色譜柱、系統和方法

2023-06-11 13:16:01 1

專利名稱：色譜柱、系統和方法
技術領域：
本發明涉及軸向色譜柱和使用這種色譜柱使液體中存在的一種 或多種分析物彼此分離的方法。
背景技術：
色i普是已被確立且重要的分離化學和生物物質的技術，且廣泛地 用於研究和工業，同時在化合物製備、純化和分析方面有許多應用。 存在許多不同形式的色譜，液相色譜對於製藥和生物工業中的蛋白 質、肽和核酸的製備、純化和分析尤為重要。
典型液相色語設備具有立式外殼，在立式外殼中，填充材料床擱 靠在可透過的保持層上，該填充材料床通常本質上為微粒且由多孔介 質組成。液體流動相通過例如柱頂部的入口進入，通常穿過多孔、穿 孔的過濾器、網格或過濾器板，穿過填充材料床移動並典型地通過第 二過濾器、網格或過濾器板經由出口移除。
在液相色譜中所用的柱典型地包括管狀主體，該管狀主體封閉多 孔色譜介質，載液或流動相穿過該多孔色譜介質流動，在流動相與多 孔介質的固相之間發生物質或分析物的分離。通常，多孔介質作為填 充床封閉於柱中，填充床一般通過固結被稱作漿料的離散顆粒懸浮物 而形成，漿料通常從位於柱一端的中心通孔或噴嘴泵送、傾倒或吸入 到柱內。穩定均勻床的產生對於最終分離過程至關重要，且使用在中 央穿置於柱端的通孔得到最佳結果。用於產生這種穩定均勻床的系統 是本項領域中已知的且包括例如利用端單元壓縮該床。
在柱填充之後和使用之前，必需通過將該柱連接到色譜系統來安
裝該柱，色譜系統通常包括泵、檢測器以;Ov口歧管和出口歧管。當 安裝該柱時，避免液體從柱中的任何洩放以及避免將空氣分別引入到
4柱和填充床內是至關重要的。而且，可能需要對採用該柱的系統清除 該柱上遊的任何空氣。通常，現有技術的柱和系統利用在柱的一端， 通常在其基部的閥("排氣"或"放氣"閥)來實現柱安裝和/或放氣或 排氣。
在實踐中，閥與柱一起使用，這表示柱在閥上遊與系統連接和斷 開。對於一次性柱而言，引入這種額外閥的成本較高。由於其位置的 原因，這增加了從柱虹吸液體的風險以及另外將空氣引入到柱內的可 能性。而且，閥的位置對於在實驗室內放置該柱有很多限制且因為需 要接近柱的頂部和底部，在使用者的可接近性方面會造成問題。
JP 63293456 (Sekisui Chemicals Co.)描述了 一種用於支承柱的柱 支架，該柱被製備成具有固定相且在其基部配備排出孔，在其頂部配 備排氣裝置。柱支架被設計成在施加重力或離心力時，為便於在固定 相上材料的色譜分離，可移除留在固定相上方的任何剩餘流體而不允 許空氣進入柱內的固定相內。排出孔連接到管道，管道在固定相溶液 上端相同高度或略高的位置出現分支且具有三個開口端，第 一個在與 排出孔的連接點，第二個在溶液表面水平上方的位置，且第三個在排 出孔水平下方。管道被構造成可通過第三開口端從該柱移除任何剩餘 流體，在該第三開口端剩餘流體收集在接受容器中。
儘管許多年來色譜柱在色譜領域中的高度實用性，但仍需要一種 簡單的軸向柱，這種軸向柱排除了對於排氣閥或複雜柱支架的需要並 減小了空氣進入該柱和/或從該柱虹吸液體的風險。至今，尚沒有滿足 這種需要和/或提供改進的使用者可接近性的軸向色"^普柱。
定義
"分析物"應被定義為天然或合成來源的物質、化合物或化學品， 或者其反應產物或衍生物或代謝產物。為了避免疑義，該用語應包括 生物分子如蛋白質、肽、胺基酸和核酸；以及合成分子如藥物和/或前 體藥物。
5"分配通道"是指某種特定結構，從截面區，流體通過該特定結 構？ 1入到色譜介質填充床的封閉空間或床空間。
一次性柱的特徵在於為了減少非一次性柱原本需要的安裝和評 定工作，對色譜介質進行預處理。至少，預處理涉及形成多孔介質床。 額外的預處理可為減少微生物負載量、滅菌、去除熱源等。
一次性柱可用作一次性使用的柱，這表示使用者並不執行清潔工 作，在重複使用之前需要對填充床進行評定(例如，測試、驗證等)。
一次性柱的 一個實施例是交付時具有預先填充有色譜介質的完 整柱。
一次性柱的另 一 實施例由第 一裝置和第二裝置組成，笫 一裝置表 示框架或器皿，且被設計成在操作期間抵抗施加在填充床的 一個或多 個側表面上的壓力和負荷以便向填充床提供尺寸穩定性，第二裝置表 示容器、殼體、匣子、袋子等，且含有附連到第一裝置上的多孔介質
或床以便操作。關於後一實施例，多孔介質包含於第二容器中且在框 架可重複使用時可被替換。在此情況下，可在將所包含的介質插入到 框架內之後調整操作所需要的多孔介質的壓縮程度(參看，例如，
US2002/0166816, Allen & Dawson和WO2005/009585, Sigma匿Aldrich Co.)。
"水平"應被定義為水平面或特定高度。

發明內容
本發明的目的在於提供一種色譜柱，其克服現有技術系統的缺 陷。這個目的由根據權利要求1所限定的色譜柱來實現。 這種色譜柱的一個優點在於其減小了柱虹吸的風險。 本發明的另一優點在於，與需要相鄰的放氣閥的現有柱相比，其 易於生產且生產成本較低。當將該柱用作一次性柱的時候這個優點尤 其重要。
色譜柱的另 一優點在於其比常規柱更易於使用，因為第 一埠和 第二埠都在柱的一端上位於床空間水平上方處於基本相同的水平
6或標高，從而提供改進的使用者可接近性，其中，第一埠和第二端 口提供諸如流動相的液體的入口和出口 。
包括少數互連元件的簡單設計是有利的，因為其減小了對擰緊和 移動或旋轉部件的動態密封的需要(如(一次性)放氣閥所需要的動態 密封)，從而降低了由於衛生問題所造成的洩漏或汙染的可能性。這些 特點對於一次性柱尤其重要，包括在柱的製備(產生)期間減小微生物 負載量，以及在柱的儲存與裝運期間維持這些條件。
另一優點在於色譜柱是可伸縮的，因為增加或減小柱大小會導致 可預測的性能。
根據本發明的第一方面，提供一種軸流色譜柱，其包括 外殼，其包括側壁；
由側壁隔離的對置的軸向間隔開的第 一 端單元和第二端單
元5
與第一端單元相鄰的第一過濾器和與第二端單元相鄰的第 二過濾器，其中過濾器與側壁一起限定封閉的床空間，以便在其內包 含微粒介質床；
第 一端單元包括第 一埠 ，該第 一埠與所封閉的床空間成 流體連通，以〗更向該床空間添加液體或/人該床空間移除液體；
第二端單元包括第二埠 ，該第二埠與封閉的床空間成流 體連通，以向該床空間添加液體或從床空間移除液體；以及
該軸流色譜柱的特徵在於，第一埠與第二埠在色譜柱上 位於床空間水平上方處於基本上相同的水平或標高。
在第二方面，提供一種使液體中的一種或多種分析物;&此分離的 方法，包括向如上文所述的軸向色譜柱施加包含一種或多種分析物的 液體，該柱內包含微粒介質床，利用流動相洗脫一種或多種分析物， 以及收集從柱中洗脫的流動相的餾分。
在本發明的第三方面，提供一種用於使液體中的一種或多種分析 物彼此分離的系統，該系統包括
7與液體流體連通的入口或入口歧管；
泵；
如上文所描述的色譜柱；以及 出口或出口歧管。 本發明的實施例在附屬權利要求中限定。


圖l是現有技術色譜柱的示意性橫截面圖，示出了該色譜柱的基 本特點。
圖2a、 2b和2c是說明現有技術柱(圖2a和圖2b)和根據本發明的 柱(圖2c)的簡化示意圖。
圖3是根據本發明的柱的橫截面。
圖4是根據本發明的色語柱的三維示意圖。
圖5a是使用現有技術已知柱的系統的示意圖5b是採用根據本發明的柱的系統的示意圖。
圖6是示出在根據本發明的色i普柱上以上流(虛線)模式和下流(實 線)模式兩種模式進行丙酮色譜分離的色譜。
圖7描述用於從洗脫峰來計算折合板高和不對稱因子的方法。
具體實施例方式
圖1示意性地示出從現有技術所公知的色譜柱1的一般構件(例 如，參看US6，524,484)。該柱具有流體不可透過的圓柱形側壁11,該 側壁由例如不鏽鋼或可能半透明的高強度/增強聚合材料製成。側壁 11的開口頂端和開口底端由頂端組裝件和底端組裝件或單元12、 13 封閉。每個端單元均具有流體不可透過的端板3，端板3密封地裝配 以塞住圓柱形壁11的開口，且優選地由不鏽鋼或高強度的工程塑性 材料如聚丙烯製成。端板由金屬保持板2支承，金屬保持板2靠在端 板外表面上並且作為保持凸緣22沿徑向突出超過側壁，通過該保持凸緣22固定可調整的張力杆14。這些張力杆14聯接頂端組裝件12 與底端組裝件13並且幫助該構造耐受高流體壓力。
每個端板3均具有中心貫通的開口 31，以便在柱外部與由側壁 11和端部組裝件12、 13所限定的填充床空間9之間實現連通。穿過 開口 31的進出口被細分成單獨的管道，在外部通過連接歧管8連接。
過濾層4，典型地由過濾或編織塑^F或鋼製成，並在端斧反3的內 表面處的床空間9的區域上延伸。端板3的內表面35在過濾層4後 面凹進，例如，如圖所示呈圓錐形凹進，且優選地使用支承肋(未表示) 從後面支承過濾層4，以在其間限定分配通道34。其中的一個連通管 道即流動相管道33向內通向此分配通道34,以及向外通向歧管8的 流動相連接器81。
從歧管8,進出口閥裝置5穿過端板開口 31且密封地穿過過濾層 4的中央孔41向內突出。進出口閥5操縱從歧管8的一個或多個管道 直接到床空間9的連通，即繞開過濾層4。在此表示為第一閥控管道 51和第二閥控管道61由閥5操縱，且在外部通過歧管8的連接器82 連接。
在柱的典型操作中，凝:粒固定相材料的填充床充填頂部過濾層4 與底部過濾層4之間的床空間9。在岡裝置5關閉的情況下，流動相 通過流動相連接器81送入(箭頭"A，，)，穿過管道33到分配通道34 且穿過過濾層4以向下穿過填充床進行洗脫，實現其組分或分析物的 分離。液體洗脫液穿過底端組裝件13的過濾層4且通過其流動相連 接器81流出(箭頭"B")以進行適當收集。這是"下流"色語的實例， 因為色譜分離是由流動相穿過該柱向下移動來實現的，但本領域技術 人員應了解該分離可替代地通過筒單地向上泵送流動相穿過該柱且 因此使流動方向相反而由"上流"色譜來實現。在此模式下，流動相 將在連接器81進入該柱(箭頭"B"),向上移動穿過固定相或微粒介 質，且在柱的頂部從連接器81收集(箭頭"A")。
當安裝該柱時，避免該柱洩放任何液體以及避免將空氣分別引入到柱內和填充床內是至關重要的。而且，可能需要在該柱的上遊清除
採用該柱的系統的任何空氣。這利用排氣閥5來實現，該排氣閥5位
於柱底部。
圖1和上文的解釋用於說明構件與典型操作模式之間的一般關 系。本領域技術人員應了解，且通過下文的描述將顯而易見，其它的
具體構造和操作^:莫式也可適用於不同類型的過程。
圖2a和圖2b示出了現有技術柱構造的簡化示意圖。柱101具有 用於引入流動相或收集流動相的第一埠 133和第二埠 140。在安 裝該柱之後和使用該柱之前，需要通過排氣/放氣來從該柱移除空氣。 這可利用具有排氣出口的排氣閥105來實現，排氣閥105可以是柱101 的整體部分(如在圖2b中示出)或在第二埠 104以外的一點連接到該 柱IOI(在圖2a中未示出)。
圖2c是根據本發明的柱101構造的簡化示意圖。第一埠 133 位於柱101的頂部(與現有技術的柱一樣)，該第一埠 133預期用於 引入流動相或收集流動相。第二埠 140位於與第一埠 133基本上 相同的水平或標高，該第二埠 140與柱的底部流體連通。這利用中 空部件160來實現，該中空部件160允許諸如空氣或流動相的流體在 柱101底部與第二埠 140之間流動。這種構造排除了對於排氣閥的 需要並減小了從該柱虹吸和將空氣引入到該柱內的風險。
圖3示出根據本發明的柱的橫截面圖。該柱201包括管狀外殼 211 、第 一端單元212(部分地示出)和第二端單元213,該管狀外殼211 、 第一端單元212和第二端單元213固定在一起以利用帶有頭部216的 張力杆214形成不透流體的密封。第一過濾器204和第二過濾器206 分別與第一端單元212和第二端單元213相鄰。這些過濾器204、 206 與側壁211 —起限定用於包含微粒介質床的床空間209。
外殼211和端單元212、 213典型地由不鏽鋼或諸如聚丙烯的高 強度塑性材料組成。在該柱被用於分離生物活性物質的優選實施例 中，根據美國藥典(USP)〈88〉V1類，材料不具生物活性使得其並不引起人的免疫反應。張力杆214與頭部216將端單元212、 213固定到外殼211上，以形成能夠耐受高操作壓力的不透流體的床空間209。
閥機構220和第一埠 233在圖中示出。第二埠 240包括通路242，其穿過第二端單元213延伸至床空間209且與床空間209流體連通(經由中空部件260)，自該床空間209可添加液體或可從該床空間209收集液體。如從圖中清楚地看出，第二埠 240在與笫一埠 233基本上相同的水平或標高，/人而^更於向該柱添加流動相和/人該柱收集流動相。這種布置還具有其它優點，因為其有助於柱的安裝，減小了虹吸的風險並減小了將空氣引入到柱內的可能性。
該柱可通過閥機構220填充漿料形式的微粒介質，該閥機構220包括中心通孔221和噴嘴224。填充微粒介質床通過本領域中熟知的常規方法獲得，例如，通過移動端單元中的一個單元來壓縮該床而獲得。在圖3中，噴嘴224示出為處於其縮回位置，但應了解其可移動到床空間209內的位置以便於該柱的充填。可使用很多種噴嘴，這些噴嘴便於漿料在床空間內的分配和均勻填充。用於分別在填充閥和噴嘴處實現打開/關閉功能的 一個替代方案是具有下面這樣的噴嘴該噴嘴固定於床空間中(且因此是不可縮回的)並在噴嘴的內部或外部位於可移動元件或套筒附近，該可移動元件或套筒取決於其位置來打開和/或關閉噴嘴。過濾器204、 206各自位於端單元212、 213的內面上且用於限定床空間(與側壁211 —起)並防止微粒介質從床空間209洩漏。
經由第一埠 233添加流動相或液體，該流動相或液體包含用於在該柱上分離的一種或多種分析物或物質。然後，液體穿過過濾器204到填充有微粒介質(未圖示)的床空間209內。以此方式引入到微粒介質上的分析物的色譜分離通過引入流動相併由流動相進行洗脫來實現。流動相最終穿過第二過濾器206並經由通路242離開該柱到第二埠 240。然後可收集包含不同分析物的流動相的所得餾分。
如本領域技術人員所了解，該柱可以如上文所述的"下流，，模式操作，或者以"上流"模式操作，在"上流"模式中，流動相的流動方向被反向以使其在該柱中向上移動。在上流才莫式中，流動相將經由
第二埠 240進入該柱，沿著通路242移動並向上穿過床空間209中的孩i粒介質床，以離開該柱而在第一埠 233處收集。
在所示實施例中，中空部件260是該柱的整體部分。但應了解，利用連接器和由合適的材料(例如，聚丙烯、聚亞安酯等)製成的適當管材，中空部件260無需與該柱是一體的。
在單個端單元上相同標高處施加流動相和收集流動相在操作者
接近和處理方面簡化了使用，減小了空氣進入該系統的風險並減少了設置該柱所需要的空間。
圖3所示的實施例包括閥機構(220),該閥機構(220)用於向該柱引入微粒介質和/或從該柱移除微粒介質。應了解的是，這種閥並不是要求保護的本發明的主要特點，因為某些柱(例如，預先填充的、 一次性柱)可能不需要終端使用者執行」微粒介質的添加或移除或者某些柱通過無需使用該閥機構的不同技術來製備(填充)。
圖4展示了圖3的柱的三維示意圖，從該圖可以清楚地看出該柱的外部特點。該柱包括第一端單元312、第二端單元313和外殼311，該第一端單元312、第二端單元313和外殼311可由張力杆314和頭部316固定在一起以形成不透流體的密封。以漿料形式的微粒介質可經由閥機構320引入到床空間(未圖示)內。第一埠 333用作流動相或液體的管道，該流動相或液體包含將要在微粒介質上分離的分析物。中空部件360經由柱基部處的出口(未圖示)與床空間流體連通，該中空部件360終止於第二埠 340，從該第二埠 340可收集從該柱洗脫出來的流動相的適當餾分。如圖可見，第二埠 340在與第一埠 333基本上相同的水平或標高處，可通過第一埠 333引入(或收集)流動相。這種布置便於使用者操作和樣品處理。在圖4所示的實施例中，柱容量為大約10升；應了解^f艮多種柱容量是可能的，典型地為0.1至2000升的容量範圍。當該柱用作一次性柱時優選容量是0.5升至50升的容量範圍。
12圖5a和圖5b示意性地將包含具有一體式排氣閥的現有^^支術柱(圖5a)的系統與使用根據本發明的柱的系統(圖5b)相比較。圖5a所示的排氣閥是旋轉閥類型，但應了解其它閥原理(夾緊閥、薄膜閥等)也可用於實現排氣閥的功能。
在安裝現有技術系統(圖5a)之後，必須通過對該系統進行灌注來從該系統移除空氣。該系統包括入口歧管408、泵470、傳感器472-476、柱閥407、出口歧管409以及柱401(示出為包圍柱401和排氣閥/放氣閥405的虛線矩形表示該柱和該排氣閥用作組合單元，因此當將該柱安裝於色譜系統中時該排氣閥附連到填充的且被灌注的柱上)。如上文所述，排氣閥的目的在於當將該柱安裝於系統中時或當從該系統移除該柱和/或使該柱與系統斷開時防止該柱洩放和/或引入空氣。柱閥407控制該柱401到入口歧管408和/或出口歧管409的連接且因此操縱該柱404 "脫機"還是"聯機，，。在圖5a和圖5b中，柱閥是旋轉閥類型，但應了解其它閥原理(例如，夾緊閥、薄膜閥等)也可用於實現柱閥功能。柱401與入口歧管408/出口歧管409的流體連通性受到閥407內的若干閘道控制，如圖中位置l-4所示)。當閥407在位置3與4和位置1與2之間連接時，繞過該柱。當旋轉閥轉動90度時，位置3與位置1之間以及位置4與位置2之間連接，這表示該柱連線或聯機並以上流^t式/流動方向連接。如上文所解釋，其它閥原理(例如，夾緊閥、薄膜閥等)和很多種其它閥構造(上流模式和/或下流模式以及多個柱的連接)也可用於實現柱閥功能。
可利用排氣閥/放氣閥405從系統移除空氣，該排氣閥/》文氣閥405允許對系統灌注，特別是對管道480灌注，並清除其內的任何空氣。
圖5a所示的系統預期用於上流^t式；因此來自入口歧管408的液體經由管道480在第二埠 440進入柱401且向上移動穿過填充床(未圖示)在第一埠 420離開。液體(例如，包含將要在該柱上分離的分析物的流動相或樣品)利用泵470在壓力下從入口歧管408吸收並經由柱閥407轉移到柱401內。傳感器472-476可用於測量系統中的環境、物理和化學條件(例如，壓力、流量、傳導性、溫度、pH、紫外線吸收度、空氣等)。這些傳感器可用於控制柱的操作，例如通過調節流動
相穿過該柱的流動速率。在第 一埠 420從柱出來的液體經由柱閥407轉移到出口歧管409以供收集。
圖5b例示了使用根據本發明的柱的系統。除了沒有排氣閥/放氣閥405之外，組成部件與上文關於圖5a所述的組成部件相同。在此構造中，在柱中床空間(未圖示)水平上方的第一埠 420和第二埠 440的水平或標高基本上相同，第二埠 440利用中空部件460連接到柱401的基部。雖然中空部件460是根據本發明的柱的一部分，但在示出現有技術構造的圖5a中示出的相應液體管道480是色譜系統的 一部分。根據本發明的柱以及其中空部件460已被清除空氣且在安裝到系統中時即可供使用。尤其是對於一次性即用型柱，本發明避免了與各單個柱一起交付一次性放氣閥的需要，這顯著地降低了成本。
在安裝後，當繞過該柱401(即該柱"脫機")時，在柱閥407上遊清除該系統。當切換該柱"連線"時，僅可忽略不計的空氣量留存在柱閥407與管道480之間。
然後圖5b所示的系統可以與上文關於現有技術系統所述的方式基本上相同的方式使用。在上流模式中，液體將由泵470從歧管408吸入並經由閥407引導至柱401的第二埠 440。然後液體將沿該柱向上移動穿過微粒介質床(未圖示)在第一埠 420處離開且可由柱閥407引導至出口歧管409以供收集。傳感器472至476可用於監控系統內的環境、物理和化學條件並因此調節其操作。
圖6是以在根據本發明的IO升柱上以下流(實線)和上流(虛線)才莫式兩種模式操作所實現的示蹤劑脈衝試驗為例示出色譜分離效率。該柱填充有85|im瓊脂糖顆粒直徑的Capto Q陰離子交換樹脂床(GEHealthcare, Uppsala, Sweden)。 ；f主的體積為10.81,直徑為263mm且床高為200mrn。丙酮(1%的填充床體積)用作示蹤劑物質且使用水作為流動相乂人該柱洗脫並以280nm監控吸光度。如/人下表l可以看出，在下流(實線)或上流(虛線)模式中，在所用85)am瓊脂糖介質的情況下觀察到優良的柱效率。
使用根據本發明的色譜柱獲得表1和圖6所示的數據，根據本發明的色譜柱還包括橫向分配通道且其中第一埠的出口與坤黃向分配通道具有不對稱的構造。具有這種布置的色譜柱是作為GB0614316.8與本發明同一天4是交的名稱為"Axial Chromatography Columns andMethods(軸向色^普柱和方法)"的本申請人(GE Healthcare Bio-SciencesAB)的共同待決的專利申請的主題。
表l
觀察值接受標準
板/米(N/m)4430>3700(對於85 p m)
折合板高(h)2.5<3.0
峰不對稱度(Af)1.140.8-1.8
表1的數據是從圖6的色譜得出，如下所述。
作為柱效率的量度，藉助於洗脫峰高二分之一處的峰寬wh來確定折合板高，如圖7所示。這個步驟是對高斯形狀的有效逼近。在實踐中，洗脫峰常常偏離這種理想高斯形狀且由所謂的不對稱因子Af來定性地描述峰偏度，其中，RTD中的'前部，表示為Af〈l且'尾部，表示為Af>l。取決於應用類型，不對稱因子的常用接受標準為0.8<Af〈1.5-1.8。
服7P^ 1
、2
:5.54
、^乂
(參看圖7)
15作為經驗法則，當考慮生物技術下遊處理中用於蛋白質色譜的高度多孔的介質時，介質的特徵性分散典型地得出以最佳表觀速度在
h=1.5-2.0的範圍中的折合板高。必須比較介質的理想效率與色譜系統
的實驗上測定的效率，其中折合板高的增加是從外圍、樣品體積、床異質以及分配系統的額外分散的結果。在實踐中，在蛋白質的離子交換分離中所用的色譜單元的典型的標準安裝評定是實驗上測定的折
合4反高h單元，表觀<3.0。Af不對稱因子dp顆粒直徑h折合板高HETP等板高度L床高,填充床Us填充床中的表觀速度VR保留體積
Wh在最大峰高的50%處的峰寬
權利要求
1. 一種軸流色譜柱，包括外殼，其包括側壁；由所述側壁隔離的對置的軸向間隔開的第一端單元和第二端單元；與所述第一端單元相鄰的第一過濾器和與所述第二端單元相鄰的第二過濾器，其中，所述過濾器與所述側壁一起限定封閉的床空間，以便在其內包含微粒介質床；所述第一端單元包括第一埠，所述第一埠與所述封閉的床空間成流體連通，以便向所述床空間添加液體或從所述床空間移除液體；所述第二端單元包括第二埠，所述第二埠與所述封閉的床空間成流體連通，以便向所述床空間添加液體或從所述床空間移除液體；以及所述色譜柱的特徵在於，所述第一埠與所述第二埠在所述色譜柱上位於所述床空間的水平上方的基本上相同的水平或標高處。
2. 根據權利要求1所述的色譜柱，其特徵在於，所述第二埠利 用中空部件與所述床空間成流體連通，所述中空部件連接到所述第二 單元中的通路上。
3. 根據權利要求2所述的色譜柱，其特徵在於，所述中空部件是 所述柱的整體部分。
4. 根據權利要求2或權利要求3所述的色語柱，其特徵在於，所 述通路從所述床空間穿過所述第二端單元的側壁延伸。
5. 根據前述權利要求中任一項所述的色譜柱，其特徵在於，所述 第一端單元額外地包括閥機構，所述閥機構與所述封閉的床空間成流 體連通，所述閥機構包括縱向部件，所述縱向部件延伸穿過所述第一 過濾器且在所述縱向部件內具有通路，所述閥可通過4喿作來打開和關閉，以允許通過所述通^各利用所述微粒介質來填充所述床空間。
6. 根據權利要求5所述的色譜柱，其特徵在於，所述閥機構的所 述縱向部件包括噴嘴。
7. 根據權利要求6所述的色語柱，其特徵在於，所述噴嘴固定於所述床空間內或可縮回到所述床空間外的位置。
8. 根據前述權利要求中任一項所述的色譜柱，其特徵在於，所述 閥機構並不允許所述微粒介質的床空間排空。
9. 根據前述權利要求中任一項所述的色譜柱，其特徵在於，所述 柱預先填充有微粒介質。
10. 根據權利要求8或權利要求9所述的色譜柱，其特徵在於， 所述柱是一次性柱。
11. 一種用於使液體中的一種或多種分析物彼此分離的方法，包 括向根據權利要求1至權利要求10中任一項所述的軸向色譜柱施加 包含所述一種或多種分析物的液體，所述柱在其內包含微粒介質床， 利用流動相來洗脫所述一種或多種分析物，以及收集從所述柱中洗脫 的所述流動相的餾分。
12. —種用於使液體中的一種或多種分析物彼此分離的系統，所 述系統包括與所述液體成流體連通的入口或入口歧管； 泵；根據權利要求1至權利要求9中任一項所述的色譜柱；以及 出口或出口歧管。
13. 根據權利要求12所述的系統，其特徵在於，所述系統還包括 閥，所述閥可通過操作來打開和關閉，以允許向所述柱的床空間添加 液體或從所述柱的床空間移除液體。
全文摘要
本發明涉及軸流色譜柱，使用這種柱使液體中一種或多種分析物分離的方法以及採用這種柱的系統。該柱包括第一埠和第二埠，該第一埠和第二埠在該色譜柱上位於該床空間的水平上方基本上相同的水平或標高處。
文檔編號B01D15/22GK101489636SQ200780026819
公開日2009年7月22日 申請日期2007年7月17日 優先權日2006年7月19日
發明者K·格鮑爾 申請人:通用電氣健康護理生物科學股份公司