2-芳基吡唑並[1,5-α]嘧啶-3-基乙醯胺衍生物作為轉運蛋白(18kDa)配體的製作方法

2023-06-11 10:51:06 2

專利名稱：2-芳基吡唑並[1,5-α]嘧啶-3-基乙醯胺衍生物作為轉運蛋白(18kDa)配體的製作方法
技術領域：
本發明涉及使對象體內表達的轉運蛋白(18 kDa)(TSPO)成像的化合物和方 法。本發明還涉及用於治療對象的神經變性疾病、炎症或焦慮症的化合物和方 法。
背景技術：
轉運蛋白(18kDa)(TSPO)，以前稱為外周苯二氮卓受體(PBR)，可與腺嘌呤 核苷酸載體(ANC) (30 kDa)以及電壓依賴性陰離子通道(VDAC) (32 kDa)形成 三聚複合物從而構成線粒體通透性轉變孔(MPTP)。 TSPO與中央苯二氮卓受體 (CBR)的區別在於其獨特的結構、生理功能以及在線粒體外膜上的亞細胞定位。 儘管已知TSPO參與許多生物過程，但其生理作用的若干方面仍舊不清楚。研 究暗示了TSPO在類固醇生物合成限速步驟、免疫調節、卟啉轉運、鈣體內平 衡和程序性細胞死亡中的重要性。
TSPO密集分布在大多數外周器官內，其中包括肺、心臟和腎臟，但它在 正常腦實質中僅少量表達。在神經損傷或感染之後，腦實質中的TSPO表達顯 著提高。體外放射自顯影和免疫組織化學已顯示，該區域內TSPO結合升高與 存在激活的小膠質細胞直接相關。最近，在阿爾茨海默病(AD)和多發性硬化 (MS)患者體內正電子發射體層攝影(PET)成像證實腦實質中的TSPO結合僅限 於活化的小膠質細胞。
小膠質細胞是中樞神經系統(CNS)的主要免疫效應細胞。這些巨噬細胞樣 的免疫細胞被假設源自單核細胞系，它們的主要作用取決於宿主防禦和免疫監 視。它們對於它們微環境的改變高度敏感，並在病理事件響應中迅速激活。出 於這些原因，TSPO被認為與某些神經變性疾病早期節段的最初炎性過程密切 相關。
在過去幾十年中已經報導了許多種類的TSPO配體，其中包括苯二氮卓類
5(苯甲二氮卓和Ro 5-4864)、異喹啉氨甲醯類(PK 11195)、吲哚乙醯胺類 (FGIN-l-27)、苯氧基苯基-乙醯胺類(DAA1106)、吡唑並嘧啶類 (pyrazolopyrimides)(DPA-713)、苯並噻氮卓類(benzothiazepine)和咪唑並吡啶類。
一些其他種類也已經開發出來，然而，需要更多具有不同結合特性和生物活性 的配體以更好地表徵TSPO的生理和治療作用、其準確定位以及TSPO亞類的 預期存在。
異喹啉氨甲醯["C](/ )-PK 11195已被用作藥物探針用來研究TSPO的功能 和表達。在AD、 MS和多系統萎縮症(MSA)患者內進行的許多PET研究已經 顯示，在體內用["C](i )-PK 11195測量TSPO在活體腦內是可行的。儘管 ["C](i )-PK 11195被認為是最廣泛應用的PET TSPO配體，但它具有較差信噪 比並顯示出較低腦透過性，這最終會降低其作為小膠質細胞激活標記物的靈敏 度。
1998年曾報導苯氧基苯基-乙醯胺衍生物DAA1106是TSPO的高選擇性的 且有效的配體(Chaki， S.; Funakoshi， T.; Yoshikawa， R.; Okuyama， S.; Okubo， T.; Nakazato ， A.; Nagamine ， M.; Tomisawa ， K. European Journal of Pharmacology ， 1999， 371， 197-204)。最近，DAA1106被碳-11 ("C)標記並用於PET研究以 評價其在鼠類和靈長類大腦中的體內動力學(ZhangMR， KidaT， Noguchi J等， [UC]DAA1106: radiosynthesis and in vivo binding to peripheral benzodiazepine receptors in mouse brain(小鼠大腦內外周苯二氮卓受體的放射性合成和體內結 合).Wmc/Med說W2003; 30:513-519. Maeda J， SuharaT, ZhangMR等，Novel peripheral benzodiazepine receptor ligand [UC]DAA1106 for PET: An imaging tool for glial cells in the brain(用於PET的新型外周苯二氮卓受體配體 [UC]DAA1106:腦內神經膠質細胞的成像工具).S少"fl;we. 2004; 52:283-291)。 在猴枕葉皮質中，["C]DAA1106的結合顯示比[UC](i )-PK 11195高四倍，說明 它有優良的腦透過性。該化合物的氟-18 ("F)類似物也已經被合成，名為 [18F]FEDAA1106，該類似物也顯示出與["C]DAA1106類似的體內結合特性 (Zhang MR， Maeda J， Ogawa M等，Development of a new radioligand,
1 ft
N-(5-fluoro-2-phenoxyphenyl)-N-(2-[ F]fluoroethyl-5-methoxybenzyl)acetamide， for pet imaging of peripheral benzodiazepine receptor in primate brain訴於靈長類腦內外周苯二氮卓受體的pet成像的新型放射性配體N-(5-氟-2-苯氧基苯 基)-N-(2-["F]氟乙基-5-甲氧基苄基)乙醯胺的開發).Ozem. 2004; 47:2228-2235)。然而，["C]DAA1106和["F]FEDAA1106的結合似乎是不可逆 的，且實際上，它們從腦中緩慢清除，表明它們沒有合適的定量分析動力學。 Ryu JK等，A^wra6/o/og7 o/D&^we， 20 (2005) 550-561報導稱，TSPO配 體PK11195能減少注射了喹啉酸的大鼠皮層中的小膠質細胞活化和神經元死 亡。該篇論文中報導的結果說明，活化的小膠質細胞造成的炎性反應會損傷紋 狀體神經元，因此藥理學尋靶小膠質細胞中的TSPO有可能保護神經疾病中的 神經元。
鑑定可用於體內TSPO表達成像的具有改進的腦動力學的TSPO配體是有 益的，因為這樣的配體可用於進一步研究涉及某些神經變性疾病早期階段的生 化事件的級聯。同樣有利的是鑑定具有改進的腦動力學的TSPO配體，因為這 樣的配體具有作為神經變性疾病診斷和治療工具的潛能。
在第一個方面，本發明提供了用選自18F、 123I、 76Br、 1241或75Br的放射性 同位素放射性標記的式(I)的化合物，或其鹽
式中
R是H、滷素、任選被滷素取代的烷基、或任選被滷素取代的垸氧基；
R,、 R2和R3各自獨立為H或疏水性基團；和
R4和R5各自獨立為任選被滷素取代的垸基、或任選被滷素取代的烷氧基。
文中，式(I)的化合物用18F、 123I、 76Br、 1241或7581""放射性標記"是指，

發明內容
7式(I)中的R,、 R2、 R3、 R4或R5中的至少一個被"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br取 代。通常是R、 R。 R2或R3中的一個被"F、 123I、 76Br、 1241或758[取代。
在第二個方面，本發明提供了一種藥物組合物，其中包含用選自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br的放射性同位素放射性標記的式(I)的化合物，或其藥學上可 接受的鹽，以及藥學上可接受的載體。
在第三個方面，本發明提供了一種使對象體內的轉運蛋白(18kDa)(TSPO) 成像的方法，所述方法包括給予該對象用選自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放 射性同位素放射性標記的式(I)的化合物，或其藥學上可接受的鹽，並獲得放射 性同位素在對象體內的定位圖。
通常，當式(I)的化合物用18F、 76Br、 ^I或"Br放射性標記時，所述圖像 通過正電子發射體層攝影(PET)成像而獲得。通常，當式(I)的化合物用1231放射 性標記時，所述圖像是通過單光子發射計算機體層攝影(SPECT)成像獲得的。
在第四個方面，本發明提供了一種診斷對象的神經變性疾病的方法，包括 給予該對象用選自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性標記的式 (I)的化合物，或其藥學上可接受的鹽，並獲得放射性同位素在對象體內的定位 圖以評價對象腦實質中該化合物或其鹽的TSPO結合程度。
在第五個方面，本發明提供了用選自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br的放射性 同位素放射性標記的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於對象體 內轉運蛋白(18kDa)成像的藥物中的應用。
在第六個方面，本發明提供了一種式(II)的化合物，或其鹽formula see original document page 8式中:R是任選被^素取代的垸基，或任選被滷素取代的垸氧基； R" R2和R3各自獨立為H或疏水性基團；和
R4和R5各自獨立為任選被滷素取代的垸基、或任選被滷素取代的垸氧基，
和
其中，R、 R卜R2、 R3、 R4或Rs中的至少一個被F取代。 在第七個方面，本發明提供了一種藥物組合物，其包含式(II)的化合物或
其藥學上可接受的鹽以及藥學上可接受的載體。
在第八個方面，本發明提供了一種治療對象的神經變性疾病、炎症或焦慮
症的方法，所述方法包括給予該對象治療有效量的式(II)的化合物或其藥學上
可接受的鹽。
在第九個方面，本發明提供了式(n)的化合物或其藥學上可接受的鹽在制
備用於治療神經變性疾病、炎症或焦慮症的藥物中的應用。 附圖簡述


圖1是TSPO配體PK11195、 Ro5-4864、 DPA-713和DPA-714對C6膠質
瘤大鼠細胞中孕烯醇酮積聚的作用的圖示。所有化合物以相同濃度(40 一)使 用；培育期(2h)結束時，通過放射免疫測定(RIA)測定孕烯醇酮的量。所示值為 至少三次測定的平均值。
圖2是實施例4中所述四組QA損傷大鼠中每一組的["F]DPA-714的外周 分布的圖示；所述四組為對照組(僅注射放射性配體)和三個預處理組(PK 11195、 DPA-713和DPA-714)。
圖3是實施例4中所述四組QA損傷大鼠中每一組的右紋狀體(右Stri)、左 紋狀體(左Stri)、右額皮質(右Cx)、左額皮質(左Cx)、右海馬(右Hippoc)和左 海馬(左Hippoc)中["F]DPA-714的大腦分布的圖示；所述四組為對照組(僅注射 放射性配體)和三個預處理組(PK 11195、 DPA-713和DPA-714)。
圖4顯示了描繪實施例5所述三個研究中60分鐘PET掃描時間期間狒狒 全腦中["F]DPA-714的攝取的時間活性曲線(TAC)(基線["F]DPA-714，阻斷 [18F]DPA-714 + PK 11195 (1.5 mg/kg)，替代["F]DPA-714 + DPA-714 (1 mg/kg) 研究)。發明詳述
文中，術語"垸基"指直鏈、支鏈或者單環或多環烷基。典型地，所述烷基 是C,-C3o烷基，例如，CrC6垸基。直鏈和支鏈垸基的例子包括甲基、乙基、 丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、仲戊基、1，2-二甲基丙基、U-二甲基丙基、己基、4-甲基戊基、l-甲基戊基、2-甲基戊基、 3-甲基戊基、1,1-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1,2-二甲基丁 基、1，3-二甲基丁基、1,2，2-三甲基丙基和1，1,2-三甲基丙基。 環垸基的例子包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基。 文中，術語"烷氧基"指化學式為0垸基的基團。垸氧基的例子包括甲氧基、 乙氧基、丙氧基和丁氧基。
文中，術語"烯基"指直鏈、支鏈或環狀烯基。典型地，所述烯基是CVC30 烯基，例如CVCV烯基。烯基的例子包括乙烯基，烯丙基，1-甲基乙烯基， 丁烯基，異丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，l-戊烯基，環戊烯基，1-甲基環戊烯基， l-己烯基，3-己烯基，環己烯基，l-庚烯基，3-庚烯基，l-辛烯基，環辛烯基， l-壬烯基，2-壬烯基，3-壬烯基，l-癸烯基，3-癸烯基，1，3-丁二烯基，1,4-戊 二烯基，1，3-環戊二烯基，1,3-己二烯基，1，4-己二烯基，1,3-環己二烯基，1,4-環己二烯基，1,3-環庚二烯基，1,3,5-環庚三烯基和1,3,5,7-環辛四烯基。
文中，術語"炔基"指直鏈、支鏈或環狀炔基。典型地，所述炔基是C2-C30
炔基，例如，CVCV炔基。
文中，術語"芳基"指單核、多核、共軛或稠合的芳烴或芳香雜環系統的殘 基。芳基的例子包括苯基、萘基和呋喃基。當芳基包含雜環芳環系統時，該 雜環芳環系統可含有1-4個獨立選自N、 O或S的雜原子。
文中，術語"齒素"指滷素殘基，例如氟、氯、溴或碘。文中，提及"任選 被滷素取代的"基團時是指該基團可被一個或多個滷素取代基取代。
本發明人吃驚地發現，用選自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素 放射性標記的式(I)的化合物是選擇性TSPO配體，並可被用作TSPO的精確體 內標記物，因此可作為小膠質細胞活化的標記物。這些放射性標記的化合物因 此可用於研究許多神經變性疾病中的神經病理學事件，並可用作診斷這種疾病以及監測這種疾病進展的工具。
文獻中已經描述了許多類型的TSPO配體。作為治療藥物有效的化合物不 必是可被放射性標記的並用於成像的化合物。實際上，許多在治療上使用的藥 物對於特定靶點沒有選擇性並且可與許多靶點相互作用而產生治療效果。此
外，許多治療藥不具有成像所需的通常為nM級的親和力，其親和力為^M級。 此外，治療藥的代謝和親油性，尤其當成像時以示蹤劑水平給予時，可使得該 藥不適合用於成像。
本發明人吃驚地發現，用選自18F、 123I、 76Br、 "I或"Br的放射性同位素 放射性標記的式(I)的化合物可用於使TSPO成像，因此可使對象體內小膠質細 胞的活化情況成像。用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性標記的式(I)的化合物 是TSPO的選擇性配體並對TSPO具有高親和力。
用選自"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性標記的式(I)的化 合物形成鹽，且這種化合物的鹽也包括在本發明之內。所述鹽優選是藥學上可 接受的，但非藥學上可接受的鹽也落入本發明範圍內。藥學上可接受的鹽的例 子包括包括藥學上可接受的陽離子的鹽，所述陽離子如鈉、鉀、鋰、轉、鎂、 銨和烷基銨；藥學上可接受的無機酸的酸加成鹽，所述無機酸如鹽酸、正磷酸、 硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氫溴酸；或者藥學上可接受的有 機酸的鹽，所述有機酸如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、 延胡索酸、檸檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、 甲磺酸、三滷甲烷磺酸、甲苯磺酸、、苯磺酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、天冬 氨酸、穀氨酸、依地酸、硬脂酸、棕櫚酸、油酸、月桂酸、泛酸、單寧酸、抗 壞血酸和纈草酸。
在式(I)中，R通常是CL6垸基或CL6烷氧基，其中CL6垸基或CV烷氧基
可任選被滷素取代。
典型地，！^和R3各自是除H之外的基團。當R。 112或113是疏水性基團，
該疏水性基團例如可以是任選被滷素取代的CL6垸基，任選被滷素取代的芳 基，任選被滷素取代的NHCV6烷基，任選被滷素取代的OCL6垸基，任選被滷 素取代的SCl6綜基，COOR6其中R6是任選被滷素取代的Cl6院基，(CH2)nOR^
其中R6是任選被滷素取代的CL6垸基且n是整數(如1、 2、 3、 4、 5或6)，或
11任選被滷素取代的聚醚。當R。 R2或R3是任選被滷素取代的聚醚時，所述聚
醚例如可以是任選被滷素取代的式-(0(CH2U(CH2)cCH3所示基團，其中a是1、 2或3， b是2、 3、 4或5，而c是0、 1、 2、 3、 4或5。
各種式(I)的化合物描述於Selleri等，"(2-Arylpyrazolo[l，5-a]pyrimidin-3-yl Acetamides. New Potent and Selective Peripheral Benzodiazepine Receptor Ligands (2-芳基吡唑射l,5-a]嘧啶-3-基乙醯胺—新的有效的選擇性外周苯二氮 卓受體配體)"，說'oorg朋/c cfe Me&c/"a/ C/ em&fr7 9 (2001) 2661-2671 ("Selleri 等(2001)")，將其納入本文作為參考。該文獻描述了某些具體的式(I)的化合物(該 文獻所述化合物3f-3y)的製備，並披露那些化合物對TSPO有親和力和選擇性 (該文獻中稱為PBR)。儘管該文獻描述的具體化合物中的一些對CBR有一定 親和力，但該文獻所述化合物3f-3y中的每一種對TSPO的選擇性高於CBR。
如Sdleri等(2001)所述，該文獻提及的式(I)的化合物可從合適的芳醯基乙 腈開始採用三步驟方法製備。在所述方法中，芳醯基乙腈在鹼性介質中與AUV-二乙基氯乙醯胺反應，所得焦油通過柱層析純化以分離AUV-二乙基丁醯胺。將 AUV-二乙基丁醯胺在存在乙酸時與水合肼在乙醇中回流反應，以得到相應的 A^V-二乙基-(3-氨基-5-芳基吡唑-4-基)乙醯胺。A^V-二乙基-(3-氨基-5-芳基吡唑 -4-基)乙醯胺然後與合適的親電試劑(4，4-二甲氧基-2-丁酮，1,1,3,3-四乙氧基丙 垸，2，4-戊二酮，l-三氟甲基-2,4-戊二酮，1，5-三氟甲基-2，4-戊二酮，1-苯基-1,3-丁二酮，3-甲基-2,4-戊二酮，2-乙醯-3-氧代丁酸乙酯，2-乙醯-3-乙氧基丙烯酸 乙酯，苯基丙醛或l-苯基-3-二甲基氨基-2-丙-l-酮)縮合以封閉嘧啶環，從而形 成相應的式(I)的化合物。
另一種製備各種式(I)的化合物的方法描述於Selleri， S.; Grafted, P.; Costagli， C; Bonaccini， C; Costanzo， A.; Melani， F.; Guerrini， G.; Ciciani， G.; Costa， B.; Spinetti， F.; Martini, C; Bruni， F.說'oorgam'c朋d Mec/Z"'"fl/ C/zem/Wo;， 2005， 13， 4821-4834 ("Selleri等(2005)")，納入本文作為參考。在 該文獻所述方法中，使苯甲醯乙腈在鹼性介質(LiOH-H20)中與碘乙酸或碘乙酸 乙酯反應以分別得到相應的酸或酯(Ia和Ib)。中間體Ia和Ib在在存在乙酸時 與水合肼在乙醇中回流反應，以得到相應的3-氨基吡唑(2a和2b)。化合物2a 飢餓2b與2,4-戊二酮縮合以封閉嘧啶環，得到酸3a和酯3b。將酸3a轉化成該中間體與醯胺反應以得到相應的式(I)的化合 物。
Selleri等(2001)和Selleri等(2005)中描述的式(I)的化合物可通過那些文獻 中描述的方法或通過有機化學合成領域技術人員已知的其他方法製備。本領域 技術人員將了解，其他式(I)的化合物可通過與Selleri等(2001)和Selleri等(2005) 所述方法類似的方法製備。
式(I)的化合物可通過有機化學領域已知的修飾有機化合物的標準技術用 18F、 123I、 76Br、 Wl或"Br放射性標記，從而用18F、 123I、 76Br、 124I或75Br代 替化合物中的滷素或滷素基團。
或者，用選自！8F、 ！23I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性標記的式 (I)的化合物可通過在用於合成式(I)的化合物的開始原料之一或中間體中摻入 18F、 123I、 76Br、 "4l或75Br作為取代基來製備。
例如，用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性標記的式(I)的化合物可以通過 製備具有上文定義的式(I)的化合物來製備，但其中，R2、 R3、 R4或Rs中 的一個被其上能發生無環親核取代反應的離去基團如甲苯磺酸根、甲磺酸根、
Br或I取代，然後將化合物置於能發生無環親核取代反應的環境下以使18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br取代該離去基團。例如，當離去基團是Br或甲苯磺酸根 時，可使化合物在乙腈(acetonitrite)中與["F]-kryptofix-K222複合物在約8(TC反 應10分鐘以形成用"F放射性標記的式(I)的化合物。用1231、 76Br、 ^I或"Br 放射性標記的式(I)的化合物也可通過形成上文定義的式(I)的化合物來形成，但 其中，R、 R,、 R2、 R3、 R4或Rs中的一個被甲錫烷基、甲矽垸基或滷素(該滷 素取代基通常不同於放射性同位素)取代，並在酸性介質中用氧化劑如氯胺-T 對化合物進行親電取代反應以形成用123I、 76Br、 ^I或"Br放射性標記的式(1) 的化合物。在一些實施方式中，該反應可在室溫進行，而在其他實施方式中， 反應混合物被加熱至約80'C至10(rC。如上文所定義的但R、 R!、 R2、 R3、 R4 或R5中的一個被離去基團取代的式(I)的化合物可通過與Selleri等(2001)或 Selleri等(2005)描述的製備式(I)的化合物的方法類似的方法來製備，但合適的 反應物被離去基團取代。或者，式(I)的化合物可通過有機化學中己知的反應來 修飾以引入離去基團作為R、 R4、 R2、 R3、 R4或R5中一個上的取代基。
13式(I)的化合物可用18F (半衰期110分鐘)、1231 (半衰期13.2小時)、76Br (半 衰期16.2小時)、124I (半衰期4.2天)或75Br (半衰期1.6小時)放射性標記。典型 地，式(I)的化合物用"F放射性標記的。相比用具有明顯較短半衰期的放射性 同位素放射性標記的化合物，臨床成像時更經常使用18F、 123I、 76Br、 124I或75Br 放射性標記的式(I)的化合物，從而可在一天內進行多次掃描。此外，現場沒有 回旋加速器的醫院/機構可使用這种放射性配體，因為這种放射性配體可在上述 地點外製備並運送到醫院/機構，在運輸過程中沒有明顯的活性損失。此外，對 用18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br標記的化合物可進行較長時間掃描(如180分鐘)，
這使得它們更適用於大多數生物過程的研究。
用"F、 123I、 76Br、 ^或"Br放射性標記的式(I)的化合物對TSPO有高親 和力和選擇性，並可用於對象體內的TSPO成像。因此，用18F、 123I、 76Br、 124I 或"Br放射性標記的式(I)的化合物可用於研究對象體內的TSPO。
在患有神經變性疾病的對象中，腦實質內的TSPO表達較之未患神經變性 疾病的對象明顯升高。因此，用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性標記的式(1) 的化合物可用於研究神經變性疾病並可用來診斷和監測神經變性疾病的進展。 可利用這些化合物研究、診斷或監測的神經變性疾病包括阿爾茨海默病、多發 性硬化、帕金森病、亨廷頓病、多系統萎縮症、癲癇、腦病、中風和腦瘤。這 些疾病中的每一種都與神經損傷或感染有關。
根據本發明第三或第四方面的方法，用選自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br 的放射性同位素放射性標記的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽被給予對 象。當式(I)的化合物用18F、 76Br、 Wl或"Br放射性標記時，可採用本領域已 知的常規技術通過正電子發射體層攝影(PET)成像獲得該放射性同位素在對象 體內的定位影像，以及對象體內TSPO的定位。當化合物用1231放射性標記時， 可採用本領域已知的常規技術通過SPECT成像獲得該放射性同位素在對象體 內的定位影像。通常，對於PET和SPECT成像，數據都是利用常規的動態或 序列模式採集技術獲得的，在給予用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性標記的 式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽之後立即開始，並持續約40分鐘或更長 時間。在完成數據釆集時，通常對數據進行處理以提供各自描繪了特定時間點 上放射性同位素在體內的分布的三維重建的時間序列。典型地，用"F、 123I、 76Br、 1241或7&放射性標記的式(1)的化合物或其藥 學上可接受的鹽是腸胃外給予的。典型地，用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射 性標記的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽是通過靜脈注射或灌注腸胃外 給予的。典型地，用"F、 76Br、 ^I或"Br放射性標記的式(I)的化合物或其藥 學上可接受的鹽是以約5-20 mCi (185-740 MBq)的劑量範圍給藥。
典型±也，用"F、 123I、 76Br、 "I或"Br放射性標記的式(I)的化合物或其藥 學上可接受的鹽通過給予一種藥物組合物來施用，該藥物組合物包含用18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性標記的式(I)的化合物，或其藥學上可接受的鹽， 以及藥學上可接受的載體。
供腸胃外給予的製品的形式通常是無菌的水性或非水性溶液、懸浮液或乳 液。合適的非水性溶劑的例子包括丙二醇，聚乙二醇，植物油如橄欖油，以 及可注射的有機酯類如油酸乙酯。合適的水性載體包括水和醇性/水性溶液、 乳液或懸浮液，包括鹽水和緩衝介質。合適的腸胃外載體包括氯化鈉溶液。
本發明人還發現，其中的R是任選被滷素取代的垸基或任選被滷素取代的 烷氧基並含有至少一個氟基的式(I)的化合物對TSPO的活性明顯高於不含氟基 的類似化合物。
因此，本發明還提供了式(II)的化合物，或其鹽 formula see original document page 15
式中
R是任選被滷素取代的垸基，或任選被滷素取代的垸氧基； R,、 R2和R3各自獨立為H或疏水性基團；和
R4和115各自獨立為任選被滷素取代的烷基、或任選被滷素取代的烷氧基，和
其中，R、 R。 R2、 R3、 R4或R5中的至少一個被F取代。 式(II)的化合物的鹽優選是藥學上可接受的，但非藥學上可接受的鹽也落 入本發明範圍內。式(II)的化合物的非藥學上可接受的鹽可用作製備式(II)的化 合物的藥學上可接受的鹽的中間體。藥學上可接受的鹽的例子包括包括藥學 上可接受的陽離子的鹽，所述陽離子如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、銨和垸基銨；藥 學上可接受的無機酸的酸加成鹽，所述無機酸如鹽酸、正磷酸、硫酸、磷酸、 硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氫溴酸；或者藥學上可接受的有機酸的鹽，所 述有機酸如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、延胡索酸、檸 檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、三滷 甲垸磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、天冬氨酸、穀氨酸、 依地酸、硬脂酸、棕櫚酸、油酸、月桂酸、泛酸、單寧酸、抗壞血酸和纈草酸。 典型地，在式(II)中，A和R3各自是除H之外的基團。
典型地，R是任選被滷素取代的CL6烷基、或任選被滷素取代的CL6烷氧
基。在一些實施方式中，R是被F取代的CV6垸氧基，如OCH2CH2F。
典型地，R!、 R2和R3各自獨立選自H， Cl6院基，芳基，NHCw烷基，
OCL6烷基，Sd-6垸基，COOR6其中R6是d-6烷基(如甲基、乙基或丙基)，
(CH2)。OR6其中R6是CL6烷基且n是整數(如1、 2、 3、 4、 5或6)，以及聚醚， 其中，這些基團中的任何一個(H除外)可任選被滷素取代。當R。 R2或R3是 任選被滷素取代的聚醚時，所述聚醚例如可以是任選被滷素取代的式 -(0(CH2)a)b(CH2)eCH3所示基團，其中a是l、 2或3， b是2、 3、 4或5，而c 是0、 1、 2、 3、 4或5。
在一些實施方式中，R4和R5各自獨立選自CL6烷基或Q.6烷氧基，其中， cl6烷基或cl6垸氧基可任選被滷素取代。
在一些實施方式中，R是被F取代的cl6垸氧基，R。 R2和R3各自獨立
選自H， Cl6院基，芳基，NHCl6院基，OdV烷基，SCL6烷基，COOR6其 中R6是Cw垸基，(CH2)nOR6其中R6是CL6烷基且n是整數，和聚醚，且R4 和R5各自獨立選自CL6烷基或CL6垸氧基。
式(II)的化合物對TSPO有選擇性並激活TSPO。 TSPO的活化與神經類固醇合成增加有關。因此TSPO的活化可提高腦內神經類固醇的濃度。這些神經 類固醇，包括孕酮和脫氫表雄酮以及它們的代謝物，正性調節，氨基丁酸
(GABA)神經遞質從而導致非鎮靜的抗焦慮效應，這種效應對於記憶和應激相 關疾病有治療益處。式(II)的化合物也可用作治療神經變性疾病的神經保護劑、 作為抗炎藥、以及作為抗焦慮藥。
因此，在另一方面，本發明提供了一種治療對象的神經變性疾病、炎症或
焦慮症的方法，該方法包括給予該對象治療有效量的式(n)的化合物或其藥學
上可接受的鹽。可用該方法治療的神經變性疾病包括阿爾茨海默病，多發性硬
化，帕金森病，亨廷頓病，多系統萎縮症，癲癇，腦病，中風和腦瘤。式(n) 的化合物或其藥學上可接受的鹽通常是通過給予包含式(n)的化合物或其藥學 上可接受的鹽的藥物組合物而施用的。
在另一方面，本發明提供了一種藥物組合物，其包含式(n)的化合物或其 藥學上可接受的鹽以及藥學上可接受的載體。
本發明第七個方面所述的組合物包含至少一種式(n)的化合物或其藥學上 可接受的鹽以及一種或多種藥學上可接受的載體，並任選包含其他治療劑。合 適的組合物包含那些適合口服、直腸、鼻、局部(包括含服和舌下)、陰道或腸 胃外(包括皮下、肌內、靜脈內和真皮內)給藥的物質。該組合物可方便地以單 位劑型存在，並可通過藥物領域熟知的方法製備。這種方法包括使活性成分與 構成一種或多種輔助成分的載體相結合的步驟。通常，該組合物是通過使式(n) 的化合物或其藥學上可接受的鹽與液態載體、稀釋劑、佐劑和/或賦形劑或者細 致分散的固態載體，或者這兩者，均勻而密切地結合而製備的，如果需要的話 然後可使產物成形。
術語"對象"在文中指任何動物。所述對象可以是哺乳動物，如人。在一些 實施方式中，所述對象是夥伴動物如狗或貓、馴養動物如馬、小型馬、驢、騾、 駱駝、羊駝、豬、奶牛或綿羊，或動物園動物如靈長類動物、貓科動物、犬科 動物、牛科動物或有蹄類動物。
文中，術語"治療有效量"指有效產生所需治療反應的化合物的量。具體的 "治療有效量"將隨要治療的具體症狀、對象的身體狀況、要治療對象的類型、 治療持續時間、並行治療(如果有的話)的特性、以及採用的具體製劑等因素變
17化，且主治醫師將能夠決定合適的治療有效量。例如，主治醫師可根據其他神
經活性化合物或動物實驗的結果來決定式(n)的化合物或其藥學上可接受的鹽
的合適的治療有效量。在一些實施方式中，式(II)的化合物或其藥學上可接受
的鹽的給藥劑量可以約為l-20mg/kg體重/天。
文中，"藥學上可接受的載體"是用來將化合物遞送給對象的藥學上可接受 的溶劑、懸浮劑或載體。所述載體可以是液態或固態，並可根據計劃的給藥方 式選擇。載體是"藥學上可接受的"是指不是生物學上或其他方面不需要的，即 該載體可與活性成分一起給予對象而不會造成任何或實質性不良反應。
式(II)的化合物或其藥學上可接受的鹽可採取含有常規的藥學上可接受的 無毒載體的劑量單位形式通過口服、局部或腸胃外(如通過皮下注射，通過氣 溶膠給予肺部或鼻腔，或通過靜脈內、肌內、鞘內或顱內注射或灌注技術)給 予。式(II)的化合物或其藥學上可接受的鹽可作為片劑、水性或油性懸浮液、 錠劑、含片、粉末劑、顆粒劑、乳液、膠囊、糖漿劑或酏劑口服給予。供口服 的組合物可包含一種或多種選自下組的試劑以得到美觀且可口的藥物製品甜
味劑、調味劑、著色劑、崩解劑、潤滑劑、延時劑和防腐劑。合適的甜味劑包 括蔗糖、乳糖、葡萄糖、阿斯巴特或糖精。合適的崩解劑包括玉米澱粉、甲基 纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、黃原膠、膨潤土、藻酸或瓊脂。合適的調味劑包括 薄荷油、冬青油、櫻桃、橙子或覆盆子香精。合適的防腐劑包括苯甲酸鈉、維
生素E、 ct生育酚、抗壞血酸、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯或亞硫
酸氫鈉。合適的潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸、油酸鈉、氯化鈉或滑石。合適 的延時劑包括甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。
供腸胃外給藥的製品的形式通常是無菌的水性或非水性溶液、懸浮液或乳
液。合適的非水性溶劑的例子包括丙二醇，聚乙二醇，植物油如橄欖油，以 及可注射的有機酯類如油酸乙酯。合適的水性載體包括水和醇性/水性溶液、 乳液或懸浮液，包括鹽水和緩衝介質。合適的腸胃外載體包括氯化鈉溶液。也 可存在防腐劑和其他添加劑，如抗微生物劑、抗氧化劑、螯合劑、生長因子、 惰性氣體，等等。
通常，術語"治療"等在文中用來表示使對象獲得所需藥理學和/或生理效 應。所述效應可以是預防性的，即完全或部分防止疾病或病症或其徵兆或症狀，
18和/或可以是治療性的，即部分或完全治癒疾病或病症。"治療"在文中涵蓋對脊 椎動物、哺乳動物，尤其是人類的疾病或病症的任何處理，並包括(a)防止 疾病或病症在可能對於這種疾病或病症易感但還未被診斷為患有該疾病或病 症的對象中發生；(b)抑制疾病或病症，即延遲疾病或病症的發展；或(C)緩解 或改善疾病或病症的影響，即使疾病或病症的影響減退。
實施例
下面參考以下非限制性實施例描述了本發明的實施方式。 實施例1合成DPA-714和["F]DPA-714 1.合成DPA-714
方案1.合成PBR配體DPA-714及其甲苯磺醯基前體8; (i)乙腈，甲醇 鈉；(ii)A/^-二乙基氯-乙醯胺，碘化鈉，NaOH/80%EtOH; (iii)水合肼，EtOH， 乙酸；(iv)2,4-戊二酮，EtOH. (Selleri等，2001); (v) 48% HBr/PTC; (vi)7，三 苯基膦，DIAD; (vii)三苯基膦，2-氟乙醇，DMF， DIAD。
3-(4-甲氧基-苯萄-3-氧代-丙腈(2)
將4-甲氧基苯甲酸甲酯(30 g， 181 mmol)和甲醇鈉(9.75 g， 181 mmol)的 混合物在氬氣下8(TC加熱，並連續攪拌直至均勻。在混合物中逐滴加入乙腈 (16.5 ml， 313 mmol)和氯苯(19 ml)。反應物在90-100。C加熱24小時並連續攪
19拌。將混合物冷卻至約0。C並用冰水(約50ml)和二乙醚(約200 ml)處理，振蕩 直至固體物質溶解。將水層與有機層分離並用稀硫酸酸化至pH2。加入二乙醚 之後萃取有機層，用無水Na2S04乾燥並蒸發至幹。將所得黃色固體溶於CHC13 並用飽和NaHC03水溶液洗滌(5x 100 ml)以除去苯甲酸。有機層用無水NaS04 乾燥並蒸發至幹。固體用石油醚洗滌純化，得到精細的淡黃色晶體狀的2(2.91 g， 9%); mp: 132-137。C; ^n.m.r.(CDCl3， 300 MHz) S 3.89 (s， 3H， OCH3)， 4.03 (s， 2H， CH2)， 6.97 (d， J=9.0， 2H， Ph)， 7.90 (d， J = 9.0， 2H， Ph)。 3-氰基-N,N-二乙基-4-(4-甲氧基-苯基)-4-氧代-丁醯胺(3) 將2 (2.0 g， 11.4 mmol)、N,N-二乙基氯乙醯胺(1.7 g， 11.4 mmol)和Nal (5.1 g， 34 mmol)的混合物加入用80% EtOH (80 ml)配製的NaOH (0.5 g， 12.5 mmol) 溶液，同時連續攪拌。混合物在室溫攪拌7小時並通過TLC監測。 一旦反應 完成便將其冷卻並過濾以除去無機物質。將濾液濃縮，殘餘物通過柱層析 (CH2Cl2作為洗脫液)純化以得到暗黃色油狀的3 (2.1 g,64 %); n.m.r. (CDC13， 300 MHz) 5 1.06-1.30 (m， 6H， N(CH2CH3)2)， 2.85 (dd， J=4.5， 16.2 Hz， 1H， CH2)， 3.21-3.43 (m， 5H: 4H， N(CH2CH3)2: 1H， CH2)， 3.卯(s， 3H， OCH3)， 4.89-5.02 (m， 1H， CH)， 6.98 (d， J=8.7， 2H， Ph)， 8.05 (d， J=9.0， 2H， Ph)。 質譜CI， m/z289 (M+ 1)。
2-[3-氨基-5-(4-甲氧基-苯基)-lH-吡唑-4-基]-N,N-二乙基乙醯胺(4) 在EtOH(37 ml)配製的3 (2.1 g， 7.3 mmol)的溶液中加入水合肼(0.73 g， 14.6 mmol)和乙酸(0.73 ml)。將混合物加熱回流4小時並通過TLC監測。 一旦反應 完成便使其冷卻至室溫。將溶液蒸發至幹，殘餘物通過矽膠柱層析 (CH2Cl2/MeOH， 10:1 v/v，作為洗脫液)純化。將純化產物重溶於CH2C12並用 飽和NaHC03水溶液洗滌(4x20 ml)以除去乙酸。這樣得到黃色晶體狀的4 (1.52 g， 68%); mp: 154.5-157.5°C; ^ n.m.r. (CDC13， 300 MHz) 5 0.90-1.10 (m， 6H， N(CH2CH3)2)， 3.04-3.33 (m， 4H， N(CH2CH3)2)， 3.50 (s， 2H， CH2)， 3.85 (s， 3H， OCH3)， 6.98 (d， J=8.7， 2H， Ph)， 7.32 (d， J=9.0, 2H， Ph)。
將^>^-二乙基-2-[2-(4-甲氧基-苯基)-5,7-二甲基吡唑並[1,5-01]嘧啶-3-基]-乙醯胺(5) 2,4-戊二酮(0.4 g，4 mmol)加入EtOH (20 ml)配製的4 (1.2 g，4 mmol) 的溶液。將混合物加熱回流12小時。使反應混合物冷卻並將溶劑蒸發至幹。殘餘物通過矽膠柱層析(CHCVMeOH， 40:1 v/v作為洗脫液)純化，得到淡黃色 晶體狀的5(1.37g， 93%); mp: 120.5-123.5。C;H n.m.r. (CDC13， 300 MHz) S 1.09-1.22 (m， 6H， N(CH2CH3)2)， 2.54 (s， 3H， 5-CH3)， 2.74 (s， 3H， 7-CH3)， 3.39-3.51 (m， 4H， N(CH2CH3)2)， 3.85 (s， 3H， OCH3)， 3.91 (s, 2H， CH2), 6.51 (s， 1H， H-6)， 6.98 (d， J=9.0， 2H， Ph)， 7.76 (d， J=9.0， 2H， Ph)。
N,N-二乙基-2-[2-(4-羥基-苯基)-5,7-二甲基-卩比唑並[l,5-a]嘧啶-3-基]-乙醯 胺(6)
將5(0.43g， 1.16mmo1)，溴化十六烷基三丁基l粦(0.06 g， 0.116 mmol)和 45% HBr (6 ml)的溶液在IO(TC邊攪拌邊加熱7小時。反應混合物用NaHC03 鹼化至pH 8-9並用CH2Cb萃取。收集有機層並用無水NaS04乾燥。真空除去 溶劑，殘餘物通過柱層析(CHCl3/MeOH， 40:1 v/v作為洗脫液)純化，得到象牙 色晶體6 (220 mg， 54%); mp: 242.5陽247。C; 'H n.m.r. (CDC13， 300 MHz) S 1.06-1.18 (m， 6H, N(CH2CH3)2)， 2.54 (s， 3H， 5-CH3)， 2.73 (s， 3H， 7-CH3)， 3.34-3.51 (m， 4H， N(CH2CH3)2)， 3.96 (s， 2H， CH2)， 6.49 (s， 1H， H-6)， 6.79-6.82 (d， J=8.7， 2H, Ph)， 7.61-7.64 (d， J=8.4， 2H， Ph);(實測值，C， 66.35; H， 6.71; N， 15.38。 C20H24N4O2.l/2H2O理論值C， 68.16; H， 6.86; N， 15.90%)。 質譜CI， m/z353 (M+l)。
甲苯-4-磺酸2-羥基-乙酯(7)
在二氯甲垸(10ml)中的1，2-乙二醇(62mg， 1 mmol)溶液中邊攪拌邊加入新 鮮氧化銀(350 mg， 1.5mmo1)、對甲苯磺醯氯(210 mg， 1.1 mmol)和碘化鉀(33 mg， 0.2 mmol)。將反應混合物室溫攪拌1小時，通過小硅藻土墊過濾並用油 酸乙酯洗漆。除去溶劑，粗產物通過柱層析(CH2Cl2MeOH， 40:lv/v作為洗脫 液)純化，得到透明油狀的單甲苯磺酸酯產物7，產率為46%。 iHiLmx^DC^, 300 MHz) S: 7.81 (d， 2H， J = 8.1)， 7.36 (d， 2H， J=8.1)， 4.15(d， 2H， J=9.0)， 3.82 (d， 2H， J=9.0)， 2.46 (s， 3H)。
甲苯-4-磺酸2-[4-(3-二乙基氨甲醯基甲基-5,7-二甲基-吡唑並-[l，5-a]嘧啶 -2_基)-苯氧基]-乙酯(S)
二異丙基偶氮二羧酸酯(DIAD， 0.48 ml， 2.4 mmol)加入6 (400 mg， 1.1 mmol)三苯基膦(637 mg, 2.4 mmol)和2-羥基乙基甲苯磺酸根(525 mg， 2.4mmol)的溶液在乾燥THF(10ml).反應混合物室溫攪拌20小時並蒸發至幹應 餘物通過矽膠柱層析(CHQ3/MeOH， 80:1 v/v作為洗脫液)產生淡黃色晶體8， 產率85。/。？Hn.m.r.(CDCl3， 300應z)8: 7.83 (d， 2H， J=8.1)， 7.74 (d， 2H， J=9.0)， 7.35 (d， 2H， J= 8.1)， 6.86 (d， 2H， J= 9.0)， 6.52 (s， 1H)， 4.37 (d， 2H， J=4.8)， 4.19 (d， 2H， J=4.8)， 3.92 (s， 2H)， 3.39-3.52 (m， 4H)， 2.74 (s， 3H)， 2.56 (s， 3H)， 2.45 (s， 3H)， 1.08-1.23 (m， 6H);(實測值，C， 63.37; H， 5.96; N， 9.89。質譜CI， m/z 551 (M + 1)。
^^二乙基-2-{2-[4-(2-氟-乙氧基)-苯基]-5，7-二甲基-吡唑並[1,5-01]嘧啶-3-基}-乙醯胺(DPA-714)
在無水DMF(6ml)中的6(150mg， 0.43 mmol)、三苯基膦(274 mg， 0.94 mmol)和2-氟乙醇(60 mg， 0.94 mmol)的溶液中加入二異丙基偶氮二羧酸酯 (DIAD， 190 mg， 0.94 mmol)。將反應混合物室溫攪拌48小時然後蒸發48小 時再然後蒸發至幹。殘餘物通過矽膠柱層析(CHCyMeOH， 80:lv/v作為洗脫 液)純化，得到淡黃色晶體狀的DPA-714，產率為47%。 1Hn.m.r.(CDCl3， 300 MHz)S: 7.78 (d， 2H， J=9.0Hz)， 6.52 (s, 1H)， 7.01 (d， 2H， J=9.0Hz)， 4.78 (dt， 2H， J=4， 47Hz)， 4.26 (dt， 2H， J=4， 28Hz)， 3.93 (s， 2H)， 3.39-3.51 (m， 4H)， 2.75 (s， 3H)， 2.56 (s， 3H)， 1.09-1.27 (m， 6H);(實測值，C， 66.70; H， 6.60; N， 13.14。質譜CI， m/z399 (M+l)。
2.放射性合成["F]DPA-714
K[18F〗FK222
CH3CN， 85°C， 5分鐘 USaLyDPA-714
放射性同位素製備。在PETtrace回旋加速器(瑞典GE醫療公司(GE Healthcare, Sweden))上製造未加入載體的水性["F]氟化物離子，方法是應用 16.5 MeV質子束在95。/。富集的卩S0]-H20上通過卩S0(p,nysF]核反應激發0.8 mL水靶。製備["F]-kryptofix-K222。將[180]富集的H20中的["F]氟化物轉移至GE TRACERlab MXFDG合成儀並使其在真空下通過陰離子交換樹脂(Sep-Pak Waters Accell Light QMA柱，碳酸酯形式，製備時用10 mL 0.5 M K2C03洗 滌然後用10mL水衝洗)。捕獲的["F]氟化物離子然後用含有K2C03(7mg溶於 300 ^tL純水)、300 乙腈和22 mg Kryptofix 222 (K222: 4，7,13,16,21,24-六氧 雜-l，10-二氮雜二環[8.8.8]二十六烷)的洗脫液從Sep-Pak柱上洗脫下來並轉移至 反應容器。加入等份乙腈並在每次加入後將反應混合物蒸發至幹(3次每次 80pL)。蒸發在氮氣流和真空下於95。C進行。
製備並配製["F]DPA-714。將甲苯磺酸酯前體(7)溶於3 mL乙腈並加入無 水["F]-kryptofix-K222配合物。使混合物在85'C反應5分鐘。反應完成後用注 射水Waters for Injections BP (WFI BP)稀釋反應混合物並通過tC-18 Sep-Pak柱。 反應容器用WFI衝洗後再次通過tC18 Sep-Pak柱。tC18捕獲的放射性標記的 產物再用WFI(總共40mL)衝洗三次。然後用EtOH (2mL)和WFI (3mL)將產物 從tC18 Sep-Pak柱上洗脫下來。使所得溶液通過0.22 Millipore CATHIVEX 無熱原無菌濾膜以除去顆粒物質，然後進行HPLC純化。將粗製混合物注射到 HPLC Waters XTerra RP C-18 10pm (7.8 x 300 mm)半製備型反相柱上。採用的 流動相為0.1 MNH4Ac: CH3CN(pH=10): (60/40， v:v)，流速為4.0毫升/分鐘， [18F]DPA-714的保留時間(tR)為12.42分鐘。收集對應於["F]DPA-714的放射性 組分並真空蒸發。殘餘物在WFI BP (4 mL)中重建並通過無菌13 mm Millipore GV0.22pm濾膜過濾入無菌無熱原的真空瓶內。如此得到["F]DPA-714，產率 為10%(n=6)無衰變校正放射性化學物質。DPA-714的質控。為測定比放射活性和放射化學純度，將已知體積和 放射活性的等份最終溶液注射到分析型反相HPLC柱(Waters XTerra C18 5pm (4.6 x 150 mm)。洗脫用的流動相為0.1 MNH4Ac: CH3CN (pH,: (50:50; v:v)，流速為2.0毫升/分鐘，[18"0 八-714的保留時間(110為2.23分鐘。在對應 於載體產物的254 nm下測量(積分)HPLC色譜圖上UV吸收峰的面積，並與將 質量與UV吸收進行關聯的標準曲線進行比較。放射化學和化學純度大於98W， 比活為1680GBq/pmo1。實施例2 DPA-714的體外結合親和力
為進行結合研究，線粒體按之前的描述(TrapaniG， FrancoM， RicciardiL 等，Synthesis and binding affinity of 2-phenylimidazo[l,2-alpha]pyrimidin derivatives for both central and peripheral benzodiazepine receptor. A new series of high-affinity and selective ligands for the peripheral type(新系歹U的夕卜周類型的高 親和力和選擇性配體一中央和外周苯二氮卓受體的2-苯基咪唑並[l，2-a]嘧啶衍 生物的合成和結合親和力)./owma/ C/zem^fry. 1997; 40:3109-3118
以及CampianiG， NacciV， Fiorinil等，Synthesis, Biological Activity, and SAR of Pyrrolo benzoxazepine Derivatives ， a New Class of Specific "Peripheral-Type" Benzodiazepine Receptor Ligands (新的一類特異性"外周型"苯二氮卓受體配體 一吡唑並苯並噁氮卓衍生物的合成、生物活性和SAR). Jow加/ 0 em/^y. 1996; 39:3435-3450)經細微改進從經頸脫臼處死的雄性Wistar大鼠 的腎臟製備。在玻璃勻漿器內用特氟隆研體將腎臟勻漿在含有蛋白酶抑制劑 (160嗎/mL節脒，200(xg/mL桿菌肽(bacitracine)和20 (xg/mL大豆胰蛋白酶 抑制劑)的20倍體積的冰冷的50 mM Tris/HCl， pH 7.4， 0.32 M蔗糖和1 mM EDTA(緩衝液A)中，並在4t:下600g離心10分鐘。所得懸浮液在4t:下10,000g 離心10分鐘。然後將沉澱重懸於20倍體積冰冷的緩衝液A中，並在4t;下 10,000g離心10分鐘。粗製的線粒體沉澱在-20。C冷凍直至測定或與0.6 nM 卩H]PK11195—起在50mMTris/HCl， pH 7.4 (緩衝液B)中培育，待測化合物的 濃度範圍為0.1nM-10pM，總體積為0.5mL，在4'C下培育90分鐘。用冰冷 的緩衝液B稀釋至5 mL以終止培育，然後立即通過玻璃纖維Whatman GF/C 濾器快速過濾。濾器然後用緩衝液B洗滌(2 5mL)，並通過功效設定為66%的 Packard 1600 TR液體閃爍計數器測定濾器上保留的放射活性的量。在存在未標 記的1 pMPK 11195時分別評估各種情況下的非特異性結合。測定ICso值並根 據Cheng和Prusoff的方程(Cheng Y-C， Prusoff WH. Relationship between the inhibition constant (KI) and the concentration of inhibitor which causes 50 per cent inhibition (150) of an enzymatic reaction(抑制常數(KI)和能夠抑制50%酶反應的 抑制劑濃度(I50)之間的關係).5/oc/ eAm'cfl/P/zamzflco/ogy. 1973; 22:3099-3108) 推測得到Ki值。通過Lowry等(LcwxyOH， RosebroughNJ, FairAL， Randall
24RJ. Protein measurement with the folin phenol reagent(用福林酚試齊U領!j量蛋白質) /owm"/o/5/o/og/ca/C/^m/W7. 1951; 193:265-275)的方法估算蛋白質濃度，以 牛血清作為標準品。
採用[SH]PK11195作為放射性配體並以大鼠腎柱子作為受體來源通過膜結 合實驗評價DPA-714對TSPO的親和力。為確保DPA-714的選擇性，用^H]Ro 15-1788和大鼠腦組織來評價其與CBR的結合。結果示於表1。如表1所示， 在相同試驗中，DPA-714的親和力(Ki = 7.0 nM)不如DPA-713的(Ki = 4.7 nM) 高，但高於PK 11195的(IQ = 9.3 nM)。所有三種TSPO配體，DPA-714、 DPA-713 和PK 11195對CBR的親和力可忽略。
表1.配體對TSPO和CBR的親和力，採用[3H]PK 11195和卩H]Ro 15-1788 作為放射性配體，並分別以大鼠腎包膜和大鼠腦組織作為受體來源。各配體的 LogD值通過HPLC測定c
配體A (nM) TSPO(nM) CBRLogD
DPA-7147.0> 10,0002.44
DPA-7134.7〉10,0002.44
PK 111959.3> 10,0003.35
實施例3刺激神經類固醇產生
在該實施例中，採用充分開發的類固醇生成試驗(Selleri S， Bruni F， Costagli C等，"2-芳基吡唑射l,5-a]嘧啶-3-基乙醯胺—新的有效的選擇性外周苯二氮卓 受體配體".MeWc/"fl/ Ozem/Wo;. 2001; 9:2661-2671)評價了 DPA-714提高孕烯醇酮合成的能力。
孕烯醇酮試驗的結果(示於圖l)證實，DPA-714刺激類固醇產生的功效顯 著高於DPA-713和廣泛使用的PBR配體PK11195和Ro5-4864。
細胞培養
大鼠膠質瘤C6細胞在添加有10%FBS, 2mML-穀氨醯胺，100單位/mL 青黴素和100 pg/mL鏈黴素的Dulbecco改進的Eagle培養基中培養。培養在 37°C、 5%(:02/95%空氣的潮溼氣氛下進行。
類固醇生物合成試驗
25將C6細胞以約1 x 106細胞/孔的密度接種於24孔板，終體積為1 ml。測 量孕烯醇酮產量之前細胞用由140mMNaCl、 5mMKCl、 1.8mMCaCl2、 1 mM MgS04、 10mM葡萄糖、10 mM HEPES/NaOH， pH7.4，加0,P/。BSA構成的
單鹽培養基洗滌三次。試驗期間，將細胞與該單鹽培養基一起在37t;空氣培養
箱中孵育。為測量分泌到培養基中的孕烯醇酮，在單鹽培養基中加入曲洛司坦
(25 pM)和SU 10603 (10 ^M)(分別為3|3-羥基類固醇脫氫酶和17a-羥化酶的抑 製劑)以阻斷其進一步代謝，如之前所述(Campiani B， Nacci V， Fiorinil等， 新的一類特異性"外周型"苯二氮卓受體配體一吡唑並苯並噁氮卓衍生物的合 成、生物活性和SAR， ^wma/o/Mecfc/wa/C/^w/Wo/ 1996; 39:3435-3450)。在 C6細胞中加入新化合物以及加入PK 11195、 Ro 5-4864或氯硝西泮能將單鹽培 養基徹底改變成含有適當濃度(40 ^M)化合物的培養基。每次實驗期間所有孔 的乙醇終濃度是恆定的且不超過0.5% (v/v)，濃度本身對於類固醇產生沒有影 響。在培育期(2h)結束時，保留細胞培養基並1500g離心10分鐘。分泌到培養 基中的孕烯醇酮的量通過放射免疫測定(RIA)定量測定，測定採用獲自美國加 州ICN生物化學公司(ICN Biochemical Inc.， CA， USA)的抗體在供應商推薦的 條件下進行。按照之前描述的方法(Lowry OH, Rosenbrough NJ， Farr AL， Randall RJ.用福林酚試劑測量蛋白質.J5fo/CAem. 1951; 193; 265-275)測定細胞蛋白 質濃度。
結果示於圖1。如圖1所示，DPA-714刺激孕烯醇酮合成水平高出基線80^， 明顯比PK 11195和Ro 5-4864有效。在相同試驗中，DPA-713顯示對於類固醇 產生沒有影響。
實施例4離體["F]DPA-714的齧齒動物研究
離體實驗採用重300-320g的成年雄性Wistar大鼠(Janvier ， Le Genest-St-Isle，法國)。所有過程按照關於實驗室動物護理的歐洲社團委員會指 令86/609/EEC(European Community Council Directive 86/609/EEC)進行。動物 在12小時晝/夜循環條件下養殖(溫度22.4 ± 0.5°C;溼度40.3 ± 7.2%)並可隨意
獲得水和食物。
喹諾酮酸(QA， Quinolonicacid)損傷大鼠用異氟烷(4%， 500 mL/分鐘)局
26部麻醉，置於立體定位裝置(Stoelting， Phymep，巴黎，法國)上並在手術期間
維持2。/。異氟烷注射(500 mL/分鐘)。暴露頭骨並用牙鑽鑽出小孔。按以下坐標
在動物右側紋狀體單側注射離開前囟A， 0.7; L， -3; P， -5.5 mm(Paxinos
和Watson， 1986)。插入套管(25號，Hamilton, Massy，法國)並以0.5 ^L/分鐘
的流速輸注QA溶液(300 nmol，用2pL磷酸鹽緩衝液，pH 7.4配製)。將注射
器保留在位4分鐘，然後抽出以免QA倒流。在頭骨中填入蠟，然後縫合頭皮。 生物分布研究用QA損傷一側紋狀體6天後用["F]DPA-714進行離體生
物分布研究。通過陰莖靜脈給大鼠注射含20-37MBq [18F]DPA-714的水和EtOH
的混合物(85/15)，或者預注射PK 11195 (n = 5， 5mg/kg)、DPA-714 (n = 2， 1 mg/kg)
或DPA-713(n-2; 1 mg/kg)， 15分鐘後再注射放射性配體。僅注射放射性配
體(['SF]DPA-714)而未預注射的大鼠作為對照組(n = 6)。注射["F]DPA-714後
60分鐘處死動物。將外周組織樣品，即血液、肌肉、骨骼、肝臟、心臟、腎上
腺和一些腦部區域(小腦，右和左紋狀體，右和左額皮質，右和左海馬)除去，
稱重並用(acompleterDenis)測量它們的放射活性。對於外周組織，結果表示為
(%ID/g組織)/(Q/oID/g血液)之比± SEM。對於腦，結果表示為(。/。ID/g大腦區
域)/(o/。ID/g小腦)之比士SEM。當數據數》5時進行斯氏t檢測。當pO.05時
被認為有統計學顯著性。
結果
外周生物分布圖2顯示了["F]DPA-714分別在四個QA損傷大鼠組；對 照組(僅注射放射性配體)和三個預處理組(PK 11195、DPA-713和DPA-714)中的 外周分布。對照組的結果顯示，["F]DPA-714最多積聚在腎上腺(71.62土 35.06) 和心臟(59.26 ± 29.06)，而在骨骼(6.30 ± 0.97)、肝臟(3.36 ± 0.16)和肌肉(2.11 ± 1.13)中的積聚最少。用PK 11195 (5 mg/kg)預處理的大鼠顯著抑制心臟、骨骼 和肝臟攝取放射性配體，但不抑制腎上腺和肌肉攝取。相反，用DPA-714 (1 mg/kg)或DPA-713 (1 mg/kg)預處理能阻斷["F]DPA-714在所有外周組織內積 聚。
大腦生物分布圖3顯示了四個QA損傷大鼠組中每一組的["F]DPA-714 的大腦分布。對照組的結果證實，與它們對應的未損傷側相比，右(損傷)側紋狀體(4.81 ± 0.47對比0.61 ± 0.14;pO.05)和額皮質(1.92 ± 0.86對比0.68 ±0.13， pO.05)攝入的["F]DPA-714在統計學上顯著升高。而在海馬中未觀察到這一現 象(0.74 ± 0.13對比0.77 ±0.29)。在右紋狀體和額皮質中，預注射PK 11195能 顯著降低["F]DPA-714的積聚(分別為1.90 ± 0.59和1.18 ±0.16， p<0.05)。預注 射DPA-714 (分別為2.00 ± 0.23和1,28 ± 0.17)或DPA-713 (分別為1.08 ± 0.08 和1.06±0.05)之後在這些相同區域同樣看到了可見的降低。有趣的是，與對照 相比，在PK 11195預處理組中，在左紋狀體(1.25 ± 0.48)、左額皮質(0.99 ± 0.04)、 右海馬(1.19 ± 0.14)和左海馬(1.09 ± 0.10)內積聚的["F]DPA-714增加。預注射 DPA-714和DPA-713之後也觀察到類似趨勢。
實施例5體內["F]DPA-714狒狒PET研究
選擇13歲、23.1 kg的正常雄性toma*_yay狒狒進行PET掃描。按 照全國衛生與醫學研究委員會(NHMRC)有關供科學研究使用的非人靈長類動 物的護理和使用實踐規範撫養和處理狒狒。項目申請獲得雪梨西南部健康服務 (SSWAHS)動物倫理學委員會批准。注射的放射性配體的劑量為100 MBq [18F]DPA-714。
在澳大利亞皇家阿爾佛雷德王子醫院(Royal Prince Alfred Hospital)的PET 和核醫學科利用西門子Biograph LSO PET-CT掃描儀獲得所有PET數據。該雙 模態裝置在同一掃描架內裝備了具有24個晶體環(crystal ring)的全-3D PET掃 描儀和雙層CT掃描儀。它在視野中央產生6.3 mm半高寬(FWHM)的重建PET 空間解析度。先用氯胺酮(8mg/kg， /m)麻醉狒狒。以0，2mg氯胺酮/kg/分的劑 量速率靜脈內(AO輸注含氯胺酮(帕內爾實驗室(ParnellLaboratory),澳大利亞) 鹽水以維持麻醉。半小時後狒狒還接受了 MgS04 (2 mL /v) +阿託品(l mg /m) + maxalon(5mg/m)。用塑料帶將狒狒的頭固定以使運動偽影最小。先進行頭部 的CT掃描，完成後再注射放射性配體。以列表模式(list mode)採集PET數 據，之後立即注射放射性配體並持續60分鐘。阻斷研究包括在注射放射性配 體5分鐘前用PK 11195 (1.5 mg/kg)進行預處理，而替代研究包括在注射 [18F]DPA-714後20分鐘給予冷的DPA-714 (1 mg/kg)。在總結各研究時，將列 表模式(listmode)數據按動態掃描分類，包括54層面(20x30s， 30x60s禾口4 x 300 s)。動態3-D PET正弦圖用Fourier Rebinning (FORE)重新劃分(rebinned) 並重建，重建採用過濾的反投影和基於CT數據的光子衰減校正，並分散到47 個軸向層中，各層包含128 x 128體素。重建體素的尺寸為0.206 x 0.206 x 0.337 cm。以注射劑量百分數/腦組織體積(M劑量/mL)作為單位將放射性配體攝取進 行轉換並對時間作圖。用自動3D配準算法配準兩種重建的掃描，然後定義 ROI(Eberl S， Ka皿o I， Fulton RR， Ryan A， Hutton BF， Fulham MJ. 1996. Automated interstudy image registration technique for SPECT and PET(SPECT禾口 PET的自動交互研究圖像配準技術).JA^c/Med37(1): 137-145)。
從選出的丘腦、小腦、紋狀體、皮層、顱骨和全腦的興趣區層面構建代表 配體濃度改變與時間關係的延遲校正時間活性曲線。列表模式(list mode)採 集之後進行全身PET-CT掃描，在六個床位中的每一個上進行2分鐘，以測定 攝取放射性配體的其他部位。
結果
進行基線研究，其中動態PET腦成像開始於i.v.給予["F]DPA-714 (100 MBq，用2ml鹽水配製，比活性為270 GBq4imol)之前數分鐘時並結束於注射 後60分鐘時。然後進行全身採集，在六個床位中的每一個上採集2分鐘。在 基線研究中獲得的這種軸向腦切片PET全圖證實，[18F]DPA-714能夠透過血腦 屏障並在腦中可觀地積聚。未觀察到狒狒顱骨內有積聚。
為測定["F]DPA-714結合的特異性進行了阻斷研究，其中包括用TSPO配 體PK11195 (1.5 mg/kg)進行預處理。該研究中獲得的軸向腦層面的PET全圖證 實，PK11195能有效阻斷腦攝取["F]DPA-714。最後進行替代研究以評價放射 性配體結合的可逆性，該研究在注射["F]DPA-714後20分鐘給予冷的DPA-714 (1 mg/kg)。
圖4顯示了描繪三種PET研究(基線研究、阻斷研究和替代研究)中狒狒全 腦中["F]DPA-714的攝取的時間活性曲線(TAC)。在基線研究中，[18F]DPA-714 在10分鐘內達到最大攝取並在隨後的50分鐘內維持大致相同的攝取水平。替 代研究在最初的20分鐘內似乎類似於基線研究，然後，在注射冷的DPA-714 之後，曲線升高形成尖峰，然後放射性配體被完全清除。相反，用TSPO特異 性配體PK 11195預處理導致["F]DPA-714攝取先升高，然後迅速降至清除水平，與替代研究結果相同。
腦成像後還立即獲得了全身圖像，以研究攝取放射性配體的其他部位。這
些圖像證實在心臟、腎上腺和唾液腺中["F]DPA-714高攝取。給予放射性配體 20分鐘後注射冷的DPA-714導致這些外周區域內的["F]DPA-714結合被完全 替代(數據未顯示)。
實施例6 ["F]DPA-714作為TSPO的PET示蹤劑在HSV腦炎大鼠模型 中與[HC]PK11195的比較
包括帕金森病和單純性皰疹性腦炎(HSE)在內的許多神經疾病與神經炎症 有關。外周苯二氮卓受體(PBR)的表達在神經炎症期間升高並可用[UC]PK11195 通過正電子發射體層攝影(PET)觀測。然而，[UC]PK11195顯示出低腦攝取和 高非特異性結合，並可能對顯示輕微炎症不夠靈敏。在該研究中，在HSE大 鼠模型中評價了["F]DPA-714，並在相同模型中與[UC]PK11195進行比較。
實驗:使相應的甲苯磺酸酯前體與K"F/kryptofix反應以製備["F]DPA-714。 通過TLC檢測["F]DPA-714的穩定性。給雄性Wistar大鼠鼻內接種1型單純 皰疹病毒(107 PFU，用1001PBS配製)或PBS(對照)。接種後一周內，複製中 的病毒遷移到腦中並導致神經炎症。接種後第6或7天時給大鼠/.v.注射 [18F]DPA-714 (559 MBq)或[H(:]PK11195 (7822 MBq)，並分別進行2小時和1 小時動態PET掃描(MicroPET Focus 220)，然後進行離體生物分布研究。
結果和討論[18F]DPA-714的放射化學產率為20 ± 5%，比活為10428 MBq/nmo1，放射化學純度>99%。在體內，[18F]DPA-714緩慢轉化成極性更大 的代謝物，注射示蹤劑211時含有母體化合物的大鼠血漿的放射活性為78±1%。 [18F] DPA-714的PET圖像顯示在對照大鼠(11=3)中有低示蹤劑攝取，該值明顯 低於lh時的[UC]PK11195攝取(11=5)( =0.01)，且示蹤劑從腦中緩慢廓清 (T1/2>100分鐘)。HSE大鼠中積聚HSV-1的嗅區和的逆行腦區域的["F]DPA-714 攝取升高(90-150%)。在這些區域當中，[UC]PK11195攝取未顯著升高。
結論這些結果證實，["F]DPA-714是一種有效的顯示神經炎症的示蹤劑， 並且由於炎症和非炎症區域更好的反差，它比[HC]PK11195更加靈敏。實施例7 DPA-714的毒性研究
在該研究中，通過靜脈途徑給大鼠施用一次DPA-714之後評價了它的潛在 毒性。
該研究包括2組共20隻SPF Sprague-Dawley大鼠(每組5隻雄性和5隻雌 性大鼠)，7周齡，隨機分組當天雄性大鼠重量在193.1 g和215 g之間，雌性 大鼠重量在160.6 g和180.1 g之間。動物購自法國查爾斯河實驗室(Charles River Laboratories France)(Domaine des Oncins - 69592 L'Arbresle Cedex，法國)。
各組如下
組l:給予載體(即0.9。/。NaCl/乙醇(9/1， (v/v))。
組2:給予5 mL/kg DPA-714
將1/10稀釋於載體(即0.9。/。NaCl/乙醇9/1， (v/v))的待測DPA-714或者載 體用0.2 pm濾膜過濾，然後通過靜脈內途徑在約30秒內以團注形式給予動物， 給藥體積為5 mL/kg。
在隨機分組當天、D7、 D14和D15(屍檢當天)對動物稱重。
在D1進行常規觀測，給藥後60分鐘± 30分鐘進行，再在給藥後3-4小 時觀測一次，然後每天一次持續14天。還在D1評價功能和神經行為，給藥後 60分鐘±30分鐘進行，然後在D7和D14進行。每天記錄兩次死亡率，持續 14天。對14天後存活的所有動物通過肉眼進行屍檢。
在採取的實驗條件下，給予載體(即0.9。/。NaCl/乙醇9/1， v/v))的動物未顯 示任何明顯徵兆且體重增加正常。屍檢時未檢測到載體對器官造成任何異常影 響。
1/10稀釋於載體(即終濃度為0.05 mg/mL)並以5 mL/kg通過靜脈內途徑施 用的DPA-714未導致死亡。觀察到與對照組相比，對於雄性和雌性大鼠的體重 增加沒有影響。在以5 mL/kg通過靜脈內給予1/10稀釋於載體DPA-714的動 物中未觀察到有關臨床徵兆。屍檢時未觀察到肉眼損傷。
在採取的實驗條件下，以5 mL/kg給Sprague-Dawley大鼠靜脈注射一次的 DPA-714 (批號140306)未導致任何中毒跡象。
因此，DPA-714(批號140306)當通過靜脈內途徑給予時，其在雄性和雌性 Sprague-Dawley大鼠中的LD5o高於5 mL/kg。解釋
採用大鼠腎膜和卩H]PK 11195進行的體外結合研究(實施例2)證實，
DPA-714以高親和力特異性結合TSPO。在正常和損傷大鼠內採用microPET 進行的生物分布研究(實施例4)顯示，[18F]DPA-714在檢測TSPO表達改變區域 時是一種高度靈敏且精確的放射性配體。這些大鼠研究還證實，[18F]DPA-714 在體內具有良好的動力學和穩定性。
正常狒狒腦的PET成像(實施例5)再次證實了在大鼠研究中觀察到的結 果。實施例5的結果顯示，["F]DPA-714特異性並選擇性結合TSPO，且在TSPO 結合時未顯示物種依賴性。
DPA-714的一個新特徵是其在孕烯醇酮類固醇生成試驗中顯著的功能活 性(實施例3)。實際上，DPA-714在刺激神經類固醇合成時的活性是最廣泛使 用的TSPO配體PK 11195在相同實驗中的兩倍。
此外，與PK 11195(K,-9.3nM)相比，DPA-714具有較高的結合親和力(K, =7.0 nM)(實施例2)。 DPA-714的這種較高的結合親和力以及良好的體內動力 學和較低親油性意味著["F]DPA-714能夠更好地標記TSPO。
因此，["F]DPA-714能夠被用作小膠質細胞活化的精確體內標記物。更具 體地說，[18F]DPA-714可與PET —起使用以檢測許多神經變性疾病的最初神經 病理學事件。這种放射性配體也可被用作研究疾病進展和治療功效的工具。可 將["F]DPA-714用作研究疾病進展和治療功效的工具的疾病種類包括阿爾茨 海默病(AD)、帕金森病(PD)、亨廷頓病、多發性硬化(MS)、多系統萎縮症(MSA)、 癲癇、腦病、中風和腦瘤。["F]DPA-714的高特異性結合和高選擇性以及其良 好的體內動力學使其適合這種應用。
本領域技術人員將了解，除了那些具體描述之外，易對這裡描述的發明進 行變化和修改。所有這種變化和修改都被認為包含在本發明範圍之內，其特徵 可從上面的描述中得出。
在隨後的權利要求書和之前的發明描述中，除非由於表達方式或必要暗示 的原因在文中另有說明，詞語"包含"或其變化形式如"包括"或"含有"以 開放式含義使用，即表示存在所列舉的特徵但不排除存在或加入本發明各種實 施方式中的其他特徵。
3權利要求
1. 一種用選自18F、123I、76Br、124I或75Br的放射性同位素放射性標記的式(I)的化合物，或其鹽式中R是H、滷素、任選被滷素取代的烷基、或任選被滷素取代的烷氧基；R1、R2和R3各自獨立為H或疏水性基團；和R4和R5各自獨立為任選被滷素取代的烷基、或任選被滷素取代的烷氧基。
2. 如權利要求1所述的放射性標記的化合物或其鹽，其特徵在於，在式(I)中，R是任選被滷素取代的CL6垸基或任選被滷素取代的CL6垸氧基。
3. 如權利要求1或2所述的放射性標記的化合物或其鹽，其特徵在於，在式(I)中，R。 R2和R3各自獨立選自氫；任選被滷素取代的Cw烷基；任 選被滷素取代的芳基;任選被滷素取代的NHCL6垸基;任選被滷素取代的Od.6 烷基；任選被滷素取代的SQv烷基；COOR6，其中&是任選被滷素取代的 Cw烷基；(CH2)nOR6，其中R6是任選被滷素取代的CL6烷基，n是整數；以及任選被滷素取代的聚醚。
4. 如權利要求1-3中任一項所述的放射性標記的化合物或其鹽，其特徵在於，在式(I)中，R4和R5各自獨立選自任選被滷素取代的Cu6垸基或任選被滷素取代的Cw烷氧基。
5. —種藥物組合物，其包含如權利要求1-4中任一項所述的放射性標記的 化合物或其藥學上可接受的鹽以及藥學上可接受的載體。
6. —種使對象體內的轉運蛋白(18 kDa) (TSPO)成像的方法，所述方法包括 給予該對象如權利要求l所定義的用選自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br的放射性 同位素放射性標記的式(I)的化合物，或其藥學上可接受的鹽，並獲得放射性同 位素在對象體內的定位圖。
7. 如權利要求6所述的方法，其特徵在於，所述式(I)的化合物用18F、 76Br、 "I或"Br放射性標記，且所述圖像通過正電子發射體層攝影(PET)成像而獲得。
8. 如權利要求6所述的方法，其特徵在於，所述式(I)的化合物用1231放射 性標記，且所述圖像是通過SPECT成像獲得的。
9. 一種診斷對象的神經變性疾病的方法，該方法包括給予該對象如權利要 求l所定義的用選自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性標記的 式(I)的化合物，或其藥學上可接受的鹽，並獲得放射性同位素在對象體內的定 位圖以評價對象腦實質中該化合物或其鹽的TSPO結合程度。
10. 如權利要求9所述的方法，其特徵在於，所述神經變性疾病是阿爾茨 海默病、帕金森病、亨廷頓病、多發性硬化、多系統萎縮症、癲癇、腦病、中 風或腦瘤。
11. 如權利要求6-9中任一項所述的方法，其特徵在於，所述對象是人。
12. 如權利要求l所定義的用選自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同 位素放射性標記的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽在製備用於對象體內 轉運蛋白(18kDa)成像的藥物中的應用。
13. —種式(II)的化合物，或其鹽formula see original document page 3式中:R是任選被滷素取代的垸基，或任選被滷素取代的垸氧基； R。 R2和R3各自獨立為H或疏水性基團；和R4和R5各自獨立為任選被滷素取代的垸基、或任選被滷素取代的垸氧基，和其中，R、 R,、 R2、 R3、 R4或R5中的至少一個被F取代。
14. 如權利要求13所述的化合物，或其鹽，其中，R是OCH2CH2F。
15. —種藥物組合物，其包含權利要求13或14所述的化合物或其藥學上 可接受的鹽以及藥學上可接受的載體。
16. —種治療對象的神經變性疾病、炎症或焦慮症的方法，所述方法包括 給予該對象治療有效量的如權利要求13或14所述的化合物或其藥學上可接受 的鹽。
17. 如權利要求16所述的方法，其特徵在於，所述對象是人。
18. 如權利要求13所定義的式(II)的化合物或其藥學上可接受的鹽在製備 用於治療神經變性疾病、炎症或焦慮症的藥物中的應用。
全文摘要
本發明提供了用18F、123I、76Br、124I或75Br放射性標記的式(I)的化合物及其鹽，以及使對象體內的轉運蛋白(18kDa)(TSPO)成像的方法，該方法包括給予用18F、123I、76Br、124I或75Br放射性標記的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽。本發明還提供了氟-取代的式(II)的化合物及其鹽，以及治療對象的神經變性疾病、炎症或焦慮症的方法，該方法包括給予式(II)的化合物或其藥學上可接受的鹽。
文檔編號C07D487/04GK101448834SQ200780018195
公開日2009年6月3日 申請日期2007年5月4日 優先權日2006年5月19日
發明者M·L·詹姆斯, M·卡西奧 申請人:雪梨大學