索骨丹有效活性成分的提取方法及用途的製作方法
2023-09-23 11:49:15 1
專利名稱：索骨丹有效活性成分的提取方法及用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種索骨丹有效活性成分的提取方法及索骨丹有效活性成分在製備抗病毒和抑菌滅菌藥物中的應用。
根據世界衛生組織全球病毒監測研究報告顯示，柯薩奇病毒在人群中感染最為常見。在新生兒、兒童突發死亡病例中，20％為病毒性心肌炎所致。由於病毒感染後可在心肌中持續存在，目前尚缺乏有效抗病毒手段[1]。《健康報》2001，03，20，蔣明。
現已研究查明，咽峽皰疹(亦稱皰疹性咽峽炎)，多為感染柯薩基病毒所致。起病初有頭痛，小兒啼哭，身痛，發燒等類似感冒症狀，繼而發現腹痛，拒食，嘔吐等胃腸症狀，兒童因此病高燒不退，體質下降，甚至出現驚厥，並發腮腺炎及腮腺炎性腦膜炎，對生命構成威脅[2]。《福建衛生報》2000，09，24金若米。
本發明的另一目的在於提供索骨丹有效活性成分在製備抗病毒和抑菌滅菌藥物中的用途。
本發明索骨丹有效活性成分的提取方法，該方法包括以下步驟a.以索骨丹的塊根為原料，將其精選、切片、洗淨、乾燥、粉碎至20目、10目或3-5mm的粒度；b.用濃度為45-95％有機溶液總萃取，其中有機溶液可以是濃度為45～60％、70～75％、90～95％的醫用乙醇的任何一種；然後分極性部位用有機溶液萃取，接著進行活性試驗，有機溶液可以是氯仿(丙酮)、乙酸乙酯、正丁醇；配合藥理篩選，棄去殘渣；其中有機溶液用量為原料量的4-8倍，萃取方式可以為冷浸或熱迥流。冷浸方式的冷浸時間為每次5-9天，萃取次數為3-5次，萃取溫度為12-30℃。熱迥流方式的迥流時間為每次1-4小時，優選2-4小時；迥流次數為2-5次，優選2-3次；c.減壓回收溶劑後，提取液濃縮成浸膏；d.分部位用色譜柱進行色譜分離，柱層析用聚醯胺或用矽膠作填充劑，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.1或正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1為洗脫劑，得活性部位的洗脫液，即得到有效活性成分。
索骨丹有效活性成分，包括1)鬼燈檠甲素；2)鬼燈檠乙素；3)槲皮素；4)熊果甙；5)紫丁香酸；6)沒食子酸；7)3-O-沒食子醯基-(-)-表兒茶素；8)(3-O-沒食子醯基)-表兒茶素-(4β-8)-(3-O-沒食子醯基)-表兒茶素；9)1，2，4，6-四-O-3-O-沒食子醯基-β-D-葡萄糖；10)沒食子酸甲酯；11)芳樟醇；12)2，6-二羥基苯乙酸甲酯等。
純中藥索骨丹的有效活性成分對柯薩基病毒、皰疹病毒等引起的疑難病症有明顯療效，適宜治療病毒性心肌炎、咽峽炎、腮腺炎、皰疹性口腔炎和惡性痢疾、B型肝炎、流行性感冒等，該藥療效顯著，服用安全，無毒副作用，增強免疫，克服了現有西藥、中成藥的缺點。本發明索骨丹的有效活性成分可單獨使用，也可將索骨丹中提取的活性成分的流浸膏單獨與輔料(如，醫用澱粉、乙基纖維素、明膠等)混合均勻、乾燥、粉碎、過篩、熟化和滅菌後製成所需的劑型，可治療由柯薩基病毒、單純皰疹病毒和乙型腦炎病毒所引起的疑難病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峽炎、皰疹性口腔炎等。還可將其與助劑、輔料科學配伍後，乾燥粉碎成100-120目的細粉，在100-110℃溫度下進行熟化、滅菌處理10-30分鐘，意即可製成膠囊、含片也可製成膏劑，既根據不同的助劑，制出相應的藥劑。例如，加一種或數種助劑製成抗病毒、抑菌滅菌製劑，或治B型肝炎、哮喘、流行性感冒等藥劑。所製成的藥物具有服用安全，療效明顯，無毒副作用，抗病毒、抑菌滅菌範圍廣，製備方法簡便易行，無環境汙染等優點。
索骨丹的有效活性成分藥劑中含有豐富的營養成分。在索骨丹中，其總胺基酸的含量為2.01％。已鑑定出18種人體所需的胺基酸，其中有8種為人體所需而又不能自身合成的胺基酸。
索骨丹有效活性成分，還對金黃色葡萄球菌、李斯德桿菌、耶爾森氏菌、變形桿菌、綠濃桿菌、炭疽桿菌、傷寒桿菌、弗氏痢疾桿菌等10餘種病菌有強的殺滅作用。此藥不僅能殺滅和抑制DNA(HGV單純皰疹)病毒，而且還能抑滅RNA(柯薩基)病毒，說明此藥為廣譜性抗病毒藥物。此藥安全量為192-96mg/Kg，而在含17-34mg/Kg時即能抑滅病毒，同時殺滅病毒後的細胞管的細胞仍能繼續分裂傳代，說明此藥安全有效，毒性小。
用瑞士種小白鼠進行經口灌胃染毒試驗，以蒸餾水對照，實驗結果表明，索骨丹的有效活性成分經口等量灌胃(0.01ml/g)，其急性經口的半數致死大於12500mg/Kg。按口服毒性分極標準，屬於微毒(實際無毒)。此外，試驗還表明，對B肝病毒和流感病毒有100％抑制作用。將索骨丹的有效活性成分製成藥劑，對治療由柯薩基病毒、單純皰疹病毒和乙型腦炎病毒所引起的疑難病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峽炎、皰疹性口腔炎等，有效率93.7％，優良率86％。
實施例1取索骨丹的塊根200g，將其精選、切片、洗淨、乾燥、粉碎至10目的粒度；用1000g的濃度為45～60％的醫用乙醇總萃取，萃取方式為冷浸方式，冷浸時間為每次7天，萃取次數為4次，萃取溫度為25℃。然後分極性部位用有機溶液萃取，有機溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接著進行活性試驗，配合藥理篩選，棄去殘渣；減壓回收溶劑後，提取液濃縮成浸膏；分部位用色譜柱進行色譜分離，柱層析用矽膠作填充劑，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝12∶5∶0.1為洗脫劑，得活性部位的洗脫液，即得到有效活性成分。
實施例2取索骨丹的塊根150g，將其精選、切片、洗淨、乾燥、粉碎至3-5mm的粒度；用750g量的濃度為70～75％的醫用乙醇總萃取，萃取方式為熱迥流方式，迥流時間為每次3小時；迥流次數為3次。然後分極性部位用有機溶液萃取，有機溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接著進行活性試驗，配合藥理篩選，棄去殘渣；減壓回收溶劑後，提取液濃縮成浸膏；分部位用色譜柱進行色譜分離，柱層析用聚醯胺作填充劑，以正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1為洗脫劑，得活性部位的洗脫液，即得到有效活性成分。
權利要求
1.一種索骨丹有效活性成分的提取方法，該方法包括以下步驟a.以索骨丹的塊根為原料，將其精選、切片、洗淨、乾燥、粉碎至20目、10目或3-5mm的粒度；b.用濃度為45-95％有機溶液總萃取，然後分極性部位用有機溶液萃取，接著進行活性試驗，配合藥理篩選，棄去殘渣；其中有機溶液用量為原料量的4-8倍，萃取方式可以為冷浸或熱迥流；c.減壓回收溶劑後，提取液濃縮成浸膏；d.分部位用色譜柱進行色譜分離，柱層析用聚醯胺或用矽膠作填充劑，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.1或正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1為洗脫劑，得活性部位的洗脫液，即得到有效活性成分。
2.根據權利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步驟中總萃取用的有機溶液可以是濃度為45～60％、70～75％、90～95％的醫用乙醇的任何一種；分極性部位萃取用的有機溶液可以是氯仿(丙酮)、乙酸乙酯、正丁醇。
3.根據權利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步驟中的萃取方式為冷浸，冷浸時間為每次5-9天，萃取次數為3-5次，萃取溫度為12-30℃。
4.根據權利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步驟中的萃取方式為熱迥流，迥流時間為每次1-4小時，迥流次數為2-5次。
5.根據權利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步驟中的萃取方式為熱迥流，迥流時間為每次2-4小時，迥流次數為2-3次。
6.索骨丹有效活性成分在製備抗病毒和抑菌滅菌藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種索骨丹有效活性成分的提取方法及索骨丹有效活性成分在製備抗病毒和抑菌滅菌藥物中的應用。提取方法包括a.以索骨丹的塊根為原料，將其精選、切片、洗淨、乾燥、粉碎；b.用濃度為45－95％有機溶液萃取，然後分極性部位用有機溶液萃取，進行活性試驗，配合藥理篩選，棄去殘渣；萃取方式可以為冷浸或熱迥流。c.減壓回收溶劑後，提取液濃縮成浸膏；d.分部位用色譜柱進行色譜分離，柱層析用聚醯胺或用矽膠作填充劑，得活性部位的洗脫液，即得到有效活性成分。將索骨丹的有效活性成分製成藥劑，對治療由柯薩基病毒、單純皰疹病毒和乙型腦炎病毒所引起的疑難病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峽炎、皰疹性口腔炎等有良好療效。
文檔編號A61P31/04GK1433788SQ0210199
公開日2003年8月6日 申請日期2002年1月24日 優先權日2002年1月24日
發明者鄭尚珍 申請人:西北師範大學