T-2毒素在製備抗腫瘤藥物中的應用的製作方法

2023-09-23 07:47:30 2

專利名稱：：T-2毒素在製備抗腫瘤藥物中的應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及T-2毒素在製備抗腫瘤藥物中的應用。
背景技術：
：目前，關於腫瘤的研究已取得較大進展，.己發展了多種治療腫瘤的各种放療、化療等方法，但各種藥物及療法均存在局限性，很難達到根治的效果，且易出現耐藥性和副作用。腫瘤死亡率仍居於各種疾病之首。據數據顯示，2006年我國有300萬人死於癌症，而且腫瘤發病率仍處於上升趨勢，並有年輕化趨勢。據資料統計在不到20年的時間裡，我國腫瘤發病率上升了69%，死亡率上升了29.4%。因此，研究新的有效的腫瘤治療藥物仍是目前腫瘤治療的主要方向。T-2毒素，分子量為466.122，分子式為C24H3409，結構式為4P，15-二乙醯氧基-8a-(3-甲氧基醯氧基)-3a-羥基-12，13-環氧單端孢黴-9-烯，其中的氧環和雙鍵是其活性部位，氧環打開或雙鍵還原均可使其毒性下降。T-2毒素為白色針狀結晶，熔點為151°C-152'C，難溶於水，易溶於極性有機溶劑，它在室溫條件下相當穩定，放置6-7年或加熱至100-12(TC1小時毒性不減。T-2毒素帶有酯基，用鹼處理後水解成相應的醇。T-2毒素是鐮刀菌所產生的單端胞黴烯族毒素中毒性最強的一種，主要作用於細胞分裂旺盛的組織器官，如胸腺、骨髓、肝、脾、淋巴結、生殖腺及胃腸黏膜等，抑制這些器官細胞蛋白質和DNA合成。此外，還發現該毒素可引起淋巴細胞中DNA單鏈的斷裂。T-2毒素還可作用於氧化磷酸化的多個部位而引起線粒體呼吸抑制。而腫瘤組織即具有細胞過度分裂的特點，因此，對腫瘤組織存在廣泛的毒性作用。目前對T-2毒素的研究主要集中於其對動物的毒性研究和致病性研究，對T-2毒素用於抗腫瘤的研究尚未發現有報導。
發明內容針對上述現有技術，本發明提供了T-2毒素的一種新用途。本發明實質上是T-2毒素在製備抗腫瘤藥物中的應用。所述T-2毒素的有效治療量為0.120mg/Kg體重。使用時，將T-2毒素製成口服製劑，口服給藥，口服製劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.5mg/kg。還可以將T-2毒素製成植入劑，通過植入給藥，植入劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0mg/kg。還可以將T-2毒素製成靜脈注射劑，靜脈注射給藥，靜脈注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。還可以將T-2毒素製成皮下注射劑，皮下注射給藥，皮下注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。還可以將T-2毒素製成肌肉注射劑，肌肉注射給藥，肌肉注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0mg/kg。本發明通過給腫瘤模型動物植入給藥、口服給藥、靜脈注射給藥、皮下注射給藥、肌肉注射給藥，觀察了其抗腫瘤效果，確定了T-2毒素的有效性及劑量，可以達到T-2毒素的安全性和有效性要求。試驗證明，T-2毒素可用於腫瘤治療。'具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步的說明實施例l:T-2毒素植入給藥的抗腫瘤作用研究1.1小鼠S，瘤細胞懸液製備選取接種Sw。實體瘤7-8d後生長良好的小鼠，急性處死；抽取腹水瘤細胞，用生理鹽水洗滌離心2次，換用RPMI-1640培養液再洗1次；將腫瘤細胞懸液放人含10%小牛血清的RPMI-1640培養液中，稀釋成1X104mr'X107mr單細胞懸液，臺盼藍染色檢査活細胞數，成活率95%以上即可接種。1.2腫瘤接種昆明小鼠40隻，每隻於左前肢腋窩皮下接種0.2mlS咖瘤細胞懸液，整個操作過程30rain內完成;24h後隨機分為4組，每組10隻，雌雄各半，分籠餵養。1.3樣品製備取10mg_20mg分子量15000-25000的聚乳酸，加一定量的有機溶劑溶解。加入T-2毒素搖勻，真空乾燥除去有機溶劑，將乾燥後的固體物立即成型，製成T-2毒素植入劑，射線滅菌。空白對照藥物僅使用10mg分子量15000-25000的聚乳酸製備。1.4藥物治療'實驗組，瘤內注射植入T-2毒素植入劑；對照組，瘤內注射植入空白藥物，每天稱體重，觀察小鼠生長情況.小鼠停藥48h後斷頸處死，剝取瘤塊稱量，並按下列公式計算抑瘤率抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重X100%。統計學處理計數資料採用非配對t檢驗，結果見表l。表1T-2毒素植入對小鼠移植瘤S18。生長的影響tableseeoriginaldocumentpage5★*P<0.01由實驗結果可見，T-2毒素植入給藥劑量為1.5mg/kg、2.5mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例2:T-2毒素靜脈注射給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S咖瘤細胞懸液製備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶於10%乙醇生理鹽水，對照組尾靜脈注射0.9%生理鹽水0.2ml，實驗組尾靜脈注射T-2毒素劑量為1.5mg/kg、2.5mg/kg。停藥24h後斷頸處死，剝取瘤塊稱量，並按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重X100L統計學處理計數資料採用非配對t檢驗，結果見表2。tableseeoriginaldocumentpage5由實驗結果可見，T-2毒素靜脈注射給藥劑量1.5mg/kg、2.5mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例3:T-2毒素經口給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S自瘤細胞懸液製備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶於10%乙醇生理鹽水，對照組灌胃0.9%生理鹽水2ml，實驗組灌胃T-2毒素，劑量分別為1.5mg/kg、2.0呢/kg。停藥48h後斷頸處死，剝取瘤塊稱量，並按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重乂10%。統計學處理計數資料採用非配對t檢驗，結果見表3。表3T-2毒素經口給藥對小鼠移植瘤S18。生長的影響tableseeoriginaldocumentpage6*好<0.01由實驗結果可見，T-2毒素經口給藥劑量為即1.5mg/kg、2.0mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例4:T-2毒素皮下注射給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S⑧瘤細胞懸液製備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶於10%乙醇生理鹽水，對照組灌胃O.將生理鹽水2ml，實驗組分別灌胃T-2毒素L5mg/kg、2.0mg/kg。停藥48h後斷頸處死，剝取瘤塊稱量，並按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重〉/對照組平均瘤重X10(m。統計學處理計數資料採用非配對t檢驗，結果見表4。tableseeoriginaldocumentpage7由實驗結果可見，T-2毒素皮下注射給藥劑量為1.5mg/kg、2.0mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。實施例5:T-2毒素肌肉注射給藥的抗腫瘤作用研究小鼠S則瘤細胞懸液製備、腫瘤接種與實施例l同，T-2毒素溶於10%乙醇生理鹽水，對照組肌肉注射0.9%生理鹽水0.lml'實驗組分別肌肉注射T-2毒素1.5mg/kg、2.0mgAg。停藥48h後斷頸處死，剝取瘤塊稱量，並按下列公式計算抑瘤率:抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重xiocm。統計學處理計數資料採用非配對t檢驗，結果見表5。tableseeoriginaldocumentpage7由實驗結果可見，T-2毒素肌肉注射給藥劑量為1.5mg/kg、2.0mg/kg對腫瘤的抑制效果較好，未導致小鼠死亡。，權利要求1.T-2毒素在製備抗腫瘤藥物中的應用。2.根據權利要求1所述的應用，其特徵在於所述T-2毒素的有效治療量為0.120mg/Kg體重。3.根據權利要求l所述的應用，其特徵在於是將T-2毒素製成口服製劑，口服製劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.5mg/kg。4.根據權利要求l所述的應用，其特徵在於是將T-2毒素製成植入劑，植入劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0mg/kg。5.根據權利要求l所述的應用，其特徵在於是將T-2毒素製成靜脈注射劑，靜脈注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。6.根據權利要求l所述的應用，其特徵在於是將T-2毒素製成皮下注射劑，皮下注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg3.5mg/kg。7.根據權利要求l所述的應用，其特徵在於是將T-2毒素製成肌肉注射劑，肌肉注射劑中T-2毒素的有效劑量為0.5mg/kg4.0tng/kg。全文摘要本發明公開了T-2毒素的一種新用途，即T-2毒素在製備抗腫瘤藥物中的應用，其有效治療量為0.1～20mg/Kg體重，使用時，可以製成口服製劑、植入劑、注射劑等。本發明通過給腫瘤模型動物植入給藥、口服給藥、靜脈注射給藥、皮下注射給藥、肌肉注射給藥，觀察了其抗腫瘤效果，確定了T-2毒素的有效性及劑量，可以達到T-2毒素的安全性和有效性要求。試驗證明，T-2毒素可用於腫瘤治療。文檔編號A61K31/35GK101491517SQ20091001462公開日2009年7月29日申請日期2009年3月3日優先權日2009年3月3日發明者厲保秋申請人:山東大學