雲南紅藥片的質量控制方法

2023-10-06 15:32:29

專利名稱：雲南紅藥片的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及到一種複方中藥的質量控制方法。
背景技術：
中國專利CN03117723.9公開了一種「雲南紅藥片及其製備方法和應用」，所述的雲南紅藥片由下述重量份數的原料製成雲南紅藥210～283，微晶纖維素5～8，蔗糖粉18～30，糊精12～15，硬脂酸鎂3，滑石粉3，羧丙基甲基纖維素60％乙醇液適量；其中所述的雲南紅藥原料組成的重量份數為三七20～30，重樓55～65，紫金龍10～15，大麻藥15～20，金鐵鎖10～15，滑葉跌打20～28，玉葡萄根20～30，制黃草烏35～40，石菖蒲5～10，西南黃芩20～30。雲南紅藥片安全無毒藥理作用強，適應症廣，可在製備治療或預防胃、十二指腸潰瘍並上消化道出血、功能性子宮出血、鎮痛、抗風溼的藥中廣泛應用。但文獻沒有公開上述紅藥片的質量控制方法。

發明內容
本發明的目的是提供一種雲南紅藥片的質量控制方法。
本發明所述的雲南紅藥片由以下重量份數的原料藥製成三七20～30，重樓55～65，紫金龍10～15，大麻藥15～20，金鐵鎖10～15，滑葉跌打20～28，玉葡萄根20～30，制黃草烏35～40，石菖蒲5～10，西南黃芩20～30。
其製法為以上十味，粉碎成細粉，過篩，混勻，加輔料適量，製成顆粒，壓片，即得(或壓片，包薄膜衣，即得)。
本發明所述的雲南紅藥片的質量控制方法，由以下步驟組成一、定性鑑別用超聲處理的方法來提取供試品中的有效成分，用重樓皂苷A、B作為對照品來鑑別重樓中的指標成分重樓皂苷A、B，用人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1作為對照品來鑑別三七中的指標成分人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1；用紫金龍為對照藥材，鑑別雲南紅藥處方中的藥材紫金龍；二、毒性成分限量用烏頭鹼作為對照品，用以控制制黃草烏中烏頭屬內相關生物鹼(酯型生物鹼)的限量；
三、定量鑑別用高效液相色譜法對其指標成分人參皂苷Rg1的含量進行測定。
在本發明所述的雲南紅藥片中，三七和重樓均為處方中的君藥，本質量控制方法是採用了超聲處理的方法來提取供試品中的有效成分，與現有的熱回流提取方法相比，更為簡便、先進和實用。並且重點鑑別三七中的指標成分人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1和重樓中的指標成分重樓皂苷A、B。由於本發明所述的雲南紅藥片中含有制黃草烏，制黃草烏中的烏頭屬內相關生物鹼(酯型生物鹼)既是治療成分，又是毒性成分，黃草烏經過炮製後使這類生物鹼雙酯類水解可生成毒性小的單酯類鹼，如繼續炮製，則變為毒性更小的胺醇類鹼，而療效不變。以烏頭鹼(有劇毒，口服0.2mg即能使人中毒，3-5mg可致死)為對照品，對制黃草烏中一類相關毒性成分的限量，是為了使臨床用藥安全有效。
本發明所述的質量控制方法是從定性和定量兩方面同時控制藥品質量，同時還增加了烏頭鹼的限量和人參皂苷Rg1的含量測定，使其質量控制方法更全面、更科學，更能保證用藥的安全有效。
本發明所述雲南紅藥片的藥效學試驗如下一.止血作用雲南紅藥片呈劑量依賴性顯著縮短小鼠及家兔全血的凝血作用時間，且縮短小鼠尾尖出血時間，提示雲南紅藥片具有明顯的止血作用。雲南紅藥片顯著提高大鼠離體子宮張力，表現出增強子宮收縮作用，有利於防治功能性子宮出血。
二.鎮痛作用在電刺激鼠尾、小鼠熱板法及醋酸扭體法等多種疼痛反應模型中，雲南紅藥片均表現出明顯的鎮痛作用，並具有量效關係。
三、消腫作用高、中劑量的雲南紅藥片(相當於臨床用量的20和10倍)明顯抑制角叉菜膠致大鼠足蹠腫脹作用，同時降低二甲苯致小鼠耳廓腫脹作用，且具一定的量-效關係；雲南紅藥片還呈劑量相關性顯著減輕大鼠氣囊肉芽腫的乾重及溼重，由此提示雲南紅藥片具有明顯的抗炎消腫作用。
出血性胃、十二指腸潰瘍及功能性子宮出血常並發不同程度的腹痛和炎症，雲南紅藥片具有較強的鎮痛和抗炎作用，這對緩解腹痛及防治黏膜炎症十分有利。
本發明的功能與主治為止血鎮痛，活血散瘀，祛風除溼。用於胃潰瘍出血，支氣管擴張咯血，功能性子宮出血，月經過多，眼底出血，眼結膜出血，鼻衄，痔瘡出血，軟組織挫傷，風溼性關節炎，風溼性腰腿痛等。口服，一次1～5片，一日2-3次。規格每片含生藥0.1-0.5g。
具體實施例方式
實施例鑑別(1)取本品粉末，置顯微鏡下觀察草酸鈣針晶成束或散在，長40～80～240μm。纖維淡黃色，稜形，壁厚，孔溝細。纖維成束或散離，壁厚，表面有縱裂紋，初生壁常與次生壁分離，兩端常斷裂成須狀，或平截。石細胞卵圓形或類方形，壁厚，溝紋明顯。
(2)取本品5-12片，研細，加乙醇5-20ml，超聲處理5-20分鐘，濾過，取濾液1-5ml，加新制的氯化鈉明膠試液1-4滴，產生白色混濁；另取濾液1-10ml，加1％三氯化鐵乙醇溶液1-6滴，顯藍色。
(3)取本品5-80片，研細，加乙醚20-120ml，超聲處理1-20分鐘，濾過，棄去乙醚液，藥渣揮幹溶劑，加正丁醇10-80ml，放置過夜，超聲處理5-50分鐘，濾過，濾液置分液漏鬥中，用氨試液洗1-6次，每次5-50ml，分取正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇0.5-10ml使溶解，作為供試品溶液。另取重樓皂苷A、B對照品，加甲醇製成每1ml各含1-6mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》附錄)試驗，吸取上述二種溶液各1～10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以硫酸乙醇溶液(1→10)，在80-120℃烘至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或螢光斑點。
(4)取鑑別(3)項的供試品溶液。另取人參皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1對照品，加甲醇製成每1ml各含1-5mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》附錄)試驗，吸取上述兩種溶液各1～10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以硫酸乙醇溶液(1→10)，在80-120℃烘至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或螢光斑點。
(5)取本品5-60片，研細，加氨試液1-10ml，氯仿20-100ml，振搖0.5-2小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇0.5-5ml使溶解，作為供試品溶液。另取紫金龍對照藥材0.1-2g，同法製備對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》附錄)試驗，吸取上述兩種溶液各1～10μl，分別點於同-以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水5-20℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色主斑點。
檢查烏頭鹼限量取本品50-200片，研細，置具塞錐形瓶中，加乙醚80-300ml，振搖5-30分鐘，加氨試液5-30ml，振搖10-60分鐘，放置0.5-3小時，分取醚層，蒸乾，加無水乙醇1-10ml使溶解，作為供試品溶液。另取烏頭鹼對照品，加無水乙醇製成每1ml含1-5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》一部附錄)試驗，吸取供試品溶液5-20μl，對照品溶液1-15μl，分別點於同一0.1-0.5％氫氧化鈉製備的氧化鋁G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上不出現斑點或出現的斑點應小於對照品的斑點。
其他(1)微生物限度檢測細菌取1∶10的供試液2ml，每1ml注入5個平板內，每個平板加0.2ml，傾注融化並冷卻至45℃的TTC營養瓊脂培養基15ml，充分混勻，凝後放置30-35℃培養箱培養48小時，計數菌落數乘以稀釋倍數報告(10個平板總數/2×稀釋倍數)黴菌、酵母菌取1∶10的供試液2ml，每1ml注入10個平板內，每個平板加0.1ml，傾注融化並冷卻至45℃的玫瑰紅鈉瓊脂培養基約15ml，充分混勻，凝後放置25-28℃培養箱培養72小時，計數菌落數乘以稀釋倍數報告(20個平板總數/2×稀釋倍數)控制菌按《中國藥典》2000年版一部附錄XIII微生物限度檢查法進行檢測。
(2)除微生物限度項外，應符合片劑項下有關的各項規定(《中國藥典》一部附錄)。
含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》附錄)測定人參皂苷Rg1的含量。
色譜條件與系統性適用性實驗用辛烷基鍵合矽膠為填充劑；乙腈-水為流動相，流速0.5-2.0ml/min，柱溫30-45℃，檢測波長203nm。理論板數按人參皂苷Rg1峰計算應不低於4000。
對照品溶液的製備精密稱取人參皂苷Rg1對照品適量，用甲醇製成每1ml含0.1-0.5mg人參皂苷Rg1的溶液，即得。
供試品溶液的製備取本品10-40片，精密稱定，研細，取細粉0.5-5g，精密稱定，加乙醚20-80ml，浸漬0.5-3小時，超聲處理1-30分鐘，濾過，棄去乙醚液，藥渣揮幹乙醚，精密加入正丁醇20-80ml，稱重，放置過夜，超聲處理5-30分鐘，，放冷，用正丁醇補足重量，混勻，濾過，精密量取續濾液10-50ml，置分液漏鬥中，用氨試液洗1-5次，每次10-50ml，放置分層，分取正丁醇液置水浴上蒸乾，殘渣用甲醇溶解並定量轉移至2-10ml量瓶中。加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。
測定法分別取對照品溶液和供試品溶液1-40μl，注入液相色譜儀，以外標法計算，即得。
本品含三七以人參皂苷Rg1(C24H72O14)計算，每片不得少於0.1-1mg。本實施例中每片不得少於0.2mg。
權利要求
1.一種雲南紅藥片的質量控制方法，其特徵在於由以下步驟組成一、定性鑑別 用超聲處理的方法來提取供試品中的有效成分，用重樓皂苷A、B作為對照品來鑑別重樓中的指標成分重樓皂苷A、B，用人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1作為對照品來鑑別三七中的指標成分人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1；用紫金龍為對照藥材，鑑別雲南紅藥處方中的藥材紫金龍；二、毒性成分限量 用烏頭鹼作為對照品，用以控制制黃草烏中烏頭屬內相關生物鹼的限量；三、定量鑑別 用高效液相色譜法對其指標成分人參皂苷Rg1的含量進行測定。
2.如權利要求1所述的雲南紅藥片的質量控制方法，其特徵在於由以下步驟組成一、定性鑑別(1)取本品粉末，置顯微鏡下觀察草酸鈣針晶成束或散在，長40～80～240μm；纖維淡黃色，稜形，壁厚，孔溝細；纖維成束或散離，壁厚，表面有縱裂紋，初生壁常與次生壁分離，兩端常斷裂成須狀，或平截；石細胞卵圓形或類方形，壁厚，溝紋明顯；(2)取本品5-12片，研細，加乙醇5-20ml，超聲處理5-20分鐘，濾過，取濾液1-5ml，加新制的氯化鈉明膠試液1-4滴，產生白色混濁；另取濾液1-10ml，加1％三氯化鐵乙醇溶液1-6滴，顯藍色；(3)取本品5-80片，研細，加乙醚20-120ml，超聲處理1-20分鐘，濾過，棄去乙醚液，藥渣揮幹溶劑，加正丁醇10-80ml，放置過夜，超聲處理5-50分鐘，濾過，濾液置分液漏鬥中，用氨試液洗1-6次，每次5-50ml，分取正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇0.5-10ml使溶解，作為供試品溶液；另取重樓皂苷A、B對照品，加甲醇製成每1ml各含1-6mg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各1～10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以氯仿—甲醇—水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以硫酸乙醇溶液1→10，在80-120℃烘至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或螢光斑點；(4)取(3)項的供試品溶液；另取人參皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1對照品，加甲醇製成每1ml各含1-5mg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1～10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以氯仿—甲醇—水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以硫酸乙醇溶液1→10，在80-120℃烘至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或螢光斑點；(5)取本品5-60片，研細，加氨試液1-10ml，氯仿20-100ml，振搖0.5-2小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇0.5-5ml使溶解，作為供試品溶液；另取紫金龍對照藥材0.1-2g，同法製備對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1～10μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水5-20℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色主斑點；二、毒性成分限量烏頭鹼限量 取本品50-200片，研細，置具塞錐形瓶中，加乙醚80-300ml，振搖5-30分鐘，加氨試液5-30ml，振搖10-60分鐘，放置0.5-3小時，分取醚層，蒸乾，加無水乙醇1-10ml使溶解，作為供試品溶液；另取烏頭鹼對照品，加無水乙醇製成每1ml含1-5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液5-20μl，對照品溶液1-15μl，分別點於同一0.1-0.5％氫氧化鈉製備的氧化鋁G薄層板上，以正己烷—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上不出現斑點或出現的斑點應小於對照品的斑點；三、定量鑑別 照高效液相色譜法測定人參皂苷Rg1的含量；色譜條件與系統性適用性實驗 用辛烷基鍵合矽膠為填充劑；乙腈—水為流動相，流速0.5-2.0ml/min，柱溫30-45℃，檢測波長203nm；理論板數按人參皂苷Rg1峰計算應不低於4000；對照品溶液的製備 精密稱取人參皂苷Rg1對照品適量，用甲醇製成每1ml含0.1-0.5mg人參皂苷Rg1的溶液，即得；供試品溶液的製備 取本品10-40片，精密稱定，研細，取細粉0.5-5g，精密稱定，加乙醚20-80ml，浸漬0.5-3小時，超聲處理1-30分鐘，濾過，棄去乙醚液，藥渣揮幹乙醚，精密加入正丁醇20-80ml，稱重，放置過夜，超聲處理5-30分鐘，，放冷，用正丁醇補足重量，混勻，濾過，精密量取續濾液10-50ml，置分液漏鬥中，用氨試液洗1-5次，每次10-50ml，放置分層，分取正丁醇液置水浴上蒸乾，殘渣用甲醇溶解並定量轉移至2-10ml量瓶中；加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；測定法 分別取對照品溶液和供試品溶液1-40μl，注入液相色譜儀，以外標法計算，即得；本品含三七以人參皂苷Rg1(C24H72O14)計算，每片不得少於0.1-1mg。
全文摘要
本發明涉及到一種複方中藥——雲南紅藥片的質量控制方法。本方法由以下步驟組成1.定性鑑別用超聲處理的方法來提取供試品中的有效成分，用重樓皂苷A、B作為對照品來鑑別重樓中的指標成分重樓皂苷A、B，用人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1作為對照品來鑑別三七中的指標成分人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1；用紫金龍為對照藥材，鑑別雲南紅藥處方中的藥材紫金龍；2.毒性成分限量用烏頭鹼作為對照品，用以控制制黃草烏中烏頭屬內相關生物鹼的限量；3.定量鑑別 用高效液相色譜法對其指標成分人參皂苷Rg1的含量進行測定。
文檔編號A61P1/04GK1872253SQ20061001085
公開日2006年12月6日 申請日期2006年4月26日 優先權日2006年4月26日
發明者周敏, 李文, 朱紅濤, 黃春球 申請人:雲南植物藥業有限公司