一種穩定的藥物脂質複合物的製作方法

2023-10-06 19:54:44 2

專利名稱：一種穩定的藥物脂質複合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，確切的說是一種穩定的藥物脂質複合物及其製備 方法。
背景技術：
難溶性藥物非腸道給藥時因不溶於水，常需將藥物製成水溶性鹽或採用非 水溶媒、複合溶媒、表面活性劑來增加藥物的溶解度，這些方法雖然能解決藥物 的溶解性問題，但通常不能使藥物的刺激性、毒性降低,反而使其增加，臨床應 用時會引起血管刺激等嚴重副作用，並且使用時有諸多限制高濃度用量時有 疼痛感，用其它靜脈注射液稀釋又產生藥物沉澱;注射速度過快，藥物會在血管 中沉澱。為使這些藥物能安全的通過靜脈注射使用，並意圖降低藥物的毒、副作用， 即解決藥物的穩定性及注射用藥的刺激性， 一般將藥物製成脂質體、微球、聚合 物微粒等製劑，但是這些藥用載體仍然有一些缺陷微球適合化學栓塞及局部注射，但不適於注射用藥；脂質體、可用於多種給藥途徑和製劑，當它作為抗癌藥物載體時可使藥物選擇性地殺傷癌細胞，提高療效，但由於磷脂雙分子膜的不 穩定性，導致藥物包裹率很低，不適於高劑量藥物，且長期放置容易聚集和滲漏， 對於一些臨床用量較高的藥物，如大環內酯類抗生素，有一定的工藝困難且難以大批量生產而限制了其應用；新近出現的以高熔點脂質材料的為載體的固體脂質 納米粒彌補了脂質體的膜不穩定性，但製備過程需要高溫、高剪切力等劇烈條件， 使其應用受到了限制。中國專利CN1253018A和CN1579546均採用生物可降解的 PLGA(乳酸-羥基乙酸共聚物)等高分子材料為載體製備聚合物納米粒，但仍存在 藥物包裹率低及藥物在聚合物材料中的不穩定和粒度難以控制等問題。顯然，這些缺陷極大地限制了這類藥物的注射劑在臨床上的使用。因此，開發一種能增加其於水溶液中穩定性、降低藥物對血管壁的刺激性、成本比較低廉 的製劑學方法，在臨床上具有重要意義。在前期專利CN1552339研究中，通過對部分大環內酯類抗生素製備膽固醇衍 生物複合物來實現降低血管刺激性的目的，進一步研究發現利用以上方法製備的 藥物脂質複合物不夠穩定，產品經稀釋之後，很快會有部分藥物游離出來，使用 時產生血管刺激。進一步研究發現，將藥物製備成膽固醇衍生物磷脂複合物後， 穩定性增強，更適於臨床使用，使用時對血管幾乎無刺激性。本專利為前期專利 CN1552339的延續。發明內容一些藥物如克拉黴素、阿奇黴素、羅紅黴素、地紅黴素、泰利黴素、萬古黴 素、去甲萬古黴素、達託黴素、米諾環素、特拉萬辛(telavancin)、兩性黴素 B、制黴菌素、大觀黴素、青蒿素、雙氫青蒿素、伊曲康唑、特比萘芬、阿黴素、 長春瑞賓、紫杉醇、多烯紫杉醇、水飛薊素、水飛薊賓，這些藥物本身不溶於水， 為製成適於注射使用的液體製劑，通常是將藥物與酸或鹼成鹽，進而溶於水中； 或使用有機溶劑來增加藥物在水中的溶解度。但是，這些藥物通常又存在血管刺 激、腎毒性等問題，無法通過增溶來解決，本發明目的是為了克服上述已有技術 存在的缺陷，提供一種穩定的脂質複合物及其製備方法。該複合物是藥物與兩性 分子膽固醇的衍生物和磷脂類通過分子間相互作用形成複合物，該複合物以顆 粒的形式均勻而穩定地分散於水中，該分散體系可以稀釋、濃縮、凍幹以及凍幹 後再溶解和稀釋，均呈現穩定、均勻的分散特徵；該複合物的製備是通過將藥物 與膽固醇的衍生物和磷脂類共同溶解於同一溶劑體系中，使藥物分子與膽固醇的 衍生物和磷脂類分子充分作用，形成複合物，然後將此溶液滴加入水或緩衝液中 形成複合物顆粒，或除去溶劑後，再將複合物分散於水或緩衝液中。為了便於保 存，這些複合物製劑可使用凍幹或噴霧乾燥等方法製成固體製劑保存。膽固醇是一親脂性分子，將膽固醇分子衍生後可形成一親水性基團而成為兩 性分子，其兩性化方法是將分子中的羥基衍生成鹽，通常可製成硫酸鹽、磷酸鹽 及磺酸鹽等。膽固醇衍生物具有無毒、無刺激性、在體液中存在的特點。在水中 一些藥物分子與兩性化的膽固醇分子通過親脂性部分的疏水力以及可能也通過 親水性部分的極性親和力，而形成按照一定分子摩爾數比的多分子複合物；磷脂是由一親水的頭部和兩個疏水的尾部組成，頭部由磷酸骨架與水溶性分子如膽 鹼、絲氨酸等酯化而成，可以溶於水，向下延伸的兩條尾部是脂肪酸鏈，每條由 10-20個炭原子和0-6個雙鍵組成，不溶於水，磷脂的兩親性及鏈式結構可與藥物 膽固醇衍生物複合物的親水和疏水部分結合產生交聯作用，增加其穩定性，減少 藥物的滲漏。所形成的這種複合物以膠體的形式均勻而穩定地分散於水中，可提 高藥物的穩定性，增加藥物的溶解度，降低藥物的刺激性。在藥物與膽固醇衍生物形成的複合物中加入磷脂類成份，可以使形成的複合 物更加穩定，這些磷脂直接參與或在複合物顆粒表面形成膜來保護複合物。對於 一些不能與磷脂類直接形成複合物的藥物，通過膽固醇衍生物即可形成脂質複合 物，同時保證了複合物的穩定性，也避免了膽固醇衍生物濃度高導致的溶血。對 於一些藥物如大環內酯類，雖然可以與膽固醇衍生物形成複合物，但由於形成的 複合物在體液中不夠穩定，且使膽固醇衍生物在體液中濃度增加，形成過飽和， 易導致溶血，同時克服血管刺激作用不夠強，通過加入磷脂形成複合物可解決這 些問題。膽固醇衍生物中膽固醇硫酸鈉、膽固醇磷酸鈉、膽固醇磺酸鈉是比較安 全且可用於製備複合物的衍生物，磷脂類中蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、二硬酯醯 膽鹼、二棕櫚醯膽鹼、磷脂醯甘油、磷脂酸、磷脂醯肌醇，為常用於製備脂質體 及脂質複合物的材料。在製備藥物與膽固醇衍生物和磷脂類的複合物時，藥物與 膽固醇衍生物須在一定比例範圍內方可形成複合物，通常比例為膽固醇衍生物和 藥物分子的摩爾比為1:5 20:1，其中優選的比例為1:3 3:1。超出此比例較難 形成，對於磷脂類的加入量也應選擇合適的比例，磷脂加入的量少，不足以增加 複合物穩定性，加入過多成本高，也會析出，實驗證實比例應為磷脂分子與藥物 分子的摩爾比例為0. 1:1 20:1，其中優選的比例為0. 1:1 3:1，對於克拉黴素 在藥物膽固醇硫酸鈉卵磷脂比例為0. 5g:0. 4g:lg時形成的複合物較穩定。在制 備這些複合物時，藥物、磷脂類、膽固醇衍生物需溶解於同一溶劑體系時，方可 形成複合物，由於三者通常不能同時溶於同一溶劑，如膽固醇硫酸鈉易溶於 DMSO，而卵磷脂易溶於乙醇，故需分別溶解或選擇混合溶劑，溶劑應選DMSO、 DMF、四氫呋喃、甲醇、乙醇的一種或幾種混合。將溶解於同一溶劑體系的藥物 與脂質體滴入緩衝液中，以複合物形式析出，或直接除去溶劑形成複合物，進一 步分散於緩衝液中。製備時，最好選用緩衝液，尤其是P服、H7.5的中性緩衝液作為複合物的分散體系。對於克拉黴素等大環內酯類抗生素及一些臨床使用劑量高的抗生素如萬古 黴素、米諾環素、兩性黴素和一些抗癌藥如長春瑞濱等，由於劑量大等原因，使 用脂質體較困難，單獨使用磷脂類又較難形成複合物，選膽固醇衍生物與磷脂類 共同使用製備複合物具有明顯的臨床意義。所製備的複合物可以以液體形式存在，但最好是採用凍幹製成凍幹製劑，這 樣可以使製成的製劑更加穩定，易於保存。為臨床需要及製劑要求，可在製劑中 加入凍幹支撐劑等輔料，以滿足製劑及臨床需要。


圖1是實施例8的兩種藥物複合物釋放度曲線 具體實施方案下面給出本發明的穩定的脂質複合物的部份實施例，這些實施例不限制本發 明範圍。實施例1:配方膽固醇醯硫酸鈉 0.35g(約0.71mmo1)克拉黴素 0. 5g (約0. 66mmo1)蛋黃卵磷脂 0. 75g (約0. 96mmo1)分別按配方量稱取膽固醇硫酸鈉與克拉黴素置100ml的燒杯中，加入二甲基 亞碸15ml， 45'C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取蛋黃卵磷脂置50ml 燒杯中，加入乙醇12ml，不斷攪拌使溶解，45。C水浴保溫。將磷脂的乙醇溶液 緩緩倒入上述二甲基亞碸溶液中，輕輕攪拌使混合均勻，於45'C水浴保溫備用。用注射器吸取上述藥物溶液，以5ml/min的速度pH7.2tris緩衝液中，直至所有 的藥物溶液注入完畢即得克拉黴素脂質複合物混懸液。注入過程中，緩衝液應輕 輕攪拌以加速有機溶劑的擴散。將上述藥物複合物混懸液中的有機溶劑和少量的游離藥物除去，濃縮。在此 過程中加入適量乳糖，使最終的藥物複合物混懸液中乳糖的濃度為lg/10ml。最 終藥物濃度為15mg/ml，收率85°/。上下。將此藥物複合物混懸液經0. 22陶濾膜過 濾除菌，冷凍乾燥,得藥物複合物凍幹品，加注射用水復溶得(約0. 71腿01)略帶 藍色乳光的藥物複合物混懸液,經馬爾文雷射粒度儀測定，平均粒徑105nm，粒徑 分布均勻。實施例2:配方:膽固醇醯硫酸鈉膽固醇醯磷酸鈉蛋黃卵磷脂 大豆磷脂0. 2g(約0. 41腸1) 0. 15g(約0. 291腿o1) 0. 5g(約0. 67,1) 0. 5g(約0. 64mmo1) 0. 25g(約0. 32腸1)分別按配方量稱取膽固醇硫酸鈉、膽固醇磷酸鈉、克拉黴素置100ml的燒 杯中，加入二甲基亞碸15ml， 45。C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱 取蛋黃卵磷脂和大豆磷脂置50ml燒杯中，加入乙醇12ml，不斷攪拌使溶解，45 'C水浴保溫。將磷脂的乙醇溶液緩緩倒入上述二甲基亞碸溶液中，輕輕攪拌使混 合均勻，於45。C水浴保溫備用。用注射器吸取上述藥物溶液，以5ml/min的速 度注入pH7. 2緩衝液中，直至所有的藥物溶液注入完畢即得克拉黴素脂質複合物 混懸液。注入過程中，緩衝液應輕輕攪拌以加速有機溶劑的擴散。將上述藥物複合物混懸液中的有機溶劑和少量的游離藥物除去，濃縮。在此過程中加入適量乳糖，使最終的藥物複合物混懸液中乳糖的濃度為lg/10ml。最 終藥物濃度為15mg/ml,收率85%上下。將此藥物複合物混懸液經0. 22Mm濾膜過 濾滅菌,冷凍乾燥，得藥物複合物凍幹品，加注射用水復溶得略帶藍色乳光的藥物 複合物混懸液，經馬爾文雷射粒度儀測定,平均粒徑101nm，粒徑分布均勻。實施例3:配方兩性黴素B 0. 5g (約0. 54mmo1)膽固醇磷酸鈉 0.3g(約0.58mmo1)蛋黃卵磷脂 0. 5g (約0. 64mmo1)按配方量稱取兩性黴素B和膽固醇磷酸鈉置100ml的燒杯中，加入二甲基亞 碸15ml,於45'C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取蛋黃卵磷脂溶於 10ml微熱的乙醇中，緩緩加入上述藥物的二甲基亞碸溶液中，攪拌使混合均勻。 45。C水浴保溫備用。用注射器吸取上述藥物溶液，緩緩注入pH7.2的緩衝液中， 此過程應緩慢攪拌以加速有機相的擴散。藥物溶液注入完畢即得兩性黴素B脂質 複合物混懸液，將有機溶劑和少量的游離藥物除去，濃縮。最終藥物濃度為 10mg/ml的略帶藍色乳光的混懸液。經馬爾文雷射粒度儀測定,藥物複合物微粒 的平均粒徑為112nm，粒徑分布均勻。實施例4:配方兩性黴素B 0. 5g (約0. 54mrao1)膽固醇硫酸鈉 0. 26g(約0. 53誦o1)蛋黃卵磷脂 2g(約2.5mmo1)按配方量稱取兩性黴素B和膽固醇硫酸鈉置100ml的燒杯中，加入15ml 二甲 基亞碸，於45'C水浴保溫，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取蛋黃卵磷脂置50ml 燒杯中，加30ml乙醇使溶解，於45。C水浴保溫。將上述二甲基亞碸溶液緩緩加入 磷脂的乙醇溶液中，攪拌使混合均勻，用注射器吸取上述藥物溶液以5ml/min的 速度注入pH7. 2的緩衝液中，注入完畢即得藥物複合物混懸液，將有機溶劑和少 量的游離藥物除去,濃縮。加入乳糖適量,使最終乳糖濃度為lg/10ml，藥物濃度 為10mg/min。將此藥物複合物混懸液經0. 22陶濾膜過濾除菌，冷凍乾燥得兩性 黴素B凍幹品。加注射用水復溶得淡白色乳光的藥物複合物混懸液，經馬爾文激 光粒度儀測定，藥物複合物微粒的平均粒徑為127nm，粒徑分布均勻。實施例5:配方羅紅黴素 0. 5g(約0. 59mmo1)膽固醇硫酸鈉 1. 5g(約3. lmmol)磷脂醯膽鹼 0. 2g (約0. 64mmo1)按配方量稱取羅紅黴素和膽固醇硫酸鈉置100ml燒杯中，加DMS050ml，於45 。C水浴放置,不斷攪拌使溶解。另按配方量稱取磷脂醯膽鹼溶於少量乙醇中，於 45'C水浴保溫並與上述藥物的甲醇溶液混合均勻。將此溶液，在pH7. 2的緩衝液 分散，得顆粒大小平均值為95nm的藥物複合物懸浮液，除去有機溶劑。加入適量 乳糖，冷凍乾燥，形成白色塊狀凍幹品，使用時加入注射用水復溶。實施例6:配方膽固醇磺酸鈉 0.3g(約0.61mrao1)蛋黃卵磷脂 2g(約2.5mmo1)紫杉醇 0. 5g(約0. 58mmol)按配方量稱取膽固醇硫酸鈉和紫杉醇置100ml燒杯中，加入甲醇適量，水浴 加熱，不斷攪拌使溶解；另按配方量稱取二硬脂醯膽鹼，加入適量的乙醇，水浴 保溫備用。將上述兩種溶液混合均勻，在pH7. 2的緩衝液中分散製得平均粒徑為 llOnm的藥物複合物混懸液。加入適量乳糖，冷凍乾燥即得紫杉醇複合物凍幹品。實施例7:將0. 5g膽固醇硫酸鈉，0. 6g青蒿素和0. 2g磷脂醯膽鹼加熱溶於乙醇中， 減壓除去乙醇，所得固體在pH7.5的緩衝液中分散，製成含藥濃度為10rag/ml. 平均粒徑為106nm的均勻分散體，加入乳糖適量，冷凍乾燥。實施例8:穩定性試驗分別取克拉黴素膽固醇硫酸鈉複合物(克拉黴素與膽固醇硫酸鈉的摩爾比為 1: 1)混懸液和克拉黴素膽固醇硫酸鈉磷脂複合物混懸液(實施例l)適量，以 葡萄糖輸液為釋放介質，槳法，溫度為37。C士 0. 5°C,轉速為5 0 r/min.分別於 15 min， 30 min, lh, 2h, 4h, 8h， 12， 24， 36， 48， 60， 72h取樣0.5mL (同 時補加0. 5mL釋放介質)置超濾膜中，於3000r/min條件下離心10min。取續濾 液20W進液相色譜儀。計算不同時間點藥物的累積百分釋放量。結果見說明書附圖l由圖1可見，克拉黴素膽固醇硫酸鈉磷脂複合物與克拉黴素膽固醇硫酸鈉復 合物相比，藥物滲漏減慢，穩定性增強。實施例9:大鼠腳掌刺激性試驗取大鼠40隻，分為4組，每組10隻，雌雄各半，分別腳掌注射10mg/mL克拉黴 素膽固醇硫酸鈉(克拉黴素與膽固醇硫酸鈉的摩爾比為l: 1)複合物混懸液、 10mg/mL克拉黴素膽固醇硫酸鈉蛋黃卵磷脂複合物混懸液(實施例l) 、 lOmg/mL 乳糖酸克拉黴素注射液、0.9X氯化鈉溶液0.05mL。記錄各組大鼠10分鐘內舔腳掌的平均次數和平均總時間，結果如下表所示大鼠腳掌刺激性試驗結果試驗組平均次數總時間(s)乳糖酸克拉黴素25223克拉黴素膽固醇硫酸鈉複合物1282克拉黴素膽固醇硫酸鹽蛋黃卵磷736脂複合物0.9%氯化鈉421結果表明，克拉黴素膽固醇硫酸鈉磷脂複合物與克拉黴素膽固醇硫酸鈉複合物相比，刺激性降低，基本與0.9%氯化鈉相當。說明磷脂增加了克拉黴素膽固 醇硫酸鈉的穩定性，避免了因藥物滲漏而導致的配方刺激性的產生。
權利要求
1.一種穩定的藥物脂質複合物，其特徵在於將在生理條件下不溶或微溶於水的藥物分子與膽固醇衍生物和磷脂類的兩性分子形成脂質複合物，使用時該複合物以微粒形式穩定、均勻地分散於水或緩衝液中。
2. 如權利要求1所述的穩定的藥物脂質複合物，兩性分子中膽固醇衍生物包括 膽固醇硫酸鈉、膽固醇磷酸鈉、膽固醇磺酸鈉中的一種或兩種以上混合使用； 磷脂類包括蛋黃卵磷脂、大豆磷脂、二硬酯醯膽鹼、二棕櫚醯膽鹼、磷脂醯甘 油、磷脂酸、磷脂醯肌醇的一種或兩種以上混合使用。
3. 如權利要求1所述的穩定的藥物脂質複合物，膽固醇衍生物和藥物分子的摩 爾比為1: 5 10:1;磷脂分子與藥物分子的摩爾比例為0， 1: l 10:1 。
4. 如權利要求1所述的穩定的藥物脂質複合物，其中藥物為克拉黴素、阿奇黴 素、羅紅黴素、地紅黴素、泰利黴素、萬古黴素、去甲萬古黴素、達託黴素、 米諾環素、特拉萬辛、兩性黴素B、制黴菌素、大觀黴素、青蒿素、雙氫青蒿 素、伊曲康唑、特比萘芬、阿黴素、長春瑞賓、紫杉醇、多烯紫杉醇、水飛薊 素、水飛薊賓的一種。
5. 如權利要求1所述的穩定的藥物脂質複合物，可以根據需要和許可程度製成 不同規格、形態的製劑；這些形態的製劑包括但不限制於液體製劑、冰凍保存 製劑、不同濃度的濃縮或稀釋製劑、乾燥成粉末製劑。
6. 如權利要求1所述的穩定的藥物脂質複合物，可以根據具體製劑的需要加入 一種或幾種藥物輔料。
全文摘要
一種穩定的藥物脂質複合物，將在生理條件下不溶或微溶於水的藥物分子與膽固醇衍生物和磷脂類的兩性分子形成脂質複合物，進一步製成藥物製劑。
文檔編號A61K9/127GK101322690SQ20071011087
公開日2008年12月17日 申請日期2007年6月12日 優先權日2007年6月12日
發明者關世俠, 李海剛 申請人:廣州瑞濟生物技術有限公司