一種色譜法測定樣品中揮發性麻醉藥濃度的方法
2023-10-11 17:24:04
專利名稱：一種色譜法測定樣品中揮發性麻醉藥濃度的方法
技術領域：
本發明屬於生物醫學技術領域，具體涉及一種用自動頂空氣相色譜法測定樣品中揮發性麻醉藥濃度的方法。
背景技術：
揮發性麻醉藥與一般靜脈麻醉藥最後目的完全一樣，但在吸入途徑給藥時，首先必須在麻醉環路系統內達到一定濃度以後，經過肺以濃度分壓差吸收入血中，再經循環系統分布至周圍組織，到達中樞神經系統發揮其麻醉作用，所以說測定血液中揮發性麻醉藥如甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷和地氟烷等的血藥濃度是非常關鍵的指標。劉進、劉明政等(二次平衡法測定吸入麻醉藥液/氣分配係數.《中華麻醉藥學雜誌》，1996，16 (12) 604 607.)公開了一種用注射器頂空二次平衡法測定吸入麻醉藥濃度的方法。該方法首先需配製及校正麻醉藥標準氣如異氟烷標準氣，過程包括1、用注射器抽取血液5 7ml ;2、在37°C恆溫水浴條件下振搖水浴1小時使異氟烷在血、氣兩相中達到第一次平衡(共約2. 5小時)；3、在37°C恆溫水浴條件下振搖水浴使異氟烷在血、氣兩相中達到第二次平衡(1 1. 5小時)；4、通過氣相色譜儀測定兩次平衡的氣相中的異氟烷濃度， 記錄兩次平衡前後注射器內氣相和液相的體積；5、計算血中異氟烷濃度。該法測量準確，同時可計算出麻醉藥的液/氣分配係數，但樣品前處理過程耗時較長，兩次平衡時間累計3. 5小時，完全測定一個樣品需時4小時，測定效率低，且在實際運用過程中，血制樣品無法在注射器內長久儲存，血液變性後會對測定的結果有影響，故該方法不適合進行大批量樣品的測定處理，所以無法滿足臨床監測快速測定和批量處理的需要。
發明內容
本發明提供了一種用自動頂空氣相色譜法測定揮發性麻醉藥濃度的方法。該方法克服了現有技術中標準品製備及樣品處理繁瑣、測定時間長、存儲不便的缺點，提供了一種簡便，快速，高效，準確，且能廣泛處理大批樣品的揮發性麻醉藥濃度測定的方法及在臨床監測中的應用。本發明的目的是提供一種用自動頂空氣相色譜法測定樣品中揮發性麻醉藥濃度的方法。具體地說，本發明提供了一種測定樣品中揮發性麻醉藥濃度的方法，其採用自動頂空氣相色譜法對包含揮發性麻醉藥的樣品進行檢測，這裡，所述的樣品為包含揮發性麻醉藥的溶液，可選自含有揮發性麻醉藥的有機溶劑和/或無機溶劑的溶液，或者離體的生物學樣品，例如血液、尿液或組織液。在本發明的實施方案中，所述的揮發性麻醉藥選自甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷或地氟烷。在本發明的實施方案中，所述的自動頂空氣相色譜法包括採用自動頂空進樣器進樣。在本發明的優選實施方案中，本發明提供了一種測定樣品中揮發性麻醉藥濃度方法，其採用自動頂空氣相色譜法，包括如下步驟(1)色譜條件與系統適用性試驗實驗儀器為Agilent6890N氣相色譜儀；色譜柱為極性毛細管柱，採用升序升溫； 進樣口溫度為100 200°C，檢測器為氫火焰離子化檢測器(FID)，檢查溫度200 300°C ； 載氣為氮氣、氫氣或氦氣；待測揮發性麻醉藥的色譜峰與雜質峰分離度大於2. 5 ；自動頂空進樣，85°C保溫30min，定量環與傳輸線溫度90 150°C，進樣量0. 5 Iml ；(2)標準曲線溶液的製備取揮發性麻醉藥適量，精密稱定，加溶劑溶解並稀釋製成儲備液，並用儲備液稀釋成6 10份不同濃度溶液作為標準曲線溶液，分別取0. 5 Iml置頂空瓶，封瓶即得；(3)供試品溶液的製備取待測溶液0. 5 Iml置頂空瓶，封瓶即得；(4)測定分別取標準曲線溶液與供試品溶液，用自動頂空進樣器注入氣相色譜儀測定、計算，即得。在本發明的實施方案中，其中，步驟(1)中色譜柱為極性毛細管柱，優選DB-WAX等以聚乙二醇為填充柱的毛細管柱。在本發明的實施方案中，其中，步驟(1)中優選進樣口溫度為100 200°C，檢測器為氫火焰離子化檢測器(FID)，檢測器溫度200 300°C ；採用升序升溫；優選起始40 60°C維持2 lOmin，以5 10°C /min速度升至150 200°C，維持2 lOmin。在本發明的實施方案中，其中，步驟(1)中優選的載氣為氮氣，流速為1.0 3. Oml/min，分流比為 1 1 1 100。在本發明的實施方案中，其中，步驟O)中溶劑優選為水或含有體積比為10 100%的N，N-二甲基甲醯胺或二甲基亞碸的水溶液。在本發明的實施方案中，其中，步驟⑷中優選的頂空預熱條件為70 90°C保溫 20 30min。本發明提供的檢測方法，用自動頂空氣相色譜法測定含有揮發性麻醉藥樣品的標準值和測量值(即標準曲線和樣品曲線)，計算出樣品中揮發性麻醉藥濃度，及該方法在臨床監測和實驗室分析中的應用本發明的有益技術效果本發明為揮發性麻醉藥的濃度測定提供了簡便、快速，準確的通用方法。1、極大簡化了樣品處理過程，僅需在試驗中抽取0. 5 Iml血液或其他液體樣品至頂空瓶中壓蓋密封即可。2、標準曲線由配製揮發性麻醉藥標準氣該成較易稀釋配製的標準液，結果同樣精確。3、極大縮短了樣品檢測時間，如用注射器二次平衡做一個樣品最低需耗時3小時，且一天同時測定樣品受水浴箱限制不可能批量進行，而用自動頂空進樣一天可測定 30 40個樣品，且完全自動測定無需手動進樣。4、使用頂空自動進樣，可以避免生物樣品帶入的雜質對分析造成幹擾，減少對色譜柱及進樣口的汙染從而確保分析結果的準確無誤。
5、經穩定性考察，揮發性麻醉藥如異氟烷能在頂空瓶中可保存7天之久，儲存方便，結果見表1。表1異氟烷樣品常溫25°C條件下15天留樣穩定性考察
權利要求
1.一種樣品中揮發性麻醉藥濃度的測定方法，其採用自動頂空氣相色譜法對包含揮發性麻醉藥的樣品進行檢測，這裡，所述的樣品為包含揮發性麻醉藥的溶液，選自含有揮發性麻醉藥的有機溶劑和/或無機溶劑的溶液，或者離體的生物學樣品。
2.根據權利要求1所述的測定方法，其中，揮發性麻醉藥選自甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷或地氟烷。
3.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述離體的生物學樣品，例如血液、尿液或組織液。
4.根據權利要求1所述的測定方法，其中，所述的自動頂空氣相色譜法包括採用自動頂空進樣器進樣。
5.根據權利要求1至4中任一權利要求所述的測定方法，包括以下步驟(1)色譜條件與系統適用性試驗檢測儀為氣相色譜儀；色譜柱為極性毛細管柱，採用程序升溫；進樣口溫度為100 2000C，檢測器為氫火焰離子化檢測器，檢查溫度200 300°C，載氣為氮氣、氫氣或氦氣；待測揮發性麻醉藥的色譜峰與雜質峰分離度應大於2. 5 ；自動頂空進樣；(2)標準曲線溶液的製備取揮發性麻醉藥適量，精密稱定，加溶劑溶解並稀釋製成儲備液，並用儲備液稀釋成 6 10份不同濃度溶液作為標準曲線溶液，分別取0. 5 Iml置頂空瓶，封瓶即得；(3)供試品溶液的製備取待測溶液置頂空瓶，封瓶即得；(4)測定分別取標準曲線溶液與供試品溶液，用自動頂空進樣器注入氣相色譜儀測定、計算，即得。
6.根據權利要求5所述的測定方法，其中，步驟(1)中色譜柱為極性毛細管柱，優選 DB-WAX等以聚乙二醇為填充柱的毛細管柱。
7.根據權利要求5所述的檢測方法，其中，步驟⑴中優選進樣口溫度為100 200°C， 檢測器為氫火焰離子化檢測器，檢測器溫度200 300°C ；採用升序升溫；優選起始40 60°C維持2 lOmin，以5 10°C /min速度升至150 200°C，維持2 lOmin。
8.根據權利要求5所述的檢測方法，其中，步驟(1)中載氣為氮氣，流速為1.0 3. Oml/min，分流比為 1 1 1 100。
9.根據權利要求5所述的檢測方法，其中，步驟O)中溶劑選自水或含有體積比為 10 100% N, N-二甲基甲醯胺或者二甲基亞碸的水溶液。
10.根據權利要求5所述的檢測方法，其中，步驟中頂空預熱方式為70 90°C保溫 20 30min。
全文摘要
本發明公開了一種自動頂空氣相色譜法測定揮發性麻醉藥濃度的方法。該方法適用於揮發性麻醉藥，例如甲氧氟烷、安氟烷、異氟烷、七氟烷和地氟烷在樣品中的濃度測定。樣品可以為含有待測物的溶液，也可以為含有待測物的離體生物學樣品，如血液、尿液、組織液中。該方法簡便、快速、準確，適用於實驗室樣品測定分析，也適用臨床監測大量樣品結果測定。
文檔編號G01N30/68GK102175780SQ20101060056
公開日2011年9月7日 申請日期2010年12月16日 優先權日2010年12月16日
發明者劉進, 張文勝, 易斌, 羅楠, 袁瑛 申請人:宜昌人福藥業有限責任公司