一種厚樸生物鹼及其提取方法和用途的製作方法

2023-10-11 17:07:54

專利名稱：一種厚樸生物鹼及其提取方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於有機化學技術領域，涉及一種厚樸活性成分生物鹼的提取方法及其作 為α-葡萄糖苷酶抑制劑的應用。
背景技術：
糖尿病是一種以糖代謝紊亂為主要症狀群的漸進性的內分泌病，基本病理生理是 體內胰島素分泌功能相對不足或絕對不足或胰島素受體功能異常等原因，引起代謝紊亂， 包括糖、蛋白質、脂肪、水及電解質等。一般表現為高血糖、糖尿及高脂血症，嚴重病例可發 生酮性酸血症，甚至循環衰減和昏迷而危及生命。糖尿病共分四類，其中最多的II型糖尿 病佔糖尿病總數的90-95%。糖尿病的治療方法主要有直接補充胰島素、刺激胰島分泌胰島 素、增加對胰島素的利用、調節餐後血糖等方法。通過抑制小腸的α-葡萄糖苷酶活性就可 以降低餐後血糖的峰值，減少高血糖對機體的損害，能有效預防糖尿病的併發症。目前機理 為抑制α -葡萄糖苷酶活性的藥物有阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖，市場呈上升趨勢。厚樸是一種常用中藥，為木蘭科木蘭屬植物凹葉厚樸(Magnolia officinalis Rehd.et Wils)的幹皮、枝皮及根皮。分布較廣，產於浙江、江西湖南、湖北、四川、雲南、 貴州、陝西、甘肅等地。其性溫，味苦、辛，具有溫中下氣，化溼引滯功效，用於消炎滅菌、胸 腹脹滿、腸梗阻、痰飲喘滿等症，在臨床應用上佔有十分重要的位置。厚樸中已發現的化 學成分主要有厚樸酚、和厚樸酚、揮髮油和生物鹼，其厚樸酚與和厚樸酚是主要的成分， 也是目前研究得比較多的成分。其抑菌活性可用於口腔護理，如公開號為CN101321513， CN101321560, CN1723011, CN1318362, CN101222909 的專利報導了在口腔方面的應用，到目 前為止，還未見關於厚樸中具有α -葡萄糖苷酶抑制活性成分的報導。本發明對厚樸提取物的α -葡萄糖苷酶抑制活性研究，通過活性追蹤發現一類生 物鹼具有較強的α-葡萄糖苷酶抑制活性，波譜分析鑑定為一類異喹啉類生物鹼，並對其 提取工藝進行了研究。根據其對α-葡萄糖苷酶的抑制活性，這類生物鹼可能在防治糖尿 病及其併發症、肥胖和治療病毒性感冒方面有較好的應用。

發明內容
本發明首次從分布廣、資源豐富的厚樸中發現了具有抑制α -葡萄糖苷酶的活性 成分生物鹼。所採取的方法是利用具有離子交換功能的離子交換樹脂或大孔陽離子交換樹 脂作為吸附劑來選擇性吸附有效成分生物鹼，也可以用溶劑萃取的方法。本發明提取工藝 簡單，成本低，無環境汙染，安全無毒，利於規模化提取生產。得到的總生物鹼可作為α-葡 萄糖苷酶抑制劑，可能在防治糖尿病及其併發症、肥胖和治療病毒性感冒方面有較好的應 用。為實現上述目的，本發明採用了以下技術方案1)提取以厚樸的根或/和皮為原料，用酸水溶液常溫或加熱提取；2)吸附提取液通過強酸型或弱酸型陽離子交換樹脂，活性成分被吸附在樹脂上；3)洗脫先用水洗樹脂柱，然後用氨水/醇溶液洗脫，濃縮乾燥得到總生物鹼。提取用的溶液中酸的濃度範圍介於0.01-1%，提取液用量的總體積為厚樸原料重 量的5-15倍，加熱提取溫度為30-100°C;洗脫用的乙醇或甲醇的濃度，其範圍介於5-99%， 氨的含量介於0. 5% -15%;鹼化用的鹼為氨水或氫氧化鈉或氫氧化鉀或氫氧化鈣或碳酸鈉 或碳酸鉀。所用的強酸型或弱酸型離子交換樹脂，可採用只具有離子交換功能的樹脂如 001 X 7，或具有吸附和交換功能的大孔強酸型陽離子交換樹脂，如D72樹脂，也可使用弱酸 型大孔交換樹脂。總生物鹼中主要成分為木蘭花鹼，鵝掌楸鹼，蕃荔枝鹼，羅默鹼和Lysicamine等 組成。總生物鹼可直接應用，或者加入可食用的輔料，如澱粉、微晶纖維素、糊精、蔗糖、乳 糖、維生素C、檸檬酸和亞硫酸鈉中的任意一種或幾種，製備成為片劑、膠囊劑或衝劑等，用 作α-葡萄糖苷酶抑制劑，作為相關的藥品或功效食品使用。根據α-葡萄糖苷酶抑制劑 的特點，可能用於防治糖尿病及其併發症、防治肥胖症和治療病毒性感冒。本發明的特點在於，首次從資源巨大的厚樸中發現了具有α-葡萄糖苷酶抑制活 性的生物鹼，提取製備工藝簡單，易於操作，成本低。
具體實施例方式下面通過實施例詳細說明本發明的技術方案，但是不局限於所列舉的例子。實施例1厚樸樹皮10kg，粉碎後用60L 0. 05%硫酸水滲漉提取。提取液通過D72大孔陽離 子交換樹脂柱(柱體積6L)，20L去離子水洗後用的氨/乙醇水(含乙醇70% )溶液 30L洗脫。洗脫液蒸乾，得到總生物鹼30g，收率0.3%。取總鹼4. 0g，通過矽膠柱層析(氯仿_甲醇梯度洗脫)分離純化得到五個化 合物，通過質譜、核磁共振碳譜和氫譜鑑定為木蘭花鹼，鵝掌楸鹼，蕃荔枝鹼，羅默鹼和 Lysicamine0取厚樸總鹼50g，加入澱粉3000g，微晶纖維素30g，以50%乙醇制粒，壓片得片劑， 每片0. 6g，其中含總鹼10mg，相當於厚樸皮2g。上述厚樸提取物的α -葡萄糖苷酶抑制活性的測試α -葡萄糖苷酶溶液用Wister大鼠的空腸製備，然後測定蛋白濃度。將厚樸提 取物用水配製成0. 05g/ml的溶液備用。樣品組加空腸勻漿50 μ 1、蔗糖50 μ 1、備檢樣品 50 μ 1 (終濃度為5 μ g/ μ 1)、PBS 50 μ 1。陽性對照用拜唐蘋，終濃度為0. 5 μ g/ μ 1。另外設 置一個空白組，其中的糖苷酶被高溫滅活。標準組其他成分相同，只是不加樣品或拜糖蘋。 上述每組平行作7管，準備完畢後37°C孵育25分鐘。孵育結束後加入0. lmol/L的Na2CO3 200 μ 1中止反應。每管取樣50 μ 1，按血糖檢測試劑盒提供的方法測定所生成葡萄糖的量。
抑制率=〔1-(拜糖蘋組葡萄糖濃度-空白組葡萄糖濃度)/ (標準組葡萄糖濃 度-空白組葡萄糖濃度)〕X100% 根據上面公式，計算得到實施例1各化合物的α -葡萄糖苷酶抑制率分別為番荔 枝鹼(60% )，鵝掌楸鹼(46% )，羅默鹼(51% ) ,Lysicamine (49% )，木蘭花鹼為(51% )。總鹼為65%。
權利要求
一種厚樸生物鹼，其特徵是包含木蘭花鹼，鵝掌楸鹼，蕃荔枝鹼，羅默鹼和Lysicamine的總生物鹼。
2.權利要求1所述的厚樸生物鹼的提取方法，包括如下步驟1)提取以厚樸樹皮為原料，用酸水溶液常溫或加熱提取；2)吸附提取液通過強酸型或弱酸型陽離子交換樹脂，活性成分被吸附在樹脂上；3)洗脫先用水洗樹脂柱，然後用氨水/醇溶液洗脫，濃縮乾燥得到厚樸總生物鹼。
3.根據權利要求2所述的厚樸生物鹼的提取方法，其特徵是提取用的溶液中酸的濃 度範圍介於0. 01-1 %，提取液用量的總體積為厚樸原料重量的5-15倍，加熱提取溫度為 30-100°C ；洗脫用的乙醇或甲醇的濃度，其範圍介於5-99%，氨的含量介於0. 5% -15% ；鹼 化用的鹼為氨水或氫氧化鈉或氫氧化鉀或氫氧化鈣或碳酸鈉或碳酸鉀。
4.根據權利要求2所述的厚樸生物鹼的提取方法，其特徵是所用的強酸型或弱酸型 陽離子交換樹脂為只具有離子交換功能的樹脂如001 X 7，或具有吸附和交換功能的大孔強 酸型陽離子交換樹脂如D72樹脂或弱酸型大孔交換樹脂。
5.權利要求1所述的厚樸生物鹼在生產與α-葡萄糖苷酶抑制劑相關的藥物或食品制 造中的用途。
6.權利要求5所述的厚樸生物鹼的用途，其特徵是直接應用或者加入可食用的澱粉 或/和微晶纖維素或/和糊精或/和蔗糖或/和乳糖或/和維生素C或/和檸檬酸或/和 亞硫酸鈉輔料，製備成片劑或膠囊劑或衝劑的藥物或功效食品。
全文摘要
本發明屬於有機化學技術領域，涉及一種厚樸活性成分生物鹼的提取方法及其作為α-葡萄糖苷酶抑制劑的應用。本發明厚樸生物鹼包含木蘭花鹼、鵝掌楸鹼、蕃荔枝鹼、羅默鹼和Lysicamine的總生物鹼；以厚樸樹皮為原料，用酸水溶液常溫或加熱提取；提取液通過強酸型或弱酸型陽離子交換樹脂，活性成分被吸附在樹脂上；先用水洗樹脂柱，然後用氨水/醇溶液洗脫，濃縮乾燥得到厚樸總生物鹼。本發明具有提取製備工藝簡單、易於操作、成本低等特點。
文檔編號A61K36/575GK101966228SQ20091006012
公開日2011年2月9日 申請日期2009年7月27日 優先權日2009年7月27日
發明者喻凱, 王明奎, 瞿慶喜 申請人:中國科學院成都生物研究所