一種高效價肝素鈉製備新工藝的製作方法
2023-10-23 09:29:37
專利名稱：一種高效價肝素鈉製備新工藝的製作方法
技術領域：
本發明屬於生化原料藥生產技術領域，尤其是涉及到高效價肝素鈉的製備工藝。
背景技術：
肝素鈉是粘多糖硫酸酯類抗凝血藥，是由豬或牛的腸黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬粘多糖類物質。肝素鈉原料藥的原料是肝素粗品，其提取只能源自健康生豬的小腸黏膜，由於含有大量雜蛋白、雜核酸、微生物等，需經過物理和化學提取分離過程，定向獲取天然結構基團完整的肝素，從而製成肝素鈉原料藥。肝素鈉原料藥是肝素製劑的有效成分和低分子肝素製劑的起始原料，目前這些製劑往往採用注射方式給藥，這使得肝素鈉原料藥需要有很高的純度，方可保證製劑的用藥安全。現有肝素鈉提取純化方法大多採用酸鹼處理去除雜質蛋白、核酸等物質，採用多次氧化的方法去除色素類物質，採用乙醇多次分級的方式去除硫酸皮膚素等雜多糖。上述酸鹼處理的方式易造成核酸、色素的殘留量高，導致後續氧化次數增多；酸處理及多次氧化易導致肝素鈉部分失活，難以得到高效價的肝素鈉；多次乙醇分級易造成收率降低及物料的浪費。
發明內容
本發明的目的在於改進現有技術的不足，從而提供了一種高效價肝素鈉的生產工藝。本發明具有操作簡單、工藝時間短的特點，所得產品具有光吸收低、效價高的特點。本發明的目的可以通過下述技術方案實現本發明以肝素鈉粗品為原料，採用常規鹽解、酶解工藝進行預處理。預處理後的藥液首先採用離子絮凝劑進行處理，離子絮凝劑採用的離子可以是鈣離子、鋁離子，並可以通過沉澱物形式去除，其加入量為O. 5 5% (W/V);絮凝後的藥液需過濾澄清，再採用超濾膜進行超濾以除去小分子雜質及部分色素物質，超濾膜採用的孔徑範圍為2000 8000Da ;超濾結束後，藥液中尚殘存少量的核酸類雜質，此時再採用帶有矽羥基的玻璃粉進行吸附處理，此時得到中控光吸收260nm合格的中間體。對此中間體藥液再進行I 2次氧化即可得到400nm光吸收合格的中間體。再對 260nm、400nm合格的藥液採用改進後的溶劑進行分級，所使用的溶劑中乙醇度數為45 70 度(體積百分數)，溶劑中加氯化鈉量為0.5 3.5% (W/V(溶劑體積))。沉澱經凍幹後即可得到高效價的肝素鈉原料藥。本發明生廣工藝製得的廣品其質量指標提聞情況如下260nm光吸收(O. 4%溶液，w/v):小於等於O. 050400nm光吸收(O. 4%溶液，w/v):小於等於O. 025效價(EP7.O 方法):大於 200IU/mg
具體實施例方式實施例1，一種高效價肝素鈉製備新工藝，是將IOOg肝素鈉粗品投入塑料杯中，加入IOOOml純化水溶解，加入濃度3.0% (w/v)的氯化鈉，酶解3 5小時。酶解完成後，加入0. 5 5% (W/V)鈣離子或鋁離子試劑反應30分鐘，離心去除絮凝沉澱物，再調pH9 10形成離子沉澱物，通過澄清過濾去除沉澱。經澄清過濾後的藥液採用2000 SOOODa的超濾膜進行超濾，濾出液體積為藥液體積的三倍量。超濾後的藥液再採用經預處理的玻璃粉進行吸附，玻璃粉的加入量為藥液體積的0. I倍(V/V)，攪拌吸附30分鐘。將藥液中的玻璃粉通過過濾去除，然後在藥液中分次加入2. 5% (V/V)的雙氧水，氧化結束後過濾至澄清，分級。此時，中控260nm、400nm應符合要求,否則增加一次氧化。將中控合格的沉澱溶解，再採用0. 22um的濾膜過濾，用特定度數的こ醇進行分級，收集沉澱，沉澱經凍幹後即可得到高效價的肝素鈉原料藥。實施例2，一種高效價肝素鈉製備新エ藝，是將IOKg肝素鈉粗品投入塑料桶中，加入100L純化水溶解，加入濃度3.0% (w/v)的氯化鈉，酶解3 5小吋。酶解完成後，加入
0.5 5% (W/V)鈣離子或鋁離子試劑反應30分鐘，離心去除絮凝沉澱物，再調pH9 10 形成離子沉澱物，通過澄清過濾去除沉澱。經澄清過濾後的藥液採用2000 SOOODa的超濾膜進行超濾，濾出液體積為藥液體積的三倍量。超濾後的藥液再採用經預處理的玻璃粉吸附，玻璃粉的加入量為藥液體積的0. I倍(V/V)，攪拌吸附30分鐘。將藥液中的玻璃粉通過過濾去除，然後在藥液中分次加入2. 5% (V/V)的雙氧水,氧化結束後過濾至澄清,分級。 此時，中控260nm、400nm應符合要求，否則增加一次氧化。將中控合格的沉澱溶解,再採用
0.22um的濾膜過濾，用特定度數的こ醇進行分級，收集沉澱，沉澱經凍幹後即可得到高效價的肝素鈉原料藥。
權利要求
1.一種高效價肝素鈉製備方法，其特徵在於採用離子絮凝、超濾、玻璃粉吸附三種技術手段依次對預處理後的肝素鈉粗品進行除雜處理，從而得到260nm光吸收極低的肝素鈉中間體；其特徵還在於改進分級所用的溶剤，從而能更明顯降低產品中的硫酸皮膚素雜質含量，縮短エ時並節約こ醇用量。
2.權利要求I所述的高效價肝素鈉製備方法，其中依次採用離子絮凝、超濾、玻璃粉吸附三種技術手段是指將三種技術聯合使用並依次用於肝素鈉粗品的除雜處理；離子絮凝採用的離子可以是鈣離子、鋁離子，並可以通過沉澱物形式去除，其加入量為0. 5 5% (ff/ V);超濾膜採用的孔徑範圍為2000 8000Da，除去小分子雜質及部分色素物質；玻璃粉採用鹽酸煮沸I 3小時，使其表面帶有矽羥基，用於吸附藥液中殘存的少量核酸類雜質。
3.權利要求I所述的高效價肝素鈉製備方法，其中改進分級所用的溶劑是基於對肝素鈉、硫酸皮膚素分級沉澱特性的理論認識，通過設定分級所用溶劑中こ醇的體積百分數及加入氯化鈉的量從而使肝素鈉、硫酸皮膚素在一次分級後可基本分離；所述的分級所用溶劑中こ醇體積百分數為45 70%，溶劑中加入氯化鈉量為0. 5 3. 5% (W/V)。
全文摘要
本發明公布了一種高效價肝素鈉製備新工藝，屬於生化原料藥生產技術領域，尤其是涉及到高效價肝素鈉的製備工藝。為提供收率高、成本低，質量好的肝素鈉精品，開發出如下製備新工藝以粗品肝素鈉為原料，採用鹽解、酶解工藝進行預處理，依次經離子絮凝、超濾、玻璃粉吸附三種除雜技術，可獲得260nm光吸收極低的肝素鈉中間體。再經簡單氧化、採用改進後的溶劑進行分級，最終得到高效價的肝素鈉精品。本發明具有提取條件溫和、回收率高、成本低的特點，易於獲得高效價、低雜質含量的肝素鈉精品並適合於進行工業化大生產。
文檔編號C08B37/10GK102603926SQ20121009589
公開日2012年7月25日 申請日期2012年3月27日 優先權日2012年3月27日
發明者張立勇, 由守誼, 苗偉, 齊東綺 申請人:煙臺東誠生化股份有限公司