一種飼用液體植酸酶製劑的製作方法
2023-10-09 14:46:29 2
專利名稱：一種飼用液體植酸酶製劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種飼用液體酶製劑，尤其是涉及一種飼用液體植酸酶製劑。
背景技術：
磷在植物性飼料中含量不一，但大部分以植酸及植酸鹽的形式存在，植
酸磷約佔植物性飼料原料中總磷的70%以上，這些磷難以被單胃動物消化利 用，未被利用的磷隨糞便排出體外，造成磷對環境的汙染，另外植酸還通過 螯合作用降低動物對Zn、 Mn、 Fe、 Ca等礦物元素和蛋白質的利用率。因此 植酸及植酸鹽是一種天然抗營養因子。在伺料中添加植酸酶，以植酸酶替代 部分或全部無機磷可降低飼料中總磷含量，降低飼料成本，提高經濟效益， 同時可減少30—50%的糞磷排放量，防止對環境的汙染。植酸酶是能水解植 酸(鹽)為肌醇和正磷酸(鹽)的一種水解酶，從而釋放正磷酸(鹽)供動 物利用。所以植酸酶是現階段詞料生產中用量最大的單一酶製劑。在植物性 詞料原料中添加植酸酶可顯著地提高磷的利用率，促進動物生長和提高詞料 營養物質轉化率。
現階段植酸酶加入飼料中的方式有兩種 一種是以固體(粉劑、顆粒劑、 丸劑)的形式在飼料調質制粒前加入。在詞料加工過程中，特別是顆粒詞料， 需要高溫高壓蒸汽進行調製並擠壓成顆粒，溫度達75度以上，溼度達17%， 以提高飼料的粘性和消毒滅菌。而植酸酶在溼度12%、溫度60度開始失活。 在飼料制粒過程中一般植酸酶的失活達50%。
另一種加入方式是先將酶製成液體劑型，在詞料調質制粒並冷卻後，用 專用噴塗設備噴塗到飼料顆粒的表面，這樣避免了高溫造成而酶活的損失。 植酸酶原酶液是產酶基因工程畢赤酵母菌的液體發酵液經陶瓷膜過濾，超濾 膜濃縮所得的濃縮液，酶活為20000u/g以上。如果將植酸酶原酶液用水稀釋 而成液體劑型，則存在酶活的儲存穩定性差的問題。這是因為在液體狀態下 酶分子處於舒展狀態，活性中心裸露，易受物理和化學因素的影響，而降低活性。如圖1、圖2所示，分別是將植酸酶原酶液用水稀釋而成酶活為6600u/g 的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月的穩定性分析和在40'C恆溫儲存6周的 穩定性分析，由圖中看出，植酸酶原酶液用水稀釋而成的液體植酸酶製劑， 其常溫儲存6個月的酶活保有率在65%以下，在4(TC恆溫儲存6周的酶活保 有率在65%以下。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是解決現有技術的不足，提供一種酶活保有 率高的飼用液體植酸酶製劑。
本發明所採用的技術方案是本發明所述詞用液體植酸酶製劑中包含的 原料有植酸酶原酶液、聚乙二醇6000、海藻糖、苯甲酸鈉、純水，所述詞
用液體植酸酶製劑的PH值為4.5 5. 5。 進一步的，所述原料的重量配比為-酶活為23270 27836u/g的植酸酶原酶液 250 300Kg;
聚乙二醇6000 30 50Kg;
海藻糖 50 100Kg;
苯甲酸鈉 0.5 1.5Kg;
純水 600Kg。
本發明的有益效果是本發明是採用酶蛋白分子表面修飾、添加穩定劑、 防腐劑、優選最佳pH等綜合穩定措施來提高液體植酸酶製劑儲存穩定性的 第一個方面是酶蛋白分子的化學修飾通過在酶溶液中加入多羥基醇(如
聚乙二醇(PEG) 6000)，使PEG分子中的羥基與酶蛋白分子表面及其活性
中心的羧基、氨基等以共價鍵、氫鍵及範德華力等結合，從而使酶蛋白分子
的活性中心和整個酶蛋白分子得到保護；
第二個方面是通過加入穩定劑(如海藻糖)，提高酶溶液的滲透壓，使酶
蛋白分子的舒展度降低，分子相對處於脫水狀態而收縮，從而提高穩定性； 第三個方面是通過加入防腐劑(如苯甲酸鈉)，提高液體酶的生物穩定性； 第四個方面是通過優選pH範圍(4.5 5.5)，提高酶蛋白分子的穩定性。經過檢測，按照本發明所述以上措施製得的產品，其在常溫儲存6個月
的酶活保有率及在4(TC恆溫儲存6周的酶活保有率均在80%以上。大大提高 了產品的穩定性。
圖1酶活為6600u/g的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月穩定性(u/g)， 是酶活為6600u/g的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月穩定性分析圖2酶活為6600u/g的液體植酸酶製劑在4(TC恆溫儲存6周穩定性(u/g)， 是酶活為6600u/g的液體植酸酶製劑在4CTC恆溫儲存6周穩定性分析圖3酶活為6981u/g的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月穩定性(u/g)， 是本發明實施例1所得產品在常溫儲存6個月穩定性分析圖4酶活為6981u/g的液體植酸酶製劑在4(TC恆溫儲存6周穩定性(u/g)， 是本發明實施例1所得產品在4(TC恆溫儲存6周穩定性分析圖5酶活為6729u/g的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月穩定性(u/g)， 是本發明實施例2所得產品在常溫儲存6個月穩定性分析圖6酶活為6729u/g的液體植酸酶製劑在4(TC恆溫儲存6周穩定性(u/g)， 是本發明實施例2所得產品在4(TC恆溫儲存6周穩定性分析圖； 圖7酶活為6959u/g的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月穩定性(u/g)，是本 發明實施例3所得產品在常溫儲存6個月穩定性分析圖8酶活為6959u/g的液體植酸酶製劑在4(TC恆溫儲存6周穩定性(u/g)， 是本發明實施例3所得產品在4(TC恆溫儲存6周穩定性分析圖。
具體實施例方式
實施例1:
稱取聚乙二醇6000 30kg、海藻糖50kg、苯甲酸鈉0.5kg，邊攪拌，慢慢 加入到600kg蒸餾水中，控制溫度小於40°C，待固體全部溶解後，加入300kg 酶活為23270u/g的植酸酶液，攪拌均勻，再用20kg0.5MHCl調節pH至4.5，得酶活6981u/g的植酸酶液體1000. 5kg。如圖3、圖4所示，分別是按照本 實施例配方制的的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月的穩定性分析和在40°C 恆溫儲存6周的穩定性分析。經分析計算，本產品在常溫儲存6個月的酶活 保有率為90%，在4CTC恆溫儲存6周的酶活保有率為83%。
實施例2:
稱取聚乙二醇6000 40kg、海藻糖75kg、苯甲酸鈉lkg、，邊攪拌，慢慢 加入到600kg蒸餾水中，控制溫度小於4(TC，待固體全部溶解後，加入260kg 酶活為25880u/g的植酸酶液，攪拌均勻，再用4kg0. 5MNaOH和20kg0.5MHCl 調pH節至5.0，得酶活6729u/g的植酸酶液體1000kg。如圖5、圖6所示， 分別是按照本實施例配方制的的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月的穩定性 分析和在4(TC恆溫儲存6周的穩定性分析。經分析計算，本產品在常溫儲存 6個月的酶活保有率為80%，在4(TC恆溫儲存6周的酶活保有率為82. 8%。
實施例3:
稱取聚乙二醇6000 50kg、海藻糖100kg、苯甲酸鈉1.5kg、，邊攪拌，慢 慢加入到600kg蒸餾水中，控制溫度小於40 °C ，待固體全部溶解後，加入250kg 酶活為27836u/g的植酸酶液，攪拌均勻，再用0. 5kg0. 5M NaOH調pH至5. 5， 得酶活6959u/g的植酸酶液體1002kg。如圖7、圖8所示，分別是按照本實 施例配方制的的液體植酸酶製劑在常溫儲存6個月的穩定性分析和在4(TC恆 溫儲存6周的穩定性分析。經分析計算，本產品在常溫儲存6個月的酶活保 有率為84%，在40。C恆溫儲存6周的酶活保有率為82. 7%。
權利要求
1、一種飼用液體植酸酶製劑，其特徵在於，所述飼用液體植酸酶製劑中包含的原料有植酸酶原酶液、聚乙二醇6000、海藻糖、苯甲酸鈉、純水，所述飼用液體植酸酶製劑的PH值為4.5～5.5。
2、 根據權利要求1所述的一種飼用液體植酸酶製劑，其特徵在於所述原 料的重量配比為.-酶活為23270 27836u/g的植酸酶原酶液 250 300Kg;聚乙二醇6000 30 50Kg;海藻糖 50 100Kg;苯甲酸鈉 0.5 1.5Kg;純水 600Kg。
全文摘要
本發明公開了一種酶活保有率高的飼用液體植酸酶製劑。本發明是在植酸酶原酶液中加入聚乙二醇6000、海藻糖、苯甲酸鈉、純水，調節pH值為4.5～5.5其中聚乙二醇6000中的羥基與酶蛋白分子表面及其活性中心的羧基、氨基等以共價鍵、氫鍵及範德華力等結合，從而使酶蛋白分子的活性中心和整個酶蛋白分子得到保護；海藻糖(穩定劑)，提高酶溶液的滲透壓，使酶蛋白分子的舒展度降低，分子相對處於脫水狀態而收縮，從而提高穩定性；苯甲酸鈉(防腐劑)及優選pH範圍(4.5～5.5)，均起到提高液體酶的生物穩定性的作用。本發明用於飼料添加劑領域。
文檔編號A23K1/165GK101617740SQ200910157818
公開日2010年1月6日 申請日期2009年7月7日 優先權日2009年7月7日
發明者眭培林, 肖渲雄 申請人:廣東溢多利生物科技股份有限公司