提高硫酸軟骨素含量的製備方法
2023-10-09 16:44:54 2
提高硫酸軟骨素含量的製備方法
【專利摘要】本發明公開了一種提高硫酸軟骨素含量的製備方法，將經過鹼提、酶解氧化得到的硫酸軟骨素溶液，調節PH5.5-6.5，溫度控制在15-25℃，緩慢的加入到攪拌中的90％的乙醇中，整個沉澱過程中乙醇的濃度始終保持在75％及其以上。經此方法沉澱得到的硫酸軟骨素質地疏鬆，顆粒細小，容易脫水和烘乾，不需要粉碎，具有節約能源、節約生產成本的優點。多得產品色澤好，質量穩定，硫酸軟骨素含量在98.5％以上。
【專利說明】提高硫酸軟骨素含量的製備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生化製藥領域，特別是直接從動物軟骨中提取的對心腦血管病等有良好的效果的硫酸軟骨素鈉的生產工藝的改進。
【背景技術】
[0002]硫酸軟骨素鈉，英文名Chondroitin sulfate sodium,是動物軟骨中提取的酸性粘多糖，多存在於動物的軟骨、喉骨、鼻骨(41%)、牛、馬中膈和氣管中，其分子結構為β -D-葡萄糖醛酸和N-乙醯氨基半乳糖通過β I — 3糖苷鍵形成的重複二糖單位所組成的多糖鏈。
[0003]硫酸軟骨素鈉主要用於治療風溼和類風溼疾病的藥物，還具有抗凝、抗癌、抗血栓、降血脂等作用，可用於治療頭痛、偏頭痛、冠心病、心絞痛等症狀。在國外，對硫酸軟骨素鈉藥理的研究已經達到分子水平。
[0004]目前國內提取硫酸軟骨素鈉的方法主要有三種:鹽解法、鹼解法和酶解法。主要採用的分離純化技術有:乙醇沉澱法、離子交換色譜法、纖維素分離法、季銨鹽配合法、吸附法、區帶電泳分離法等。在以上的集中提取方法中，收率雖然可以達到很高的水平，但生產方法都存在很大問題，如鹽解法工藝中存在除酸性蛋白調節PH值1-2在產品量大時耗時很長，硫酸軟骨素中的氨基易被解離下來，從而影響了硫酸軟骨素的含量。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是:提供一種提高硫酸軟骨素含量的製備方法，此方法通過復沉，並控制乙醇濃度，使生產的硫酸軟骨素沉澱質地疏鬆、顆粒細小、容易脫水和烘乾，且產品不需要粉碎，能耗低，質量高`且穩定。
[0006]本發明的技術解決方案是該製備方法包括下列步驟:
[0007]1、鹼提酶解:將動物軟骨原料加水浸泡，用氫氧化鈉調節ΡΗ8.5-9.5，升溫至50-600C，保溫4-6小時，加入胰蛋白酶，保持ΡΗ8.5-9.5，保溫50_60°C，並攪拌6小時，升溫至溶液沸騰10-20分鐘，用微孔濾膜過濾得硫酸軟骨素溶液；
[0008]2、乙醇沉澱:將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，邊攪拌便加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為1-5%，然後加入溶液體積2-3倍的濃度為90%以上的乙醇，靜置6-8小時，用微孔濾膜過濾得硫酸軟骨素沉澱；
[0009]3、氧化:將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉澱加入水中溶解，同時水中加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為1_5%，含硫酸軟骨素重量濃度為3.5-5.5%，調節PH至
9.5-11.5，加入1-3.5%的過氧化氫氧化6-8小時，過濾得濾液；
[0010]4、復沉:調節步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5.5-6.5，溫度控制在15-25°C,邊攪拌,邊將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到體積為硫酸軟骨素溶液4.5-6.5倍的，濃度為90%以上的乙醇中，緩慢加完後繼續攪拌I小時，靜置沉澱10-15小時；
[0011]5、脫水乾燥:沉澱結束後棄去上層酒精，收集沉澱物，用濃度為95%以上的乙醇脫水，然後乾燥即得硫酸軟骨素成品。
[0012]本方法進一步改進方案是，所述乙醇濃度為90%或90%以上。其中，步驟(4)的溶液含乙醇的濃度始終保持在75%或75%以上。
[0013]本發明取得的效果為:
[0014]1、將經過鹼提、酶解氧化得到的硫酸軟骨素溶液，調節PH5.5-6.5，溫度控制在15-25°C，緩慢的加入到攪拌中的90%的乙醇中，整個沉澱過程中乙醇的濃度始終保持在75%及其以上。經此方法沉澱得到的硫酸軟骨素質地疏鬆，顆粒細小，容易脫水和烘乾，不需要粉碎，具有節約能源、節約生產成本的優點。
[0015]2、所得產品色澤好，質量穩定，且硫酸軟骨素含量在98.5%以上。
【具體實施方式】
[0016]實施例1
[0017](I)鹼提酶解:將動物軟骨原料IOOkg加水浸泡，用氫氧化鈉調節PH9.0，升溫至50-600C，保溫5小時，加入2kg胰蛋白酶，保持PH9.0，保溫50_60°C，並攪拌6小時，升溫至溶液沸騰15分鐘，用微孔濾膜過濾得硫酸軟骨素溶液600L ；
[0018](2)乙醇沉澱:將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，邊攪拌便加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為18kg，然後加入溶液體積2.5倍的濃度為90%以上的乙醇1500L，靜置7小時，用微孔濾膜過濾得硫酸軟骨素沉澱；
[0019](3)氧化:將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉澱加入250L水中溶解，同時水中加入
7.5kg氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃`度為3%，含硫酸軟骨素重量濃度為5%，調節PH至11，加入5kg過氧化氫氧化8小時，過濾得濾液；
[0020](4)復沉:調節步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5.5-6.5，溫度控制在18°C，邊攪拌，邊將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到濃度為90% 1250L的乙醇中，緩慢加完後繼續攪拌I小時，靜置沉澱15小時；
[0021](5)脫水乾燥:沉澱結束後棄去上層酒精，收集沉澱物，用濃度為95%以上的乙醇脫水，然後乾燥即得硫酸軟骨素成品15.1kg,含量98.6%。
【權利要求】
1.提高硫酸軟骨素含量的製備方法，其特徵在於包括以下步驟: (1)鹼提酶解:將動物軟骨原料加水浸泡，用氫氧化鈉調節PH8.5-9.5，升溫至50-600C，保溫4-6小時，加入胰蛋白酶，保持PH8.5-9.5，保溫50_60°C，並攪拌6小時，升溫至溶液沸騰10-20分鐘，用微孔濾膜過濾得硫酸軟骨素溶液； (2)乙醇沉澱:將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，邊攪拌便加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為1_5%，然後加入溶液體積2-3倍的濃度為90%以上的乙醇，靜置6-8小時，用微孔濾膜過濾得硫酸軟骨素沉澱； (3)氧化:將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉澱加入水中溶解，同時水中加入氯化鈉，使溶液中氯化鈉重量濃度為1-5 %，含硫酸軟骨素重量濃度為3.5-5.5 %，調節PH至9.5-11.5，加入1-3.5%的過氧化氫氧化6-8小時，過濾得濾液； (4)復沉:調節步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5.5-6.5，溫度控制在15_25°C，邊攪拌，邊將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到體積為硫酸軟骨素溶液4.5-6.5倍的,濃度為90%以上的乙醇中，緩慢加完後繼續攪拌1小時，靜置沉澱10-15小時； (5)以上的乙醇脫水，然後乾燥即得硫酸軟骨素成品。
2.根據權利要求1所述的提高硫酸軟骨素含量的製備方法，其特徵在於:沉澱與復沉所述乙醇的濃度為90 %或90 %以上。
3.根據權利要求1所述的提高硫酸軟骨素含量的製備方法，其特徵在於:其中步驟(4)的溶液含乙醇的濃度始終保持在75%或75%以上。
【文檔編號】C08B37/08GK103804518SQ201310632537
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2013年11月25日 優先權日:2013年11月25日
【發明者】劉乃山, 陸玉梅, 遲培升, 夏襯來 申請人:青島九龍生物醫藥有限公司