一種治療肝癌的靶向藥物組合物的製作方法

2023-09-24 12:39:20 1

專利名稱：一種治療肝癌的靶向藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明屬生物醫藥領域，涉及生物醫學中治療腫瘤的靶向藥物，具體涉及一種治療肝癌的靶向藥物組合物。
背景技術：
臨床研究顯示，惡性腫瘤的發病率和死亡率逐年增高，已成為嚴重影響人民健康的主要疾病。目前，腫瘤治療進入分子靶向時代。而靶向抑制腫瘤供應血管的抗血管生成治療策略，從理論上講具有抗瘤譜廣、不易產生耐藥及藥物易於到達靶部位等特點成為腫瘤生物治療研究熱點。腫瘤血管生成是一個涉及多種細胞增殖、凋亡及細胞外基質降解及重塑的複雜過程。其中，腫瘤細胞內轉錄因子SPl (其結構模擬圖如圖1所示)及其下遊血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)基因在腫瘤血管生成中發揮了重要作用。現有技術公開了轉錄因子spl是第一個被克隆和純化的核轉錄因子，屬於spl/ Kriippel (specificity protein/Kr Uppel-like factor)轉錄因子家族。Spl 通過結合到基因啟動子區的GC盒(-GGGCGGG-)或GT盒(CACCC-)發揮其調控基因轉錄作用。受Spl 調節的下遊基因眾多，廣泛參與細胞的代謝、生長、分化等重要生理過程。越來越多的研究表明，Spl參與了腫瘤血管形成、細胞增殖和凋亡，在腫瘤的發生、發展中起重要作用。光輝黴素(mithramycin A，MIT)屬於抗腫瘤抗生素類藥物，曾經廣泛應用於治療惡性高鈣血症、白血病和睪丸精原細胞瘤等疾病，但其在高劑量下雖顯示出具有抗所述的腫瘤的效果，但同時具有嚴重副作用，因此限制了其在臨床上的廣泛應用。近年來，研究發現低劑量的MIT能特異性結合到富含GC區域的染色質，阻斷上遊啟動子區富含GC的相關基因的轉錄表達。目前，在眾多的抗血管生成腫瘤治療靶點中，以針對血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)為靶點設計的單克隆抗體藥物bevacizumab (貝伐單抗，商品名=Avastin)最早應用於臨床。研究顯示，bevacizumab能阻斷VEGF與其受體結合，從而抑制VEGF介導的腫瘤血管生成活性。臨床應用bevacizumab，多與細胞毒化療藥物聯合，使其增加療效。臨床實踐顯示，單獨應用bevacizumab的抗腫瘤治療作用有限，其有效性持續時間不長，需加大劑量維持治療，並能逐漸誘導耐藥。對此現象初步的機制研究發現，體內低劑量的bevacizumab能誘導腫瘤組織正反饋加強VEGF等血管生成促進因子的表達，從而削弱了 bevacizumab的抗血管生成效應。目前，尋找多靶點的控制腫瘤效果好，毒副作用低的用於治療腫瘤的靶向藥物已成為有關研究人員，醫務工作者和腫瘤患者的共同期望。

發明內容
本發明的目的是針對現有技術中抗血管生成單藥治療藥效減低的缺陷，提供一種新的用於治療腫瘤的靶向藥物，具體涉及一種治療肝癌的靶向藥物組合物。
本發明的靶向藥物組合物，其特徵在於，其包括低劑量光輝黴素(mithramycin A， MIT)和抗VEGF抗體(VEGF-Ab)藥物。本發明中，所述的抗VEGF抗體藥物選自單克隆抗體藥物bevacizumab(貝伐單抗，商品名Avastin)本發明的靶向藥物組合物，能阻斷與腫瘤血管生成密切相關的腫瘤組織中轉錄因子SPl的活性，抑制轉錄因子SPl下遊VEGF表達。其中的MIT和VEGF-Ab針對不同的作用靶點，MIT阻斷造成VEGF-Ab耐藥的信號通路，進而對腫瘤血管生成發揮協同抑制作用，能更加有效的抑制腫瘤血管生成，抑制腫瘤的生長。本發明的靶向藥物組合物，聯合應用低劑量MIT和VEGF抗體(VEGF-Ab)進行體外 (細胞水平)和在體(荷瘤裸鼠模型)水平協同多靶點抗腫瘤血管生成作用及分子機制實驗研究。並通過對低劑量MIT和VEGF-Ab在細胞水平和荷瘤裸鼠體內協同抗腫瘤血管生成的藥效學、藥理學、藥代動力學作用和早期安全性的研究，設定本發明的靶向藥物組合物中的MIT和VEGF抗體藥的合理有效的劑量，製成多靶點聯合抑制腫瘤血管生成的新藥。本發明所述的靶向藥物組合物，它含以下物質作為活性成分(1)光輝黴素(mithramycin A, MIT)；( 抗VEGF抗體藥物，本發明中，抗VEGF抗體藥物為單克隆抗體藥物bevacizumab (貝伐單抗，商品名 Avastin)上述活性成分的劑量如下述(1)光輝黴素的劑量為0. 10mg/kg/次，(2)單克隆抗體藥物bevacizumab的劑量為25 μ g/次，本發明中，MIT採用常規的製備工藝，製備成不同的藥物劑型供使用，如製成口服液、膠囊、粉劑或針劑等。本發明所述的靶向藥物組合物可以採用皮下注射或靜脈注射方式使用。本發明中，採用MIT聯合VEGF-Ab bevacizumab進行在體肝癌荷瘤裸鼠模型實驗， 觀察對腫瘤血管生成及調控其生成的細胞因子的影響。採用肝癌裸鼠荷瘤模型，每周兩次腹膜內注射不同劑量的MIT(0. lmg/kg)聯合應用bevacizumab (25 μ g、50 μ g、100 μ g)。結果顯示，bevacizumab產生了劑量依賴性的抑制血管生成和抗腫瘤生長作用，並且單獨給予MIT或bevacizumab只能產生微弱的抑制血管生成和抗腫瘤生長作用。但給與本發明藥物組合物，其中含MIT (0. 10mg/kg/次)， VEGF-Ab(25y g/次)，結果顯示，產生明顯協同抑制血管生成和抗腫瘤生長效應。其他實驗組，如，單用PBS/IgG組、bevacizumab組、MIT+bevacizumab組裸鼠體重未發生明顯的變化。 結果表明，本發明藥物組合物其中含MIT (0. 10mg/kg/次)，VEGF-Ab (25 μ g/次)，比單獨使用MIT或bevacizumab得到更高的抗腫瘤效果，而不增加藥物毒性。結果顯示，在較低安全劑量範圍內單用MIT，即不能對實驗動物的正常生理活動產生影響又不能抑制肝腫瘤血管生成及生長(或僅有微弱影響)；但給與本發明藥物組合物， 其中含MIT (0. 10mg/kg/次)和VEGF-Ab (25 μ g/次)時，則能夠抑制腫瘤血管生成，進而抑制肝腫瘤的生長。本發明實驗證實所述的的靶向藥物組合物，可顯著提高抑制腫瘤的生的治療效果。尤其是靶向治療肝癌的效果。本發明的靶向藥物組合物，為解決目前臨床應用中出現的抗血管生成單藥化療藥效減低難題提供了新的解決方法。


圖1是轉錄因子Spl結構模擬圖。
具體實施例方式實施例1 :MIT+bevacizumab聯合抑制肝癌血管新生及腫瘤生長1、實驗動物BALB/c裸鼠8周齡中科院上海分院實驗動物中心提供2、實驗材料MIT、bevacizumab、低轉移人肝癌細胞株，MHCC97-HG(CGMCC No 1063)和 MHCC97-LG(CGMCC No :1062)。3、實驗方法採用上述肝癌細胞系，皮下注射及原位種植建立動物模型，檢測不同劑量的NS/LgG方案、MIT方案、bevacizumab方案和不同劑量組的本發明藥物組合物，對抑制腫瘤組織血管生成及抗腫瘤生長的作用。4、實驗結果bevacizumaM25y g、50y g、100y g)產生了劑量依賴性的抑制血管生成和抗腫瘤生長作用，並且單獨給予MIT(0. lmg/kg)或bevacizumab只能會產生微弱的抑制血管生成和抗腫瘤生長作用。但給與本發明藥物組合物，其中含MIT(0. 10mg/kg/次)， VEGF-Ab (25 μ g/次)，結果顯示，產生明顯協同抑制血管生成和抗腫瘤生長效應。其他實驗組，如，單用PBS/IgG組、bevacizumab組、MIT+bevacizumab組裸鼠體重未發生明顯的變化。 結果表明，本發明藥物組合物，尤其是其中含MIT(0. 10mg/kg/次)，VEGF-Ab (25 μ g/次)， 比單獨使用MIT或bevacizumab得到更高的抗腫瘤效果，而不增加藥物毒性。實施例2 MIT+bevacizumab聯合治療抑制胰腺癌血管新生及腫瘤生長1、實驗動物BALB/c裸鼠8周齡中科院上海分院實驗動物中心提供，2、實驗材料MIT、bevacizumab、胰腺癌細胞株 PANC-1 和 BxPC3，3、實驗方法採用上述胰腺癌細胞系，皮下注射及原位種植建立荷瘤動物模型，檢測不同劑量的NS/LgG方案、MIT方案、be vac i zumab方案和不同劑量組合的 MIT+bevacizumab聯合化療新方案四種化療方案對抑制腫瘤組織血管生成及抗腫瘤生長的作用。4、實驗結果當腫瘤達到實驗要求的大小時進行化療時，bevacizumab (25 yg, 50ygU00yg)產生了劑量依賴性的抑制血管生成和抗腫瘤生長作用，並且單獨給予 MIT (0. lmg/kg)或bevacizumab只能會產生微弱的抑制血管生成和抗腫瘤生長作用。但給與本發明藥物組合物，其中含MIT (0. 10mg/kg/次)，VEGF-Ab (25 μ g/次)，結果顯示，產生協同抑制血管生成和抗腫瘤生長效應。單用PBS/IgG組、bevacizumab組、本發明藥物組合物組裸鼠體重未發生明顯的變化。因此，本發明藥物組合物尤其是其中含MIT (0. 10mg/kg/ 次)，VEGF-Ab (25 μ g/次)是比單用MIT或bevacizumab會得到更高的抗腫瘤效果，而不增加藥物毒性。
權利要求
1.一種治療肝癌的靶向藥物組合物，其特徵在於，其包括低劑量光輝黴素MIT和抗 VEGF抗體藥物；所述的光輝黴素MIT的劑量為0. 10mg/kg/次，抗VEGF抗體藥物的劑量為 25 μ g/次。
2.按權利要求1所述的治療肝癌的靶向藥物組合物，其特徵在於，所述的抗VEGF抗體藥物為單克隆抗體藥物bevacizumab。
3.按權利要求1所述的治療肝癌的靶向藥物組合物，其特徵在於，所述的光輝黴素， MIT其劑型是口服液、膠囊、粉劑或針劑。
4.權利要求1所述的靶向藥物組合物在製備靶向抑制轉錄因子SPl抑制劑中的用途。
5 權利要求1所述的靶向藥物組合物在製備抗腫瘤血管生成和抑制腫瘤生長藥物中的用途。
6.按權利要求5的用途，其特徵在於，所述的腫瘤是肝癌。
全文摘要
本發明屬生物醫藥領域，涉及生物醫學中治療腫瘤的靶向藥物，具體涉及一種治療肝癌的靶向藥物組合物。本發明的靶向藥物組合物包括低劑量0.10mg/kg/次光輝黴素MIT和25μg/次抗VEGF抗體藥物；本發明進行了在體肝癌、胃癌、胰腺癌荷瘤裸鼠模型實驗，觀察對腫瘤血管生成及調控其生成的細胞因子的影響。結果顯示，在較低安全劑量範圍內單用MIT，即不能對實驗動物的正常生理活動產生影響又不能抑制肝腫瘤血管生成及生長或僅有微弱影響；但給與本發明藥物組合物時，則能夠抑制腫瘤血管生成，進而抑制肝腫瘤的生長，而不增加藥物毒性。
文檔編號A61K39/395GK102258781SQ20101018700
公開日2011年11月30日 申請日期2010年5月28日 優先權日2010年5月28日
發明者王理偉 申請人:上海市第一人民醫院