一種豬胚胎移植方法
2023-09-24 01:20:15
專利名稱：一種豬胚胎移植方法
技術領域：
本發明屬於一種胚胎移植方法，尤其涉及一種豬胚胎移植方法。
背景技術：
豬的胚胎移植，是將豬的體內發育或是體外培養的早期胚胎取出，再移植 到經同期化處理的受體豬輸卵管或子宮中，使其繼續發育的技術。胚胎移植是 胚胎工程中不可缺少的重要部分，是連接供體(胚胎)與受體的橋梁。
現有豬的胚胎移植方法，主要通過手術法。
手術法移植胚胎能夠將胚胎移植到比較準確的部位，但在移植過程中，其 過程需要剖開受體豬，並需要麻醉受體豬。這樣，豬體有創傷，需要術後恢復 過程，而且手術部位會有感染的危險。另外，採用這種方法受體母豬使用次數 也有限制。
發明內容
本發明實施例的目的在於提供一種豬胚胎移植方法，旨在解決在豬的胚胎 移植過程中，手術和麻醉容易使受體母豬受到傷害，給其帶來痛苦的問題。
本發明實施例是這樣實現的， 一種豬胚胎移植方法，包括如下步驟
(1) 將受體豬人工保定，清洗受體豬陰門部，從陰門處向陰道內插入深宮 輸精管外管至其海綿頭堵住子宮頸口 ，再向深宮輸精管內插入內置的柔性細管 至子宮角內；
(2) 第一次灌注胚胎培養液於內置柔性細管中潤洗細管後，第二次注入胚 胎培養液，將發育至嚢胚階段的豬胚胎從內置柔性細管外部開口處注入，使其 與培養液混合，由內置柔性細管引導進入子宮角，然後第三次注入胚胎培養液衝洗內置柔性細管，摺疊內置柔性細管外端開口處，利用空氣壓力，使液體全
部流入子宮內；
(3 )抽出內置柔性細管後再抽出深宮輸精管外管，然後讓受體豬保持站立 姿勢至少15分鐘。
與現有技術相比，上述技術方案直接用深宮輸精管輔助，不需要麻醉和手 術，豬體表面沒有創口，無需恢復過程，無創口感染的危險。因此，在胚胎移 植過程中，不會因此使受體母豬受到傷害，給其帶來痛苦。另外，受體母豬重 複利用次數與正常母豬使用次數一致。
具體實施例方式
為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例， 對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以 解釋本發明，並不用於限定本發明。
本發明的實施例提供一種與現有豬胚胎移植方法相比，不需要麻醉和手術， 為此，本發明實施例的豬胚胎移植方法，包括如下步驟
(l)將受體豬人工保定，清洗受體豬陰門部，從陰門處向陰道內插入深宮 輸精管外管至其海綿頭堵住子宮頸口，再向深宮輸精管內插入內置的柔性細管 至子宮角內；
(2 )第一次灌注胚胎培養液於內置柔性細管中潤洗細管後，第二次注入胚 胎培養液，將發育至嚢胚階段的豬胚胎從內置柔性細管外部開口處注入，使其 與培養液混合，由內置柔性細管引導進入子宮角，然後第三次注入胚胎培養液 衝洗內置柔性細管，摺疊內置柔性細管外端開口處，利用空氣壓力，使液體全 部流入子宮內；
(3 )抽出內置柔性細管後再抽出深宮輸精管外管，然後讓受體豬保持站立 姿勢至少15分鐘。
本實施例中，步驟(l)中保定是指使豬體保持站立姿勢，豬口部用繩子一端綁好，繩子另一端捆綁在某固定物上，再利用靜壓反射，按壓豬體腰背部。 這樣，可避免豬體過大晃動。
本實施例中，步驟(3)中，讓受體豬保持站立姿勢至少15分鐘，是為了
避免液體倒流，造成胚胎流失。
本實施例中，步驟(2)中每次注入的胚胎培養液為3~5 mL。因為母豬在 妊娠早期，子宮液分泌很少，輸入液體量過多時，植入的胚胎會隨液體流入子 宮頸管，造成胚胎的損失或死亡。
本實施例中，受體豬可以為斷奶後，自然觀測發情4~ 5天的經產母豬， 此時，深宮輸精管採用經產深入子宮輸精管；受體豬也可以為初產母豬，此時， 深宮輸精管則採用初產深入子宮輸精管。該兩種深入子宮輸;睛管皆包括一個帶 海綿頭的輸精管，和一條至少1.5米長的內置柔性細管。
本實施例中，豬胚胎，包括手工克隆生產的豬胚胎，體外受精技術生產的 豬胚胎以及活體採集的豬胚胎。該豬胚胎在體外條件下，在專業培養箱中發育 至嚢胚階段。將發育至嚢胚階段的豬胚胎取出後，裝入移植導管中，如需運輸， 應將移植導管封口，於38.5。C條件下運輸。
以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，並不用以限制本發明，凡在本發 明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明 的保護範圍之內。
權利要求
1、一種豬胚胎移植方法，包括如下步驟(1)將受體豬人工保定，清洗受體豬陰門部，從陰門處向陰道內插入深宮輸精管外管至其海綿頭堵住子宮頸口，再向深宮輸精管內插入內置的柔性細管至子宮角內；(2)第一次灌注胚胎培養液於所述內置柔性細管中潤洗細管後，第二次注入胚胎培養液，將發育至囊胚階段的豬胚胎從內置柔性細管外部開口處注入，使其與培養液混合，由內置柔性細管引導進入子宮角，然後第三次注入胚胎培養液衝洗內置柔性細管，摺疊內置柔性細管外端開口處，利用空氣壓力，使液體全部流入子宮內；(3)抽出內置柔性細管後再抽出深宮輸精管外管，然後讓受體豬保持站立姿勢至少15分鐘。
2、 如權利要求1所述的移植方法，其特徵在於，所述受體豬為斷奶後，自 然觀測發情4 5天的經產母豬，且所述深宮輸精管採用經產深入子宮輸精管。
3、 如權利要求1所述的移植方法，其特徵在於，所述受體豬為初產母豬， 所述深宮輸精管釆用初產深入子宮輸精管。
4、 如權利要求1所述的移植方法，其特徵在於，所述步驟(2)中每次注 入的胚胎培養液為3~5 mL。
5、 如權利要求1至4任一項所述的移植方法，其特徵在於，所述豬胚胎， 包括手工克隆生產的豬胚胎，體外受精技術生產的豬胚胎以及活體採集的豬胚 胎。
6、 如權利要求5所述的移植方法，其特徵在於，所述豬胚胎在體外條件下， 在專業培養箱中發育至嚢胚階段。
7、 如"利要求6所述的移植方法，其特徵在於，所述發育至嚢胚階段的豬 胚胎裝入移植導管中，且移植導管運輸時應封口，並保持溫度為38.5°C。
全文摘要
本發明提供了一種豬胚胎移植方法，包括步驟(1)將受體豬人工保定，清洗陰門部，向陰道內插入深宮輸精管外管至其海綿頭堵住子宮頸口，再向深宮輸精管內插入柔性細管至子宮角內；(2)第一次灌注胚胎培養液於細管中潤洗細管後，第二次注入胚胎培養液，將發育至囊胚階段的豬胚胎從細管外部開口處注入，使其與培養液混合，由細管引導進入子宮角，然後第三次注入胚胎培養液衝洗細管，摺疊細管外端開口處，利用空氣壓力，使液體全部流入子宮內；(3)抽出細管後再抽出深宮輸精管外管，然後讓受體豬保持站立姿勢至少15分鐘。本發明在豬胚胎移植過程中，不需要麻醉和手術，解決了受體豬因此受到傷害，給其帶來痛苦的問題。
文檔編號A61D19/04GK101427946SQ20081021833
公開日2009年5月13日 申請日期2008年12月12日 優先權日2008年12月12日
發明者波 律, 穎 徐, 杜玉濤, 楊珍珍, 蔡雅蘭, 玉 陳 申請人:深圳華大基因科技有限公司