大豆異黃酮軟膠囊及其製備工藝的製作方法

2023-10-19 01:13:17 3

專利名稱：大豆異黃酮軟膠囊及其製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及保健品或藥品及其生產方法，是一種大豆異黃酮軟膠囊及其製備工藝，特別用於防治與婦女更年期後一些和激素低下有關的疾病和症狀，還具有提高機體免疫功能，抗炎、抗疲勞、降低膽固醇並能預防心血管疾病的發生、抗衰老。

背景技術：
大豆異黃酮是一類具有廣泛營養學價值，健康保護和治療學意義地非固醇類物質。它由金雀異黃素、大豆苷元、金雀異黃苷、大豆苷、染料木素等組成。由於它能與雌激素受體結合，具有雌激素樣作用，故稱之為植物雌激素。大豆異黃酮的生物作用近來受到人們的普遍關注，對體內雌激素水平具有雙向調節作用，對於低雌激素水平者，它表現為弱的雌激素樣作用，有望用於防治與婦女更年期後一些和激素低下有關的疾病和症狀，如更年期綜合症、骨質疏鬆、血脂升高等；對於高雌激素水平者，大豆異黃酮表現抗雌激素樣作用，有望用於防治乳腺癌、子宮內膜癌、前列腺和直腸腫瘤等；它的抗氧化作用，可延緩老年通行性疾病的發生，預防腫瘤放化療引起的毒副作用(其中一些被認為和引起過氧化損傷有關)。國外已有專利報導，利用混合異黃酮作為健康食品，用於降低膽固醇，預防或治療經前症候群，絕經後的一些症狀及癌症的預防。大豆異黃酮除具有上述作用外，還具有提高機體免疫功能，抗炎、抗疲勞、降低膽固醇並能預防心血管疾病的發生、抗真菌，從而可抑制真菌活性的功能。最近，日本科學家正在研究通過大豆異黃酮的植物雌激素功效，改善婦女皮膚，增強美容效果；同時開始研究大豆異黃酮對糖尿病及其它併發症、腎臟病、牙周病等疾病的預防和治療功效。


發明內容
本發明提供了一種大豆異黃酮軟膠囊，其特別用於防治與婦女更年期後一些和激素低下有關的疾病和症狀，其質量穩定，安全，使用方便。本發明還提供了一種大豆異黃酮軟膠囊製備工藝。
本發明的技術方案之一是這樣來實現的一種大豆異黃酮軟膠囊，包括囊心物和囊殼，其囊心物按重量百分比含有10～50％的大豆異黃酮、0～35％的碳酸鈣、0～2％的維生素、0～0.2％的抗氧劑、1～10％的囊化穩定劑和餘量的稀釋劑。
上述囊心物按重量百分比含有10～50％的大豆異黃酮、25～35％的碳酸鈣、0～2％的維生素、0.1～0.2％的抗氧劑、1～10％的囊化穩定劑和餘量的稀釋劑。
上述稀釋劑為花生油、豆油、紅花油、沙棘油、茶油、色拉油、聚乙二醇400、玉米油中的一種或一種以上。
上述抗氧劑為茶多酚、特丁基對苯二酚(TBHQ)、沒食子酸丙酯(PG)、二丁基羥基甲苯(BHT)中的一種或一種以上。
上述囊化穩定劑為蜂蠟、羊脂、大豆磷脂、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙二醇單硬脂酸脂、吐溫-80、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000中的一種或一種以上。
上述維生素是維生素A、維生素C、維生素D、維生素E中的一種或一種以上。
上述囊殼按原料重量百分比含有35～45％的明膠、18～22％的增塑劑、0.08～0.11％的防腐劑、0～1％的遮蔽劑、0～0.35％的色素、0～0.07％的矯味劑和餘量的水。
上述增塑劑是甘油、山梨醇中的一種或一種以上。
上述防腐劑是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上。
上述遮蔽劑是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上。
上述色素是檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、可可棕、炭黑、果綠中的一種或一種以上。
上述矯味劑是乙基香蘭醛、香精油、蔗糖中的一種或一種以上。
本發明的技術方案之二是這樣來實現的上述大豆異黃酮軟膠囊的製備工藝，其包括囊殼製備、囊心物製備和軟膠囊壓制，其中
囊殼製備將所需量的水、增塑劑、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不鏽鋼鍋內攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不鏽鋼夾層鍋內，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹後加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；
囊心物製備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入穩定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入抗氧化劑及維生素攪拌均勻；將大豆異黃酮、碳酸鈣(可不加)加入混合液中攪拌均勻並使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；
軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉模壓法壓制軟膠囊；然後進行洗丸、乾燥、包裝得到大豆異黃酮軟膠囊。
本發明大豆異黃酮軟膠囊，產品質量穩定，相對其它劑型其生物利用度更高、吸收更好，在臨床劑量條件下是安全的，具有弱的雌激素樣作用，能改善更年期婦女雌激素水平下降所導致的症狀同時又避免了雌激素類化合物的副作用，如更年期綜合症、骨質疏鬆、血脂升高等；同時，具有一定的抗衰老活性，還可用於防治乳腺癌、子宮內膜癌、前列腺和直腸腫瘤等；其抗氧化作用，可延緩老年通行性疾病的發生，預防腫瘤放化療引起的毒副作用，還具有提高機體免疫功能，抗炎、抗疲勞、降低膽固醇並能預防心血管疾病的發生。

具體實施例方式
本發明不受下述實施例的限制，可根據上述本發明的技術方案和實際情況來確定具體的實施方式。
實施例1，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼按重量百分比含有明膠為35％，甘油為18％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，水為46.92％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為10％，碳酸鈣為10％，聚乙二醇400為79.92％，特丁基對苯二酚為0.08％。
實施例2，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼按重量百分比含有明膠為45％，甘油為22％，對羥基苯甲酸乙酯為0.11％，二氧化鈦為1％，檸檬黃為0.35％，乙基香蘭醛為0.07％，水為31.47％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為50％，維生素A為1％，維生素C為3％，維生素D為0.9％，維生素E為2％，茶油為35％，茶多酚為0.1％，大豆磷脂為5％，聚乙二醇4000為3％。
實施例3，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼按重量百分比含有明膠為40％，甘油為12％，山梨醇為8％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，對羥基苯甲酸丙酯為0.02％，硫酸鋇為0.5％，莧菜紅為0.1％，香精油為0.05％，水為39.77％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為30％，碳酸鈣為10％，維生素D為1％，維生素E為6％，紅花油為46.87％，特丁基對苯二酚為0.1％，二丁基羥基甲苯為0.03％，蜂蠟為4％，吐溫-80為3％。
實施例4，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為42％，山梨醇為19％，對羥基苯甲酸乙酯為0.09％，氧化鐵為0.68％，可可棕為0.28％，蔗糖為0.06％，水為37.89％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為15％，碳酸鈣為35％，維生素D為1.5％，豆油為35.42％，二丁基羥基甲苯為0.08％，羊脂為5％，大豆磷脂為8％。
實施例5，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為39％，甘油為20％，對羥基苯甲酸丁酯為0.1％，沉降碳酸鈣為0.78％，胭脂紅為0.12％，香精油為0.01％，水為39.99％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為30％，維生素E為12％，玉米油為48.5％，大豆磷脂為2.5％，甲基纖維素為4％，聚乙二醇單硬脂酸脂為3％。
實施例6，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為40％，甘油為18％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，對羥基苯甲酸丙酯為0.02％，二氧化鈦為0.8％，炭黑為0.28％，水為40.82％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為34％，維生素A為1.2％，維生素C為5.8％，維生素D為1.5％，沙棘油為51.96％，沒食子酸丙酯為0.14％，蜂蠟為5.4％。
實施例7，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為45％，甘油為18％，對羥基苯甲酸乙酯為0.1％，硫酸鋇為0.75％，果綠為0.2％，水為35.95％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為20％，碳酸鈣為10％，維生素C為5.6％，紅花油為17.52％，豆油為16％，色拉油為28％，特丁基對苯二酚為0.08％，聚乙二醇單硬脂酸脂為2.8％。
實施例8，該大豆異黃酮軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為44％，甘油為20％，對羥基苯甲酸丁酯為0.08％，二氧化鈦為0.65％，炭黑為0.18％，水為 35.09％；該大豆異黃酮軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有大豆異黃酮為25％，維生素A為1％，紅花油為35％，茶油為26.38％，茶多酚為0.12％，乙基纖維素為2.5％。
上述實施例中的大豆異黃酮軟膠囊可通過以下製備工藝得到該製備工藝包括囊殼製備、囊心物製備和軟膠囊壓制，其中
囊殼製備將所需量的水、增塑劑、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不鏽鋼鍋內攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不鏽鋼夾層鍋內，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹後加熱至50℃或60℃或70℃或80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續減壓攪拌30分鐘或50分鐘或70分鐘或90分鐘或110分鐘或120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減速壓脫氣待用；
囊心物製備將稀釋劑加熱至25℃或35℃或45℃或55℃或65℃或75℃或85℃，加入穩定劑混合均勻；待溫度降至25℃或30℃或35℃時，加入抗氧化劑及維生素攪拌均勻；將大豆異黃酮、碳酸鈣(可不加)加入混合液中攪拌均勻並使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；
軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉模壓法壓制軟膠囊；然後進行洗丸、乾燥、包裝得到大豆異黃酮軟膠囊。
下面對上述實施例所得產品即大豆異黃酮軟膠囊進行藥效學試驗、毒理學實驗和穩定性實驗如下
一、藥效學試驗1、子宮增重試驗
選取健康雌性NIH小鼠100隻，體重為11～13g，隨機分組後灌胃給藥，給藥量分別為6.25、12.5、25.0g/公斤體重(以大豆異黃酮計)，每日1次，連續14天，陽性藥給予尼爾雌醇，給藥量為1g/公斤體重，對照組給予等量大豆油。末次給藥後第2天，小鼠稱重，頸椎脫臼處死動物，剖取子宮，精密稱重，計算子宮係數，比較各組的差異。結果見表1。表1結果可見，與空白組相比，大豆異黃酮提取物的大、中劑量和陽性對照藥均能促進未成熟雌性小鼠子宮的發育，增重作用的差異有統計學意義(P＜0.05)，小劑量組增重作用不明顯(P＞0.05)。
表1子宮增重試驗
劑量 子宮重量 子宮係數
組別 N(只)
(g/Kg)(g)(X±SD)(g/10g)
空白對照組18 - 0.02284 0.0111±0.0037
尼爾雌醇 18 1.00 0.04187 0.0212±0.0050*
高劑量組 18 25.0 0.03215 0.0156±0.0061*
中劑量組 18 12.5 0.03571 0.0180±0.0048*
低劑量組 18 6.25 0.02944 0.0146±0.0028
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.012、腦功能試驗
選取健康小鼠60隻，體重為19～21g，隨機分組後按高、中、低劑量及空白對照灌胃給藥，連續給藥15天，末次給藥後2h將小鼠放入跳臺儀中，訓練後將5隻小鼠放入反應箱中，適應3分鐘後通電，記錄小鼠在跳臺上的停留時間(潛伏期)和3分鐘內跳下受刺激的次數(錯誤次數)。將大豆異黃酮提取物的大、中、小劑量和空白組相比，各組間差異採用統計方法進行檢驗。結果見表2。由表2可見，與空白組相比，該軟膠囊具有增加小鼠腦功能的作用。
表2腦功能試驗
劑量
組別N(只) 潛伏期(s) 錯誤次數(次)
(g/Kg)
空白對照組 15 - 49±18 5.20±2.57
試藥高劑量組1525.0 79±28 3.00±1.33*
試藥中劑量組1512.5 74±25 2.00±1.05*
試藥低劑量組156.25 77±21 2.20±1.20*
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.013、對小鼠免疫器官重量的影響
選取健康小鼠60隻，體重為19～21g，隨機分組後按高、中、低劑量及空白對照灌胃給藥，連續給藥15天，末次給藥後6h拉頸處死小鼠，分別稱取胸腺和脾臟的重量(用器官重量/10g體重表示)。結果見表3。由表3可見，與空白組相比，該軟膠囊並不能顯著增加免疫器官的重量。
表3對小鼠免疫器官重量的影響
劑量 胸腺重量 脾臟重量
組別 N(只)
(g/Kg) (mg/10g體重) (mg/10g體重)
對照組 15 -26.49±7.41 56.38±8.72
試藥高劑量組 15 25.0 22.77±5.68 50.52±9.57
試藥中劑量組 15 12.5 27.22±6.85 48.91±11.5
試藥低劑量組 15 6.25 28.86±8.53 53.12±9.72
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.014、對小鼠耐常壓缺氧能力的影響
選取健康小鼠60隻，體重為19～21g，隨機分組後按高、中、低劑量及空白對照灌胃給藥，連續給藥15天，末次給藥後1h，將小鼠放於盛有10g鈉石灰的125ml廣口瓶中，密封。記錄個小鼠在各缺氧條件下的存活時間。結果見表4。由表4可見，與空白組相比，該軟膠囊可以增加小鼠的耐缺氧能力。
表4對小鼠耐常壓缺氧能力的影響
組別N(只)劑量(g/kg) 存活時間(min)
空白對照組 15 - 35.15±2.42
試藥高劑量組1525.0 38.55±2.81*
試藥中劑量組1512.5 39.11±3.18*
試藥低劑量組156.25 38.63±2.54*
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.015、對小鼠遊泳耐力的影響
選取健康小鼠60隻，體重為19～21g，隨機分組後按高、中、低劑量及空白對照灌胃給藥，連續給藥15天，末次給藥後1h，將小鼠放入水深19cm和水溫(29±1)℃的水中，使之不停的遊泳。記錄每隻小鼠自放入水中至沉入水底死亡的時間即遊泳時間，以此反映小鼠的遊泳耐力。結果見表5。由表5可見，與空白組相比，該軟膠囊可以增加小鼠的遊泳耐力。
表5對小鼠遊泳耐力的影響
組別 N(只) 劑量(g/Kg)遊泳時間(min)
空白對照組15 - 160±53
試藥高劑量組 1525.0 185±29
試藥中劑量組 1512.5 217±57*
試藥低劑量組 156.25 209±38*
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.01
結論通過以上實驗結果表明，子宮增重試驗表明大豆異黃酮軟膠囊具有弱的雌激素樣作用，有可能改善更年期婦女雌激素水平下降所導致的症狀同時又避免了雌激素類化合物的副作用，而這恰恰是植物雌激素所具有的優點；跳臺試驗表明該軟膠囊可改善實驗動物的記憶力，具有一定抗衰老的功能；遊泳試驗與耐高溫試驗表明該軟膠囊能延長小鼠的生存時間，提示該膠囊具有一定的抗衰老活性；但藥效試驗同時也表明該軟膠囊不能增加免疫器官的重量，說明其對免疫系統的作用不顯著。
二、毒理學實驗1、劑量設計樣品對人體最大推薦劑量為每日0.8g/60kg·bw，除急性經口毒性試驗外，其他各項動物毒性試驗均按人體推薦量的25、50、100倍即0.335、0.670、1.34g/60kg·bw給予。分別稱取樣品6.7、13.4、26.8g加葵花籽色拉油定容至100ml，配製成6.7％、13.4％、26.85％的油溶液，葵花籽色拉油作溶劑對照，各劑量組動物均按5ml/kg·bw等容積灌胃。2、急性經口毒性試驗
選用ICR小白鼠20隻，體重18-22g，Wistar大鼠20隻，體重181-238g，雌雄各半。採用最大限量法，大、小鼠劑量均為10.0g/60kg·bw。去受試動物按10ml/kg·bw灌胃，動物灌胃後有輕度腹瀉，無其他不良症狀，觀察2周，無一死亡。大、小鼠急性經口毒性LD50均大於10.0g/60kg·bw。3、微核試驗
選用ICR小白鼠50隻，體重25-30g，隨機分為5組，每組10隻，雌雄各半。各劑量組均按5ml/kg·bw給予6.7％、13.4％、26.85％的油溶液等容積灌胃，陽性對照組(環磷醯胺)40mg/kg·bw兩次腹腔注射。試驗採用二次給樣法，於末次給藥後6h，按常規取材、製片、鏡檢，每隻動物計數1000個骨髓嗜多染紅細胞並計算其微核率，結果見表6。由表6可見，樣品各劑量組小鼠嗜多染紅細胞微核率與陰性對照組相比，經泊松分布檢驗(P＞0.05)，差異無統計學意義，而陽性組與陰性組比較(P＜0.01)，差異有統計學意義，即樣品微核試驗結果為陰性。
表6微核試驗結果
受檢含微核
組別N(只) 微核率(‰)P值 PCE/NCE
PCE PCE
陰性對照 5 5×10004 0.8±1.30 0.90±0.10
低劑量組 5 5×10004 0.8±1.301.0000.86±0.16雌
中劑量組 5 5×10004 0.8±1.301.0000.96±0.34性
高劑量組 5 5×10006 1.2±1.300.5260.94±0.18
陽性對照 5 5×1000489.6±6.310.0000.99±0.13
陰性對照 5 5×10004 0.8±0.84 1.01±0.33
低劑量組 5 5×10005 1.0±1.410.7351.03±0.27雄
中劑量組 5 5×10005 1.0±0.710.7380.97±0.32性
高劑量組 5 5×10006 1.2±0.450.5260.92±0.18
陽性對照 5 5×10005210±4.67 0.0000.96±0.12
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.014、精子畸形試驗
選用ICR雄性小鼠25隻(25-33g)，隨機分為5組，每組5隻。各試驗組劑量及陰性對照組均同於微核試驗，陽性對照組給予環磷醯胺，按40mg/kg·bw腹腔注射。動物連續灌胃5天，與第一次灌胃後35天按常規取材、製片、鏡檢。每隻動物計數1000個精子並計算其畸變率。結果見表7。
表7精子畸形試驗
畸變精子數
組別 N(只)畸變率(％) P值
(個)
陰性對照 5 1312.62
低劑量組 5 1152.30 0.307
中劑量組 5 1442.88 0.432
高劑量組 5 1563.12 0.140
陽性對照 5 4909.80 0.000
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.01由表7可見，樣品各劑量組小鼠的精子畸形率與陰性對照組相比，經泊松分布檢驗(P＞0.05)，差異無統計學意義，而陽性組與陰性組比較(P＜0.01)，差異有統計學意義，即精子畸形試驗結果為陰性。5、Ames試驗5.1試驗菌種組氨酸缺陷型鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102及大鼠肝勻漿均由中國預防醫學科學院勞衛所分子毒理室提供，其生物學性狀經鑑定合格。5.2陽性劑
-S9TA97、TA98均為2，4，7-三硝基芴酮(0.4μg/皿)；TA100為疊氮鈉(1.5μg/皿)；TA102為絲裂黴素(1.0μg/皿)。
+S9TA97、TA98、TA100均為2，-氨基芴(20μg/皿)；TA102為1，8-二羥基蒽醌(50μg/皿)。5.3方法
採用標準平皿摻入法，在加與不加S9活化系統的情況下劑量以樣品膠囊內容物計，設0.016、0.08、0.40、2.00、10.0mg/皿、自發回變、溶劑對照(葵花籽色拉油)及陽性對照8個組進行致突變試驗。在實驗條件和試驗菌種完全相同的情況下重複做兩次試驗。結果見表8、9。
表8 Ames試驗結果(一)
劑量(mg/皿) TA97 TA98 TA100TA102
自發回變-S9193±13.035±9.5 193±24.3 247±38.6
+S9209±6.2049.5±13.4 143±38.0 239±17.1
溶劑對照-S9190±11.547±11.6 168±42.3 273±19.0
+S9190±14.238±15.4 162±29.1 289±11.6
0.016 -S9184±17.642±8.00 172±17.9 278±19.0
+S9185±8.6042±13.3 161±30.8 289±11.6
0.08-S9176±12.945±14.8 181±11.5 284±18.9
+S9179±17.745±12.2 181±13.0 282±10.0
0.4 -S9194±9.1037±0.6 187±24.2 250±20.0
+S9207±7.2047±15.0 179±20.7 242±32.0
2.0 -S9204±14.544±5.9 187±23.6 248±13.0
+S9172±31.241±2.0 150±26.6 267±64.5
10.0-S9195±12.230±6.1 142±12.5 236±33.5
+S9158±49.537±12.1 170±30.9 267±64.5
陽性對照-S93723±466.5 3941±220.1 971±76.2 1022±123.1
+S91077±66.20 2954±487.0 4042±1157822±98.9
表9 Ames試驗結果(二)
劑量(mg/皿) TA97 TA98TA100 TA102
自發回變 -S9181±25.038±14.0197±23.2274±21.1
+S9184±19.547±14.1160±20.2246±25.1
溶劑對照 -S9179±16.543±13.4179±47.6292±10.6
+S9190±14.645±10.7177±30.7278±18.7
0.016-S9180±13.641±16.8185±8.50288±16.6
+S9192±12.447±9.30186±7.50269±13.7
0.08 -S9173±24.945±13.3169±12.1282±30.3
+S9175±16.741±16.6156±12.5277±18.3
0.4 -S9190±14.740±14.9168±23.4285±11.1
+S9174±14.044±10.0174±33.6295±13.8
2.0 -S9184±9.1045±11.7163±20.7286±15.4
+S9181±13.139±15.4173±17.0270±16.4
10.0 -S9186±8.5 40±17.7183±8.50287±15.0
+S9179±20.543±15.0179±39.7289±19.7
陽性對照 -S93797±259.4 3869±273.4 978±58.71016±152.9
+S91051±56.0 2838±296.5 4051±1131 827±114.0
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.01由表8、9可見，樣品各劑量組回變菌落數均未超過菌種本身自發回變菌落數的兩倍，而陽性組明顯大於自發回變菌落數，表明樣品Ames試驗結果為陰性。6、30天餵養試驗
選用Wistar大鼠80隻，雄性體重66-94g，雌性體重66-95g，隨機分為4組，每組20隻，雌雄各半。各劑量組均按5ml/kg·bw給予6.7％、13.4％、26.85％的油溶液等容積灌胃，溶劑對照組以等容積量的葵花籽油灌胃。每周稱一次體重和剩食，計算其食物攝入量及食物利用率，連續餵養30天後禁食12-16h，摘除眼球取血，進行血液學、生化學檢查，解剖取肝、腎、脾、睪丸等稱重，計算髒體比，並對主要臟器進行病理組織學檢查。試驗數據採用《中國醫學百科全書—醫學統計學》統計軟體包進行統計分析。6.1生長情況及食物利用率
生長情況見表10。食物利用率結果見表11。
表10各實驗組動物體重增長情況(g)
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.01
表11各實驗組動物食物利用率結果
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.01
由表10結果可見，各實驗組與對照組比較，經方差分析，差異無統計學意義(P＞0.05)。表11結果表明，各實驗組與對照組比較，經方差分析，差異無統計學意義(P＞0.05)。6.2血液學檢查
血常規測定結果見表12。表12結果表明，各實驗組與對照組大鼠的各項指標比較，經方差分析，差異無統計學意義(p＞0.05)。白細胞分類結果見表13。表13結果表明，各實驗組與對照組大鼠的白細胞分類指標比較，經方差分析，差異無統計學意義(P＞0.05)。
表12血常規測定結果
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.01
表13白細胞分類結果
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.016.3生化檢查
生化檢查結果見表14、15。生化檢測結果表明，除雄性大鼠低、中、高劑量組血糖值高於對照組，經方差分析組間差異有統計學意義(P＜0.05)，但各劑量組的血糖值與正常大鼠血糖值相比無統計學差異(P＞0.05，正常大鼠血糖值範圍為3.75-8.19)。各實驗組其餘各項生化指標與對照組相比，經方差分析，差異無統計學意義(P＞0.05)
表14 生化檢查結果(一)
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.01
表15生化檢查結果(二)
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.016.4髒體比結果
髒體比結果見表16。結果表明，各實驗組的是主要髒體比與對照組相比，經方差分析，差異無統計學意義(P＞0.05)。
表36各劑量組大鼠髒體比結果
組別N(只) 肝體比(％)腎體比(％) 脾體比(％) 睪體比(％)
對照組10 3.47±0.37 0.75±0.05 0.26±0.02 1.05±0.11雄 低劑量10 3.53±0.13 0.76±0.05 0.24±0.03 1.08±0.06性 中劑量10 3.52±0.20 0.77±0.05 0.24±0.03 1.12±0.10
高劑量10 3.51±0.18 0.78±0.04 0.24±0.02 1.08±0.06
對照組10 3.45±0.25 0.74±0.03 0.28±0.02雌 低劑量10 3.42±0.19 0.76±0.03 0.27±0.02性 中劑量10 3.33±0.12 0.76±0.03 0.26±0.02
高劑量10 3.46±0.34 0.73±0.04 0.25±0.04
與對照組相比*P＜0.05；**P＜0.016.5病理組織學檢查
各組動物大體檢查未見異常，肝、腎、脾、胃、腸、睪丸等臟器的病理組織學檢查結果未見到與實驗因素有關的病變。各組大鼠肝臟少部分膽管數量輕度增生，肝小葉周邊帶肝細胞漿內可將多個細小圓形空泡(脂肪浸潤)，上述所見在程度和範圍上組間無明顯差異。
結論大豆異黃酮軟膠囊對雌雄大小白鼠的急性經口LD50均大於10g/kg；微核試驗、精子畸形試驗和Ames實驗結果均為陰性，無致突變作用；30天餵養試驗結果表明，試驗動物生長情況良好，血液學檢查、生化檢查、主要髒體比及組織病理學檢查結果與對照組相比均無差異，說明在按以上試驗劑量給予動物大豆異黃酮軟膠囊，並未產生明顯毒副作用。毒理實驗結果表明大豆異黃酮軟膠囊在臨床劑量條件下是安全的。
三、穩定性實驗
三批大豆異黃酮軟膠囊供試樣品，在30±2℃，相對溼度60％±5％條件下，在保存時間為零月、一月、二月、三月時分別抽樣，做零月批次、一月批次、二月批次、三月批次的穩定性實驗。實驗結果表明大豆異黃酮、碳酸鈣、各種維生素、酸價、過氧化值、羰基價、黃麴黴素B1、菌落總數、大腸桿菌、黴菌、酵母菌、致病菌均符合質量標準要求。
權利要求
1、一種大豆異黃酮軟膠囊，包括囊心物和囊殼，其特徵在於囊心物按重量百分比含有10～50％的大豆異黃酮、0～35％的碳酸鈣、0～2％的維生素、0～0.2％的抗氧劑、1～10％的囊化穩定劑和餘量的稀釋劑。
2、根據權利要求1所述的大豆異黃酮軟膠囊，其特徵在於囊心物按重量百分比含有10～50％的大豆異黃酮、25～35％的碳酸鈣、0～2％的維生素、0.1～0.2％的抗氧劑、1～10％的囊化穩定劑和餘量的稀釋劑。
3、根據權利要求1或2所述的大豆異黃酮軟膠囊，其特徵在於稀釋劑為花生油、豆油、紅花油、沙棘油、茶油、色拉油、聚乙二醇400、玉米油中的一種或一種以上；或/和，抗氧劑為茶多酚、特丁基對苯二酚(TBHQ)、沒食子酸丙酯(PG)、二丁基羥基甲苯(BHT)中的一種或一種以上；或/和，囊化穩定劑為蜂蠟、羊脂、大豆磷脂、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙二醇單硬脂酸脂、吐溫-80、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000中的一種或一種以上；或/和，囊化穩定劑為蜂蠟、羊脂、大豆磷脂、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙二醇單硬脂酸脂、吐溫-80、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000中的一種或一種以上；或/和，維生素是維生素A、維生素C、維生素D、維生素E中的一種或一種以上。
4、據權利要求1或2所述的大豆異黃酮軟膠囊，其特徵在於囊殼按原料重量百分比含有35～45％的明膠、18～22％的增塑劑、0.08～0.11％的防腐劑、0～1％的遮蔽劑、0～0.35％的色素、0～0.07％的矯味劑和餘量的水。
5、根據權利要求3所述的大豆異黃酮軟膠囊，其特徵在於囊殼按原料重量百分比含有35～45％的明膠、18～22％的增塑劑、0.08～0.11％的防腐劑、0～1％的遮蔽劑、0～0.35％的色素、0～0.07％的矯味劑和餘量的水。
6、根據權利要求4所述的大豆異黃酮軟膠囊，其特徵在於增塑劑是甘油、山梨醇中的一種或一種以上；或/和，防腐劑是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上；或/和，遮蔽劑是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上；或/和，色素是檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、可可棕、炭黑、果綠中的一種或一種以上；或/和，矯味劑是乙基香蘭醛、香精油、蔗糖中的一種或一種以上。
7、根據權利要求5所述的大豆異黃酮軟膠囊，其特徵在於增塑劑是甘油、山梨醇中的一種或一種以上；或/和，防腐劑是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上；或/和，遮蔽劑是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上；或/和，色素是檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、可可棕、炭黑、果綠中的一種或一種以上；或/和，矯味劑是乙基香蘭醛、香精油、蔗糖中的一種或一種以上。
8、一種根據權利要求1或2或5或6或7所述的大豆異黃酮軟膠囊製備工藝，包括囊殼製備、囊心物製備和軟膠囊壓制，其特徵在於
囊殼製備將所需量的水、增塑劑、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不鏽鋼鍋內攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不鏽鋼夾層鍋內，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹後加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減速壓脫氣待用；
囊心物製備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入穩定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入抗氧化劑及維生素攪拌均勻；將大豆異黃酮、碳酸鈣(可不加)加入混合液中攪拌均勻並使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；
軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉模壓法壓制軟膠囊；然後進行洗丸、乾燥、包裝得到大豆異黃酮軟膠囊。
9、一種根據權利要求3所述的大豆異黃酮軟膠囊製備工藝，包括囊殼製備、囊心物製備和軟膠囊壓制，其特徵在於
囊殼製備將所需量的水、增塑劑、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不鏽鋼鍋內攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不鏽鋼夾層鍋內，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹後加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減速壓脫氣待用；
囊心物製備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入穩定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入抗氧化劑及維生素攪拌均勻；將大豆異黃酮、碳酸鈣(可不加)加入混合液中攪拌均勻並使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；
軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉模壓法壓制軟膠囊；然後進行洗丸、乾燥、包裝得到大豆異黃酮軟膠囊。
10、一種根據權利要求4所述的大豆異黃酮軟膠囊製備工藝，包括囊殼製備、囊心物製備和軟膠囊壓制，其特徵在於
囊殼製備將所需量的水、增塑劑、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不鏽鋼鍋內攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不鏽鋼夾層鍋內，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹後加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減速壓脫氣待用；
囊心物製備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入穩定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入抗氧化劑及維生素攪拌均勻；將大豆異黃酮、碳酸鈣(可不加)加入混合液中攪拌均勻並使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；
軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉模壓法壓制軟膠囊；然後進行洗丸、乾燥、包裝得到大豆異黃酮軟膠囊。
全文摘要
一種大豆異黃酮軟膠囊，包括囊心物和囊殼，其囊心物按重量百分比含有10～50％的大豆異黃酮、0～35％的碳酸鈣、0～2％的維生素、0～0.2％的抗氧劑、1～10％的囊化穩定劑和餘量的稀釋劑；其製備工藝包括囊殼製備、囊心物製備和軟膠囊壓制；其產品質量穩定，相對其它劑型其生物利用度更高、吸收更好，在臨床劑量條件下是安全的，具有弱的雌激素樣作用，能改善更年期婦女雌激素水平下降所導致的症狀同時又避免了雌激素類化合物的副作用，如更年期綜合症、骨質疏鬆、血脂升高等；同時，具有一定的抗衰老活性，還可用於防治乳腺癌、子宮內膜癌、前列腺和直腸腫瘤等；還具有提高機體免疫功能，抗炎、抗疲勞、降低膽固醇並能預防心血管疾病的發生。
文檔編號A61P15/00GK1475213SQ0314551
公開日2004年2月18日 申請日期2003年6月26日 優先權日2003年6月26日
發明者高曉黎, 馬桂芝, 馮崴 申請人:新疆特豐藥業股份有限公司