小孔徑過濾裝置的製作方法

2023-10-10 10:49:34

專利名稱：小孔徑過濾裝置的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種小孔徑過濾裝置，用於膜片過濾富集樣品。
背景技術：
某些膜片本身對某些物質具有較強的吸附能力，或將膜片進行處理也可增強或增加對某些物質的吸附能力。因此採用膜片吸附原理已經建立了很多檢測方法。很多「試紙檢測」多利用此原理，如採用試紙進行酶聯吸附免疫檢測等。為了進一步提高膜片法檢測某些物質的靈敏度，目前採用的常見方式有三1)將某些稀薄的樣品進行濃縮後再點樣檢測；2)在膜上同一位置反覆點樣，使樣品得到富集後再檢測；3)將整張膜片浸泡在樣品溶液中，進行樣品富集後再檢測。以上第一種方法需要一定的濃縮設備和濃縮操作，如冷凍乾燥機等，增加了操作難度和操作時間，不利於不穩定物質的檢測；第二種方法由於在膜片的同一位置反覆點樣， 需要對樣品進行著色處理，否則同一位置不好確定，加入著色劑本身就是對樣品的一種汙染，同時經驗表明，在同一位置反覆點樣或出現滲透現象，導致檢測斑點不均一，不利於結果觀察；第三種方法將整張膜片浸泡在樣品溶液中，為了達到富集效果，吸附平衡需要的時間長，常需要過夜，同時由於整張膜片均吸附了樣品，導致整張膜片均顯色，信號對比差，常需另設陰性對照，不利於檢測結果判斷。對於採用膜片吸附或富集原理進行的物質檢測，為了提高檢測的靈敏度和檢測限，克服以上不足，特發明一種小孔徑過濾裝置。
發明內容本實用新型發明一種小孔徑過濾裝置，特別適用於將樣品富集到某些膜片上。本實用新型解決其技術問題所採用的技術方案是本裝置由帶小孔的上下兩塊光滑平整的蓋板和固定夾構成。上蓋板通過過濾小孔連接一盛液鬥，下蓋板通過過濾小孔連接下蓋板小孔乳頭進而連接負壓導管，為了方便上蓋板過濾小孔和下蓋板過濾小孔的對接，上下蓋板之間有相互匹配的固定孔和固定栓。為了控制過濾膜片的斑點大小，兩塊光滑平整的蓋板上的小孔直徑為l_5mm，較佳孔徑為2mm。本實用新型的效果是，由於採用過濾接觸方式，樣品溶液與吸附膜片的小塊圓形區域接觸，增加了吸附效率，能夠將較多體積樣品的特定成分富集在膜片的特定小塊圓形區域中，起到高濃度樣品點樣的效果。本裝置能顯著增加膜片吸附檢測方法的靈敏度。
以下結合附圖和實施例對本實用新型進一步說明。

圖1是本實用新型的示意圖；圖2是本實用新型的使用方法示意圖。[0014]以上圖中1.盛液鬥，2.固定夾，3.上蓋板，4.固定孔，5.上蓋板過濾小孔，6.下蓋板過濾小孔，7.固定栓，8.下蓋板，9.下蓋板小孔乳頭，10.負壓導管，11.膜片，12.真空泵。
具體實施方式
參見圖2。使用時，先將負壓導管(10)連接到下蓋板(8)上的下蓋板小孔乳頭(9) 上，隨後將與盛液鬥(1)連接的上蓋板C3)與下蓋板(8)重疊，在兩塊蓋板之間放入一張膜片(11)，確保上蓋板過濾小孔(5)和下蓋板過濾小孔(6)對準並將膜片(11)夾住。對準上蓋板上的兩個固定孔(4)和下蓋板上的固定栓(7)有助於兩塊蓋板過濾小孔的對準。兩塊蓋板和膜片擺放好後，用兩個固定夾( 將兩塊蓋板夾緊固定。隨後將液體樣品加入到盛液鬥(1)中，啟動與負壓導管(10)相連的真空泵(12)，由於負壓作用，盛液鬥(1)中的液體樣品慢慢通過小孔透過膜片(11)，液體樣品中某些物質會在膜片(11)的小孔區域上發生富集(吸附富集作用由膜片的特性決定)，由於上蓋板(3)和下蓋板(8)光滑平整，與膜片 (11)接觸好，因表面張力作用不易發生側滲，因此膜片(11)的非小孔區域則無樣品吸附或很少有品吸附。實施示例PVDF膜對蛋白質有很強的親和力，現比較PVDF膜點樣法、浸泡法和採用本過濾裝置過濾截留法對蛋白質(牛血清白蛋白BSA)的檢查限。點樣法將PVDF膜用甲醇溼潤，在PVDF膜上點樣1 μ 1蛋白質(BSA)溶液，用 0. 25%考馬斯亮藍染色液染色5min，在轉移脫色搖床上用脫色液(甲醇-水-冰醋酸= 4.5 4.5 DlOml洗脫3次，每次5min，脫去背景色，可見第6個斑點，樣品中蛋白質的檢查限量約為12μ g/ml。(點樣方法從左至右蛋白質(牛血清白蛋白)濃度依次均為9mg/ ml、3mg/ml、lmg/ml、0. 33mg/ml、0. lmg/ml>37 μ g/ml、12 μ g/ml、4μ g/ml、1· 3 μ g/ml、0μ g/ ml，點樣量為1 μ 1。)浸泡法將PVDF膜裁成9mm2大小的膜片，用甲醇溼潤後浸泡在Iml蛋白質(BSA) 樣品溶液中，於轉移脫色搖床上振搖(30rpm，20-25°C)過夜(15小時)。隨後將PVDF膜片取出，用0.25%考馬斯亮藍染色液(用脫色液配製)染色5min。再用脫色液(甲醇-水-冰醋酸=4.5 4.5 1)在轉移脫色搖床上脫色3-5次，每次5min，脫去背景色，以陰性對照膜片基本無色為度。結果表明PVDF膜浸泡法對微量蛋白質的檢查限量為1.4yg/ml。採用本發明裝置過濾截留法將PVDF膜用甲醇溼潤後安裝在濾過孔徑為2mm的小孔徑過濾裝置上，連接真空泵。隨後將蛋白質(BSA)樣品溶液0.5ml加到濾器上，啟動真空泵，樣品溶液從濾孔穿過PVDF膜。之後用0. 25%考馬斯亮藍染色液染色5分鐘，在轉移脫色搖床上用脫色液(甲醇-水-冰醋酸=4. 5 4.5 DlOml洗脫3次，每次5分鐘，脫去背景色，結果表明，當過濾體積為0. 5ml時，本法的蛋白質檢測限量為(點7)137ng/ml。以上結果表明，在本發明裝置的幫助下，PVDF膜檢查蛋白質的靈敏度顯著提高，約是點樣法的100倍，浸泡法的10倍，且檢測過程中不需要將樣品進行濃縮處理，濾過所耗時間短，具有簡單快捷的特點。
權利要求1.一種小孔徑過濾裝置，由帶小孔的上下兩塊光滑平整的蓋板和固定夾構成。
2.根據權利要求1所述的小孔徑過濾裝置，其特徵是兩塊光滑平整的蓋板上的小孔直徑為l-5mm。
3.根據權利要求1所述的小孔徑過濾裝置，其特徵是上蓋板連有盛液鬥。
4.根據權利要求1所述的小孔徑過濾裝置，其特徵是下蓋板通過過濾小孔連接下蓋板小孔乳頭進而連接負壓導管。
5.根據權利要求1所述的小孔徑過濾裝置，其特徵是上下蓋板之間有相互匹配的固定孔和固定栓。
專利摘要一種操作簡便的小孔徑過濾裝置。它由帶小孔的上下兩塊光滑平整的蓋板和固定夾構成，上蓋板通過過濾小孔連接一盛液鬥，下蓋板通過過濾小孔連接下蓋板小孔乳頭進而連接負壓導管，為了方便上蓋板過濾小孔和下蓋板過濾小孔對接，在上下蓋板分別設有固定孔和固定栓。兩塊光滑平整的蓋板上的小孔直徑為1-5mm。將特異吸附膜片夾在上下蓋板的小孔中間進行抽濾，樣品中某些物質被膜片吸附富集，能顯著增加採用膜片吸附檢測方法的靈敏度。
文檔編號G01N1/40GK202177540SQ201120097448
公開日2012年3月28日 申請日期2011年4月6日 優先權日2011年4月6日
發明者雲宇, 段為鋼 申請人:雲宇