單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑及其製備方法
2023-10-27 06:01:42 2
單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑及其製備方法
【專利摘要】本發明涉及一種單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑及其製備方法。本發明採用膜乳化技術製備單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，直接將無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中，加入無菌L-賴氨酸調節PH值，使其全部溶解，得硫酸頭孢喹肟/l賴氨酸的水溶液，為連續相；將含有抗氧化劑的注射用磷脂、膽固醇溶解於乙醇中，為分散相；將分散相在壓力作用下透過多孔質膜分散在連續相中，減壓除去乙醇，經除菌、分裝，冷凍乾燥即得注射用單分散納米硫酸頭孢喹肟製劑。該發明所提供的製備方法簡單，製備的微粒尺寸均一、包封率高、穩定性好，乳化過程能耗較低、條件溫和，重現性較好，增加硫酸頭孢喹肟藥物的穩定性，降低了其毒副作用，提高了藥物利用度，並且製備工藝簡單，適合工業化生產。
【專利說明】單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑及其製備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種含有納米硫酸頭孢喹肟的藥物組合物及其製備方法，特別是一種單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑及其製備方法。
【背景技術】
[0002]頭孢喹諾又名頭孢喹I虧、頭孢喹咪，商品名為克百特(Cobactan，是德國HoechstAG研製開發的第I個動物專用第4代頭孢類抗生素，1993年首次批准上市，1994年英國英特威公司(Intervet)也隨之上市。頭孢喹諾的分子式為C23H24N6O5S2，相對分子質量528.60Da，化學名稱為:(6R — 7R) — 7 — [ (Z) — 2 — (2 一氨基一 4 一噻唑基)一 2—甲氧亞氨基乙醯氨基]一 3 — [(5，6，7，8 —四氫喹啉基一 I 一甲基]一 8 —氧代一 5—硫雜一1 一氮雜雙環[4.2.0]辛一 2 —烯一羧酸鹽。頭孢喹諾以抗菌譜廣、抗菌活性強、耐受性低等優點深受獸醫臨床工作者歡迎。國外學者研究發現，頭孢喹諾對革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G_)均顯示良好的抗菌活性。對β_內醯胺酶高度穩定。目前已被歐盟獸用藥品委員會(CVMP)批准用於豬、牛的呼吸道細菌感染和奶牛乳房炎等疾病的臨床治療。
[0003]目前市場上現有的注射用硫酸頭孢喹肟主要是硫酸頭孢喹肟的混懸劑、硫酸頭孢喹肟與碳酸鈉復配粉和凍乾粉，在實際使用過程中硫酸頭孢喹肟混懸劑出現聚集沉降等現象，尤其在低溫下表現明顯。而粉針劑由於採用碳酸鈉作為助溶劑，在使用過程中易產生氣泡和崩瓶等現象，同時，目前的硫酸頭孢喹肟製劑的穩定性較差，長期存放，聚合物增加較快，有關物質增加較多，在使用過程中存在較為嚴重的質量風險。
[0004]中國專利文件CN10347407A公開了一種製備硫酸頭孢喹肟注射劑的製備方法，是將硫酸頭孢喹肟微粉加入到混有抗氧劑的酯類或脂類有幾溶劑中，用膠體磨磨細，製成混懸劑、分裝、滅菌而成。這樣製成的混懸劑產品的粒度和均一性難以保障，能耗大、生產效率低、微粒粒徑大且分布範圍廣、體系重現性差等缺點。且膠體磨本身容易脫落異物、未經滅菌的硫酸頭孢喹肟本身會含有不溶性顆粒，生產的硫酸頭孢喹肟注射劑質量極不穩定，不溶性微粒難以合格。
[0005]中國專利文件CN101987100A公開了一種硫酸頭孢喹肟混懸劑注射液的製備方法，其採採用硫酸頭孢喹肟微粉加入到注射用油中，用高壓勻質機進行勻質，鈷60照射滅菌。由於該產品在鈷60照射下極不穩定，易分解產生雜質，不良反應增加，且用該法進行滅菌是產品滅菌不徹底。
[0006]脂質體(liposome)自60年代末問世以來,70年代初便開始作為藥物載體應用。它是一種定向藥物載體，具有類細胞結構，進入體內主要被網狀內皮系統吞噬而激活機體的自身免疫功能並改變被包封藥物的體內分布，使得藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積累，從而提高藥物的治療指數、減少藥物治療劑量和降低藥物毒性。
[0007]中國抗生素雜誌【2001，26 (2):123_126】報導了兩性黴素B是一種有效的抗真菌藥物，但對多數哺乳動物的毒性也較大。若用脂質體包封，則可使其毒性顯著降低而不影響抗真菌活性。
【發明內容】
[0008]本發明的目的在於提供一種單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑及其製備方法，主要解決現有技術製備注射用硫酸頭孢喹肟製劑的穩定性和均一性較差，滅菌過程中產品不穩定，無菌生產過程中難以保證不溶性微粒，長期放置有關物質增加很多，且在常溫下難以儲存，不能滿足有效期時間內的質量要求等技術問題，為硫酸頭孢喹肟的使用和儲存提供了更加可靠的技術支持，降低了產品的毒性，提高了產品的療效。
[0009]為實現上述目的，本發明是這樣實現的。
[0010]一種單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:該製劑含有如下重量比的組分:
[0011]
硫酸頭孢喹肟1-5
胺基酸O 6~1.5
磷脂2.0~4.0
膽固醇0.6~1.2
抗氧化劑O 05~0.2
[0012]優選(重量比):
[0013]
硫酸頭孢喹肟1~3
L-賴氨酸0.6~1.2
磷脂2.5~3.5
膽固醇0.6~1.0
抗氧化劑0.06~0.15
[0014]進一步優選(重量比):
[0015]
硫酸頭孢喹肟1~2
L-賴氨酸酸0.8~1.0
磷脂2.8~3.0
膽固醇0.6~0.8
[0016]
抗氧化劑0.08~0.1[0017]更優選(重量比):
[0018]
硫酸頭孢喹肟I
L-賴氨酸I
磷脂3.5
膽固醇0.8
抗氧化劑0.12ο
[0019]所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:所述的磷脂選自蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、雙硬脂酸卵磷脂、大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、雙軟脂酸卵磷脂和雙肉豆蘧酸卵磷、雙肉豆蘧酸磷脂醯甘油、雙月桂酸磷脂醯甘油、雙硬脂酸磷脂醯甘油、雙肉豆蘧酸磷脂酸、雙硬脂酸磷脂酸、雙月桂酸磷脂酸、雙軟脂酸磷脂酸、雙油酸磷脂醯絲氨酸或雙亞油酸磷脂醯肌醇中的一種或幾種。該磷脂沒有特別限制，只要能用於注射劑即可。這些磷脂可以單獨使用，也可以兩種或以上混合使用，當混合使用時，配方磷脂的量是指混合磷脂的總量。
[0020]所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:所述的抗氧化劑為亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、抗壞血酸、維生素E中的一種或者幾種。其中優選為維生素Ε。
[0021]所述的單分散納米硫酸 頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:所述的胺基酸是賴氨酸、精氨酸、色氨酸或半胱氨酸中的一種。胺基酸優選為L-賴氨酸；可以列舉的胺基酸有L-精氨酸、L-賴氨酸、L-組氨酸/L-半胱氨酸等。
[0022]所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備方法，其特徵在於:該方法包括如下步驟:
[0023]I)連續相的製備:室溫下向反應釜中加入無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中；加入無菌胺基酸調節pH值至5~7，使其全部溶解，得硫酸頭孢喹肟/胺基酸的水溶液；硫酸頭孢喹肟與注射用水的重量比為1:5~100 (優選1:5~50，更優選1:5 — 10)；
[0024]2)分散相的製備:向反應釜中將注射用磷脂、膽固醇、抗氧化劑溶解於乙醇中，得到分散相；磷脂與乙醇的重量比為1:10~40 (優選1:10~30，最優選1:20)；
[0025]3)單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備:將分散相在壓力作用下透過多孔質膜均勻注入到連續相中，再用0.45 μ m的微孔濾膜過濾，最後通過0.22 μ m的微孔濾膜過濾，分裝，經冷凍乾燥即得單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑。
[0026]本發明硫酸頭孢喹肟脂質體製劑是由硫酸頭孢喹肟、L-賴氨酸、注射用水、磷脂、膽固醇、抗氧化劑、乙醇製備而成，由於本發明脂質體製劑的最終劑型為凍乾粉針劑，因此，製備過程中用做溶劑的注射用水和乙醇均會通過減壓或者凍幹過程出去，因此最終的製劑中並不含有水和乙醇，但由於工藝等因素，最終製劑中存在藥學允許含量的溶劑也是可以理解的，例如製劑中可能含有重量百分含量O~0.5%的乙醇。
[0027]所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備方法，其特徵在於:所述的步驟3)多孔質膜為無機陶瓷膜或玻璃膜，膜的孔徑為IOOnm~500nm。
[0028]本發明採用膜乳化技術製備單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，直接將無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中，加入無菌L-賴氨酸調節PH值，使其全部溶解，得硫酸頭孢喹月虧/賴氨酸的水溶液，為連續相；將含有抗氧化劑的注射用磷脂、膽固醇溶解於乙醇中，為分散相；將分散相在壓力作用下透過多孔質膜分散在連續相中，減壓除去乙醇，經除菌、分裝，冷凍乾燥即得注射用單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑。該發明所提供的製備方法簡單，製備的微粒尺寸均一、包封率高、穩定性好，乳化過程能耗較低、條件溫和，重現性較好，脂質體增加硫酸頭孢喹肟藥物的穩定性，降低了其毒副作用，提高了藥物利用度。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0029]圖1是實施例2製備得到的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體的粒徑分布圖。測量儀器:Mastersizer粒度分析儀(英國MALVERN公司)。
【具體實施方式】
[0030]下面結合附圖和實施例對本發明做進一步說明，但不限於此。
[0031]實施例1:
[0032]配方:
[0033]
硫酸頭孢喹肟100g
L一賴氨酸75g
注射用水800ml 大豆卵磷脂280g
膽固醇70g
維生素E120mg
乙醇550ml
[0034]製備工藝:
[0035]I)連續相的製備:室溫下向反應釜中加入無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中；加入無菌L-賴氨酸調節ph值，使其全部溶解,得硫酸頭孢喹廂/賴氨酸的水溶液。加入完畢，調節Ph值5.6 ;其中無菌硫酸頭孢喹肟的重量以C23H24N6O5S2.H2SO4.H2O計。
[0036]2)分散相的製備:向反應釜中將注射用磷脂、膽固醇、抗氧化劑溶解於乙醇中，攪拌得到分散相溶液；
[0037]3)單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備:將分散相在壓力(0.1千帕)作用下透過多孔質膜均勻注入到連續相中，減壓除去乙醇，再用0.45 μ m的微孔濾膜過濾，最後通過0.22 μ m的微 孔濾膜過濾，分裝，經冷凍乾燥即得單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑。[0038]實施例2:
[0039]配方:
[0040]
硫酸頭孢喹肟100g L 一賴氨酸80g
注射用水1000ml
雙硬脂酸卵磷脂290g 膽固醇68g
維生素E1lOmg 乙酹700ml
[0041]製備工藝:
[0042]I)連續相的製備:室溫下向反應釜中加入無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中；加入無菌L-賴氨酸調節ph值，使其全部溶解,得硫酸頭孢喹廂/賴氨酸的水溶液；加入完畢，調節Ph值6.1 ;其中無菌β -硫酸頭孢喹肟的重量以C23H24N6O5S2.H2SO4.H2O計。
[0043]2)分散相的製備:向反應釜中將注射用磷脂、膽固醇、維生素E溶解於乙醇中，得到分散相；
[0044]3)單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備:將分散相在壓力作用下透過多孔質膜均勻注入到連續相中，減壓除去乙醇，再用0.45 μ m的微孔濾膜過濾，最後通過
0.22 μ m的微孔濾膜過濾，分裝，經冷凍乾燥即得單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑。實施例2製備得到的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體的粒徑分布如圖1所示。
[0045]實施例3:
[0046]配方:
[0047]
硫酸頭孢喹肟100g L一賴氨酸80g
注射用水800ml
雙硬脂酸磷脂醯甘油300g 膽固醇70g
維生素E120mg 乙醇750ml
[0048]製備工藝:[0049]I)連續相的製備:室溫下向反應釜中加入無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中；加入無菌L-賴氨酸調節ph值，使其全部溶解,得硫酸頭孢喹廂/賴氨酸的水溶液；加入完畢，調節pH值6.5 ;其中無菌硫酸頭孢喹肟的重量以C23H24N6O5S2.H2SO4.H2O計。
[0050]2)分散相的製備:向反應釜中將注射用磷脂、膽固醇、抗氧化劑溶解於乙醇中，得到分散相；
[0051]3)單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備:將分散相在壓力作用下透過多孔質膜均勻注入到連續相中，減壓除去乙醇，再用0.45 μ m的微孔濾膜過濾，最後通過
0.22 μ m的微孔濾膜過濾，分裝，經冷凍乾燥即得單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑。
[0052]實施例4:
[0053]配方:
[0054]
硫酸頭孢喹肟100gL—賴氨酸100g
注射用水1000ml 雙硬脂酸磷脂醯甘油350g
膽固醇80g
維生素E120mg
乙醇800ml
[0055]製備工藝:
[0056]I)連續相的製備:室溫下向反應釜中加入無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中；加入無菌L-精氨酸調節pH值，使其全部溶解,得硫酸頭孢喹廂/賴氨酸的水溶液；加入完畢，調節Ph值6.9 ;其中無菌β -硫酸頭孢喹肟的重量以C23H24N6O5S2.H2SO4.H2O計。
[0057]2)分散相的製備:向反應釜中將注射用磷脂、膽固醇、抗氧化劑溶解於乙醇中，得到分散相；
[0058]3)單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備:將分散相在壓力作用下透過多孔質膜均勻注入到連續相中，減壓除去乙醇，再用0.45 μ m的微孔濾膜過濾，最後通過
0.22 μ m的微孔濾膜過濾，分裝，經冷凍乾燥即得單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑。
[0059]實施例5:質量研究考察
[0060]對以上4個實施例中製得的樣品進行質量檢測，並同時進行高溫40°C、相對溼度75% ±5%條件下加速試驗6個月和溫度25°C、相對溼度60% ±10%條件下長期試驗18個月，得到數據結果如下:
[0061]表1本發明單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體注射劑O天質量檢測結果
[0062]
[HIph I總雜 I最大單雜 [Wi
【權利要求】
1.一種單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:該製劑含有如下重量比的組分:
硫酸頭孢喹肟I~5胺基酸O 6~1.5磷脂2.0~4.0膽固醇O 6~1.2抗氧化劑0.05~0.2。
2.根據權利要求1所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:所述的磷脂選自蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、雙硬脂酸卵磷脂、大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、雙軟脂酸卵磷脂和雙肉豆蘧酸卵磷、雙肉豆蘧酸磷脂醯甘油、雙月桂酸磷脂醯甘油、雙硬脂酸磷脂醯甘油、雙肉豆蘧酸磷脂酸、雙硬脂酸磷脂酸、雙月桂酸磷脂酸、雙軟脂酸磷脂酸、雙油酸磷脂醯絲氨酸或雙亞油酸磷脂醯肌醇中的一種或幾種。
3.根據權利要求1所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:所述的抗氧化劑為亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、抗壞血酸、維生素E中的一種或者幾種。
4.據根據權利要求1所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑，其特徵在於:所述的胺基酸是賴氨酸、精氨酸、色氨酸或半胱氨酸中的一種。
5.根據權利要求1或2或3或4所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備方法，其特徵在於:該方法包括如下步驟: 1)連續相的製備:室溫下向反應釜中加入無菌硫酸頭孢喹肟懸浮於注射用水中；加入無菌胺基酸調節PH值至5~7，使其全部溶解，得硫酸頭孢喹肟/胺基酸的水溶液；硫酸頭孢喹肟與注射用水的重量比為1:5~100 ； 2)分散相的製備:向反應釜中將注射用磷脂、膽固醇、抗氧化劑溶解於乙醇中，得到分散相；磷脂與乙醇的重量比為1:10~40 ; 3)單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備:將分散相在壓力作用下透過多孔質膜均勻注入到連續相中，再用0.45 μ m的微孔濾膜過濾，最後通過0.22 μ m的微孔濾膜過濾，分裝，經冷凍乾燥即得單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑。
6.根據權利要求5所述的單分散納米硫酸頭孢喹肟脂質體製劑的製備方法，其特徵在於:所述的步驟3)多孔質膜為無機陶瓷膜或玻璃膜，膜的孔徑為IOOnm~500nm。
【文檔編號】A61K9/19GK103637993SQ201310706008
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年12月20日 優先權日:2013年12月20日
【發明者】龔俊 申請人:湖北領盛製藥有限公司