一種胺基酸植物甾醇酯鹽酸鹽的製備方法
2023-10-29 20:47:12 3
一種胺基酸植物甾醇酯鹽酸鹽的製備方法
【專利摘要】本發明涉及一種胺基酸植物甾醇酯鹽酸鹽的製備方法。本發明採用的技術方案為：採用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、4-二甲氨基吡啶和三乙胺複合催化劑催化植物甾醇與N-叔丁氧羰基胺基酸的酯化，先在0℃下反應2～10h，再升溫至室溫25℃下繼續反應1～22h，反應混合物經矽膠柱層析分離純化得到N-叔丁氧羰基胺基酸植物甾醇酯，將N-叔丁氧羰基胺基酸植物甾醇酯溶於3～4mol/L的氯化氫/乙酸乙酯溶液，在室溫25℃下攪拌反應0～2h，減壓旋轉蒸發除去氯化氫/乙酸乙酯溶劑，得到胺基酸植物甾醇酯鹽酸鹽。本方法操作簡單、能耗低且產率高，產品性質穩定，易於保存。
【專利說明】一種胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽的製備方法
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種備植物留醇衍生物的方法，特別涉及一種胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽的製備方法。本產品的應用開發涉及到食品、醫藥、化工和化妝品等【技術領域】。
【背景技術】
[0002]植物留醇是一類以環戊烷全氫菲為主體骨架的留體化合物，具有非常好的降膽固醇作用。近年來，還發現植物留醇在抗癌、抗炎、抗病毒和提高免疫力等方面具有重要作用，在化妝品工業中可作為乳化劑，目前受到了越來越多的重視。
[0003]然而，游離型植物留醇具有結晶性和難溶性，既不溶於水，在油中的溶解度也很小，限制了它在食品中的應用。目前植物留醇一般只添加於脂肪食品，在低脂肪食品、減肥食品、飲料和其它水基質食品中的應用還受到很大限制，這就要求在不影響植物留醇的生理功能前提下改變植物留醇的形式，改善植物留醇的水溶性，使其便於在食品加工中應用。
[0004]目前植物留醇衍生物主要是酯化型的植物留醇，例如飽和脂肪酸植物留醇酯和不飽和脂肪酸植物留醇酯，目的是改善植物留醇的油溶性。改善植物留醇水溶性的方法多集中在製備微乳體系或者微膠囊包埋等方面，但這兩種方法面臨貯藏穩定性和實際應用中添加形式受限制的問題。關於水溶性植物留醇衍生物的相關報導也比較少，目前只有檸檬酸植物留醇酯和丁二酸植物留醇糖醇酯。胺基酸是人類必須的營養物質，存在於蛋白質中的20種主要胺基酸中有8種人體必需胺基酸，所有的胺基酸都含有極性基團氨基和羧基(除脯氨酸是含亞胺基)，一些胺基酸還含有羥基，如絲氨酸和蘇氨酸，其中有些胺基酸的水溶性很大，如脯氨酸、精氨 酸、賴氨酸、絲氨酸和甘氨酸，它們在水中的溶解度分別達到1620g/L、856g/L、739g/L、422g/L和250g/L，因此胺基酸植物留醇酯的水溶性應該會比植物甾醇的水溶性高，能方便植物留醇在水基質食品中的加工應用，同時胺基酸植物留醇酯能兼有植物留醇和胺基酸兩者的生理活性，生物學效價得到提高。
[0005]目前關於胺基酸植物留醇酯的報導只有一篇文獻，Pang等人以一水硫酸氫鈉為催化劑，以正丁醇為溶劑，植物留醇和穀氨酸在70~90°C下反應6~10小時，但重複該試驗，並不能得到穀氨酸植物留醇酯，嘗試其它胺基酸，在相同反應條件下使其與植物留醇反應，也得不到相應的胺基酸植物留醇酯。本發明探索出一種胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽的高效製備方法，先催化合成N-叔丁氧羰基(B0C-)胺基酸植物留醇酯，再脫除BOC保護基，雖然要分兩步反應，但這兩步反應都不需要加熱和除水措施以促進反應，且第二步BOC脫除方法快速又簡便，脫除率高達99%，產品不需要進一步分離純化。
【發明內容】
[0006]本發明提供一種胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽的製備方法。本方法分兩步進行，第一步使用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、4_ 二甲氨基吡啶(DMAP)和三乙胺(Et3N)複合催化劑催化N-BOC-胺基酸與植物留醇酯化，第二步使用氯化氫/乙酸乙酯溶液脫除BOC保護基，兩步方法都操作簡單、能耗低且產率高，適合用於食品工業生產。[0007]本發明採用以下技術方案:
[0008]使用EDC，DMAP和Et3N複合催化劑催化植物留醇與N-BOC-胺基酸進行酯化，反應溶劑為無水二氯甲烷，間隔一定時間取樣，採用薄層層析(TLC)檢測反應進程，反應結束後反應混合物經矽膠柱層析分離純化得到N-BOC-胺基酸植物留醇酯；將N-BOC-胺基酸植物甾醇酯溶於3~4mol/L的氯化氫/乙酸乙酯溶液，室溫下攪拌反應O~2小時，減壓旋轉蒸發除去氯化氫/乙酸乙酯溶劑，得到胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽；中間體N-BOC-胺基酸豆甾醇酯和產物胺基酸豆留醇酯鹽酸鹽經高效液相色譜(HPLC)測定純度，紅外光譜、質譜和核磁共振波譜進行結構表徵。
[0009]本發明所述的植物留醇為谷留醇、豆留醇、菜油留醇和菜籽留醇中一種或幾種以上的任意比例的混合物。
[0010]本發明所述的N-BOC-胺基酸為N-BOC-甘氨酸、N-BOC-穀氨酸和N-BOC-天冬氨酸。
[0011]本發明所述的植物甾醇與N-BOC-胺基酸的物質的量比為1:1~1: 3，優選1: 1.5;N-B0C-胺基酸與EDC，DMAP和Et3N的物質的量比為l:1:1: 1.5~1:2:2: 3，優選 1: 1.2: 1.2: 1.8。
[0012]本發明所述的反應溫度為先在(TC冰浴下反應2~10小時，再升溫至25°C室溫下反應I~22小時，優選先在0°C下反應8小時，再升溫至25°C室溫下反應16小時。
[0013]本發明所述的N-BOC-胺基酸和植物留醇酯化反應的投料順序為先將EDC和Et3N溶解在無水二氯甲烷中，再加入DMAP和N-BOC-胺基酸在0°C冰浴條件下活化羧基I小時，最後加入植物留醇在O°C冰浴下反應2~10小時之後升至25°C室溫下繼續反應I~22小時。
[0014]本發明所述的矽膠柱層析分離純化，是利用N-BOC-胺基酸植物留醇酯、植物甾醇和N-BOC-胺基酸的極性差異及其在不同溶劑中的溶解性不同來實現，其步驟為:將含N-BOC-胺基酸植物留醇酯反應混合物溶解在三氯甲烷中，洗脫劑為乙酸乙酯/石油醚/甲酸混合溶液(3: 2: 0.05，v/v/v)，對收集到的組分進行液相分析，將同一組分合併，減壓旋轉蒸發除去溶劑，得到N-BOC-胺基酸植物留醇酯純品，並對產品進行紅外、質譜和核磁共振波譜分析表徵。
[0015]本發明中植物留醇的酯化率採用高效液相法測定，分析條件為:symmetry-C18柱(5 μ m,4.6mmX 150mm, Waters),柱溫 35°C,流動相為甲醇:甲酸=1000: l(v/v),流速為
1.0mL/min,使用蒸發光檢測器，載氣為N2，壓力為0.25MPa，漂移管溫度為85°C，噴霧級別為70%，進樣量IOyL0
[0016]本發明的有益效果:
[0017]1.本發明首次合成了甘氨酸植物留醇酯鹽酸鹽、穀氨酸植物留醇酯鹽酸鹽和天冬氨酸植物留醇酯鹽酸鹽，改善了植物留醇的水溶性，拓寬了植物留醇的應用範圍；
[0018]2.反應在0°C冰浴和25°C室溫下即可進行，操作簡單，無需加熱，能耗低；
[0019]3.N-BOC-胺基酸與植物留醇的酯化反應幾乎定量反應，酯化產率高達95%以上，且反應中不需要添加除水劑；
[0020]4.BOC保護基的脫除非常簡便，且脫除率達到99%以上，產品無需再進行分離純化；[0021]5.胺基酸植物甾醇酯鹽酸鹽性質穩定，易於保存。
【具體實施方式】
[0022]下面結合實施例進一步闡明本發明的內容，但本發明所保護的內容不僅僅局限於下面的實施例，本領域內技術人員可以適當修改本發明參數。
[0023]實施例1:
[0024]在反應瓶中加入0.6894g(3.6mmol)EDC和 0.606g(5.4mmol) Et3N，加入無水二氯甲烷溶解，再加入0.4392g(3.6mmol)DMAP和0.525g (3mmol) N-BOC-甘氨酸，在(TC冰浴下磁力攪拌I小時，再加入0.824g(2mmol)豆甾醇，在0°C冰浴下攪拌反應8小時，再升至25°C室溫下反應16小時，採用TLC監測反應進程，HPLC測定酯化率，反應結束後得到N-BOC-甘氨酸豆留醇酯粗產品，用矽膠柱層析法分離純化，得到純品，產率96.6 %。
[0025]將N-BOC-甘氨酸豆甾醇酯純品0.569g(Immol)溶解在50mL3mol/L的氯化氫/乙酸乙酯溶液中，在室溫下磁力攪拌反應0.5小時，減壓旋轉蒸發除去氯化氫/乙酸乙酯溶劑，得到甘氨酸豆留醇酯鹽酸鹽純品。
[0026]中間體N-BOC-甘氨酸豆留醇酯和產物甘氨酸豆留醇酯鹽酸鹽經HPLC、紅外光譜、質譜和核磁共振波譜分析進行結構表徵。
[0027]N-BOC-甘氨酸豆甾醇酯:HPLC 保留時間(min) =10.810 ；IR(v, cm1):1170.61,1206.09 (C-O-C), 1719.39,1752.47 (C = O) ,3369.1O(N-H) ；MS (m/z):592.4 (M+Na) + !1HNMR(400MHz, CDCl3, δ，ppm): δ = 0.68 (3H, s』 18-H)，0.80 (6H, d, J = 8.0Ηζ，26_27_Η)，
0.84 (3H, t, J = 6.0Hz，29-H)，1.02 (6H, m)，1.03 (3H, s, 19-H)，1.10-1.30 (5H, m)，
1.45 (9H, s』 (CH3) 3C-)，1.62-1.50 (8H, m)，1.65-1.73 (2H, m)，1.86-2.09 (5H, m)，2.33 (2H,d, J = 8.0Hz)，3.88 (2H, d, J = 4.0Hz, -CH2CO)，4.64-4.71 (1H, m, 3_H)，5.02 (1H, dd, J=8.0，16.0Hz，22-H or23-H)，5.15(1H, dd, J = 8.0，16.0Hz，22-H or23-H)，5.38 (1H, d,J = 8.0Hz，6-H) ；13C NMR (IOOMHz, CDCl3, δ，ppm): δ = 12.05 (29_CH3)，12.26(18_CH3)，18.99 (21-CH3)，19.29 (19_CH3)，21.02 (26-or27-CH3) ,21.09 (26-or27-CH3) ,21.23 (CH2)，
24.36 (Il-CH2)，25.41 (15_CH2) ,27.71 (CH2)，28.33 ((CH3) 3C_) ,28.91 (CH2) ,31.85 (CH2)，31.89 (2C, 8-and25-CH)，36.58 (quaternary C-10)，36.92 (CH2)，38.03 (CH2)，39.62 (CH2)，40.50 (20-CH) ,42.21 (quaternary C-13)，42.67 (-CH2CO)，50.04 (9-CH) ,51.24 (24-CH)，55.94 (17-CH)，56.79 (14-CH)，75.18 (3-CH) , 79.91 ((CH3) 3C-) , 122.92 (6-CH)，129.31 (22-CH)，138.30(23-CH)，139.36(quaternary C_5)，155.70(CONH)，169.75(CH2C =0)
[0028]甘氨酸豆甾醇酯鹽酸鹽:HPLC保留時間(min):1.479 ；IR( v , cm-1):1217.46 (C-O-C), 1731.67 (C = 0), 1623.65,3397.70 (N-H) ；MS (m/z):470.7 (M-HC1+H) + !1HNMR(400MHz, CDCl3, δ，ppm): δ = 0.70 (3H, s』 18-H) ,0.80 (6H, d, J = 8.0Ηζ，26_27_Η)，
0.84 (3H, t, J = 6.0Hz，29-H)，1.02 (3H, s』 19-H)，0.93-1.08 (6H, m)，1.12-1.28 (5H, m)，
1.38-1.58 (8H, m)，1.61-1.73 (2H, m)，1.86-2.09 (5H, m)，2.33 (2H, d, J = 8.0Hz)，3.40 (2H,s，-CH2CO) ,4.63-4.71 (lH，m，3-H)，5.03 (1H，dd, J = 8.0，16.0Hz，22—H or23_H)，5.16 (1H,dd, J = 8.0，16.0Hz，22-H or23-H), 5.38 (1H, d, J = 8.0Hz，6_H) ；13C 匪R(100MHz，CDCl3, δ , ppm): δ = 12.05 (29_CH3)，12.26 (18_CH3)，18.99 (21_CH3)，19.31 (19_CH3)，21.02 (26-or27-CH3) ,21.09 (26-or27_CH3)，21.23 (CH2) ,24.26 (I 1-CH2)，25.41 (CH2)，27.79 (15-CH2) ,28.91 (CH2) ,31.86 (CH2) ,31.89 (2C, 8-and25_CH) ,36.61 (quaternaryc-10)，36.96 (CH2)，38.14 (CH2)，39.63 (CH2)，40.50 (20-CH)，42.22 (quaternary C-13)，44.25 (-CH2CO)，50.05 (9-CH)，51.24 (24-CH)，55.95 (17-CH)，56.79 (14-CH)，74.61 (3-CH)，122.83(6-CH)，129.31 (22-CH)，138.30(23-CH)，139.49(quaternary C_5)，173.72 (C = 0)
[0029]實施例2:
[0030]在反應瓶中加入0.6894g(3.6mmol)EDC和 0.606g(5.4mmol) Et3N，加入無水二氯甲烷溶解，再加入0.4392g(3.6mmol)DMAP和0.741g(3mmol)N-B0C-穀氨酸，在(TC冰浴下磁力攪拌I小時，再加入0.824g(2mmol)豆甾醇，在0°C冰浴下攪拌反應8小時，再升至25°C室溫下反應16小時，採用TLC監測反應進程，HPLC測定酯化率，反應結束後得到N-BOC-穀氨酸豆留醇酯粗產品，用矽膠柱層析法分離純化，得到純品，產率95.8 %。
[0031]將N-BOC-穀氨酸豆甾醇酯純品0.641g (Immol)溶解在50mL3mol/L的氯化氫/乙酸乙酯溶液中，在室溫下磁力攪拌反應0.5小時，減壓旋轉蒸發除去氯化氫/乙酸乙酯溶劑，得到穀氨酸豆留醇酯鹽酸鹽純品。
[0032]中間體N-BOC-穀氨酸豆留醇酯和產物穀氨酸豆留醇酯鹽酸鹽經HPLC、紅外光譜、質譜和核磁共振波譜分析進行結構表徵。
[0033]N-BOC-穀氨酸豆甾醇酯:HPLC 保留時間(min):10.138 ；IR(v, cm_1):1170.39，1190.97，1253.60(C-O-C)，1720.25，1728.39，1741.17(C = O),3426.73 (N-H)，2500-3700 (O-H) ；MS (m/z):640.1 (M-H)+ NMR (400MHz，CDCl3, δ ,ppm): δ =0.70(3H，s，18-H) ,0.80(6H，d，J = 8.0Hz，26-27-H)，0.84(3H，t，J = 6.0Hz，29-H)，1.03 (3H，s，19-H)，
1.01 (6H, m)，1.14-1.30 (5H, m)，1.45 (9H, s』 (CH3) 3C_)，1.50-1.57 (8H, m)，1.60-1.72 (2H,m)，1.84-2.05 (5H, m)，2.19-2.26 (2H, m, -CH2CH2COOH) ,2.31 (2H, d, J = 8.0Hz)，
2.37-2.46 (2H, m, -CE.C00H)，4.33 (1H, m, -CHC0)，4.61-4.62 (1H, m, 3_H)，5.02 (1H, dd, J=8.0，12.0Hz，22-H or23-H)，5.16 (1H, dd, J = 8.0，12.0Hz，22-H or23-H)，5.37 (1H, d, J=8.0Hz，6-H)，8.04 (1H, s』 -NH-)，10.06 (1H, m, -C00H) ;13CNMR(100MHz，CDCl3, δ，ppm):δ = 12.05 (29-CH3)，12.26 (18_CH3)，19.00 (21-CH3), 19.31 (19_CH3) ,21.02 (26-or27-CH3)，21.09(26-or27-CH3) ,21.24 (CH2) ,24.36 (Il-CH2) ,25.41 (CH2) , 27.33 (CH2CH2COOH)，27.71 (15-CH2) ,28.30 ((CH3) 3C-) , 28.92 (CH2) ,30.85 (-CH2COOH) , 31.86 (8-or25-CH)，31.89 (8-or25-CH) , 36.60 (quaternary C-10) , 36.96 (CH2) , 38.06 (CH2) , 39.63 (CH2)，40.51 (20-CH) ,42.21 (quaternary C-13)，50.04 (9-CH) ,51.25 (24-CH) ,53.01 (-CHC0)，
55.94 (17-CH)，56.79 (14-CH)，74.57 (3-CH)，80.45 ((CH3) 3C-)，122.76 (6-CH)，129.30 (22-CH),138.31 (23-CH),139.52(quaternary C_5),155.78(CONH),172.55(CHC =0)，176.63(-C00H)
[0034]穀氨酸豆甾 醇酯鹽酸鹽:HPLC保留時間(min):3.336 ；IR( v , cm-1):1198.18,1230.17(C-O-C)，1731.92，1744.88(C = 0)，1599.79，3427.81(N-H)，2500-3700(0_H)；MS (m/z):540.1 (M-HCl-H)+ 5? NMR(400MHz, (CD3)2SO, δ，ppm): δ = 0.68 (3H, s，18-H)，0.77 (6H, d, J = 8.0Hz, 26-27-H)，0.82 (3H, t, J = 6.0Hz，29-H)，0.98 (6H, m)，1.01 (3H,s』 19-H)，1.10-1.28 (5H, m)，1.37-1.65 (10H, m)，1.78-2.00 (5H, m)，2.03-2.12 (2H,m, -CH2COOH)，2.28 (2H, d, J = 8.0Hz)，2.40-2.59 (2H, m, CH2CH2COOH) ,3.91 (1H, m, -CHC0)，4.44-4.52 (1H, m, 3_H)，5.03 (1H, dd, J = 8.0，16.0Hz，22-H or23-H)，5.16 (1H, dd, J =8.0，16.0Hz，22-H or23-H), 5.34 (1H, d, J = 8.0Hz，6_H)，8.48 (3H，s』 -NH3+)，13.79 (1H，m, -COOH) ；13C NMR(IOOMHz, (CD3)2SO, δ , ppm): δ = 11.82 (29_CH3), 12.07 (18_CH3)，
18.83 (21-CH3)，18.94 (19_CH3)，20.72 (26-or27-CH3)，20.89 (26-or27-CH3)，21.09 (CH2)，23.85 (Il-CH2)，24.83 (CH2)，25.17 (CH2CH2COOH)，27.30 (15_CH2)，28.45 (CH2)，29.51 (-CH2COOH),31.35 (8-or25-CH),31.35 (8-or25-CH),36.09 (quaternary C-10)，36.47 (CH2)，37.62 (CH2)，39.13 (CH2)，39.88 (20-CH) ,41.73 (quaternary C-13)，50.58 (9-CH)，51.17 (24-CH)，55.35 (17-CH)，56.21 (14-CH)，59.70 (-CHCO)，73.54 (3-CH)，122.07(6-CH)，128.85(22-CH)，137.97(23-CH)，139.44(quaternary C_5)，170.48(CHC =0), 171.05(-C00H)
[0035]實施例3:
[0036]在反應瓶中加入0.6894g(3.6mmol)EDC和 0.606g(5.4mmol) Et3N，加入無水二氯甲烷溶解，再加入0.4392g(3.6mmol)DMAP和0.699g(3mmol)N-B0C-天冬氨酸，在(TC冰浴下磁力攪拌I小時，再加入0.824g(2mmol)豆甾醇，在0°C冰浴下攪拌反應8小時，再升至25°C室溫下反應16小時，採用TLC監測反應進程，HPLC測定酯化率，反應結束後得到N-BOC-天冬氨酸豆留醇酯粗產品，用矽膠柱層析法分離純化，得到純品，產率95.2%。
[0037]將N-BOC-天冬氨酸豆甾醇酯純品0.627g(Immol)溶解在50mL3mol/L的氯化氫/乙酸乙酯溶液中，在室溫下磁力攪拌反應0.5小時，減壓旋轉蒸發除去氯化氫/乙酸乙酯溶劑，得到天冬氨酸豆留醇酯鹽酸鹽純品。
[0038]中間體N-BOC-天冬氨酸豆留醇酯和產物天冬氨酸豆留醇酯鹽酸鹽經HPLC、紅外光譜、質譜和核磁共振波譜分析進行結構表徵。
[0039]N-BOC-天冬氨 酸豆甾醇酯:HPLC 保留時間(min):9.141 ；IR( v , cnT1):1167.79，1190.85，1220.20(C-O-C)，1720.05，1740.23，1750.07 (C = O),3426.27(N-H)，2500-3700 (O-H) ；MS (m/z):626.2 (M-H)+ NMR(400MHz, CDCl3, δ，ppm): δ = 0.70 (3H,s, 18-H) ,0.80 (6H, d, J = 8.0Hz, 26-27-H), 0.84 (3H, t, J = 6.0Hz, 29-H), 1.02 (6H,m)，1.03 (3H, s』 19-H)，1.14-1.30 (5H, m)，1.45 (9H, s, (CH3) 3C_)，1.50-1.61 (8H, m)，
1.65-1.73 (2H, m)，1.85-2.09 (5H, m)，2.29-2.34 (2H, m)，2.78-3.06 (2H, m, -CH2COOH)，
4.53 (1H, m, -CHC0), 4.63-4.71 (1H, m，3_H)，5.02 (1H, dd, J = 8.0，16.0Hz, 22-H or23-H)，
5.16 (1H, dd, J = 8.0,16.0Hz, 22-H or23-H), 5.37 (1H, d, J = 8.0Hz，6_H)，6.22 (1H，m, -NH-) ；13C NMR(100MHz, CDCl3, δ，ppm): δ = 12.08 (29_CH3)，12.24 (18_CH3)，
19.02(21-CH3)，19.32 (19_CH3)，21.08 (2C，26-and27_CH3)，21.26 (CH2)，24.38 (I 1-CH2)，
25.41 (CH2) ,27.68 (15_CH2)，28.33 ((CH3) 3C_)，28.91 (CH2) ,31.90 (2C，8-and25_CH)，
36.60 (quaternary C-10)，36.69 (CH2COOH)，36.95 (CH2) , 37.91 (CH2)，39.67 (CH2)，40.49 (20-CH)，42.25(quaternary C-13)，50.08(2C,9-CH and-CHCO),51.27(24-CH)，
56.00 (17-CH)，56.83 (14-CH)，75.16 (3-CH)，80.30 ((CH3) 3C-)，122.96 (6-CH)，129.37 (22-CH),138.29(23-CH),139.35(quaternary C_5),155.56(CONH),170.27(CHC =0)，176.35(-C00H)
[0040]天冬氨酸豆甾醇酯鹽酸鹽:HPLC保留時間(min):2.545 ；IR( v，cm1):1190.85，1252.46(C-O-C)，1740.23，1746.65(C = 0)，1589.56，3426.91(N-H)，2500-3700(0_H)；MS (m/z):526.1 (M-HCl-H)+ NMR(400MHz, (CD3)2SO, δ，ppm): δ = 0.68 (3H, s，18-H)，0.78 (6H, d, J = 8.0Hz, 26-27-H)，0.82 (3H, t, J = 6.0Hz, 29-H)，0.99 (6H, m)，1.03 (3H,s, 19-H)，1.07-1.24 (5H, m)，1.41-1.70 (10H, m)，1.84-2.06 (5H, m)，2.28-2.30 (2H, m)，2.85-2.94(2H, m, -CH2COOH)，4.22(1H, m, -CHCO)，4.57 (1H, m,3_H)，5.03 (1H, dd, J =8.0,16.0Hz, 22-H or23_H)，5.16 (1H，dd, J = 8.0, 16.0Hz, 22-H or23-H) ,5.36 (1H,d, J = 8.0Hz,6-H) ,9.43 (1H, s, -COOH) ；13C NMR(100 MHz, (CD3)2SO, δ，ppm): δ =
11.82(29-CH3)，12.08(18_CH3)，18.83(21_CH3)，18.93 (19_CH3)，20.53 (26-or27-CH3)，20.90 (26-or27-CH3)，21.09 (CH2)，23.85 (Il-CH2)，24.83 (CH2)，27.05 (15_CH2)，28.43 (CH2)，31.30 (2C, 8-and25-CH)，34.31 (CH2COOH)，36.07 (quaternary C-10)，36.24 (CH2)， 37.51 (CH2)，38.93 (CH2)，39.97 (CH2) ,40.18 (20-CH) ,41.73 (quaternary C-13)，48.57 (9-CH)，49.38 (-CHCO)，50.57 (24-CH)，55.35 (17-CH)，56.17 (14-CH)，75.39 (3-CH)，122.40 (6-CH)，128.86 (22-CH)，137.97(23-CH)，139.07(quaternary C_5)，168.10 (CHC =0)，170.73(-COOH)。
【權利要求】
1.一種胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽的製備方法，其特徵在於所述的方法為:採用1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、4- 二甲氨基吡啶和三乙胺複合催化劑催化植物留醇與N-叔丁氧羰基胺基酸進行酯化反應，先將1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和三乙胺溶解於無水二氯甲烷中，再加入4- 二甲氨基吡啶和N-叔丁氧羰基胺基酸在0°C下攪拌lh，然後加入植物留醇，在0°C下反應2~IOh後，升溫至室溫25°C繼續反應I~22h，反應混合物經矽膠柱層析分離純化得到N-叔丁氧羰基胺基酸植物留醇酯，將N-叔丁氧羰基胺基酸植物留醇酯溶於3~4mol/L的氯化氫/乙酸乙酯溶液，在25°C下攪拌反應O~2h，減壓旋轉蒸發除去氯化氫/乙酸乙酯溶劑，得到胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽。
2.如權利要求1所述的胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽的製備方法，其特徵在於所述的植物甾醇為谷留醇、豆留醇、菜油留醇和菜籽留醇中的一種或幾種以上的任意比例的混合物，所述的N-叔丁氧羰基胺基酸為N-叔丁氧羰基甘氨酸、N-叔丁氧羰基穀氨酸和N-叔丁氧羰基天冬氨酸。
3.如權利要求1所述的胺基酸植物留醇酯鹽酸鹽的製備方法，其特徵在於所述的植物甾醇與N-叔丁氧羰基胺基酸的物質的量比為1:1~1: 3，N-叔丁氧羰基胺基酸與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、4-二甲氨基吡唳和二乙胺的物質的量比為1:1:1: 1.5 ~1: 2: 2: 3。
【文檔編號】C07J41/00GK103724392SQ201310717699
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月18日 優先權日:2013年12月18日
【發明者】賈承勝, 劉萍, 林蔚婷, 張曉鳴 申請人:江南大學