一種促進腸胃蠕動的藥物組合物的製作方法
2023-09-22 19:34:50 1
專利名稱：：一種促進腸胃蠕動的藥物組合物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種促進腸胃蠕動的藥物組合物，屬於中藥製劑
技術領域：
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背景技術：
：苦丁香(甜瓜蒂)，為葫蘆科植物甜瓜(C"C"肌'S777^0Z.)的乾燥果梗。《中藥誌》第五巻4580頁甜瓜蒂和《內蒙古中藥材標準》1988年版64頁苦丁香規定其功能與主治為湧吐痰食，除溼退黃；主治中風，癲癇，喉痺、痰涎壅盛，呼吸不利，宿食不化，胸脘脹痛，溼熱黃疸。傳統將之作為湧吐藥，因其對胃黏膜刺激，反射性地興奮嘔吐中樞而致嘔吐。葫蘆素是中藥甜瓜蒂中的一類主要化學成分。《中草藥》1992年第23巻第11期報導，葫蘆素具有細胞毒和抗腫瘤、保肝、抗肝炎，提高免疫功能，抗化學致癌，增加毛細血管通透性，刺激胃腸道等作用。市場上現有的以苦丁香為原料製成的產品為葫蘆素片，藥品標準收載於中藥部頒標準第19冊，該片劑中的葫蘆素為苦丁香經乙醇提取後精製而得，其中主要含有葫蘆素B，部頒標準規定其含量不得低於60%。葫蘆素片的功能主治為解毒清熱，利溼退黃，用於溼熱毒盛所致遷延性肝炎、慢性肝炎及原發性肝癌的輔助治療。苦丁香傳統功效中並無"通便"功效的記錄，但國外研究報導表明，從噴瓜屬植物^^Wh'鵬e7sten'咖Z中分離得到的葫戸苦素D靜脈注射可使清醒貓和犬出現腹瀉，對麻醉犬也有明顯刺激腸蠕動效果，見[H.Edery,G.SchatzbergPorath,SGitter.PharmacodynamicactivityofELatericin(CcurbitacinD)ArchIntPharmacodyn.1961,13(34):315335]。在腹部各種手術中，由於手術的創傷，加之麻醉的作用，術後24小時內正常的腸蠕動多不能恢復(早期腸麻痺)。同時，由於手術時對腸管的激惹及腹腔滲液，炎症和麻醉藥物的作用等，均影響腸功能恢復，導致腸脹氣甚至腸黏連；而腸黏連又是引起腸梗阻最常見的原因之一。據國外資料報導，剖腹手術後腸黏連發生率約為6070%，其中的5%會出現腸梗阻。這種腸梗阻在行黏連分解術後復發率很高，在15%以上，而且手術次數越多，復發率也越高[陳奇，主編中藥藥效研究思路與方法急性腸梗阻的中藥藥效研究思路與方法人民衛生出版社，2005第l版491492]，故手術後積極預防腸脹氣或腸黏連的發生，促進腸功能的恢復，對手術患者恢復健康有著重要意義。臨床常用的治療腸脹氣或預防腸黏連的方法，是使用如新斯的明或口服各種通裡攻下中藥，或進行灌腸治療，使腸管在術後早期活動。但新斯的明注射給藥，雖具有肯定作用，給藥不受肛門排氣與否的限制，但其引起腸絞痛、腺體分泌增加及肌肉振顫等副作用明顯，見[楊藻宸，江明性醫用藥理學人民衛生出版社1997年第3版116]，影響了臨床的廣泛應用；而口服通裡攻下中藥又受到給藥體積大，術後應肛門排氣(腸蠕動恢復的標誌)後才能飲水進食的限制；灌腸治療病人痛苦很大，因此臨床上沒有較好解決該問題的藥物和治療方案。研究發現，術後給藥時間越早，效果越好[馬桂香，侯丙柱中藥排氣湯預防術後腸脹氣405例臨床分析中國廠礦醫學2002，15(1):7273]。因此，開發出具有給藥簡便，且療效好，痛苦少，不受肛門排氣與否限制的藥物製劑意義重大。
發明內容本發明的目的在於提供一種促進腸、胃蠕動的藥物組合物。本發明的另一目的在於提供上述藥物組合物在製備促進腸、胃蠕動藥物方面的應用。本發明所述的促進腸、胃蠕動藥物組合物含有葫蘆素A、葫蘆素B、葫蘆素E、異葫蘆素B和異葫蘆素D中的至少一種和葫蘆素D;也就是說，本發明所述的藥物組合物在含有葫蘆素D的前提下，還可以含有葫蘆素A、葫蘆素B、葫蘆素E、異葫蘆素B和異葫蘆素D中的一種，或者含有其中的兩種、三種、四種或者五種；例如，含有葫蘆素A和葫蘆素D，含有葫蘆素B和葫蘆素D，含有葫蘆素E和葫蘆素D，含有異葫蘆素B、異葫蘆素D和葫蘆素D，含有葫蘆素B、葫蘆素E和葫蘆素D，等等。在上述藥物組合物中，本發明研究人員優選含有葫蘆素A、葫蘆素E、異葫蘆素B和異葫盧素D中的至少一種、葫蘆素B和葫戸素D。也就是說，本發明所述的藥物組合物在含有葫蘆素B和葫蘆素D的前提下，還可以含有葫蘆素A、葫蘆素E、異葫蘆素B和異葫盧素D中的一種，或者含有其中的兩種、三種或者四種；例如，本發明藥物含有葫戸素A、葫蘆素B和葫蘆素D，含有葫蘆素E、葫蘆素B和葫蘆素D，含有異葫蘆素B、異葫蘆素D、葫蘆素B和葫蘆素D，等等。在上述的本發明藥物組合物中，本發明研究人員進一步優選的本發明藥物組合物是含有葫蘆素A、葫蘆素B、葫蘆素E、異葫蘆素B和葫蘆素D的藥物組合物。鑑於提取製備手段的不同、原料的差異，以及在不同患者、不同適應症的針對性治療上，本發明研究人員最優選的藥物組合物是含有葫蘆素A、葫蘆素B、葫蘆素E、異葫蘆素B、異葫蘆素D和葫蘆素D的藥物。本發明研究人員同時也直接提出，本發明所述的促進腸、胃蠕動藥物組合物也可以優選是含有葫蘆素B和葫蘆素D的藥物。根據實際應用中的需要，在上述本發明藥物當中，本發明研究人員通過進一步的實驗，提出更進一步的優選方案，即，所述的藥物組合物中，葫蘆素D的含量優選為0.00廣6(m重量比；在此基礎之上，在含有葫蘆素B和葫蘆素D的至少兩組分的本發明所述促進腸、胃蠕動藥物組合物中，葫蘆素B與葫蘆素D的含量之比優選為30:11:10。在考慮藥效的前提下，上述優選方案中，葫蘆素B與葫蘆素D的含量之比還可以進一步優選為10:11:2。在現有技術的基礎上，本發明所述的促進腸、胃蠕動的藥物組合物優選由含有苦丁香的原料通過進一步提取得到，根據原料的特性，以及提取有效成分的可能性與可行性，本發明研究人員推薦採用浸提的方式，從含有苦丁香的原料中得到。浸提中所用的溶媒可以是水、乙醇、甲醇或它們的水溶液，以及能從苦丁香中提取分離得到有效成分的其它溶媒。所述的浸提可以通過加熱回流提取(包括索氏提取)、常溫浸漬或滲漉的方法實現。本發明推薦的提取方法為將苦丁香藥材粉碎，或者將含有苦丁香的藥材粉碎，使用溶媒浸提，得到提取液，將提取液濃縮，形成一次濃縮液，將一次濃縮液加入到乙醇溶液中，充分攪拌後，靜置過濾;濾液濃縮，得二次濃縮液，濃縮的同時回收乙醇；將二次濃縮液乾燥，得到本發明所述的藥物提取物。該提取物通過藥劑學上的常規方法，可以製成各種不同的最終劑型。製備過程中的乾燥可以是減壓乾燥、噴霧乾燥，或者是可以實現乾燥目的的各種方式。所述的溶媒優選為水。所述浸體的方法優選加熱回流提取；根據原料狀態、用水量，一般提取1-4次，優選3次；每次提取時間一般可以是O.5-2小時，優選l小時；每次用水量5-12倍原料重量，優選8-10倍。所述的一次濃縮液中，優選每毫升相當於0.5-2倍重量的生藥，優選1.5倍生藥。上述將一次濃縮液加入到乙醇溶液中後，所得溶液中的乙醇最終濃度應為50%-80%，優選70%，此種情況下，最終有效成分的含量與配比關係最適合於藥物用途。本發明推薦的第二種提取方法是將上述的一次濃縮液或二次濃縮液用溶劑萃取的方法進行提純，從而得到最終的提取物。萃取所用到的溶劑可以是氯仿、二氯甲烷、乙醚或乙酸乙酯；萃取次數一般為2-5次，優選3次；在萃取之後，回收萃取溶劑，如回收氯仿，萃取後的濃縮液經乾燥處理，得到適用於本發明所述產品的提取物，該提取物通過藥劑學上的常規方法，可以製成各種不同的最終劑型。乾燥可以是減壓乾燥、噴霧乾燥，或者是可以實現乾燥目的的各種方式。本發明推薦的第三種提取方法是將上述一次濃縮液或二次濃縮液加水溶解，溶液通過大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，棄去；再用甲醇、乙醇、含水甲醇和含水乙醇中的一種或多種進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，回收溶劑，得到濃縮液經乾燥處理，得到適用於本發明所述產品的提取物，該提取物通過藥劑學上的常規方法，可以製成各種不同的最終劑型。所述的大孔吸附樹脂可以是D-101型、AB-8型或其它類型。上述的洗脫可以是等濃度洗脫，也可以是梯度洗脫。乾燥可以是減壓乾燥、噴霧乾燥，或者是可以實現乾燥目的的各種方式。上述含有苦丁香的原料中，可以根據實際需要，進一步含有檳榔、大黃、番瀉葉、戸薈、火麻仁、鬱李仁、決明子、皂莢(豬牙皂)、細辛、枳實、青皮、厚樸、……、冰片中的一種或多種。上述的苦丁香為葫蘆科植物甜瓜(O;c哪A鵬"厶)的乾燥果柄。當本發明組合物由葫蘆素D，以及葫蘆素A、葫戸素B、葫蘆素E、異葫聲素B和異葫蘆素D中的一種構成兩組分組合物時，也可以通過對上述的各種不同製備方法得到的產物進行進一步的分離，得到純品再進行組配實現。本發明研究人員通過大量藥理篩選，發現苦丁香經水提醇沉，分離得到的提取物具有明顯的刺激腸蠕動的作用；能明顯促進非手術動物胃腸運動，明顯促進正常小腸和大腸的推進，明顯促進胃排空作用，明顯縮短正常小鼠黑便排放時間，並顯著增加排便量。對於直腸一次性給予麻醉的動物，在本發明藥物的作用下，其近結腸運動的變化在30min內明顯提高，在3060min內作用達到高峰。本發明藥物組合物能明顯促進手術致腸道機械性損傷後的動物腸推進作用，在劑量較大時，該作用與新斯的明基本相當，同時未見有類似於新斯的明引起的肌肉明顯震顫現象。本發明藥物組合物能明顯促進阿託品致胃腸功能減弱後的動物腸推進作用，並能夠明顯縮短阿託品致胃腸功能減弱後的小鼠黑便排放時間，且排便量顯著增加(4h糞便粒數)；同時具有改善阿託品致胃腸功能減弱後的動物胃排空作用。綜上所述，本發明藥物組合物對於正常及胃腸運動受抑制的動物的胃腸具有明顯的增加蠕動，促進胃、小腸及大腸的運動的作用。比較而言，在促進胃腸運動方面，對胃、小腸、大腸作用強度由強至弱依次為大腸一小腸一胃；並且具有用藥量小、給藥次數少以及見效快的優點。實際使用中，可以施用於多種宿主，促進宿主的胃腸運動，所述宿主一般可以是哺乳動物。因此，根據以上特性，可以通過使用苦丁香提取物對宿主進行處理，通過促進宿主的胃腸運動，達到不同的治療目的或預防目的，如治療和預防便秘，幫助腹腔手術後宿主儘早排氣，預防和治療腹腔手術後的腸粘連和腸梗阻等等。根據以上對本發明藥物組合物性質的描述，按照本發明所指出的應用方向，該藥物組合物還可以與生理學上可接受的藥物載體結合，形成藥物，以便能夠通過任何一種方便的途徑給與宿主，如口服給藥、直腸給藥或者經過其它給藥途徑給藥；例如在一些特殊部位注射；例如皮下注射、皮內注射、肌肉注射、腹膜內注射、靜脈注射、鼻內注射、穴位注射以及各種穴內注射等。在給藥時，所述的生理學上可接受的載體與藥物活性成分或化合物結合，形成藥物，載體的性質必須由該藥物預定的給藥途徑決定。本發明藥物的使用方式優選直腸給藥。直腸給藥方式中的可用載體中，脂溶性基質可以是天然的脂肪酸酯、半合成脂肪酸甘油脂類以及氫化植物油，水溶性基質可以是甘油明膠、聚乙二醇類、硬脂酸聚烴氧(40)脂、聚氧乙烯失水山梨醇單硬脂酸酯(吐溫61)、泊洛沙姆或普流羅尼類等；可使用的附加劑可以是表面活性劑，如吐溫-80等；螯合劑可以是EDTA、校檬酸三鈉或烯胺衍生物等；非甾體抗炎劑可以是水楊酸鹽等；抗氧劑可以是叔丁基羥茴香醚(BHA)、叔丁基對甲酚(BHT)或沒食子酸酯等；防腐劑可以是對羥基苯甲酸酯類等。直腸給藥的藥物通過直腸黏膜吸收，約5075%的藥物不通過肝臟而直接進入血循環，可減少藥物在肝臟中的代謝以及對肝臟的毒害作用，同時避免了口服藥物對胃的刺激；用藥方便，宿主既可以在醫院內使用，又可以在院外自行使用，不受地點和專業人員的限制；而且具有吸收快、起效快、生物利用度高的特點；在用於幫助腹腔手術後宿主恢復胃腸功能時，不受胃腸功能的限制，能夠儘早用藥，爭取了治療和儘快康復的時間。本發明提取物在直腸給藥時，提取物的劑量以葫蘆素D重量計，一般為0.1-2.Omg/次，優選的劑量為0.2-1.Omg/次。本發明提取物還可以注射劑的形式進行使用，其中包括溶液型、乳劑型、混懸型和注射用無菌粉末。在注射劑中，生理學上可接受載體包括可接受的介質和可利用的附加劑。可接受的介質有注射用水、非水介質或二者複合溶媒，其中非水介質有注射用油、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、苯甲酸苄酯、二甲基乙醯胺、二甲基亞碸、肉豆蔻異丙基酯等。可利用的附加劑有增溶劑、抗氧化劑、等滲調節劑、緩衝劑、助懸劑、穩定劑、鰲合劑、抑菌劑、填充劑等，如吐溫-80、磷酸鹽、甲基纖維素、肌酐、亞硫酸鈉、氯化納、乙二胺四乙酸二鈉、乳糖、苯酚等。上述本發明提取物的使用是將苦丁香單味藥材作為原料，經提取得到有效物質後，製成製劑，通過上述任意一種給藥途徑，施用於宿主；還可以將經提取得到的有效物質作為藥物處方之一，通過與其它藥物或化學成分組配混合後，製成製劑，通過上述任意一種給藥途徑，施用於宿主，例如苦丁香提取物與冰片組成處方，製成含有本發明有效物質提取物的栓劑。由於中藥製劑的複雜性，對於本發明總葫蘆素提取物的應用，還可以將苦丁香藥材作為最終藥物製劑處方組分之一，與其它植物原料成分或化學物質混合，經提取，得到同時含有本發明有效物質提取物和其它藥物成分的混合提取物，該混合提取物可通過上述任意一種給藥途徑，施用於宿主，用於任何一種與刺激腸蠕動作用相關的應用，例如苦丁香與檳榔、苦丁香與大黃組成處方，經提取後製成含有本發明有效物質提取物的栓劑；用於治療便秘，幫助腹腔手術後宿主儘早排氣，或者預防和治療腹腔手術後的腸粘連和腸梗阻等等。圖1-1葫戸素D結構式圖1-2葫戸素B結構式圖l-3葫蘆素E結構式圖1—4異葫蘆素B結構式圖l-5葫蘆素A結構式圖l-6異葫蘆素D結構式圖2-a實施例1中一次濃縮液的HPLC指紋圖譜圖2-b實施例2中苦丁香醇提取物的HPLC指紋圖譜圖2-c實施例1中二次濃縮液的HPLC指紋圖譜圖2-d實施例8中氯仿萃取物的HPLC指紋圖譜圖2-e實施例11中樹脂處理提取物的HPLC指紋圖譜峰1為葫蘆素A峰2為葫蘆素D峰3為異葫蘆素D峰4為葫蘆素B峰5為葫聲素E峰6為異葫蘆素B色譜條件色譜柱迪馬鑽石C18250mmX4.6mm，5ym柱溫30°C波長232nm流速1.0min/ml流動相A:乙氰四氫呋喃(1:1);B:0.1%磷酸水兩相梯度洗脫(Omin:30%A;40min:70%A)圖3:實驗例4中正常小鼠小腸推進試驗結果——推進百分率圖4:實驗例5中正常大鼠大腸推進試驗結果——推進百分率圖5:實驗6中正常小鼠胃排空試驗結果——胃排空百分率圖6:實驗例7中腸道機械性損傷小鼠腸推進試驗結果——推進百分率圖7:實驗例8中阿託品致胃腸功能減弱小鼠腸推進試驗結果——推進百分率圖8麻醉大鼠在體近結腸腸管收縮活動影響試驗-收縮波數目圖9麻醉大鼠在體近結腸腸管收縮活動影響試驗-收縮波數變化率圖io麻醉大鼠在體近結腸腸管收縮活動影響試驗-振幅指數圖11麻醉大鼠在體近結腸腸管收縮活動影響試驗-振幅指數變化率圖12阿託品致胃腸功能減弱小鼠胃排空實驗結果具體實施例方式實施例1取苦丁香藥材5Kg，粉碎成粗粉；煎煮3次，第一次用50Kg水，煎煮2小時；第二、三次用40Kg水，煎煮1小時，將煎煮液合併，濾過，濾液濃縮，得一次濃縮液7.5Kg，加乙醉，使含醇量為70%，充分攪拌，靜置24小時，過濾；濾液減壓濃縮，得二次濃縮液，濃縮同時回收乙醇；將二次濃縮液噴霧乾燥，得固體物；其中，含有葫蘆素A0.12免，葫蘆素D0.6iy。，異葫戸素00.09%，葫聲素B0.99免，葫戸素EO.14%，異葫戸素BO.06%。實施例2取苦丁香藥材5Kg，粉碎成粗粉；加25Kg甲醇，於索氏提取器中回流提取6小時，得提取液，經減壓濃縮，噴霧乾燥，得固體物；其中，含有葫蘆素A0.36。/。，葫蘆素00.63%，葫戶素B5.83。/。，葫戸素E0.03。/d，異葫戸素BO.76%,異葫戸素D未檢出(〈0.01%)。實施例3取苦丁香藥材5Kg，粉碎成粗粉；加30Kg水，煎煮4次，每次0.5小時；將煎煮液合併，濾過，濾液濃縮，得一次濃縮液2.5Kg，加乙醇，使含醇量為65%，充分攪拌，靜置18小時，過濾；濾液減壓濃縮，得二次濃縮液，濃縮同時回收乙醇；將二次濃縮液減壓乾燥，得固體物；其中，含有葫蘆素AO.10%，葫蘆素DO.51%，異葫蘆素DO.07%，葫蘆素BO.87%，葫聲素EO.11%，異葫戸素BO.05%'實施例4取苦丁香藥材4Kg、大黃lKg,粉碎成粗粉；加25Kg75。/。乙醇，加熱回流4小時，得提取液，噴霧乾燥，得固體物；其中，含有葫蘆素AO.18%，葫蘆素D0.58W，葫蘆素B2.91%，異葫蘆素B0.36。/。，葫蘆素E和異葫蘆素D未檢出。實施例5取苦丁香藥材3Kg、檳榔2Kg，粉碎成粗粉；加30Kg水，煎煮3次，每次1小時；將煎煮液合併，濾過，濾液濃縮，得一次濃縮液5Kg，加乙醇，使含醇量為75%，充分攪拌，靜置30小時，過濾；濾液減壓濃縮，得二次濃縮液，濃縮同時回收乙醇；將二次濃縮液減壓乾燥，得固體物；其中，含有葫蘆素AO.10%，葫蘆素D0.48。/。，異葫蘆素00.06%，葫戶素BO.81%,葫聲素EO.10%,異葫蘆素BO.04%。實施例6取苦丁香藥材4.5Kg、番瀉葉0.5Kg，粉碎成粗粉；加35Kg水，煎煮4次，每次1小時；將煎煮液合併，濾過，濾液濃縮，得一次濃縮液5Kg，加乙醇，使含醇量為80%，充分攪拌，靜置30小時，過濾；濾液減壓濃縮，得二次濃縮液，濃縮同時回收乙醇；將二次濃縮液噴霧乾燥，得固體物；其中，含有葫蘆素AO.10%，葫蘆素DO.58%，異葫蘆素DO.05%，葫聲素BO.62%，葫蘆素EO.12%，異葫盧素B0.060/0。實施例7取苦丁香藥材5Kg，粉碎成粗粉；加適量50%乙醇水溶液於室溫中浸泡過夜，用60Kg50%乙醇水溶液滲漉提取，得提取液，減壓濃縮後噴霧乾燥，得固體物；其中，含有葫蘆素DO.42%,葫戸素B2.78y。，異葫蘆素B0.03呢，葫蘆素A、異葫蘆素D和葫蘆素E未檢出。實施例8取實施例1中的一次濃縮液，用2/3體積的氯仿萃取3次，合併氯仿萃取液，回收氯仿，殘渣減壓乾燥後得到固體物；其中，含有葫蘆素A3.50。/。，葫蘆素D24.95W，異葫蘆素D4.24%,葫戸素B30.68%,葫戸素E4.24%，異葫戸素B3.50%。實施例9取實施例2中的提取液，經減壓濃縮去除甲醇後，加入與藥材重量相當的水溶解，用相同體積的乙醚萃取2次，合併乙醚萃取液，回收乙醚，殘渣減壓乾燥後得到固體物；其中，含有葫蘆素D8.45%，異葫蘆素DO.35%，葫戶素B65.79%，葫戸素E0.42。/。，異葫蘆素B9.4%，葫蘆素A5.04%。實施例10取實施例5中的二次濃縮液，溶解在與藥材重量相當的水中，用l/2體積的乙酸乙酯萃取5次，合併乙酸乙酯萃取液，回收乙酸乙酯，殘渣減壓乾燥後得到固體物；其中，含有含有葫蘆素Al.98%,葫蘆素D12.50%，異葫蘆素Dl.84%,葫蘆素B18.94%,葫蘆素E2.53%,異葫蘆素B2.02%。實施例11取實施例1中的一次濃縮液，用水稀釋後上預先用水平衡好的D-101型大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用90%的乙醇洗脫；收集90%乙醇洗脫液，減壓濃縮回收乙醇，濃縮液噴霧乾燥後得到固體粉末；其中，含有葫蘆素A3.01%，葫蘆素D17.60%，異葫蘆素Dl.15%,葫戶素B47.52%，葫戸素E1.729&，異葫戸素B3.72%。實施例12取實施例6中的二次濃縮液，用水稀釋後上預先用水平衡好的AB-8型大孔吸附樹脂柱，分別用水、10%的乙醇、50%乙醇和90%乙醇梯度洗脫，棄去水和10%乙醇洗脫液，收集50%和90%乙醇洗脫液，減壓濃縮回收乙醇，濃縮液減壓乾燥後得到固體物；其中，含有葫蘆素A2.97y。，葫蘆素D13.42y。，異葫蘆素D0.97X,葫蘆素B13.55%，葫蘆素El.10%，異葫蘆素BO.80%。實施例13取實施例7中的濃縮液，用水稀釋後上預先用水平衡好的AB-8型大孔吸附樹脂柱，分別用水、10%的乙醇、50%乙醇和90%乙醇梯度洗脫，棄去水和10%乙醇洗脫液，收集50%和90%乙醇洗脫液，減壓濃縮回收乙醇，濃縮液減壓乾燥後得到固體物；其中，含有葫蘆素AO.14%，葫聲素06.25%，葫戸素B36.88X，異葫聲素Bl.11%，異葫戸素D和葫戸素E未檢出。實施例14-23參照上述實施例的製備方法，得到以下不同的產物:tableseeoriginaldocumentpage12/表不未檢出。實施例24將實施例5中固體物粉碎成細粉；取半合成脂肪酸甘油酯適量，於4(TC水浴中熔融，倒入上述藥液中，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻後取出，即得栓劑。製成栓劑中，葫蘆素D含量為0.03%。實施例25將實施例l中固體粉末，粉依次加入適量50%乙醇溶液和吐溫-80，攪拌均勻；取半合成脂肪酸甘油酯適量，於4(TC水浴中熔融，倒入上述藥液中，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻後取出，即得栓劑。製成栓劑中，葫蘆素D含量為0.01呢。實施例26將實施例3中固體粉末1份與研成細粉的冰片0.25份充分混合，待用；取可可豆酯和泊洛沙姆適量，於4(TC水浴中熔融，加入上述藥粉，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻後取出，即得。製成栓劑中，葫蘆素D含量為0.0W。實施例27將實施例8中固體物研成細粉，待用；取半合成脂肪酸甘油酯和泊洛沙姆適量，於40°C水浴中熔融，加入上述藥粉，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻後取出，即得。製成栓劑中，葫蘆素D含量為O.1%。實施例28將實施例6中固體粉末與研成細粉的適量冰片充分混合，待用；取香果酯和吐溫-80適量，於4(TC水浴中熔融，加入上述藥粉，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻後取出，即得。製成栓劑中，葫蘆素D含量為0.02L實驗例1本例為實施例l-24產品直腸給藥最大耐受量(MTD)測定試驗，說明本發明實施例l的提取物一次性給予使用，具有較高的安全性。將實施例1中的固態物以動物能耐受的最大劑量(提取物153mg/kg/d)直腸給藥，連續觀察14天，給藥後30mirTl20ra:m多數動物出現稀便並帶有粘液，68h恢復為正常糞便，少部分動物給藥初期還出現靜伏少動情況，但30分鐘內均恢復正常。14天觀察期無動物死亡，且體重均正常增長，肉眼觀察未見明顯毒性反應。試驗結束後解剖動物，未見明顯的臟器異常。提取物最大直腸給藥量為153mg/kg/d,為推薦臨床人用量的兩百多倍。表明提取物一次性給予使用，具有較高的安全性，為臨床安全用藥提供了參考。實驗例2本例為實施例l-24產品直腸給藥對直腸黏膜刺激性試驗，說明本發明提取物臨床按推薦0.65mg/kg/d—次性給予是比較安全的。將實施例2中的固態物按高低劑量分別連續7天直腸給予家兔，未見小劑量組(4.64mg/kg，相當於臨床推薦人用量的7.14倍)對直腸黏膜有明顯的刺激性；而高濃度提取物(18.55mg/kg，相當於臨床推薦人用量的28.5倍)雖對家兔直腸黏膜有一定剌激性，但反應輕微，且病變具可逆性，說明提取物臨床按推薦0.65mg/kg/d—次性給予是比較安全的。實驗例3本例為實施例l-24產品對正常小鼠排便時間和排便數量的影響試驗，說明本發明提取物大、中、小劑量組均有明顯促進正常小鼠排便的作用。取50隻2327g雄性ICR，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為5組，每組10隻，分別為正常對照組，小、中、大劑量組(2.48mg/kg、4.96mg/kg、9.92mg/kg)，陽性組(新斯的明)。除陽性組按O.lml/10g體重皮下注射新斯的明外，其餘各組按0.02ml/10g體重直腸給予生理鹽水或提取物(生理鹽水稀釋)。給藥後隨即按0.2ml/10g體重灌胃10%墨汁，各鼠分別放置於鋪有濾紙的小鼠盒內(每l盒放l只小鼠)，記錄小鼠出現黑便的時間及自黑便出現後糞便粒數。連續觀察4h，並與正常對照組進行比較及統計，結果與正常對照組比，陽性組、小、中和大劑量組第一次排黑便時間分別比對照組縮短了53%、34%、39%和49%，p值均<0.01;4h糞便粒數分別比對照組增加了49%(P〈0.01)、魔P〈0.05)、29%(P<0.01)和49%(P〈0.01)。結果可知，提取物大、中、小劑量組均有明顯促進正常小鼠排便的作用，並呈現出一定的量效關係。實驗例4本例為實施例1-24產品對正常小鼠小腸推進的影響試驗，說明本發明提取物具有明顯促進正常小鼠小腸推進的作用。取50隻23、7g雄性ICR，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為五組，每組10隻，分別為正常對照組，提取物小、中、大劑量組(2.48rag/kg、4.96mg/kg、9.92mg/kg)，陽性組(新斯的明)。除陽性組按.lml/10g體重皮下注射新斯的明外，其餘各組按0.02ml/10g體重直腸給於生理鹽水或提取物提取物(生理鹽水稀釋)。給藥20min後，按0.2ml/10g體重灌胃給予小鼠10%印度墨水(生理鹽水稀釋)，15min後脫頸處死小鼠，即而剖腹，取出自幽門至回盲部的腸管，測量(小腸)長度及墨汁前沿至幽門的距離，計算墨汁推進長度佔小腸全長的百分率，即推進百分率。結果見圖3，與正常對照組進行比較，大、中劑量組均有明顯促進正常小鼠小腸推進的作用，P值均〈0.01。實驗例5本例為提取物對正常大鼠大腸運動的影響試驗，說明本發明提取物具有明顯促進正常大鼠大腸推進的作用。取50隻20(T250g雄性Wistar大鼠，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為5組，每組10隻，分別為正常對照組，提取物小、中、大劑量組，新斯的明組。用乙醚麻醉後背位固定於大鼠手術臺上，在下腹部沿腹中線開1.5-2cm的切口，用鑷子輕提回盲部腸段於體外，用注射器從回盲部向結腸起始端按0.2ml/100g體重注入含10%墨汁的提取物(生理鹽水稀釋)。小1.5mg/kg、中3.Omg/kg、大6.Omg/kg，陽性組和對照組按0.2ml/100g體重注入含10%墨汁生理鹽水，同時陽性組還按0.2ml/100g體重皮下注射新斯的明0.08mg/kg。注入完畢立即計時並縫合切口。給藥後40min處死動物，即而剖腹，取出盲腸至肛門腸管，測量結腸起點至肛門的距離作為大腸總長度，同時測量結腸起點至墨汁前沿腸管的距離作為"墨汁在大腸推進距離"，計算其與大腸全長的百分比，即推進百分率。結果見圖4，與正常對照組進行比較，大、中、小劑量組均有明顯促進正常大鼠大腸推進的作用，P值均〈0.01，並顯示出一定的量效關係。實驗例6本例為實施例1-24產品對健康小鼠胃排空的影響實驗，說明本發明提取物具有明顯促進正常小鼠胃排空的作用。取22、6g雄性ICR小鼠60隻，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為5組，每組12隻。分別為正常對照組、提取物小、中、大劑量組及陽性組(新斯的明)。分別直腸給予生理鹽水(正常對照組)或提取物提取物(生理鹽水稀釋)2.48mg/kg、4.96mg/kg、9.92mg/kg，陽性組皮下注射新斯的明0.15mg/kg，給藥後30min灌胃給予含0.05%酚紅2M羧甲基纖維素懸液0.4ml/只。15min以後處死動物，立即剖腹並結紮胃上下兩端後，將完整的胃(含胃內容物)用lraol"NaOH溶液8ml浸泡並剪碎胃，浸泡2h後3000r/min離心5min,取上清2.5ml用10%三氯乙酸2.5ml沉澱蛋白，然後3000r/min離心15min，取上清，於分光光度計546mn波長處測定。按以下公式計算胃排空的百分率。各組均與正常對照組比較。胃排空的百分率(Se)=100-Ps*Pa、1003==胃內酚紅的濃度(ug/ml)Pa二:原液(給予動物的等量溶液)中加入等體積的lmol/LnaOH和三氯乙酸後酚紅的濃度(ug/ml)如圖5可見，與正常對照組進行比較，大(P<0.01)、中(P〈0.05)劑量組均有明顯促進正常小鼠胃排空的作用。並顯示出一定的量效關係。實驗例7本例為實施例1-24產品對手術後致腸道機械性損傷的小鼠腸推進試驗，說明本發明提取物能夠明顯促進該腸蠕動抑制模型腸蠕動的恢復。取72隻2226g雄性ICR小鼠，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為6組，每組12隻，分別為假手術組、模型組、提取物小劑量組、中劑量組、大劑量組及陽性組(新斯的明)。除假手術組僅乙醚麻醉，並於腹腔開一個小孔即縫合外，其餘各組麻醉開孔後，以彎型鈍器沿逆時針方向旋轉5圈，造成模擬腸道機械性損傷，然後縫合切口。手術結束後，分別按0.02ml/10g體重直腸給予生理鹽水(假手術組及模型組)或不同劑量的提取物提取物(2.48mg/kg、4.96rag/kg、9.92mg/kg，生理鹽水稀釋)。陽性藥組則按0.lml/10g體重皮下注射新斯的明0.15mg/kg。給藥後隨即將10%墨汁按0.2ml/10g體重灌胃小鼠，給墨汁140min後脫頸椎處死小鼠，即而剖腹，取出自幽門至肛門的消化管測量其消化道全長和墨汁前沿至幽門的距離，計算其與全長的百分比，即推進百分率，結果見圖6。如圖6可見，與正常對照組進行比較，大、中、小劑量組均有明顯促進手術致腸道機械性損傷小鼠腸推進的作用，P值均〈0.01，表明提取物能明顯促進該腸蠕動抑制模型腸蠕動的恢復。實驗例8本例為實施例1-24產品對阿託品致胃腸功能減弱小鼠腸推進試驗，說明了本發明提取物能夠明顯促進腸蠕動抑制模型中腸蠕動的恢復。取66隻2226g雄性ICR小鼠，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為6組，每組11隻，分別為正常對照組，模型組，提取物小、中、大劑量組，陽性組(新斯的明)。除正常對照組外，其餘各組按0.lml/10g體重給小鼠皮下注射阿託品0.25mg/kg，正常對照組注射同體積生理鹽水。20min後分別按0.02ml/10g體重直腸給予提取物提取物(生理鹽水稀釋)2.48mg生藥/kg、4.96mg生藥/kg、9.92mg生藥/kg。正常對照組及模型組直腸給予同體積生理鹽水，陽性藥組按O.lml/10g體重皮下注射新斯的明0.15mg/kg。給藥20min後，按0.2ml/10g體重給小鼠灌胃10%墨汁，給墨汁90min後脫頸椎處死動物，即而剖腹，取出自幽門至肛門的消化管測量其全長和墨汁前沿至幽門的距離，計算其與全長的百分比，即推進百分率。如圖7可見，與正常對照組進行比較，大、中、小劑量組組均有明顯促進阿託品致胃腸功能減弱小鼠腸推進的作用，P值均〈0.01，表明提取物能明顯促進該腸蠕動抑制模型腸蠕動的恢復。且大劑量組作用與陽性藥新斯的明作用基本相當，而未見小鼠肌肉的明顯震顫(在所有項目實驗中，新斯的明組動物均出現肌肉的明顯震顫)。實驗例9本例為實施例1-24產品對阿託品致胃腸功能減弱小鼠的排便時間和排便數量影響試驗，說明了本發明總葫蘆素提取物能夠明顯促進該腸蠕動抑制模型腸蠕動的恢復。取66隻22、6g雄性ICR小鼠，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為6組，每組ll只，分別為正常對照組，模型組，總葫蘆素小、中、大劑量組，陽性組(新斯的明)。除正常對照組外，其餘各組按0.lml/10g體重皮下注射阿託品0.25mg/kg，正常對照組皮下注射同體積生理鹽水。20min後分別按0.02ml/10g體重直腸給予提取物(2.48mg/kg、4.96mg/kg、9.92mg/kg，生理鹽水稀釋)。正常對照組及模型組直腸給予同體積生理鹽水，陽性藥組按0.lral/10g體重皮下注射新斯的明0.15mg/kg。給藥20min後將10%墨汁按0.2ml/10g體重給小鼠灌胃，各鼠分別放置於鋪有濾紙的小鼠盒內(每盒僅放l只小鼠)進行觀察，記錄小鼠出現黑便的時間及自黑便出現後糞便粒數。連續觀察4h,各給藥組與模型組進行比較，結果可見，與模型組比較，總葫蘆素小(P<0.05)、中(P<0.01)、大(P〈0.01)劑量組均有明顯縮短阿託品致胃腸功能減弱小鼠黑便排放時間，顯著增加排便量(4h糞便粒數)，表明本發明產品能明顯促進該腸蠕動抑制模型腸蠕動的恢復。實驗例10本例為實施例1-24產品對麻醉大鼠在體近結腸腸管收縮活動的影響試驗，說明了本發明提取物對近結腸運動的變化呈明顯的量效關係。取體重300—350g雄性Wistar大鼠30隻，將大鼠禁食24小時後，用10%烏拉坦腹腔注射麻醉，將麻醉後的大鼠背位固定於保溫手術臺上剪去腹中部毛，沿腹中線做5—6cm長的切口，打開腹腔，輕輕將結腸提出，找到回盲部，在靠近回盲部選一段2cm長的結腸段，將腸段同側兩端用縫合線固定在腸管固定管兩端的小孔上，，再用一條較長的縫合線一端縫在腸段中間的腸壁上，另一端由腸管固定管中央穿出連在負荷2.0g的JZ100肌肉張力換能器上。然後把結腸放回腹腔內，並用縫線把腸管固定管縫合固定在腹腔切口的腹壁上，以防腸段滑脫，並用沾有0.9%氯化鈉溶液的紗布蓋好周圍切口。手術完畢後，連接RM6240多道生理記錄儀記錄運動曲線。腸蠕動恢復正常後，記錄正常蠕動曲線，然後直腸給藥(小3.05mg/kg、大6.lmg/kg)，給藥後繼續觀察記錄2小時腸蠕動曲線。並計算(1)每30min收縮波的數目；(2)每30min振幅指數，即所有收縮波振幅總和；(3)收縮波的數目變化百分率(以給藥前為％)=(給藥後每30min收縮波的數目一給藥前每30min收縮波的數目)/給藥前每30min收縮波的數目X100^;(4)振幅指數變化百分率(以給藥前為％)=(給藥後每30min振幅指數一給藥前每30min振幅指數)/給藥前每30min振幅指數X100X。結果見圖8-11，大、小劑量組直腸一次性給予麻醉大鼠。其近結腸運動的變化，無論是收縮波的數目、振幅指數、收縮波數目變化百分率及振幅指數變化百分率，均在30min內明顯提高，3060min作用達高峰，且具有明顯的量效關係。實驗例11本例為阿託品造模小鼠的胃排空試驗(酚紅比色法)，說明本發明實施例1-24產品具有明顯改善阿託品致胃腸功能減弱小鼠的胃排空的作用。取2226g雄性ICR小鼠60隻，實驗前動物禁食24小時，按體重隨機分為6組，每組10隻。分別為正常對照組、模型組、總葫蘆素小、中、大劑量組及陽性組(新斯的明)。除正常對照組皮下注射生理鹽水外，其餘各組皮下注射阿託品0.3mg/kg，並分別於直腸給予生理鹽水(正常對照組、模型組)或總葫蘆素提取物(生理鹽水稀釋)49.6mg/kg、99.2mg/kg、198.4mg/kg，陽性組皮下注射新斯的明0.15mg/kg，給藥後30min灌胃給予含0.05%酚紅2%羧甲基纖維素懸液0.4!111/只。40min以後處死動物，立即剖腹並結紮胃上下兩端後，將完整的胃(含胃內容物)用lmol/LNaOH溶液8ml浸泡並剪碎胃，浸泡2h後3000r/min離心5min,取上清2.5ml用10%三氯乙酸2.5ml沉澱蛋白，然後3000r/min離心15min，取上清於分光光度計546nm波長處測定。按以下公式計算胃排空的百分率。各組均與模型組進行比較。結果如下胃排空的百分率(Se)=100-Ps*Pa_1*100Ps二二胃內酚紅的濃度(ug/ml)Pa:原液(給予動物的等量溶液)中加入等體積的lraol/LnaOH和三氯乙酸後酚紅的濃度(ug/ml)見圖12，大劑量組有明顯改善阿託品致胃腸功能減弱小鼠胃排空的作用(P<0.05)，小劑量組、中劑量組雖有促進胃排空作用的趨勢，但與模型組比較，差異不具顯著性(PX).05)。權利要求1、一種促進腸胃蠕動的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物含有葫蘆素D，以及葫蘆素A、葫蘆素B、葫蘆素E、異葫蘆素B和異葫蘆素D中的至少一種；所述的藥物組合物優選含有葫蘆素B和葫蘆素D。2、根據權利要求l所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物含有葫蘆素B和葫蘆素D，以及葫蘆素A、葫蘆素E、異葫蘆素B和異葫蘆素D中的至少一種。3、根據權利要求2所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物含有葫蘆素A、葫蘆素B、葫蘆素E、異葫蘆素B和葫蘆素D。4、根據權利要求3所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物含有葫蘆素A、葫盧素B、葫蘆素E、異葫蘆素B、異葫蘆素D和葫蘆素D。5、根據權利要求1-4任意一項所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物中，葫戸素D的含量為0.00廣60%重量比。6、根據權利要求2-5任意一項所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物中，葫蘆素B與葫蘆素D的含量之比為30:廣l:10。7、根據權利要求6任意一項所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物中，葫戸素B與葫蘆素D的含量之比為10:11:2。8、根據權利要求1-7任意一項所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物由含有苦丁香的原料提取得到；所述的原料優選含有檳榔、大黃和冰片中的至少一種。9、根據權利要求8所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物可製備成藥劑學上可接受的任意劑型，優選栓劑。10、權利要求1-9所述的組合物在製備促進腸、胃蠕動藥物方面的應用。全文摘要本發明提供了一種促進腸胃蠕動的藥物組合物，屬於中藥製劑
技術領域：
。所述的藥物含有葫蘆素A、葫蘆素B、葫蘆素E、異葫蘆素B和異葫蘆素D中的至少一種和葫蘆素D。所述的藥物由含有苦丁香的原料通過提取得到。所述藥物對於正常及胃腸運動受抑制的動物的胃腸具有明顯的增加蠕動，促進胃、小腸及大腸的運動的作用。該藥物還可以作為最終藥物製劑的處方組分之一，與其它植物成分或化學物質組配混合後，得到最終產品；還可以將苦丁香藥材作為最終藥物製劑處方組分之一，與其它植物原料成分或化學物質混合，經提取，得到同時含有本發明總葫蘆素提取物和其它藥物成分的混合提取物，該混合提取物通過任意一種給藥途徑，施用於宿主，用於任何一種與刺激腸蠕動作用相關的應用。文檔編號A61K31/045GK101103989SQ20061009856公開日2008年1月16日申請日期2006年7月10日優先權日2006年7月10日發明者羅秀珍,忱謝,雲齊申請人:博仲盛景醫藥技術(北京)有限公司