用作放射指示劑和顯象劑的吡啶基乙炔類化合物的製作方法

2023-09-22 18:34:00

專利名稱：用作放射指示劑和顯象劑的吡啶基乙炔類化合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及新的吡啶基乙炔衍生物、它們的製備、它們作為放射指示劑/標記物的用途以及包含它們的組合物。
更具體地說，本發明提供了游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物 其中R為CH3、(CH2)nI、(CH2)nBr或(CH2)nF，n為1、2、3或4。
優選如下游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物，其中R為11CH3、(3H)3C、(CH2)n123I、(CH2)n76Br或(CH2)n18F，n為1、2、3或4。
在可能的立體異構現象中，例如雙鍵的順/反異構，化合物能以純立體異構體或其混合物存在。
另一方面，本發明提供了生產式I化合物和其鹽的方法，其包括如下步驟a)對於式Ia化合物的生產 其中Ra分別為11CH3或(3H)3C，
將式II化合物在鹼存在的條件下，分別與11CH3I或C(3H)3I反應， 或者b)對於式Ib化合物的生產 其中Rb分別為(CH2)n18F、(CH2)n123I或(CH2)n76Br，將式III化合物分別與18F、123I或76Br反應， 其中n如上文所定義，X為OTs或OMs，或將式II化合物與式IV化合物反應X-RbIV其中X和Rb如上文所定義，並回收所形成的游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
這些反應可根據已知的方法，例如按照實施例中描述的那樣進行。
反應混合物的後處理以及所得到的化合物的純化可以根據已知的方法進行。
酸加成鹽可用已知的方法從游離鹼製得，反之亦然。
式II、III和IV的起始原料是已知的，或可用與已知方法類似的方式獲得，如實施例中描述的那樣。
游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物(在下文中稱為本發明的物質)呈現可作為組織病理標記物、顯象劑和/或生物標記物(在下文中稱為「標記物」)的有價值的性質，可用於選擇性地標記代謝型穀氨酸受體亞型5(mGlu5受體)。
更具體地說，本發明的物質可在體外和體內用作標記中樞和外周mGlu5受體的標記物(參閱實施例5-7)。
所以，本發明的物質可用於確定作用於mGlu5受體的藥物的受體佔據水平，或用於診斷由於mGlu5受體失調或功能異常而導致的疾病，以及用於監察所述疾病的藥物治療有效性。
如上所述，本發明提供了用作神經顯象標記物的本發明的物質。
另一方面，本發明提供了用於在體內和體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經系統結構的組合物，該組合物包含本發明的物質。
另一方面，本發明還提供了用於在體內或體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經系統結構的方法，該方法包括用本發明的物質接觸腦組織。
本發明的方法還可以包括確定是否本發明的物質已標記靶結構的步驟。所述步驟可通過使用正電子發射斷層成像術(PET)或單光子發射計算機斷層成像術(SPECT)或使用任何允許進行放射性輻射檢測的儀器觀察靶結構來進行。
下面的實施例舉例說明了本發明。
實施例13-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟將[11C]-MeI與3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮肟的鈉鹽(1mg)在乾燥的DMF(400μl)中反應以合成3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。[11C]-MeI是通過慢速的氦氣流引入的，加完後將反應混合物加熱至120℃，保持10分鐘。產物的純化是通過反相高效液相色譜法完成的，使用C-18 μ-Bondapak色譜柱(7.8×300mm)，流動相為CH3CN/0.1％ H3PO4(70/30)，流速為5ml/min。目標產物的保留時間在6分鐘至7分鐘之間。
在包含吐溫(2％)、乙醇(10％)和鹽水(0.9％)的溶液中配製3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。
LogD＝2.5(用經典的搖瓶法測定)。
起始原料用下文描述的方法製備a)3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮將2-乙炔基-6-甲基-吡啶(702mg，6mmol)、3-溴-環己-2-烯酮(1.26g，7.2mmol)、二-(三苯膦)-鈀-二氯化物(168mg，0.24mmol)、碘化亞銅(93mg、0.48mmol)、三乙胺(4.8ml，34.4mmol)在12ml DMF中的溶液加熱至55℃，保持1小時。然後將溶液用乙酸乙酯(500ml)稀釋，並用飽和NaHCO3水溶液(1×150ml)洗滌。水相用乙酸乙酯(1×150ml)萃取，合併的有機相用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物(1.88g)用柱色譜法進行純化(矽膠，洗脫劑己烷/乙酸乙酯3∶1v/v)，收集包含目標化合物的級分，真空濃縮得到1.05g(收率為82％)淡黃色油狀的標題化合物。
b)3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮肟將3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮(422mg，2mmol)和羥基胺鹽酸鹽(278mg，4mmol)在吡啶(20ml)中的溶液在室溫下攪拌17小時。然後將溶劑真空蒸發。殘餘物溶解在乙酸乙酯(300ml)中並用飽和NaHCO3(1×50ml)洗滌。水相用乙酸乙酯(1×50ml)萃取，合併的有機相用Na2SO4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物(0.45g)用柱色譜法進行純化(矽膠，洗脫劑己烷/乙酸乙酯2∶1v/v)，收集包含目標化合物的級分，真空濃縮得到0.192g(收率為42％)淡黃色結晶狀的標題化合物，熔點為166-168℃。
實施例23-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[三(3H)-甲基]-肟將3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮肟與[3H]-MeI(0.5當量)在K2CO3存在的條件下，在DMF中於100℃反應180分鐘，隨後用反相色譜法進行純化，製得標題化合物。
實施例33-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-(2-[18F-氟]-乙基)-肟將3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮肟的鈉鹽(2mg)在乾燥的DMF(400μl)中與[18F]-2-氟-乙基甲苯磺酸酯(從乙烯二甲苯磺酸酯和[18F]-KF-Kryptofix絡合物獲得)在100℃下反應10分鐘。反應混合物用tC-18 Sep-Pak色譜柱進行純化，包含目標化合物的級分進一步用半製備反相HPLC法進行純化，使用C18 Bondclone柱(300×7.8mm)，流動相為CH3CN/0.01M H3PO4(70/30)，流速為4ml/min。含有產品的級分(保留時間在12分至13分之間)通過tC-18 Sep-Pak色譜柱，並用1ml乙醇進行洗脫。該醇溶液用0.15M的磷酸鹽緩衝液緩衝，無菌過濾後得到等滲和可注射的溶液。
實施例43-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[18F-氟]-甲基)-肟3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮的鈉鹽(2mg)在乾燥的DMF(400μl)中，在100℃下與[18F]CH2OTf反應30分鐘。在將反應混合物通過tC-18 Sep-Pak色譜柱進行最初的純化後，3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[18F-氟]-甲基-肟用半製備反相HPLC法進行最後的純化，使用C18 Bondclone柱(300×7.8mm)，流動相為CH3CN/0.01M H3PO4(70/30)，流速為4ml/min。產品用3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-(2-[18F-氟]-乙基)-肟類似的方法進行配製(實施例3)。
實施例5Ki/IC50測定(結合試驗)在體外實驗中，使用Gasparini等人在Biorg.Med.Chem.Lett.2002，12，407-409中描述的放射配體置換技術測定與mGlu5受體的親和力。結果表明，對於從穩定表達人mGlu5受體的L-tk細胞膜(Daggett等人，Neuropharm.1995，34871-886)置換[3H]-2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶而言，3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-甲基-肟的IC50為8nM(Hill係數為1.08；95％置信區間為6.0-10.0nM)。使用Cheng-Prusoff方程，通過計算得出Ki為4nM(試驗所用的放射配體濃度為2nM)。
實施例6器官和腦結構分布用兩組體重為250-300g的雄性成年Sprague-Dawley大鼠進行生物分布研究。第一組(n＝3)作為對照組，第二組(n＝3)作為阻斷組。每隻動物由一側尾靜脈接受250-300pmol(0.6-40MBq)的3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。阻斷組共同注射2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶(1mg/kg)，而對照組(n＝3)只給予相應體積的0.9％NaCl。動物在注射後30分鐘處死。器官或腦部區域如海馬、紋狀體、皮質、小腦被取出，並用γ計數器測量。組織分布以每克溼組織注射的劑量的百分數表示(％注射的劑量/克器官)。
實施例7用3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟進行的腦分布研究的結果下表展示了歸一化的每克組織注射劑量的百分數。K1、K2、K3為對照動物的個體值。B1、B2、B3為共同注射2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶的動物的個體值。
權利要求
1.游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物 其中R為CH3、(CH2)nI、(CH2)nBr或(CH2)nF，n為1、2、3或4。
2.游離鹼形式或酸加成鹽形式的權利要求1的化合物，其中R為11CH3、(3H)3C、(CH2)n123I、(CH2)n76Br或(CH2)n18F，n為1、2、3或4。
3.如權利要求1所定義的式I化合物或其鹽的生產方法，其包括如下步驟a) 對於式Ia化合物的生產 其中Ra分別為11CH3或(3H)3C，將式II化合物在鹼存在的條件下，分別與11CH3I或C(3H)3I反應， 或者b)對於式Ib化合物的生產 其中Rb分別為(CH2)n18F、(CH2)n123I或(CH2)n76Br，將式III化合物分別與18F、123I或76Br反應， 其中n如權利要求1所定義，X為OTs或OMs，或將式II化合物與式IV化合物反應X-RbIV其中X和Rb如上文所定義，並回收所形成的游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
4.用作神經顯象的標記物的如權利要求1所定義的游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
5.用於在體內和體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經系統結構的組合物，其包含如權利要求1所定義的游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
6.在體內和體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經系統結構的方法，該方法包括將腦組織與權利要求1所定義的游離鹼形式或酸加成鹽形式的式I化合物接觸。
全文摘要
本發明涉及式I的新的吡啶基乙炔衍生物，它們的製備，它們作為放射指示劑/標記物的用途，以及包含它們的組合物。
文檔編號A61K31/44GK1856468SQ200480027309
公開日2006年11月1日 申請日期2004年9月24日 優先權日2003年9月26日
發明者F·加斯帕裡尼, Y·奧貝松, L·凱斯勒, S·M·阿梅塔梅 申請人:諾瓦提斯公司