設有內部分隔的試劑盒組分容器的製作方法

2023-10-05 18:07:44 1

專利名稱：設有內部分隔的試劑盒組分容器的製作方法
所屬領域本發明涉及設有容納試劑盒組分的內部分隔的容器。更具體地說，本發明涉及構成聚合酶鏈反應試劑盒的具有至少兩個分隔小室的容器，以及包括一個或多個所說的容器的試劑盒。
背景技術：
在醫學和生物學的研究與實踐中，特別在醫學檢驗以及生物材料的分離、提取和純化中，為了使用或操作以及運輸或攜帶上的方便，常常要使用具有多種不同的包裝形式的試劑盒。
一般說來，這些試劑盒都是將用於特定化合物或其組分的分離、提取或純化，及其檢測或定量分析的兩種或兩種以上試劑以不同組合方式包裝在一起。這些試劑可包括直接或間接參與相關化學反應的核心試劑或輔助試劑。其中核心試劑可以是受體和/或配基、抗原和/或抗體、酶和/或底物、生物素和/或抗生物素蛋白(親和素)、電子(離子)供體和/或接受體，特定靶核酸的探針，或者是某特定化合物的特異性溶解劑或沉澱劑等。輔助試劑則可以是上述基本試劑的溶解劑、稀釋劑、緩衝劑、穩定劑或載體、或者是某特定化學反應產物的著色劑或其他顯示劑等。
具體地說，在聚合酶鏈反應(PCR)試劑盒中，雖然上述核心試劑(例如Taq酶、核酸引物或探針)常常要與相關輔助試劑(例如PCR反應緩衝液、脫氧單核苷酸底物等)混合使用，但由於它們的化學性質所決定的，在試劑盒的儲存期間必須將基本試劑和其相關輔助試劑(如溶解劑)分裝在不同的容器內，而在使用中再臨時將它們混合在一起並將所得到的混合物用於進一步的反應。
這樣，無疑將增加試劑盒使用和操作上的麻煩，不利於試驗的標準化，同時也增加了試劑盒的生產成本。因此，本領域期望提供一種能夠以彼此分隔的方式預先裝入兩種或多種試劑(包括基本試劑和輔助試劑)，並且又在使用時能夠很方便地將這些試劑混合在一起的所謂試劑盒組分容器。
本發明的目的本發明的一個目的是提供一種組成聚合酶鏈反應試劑盒的具有一個以上分隔小室的容器。
根據本發明的特別優選的實施方案，所說的容器具有兩個分隔小室。
根據本發明的優選實施方案，其中所說的分隔小室內分別預裝有不同但彼此相關的溶液。
根據本發明的一個優選實施方案，所說的容器是具有適當容積的小管或空心圓柱體。
根據本發明的一個優選實施方案，其中分隔小室之間的分隔是由高分子塑料材料或具有較低熔點的石蠟構成的。
本發明的另一個目的是提供一種由一個以上如上限定的容器組合在一起構成的聚合酶鏈反應試劑盒。
根據本發明的一個優選實施方案，所說的聚合酶鏈反應試劑盒包括傳統的聚合酶鏈反應和改良的聚合酶鏈反應試劑盒。所說的改良的聚合酶鏈反應試劑盒包括但不只限於實時螢光定量聚合酶鏈反應試劑盒。


圖1舉例顯示本發明管狀分隔容器的側視圖。
圖2舉例顯示本發明管狀分隔容器的俯視圖。
圖3舉例顯示本發明圓柱狀分隔容器的側視圖。
圖4舉例顯示本發明圓柱狀分隔容器的俯視圖。
本發明的詳細內容試劑盒的出現為醫學臨床檢驗和生物學實驗室研究提供了極大的方便。然而，隨著生物化學和分子生物學基礎研究的不斷深入，生物體內會有一些可作為生理生化指標的新的生物學活性物質和生物學作用機理被發現，這樣，不僅許多新的臨床檢驗和實驗室研究方法被建立，而且這些方法所涉及的生化反應和試劑也越來越多。因此，在一些已有的和未來將出現的試劑盒中可能包括更多反應所需的試劑，從而可能進一步增加試劑分裝、保存、取樣和加樣等操作步驟所到來的麻煩。其中一個典型例子就是基於PCR技術的試劑盒。
為了克服上述或其他有關缺陷，本設計人在長期從事PCR試劑盒的研究和生產實踐的基礎上，成功地生產並製備了一種設有至少一個分隔並可容納一種以上相關PCR試劑的容器，以及包括一個以上所說的容器的PCR檢測試劑盒。
本發明提供了本發明提供了一種設有至少兩個能容納試劑盒的特定組分的分隔小室的容器，以及包括一個或多個這樣的容器的試劑盒。根據本實用新型，雖然所說的容器內可以設有兩個以上的分隔小室，但從目前的製作技術和實際應用角度說，最好有兩個這樣的小室。
根據本發明的優選實施方案，其中所說的分隔小室內分別預裝有不同但彼此相關的溶液。例如，在基於PCR技術的檢測體系中，常常可能包括某種完成定性檢測和/或定量分析所必需的第一核心試劑，以及作為基本試劑的緩衝液和/或底物等的輔助試劑。但由於它們彼此的化學性質所決定的，這兩種試劑並不能混合預裝(例如，如果預先混合可能導致基本試劑的失活或沉澱析出)，只有在使用時才能將兩種試劑混合在一起。這種情況下，我們便可以按照本發明教導的原則和方法，在容納檢測試劑的容器內部設置兩個分隔的小室，藉以分別容納所說的第一和第二基本試劑，或所說的基本試劑和輔助試劑。
所說的容器可以是使用透明或半透明的聚氯乙烯或聚苯乙烯等高分子聚合物材料製成的。在使用前的存儲期間，容器通常是使用製作容器本身或小室間分隔的材料製成的蓋或封閉層密封的。
根據容器的大小和形狀的不同，所說的小室可以是平行並列的，或者也可是上下疊制的。因此，小室間的分隔可以是水平或垂直的。小室的長徑一般為0.1-1.5cm，但優選的是0.3-0.8cm。每個小室的體積一般為0.3-1.2cm3-0，優選的是0.3-1.2cm3。
構成兩小室之間的分隔的材料可以是硬質高分子塑料或者是具有相對較低熔點的石蠟。這些材料應是對容器內的兩種試劑或它們的混合物或反應產物沒有任何幹擾、破壞或通透作用的惰性物質。因此，根據本發明的一個優選實施方案，所說的容器是具有適當容積的小管，並且其中分隔小室之間的分隔體是由具有較低熔點的惰性材料如石蠟構成的；根據本發明的另一個優選實施方案，所說的容器是具有適當容積的空心柱狀體，並且其中分隔小室之間的分隔是由硬質高分子塑料構成的。
就本發明的第一種管狀模式的容器而言，為了在同一容器內造成兩個獨立的分隔空間，並分別裝入一對必須在使用當時混合的試劑之一，可以首先在管的下部加入輔助試劑，在其上面用液化石蠟鋪層並待其凝固後，再加入核心試劑。
就本發明的第二種柱體模式的容器而言，為了容納一對必須在使用當時混合的試劑，可將輔助試劑和核心試劑分別加入兩個分隔室。
使用前，只需加入模板核酸，蓋緊管蓋並高速瞬時離心，即可使輔助溶液和核心試劑溶液混合，參與隨後的PCR反應。因此，本發明的分隔容器作為試劑盒的一個重要組成部分。特別有利於減少容器的數目，簡化操作步驟，減少環境汙染，適合於試劑盒工業化大批量生產。
實施例以下結合附圖舉例描述本發明容器的結構特徵和使用方法。
(1)本發明容器的第一種結構是外觀呈子彈頭型的並帶有光學管蓋的0.2ml微量離心管(Ependoff管)(參見圖1和圖2)。如圖1所示，管體5上口邊緣有一與管體密切接合的管蓋4，其中管體5高21.0mm，管蓋高3.0mm，管體最大直徑6.3mm。為了製作本發明的容器，首先用移液器緩慢加入包括緩衝液與底物的輔助試劑溶液層2(40μl)。接著在緊挨著液體的上方加入石蠟油層1(30μl)，最後在靠近石蠟油上方的管壁上加入包括Taq酶及DNA引物和探針的核心試劑溶液層3(3μl)。其中核心試劑溶液因體積很小加上液體表面張力作用而形成一滴易於識別的液珠。這樣，小管內容物即形成了界限分明的三層下層為輔助試劑溶液層2、中層為常溫下固化的液體石蠟分隔層1，上層則是形成微小液滴的核心試劑溶液層3。如此得到的小管加上管蓋4可直接使用或低溫保存備用。圖2是本發明分隔小管的俯視圖，由圖中可以看出，頂蓋的中心部分7具有很好的透光性，所以很容易觀察管內的液體分布和分層情況；管蓋上的連接柄8則有利於管蓋4與管體5之間的密切結合。使用時，向管內加入模板核酸(5μl)後高速離心，上層溶液和所加入的模板核酸即可穿過石蠟油層進入下層溶液並與之混合，從而在條件適宜情況下開始聚合酶聯反應(PCR)。
(2)本發明容器的另一種結構是由聚氯乙稀塑料材料製成的包括基座1，帶有中間分隔4的桶狀液體容納部分6，和帽7四部分(參見圖3和圖4)。其中塑料基座1，桶狀液體容納部分6，及其內的分隔板4是一個完整的塑料注塑件，帽7則可自由取下。基座1是直徑6.0mm、高6.0mm的圓柱體，其上為外徑4.0mm，內徑3.0mm，高度3.5mm的桶狀液體容納部分6。桶狀液體容納部分6內有寬3.0mm，厚度1.0mm的分隔板4，距環上口3mm。分隔板4將桶狀液體容納部分分隔成第一和第二容室。其中第一容室2嵌入基座1.5mm，並容納包括緩衝液與底物的輔助試劑溶液(16μl)。第二容室3嵌入基座4.0mm，並容納包括Taq酶及DNA引物和探針的核心試劑溶液(2μl)。上層用石蠟油層5(16μl)封固。加入試劑溶液後蓋好帽7，即構成本發明的有兩個分隔室的戴帽容器。圖4是分隔容器的俯視圖，其中8顯示蓋7的頂部，9顯示容器基座1的較大的外徑，10顯示便於取下管帽的防滑齒。使用時，首先將模板核酸(5μl)加入玻璃毛細管中，去掉帽並將基座翻轉180度蓋到毛細管上。然後高速離心，第一和第二容室的內容物即可穿過石蠟油進入玻璃毛細管中並與模板混合，然後在適宜的條件下開始聚合酶聯反應(PCR)。
權利要求
1.一種組成聚合酶鏈反應試劑盒的具有一個以上分隔小室的容器。
2.根據權利要求1的容器，所說的容器具有兩個分隔小室。
3.根據權利要求1的容器，其中所說的分隔小室內分別預裝有不同但彼此相關的溶液。
4.根據權利要求1的容器，所說的容器是具有適當容積的小管或空心圓柱體。
5.根據權利要求1的容器，其中分隔小室之間的分隔是由高分子塑料材料或具有較低熔點的石蠟構成的。
6.由權利要求1的容器組合構成的聚合酶鏈反應試劑盒。
全文摘要
本發明涉及設有容納試劑盒組分的內部分隔的容器。更具體地說，本發明涉及構成聚合酶鏈反應試劑盒的具有至少兩個分隔小室的容器，以及包括一個或多個所說的容器的試劑盒。
文檔編號B65D81/32GK1597462SQ0314684
公開日2005年3月23日 申請日期2003年9月17日 優先權日2003年9月17日
發明者程鋼, 何蘊韶, 周新宇, 許擎 申請人:中山大學達安基因股份有限公司