用作甾族化合物c17-20裂解酶抑制劑的δ的製作方法

2023-10-05 14:42:29 2

專利名稱：用作甾族化合物c17-20裂解酶抑制劑的δ的製作方法
據估計，75％的前列腺癌對雄激素的水平更具體地說是睪酮的水平敏感(Van WauWe，J.P.和Janssen，P.A.J.，J.Med.Chem.，(1989)，32，2233)。人們很好地證明了血清睪酮水平的降低可用於治療這類前列腺癌。在臨床實踐中，這種治療已經通過例如睪丸切除術或通過二乙基己烯雌酚療法得以完成。然而，第一種途逕往往是心理學上不能接受的，而第二種途徑伴隨有大量的副作用。
細胞色素P-45017α單加氧酶系統催化C21甾族化合物的17α-羥基化作用並且還催化C17-20鍵的氧化裂解。(Blohm，T.R.等人，Biochem.BiophYs.Res.Commun.，(1989)，162.1571)。更具體地說，細胞色素P-45017α的甾族化合物C17-20裂解酶活性催化C21甾族化合物孕烯醇酮和孕酮轉化成C19甾族化合物脫氫表雄酮和雄烯二酮，它們是雄激素、5α-二氫睪酮和睪酮的前體。然後雄烯二酮和睪酮又是雌激素、雌酮和雌二醇的前體。因此，甾族化合物C17-20裂解酶的抑制作用可以降低雄激素以及雌激素的形成。根據這個作用結果，人們正在擴大尋找對甾族化合物C17-20裂解酶有效的並具有選擇性的抑制劑。(Laughton.C.A.和Neidle，S.，Biochem.Bioph Ys.Res.Commun.，(1990)，171，1160)。C17-20裂解酶抑制劑能用於治療各種雄激素依賴性障礙。更具體地說，此類化合物將用於治療前列腺癌、良性前列腺增生、雄性方式的脫須以及女子男性化和多毛症(婦女)。此外，C17-20裂解酶抑制劑還能用於治療雌激素依賴性障礙，例如雌激素依賴性乳腺癌。
因此，鑑於與二乙基己烯雌酚療法或睪丸切除術相關的缺陷，對甾族化合物C17-20裂解酶的有效抑制劑的探索正在進行。本發明涉及C17雜環甾族化合物並且還涉及一種使用此類化合物作為有效的甾族化合物C17-20裂解酶抑制劑的方法。更具體地說，本發明涉及一種雄激素依賴性障礙的治療方法。
本發明涉及具有以下通式I的化合物或其一種藥物學可接受的鹽和/或溶劑化物 式I其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；並且Y是S、O、或NR；其中R、R1和R2各自獨立地是氫或C1-C4烷基。
本發明進一步提供一種對需要治療的患者抑制其甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的式II化合物或其藥物學可接受的鹽 式II其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基。
此外，本發明進一步提供了一種對需要治療的患者抑制其甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的式(I)的化合物。
本發明進一步提供一種治療患雄激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的式(I)或者式(II)的化合物。
本文所使用的術語「C1-C4烷基」是指一種1至4個碳原子的飽和直鏈或支鏈的烴基。包括在這個術語範圍內的有甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等等。術語「滷素」或「滷」指的是氯、溴或碘原子。
術語「立體異構體」指一種化合物，它由被相同鍵結合的相同原子組成但具有不可互換的不同的三維結構。這種三維結構稱為構型。
這些式(I)和(II)的化合物可以不同的立體異構構型存在，這一點人們都清楚。特別應當清楚的是這些立體異構體包含在本發明所要求保護的範圍內。
術語「藥物學可接受的鹽」指達到所需要效果的給藥劑量基本無毒且並不能單獨擁有顯著藥理學活性的那些鹽類。包含在此術語範圍內的鹽類是氫溴化物、氫氯化物、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、乙醇酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、α-氧代戊二酸鹽、穀氨酸鹽、天冬氨酸鹽、馬來酸鹽、羥馬來酸鹽、丙酮酸鹽、苯乙酸鹽、苯甲酸鹽、對氨基苯甲酸鹽、鄰氨基苯甲酸鹽、對羥基苯甲酸鹽、水楊酸鹽、羥乙烷磺酸鹽、亞乙基二磺酸鹽、滷苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、萘磺酸鹽、磺胺酸鹽等等。這些鹽可以水合的、溶劑化或大體上無水的任何一種形式存在。優選溴氫化物為式I化合物的藥物學可接受的鹽。
術語「溶劑化物」指求(I)化合物或式(I)的藥物學可接受的鹽，其中適宜溶劑的分子摻入到晶體點陣中。適宜的溶劑在用溶劑化物達到所需要效果的給藥劑量基本無毒。適宜溶劑的實例為乙醇等。
結構A描述了通常甾族化合物的骨架結構和相應的偏號體系； 由式Ia和Ib定義的式I化合物可以通過如方案I和II所描述的方法製備，除非另外指出，所有的取代基都如前定義。試劑和起始原料對本領域普通技術人員來說可以很容易地得到。
方案1 式Ib 式Ia在方案I步驟A中，由結構(1)描述的甾族化合物經過溴化反應得到由結構(2)描述的溴化了的甾族化合物。
例如，一種適當取代的甾族化合物(1)，如孕烯醇酮，溶解於如甲醇這樣的適宜有機溶劑中並且用過量的溴化銅(II)處理。混合物加熱回流約2至24小時。冷卻後，過濾反應物並且用本領域公知的技術如提取方法及再結晶作用分離並純化產物。例如，濾液在真空下還原，殘餘物溶於適宜有機溶劑如二氯甲烷中並且用水、半飽和含水碳酸氫鈉及鹽水漂洗有機物。然後有機物經過如無水硫酸鈉這樣的適宜乾燥劑乾燥、過濾並真空濃縮。然後殘餘物從適宜有機溶劑如丙酮中重結晶得到溴化了的甾族化合物(2)在方案I中，步驟B的溴化甾族化合物(2)經過用適宜的脲、硫脲或胍處理的環化/消去反應得到C17雜環甾族化合物，這個化合物由式Ia描述，其中式I中的X是OH。適宜的脲類、硫脲類或胍類是脲、硫脲、胍、1-甲基-2-硫脲、苄脲，1-乙基胍等。
例如，溴化的甾族化合物(2)懸浮於一種適宜有機溶劑如乙醇中。用過量的適宜脲、硫脲或胍處理懸浮液並且加熱回流大約1.5小時。大約一半的溶劑在回流過程中被蒸出。反應液冷卻至室溫、過濾並且用適宜有機溶劑如乙醇洗滌固體。所得的固體在高真空下乾燥得到式Ia的C17雜環甾族化合物。
方案I中，步驟C的式Ia的C17雜環甾族化合物被氧化成由式Ib描述的C17雜環甾族化合物的酮衍生物。
例如，在惰性環境下如在氮氣環境中，將草醯氯溶於如二氯甲烷這樣的適宜有機溶劑中。溶液冷卻至大約-55℃並且邊攪拌溶液邊逐滴加入大約1.2當量的二甲基亞碸。攪拌約3分鐘後，將溶於適宜有機混合溶劑如二氯甲烷/二甲基亞碸(2∶1)的約0.33當量的式Ia的C17雜環甾族化合物，逐滴慢慢加入反應液中。加入完畢後反應液在-55℃下攪拌約30分鐘。加入一種過量的適宜的鹼如三乙胺，並且大約過5分鐘後將反應物加熱至室溫。然後利用本領域公知的技術分離並純化反應產物，例如用提取方法和急驟層析法。例如，反應物用二氯甲烷稀釋、用稀釋的碳酸氫鈉、鹽水漂洗，在無水硫酸鎂上乾燥、過濾並且真空濃縮。然後由使用有機溶劑的適宜混合洗脫液的急驟層析法純化殘餘物，例如在矽膠固定相上使用乙酸乙酯/己烷。純化的產物接下來可以從適宜混合溶劑如乙酸乙酯/己烷中再結晶得到式Ib描述的C17雜環甾族化合物。
或者用另一種方法，在方案II中式Ia和Ib的化合物可以由結構(3)描述的起始原料製備。
方案II
例如在方案II中，步驟A，一種適當取代的甾族化合物(3)，如16-脫氫孕烯醇酮溶於適宜有機溶劑如四氫呋喃中，並且用過量的5，5-二溴巴比土酸處理。加入濃縮的含水溴化氫並加熱反應物回流大約1小時。冷卻後，真空濃縮反應物。用如前面方案I步驟A中描述的提取技術和再結晶作用分離並純化產物，得到由結構(4)所描述的溴化了的甾族化合物。
方案II中的步驟B，用適宜的脲或硫脲處理溴化的甾族化合物(4)對其進行環化反應，得到由式Ia描述的C17雜環甾族化合物，其中式I中的X是OH。
例如，將溴化了的甾族化合物(4)懸浮於適宜有機溶劑如乙醇中。加入過量的適宜脲或硫脲並且加熱反應物回流大約1小時。在回流過程中大約一半的溶劑被蒸出。反應物冷卻至室溫並過濾反應物。用乙醇漂洗固體，高真空乾燥並從適宜溶劑如乙醇中再結晶，得到由式Ia所描述的C17雜環甾族化合物。
由式Ia描述的C17雜環甾族化合物接下來被氧化成如前面方案I步驟C中的式Ib描述的C17雜環甾族化合物。
式II的化合物的製備如方案III所描述。除非有另外的說明，所有的取代基均如前定義。試劑和起始原料對本領域普通技術人員來說能夠很容易地獲得。
方案III
方案III的步驟A中，由結構(5)描述的甾族化合物上的3-羥基取代基被一種適宜的保護基保護起來，得到由結構(6)描述的被保護的甾族化合物。用於羥基取代基的適宜保護基，這類基團的製備方法和裂解方法都在Y.W.Greene的「Protective Groups inOrgnic SYnthesis」，John WileY and Sons，Inc.，1981，Chapber2中有所描述。
例如，在惰性氣氛如氮氣環境下，將甾族化合物(5)如脫氫異雄酮溶於適宜有機溶劑中，如二甲基甲醯胺中。1當量適宜的保護基試劑如叔丁基二甲基甲矽烷氯化物加入到溶液中。加入稍微過量的適宜有機鹼如三乙胺連同一定催化量的4-二甲基氨基吡啶。反應物在室溫下攪拌1到2天。通過如提取方法和急驟層析法這些本領域公知的技術對產物進行分離和純化。例如用水稀釋反應物並且通過過濾收集固體。接著將固體溶於適宜有機溶劑如乙酸乙酯中，用稀鹽酸、半飽和碳酸氫鈉、鹽水漂洗，通過無水硫酸鎂進行乾燥，過濾並真空濃縮。然後用急驟層析法純化殘餘物得到被保護的甾族化合物(6)，其中急驟層析法是在適宜的固定相如矽膠上使用如乙酸乙酯/己烷這樣的適宜洗脫液。
方案III步驟B，被保護的甾族化合物(6)經過由W描述的雜環的加成得到由結構(7)描述的C17甾族化合物。
例如，在惰性氣氛如氮氣環境下，將過量的適當取代的雜環溶於適宜的無水有機溶劑中，如四氫呋喃中。適當取代的雜環實例有噻吩、呋喃、3-溴噻吩、3-溴呋喃及類似物。在-78℃到室溫下向反應物中一滴滴加入適宜的烷基鋰如正丁基鋰，產生相應的鋰化雜環。然後攪拌反應物約15分鐘並且在反應物中加入上面步驟A中製備的被保護的甾族化合物(6)。可選擇地，可以在-78℃至室溫下向被保護的甾族化合物(6)的溶液中加入鋰化雜環溶液。反應物攪拌約4小時然後再用本領域公知的技術，如提取方法和急驟層析法分離並純化產物。例如，用適宜有機溶劑如乙醚稀釋反應物，用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。用在適宜固定相如矽膠上使用適宜洗脫液如乙酸乙酯/己烷的急驟層析法對殘餘物進行純化，得到C17雜環甾族化合物(7)。
方案III步驟C中，C17雜環甾族化合物(7)經過脫水/脫保護反應得到由式IIa描述的脫水/脫保護C17甾族化合物。
例如，在氮氣環境下將C17雜環甾族化合物(7)溶於有過量4N鹽酸的1，4-二噁烷溶液中。反應物攪拌30分鐘到4小時並且用象提取方法和急驟層析法或再結晶作用這些本領域公知的技術對產物進行發離和純化。例如，用如二氯甲烷這樣的適宜有機溶劑稀釋反應物，用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，通過無水硫醇鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過從適宜溶劑如含水甲醇或含水丙酮中的再結晶作用純化殘餘物，得到式Ha的脫水/脫保護C17雜環甾族化合物。可選擇地，可以用在適宜固定相如矽膠上使用適宜洗脫液如乙酸乙酯/己烷的急驟層析法純化殘餘物，得到式IIa的脫水/脫保護C17雜環甾族化合物。
方案III步驟D中，式IIa的脫水/脫保護C17雜環甾族化合物上的3-羥基取代基，以和前面在方案I步驟C中描述的反應過程相類似的方式被氧化，生成由式IIb描述的C17雜環甾族化合物的3-酮衍生物。
由式(I)和式(II)的立體異構體包括的構型對本領域技術人員來說很容易製備，這一點是清楚的。
以下的實施例表示如方案I、II和III描述的典型的合成實例。應當說明的是這些實施例僅僅是舉證性的而並不以任何形式限制本發明的範圍。以下實施例所用到的下列術語表示的意思是「eq」指當量，「g」指克，「mg」指毫克，「mmol」指毫摩爾，「mL」指毫升，「℃」指攝氏度，「TLC」指薄層色譜法，「Rf」指保留係數且「σ」指低場於四甲基矽烷的百萬份數。
實施例1a (3β)-17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr·CH3CH2OH的製備方案I，步驟A孕烯醇酮(1.58g，5.00mmol)溶解於甲醇(180mL)並且用溴化銅(II)(6.7g，30.0mmol)處理。加熱反應物回流24小時。冷卻後，過濾反應物並在真空下濃縮濾液。溶解殘餘物於二氯甲烷(75mL)中並用水(125mL)洗滌。用二氯甲烷(25(mL)提取含水洗滌物，合併有機相併用半飽和碳酸氫鈉(2×100mL)漂洗接著再用鹽水(50mL)漂洗。經過無水硫酸鈉乾燥有機相、過濾並真空濃縮得到黃色油狀泡沫(2.3g)。通過從丙酮中再結晶作用泡沫得以純化，得到白色結晶狀固體21-溴-2β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(428mg)。(參見NumazaWa，M.和Nagaoka，M.，J.Org.Chem.(1985)，50，81關於製備所述化合物的文獻)。方案I，步驟B將21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(638mg，1.50mmol)懸浮於乙醇(25mL)中並加入硫脲(126mg，1.65mmol)。反應物加熱回流1.5小時讓半數的溶劑蒸出。將反應物冷卻至室溫並且過濾。用乙醇(2×1mL)洗滌沉澱物。在高真空下乾燥所得的白色固體，得到標題化合物(369mg)，熔點255-260℃(分解)。對C22H30N2OS·HBr·CH3CH2OH計算分析C，57.94；H，7.49；N，5.63；S，6.44.得到C，57.54；H，7.31；N，5.66；S，6.84.
C，57.61；H，7.35；N，5.65.
實施例1b(3β)-17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr·CH3CH2OH的製備方案II，步驟A16-脫氫孕烯醇酮(5.00g，15.90mmol)和5，5-二溴巴比土酸(4.55g，15.90mmol)溶於四氫呋喃(60mL)中。向攪拌的溶液中加入濃縮的含水溴化氫(100μL 48％溶液)並且加熱反應物回流1小時。稍微冷卻然後真空濃縮產生棕色油狀泡沫。溶解殘餘物於二氯甲烷(350mL)中，用50％飽和碳酸氫鈉(2×200mL)、鹽水(125mL)漂洗，經無水硫酸鎂乾燥、過濾並真空濃縮得到橙棕色固體21-溴-3β-17-羥基孕-5，16-二烯-20-酮(6.53g)，其中稍微帶有起始物質。方案II，步驟B將21-溴-3β-羥基孕-5，16-二烯-20-酮(16mmol)懸浮於乙醇(260mL)中並且加入硫脲(1.33g，17.5mmol)。加熱反應物回流1小時且蒸發掉大約半數的溶劑。使反應物冷卻至室溫。過濾收集固體並在高真空下乾燥，得到為亮黃色固體的標題化合物(3.62g)。濾液濃縮至大約20mL作為第二批物質，高真空下乾燥並和第一批物質合併總共得到4.25g。將其從乙醇中再結晶得到呈白色晶體狀固體的標題化合物(2.77g)，，熔點258-260℃(分解)；1H NMR(DMSO-d6)δ8.85(寬 單峰，2H)，6.81(s，1H)，6.28(dd，1H，J＝1.9，3.3Hz)，5.29(寬雙峰，1H，J＝4.7hz)，3.43(q，2H，J＝7.0Hz)，3.32-3.18(m，1H)，1.05(t，3H，J＝7.0Hz)，0.99(s，3H)，0.94(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)δ169.4，142.5，141.6，135.6，131.0，120.1，102.0，69.9，56.4，55.9，49.7，46.1，42.2，36.8，36.2，34.4，31.3，31.2，30.8，29.7，20.4，19.0，18.5，15.8；MS(CI，CH4)m/z(相對強度)371(MH+，76)，370(33)，369(34)，353(100)，83(26)，81(27).
實施例2 17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案I，步驟C在氮氣環境下將草醯氯(在二氯甲烷中的2.0M溶液，8.86mL，17.73mmol)溶於二氯甲烷(65mL)並且將溶液冷卻至-55℃。一滴滴加入二甲基亞碸(1.47mL，20.68mmol)且攪拌3分鐘。將實施例1a或1b製備的、溶於二氯甲烷(20mL)和二甲基亞碸(10mL)中的(3β)-17-(2-氨基-4-噻唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr·CH3CH2OH(2.94g，5.91mmol)4分鐘內緩慢加入反應液中，並且攪拌30分鐘。然後加入三乙胺(5.77mL，41.36mmol)並在5分鐘的攪拌之後將反應物升溫至室溫。用二氯甲烷(180mL)稀釋並用稀碳酸氫鈉(4×225mL)和3∶1的鹽水/飽和碳酸氫鈉(200mL)洗滌。經無水硫酸鎂乾燥有機相、過濾並真空濃縮得到棕色泡沫。用急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，矽膠)純化接著從乙酸乙酯/己烷中再結晶，在56℃下高真空乾燥2小時後得到呈淡橙色固體的標題化合物(135mg)，(Rf＝0.38，50％乙酸乙酯/己烷，SiO2)；1H NMR(DMSO-d6)δ6.85(寬單峰，2H)，6.45(s，1H)，6.06(寬三峰，1H，J＝1.9，3.0Hz)，5.35-5.31(m，1H)，3.43(dq，1H，J＝2.6，15.9Hz)，2.67(dd，1H，J＝1.8，16.0Hz)，1.21(s，3H)，0.97(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對強度)369(MH+，100)，368(23)；HRMS C22H29N2OS(MH+)計算值369.2001，觀測值369.1989.
實施例3 (3β)-17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr的製備方案I，步驟B將實施例1a步驟A中製備的21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(250mg，0.59mmol)懸浮於無水乙醇(15mL)，加入1-甲基-2-硫脲(64mg，0.71mmol)並回流75分鐘使溶劑濃縮至大約7mL。追加回流1小時。使反應物冷卻至室溫，過濾並且用乙醇(2×1ml)漂洗沉澱物。收集白色固體並高真空乾燥得到作為HBr鹽的標題化合物(152mg)，熔點256-259℃(分解)；1H NMR(DMSO-d6)δ6.86(寬單峰單峰，1H)，6.38(s，1H)，6.38(dd，1H，J＝1.9，3.1Hz)，5.30(寬雙峰 ，1H，J＝4.9Hz)，3.33-3.20(m，1H)， 3.02(s，3H)，1.00(s，3H)，0.95(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)δ169.3，142.7，141.6，135.6，131.5，120.1，101.7，69.9，56.5，49.8，46.3，42.2，36.8，36.2，34.4，32.5，31.4，31.2，30.9，29.8，20.5，19.0，15.9；MS(CI/CH4)m/z(rel.相對強度)385(MH+，80)，367(100)，83(58)，81(60)；HRMSC23H33N2O6(MH+)計算值385.2314，觀測值385.2296.
實施例4 17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案I，步驟C用與實施例2類似的方式，從實施例3所製備的(3β)-17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr製備本標題化合物。
實施例5 (3β)-17-〔2-氨基-4-噁唑基〕-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr的製備方案I，步驟B實施例1a所製備的21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(1.50mmol)懸浮於乙醇(25mL)中並加入脲(1.65mmol)。反應物加熱回流1.5小時使半數的溶劑蒸發掉。使反應物冷卻至室溫並過濾。用乙醇洗滌沉澱物並在高真空下乾燥固體得到標題化合物。
實施例6 17-(2-氨基-4-噁唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案I，步驟C用與實施例2類似的方式，從實施例5中製備的(3β)-17-(2-氨基-4-噁唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr製備本標題化合物。
實施例7 (3β)-17-(2-氨基-4-咪唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇HBr的製備方案I，步驟B實施例1中製備的21-溴-3β-羥基-17α-甲氧基-5-孕烯-20-酮(1.50mmol)懸浮於乙醇(25mL)中並加入胍(1.65mmol)。反應物加熱回流1.5小時使半數的溶劑蒸發掉。將反應物冷卻至室溫並過濾。用乙醇洗滌沉澱物並在高真空下乾燥固體，得到標題化合物。
實施例8 17-(2-氨基-4-咪唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案I，步驟C用與實施例2類似的方式，從實施例7中製備的(3β)-17-(2-氨基-4-咪唑基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇·HBr製備本標題化合物。
實施例9 (3β)-17-(2-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的製備方案III，步驟A在氮氣環境下將脫氫異雄酮(10.0g，34.67mmol)溶於二甲基甲醯胺(DMF，150mL)。在室溫、攪拌下加入氯化叔丁基二甲基矽烷(5.23g，34.67mmol)、三乙胺(5.32mL，38.14mmol)和一定催化量的4-二甲基氨基吡啶(0.21g，1.73mmol)。2天後將反應物傾入正在快速攪拌的水(1.5L)中。過濾白色固形物並用水(2×50mL)洗滌。用乙酸乙酯(350mL)溶解該固形物並且用0.5N鹽酸(2×150mL)、半飽和碳酸氫鈉(2×150mL)和鹽水(100mL)洗滌。有機相通過無水硫酸鎂乾燥、過濾並真空濃縮。用急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，15∶85，矽膠)純化殘餘物，得到白色固體(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(12.60g)，Rf＝0.78(乙酸乙酯/己烷，1∶1，矽膠)，熔點146-148℃。方案III，步驟B在氮氣環境下將噻吩(0.66mL，8.25mmol)溶於無水四氫呋喃(1.5mL)。慢慢加正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，4.69mL，7.5mmol)到正在攪拌的溶液中(放熱反應)。室溫下攪拌15分鐘並且加入上面步驟A中製備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(604mg，1.50mmol。攪拌反應物4小時然後用乙醚(100mL)稀釋。用0.5N鹽酸(45mL)、飽和碳酸氫鈉(45mL)、鹽水(30mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥、過濾並真空濃縮。通過急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，10∶90，矽膠)接著用從含水丙酮中再結晶作用純化殘餘物，得到蘭色固態的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(2-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇，Rf＝0.27(乙酸乙酯/己烷，1∶9，矽膠)，熔點164-168℃。方案III，步驟C在氮氣環境下用溶於1，4-二噁烷(4mL)中的4N鹽酸化合如上面方案III步驟B中製備的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(2-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.22g，0.45mmol)。室溫下攪拌反應物25分鐘。然後將反應物傾入二氯甲烷/飽和碳酸氫鈉(50mL∶30mL)中並且分離出各層。有飽和碳酸氫鈉(2×30mL)、鹽水(25mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，30∶70，矽膠)得以純化，獲得白色固態的標題化合物(0.11g)，Rf＝0.39(乙酸乙酯/己烷，35∶65，矽膠)，熔點190-195℃(分解)；1H NMR(CDCl3)δ7.14(dd，1H，J＝1.0，5.1Hz)，7.03(寬雙峰，1H，J＝3.5Hz)，6.97(dd，1H，J＝3.6，5.1Hz)，5.98(dd，1H，J＝2.0，3.2Hz)，5.41-5.37(m，1H)，3.60-3.47(m，1H)，1.07(s，3H)，1.03(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對強度)355(MH+，75)，337(100).
實施例10 17-(2-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案III，步驟D用與實施例2類似的方式，從實施例9中製備的(3β)-17-(2-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇製備本標題化合物。
實施例11 (3β)-17-(2-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的製備方案III，步驟B在氮氣環境下將呋喃(0.60mL，8.25mmol)溶於無水四氫呋喃(15mL)並且冷卻至大約0℃。慢慢往溶液中加入正丁基鋰(1.6M溶於己烷的溶液，4.69mL，7.5mmol)。5分鐘後將溶液升溫至室溫。在室溫下15分鐘之後，邊攪拌邊往反應物中加入實施例9步驟A中製備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(604mg，1.50mmol，溶於6mL四氫呋喃中)。過2小時後用乙醚(100mL)稀釋反應物並且用0.5N鹽酸(45mL)、飽和碳酸氫鈉(2×45mL)、鹽水(45mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥、過濾並真空濃縮。通過急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，1∶9，矽膠)純化殘餘物然後從含水甲醇中再結晶，在高真空度下經回流乙醇乾燥3小時，得到(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(2-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(302g)，Rf＝0.25(乙酸乙酯/己烷，1∶9，矽膠)，熔點129-133℃。方案III，步驟C在氮氣環境下，用溶於1，4-二噁烷(15mL)的4N鹽酸化合上面方案III步驟B中製得的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(2-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(3mmol)。在室溫下攪拌反應物20分鐘。然後將反應物傾入二氯甲烷/飽和碳酸氫鈉(200mL∶100mL)並分離出各層。用飽和碳酸氫鈉(100mL)、鹽水(100mL)洗滌有機層、經無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，25∶75，矽膠)純化殘餘物，得到呈白色固體的標題化合物，Rf＝0.24(乙酸乙酯/己烷3∶7，矽膠)，熔點105-116℃；1H NMR(CDCl3)δ7.35(d，1H，J＝1.8Hz)，6.36(dd，1H，J＝1.8，3.3Hz)，6.27(d，1H，J＝3.3Hz)，6.07(dd，1H，J＝2.1，3.3Hz)，5.41-5.36(m，1H)，3.61-3.48(m，1H)，1.07(s，3H)，0.99(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對強度) 339(MH+，55)，338(42)，337(36)，321(100)；HRMS C23H31O2(MH+)計算值339.2324，觀測值339.2328.
實施例12 17-(2-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案III，步驟D用與實施例2類似的方式，從實施例11中製備的(3β)-17-(2-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇中製備本標題化合物。
實施例13 (3β)-17-(3-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的製備方案III，步驟B在氮氣環境下將正丁基鋰(溶於己烷的1.6M溶液，7.81mL，12.5mmol)溶於四氫呋喃(20mL)並冷卻至-78℃。向溶液中一滴滴地加入3-溴噻吩(1.17mL，12.5mmol)。反應物攪拌30分鐘然後再加入預先冷卻的(-78℃)、溶於四氫呋喃(20-mL)、實施例9步驟A中製備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(1.01g，2.50mmol)的溶液，1.5小時後將反應物傾入乙醚/0.5N鹽酸(150mL∶65mL)中並分離出各層。用0.5N鹽酸(50mL)、飽和碳酸氫鈉(20mL)、鹽水(25mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，1∶9，矽膠)純化，獲得呈白色固體的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(3-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.88g)，Rf＝0.25(乙酸乙酯/己烷，1∶9，矽膠)，熔點176-178℃。方案III，步驟C在氮氣環境下，用溶於1，4-二噁烷(5mL)的4N鹽酸化合上面方案III步驟B中製備的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(3-噻吩基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.25g，0.51mmol)。在室溫下攪拌反應物40分鐘。然後用二氯甲烷(35mL)稀釋反應物。用飽和碳酸氫鈉(50mL)、鹽水(30mL)洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過從丙酮中的再結晶作用純化殘餘物，得到呈白色固體的標題化合物(0.123g)，Rf＝0.35(乙酸乙酯/己烷，35∶65，矽膠)，熔點215-219℃；1H NMR(CDCl3)δ7.26-7.23(m，1H)，7.19(s，1H)，7.19-7.17(m，1H)，5.93(dd，1H，J＝1.9，3.2Hz)，5.42-5.36(m，1H)，3.61-3.43(m，1H)，1.07(s，3H)，1.03(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對強度)355(MH+，77)，354(35)，353(25)，337(100).
實施例14 17-(3-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案III，步驟D用與實施例2類似的方式，從實施例13中製得的(3β)-17-(3-噻吩基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇中製備本標題化合物。
實施例15 (3β)-17-(3-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇的製備方案III，步驟B在氮氣環境下將正丁基鋰(溶於己烷的1.6M溶液，15.63mL，25.00mmol)溶於無水四氫呋喃(30mL)並冷卻至-78℃。一滴滴加3-溴呋喃(2.25mL，25.00mol)於溶液中。反應物攪拌30分鐘並且向反應物中加入溶於四氫呋喃的、實施例19步驟A中製備的(3β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-雄甾-5-烯-17-酮(2.01g，5.00mmol)的經冷卻的溶液(-78℃)。攪拌1.5小時，傾入乙醚/0.5N鹽酸(300mL∶125mL)中。分離出各層，用0.5N鹽酸(125mL)、飽和碳酸氫鈉(3×75mL)、鹽水(75mL)洗滌有機層，經無水硫酸鎂乾燥、過濾並真空濃縮。殘餘物純化是通過急驟層析(乙酸乙酯/己烷，10∶90，矽膠)，得到呈白色固體的產物2.03g。從含水丙酮中再結晶0.2g產物，得到呈白色固體的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(3-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(0.12g，Rf＝0.19(乙酸乙酯/己烷，1∶9，矽膠)，溶點156-158℃。方案III，步驟C在氮氣環境下，用溶於1，4-二噁烷(35mL)的4N鹽酸化合上面方案III步驟B中製備的(3β，17β)-3-〔〔(1，1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷〕氧基〕-17-(3-呋喃基)-雄甾-5-烯-17-醇(2.50g，5.31mmol)。室溫下攪拌化合物40分鐘，然後用二氯甲烷(150mL)稀釋反應物。用水(35mL)、飽和碳酸氫鈉(2×50mL)、鹽水(30mL)洗滌有機層，經無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過急驟層析法(乙酸乙酯/己烷，3∶7，矽膠)純化殘餘物，得到1.05g的呈白色固體的產物。從含水丙酮中再結晶部分產物並且在高真空度下經回流乙醇乾燥4小時，得到呈白色晶狀固體的標題化合物，Rf＝0.43(乙酸乙酯/乙烷，35∶65，矽膠)，熔點186-189℃；1H NMR(CDCl3)δ7.47(寬單峰 ，1H)，7.36(t，1H，J＝1.7Hz)，6.48(dd，1H，J＝0.8，1.8Hz)，5.83(dd，1H，J＝1.9，3.2Hz)，5.41-5.37(m，1H)，3.60-3.48(m，1H)，1.07(s，3H)，0.96(s，3H)；MS(CI/CH4)m/z(相對強度)339(MH+，68)，338(55)，337(28)，321(100)；HRMS C23H31O2(MH+)計算值339.2324，觀測值339.2304.
實施例16 17-(3-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-酮的製備方案III，步驟D用與實施例2類似的方法，從實施例15中製備的(3β)-17-(3-呋喃基)-雄甾-5，16-二烯-3-醇製備本標題化合物。
本發明提供了一種抑制需要治療的患者中甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的式(I)或式(II)的化合物。本發明進一步提供了一種治療患雄激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的式(I)或式(II)的化合物。此外，本發明還提供了一種治療患雌激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的式(I)或式(II)的化合物。
患雄激素依賴性障礙的患者，例如患前列腺癌、良性前列腺增生、男性方式脫髮、女子男性化和多毛症的患者可以從象式(I)或式(II)化合物這樣的C17-20裂解酶抑制劑中受益。患雌激素依賴性乳腺癌的患者也可以從象式(I)或式(II)化合物這樣的C17-20裂解酶抑制劑中受益。
正如這裡所使用的，術語「患者」指患有或有危險患有雄激素依賴性障礙的溫血動物，例如哺乳動物。應當清楚的是，人類、小鼠和鼠類都包括在術語「患者」的範圍內。
給患者施用式(I)或式(II)的化合物會抑制患者體內甾族化合物C17-20裂解酶活性。因此，用式(I)或式(II)的化合物治療患者可以抑制雄激素依賴性障礙或雌激素依賴性障礙。
患者需要用一種抑制甾族化合物C17-20裂解酶的試劑，例如式(I)或式(II)的化合物進行治療。對患有某些雄激素依賴性障礙的患者，甾族化合物C17-20裂解酶活性的提高被看作是其病症發展的促進因素。
基於標準臨床和實驗的測試及操作，作為本技術領域專業人員的護理診斷者能夠很容易地判斷出哪些患者需要用甾族化合物C17-20裂解酶的抑制劑來治療，例如用式(I)或式(II)的化合物。
有效抑制量的式(I)或式(II)化合物是指這樣的劑量，即單或多劑量給患者用藥後，該劑量可有效地提供對甾族化合物C17-20裂解酶的抑制作用。
作為本技術領域專業人員的護理診斷者通過應用公知技術及通過在類似情況下得到的觀察結果，可以很容易地確定式(I)或式(II)化合物的有效抑制量。在確定有效量或劑量時，護理診斷者要考慮很多因素，包括但不僅限於哺乳動物的種類；它的大小、年齡和一般健康狀況；所涉及的特定雄激素依賴性障礙；病症的程度或病症的困難或嚴重性；單個患者的反應；服用的特定化合物；給藥方式；服用製品的生物利用率特徵；所選擇的劑量方案；伴隨藥物的使用；以及其它相關的情況。
有效抑制量的式(I)或式(II)化合物預計為約每天每公斤體重0.625毫克(mg/kg/天)到約62.5mg/kg/天。優選的用量預計為約5到約30mg/kg/天。
在有效治療患者的過程中，有效量的式(I)或式(II)的化合物可以任何一種形式或方式給藥，該形式或方式能使化合物成為生物可利用的，包括口服和腸胃外途徑。例如式(I)或式(II)的化合物可以通過口服、皮下、肌內、靜脈內、經皮膚、鼻內、直腸等方式給藥。一般優選口服給藥和靜脈內給藥方式。製備製劑的專業人員根據所選化合物的特殊性質、所要治療的病症、病症的階段及其它相關情況，可以很容易地選擇合適的給藥形式和給藥方式。
化合物可以單獨或以和藥物學可接受的載體或賦形劑結合的藥物組合物形式給藥，其中載體或賦形劑的比例和性質要根據所選化合物的溶解性和化學特性、選擇的給藥途徑、標準藥物學實驗而確定。為了達到穩定、便於結晶、增加溶解性等等目的，可以將本發明的化合物(儘管其自身是有效的)以它們的藥物學可接受的酸加成鹽形式配製及給藥。
在另一種實施方案中，本發明提供了包括與一種或多種惰性載體混合或者和其締合的式(I)或式(II)化合物的多種組合物。這些組合物用作，例如檢測標準、製造大批量貨物的捷徑、或藥物組合物。式(I)或式(II)化合物的可檢測量是指通過本領域技術人員公知和理解的標準測定方法和技術很容易測定的量。式(I)或式(II)化合物的可檢測量通常會從約組合物重量的0.001％到75％。惰性載體可以是任何不降解或者不和式(I)或式(II)化合物共價反應的物質。適宜的惰性載體的實例有水，如通常在高效液相色譜(HPLC)分析中使用的那些含水緩衝劑；有機溶劑，例如乙腈、乙酸乙酯、乙烷等等；及藥物學可接受的載體或賦形劑。
更具體地說，本發明提供了多種藥物組合物，該組合物包括有效抑制量的與一種或多種藥物學可接受的載體或賦形劑混合或者締合的式(I)或式(II)化合物。
用藥物學領域公知的方式製備藥物組合物。載體或賦形劑可以是用作活性成分的賦形劑或介質的固體、半固體或液體物質。適宜的載體或賦形劑是本領域公知的。藥物組合物可適於口服或非腸道使用，包括局部使用，還可以給患者以片劑、膠囊、栓劑、溶液、懸液等等形式給藥。
本發明的化合物，例如可以與稀釋劑或可食用載體口服給藥。可以將它們包入明膠膠囊或者壓成片劑。為了達到口服治療給藥的效果，化合物可以和賦形劑結合併且其使用的形式有片劑、錠劑、膠囊、酏劑、懸液、糖漿劑、糯米紙囊劑、咀嚼用膠等等。這些製劑應該含有至少4％的活性成分即本發明化合物，但可以根據特定形式有所變化，適宜的變化在4％至約70％單位重量之間。本發明化合物在組合物中的含量應當可以獲得適宜的劑量。優選的本發明組合物和製劑製備成口服劑量單位形式含有5.0-300毫克本發明化合物。
片劑、丸劑、膠囊、錠劑等還可以含有一種或多種以下佐劑粘合劑，如微晶纖維素、黃蓍樹膠或明膠；賦形劑如澱粉或乳糖；崩解劑，如藻酸、Primogel、玉米澱粉等等；潤滑劑，如硬脂酸鎂或SteroteX；滑移劑如膠體二氧化矽；以及加入甜味劑如蔗糖或糖精或者加入調味劑，例如薄荷、水楊酸甲酯或桔子香精。當劑量單位形式是膠囊時，除了以上類型物質外，還可以含有如聚乙二醇或脂肪油這樣的液體載體。其它劑量單位形式可以含有其它不同物質，其改變劑量單位的物理形式，例如用作包衣的物質。因此，片劑或丸劑可以用糖、紫膠或其它腸包衣劑包衣。除本發明化合物外，糖漿劑可以含有作為甜味劑的蔗糖和某些防腐劑、染色劑和著色劑及香料。製備這些不同組合物所用的物質在其用量上必須具有藥物學純度並且是無毒的。
為了達到非腸道治療給藥的目的，包括局部給藥，本發明的化合物可以摻入一種溶液或懸液中。這些製劑中至少應包含0.1％的本發明化合物，但可以在0.1和約50％製劑重量之間變化。這種組合物中存在本發明化合物的量是能獲得適宜劑量的量。優選的本發明組合物和製劑製備成非腸道劑量單位含有5.0-100毫克本發明化合物。
溶液或懸液還可以包括一種或多種以下佐劑無菌稀釋劑，如注射用水、0.6％食鹽水、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑如苄醇或羥苯甲酸甲酯；抗氧化劑如抗壞血酸或者亞硫酸氫鈉；螯合劑，如乙二胺四乙酸；緩衝劑如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽以及用來調節張力的介質例如氯化鈉或葡萄糖。非腸道製劑可以裝入安瓿瓶、一次性注射器或者玻璃或塑料作的多劑量小瓶。
正如任何一組擁有特定同類功效的結構相關的化合物那樣，式(I)和式(II)的化合物在其應用過程中優選某些組及某些構型。
一般優選其中X是OH的式(I)化合物。其中Y是S的式(I)化合物也常常優選。往往優選其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵的式(I)化合物。
通過優選其中X是OH的式(II)化合物。其中W是3-呋喃基的式(II)化合物也往往是優選的。常常優選其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵的式(II)化合物。
以下序列列舉了根據本發明的化合物1)17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH；2)17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；3)17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；4)17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr；5)17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3-酮；6)17-(2-氨基-4-噁唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr；
7)17-(2-氨基-4-噁唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；8)17-(2-氨基-4-咪唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr；9)17-(2-氨基-4-咪唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；10)17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；11)17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；12)17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；13)17-(2-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；14)17-(2-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；15)17-(3-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；16)17-(3-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3-酮；17)17-(3-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇；18)17-(3-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3-酮。
以下的研究舉例說明了式(I)和式(II)化合物的效用。應當清楚這些研究僅起舉證作用而不以任何形式限制本發明的範圍。這裡所使用的下列術語具有指明的意思「mM」指毫摩爾濃度；「μM」指微摩爾濃度；「單位」指國際接受的蛋白質測量單位；「S.D.」指標準偏差；「ηmol」指納摩爾；「μg」指微克；「ηg」指納克；「μL」是指微升；「mCi」指毫居裡；「μCi」指微居裡。體外活性利用體外分析法，用來自人類或cynomolgus猴睪丸組織的酶微粒體製品確定作為甾族化合物C17-20裂解酶抑制劑的式(I)和式(II)化合物的活性。人測驗對象從治療睪丸切除術中獲得。從人或cynomolgus猴的組織中分離微粒體。待測化合物溶於二甲基亞碸並用0.05M pH7.4的磷酸鉀緩衝液稀釋至測試化合物所需要的濃度。試樣包括由1mM NADPH、5mm葡糖-6-磷酸酯、1IU/mL葡糖-6-磷酸脫氫酶及微粒體蛋白質組成的總體積為0.2mL的NADPH再生系統。對照試樣中含有包括二甲基亞碸在內的所有成分，但不包含測試化合物。所有試樣進行兩次測定。用20至62μg/mL微粒體蛋白質、緩衝劑和以上描述的NADPH再生系統在34℃下與測試化合物一起培養0或40分鐘以測定時間依賴性C17-20裂解酶的失活。然後取出180μL的等分試樣並且添加7-3H-17α-羥基孕烯醇酮(11.2mCi/mmole；0.2μCi每份試樣)再加入未標記的17α-羥基孕烯醇酮使每份試樣的底物總濃度為1.0μM或0.3μM後並緊接著在34℃下培養6分鐘來檢測酶活性。為了測定由測試化合物產生的可逆抑制作用，將底物即7-3H-17α-羥基孕烯醇酮(11.2mCi/mmole；0.20μCi每份試樣)外加未標記的17α-羥基孕烯醇酮加入到其它試樣成分中以達到0.3μM(＝Km)最終濃度並開始反應。全部試樣在34℃下培養6分鐘。加入5mL的氯仿/甲醇(2∶1)終止各個檢測。這時還要加入代表底物和產物的載體甾族化合物17α-羥基孕烯醇酮、脫氫表雄酮和雄-5-烯-3β，17β-二醇以及0.8mL的蒸餾去離子水。用Moore和Wilson的方法提取甾族化合物(Methods in EnzY mol.，eds.O′MalleY，B.W.and Hardman，J.G.36，1975，pp.466-474)。使用氮氣蒸發含有甾族化合物的有機相，殘餘物溶於己烷中的18％四氫呋喃(v/v)並且通過在Si60(5μM)柱(250×4mm)上的HPLC分離甾族化合物，其中使用了18-22％在己烷中的四氫呋喃(v/v)的梯度。用Padio-metric Model HS或Model A515 Flo-One檢測器測定甾族化合物峰的放射性。
每個檢測的酶活性可以從底物轉化成產物的百分比計算出來，且計算出的結果以對照物的抑制百分比來表示。IC50值的測定是通過將這些數據代到兩參數劑量-反應方程中進行的。當式(I)和(II)的化合物用以上過程進行測試時，其結果可見以下的表1、表2和表3。表1篩選由17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH引起的人睪丸C17-20裂解酶的時間依賴性抑制

表2篩選由17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr引起的cynomolgus猴睪丸C17-20裂解酶的時間依賴性抑制以及由17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮引起的cynomolgus猴睪丸C17-20裂解酶的抑制

表3篩選由不同式(II)化合物引起的cynomolgus猴睪丸C17-20裂解酶的抑制

權利要求
1.一種下式的化合物或其藥物學可接受的鹽及/或溶劑化物， 其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；以及Y是S、O或NR；其中R，R1和R2各自獨立是氫及C1-C4烷基。
2.根據權利要求1的化合物，其中X是OH。
3.根據權利要求2的化合物，其中Y是S。
4.根據權利要求3的化合物，其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵。
5.根據權利要求1的化合物，其中所說的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH。
6.根據權利要求1的化合物，其中所說的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
7.根據權利要求1的化合物，其中所說的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
8.根據權利要求1的化合物，其中所說的化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮。
9.根據權利要求1的化合物，其中所說的化合物是17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
10.一種抑制需要治療的患者中甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，包括給所說的患者施用有效抑制量的下式化合物或其藥物學可接受的鹽， 其中表示單鍵或雙鍵；X是＝O或-OH；W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基。
11.根據權利要求10的方法，其中X是OH。
12.根據權利要求11的方法，其中W是3-呋喃基。
13.根據權利要求10的方法，其中化合物是17-(2-噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
14.根據權利要求10的方法，其中化合物是17-(2-(呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
15.根據權利要求10的方法，其中化合物是17-3-(噻吩基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
16.根據權利要求10的方法，其中化合物是17-(3-呋喃基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
17.一種抑制需要治療的患者中甾族化合物C17-20裂解酶活性的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的根據權利要求1的化合物。
18.根據權利要求17的方法，其中X是OH。
19.根據權利要求18的方法，其中Y是S。
20.根據權利要求19的方法，其中C4-5是單鍵而C5-6是雙鍵。
21.根據權利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr·CH3CH2OH。
22.根據權利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇。
23.根據權利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
24.根據權利要求17的方法，其中化合物是17-(2-氨基-4-噻唑基)雄甾-5，16-二烯-3-酮。
25.根據權利要求17的方法，其中化合物是17-〔2-(甲氨基)-4-噻唑基〕雄甾-5，16-二烯-3β-醇·HBr。
26.一種治療患雄激素依賴性障礙患者的方法，該方法包括給所說的患者施用有效抑制量的權利要求1或10的化合物。
27.一種藥物組合物，它含有與惰性載體混合或者締合的可檢測量的權利要求1的化合物。
28.一種藥物組合物，它含有抑制甾族化合物C17-20裂解酶活性有效量的權利要求1的化合物，其中所說的化合物和一種或多種藥物學可接受的載體或賦形劑相混合或者相締合。
29.一種藥物組合物，它含有抑制甾族化合物C17-20裂解酶活性有效量的權利要求10的化合物，其中所說的化合物和一種或多種藥物學可接受的載體或賦形劑相混合或者相締合。
30.根據權利要求1的化合物作為藥物活性化合物的應用。
31.權利要求1-16中任一權利要求的化合物用於抑制甾族化合物C17-20裂解酶的應用。
32.權利要求1-16中任一權利要求的化合物用於治療前列腺癌、良性前列腺增生、雄性方式的脫髮、女子男性化或多毛症的應用。
33.權利要求1-16中任一權利要求的化合物用於治療雌激素依賴性乳腺癌的應用。
34.權利要求1-16中任一權利要求的化合物選擇性地和藥物學可接受的載體結合用於製備藥物組合物，該藥物組合物用來治療前列腺癌、良性前列腺增生、雄性方式的脫髮、女子男性化或多毛症。
35.權利要求1-16中任一權利要求的化合物選擇性地和藥物學可接受的載體結合用於製備藥物組合物，該藥物組合物用來治療雌激素依賴性乳腺癌。
36.一種下式化合物或其藥物學可接受的鹽及/或溶劑化物的製備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且Y是S、O或NR；其中R、R1和R2各自獨立地是氫及C1-C4烷基，該方法包括將下式的化合物與適宜的脲、硫脲或胍反應， 式中的、Y、R、R1和R2如上定義。
37.一種下式化合物或其藥物學可接受的鹽及/或溶劑化物的製備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且Y是S、O或NR；其中R、R1和R2各自獨立地是氫及C1-C4烷基，該方法包括將下式的化合物氧化， 式中的、Y、R、R1和R2如上定義。
38.一種下式化合物或其藥物學可接受的鹽及/或溶劑化物的製備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且Y是S或者O；其中R、R1和R2各自獨立地是氫及C1-C4烷基，該方法包括將下式的化合物與適宜的脲或者硫脲反應， 式中的、Y、R、R1和R2如上定義。
39.一種下式化合物或其藥物學可接受的鹽的製備方法， 其中，表示單鍵或雙鍵；且W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基；該方法包括氧化下式的化合物， 式中的和W如上定義。
40.一種下式化合物或其藥物學可接受的鹽的製備方法， 其中表示單鍵或雙鍵；且W選自 和 其中Q是O、S或NR；其中R是氫或C1-C4烷基，該方法包括用4N的鹽酸處理下式的化合物， 式中的Pg是一種適宜的保護基團；以及和W如上定義。
全文摘要
本發明涉及可用作甾族化合物C
文檔編號A61K31/58GK1133596SQ94193950
公開日1996年10月16日 申請日期1994年9月29日 優先權日1993年10月27日
發明者N·P·皮特, J·P·伯克哈特, C·P·蓋茨 申請人:默裡爾藥物公司