一種中藥製劑的質量控制方法

2023-09-14 21:15:55

專利名稱：一種中藥製劑的質量控制方法
一種中藥製劑的質量控制方法技術領域
本發明屬於中藥技術領域，涉及中藥的檢測方法，尤其是一種夜尿寧製劑的質 量控制方法。
背景技術：
夜尿寧製劑的處方為肉桂、桑螵蛸、補骨脂(鹽制)、大青鹽，具有補腎散寒 止溼縮尿功效的中藥製劑，特別用於治療兒童遺尿病，對於腎氣不足型的小兒遺尿症具 有較好的臨床療效，該藥有效克服了西醫治療遺尿症副作用大，見效慢，治癒率低等缺 陷。
本品收載於《中華人民共和國衛生部藥品標準》(中藥成方製劑)第十七冊 中，處方由肉桂，補骨脂(鹽制)，桑螵蛸，大青鹽組成，其中補骨脂為豆科植物補骨脂 PsoraleacorylifoliaL.的乾燥成樹果實，有補腎、助陽、止瀉的功效，肉桂為樟科植物肉桂 Cinnamomum cassia Presl的乾燥樹皮，有補陽、溫腎、祛寒、通脈、止痛的功效，桑螵蛸 為節肢動物門昆蟲綱螳螂科昆蟲大刀螂Tenodera sinensis Saussure小刀螂Statiliamaculata 或巨斧螳螂Hierodula patellifera的乾燥卵鞘，有益腎、固精、縮尿、止帶的功效，大青 鹽引藥入腎經。全方以收澀為主，溫腎縮尿，特別是丸劑加蜜和丸，加強了營養滋潤作 用。
目前衛生部頒發的現有夜尿寧的質量控制方法中，沒有控制內在質量的項目， 只有性狀鑑別和丸劑通則項有關各項規定的檢查。局限性很大，專屬性不強，難以有效 控制成品的質量。眾所周知，中藥成分十分豐富，而基礎研究還較薄弱，有效成分往往 不明確，或者含量極低，其作用的發揮常常是多成分，多靶點的綜合作用，這些都給中 成藥的質量控制及質量標準的研究增加了難度。
薄層色譜法(TLC)鑑別中對照藥材的確定越來越多的運用在中藥製劑中，由於 對照品的限制或選擇對照品不夠專屬等原因，常選用對照藥材作為TLC鑑別的色譜對 照。
高效液相色譜(HPLC)具有快速、靈敏、分離效能高等優點，在中藥鑑定中， 採用HPLC法分離特徵成分後，用紫外檢測器(UV)或質譜檢測器(MS)進行結構分析和 定量分析，是全面評價質量的有效方法。中國藥典(2000年版)一部中就有59種藥材和 50種中成藥採用HPLC法進行鑑定，而且還不斷有人用HPLC法對其它的中藥進行鑑定 和成分分析研究。發明內容
本發明的目的在於克服現有技術的不足之處，提供一種能夠即能定性又能定量 的、檢測手段簡單，結果準確的中藥製劑夜尿寧製劑的質量控制方法，通過本發明的質 量控制方法，有效控制這種夜尿寧製劑的質量，保證了該製劑的臨床療效。
本發明的目的是通過以下技術方案實現的
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，步驟是
(1)對製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸進行顯微定性鑑定；
(2)以桂皮醛為對照品，對製劑中肉桂進行薄層定性鑑別；
(3)對製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定。
而且，所述製劑包括夜尿寧丸劑、夜尿寧片劑、夜尿寧膠囊劑、夜尿寧散劑或 夜尿寧顆粒劑。
而且，所述步驟(1)的定性鑑定方法如下
取製劑置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
而且，所述步驟O)的鑑別方法為取製劑適量，加硅藻土適量，研碎，加乙 酸乙酯，超聲處理，放冷，濾過，濾液即為供試品溶液；另取桂皮醛對照品，加乙酸乙 酯製成溶液，即為對照品溶液；按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的工藝 製成製劑，再按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液；薄層色譜法參照《中國藥 典》2005年版一部附錄VI B試驗，吸取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照樣品溶液， 分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴 以二硝基苯胼乙醇試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的 斑點，陰性對照樣品無幹擾。
而且，所述步驟(3)的含量測定方法為採用高效液相色譜法，測定本製劑 中補骨脂有效成分補骨脂素和異補骨脂素的總含量，色譜柱為C18或C8或C4柱，以 甲醇水為流動相，檢測波長為200-300nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於 3000；分別取補骨脂素與異補骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇或乙酸乙酯中的任 意一種製成混合溶液，搖勻，即得對照品溶液；另取本製劑適量，研細，精密稱定，精 密加入甲醇或乙酸乙酯中的任意一種，稱定重量，超聲處理或加熱回流提取方法中的任 意一種，放冷，稱定重量，用甲醇或乙酸乙酯中的任意一種再補足減失的重量，搖勻， 濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相 色譜儀測定含量。
而且，所述步驟(3)的含量測定夜尿寧製劑中，每g製劑含補骨脂以補骨脂素 (C11H6O3)與異補骨脂素(C11H6O3)的總量不得少於1.35mg。
本發明的優點和積極效果是
1、本發明克服了現有技術的不足，經過對該藥物的各種藥化學成分和藥理作用 報導的分析，增加了君藥臣藥補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑別方法，以及活性成分桂 皮醛為對照品的肉桂的薄層鑑別方法，和高效液相色譜法對補骨脂中有效成分補骨脂素 與異補骨脂素總量進行的含量測定方法。
2、本發明建立了專屬性強的定性鑑別方法和精確的含量測定方法，使用現代手 段把顯微鑑別、色譜鑑別與性狀鑑別等方法相輔相成，提高了其原有的質量標準，全面 控制了夜尿寧製劑的質量，對於保證藥品質量、更好地發揮療效具有非常重要的作用。
3、本發明提供了一種夜尿寧製劑新的質量控制方法，增加了肉桂中活性成分桂皮醛的薄層色譜鑑別，經方法學試驗確認方法可行，且陰性無幹擾，同時選擇了補骨脂 中有效成分補骨脂素和異補骨脂素為測定指標，並進行了方法學考察，建立了夜尿寧制 劑HPLC的含量測定方法，本方法有較強的專屬性、重現性和可行性，操作簡單，結果 準確，能有效地進行質量控制，保證夜尿寧製劑的質量和療效。


圖1肉桂薄層鑑別凝膠色譜圖從左至右依次為陰性樣品溶液，樣品(批 號EM7001)，樣品(批號EM7002)，樣品(批號EM7003)，桂皮醛對照品(中檢 所)；
圖2為本發明補骨脂素對照品溶液光譜圖3為本發明異補骨脂素對照品溶液光譜圖4為本發明中補骨脂素異和補骨脂素對照品色譜圖5為本發明中補骨脂素異和補骨脂素供試品色譜圖6為本發明中補骨脂素異和補骨脂素陰性色譜圖。
具體實施方式
下面結合實施例，對本發明進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性 的，不能以下述實施例來限定本發明的保護範圍。
在以下實施例中夜尿寧製劑包括丸劑、片劑、膠囊劑、散劑或顆粒劑。
實施例1
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，包括如下步驟
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品1丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯20ml，超聲處理30分鐘，放冷， 濾過，濾液揮至約10ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml 含0.5μ1的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的 工藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中 國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各6 8 μ 1， 對照品溶液2μ1，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯 (17 3)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在 與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水(50 50)為流動相，檢 測波長為M6nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補 骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含各40 μ g的混合溶液，搖勻，即得對照品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量， 超聲處理(功率^OW,頻率33kHz) 30分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇再補足減失的重 量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供試品 溶液10 15μ1，注入液相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素 (C11H6O3)與異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少於1.35mg。
實施例2
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，包括如下步驟
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品1丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯30ml，超聲處理25分鐘，放冷， 濾過，濾液揮至約15ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml 含 μ 的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的工 藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中國 藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各10 μ 1，對照品 溶液Ιμ ，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯(15 5) 為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水00 60)為流動相，檢測 波長為246nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補骨 脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含各30 μ g的混合溶液，搖勻，即得對照 品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取3g，精密稱定，精密加入甲醇800ml，稱定重量， 超聲處理(功率^OW,頻率33kHz)45分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇再補足減失的重 量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供試品 溶液10 15μ1，注入液相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素 (C11H6O3)與異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少於1.35mg。
實施例3
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，包括如下步驟
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品2丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯50ml，超聲處理40分鐘，放冷，濾過，濾液揮至約20ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml 含0.5μ1的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的 工藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中 國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各6 8 μ 1， 對照品溶液2μ1，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)-_乙酸乙酯 (18 2)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在 與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水(60 40)為流動相，檢測 波長為246nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補骨 脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含各40 μ g的混合溶液，搖勻，即得對照 品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取4g，精密稱定，精密加入甲醇100ml，稱定重量， 超聲處理(功率^OW,頻率33kHz)45分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇再補足減失的重 量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供試品 溶液10 15μ1，注入液相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素 (C11H6O3)與異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少於1.35mg。
實施例4
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品1丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯10ml，超聲處理15分鐘，放冷， 濾過，濾液揮至約5ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml含 0.8μ1的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的工 藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中國 藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各5 μ 1，對照品 溶液Ιμ ，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯(17 3) 為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水(50 50)為流動相，檢測 波長為246nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補骨 脂素對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯製成每Iml含各40yg的混合溶液，搖勻，即得 對照品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入乙酸乙酯50ml，稱定 重量，超聲處理(功率^OW,頻率33kHz)30分鐘，放冷，稱定重量，用乙酸乙酯再補足 減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1 與供試品溶液10 15 μ 1，注入液相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素(C11H6O3)與異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少於1.35mg。
實施例5
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，包括如下步驟
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品1丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯20ml，超聲處理30分鐘，放冷， 濾過，濾液揮至約10ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml 含0.5μ1的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的 工藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中 國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各6 8μ1， 對照品溶液2μ1，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯 (17 3)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在 與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水(70 30)為流動相，檢測 波長為246nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補骨 脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含各40 μ g的混合溶液，搖勻，即得對照 品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加 熱回流提取45分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇再補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾 液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供試品溶液10 15 μ 1，注入液 相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素(C11H6O3)與異補骨脂素 (C11H6O3)的總量計，不得少於1.35mg。
實施例6
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，包括如下步驟
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品1丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯25ml，超聲處理15分鐘，放冷， 濾過，濾液揮至約10ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml 含0.6μ1的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的 工藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中 國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各6 8 μ 1，對照品溶液2μ1，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯 (20 1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在 與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水(35 65)為流動相，檢測 波長為246nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補骨 脂素對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯製成每Iml含各50yg的混合溶液，搖勻，即得 對照品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入乙酸乙酯50ml，稱定 重量，加熱回流提取30分鐘，放冷，稱定重量，用乙酸乙酯再補足減失的重量，搖勻， 濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供試品溶液10 15μ1，注入液相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素(C11H6O3) 與異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少於1.35mg。
實施例7
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，包括如下步驟
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品1丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯30ml，超聲處理15分鐘，放冷， 濾過，濾液揮至約10ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml 含0.5μ1的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的 工藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中 國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各6 8μ1， 對照品溶液2μ1，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯 (17 3)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在 與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品為幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水(50 50)為流動相，檢測 波長為246nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補骨 脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含各40 μ g的混合溶液，搖勻，即得對照 品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取4g，精密稱定，精密加入甲醇100ml，稱定重量， 超聲處理(功率^OW,頻率33kHz)45分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇再補足減失的重 量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供試品 溶液10 15μ1，注入液相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素 (C11H603)與異補骨脂素(C11H603)的總量計，不得少於1.35mg。
實施例8
一種夜尿寧製劑的質量控制方法，包括如下步驟
(1)本製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定方法
取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁 稍厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈 類多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有 長方形或方形結晶。
(2)以桂皮醛為對照品，本製劑中肉桂的薄層定性鑑別方法
取本品2丸，加硅藻土相，研碎，加乙酸乙酯30ml，超聲處理15分鐘，放冷， 濾過，濾液揮至約10ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml 含 μ 的溶液，作為對照品溶液。按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的工 藝製成丸劑，在按上述供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。照薄層色譜法(《中國 藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各5 μ 1，對照品溶 液0.5μ1，分別點於同一以矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C )_乙酸乙酯(15 5) 為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液。供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹擾。
(3)本製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定方法
採用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇水(60 40)為流動相，檢 測波長為M6nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補 骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含各50 μ g的混合溶液，搖勻，即得 對照品溶液；另取本製劑適量，剪碎，取3g，精密稱定，精密加入甲醇100ml，稱定重 量，超聲處理(功率^OW,頻率33kHz)45分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇再補足減失 的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供 試品溶液20 μ 1，注入液相色譜儀測定含量；該夜尿寧製劑中，每g含補骨脂以補骨脂素 (C11H6O3)與異補骨脂素(C11H6O3)的總量計，不得少於1.35mg。
為了完成本發明，申請人做了大量的研究，對含量測定進行了方法學考察，具 體考察了一下內容
(1)儀器與試藥
儀器日本SHIMADZULC-2010C，CLASS-VP 工作站。
試劑甲醇(色譜純，天津市康科德科技有限公司)，水為去離子水。
對照品補骨脂素與異補骨脂素(中國藥品生物製品檢定所購置，批號補骨 脂素200310;異補骨脂素200309均為含量測定用對照品)。
樣品夜尿寧丸天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂製藥廠提供(批號 E547001, E547002, Ε54700!3)。
(2)色譜條件
參照《中國藥典》2005年版一部補骨脂項下含量測定方法，且分別對補骨
脂素與異補骨脂素在190nm 400nm進行光譜掃描，確定檢測波長為246nm， 結果見圖2、3。 色譜柱DikmaC18 (250mm X 4.6mm 5 μ m)；流動相甲醇-水 (1:1);柱溫40°C ；流速lml/η ι。理論板數按補骨脂素峰計算應不低於3000。
(3)提取方法及時間的考察
a、提取溶劑與提取方法的考察與選擇取同一批號(EM700;3)樣品，剪碎，取2g，精密稱定，分別精密加入甲醇、乙酸乙酯各50ml，稱定重量，分別採用超聲處理與 加熱回流的方式，提取時間均為30分鐘，放冷，稱定各自重量，用各自溶劑補足減失的 重量，濾過，取續濾液，測定樣品中補骨脂素與異補骨脂素的總量。結果見表1，2。
表1採用甲醇為提取溶劑
權利要求
1.一種夜尿寧製劑的質量控制方法，其特徵在於控制方法的步驟是(1)對製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸進行顯微定性鑑定；(2)以桂皮醛為對照品，對製劑中肉桂進行薄層定性鑑別；(3)對製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定。
2.根據權利要求1所述一種夜尿寧製劑的質量控制方法，其特徵在於所述製劑包 括夜尿寧丸劑、夜尿寧片劑、夜尿寧膠囊劑、夜尿寧散劑或夜尿寧顆粒劑。
3.根據權利要求1所述一種夜尿寧製劑的質量控制方法，其特徵在於所述步驟(1) 的定性鑑定方法如下取製劑置顯微鏡下觀察種皮柵狀細胞淡棕色或紅棕色，表面觀類多角形，壁稍 厚，胞腔內含紅棕色物；石細胞類圓形或類長圓形，壁一面菲薄；木栓細胞表面觀呈類 多角形，壁稍後，木化，胞腔常含棕色或紅棕色物；不規則薄片黃色或棕黃色，布有長 方形或方形結晶。
4.根據權利要求1所述一種夜尿寧製劑的質量控制方法，其特徵在於所述步驟(2) 的鑑別方法為取製劑適量，加硅藻土適量，研碎，加乙酸乙酯，超聲處理，放冷，濾 過，濾液即為供試品溶液；另取桂皮醛對照品，加乙酸乙酯製成溶液，即為對照品溶 液；按處方配比，取除肉桂外的其他藥材按上述製法的工藝製成製劑，再按上述供試品 溶液製備方法製得陰性樣品溶液；薄層色譜法參照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B 試驗，吸取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照樣品溶液，分別點於同一以矽膠G薄層 板上，以石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯胼乙醇試液； 供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照樣品無幹 擾。
5.根據權利要求1所述一種夜尿寧製劑的質量控制方法，其特徵在於所述步驟 (3)的含量測定方法為採用高效液相色譜法，測定本製劑中補骨脂有效成分補骨脂素 和異補骨脂素的總含量，色譜柱為C18或C8或C4柱，以甲醇水為流動相，檢測波長 為200-300nm，理論塔板數按補骨脂素峰計算應不低於3000 ；分別取補骨脂素與異補骨 脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇或乙酸乙酯中的任意一種製成混合溶液，搖勻，即 得對照品溶液；另取本製劑適量，研細，精密稱定，精密加入甲醇或乙酸乙酯中的任意 一種，稱定重量，超聲處理或加熱回流提取方法中的任意一種，放冷，稱定重量，用甲 醇或乙酸乙酯中的任意一種再補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶 液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測定含量。
6.根據權利要求1所述一種夜尿寧製劑的質量控制方法，其特徵在於所述步驟 (3)的含量測定夜尿寧製劑中，每g製劑含補骨脂以補骨脂素(C11H6O3)與異補骨脂素 (C11H6O3)的總量不得少於1.35mg。
全文摘要
本發明涉及一種夜尿寧製劑的質量控制方法，步驟是(1)製劑中補骨脂、肉桂、桑螵蛸的顯微鑑定；(2)以桂皮醛為對照品，製劑中肉桂的薄層定性鑑別；(3)製劑中補骨脂素和異補骨脂素總量的含量測定。本發明建立了專屬性強的定性鑑別方法和精確的含量測定方法，使用現代手段把顯微鑑別、色譜鑑別與性狀鑑別等方法相輔相成，提高了其原有質量標準，全面控制了夜尿寧製劑的質量，對於保證藥品質量、更好地發揮療效具有非常重要的作用。
文檔編號A61P13/00GK102018762SQ200910070509
公開日2011年4月20日 申請日期2009年9月21日 優先權日2009年9月21日
發明者劉彤, 劉稚菲, 安適之, 李豔鈺, 王志強, 金兆祥 申請人:天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂製藥廠