低分子柑桔果膠用於增強免疫功能的應用的製作方法

2023-09-13 03:45:30

專利名稱：低分子柑桔果膠用於增強免疫功能的應用的製作方法
技術領域：
本發明專利涉及一種低分子柑桔果膠的新用途，尤其涉及低分子柑桔果膠用於製藥、食品和保健品中地應用。
背景技術：
天然柑桔果膠是一種多糖複合物(長鏈碳水化合物)，也是一種膳食纖維。它由天然柑桔水果如檸檬、柚子、桔子和桔的果皮和果肉中提取獲得。這種多聚糖的長鏈產物有許多分枝，具有很強的粘附功能。天然果膠是可溶性纖維，食用後不能被腸道吸收。儘管有一些在大腸內發酵，但天然柑桔果膠對於人體沒有非常有效的功用。
低分子柑桔果膠結構圖
低分子柑桔果膠是從天然果膠產物中提取得到的一種以半乳糖為主要成份的多糖，分子量小，無抗原性，水溶性好，容易被胃腸道吸收而進入血液循環。處理後的果膠分子量明顯小於天然果膠，分子結構也因甲基減少得到改變。它具有與惡性表型細胞親和，粘附特性，特異地殺傷已突變細胞的功能，使突變細胞在未形成之前即被清除。這種較小的多糖基團還能夠緊緊地結合在癌細胞膜表面上能與半乳糖結合的特定部位，形成一種特異的複合體，並阻止突變細胞間的聚集及突變細胞粘附到鄰近的細胞和組織。因此，具有預防多種疾病的功能，特別對癌細胞清除和控制能力有特異功能。

發明內容
為了進一步開發低分子柑桔果膠的用途，本發明的目的在於提供低分子柑桔果的新應用。
具體的說，是涉及低分子柑桔果膠用於製備增強免疫功能的藥品中的應用。
涉及低分子柑桔果膠用於製備增強免疫功能的食品中的應用。
涉及低分子柑桔果膠用於製備增強免疫功能的保健品中的應用。
低分子柑桔果膠不但具有防治癌症的功效，而且還能增強人體免疫功能。經過特殊技術處理的10KD純小分子柑桔果膠粉。特製後的果膠分子量明顯小於天然果膠，分子結構因甲基減少得到改變，容易被腸道吸收而進入血液循環。它能明顯改善食慾，增加免疫功能和調節免疫紊亂；能降低膽固醇預防動脈粥硬樣化。進入血液循環後能幫助人體排除有毒的重金屬。
通過大量的動物試驗及臨床觀察，本發明創造性的發現低分子柑桔果膠由於分子量較低，容易被吸收進入血液循環，刺激體內免疫系統尋找破壞突變細胞。抑制(Th2)，對抗過敏源，控制病毒細菌的傳染。幫助(Th1)清除有毒物質及突變細胞，維持一個平衡的免疫系統。低分子柑桔果膠具有增強人體免疫功能，調節和增加單核細胞細胞毒作用，它的成分rhamnogalacturonan能提高CD3+T細胞和NK細胞的細胞毒活性，增強T細胞的活動能力。
為了進一步說明低分子柑桔果膠的增強免疫功能的作用，下面對低分子柑桔果膠粉對小鼠免疫功能的影響做了動物實驗。
一、低分子柑桔果膠粉對小鼠細胞免疫功能的影響
表1 低分子柑桔果膠粉對小鼠遲髮型變態反應(DTH)的影響(x±SD)
**P＜0.01
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據進行方差齊性檢驗後，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表1可見，在其餘各劑量組與3.000g/kgBW組間比較，差異有極顯著性(P＜0.01)，在其餘各劑量組與0.000g/kg BW組間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)，即低分子柑桔果膠粉在3.000g/kg BW組能提高小鼠的遲髮型變態反應能力。
表2 低分子柑桔果膠粉對ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉化實驗的影響(x±SD)
*P＜0.05
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據方差不齊，經過對數和平方根轉換後，仍不滿足方差齊的要求，在經過秩次轉換後，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。有表2可見，在0.100g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異有顯著性(P＜0.05)，在其餘各劑量組與0.000g/kg BW組間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)，即低分子柑桔果膠粉在0.100g/kg BW組能提供ConA誘導小鼠淋巴細胞轉化能力。
由表1、2可見，低分子柑桔果膠粉小鼠細胞免疫功能測定結果陽性。
二、低分子柑桔果膠粉對小鼠體液免疫功能的影響
表3 低分子柑桔果膠粉對小鼠抗體生成細胞數的影響(x±SD)
*P＜0.05
**P＜0.01
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據進行方差齊性檢驗後，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表3可見，在0.100g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異均有顯著性(P＜0.05)。即低分子柑桔果膠粉在各劑量組均能增加小鼠控體生成細胞數。
表4 低分子柑桔果膠粉對小鼠半數溶血值(HC50)的影響(x±SD)
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據進行方差齊性檢驗後，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。有表4見，在各劑量組與0.000g/kg BW組間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。即低分子柑桔果膠粉對小鼠的半數溶血值無影響。
有表3、4可見，低分子柑桔果膠粉小鼠體液免疫功能測定結果陽性。
三、低分子柑桔果膠粉對小鼠單核一巨噬細胞吞噬功能的影響
表5 低分子柑桔果膠粉對小鼠單核-巨噬細胞碳廓清能力的影響(x±SD)
*P＜0.05
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據進行方差齊性檢驗後，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表5可見，在0.100g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異有顯著性(P＜0.05)，在其餘各劑量組與0.000g/kgBW組間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。即低分子柑桔果膠粉在0.100g/kg BW組能提高小鼠單核-巨噬細胞碳廓清能力。
表6 低分子柑桔果膠粉對小鼠巨噬細胞雞紅細胞吞噬率的影響(x±SD)
*P＜0.05
**P＜0.01
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據進行平方根反正弦轉換後，經過方差齊性檢驗，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表6可見，在1.000g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異有顯著性(P＜0.05)，在3.000g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異有極顯著性(P＜0.01)，在0.100g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異無顯著性(P＞0.05)。即低分子柑桔果膠粉在1.000g/kg BW組、3.000g/kg BW組能提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬率。
表7 低分子柑桔果膠粉對小鼠巨噬細胞雞紅細胞吞噬指數的影響(x±SD)
*P＜0.05
*P＜0.01
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據進行平方根反正弦轉換後，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表7可見，在1.000g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異有顯著性(P＜0.05)，在3.000g/kg BW組與0.000g/kgBW組間比較，差異有極顯著性(P＜0.01)，在0.100g/kg BW組與0.000g/kg BW組間比較，差異無顯著性(P＞0.05)。即低分子柑桔果膠粉在1.000g/kg BW組、3.000g/kg BW組均能提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬指數。
由表5、6、7可見，低分子柑桔果膠粉小鼠單核-巨噬細胞功能測定結果陽性。
四、低分子柑桔果膠粉對小鼠NK細胞活性的影響
表8 低分子柑桔果膠粉對小鼠NK細胞活性的影響(x±SD)
**P＜0.01
經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，原始數據進行平方根反正弦轉換後，經過方差齊性檢驗，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表8可見，在各劑量組與0.000g/kg BW組間比較，差異均有極顯著性(P＜0.01)，即低分子柑桔果膠粉在各劑量組均能提高小鼠NK細胞活性，即小鼠NK細胞活性測定結果陽性。
綜上所述，經口給予小鼠不同劑量的低分子柑桔果膠粉30d，小鼠的細胞免疫功能、體液免疫功能、單核-巨噬細胞功能、NK細胞活性測定結果均為陽性。對小鼠的體重增長、胸腺體重比值、脾臟體重比值均無影響。因此，低分子柑桔果膠粉具有增強免疫力的功能。
具體實施例
下面對本發明的具體實施例做進一步說明。
實施例1
1、柑桔果膠生產工藝流程(酸解法提取柑桔果膠)
首先將幹柑桔皮衝洗去雜、浸泡、瀝乾後，粉碎成2-4mm的小顆粒，然後在10倍於幹柑桔桔皮重量的稀鹽酸(濃度為1％，由31％的食品級鹽酸加水稀釋而成)的催化下在90±2℃下攪拌2小時提取果膠。經板框過濾，取得濾液。過濾液用4M的氫氧化鈉溶液(由食品級氫氧化鈉配製)中和至pH＝5後，減壓濃縮(真空度為660毫米水銀柱，溫度為50±2℃，濃縮比為4∶1)。濃縮液用96％的食品級乙醇沉澱(乙醇濃縮液為2∶1)，經板框過濾，取得沉澱物。沉澱物再用96％的食品級乙醇進一步清洗純化。取得純化物，經12小時真空乾燥(真空度為200毫米水銀柱，溫度為85±2℃)、無菌密閉研磨器研磨後，過35目篩成柑桔果膠(得率為10％)。
2、低分子柑桔果膠生產工藝流程
先將柑桔果膠在氫氧化鈉和氫氧化鉀得催化下在水中(25±2℃，果膠的濃度為5％，用3M氫氧化鈉/氫氧化鉀的混合液(摩爾比1∶5)，由食品級的氫氧化鈉和食品級的氫氧化鉀配製而成把果膠溶液的pH調至10)進行酯的水解(去甲基)和果膠解聚1小時，然後在鹽酸的催化下(25±2℃，用3M鹽酸(食品級)把果膠溶液的pH調至3)進行酯的水解(去甲基)和果膠解聚10小時。水解液用3M的氫氧化鈉/氫氧化鉀的混合液(摩爾比1∶5，由食品級的氫氧化鈉和食品級的氫氧化鉀配製而成)進行部分中和至pH＝6。水解液用96％的食品級乙醇沉澱(乙醇∶濃縮液為3∶1)，經板框過濾，取得沉澱物。沉澱物再用96％的食品級乙醇進一步清洗純化。取得純化物，經12小時真空乾燥(真空度為200毫米水銀柱，溫度為85±2℃)、無菌密閉研磨器研磨，過35目篩成低分子柑桔果膠(得率為20％)。
低分子柑桔果膠粉由低分子柑桔果膠直接研磨製得，製得後的低分子柑桔果膠粉可直接包裝成食品食用。
實施例2
將實施例1得到的低分子柑桔果膠作為食品添加成分，加入到日常食用的食品中，製得含低分子柑桔果膠的食品。
實施例3
將實施例1得到的低分子柑桔果膠添加常規輔料，製成口服液、膠囊、片劑等保健品形式服用。
實施例4
將實施例1得到的低分子柑桔果膠添加常規輔料，製成口服液、膠囊、片劑等作為增強人體免疫功能的藥品服用。
權利要求
1.低分子柑桔果膠用於製備增強免疫功能的藥品中的應用。
2.低分子柑桔果膠用於製備增強免疫功能的食品中的應用。
3.低分子柑桔果膠用於製備增強免疫功能的保健品中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種低分子柑桔果膠的新用途，尤其涉及低分子柑桔果膠用於製藥、食品和保健品中的應用。低分子柑桔果膠分子量明顯小於天然果膠，分子結構因甲基減少得到改變，容易被腸道吸收而進入血液循環。它能明顯改善食慾，增加免疫功能和調節免疫紊亂；能降低膽固醇預防動脈粥樣硬化。進入血液循環後能幫助人體排除有毒的重金屬。因此，低分子柑桔果膠用於製備增強免疫功能的藥品、食品和保健品。
文檔編號A61P37/04GK1883500SQ20061005080
公開日2006年12月27日 申請日期2006年5月18日 優先權日2006年5月18日
發明者範曉青, 俞仲華 申請人:範曉青