一種治療白細胞減少症藥物的質量控制方法

2023-09-18 12:29:35 5

專利名稱：一種治療白細胞減少症藥物的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種用於治療白細胞減少症的中藥藥物，特別是涉及該藥物的質量控制方法。
背景技術：
芪精升白顆粒在臨床上主要用於治療腫瘤化療所致的白細胞減少症(脾腎兩虛證)，處方由黃芪、鹿角膠、西洋參、淫羊藿、當歸、黃精等十味中藥組成，功能健脾補腎，益氣養血，經多年臨床應用，證實藥物組方合理，療效確切。芪精升白顆粒為顆粒劑，目前已經明確了科學合理的工藝提取路線，並確定了工藝中的關鍵技術參數，工藝穩定，既保證了主要有效成分完全入藥，又兼顧了生產的實際情況及藥品的相對穩定性，成品質量符合質量標準，適合工業化大生產要求。芪精升白顆粒的具體製備工藝為:黃芪360g、鹿角膠60g、西洋參120g、淫羊藿180g、當歸120g、黃精120g、墨旱蓮180g、枸杞子120g、補骨脂120g、雞血藤360g，取西洋參加80%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液回收乙醇使成清膏，藥渣與除鹿角膠外的其餘八味加水煎煮二次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至60°C相對密度為1.15 1.18的清膏，加95%乙醇至含醇量為30%，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液與上述西洋參醇提清膏合併，濃縮至60°C相對密度1.25 1.28的稠膏，乾燥，幹膏加鹿角膠粉碎成細粉；加入安賽蜜2g及適量麥芽糊精，混勻，加95%乙醇適量製成顆粒，乾燥，製成lOOOg，即得。為進一步控制芪精升白顆粒的藥物質量，需要提供科學合理的藥物質量控制方法，以適應藥物的工業化穩定生產。

發明內容
本發明的目的是提供一種上述治療白細胞減少症藥物的質量控制方法，本發明的質量控制方法操作容易，重現性好，質量控制精確、穩定。本發明提供的治療白細胞減少症藥物的質量控制方法適合於由以下重量份數的原料藥製備而成的藥物:6份黃芪、I份鹿角膠、2份西洋參、3份淫羊藿、2份當歸、2份黃精、3份墨旱蓮、2份枸杞子、2份補骨脂、6份雞血藤。質量控制方法包括鑑別方法和含量測定方法。其中，所述鑑別方法包括如下鑑別:
I)取所述藥物8g，加甲醇30ml，加熱回流I小時，濾過，濾液加在100 200目中性氧化鋁柱上，用40%甲醇IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，棄去氨洗液，再用水洗滌2次，每次15ml，棄去水洗液，蒸乾，殘渣加甲醇0.5ml使溶解,作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5 yl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷:甲醇:水=65:35:10混合溶液10°C以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在100°c加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，與對照品色譜相應的位置上，顯相同的棕褐色斑點；
2)取所述藥物Sg，加甲醇25ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和水20ml使溶解，加水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇提取液，用水洗滌2次，每次10ml，取正丁醇液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取西洋參對照藥材lg，同法製成對照藥材溶液；再取人參皂苷Rbl對照品、人參皂苷Re對照品，加甲醇製成每Iml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 U 1、對照藥材溶液和對照品溶液各I U L，分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇:水=15:40:22:10混合溶液5 10°C放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
3)取所述藥物15g，加乙酸乙酯40ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液；另取補骨脂對照藥材0.5g，同法製成對照藥材溶液；再取補骨脂素對照品、異補骨脂素對照品，加乙酸乙酯製成每Iml各含2mg的混合溶液作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10 U 1、對照藥材溶液和對照品溶液各I Ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正己烷:乙酸乙酯=3:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%氫氧化鉀甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；
4)取所述藥物6g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，通過DlOl型大孔樹脂預處理柱，用50ml水洗脫，棄去洗脫液，繼用50%乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加乙醇溶液Iml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊藿對照藥材Ig,同法製成對照藥材溶液；再取淫羊藿苷對照品，加乙醇製成每Iml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10 yl、對照藥材溶液和對照品溶液各5 V- 1，分別點於同一娃膠H薄層板上，以三氯甲燒:甲醇:甲酸:水=14:6:0.5:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，於105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
5)取所述藥物10g，加乙酸乙酯30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加無水乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，同法製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液5 yl、對照藥材溶液2 yl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以30 60°C石油醚:甲酸乙酯:甲酸=20:20:1為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。所述含量測定方法包括黃芪甲苷含量和補骨脂素及異補骨脂素含量的測定。本發明具體以下述高效液相色譜法測定所述黃芪甲苷的含量:
1)色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，流動相乙腈:水=38:62，蒸發光散射檢測器，色譜柱理論板數按黃芪甲苷峰計算不低於4000 ；
2)對照品溶液的製備:取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含0.5mg的溶液，即得；
3)供試品溶液的製備:取所述藥物研細，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，150W、40KHZ超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，濾過，濾液，回收溶劑並濃縮至幹，殘渣加正丁醇飽和的水IOml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合併正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解並轉移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；
4)分別精密吸取對照品溶液5 iil、10 ii 1，供試品溶液各10 u 1，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。本發明同時以下述高效液相色譜法測定所述補骨脂素及異補骨脂素含量:
1)色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，流動相甲醇:水=55:45，檢測波長246nm，色譜柱理論板數按補骨脂素峰計算不低於3000 ；
2)對照品溶液的製備:稱取補骨脂素對照品、異補骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml各含20 y g的溶液，即得；
3)供試品溶液的製備:取所述藥物4g，研細，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇適量，加熱回流提取I小時，放冷，轉移至IOOml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；
4)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各lOyl，注入液相色譜儀，測定，即得。 本發明建立了治療白細胞減少症藥物的質量控制方法，所建立的方法中，藥材的鑑別方法成熟可行，專屬性強，陰性無幹擾，含量測定方法操作容易，精密度高，重現性好，使用本發明的質量控制方法能夠精確、穩定地控制芪精升白顆粒的藥物質量，以適應藥物的工業化穩定生產。
具體實施例方式實施例1。處方:黃芪360g、鹿角膠60g、西洋參120g、淫羊藿180g、當歸120g、黃精120g、墨旱蓮180g、枸杞子120g、補骨脂120g、雞血藤360g。製法:以上十味，取西洋參加80%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液回收乙醇使成清膏，備用；藥渣與其餘黃芪(除鹿角膠外)等八味加水煎煮二次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15 1.18 (60°C)的清膏，加95%乙醇至含醇量為30%，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液與上述西洋參醇提清膏合併，濃縮至相對密度1.25 1.28 (60°C)的稠膏，乾燥，幹膏加鹿角膠粉碎成細粉。加入安賽蜜2g及適量的麥芽糊精，混勻，加95%乙醇適量製成顆粒，乾燥，製成lOOOg，即得。性狀:本品為掠色顆粒；味甜，微古。功能與主治:健脾補腎，益氣養血。用於腫瘤放化療所致的白細胞減少症(脾腎兩虛證)。症見身疲乏力，心悸失眠,頭暈目眩、腰膝酸軟等,並伴有外周血液白細胞計數減少。用法與用量:開水衝服。一次I袋，一日2次。規格:每袋裝6g。貯藏:密封。實施例2:黃芪的薄層鑑別。取實施例1藥物8g，加甲醇30ml，加熱回流I小時，濾過，濾液加於中性氧化鋁柱(100 200目，5g,內徑10 15mm)上,用40%甲醇IOOml洗脫,收集洗脫液,蒸乾,殘洛加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，用氨試液洗滌2次,每次20ml，棄去氨洗液，再用水洗滌2次，每次15ml，棄去水洗液，蒸乾，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 u 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(65:35:10) 10°C以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，與對照品色譜相應的位置上，顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈(365nm)下顯相同顏色的螢光斑點，方法簡便、快速、重現性好，陰性不幹擾。實施例3:西洋參的薄層鑑別。取實施例1藥物Sg，加甲醇25ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和水20ml使溶解，加水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇提取液，用水洗滌2次，每次10ml，取正丁醇液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取西洋參對照藥材lg，同法製成對照藥材溶液。再取人參皂苷Rbl對照品、人參皂苷Re對照品，加甲醇製成每Iml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液2 u 1、對照藥材溶液和對照品溶液各I U L，分別點於同一娃膠G薄層板上，以三氯甲燒-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10) 5 10°C放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。薄層結果理想，簡便快速，斑點清晰，且缺西洋參的陰性樣品未見幹擾。實施例4:補骨脂的薄層鑑別。取實施例1藥物15g，加乙酸乙酯40ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液。另取補骨脂對照藥材0.5g，同法製成對照藥材溶液。再取補骨脂素對照品、異補骨脂素對照品，加乙酸乙酯製成每Iml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液10 yl、對照藥材溶液和對照品溶液各I yl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(3:1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%氫氧化鉀甲醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。獲理想薄層結果，方法簡便，斑點清晰，且缺補骨脂的陰性樣品未見幹擾。實施例5:淫羊藿的薄層鑑別。取實施例1藥物6g,加甲醇30ml,超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸乾,殘洛加水20ml使溶解，通過DlOl型大孔樹脂預處理柱(內徑10 15mm，12cm)，用50ml水洗脫，棄去洗脫液，繼用50%乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾,殘渣加乙醇溶液Iml使溶解，作為供試品溶液。另取淫羊藿對照藥材lg，同法製成對照藥材溶液。再取淫羊藿苷對照品，加乙醇製成每Iml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液10iU、對照藥材溶液和對照品溶液各5iU，分別點於同一矽膠H薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸-水(14:6:0.5:1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，於105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。薄層結果理想，重複性好，方法簡便。陰性樣品無幹擾。實施例6:枸杞子的薄層鑑別。取實施例1藥物10g，加乙酸乙酯30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加無水乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5g,同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液5 u 1、對照藥材溶液2 u 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以石油醚(30 60°C )-甲酸乙酯-甲酸(20:20:1)，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。薄層結果理想，且陰性無幹擾。實施例7:黃芪甲苷含量的測定。實施例1藥物中的君藥為黃芪，故首選其所含有效成分進行含量測定。採用HPLC法對其有效成分黃芪甲苷進行含量測定，快速簡便、穩定可靠。1、儀器與試藥。Agilent HP1100高效液相色譜儀(包括Alltech-ELSD蒸發光散射檢測器、Agilent 1100色譜工作站；電子天平(德國賽多利斯BP211D) ;Millipore純水器；Sartorius電子天平；KQ_300DA超聲儀。乙腈為色譜純；水為重蒸水；其它化學試劑均為分析純。黃芪甲苷對照品(供含測用，批號:0737-200111)由中國藥品生物製品檢定所提供。芪精升白顆粒(批號:20100801、20101201、20101202、20101203)由山西振東製藥有限
公司生產。2、色譜條件。色譜柱:Acclaim120 C18 (250mmX4.6mm, 5 u m);流動相為乙腈-水(38:62);流速1.0mL/min ;柱溫25°C ；ELSD參數:漂移管溫度105°C，氮氣流速2.5L/min ;進樣量:對照品溶液5 ill與10 ii 1、供試品溶液10 ill。理論板數按黃芪甲苷峰計算不低於4000。3、對照品溶液的製備。取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含0.5mg的溶液，即得。4、供試品溶液的製備。 取實施例1藥物，研細，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(150W，40KHZ) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，濾過，濾液，回收溶劑並濃縮至幹，殘洛加正丁醇飽和的水IOml使溶解,用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合併正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解並轉移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。5、黃芪甲苷含量的測定。分別精密吸取對照品溶液5 ill、10 ill，供試品溶液各10 ill，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。6、空白試驗。按處方自制不含黃芪的陰性製劑，按供試品溶液製備方法進行提取、測定。結果在黃芪甲苷相應的保留時間無幹擾。
7、線性關係的考察。精密稱取經五氧化二磷乾燥至恆重的黃芪甲苷對照品適量，加甲醇製成0.256mg/ml的溶液。分別吸取l、2、5、10、15、25iU進樣，依法測定，結果見表1。以黃芪甲苷含量的對數與峰面積積分值對數計算得回歸方程:Y=1.2446X+3.3271，y =.0.9991。
_表1線性關係考察數據_
權利要求
1.一種治療白細胞減少症藥物的質量控制方法，所述治療白細胞減少症藥物是由以下重量份數的原料藥製備而成的藥物:6份黃芪、I份鹿角膠、2份西洋參、3份淫羊藿、2份當歸、2份黃精、3份墨旱蓮、2份枸杞子、2份補骨脂、6份雞血藤，其特徵在於所述質量控制方法中的鑑別方法包括如下鑑別: 1)取所述藥物8g，加甲醇30ml，加熱回流I小時，濾過，濾液加在100 200目中性氧化鋁柱上，用40%甲醇IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，棄去氨洗液，再用水洗滌2次，每次15ml，棄去水洗液，蒸乾，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷:甲醇:水=65:35:10混合溶液10°C以下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在100°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，與對照品色譜相應的位置上，顯相同的棕褐色斑點； 2)取所述藥物Sg，加甲醇25ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和水20ml使溶解，加水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇提取液，用水洗滌2次，每次10ml，取正丁醇液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取西洋參對照藥材lg，同法製成對照藥材溶液；再取人參皂苷Rbl對照品、人參皂苷Re對照品，加甲醇製成每Iml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2U 1、對照藥材溶液和對照品溶液各I U L，分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇:水=15:40:22:10混合溶液5 10°C放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； 3)取所述藥物15g，加乙酸乙酯40ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作 為 供 試品溶液；另取補骨脂對照藥材0.5g，同法製成對照藥材溶液；再取補骨脂素對照品、異 補骨脂素對照品，加乙酸乙酯製成每Iml各含2mg的混合溶液作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10 U 1、對照藥材溶液和對照品溶液各I Ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正己烷:乙酸乙酯=3:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%氫氧化鉀甲醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； 4)取所述藥物6g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，通過DlOl型大孔樹脂預處理柱，用50ml水洗脫，棄去洗脫液，繼用50%乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加乙醇溶液Iml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊藿對照藥材Ig,同法製成對照藥材溶液；再取淫羊藿苷對照品，加乙醇製成每Iml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10 yl、對照藥材溶液和對照品溶液各5V- 1，分別點於同一娃膠H薄層板上，以三氯甲燒:甲醇:甲酸:水=14:6:0.5:1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，於105°C加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； 5)取所述藥物10g，加乙酸乙酯30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加無水乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，同法製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液5 yl、對照藥材溶液2 yl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以30 60°C石油醚:甲酸乙酯:甲酸=20:20:1為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
2.根據權利要求1所述的治療白細胞減少症藥物的質量控制方法，其特徵在於所述質量控制方法中的含量測定方法包括黃芪甲苷含量和補骨脂素及異補骨脂素含量的測定。
3.根據權利要求2所述的治療白細胞減少症藥物的質量控制方法，其特徵在於以下述高效液相色譜法測定所述黃芪甲苷的含量: 1)色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，流動相乙腈:水=38:62，蒸發光散射檢測器，色譜柱理論板數按黃芪甲苷峰計算不低於4000 ； 2)對照品溶液的製備:取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含0.5mg的溶液，即得； 3)供試品溶液的製備:取所述藥物研細，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，150W、40KHZ超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，濾過，濾液，回收溶劑並濃縮至幹，殘渣加正丁醇飽和的水IOml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合併正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇適量使溶解並轉移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得； 4)分別精密吸取對照品溶液5iil、10ia，供試品溶液各10iil，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。
4.根據權利要求2所述的治療白細胞減少症藥物的質量控制方法，其特徵在於以下述高效液相色譜法測定所述補骨 脂素及異補骨脂素含量: 1)色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，流動相甲醇:水=55:45，檢測波長246nm，色譜柱理論板數按補骨脂素峰計算不低於3000 ； 2)對照品溶液的製備:稱取補骨脂素對照品、異補骨脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml各含20 y g的溶液，即得； 3)供試品溶液的製備:取所述藥物4g，研細，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇適量，加熱回流提取I小時，放冷，轉移至IOOml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得； 4)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測定，即得。
全文摘要
本發明公開了一種白細胞減少症藥物的質量控制方法，分別以薄層色譜法鑑別藥物中的黃芪、西洋參、補骨脂、淫羊藿和枸杞子，以液相色譜法測定藥物中的黃芪甲苷含量和補骨脂素及異補骨脂素含量。本發明建立的質量控制方法中，藥材鑑別方法成熟可行，專屬性強，陰性無幹擾，含量測定方法操作容易，精密度高，重現性好，使用本發明的質量控制方法能夠精確、穩定地控制藥物的質量，以適應藥物的工業化穩定生產。
文檔編號G01N30/02GK103115984SQ201310057730
公開日2013年5月22日 申請日期2013年2月25日 優先權日2013年2月25日
發明者李安平, 李明花, 喬玉峰, 王紅宇, 陳強, 王永宏 申請人:山西振東製藥股份有限公司