一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑及其製備方法

2023-09-19 03:31:10 2

專利名稱：：一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及製藥領域，尤其涉及一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑及其製備方法。
背景技術：
：惡性腫瘤嚴重威脅人類的健康。近年來，惡性腫瘤發病率逐年升高，在我國甚至全世界範圍內，腫瘤的發病率、死亡率均已為單瘤種疾病的首位。由於現代科學對惡性腫瘤的發生、發展機理認識不夠，目前尚無可達到治癒惡性腫瘤目的之方法。西醫學治療惡性腫瘤的主要方法是手術、放療和化療。手術治療用於局限性腫瘤，可以得到根治性治療效果。手術根治切除輔以區域淋巴結清掃能將腫瘤比較完整切除，清除周圍可能的病灶，術後標本可作病理檢查以明確腫瘤類型，有否轉移，切除是否徹底，對下一步治療有一定參考意義。但一般情況下，惡性腫瘤患者在手術過程中或手術前就有微小轉移灶，術後體內也還存在一定量腫瘤細胞。如肺腺癌長至lcm直徑時就有約30%的遠處轉移，至2cm則有約60%的轉移。因此，大部分病人僅靠手術不能防止腫瘤復發和遠處轉移。有些病人由於腫瘤在術前已有遠處轉移，即使作了超根治術，仍不能取得根治性療效。還有部分病人在被確診時，已失去了手術指徵。此外，手術對患者生理功能亦有一定幹擾，尤其對免疫功能的損傷，影響了手術效果與預後。手術後的放療和化療都可以將一定數量的剩餘癌細胞殺滅，減少腫瘤復發。(1)放療是應用放射線殺滅癌細胞，適用於局限性放射敏感性腫瘤，一般用來處理腫瘤的原發灶，亞臨床灶和淋巴結轉移。但放療對放射區正常組織也有損傷作用，產生全身和局部反應，並不適用於有遠處轉移的患者，加之，有些腫瘤對放射線不敏感，所以，放療也有一定的局限性，需配合其他治療方法。(2)近十餘年來，化療得到了較快的發展，尤其對白血病、惡性淋巴瘤等的治療取得了較好效果，新的抗腫瘤化療藥品研發，聯合化療的較大進展，綜合療法的使用，均使腫瘤化療的療效有所提高。但化療存在許多缺點。理論上，化療對癌細胞的殺滅是對數級殺滅，不可能殺滅體內所有的癌細胞，一般體內含殘留106~108左右癌細胞；而且多數抗腫瘤化療藥品缺乏理想的選擇性，在抑制腫瘤細胞的同時也損傷了正常細胞，常引起腫瘤患者較嚴重的毒副反應，對造血系統、消化系統、神經系統、肝腎功能的損害，迫使患者中斷治療。近代中醫腫瘤學家認為，腫瘤的診斷、正規治療(主要是手術、放化療)時間的早晚對於腫瘤的預後有重大影響。在提倡儘早手術時，應注意到患者在接受手術前的整體狀況，許多學者認為此階段中醫藥的運用，應以調整患者氣血陰陽，臟腑功能為原則，使患者恢復接近"陰平陽秘"狀態，這是使手術、放化療順利完成的關鍵。一般採用益氣養陰生津等方法，以達到明顯減輕腫瘤患者放療後的臨床症狀，保護造血系統功能、提高免疫功能、減輕組織損傷、減毒增效、抑制腫瘤的效果，使放療得以順利進行。近代多數中醫學者認為化療後患者不良反應的病機主要是氣血損傷，熱毒傷陰，脾胃失調等。目前對化療反應的治療原則為扶正培本，應用益氣養血，滋補肝腎等方法。常可明顯減輕腫瘤患者化療後多種臨床症狀，防止化療過程中白細胞和血小板下降，調整免疫功能，明顯提高腫瘤患者化療療程的完成率，以其減毒增效抑瘤作用，提高患者生存質量，延長生存期。手術、放化療以後的治療以恢復機體功能為主，抑制、消除殘留的癌細胞，以鞏固療效，防止復發轉移。治療主要針對常見症狀，如低熱、盜汗、乏力、食慾減退等症狀進行整體調整。對於失去最佳手術或放化療時機的腫瘤患者，可以根據病人的具體狀況，以扶正固本為主，攻補兼施，以達到提高生存質量，延長生命的目的。總之，西醫採用的以手術、放療、化療為主的治療方法是目前治療惡性腫瘤的主要措施，但對相當數量患者的療效不能令人滿意。在給腫瘤患者應用西醫藥治療時，使用立足於扶正培本的中醫藥治療，有其抑瘤、減毒、增效、降低不良反應的明顯優勢。以中醫藥理論為指導，臨床療效為基礎，針對惡性腫瘤發生、發展及西醫治療對機體損傷的病因病機，從整體功能調節角度，研製緩解患者症狀，以達到治療未病、有病早治、治病求本目的防治惡性腫瘤藥物是既有必要、又有可能的。
發明內容本發明的目的是提供一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑，該中藥製劑具有調節免疫功能，抑瘤抗癌，減少西醫藥毒副反應，緩解症狀等作用，適於手術、放化療前後及不宜接受手術或放化療之氣陰兩虛證惡性腫瘤患者服用。本發明同時提供該中藥製劑的製備方法。本發明提供一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑，所述中藥製劑的原料藥為靈芝孢子和白朮。所述的中藥製劑，其原料藥靈芝孢子與白朮的重量比優選l:1。以上的原料藥配伍藥物上可接受的輔料，製成藥物上所說的各種口服劑型。本發明還提供該中藥製劑的製備方法，其具體步驟如下a:分別淨制靈芝孢子和白朮，按照重量比分別稱取淨制後的靈芝孢子和白朮；b:破壁粉碎步驟a所得的靈芝孢子；C:將步驟b所得破壁粉碎後的靈芝孢子制粒並乾燥，獲得乾燥的靈芝孢子顆粒；d:將步驟C所述乾燥的靈芝孢子顆粒與步驟a所得的白朮混合，經過粗混合油提取、雜質及水分去除步驟後，獲得的靈芝孢子白朮混合油即為所述的中藥製劑。上述製備方法中，步驟b中可以採用細胞破壁微粉機破壁粉碎靈芝孢子。細胞破壁微粉機使用的條件為選靈芝孢子的裝量為l~3kg，每次破壁粉碎時間1~2h，優選條件為裝量2kg，每次破壁粉碎時間1.5h。步驟c所述制粒的優選條件如下取破壁粉碎後靈芝孢子加入其20~30%重量的蒸餾水，混合均勻，製成軟材，將該軟材置於制粒機中，用10目不鏽鋼篩制粒，獲得靈芝孢子顆粒；步驟C所述乾燥的優選條件如下將所述靈芝孢子顆粒置熱風循環烘箱中，在小於等於6(TC乾燥。蒸餾水加入的量優選25%破壁粉碎後靈芝孢子重量。為了高效提取靈芝孢子白朮混合油，步驟d中提取粗混合油的方法優選C02超臨界萃取法。提取條件如下萃取溫度為40~60°C，壓力為18~26MPa,CCV流量為0.4~0.6m7h，萃取時間為35h。優選的提取條為萃取溫度6CTC，壓力26MPa,C02流量為0.6m3/h，萃取時間5h。將所述的靈芝孢子混合油以常規方式製成軟膠囊劑。將所述的靈芝孢子白朮混合油採用e-環糊精進行包合，獲得靈芝孢子白朮混合油的包合物。優選的包合方法如下取48份重量的e-環糊精與2^4份重量的水混勻，然後加入l份重量的靈芝孢子白朮混合油，研磨2040min後，低溫存放後抽濾，採用0.10.3份重量的無水乙醇洗滌，然後真空乾燥即得所述靈芝孢子白朮混合油的包合物。將所述包合物製成片劑或硬膠囊劑。本發明提供一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑，該中藥製劑具有調節免疫功能，抑瘤抗癌，減少西醫藥毒副反應，緩解症狀等作用，適於手術、放化療前後及不宜接受手術或放化療之氣陰兩虛證惡性腫瘤患者服用。靈芝孢子性味甘平，具有療虛勞，益精氣，扶正固本作用，是靈芝的生殖細胞，白朮性溫，味甘、苦，健脾和胃，燥溼安胎。全方藥味少而性平和，二藥共用，具益氣養陰，扶正固本功效。應用於腫瘤患者，具有增強患者體質，補益虛弱狀態，調整機體內環境穩定，抑制腫瘤細胞生長等作用。近年來對靈芝孢子、白朮的化學組成與藥效作用進行了較為深入的研究。靈芝孢子含有蛋白質、胺基酸類、多糖糖肽類、腺苷類、甾醇類、三萜類、生物鹼類、脂肪酸類等化學物質。藥理研究表明，靈芝孢子具有抗染色體突變，誘導腫瘤細胞凋亡，抑制腫瘤細胞增殖、殺傷癌細胞，拮抗環磷醯胺引起的小鼠耐力下降、染色體畸變、血紅蛋白與白細胞下降、染色體畸變、血紅蛋白與白細胞下降、巨噬細胞吞噬力下降和SGPT升高等不良反應，抑制^Co照射引起的白細胞減少不良反應、激活並提高特異性殺傷細胞(CTL)和非特異性殺傷細胞(NK、LAK)的抗腫瘤作用、增強單核-巨噬細胞吞噬功能，抗脂質過氧化反應等作用，顯示出靈芝孢子在調節免疫功能、抗腫瘤方面的良好應用前景。白朮揮髮油對小鼠肉瘤S^.、艾式腹水癌及淋巴肉瘤腹水型均有抑制作用，對小白鼠肉瘤3180、抑制率為31%~49%;白朮揮髮油對組織培養人的食管癌細胞株有明顯抑制作用。白朮的抑瘤機理同降低癌細胞的增殖率、減低瘤組織的侵襲性，提高機體抗瘤反應能力及對瘤細胞的細胞毒作用等有關。根據中醫藥理論、實踐經驗及藥理學研究結果，提示本方藥具有調節免疫功能，抑瘤抗癌，減少西醫藥毒副反應，緩解症狀等作用，適於手術、放化療前後及不宜接受手術或放化療之氣陰兩虛證惡性腫瘤患者服用。本發明提供的該中藥製劑的製備方法，能夠高效的提取靈芝孢子與白朮混合油。採用e-環糊精對所述的混合油進行包合，靈芝孢子與白朮混合油被包合後化學成分沒有變化，而製成包合物後溶解度明顯增加，可以提高揮髮油的生物利用度，降低揮髮油的刺激性和副作用，掩蓋其不良氣味，大大提高了揮髮油的穩定性，降低了揮髮油在生產、儲存過程中的揮散或氧化變質，可增加製劑的穩定性，提高了該產品的質量，並使揮髮油液體藥物固體粉末化，便於製成多種劑型，例如片劑、硬膠囊劑等，服用攜帶均很方便。圖1表示含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑的製備過程；圖2表示各物質的紫外表徵圖，縱坐標表示吸光度，橫坐標表示吸收波長，其中l一靈芝孢子白朮混合油，2—靈芝孢子白朮混合油與e-環糊精的物理混合物，3—包合物脫包後的物質，4一包合物，5—e-環糊精。具體實施例方式實施例1含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑一靈芝孢子白朮混合油的製備方法該中藥製劑的製備過程如下(圖l):a:分別淨制靈芝孢子和白朮，按照重量比分別稱取淨制後的靈芝孢子和白朮；所謂淨制，即去除靈芝孢子或白朮中的雜質。按照重量比l:l分別稱取淨制後的靈芝孢子和白朮。b:破壁粉碎步驟a所得的靈芝孢子；採用貝利細胞破壁微粉機(BFM-100A型，濟南倍力粉技術工程有限公司)來破壁粉碎淨制後的靈芝孢子，冷卻介質為水，冷卻介質壓力大於0.65Mpa，冷卻介質流量為3M"分鐘，冷卻介質溫度〈20'C，粉碎室溫度〈50'C，主軸轉速為970/分鐘，摩擦棒為500根。確定破壁粉碎過程中的加料量與時間取靈芝孢子進行破壁粉碎，根據破壁粉碎設備的特性，在主軸轉速、摩擦棒、冷卻介質、時間(lh)各項參數固定的情況下，選擇l3kg不同加料量進行試驗，考察指標為得粉率和破壁率。結果加料量對得粉率影響不大；破壁率與加料量成反比，考慮到生產成本和效率，加料量2kg為宜(見表l)。加料確定為2kg後，又對破壁粉碎時間進行選擇(見表2)，經三批驗證均能符合試驗結果(見表3)。表l.靈芝孢子破壁加料量試驗數據表序號破壁前重量破壁後重量(kg)(kg)得粉率(%)破壁率(%)1109696》9521.51.493》95321.9296》9542.52.3494》90532.8294》60表2.靈芝孢子破壁時間試驗數據表序號破壁粉碎時間(h)破壁前重量破壁後重量(kg)(kg)得粉率(%)破壁率(%)1121.9296》9021.521.9296》953221.9296>95表3.三批靈芝孢子破壁驗證試驗數據表序號破壁前重量(kg)破壁粉^據Ff縣碎時間破，，嚴量(h)(kg)得粉率(%)破壁率(%)121.51.9497》95221.51.9296》95321.51.9296》95因此，採用貝利細胞破壁微粉機進行破壁粉碎時，靈芝孢子的裝量為2kg，每次破壁粉碎時間為1.5h。破壁後的芝孢子粉經掃描電鏡檢測，粒徑《5wm，破壁率》95%，正態分布測定為90%《5ym。c:將步驟b所得破壁粉碎後的靈芝孢子制粒並乾燥，獲得乾燥的靈芝孢子顆粒。(1)制粒軟材加水量的考察為了制粒方便，需要先將破壁粉碎後的靈芝孢子製成軟材，考慮到破壁後的靈芝孢子表面能比較大，溼潤劑選用水(蒸餾水)即可。用目測對加水量進行了考察，實驗結果顯示破壁粉碎後的靈芝孢子與水的重量比為1:0.25製成的軟材比較適宜(表4)。表4.軟材加水量的考察數據表序號靈芝孢子量(kg)蒸餾水量(ml)軟材情況11300軟材太粘21250軟材疏鬆度好31200軟材細粉多制粒篩目的選擇由於制粒的目的主要是為了防止在超臨界萃取時靈芝孢子被萃取劑帶走，只要成顆粒，對篩目的大小並不重要，因此我們在篩目選擇時，用目測重點考察顆粒的成型率，控制細粉的比例，10目篩(不鏽鋼)顆粒成型率高，結果見表5。表5.篩目的考察數據表tableseeoriginaldocumentpage10因此，優選制粒的方法如下取破壁粉碎後靈芝孢子加入其25%重量的蒸餾水，混合均勻，製成軟材，將該軟材置於制粒機中，用10目不鏽鋼篩制粒，獲得靈芝孢子顆粒。(2)乾燥乾燥溫度的確定考察乾燥溫度主要是看乾燥速率和控制顆粒的水分，從生產成本及保證靈芝孢子的有效成分的活性角度，確定乾燥的溫度《60'C，乾燥4小時，水分《5%。結果見表6。表6.乾燥溫度的考察數據表tableseeoriginaldocumentpage10d:將步驟c所述乾燥的靈芝孢子顆粒與步驟a所得的白朮混合，經過粗混合油提取、雜質及水分去除步驟後，獲得靈芝孢子白朮混合油。(1)取乾燥的靈芝孢子顆粒與步驟a所得的白朮混合。(2)C02超臨界萃取法提取粗靈芝孢子白朮混合油(粗混合油)。工藝條件正交試驗C02超臨界流體萃取技術是一項較新的提取和分離技術，利用萃取劑在超臨界狀態的下特有的性質達到提取和分離的目的，具有無化學溶劑殘留、避免萃取物在高溫下裂解和保證生理活性物質的活性等優點。用C02超臨界萃取工藝提取粗靈芝孢子白朮混合油時，主要因素有萃取物的粒度、萃取壓力、萃取溫度、萃取時間、C(V流量等因素，在預試的基礎之上，以乾燥的靈芝孢子顆粒1000g，粒度(10目)固定的情況下，我們對影響萃取效率的主要因素萃取壓力、萃取溫度、萃取時間、C02流量採用L9(3)4正交試驗設計，以粗靈芝孢子白朮混合油得率為指標，進行提取工藝條件的試驗，結果見表7—8、表9-l和表9-2。表7.提取工藝的因素水平表ABCD萃取壓力萃取溫度萃取時間C02流量水平\^(MPa)(。C)(h)(raVh)1184030.42225040.53266050.6表9-l以靈芝孢子白朮混合油量為指標的正交安排表ABCD粗靈芝孢子萃取壓力萃取溫度萃取時間C02流量油量序號\(MPa)rc)(h)(m7h)(g)11i1132.42122235.53133384.44212350.95223175.16231294.673132103.28321398.593321115.0注表中提供了9個試驗方案。如第6號試驗是A2B3dD2，即萃取壓力22MPa，萃取溫度60。C萃取時間3h，C02流量0.5mVh，依此類推。_表9-2正交試驗數據分析結果_ABCD參數萃取壓力萃取溫度萃取時間C02流量(MPa)(°C)(h)(m3/h)152.300186.500225.500222.500K2220扁209.100201.400233.300K3316.700294扁262.700233.80050.76762.16775.16774.167K273.53369.70067.13377.767K3105.5679謹087.56777.933R54.80035.83320.4333.767以粗靈芝孢子白朮混合油量為指標，極差分析結果A>B>C>D即影響因素排列順序為萃取壓力>萃取溫度>萃取時間>0.05B54980.353227490.1771.040>0.05C53474.500226737.2501.012>0.05誤差52865.860226432.930總和165841.0338查F檢驗臨界值結果F。.。5(2，2)=19.00，各因素P>0.05對實驗結果的影響均不顯著。002超臨界萃取工藝驗證試驗為了驗證上述結果，選用A3BsC3D3條件進行提取試驗，看看是否選定條件與原來的試驗結果一致，進行驗證試驗，結果見表10。表io.提取驗證試驗結果ABCD序號萃取壓力萃取溫度萃取時間C02流量粗靈芝孢子油量(MPa)(。C)(h)(mVh)(g)1266050.6亂02266050.6110.43266050.6113.5因此，驗證試驗中粗靈芝孢子白朮混合油得率與正交結果相符，因此以A3B3C3D3即萃取壓力26MPa，萃取溫度60。C，萃取時間5h，C02流量0.6mVh確定為最佳萃取工藝條件。(3)將獲得的粗靈芝孢子白朮混合油進行板框壓濾或高速離心，去除其中的雜質，水分，得透亮且金黃色靈芝孢子白朮混合油，即為所述的中藥製劑。該靈芝孢子白朮混合油可以直接灌瓶，供病人口服。實施例2說明含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑——軟膠囊劑的製備方法按照實施例1的方法獲得靈芝孢子白朮混合油，以明膠、甘油和水為原料製備軟膠囊囊殼，經軟膠囊灌裝機製成軟膠囊劑。實施例3含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑一片劑的製備方法靈芝孢子白朮混合油的包合物(簡稱為包合物)包合劑一e-環糊精，被包合劑一按照實施例1的方法獲得的靈芝孢子白朮混合油。其製備方法如下(1)實驗儀器與試劑TM-40膠體磨，天津市鑫普機械製造有限公司；UV-2102PC型紫外分光光度計，優尼柯(上海)儀器有限公司；DZF-1B型真空乾燥箱，上海躍進醫療器械廠；CQX25-06型超聲波清洗器，上海必能信超聲有限公司；磁力攪拌器，上海司樂儀器廠；HH-S數顯恆溫水浴鍋，常州市國立試驗設備研究所；AB104-N型電子分析天平，梅特勒-託利多儀器(上海)有限公司。e-環糊精，國藥集團化學試劑有限公司，批號F20060731;其它試劑均為分析純。(2)包合方法的選擇以包合物收率、包合物含油率、油利用率為指標，在相同的物料比例下對飽和水溶液法、超聲法、研磨法進行比較。飽和水溶液法取e-環糊精16g，在60'C下配成飽和溶液，在恆溫條件下，緩緩加入靈芝孢子白朮混合油2mL，攪拌一定時間，4'C下存放24h，抽濾，以少量水及乙醇洗滌3次，4(tc真空乾燥，即得e-環糊精包合物。超聲法取e-環糊精16g，加入3倍量水，混合均勻，緩緩加入靈芝孢子白朮混合油2mL，超聲一定時間，其餘同上。(f=40KHz)研磨法取e-環糊精16g，加入3倍量水，混合均勻，倒入研缽中，緩緩加入靈芝孢子白朮混合油2mL，碾磨一定時間，其餘同上。根據實驗結果(表ii)，優選研磨法對靈芝孢子白朮混合油進行e-環糊精包合。表ll3種不同包合方法的結果比較tableseeoriginaldocumentpage14tableseeoriginaldocumentpage15表14以綜合評分為指標的方差分析表tableseeoriginaldocumentpage15F。.05(2,2)=19.00對包合物綜合評分結果統計分析(表14)，由極差分析可知，各因素對該指標的影響大小排列為A〉B〉OD，各因素間無顯著性差異。A因素水平優劣排列如下:1〉2>3，B因素水平優劣排列如下1>2>3，C因素水平排列如下2>3>1，D因素水平排列如下1>2>3，以綜合評分為指標的最佳工藝為AiBiC2Di,即包合條件為靈芝孢子白朮混合油與e-環糊精的重量比為l:4，加入的水為靈芝孢子白朮混合油重量的2倍，研磨時間為30min，無水乙醇為靈芝孢子白朮混合油重量的10%。驗證試驗按上述最佳工藝條件進行三批驗證試驗，測定結果見表15，說明該工藝穩定可行。表15驗證試驗結果序號包合物得率％含油率％油利用率％192.814.297.6293.614.596.592.314.796.9RSD0.711.740.57(4)包合物的紫外表徵取靈芝孢子白朮混合油lg，加入20mL石油醚(30°C60°C)，超聲溶解，過濾，濾液作為供試品溶液l;取靈芝孢子白朮混合油0.15g，20mL石油醚(30'C60°C)，超聲溶解，加入0.6ge-環糊精，振搖，過濾，濾液作為供試品溶液2;取包合物lg，加入20mL石油醚(30°C60°C)，超聲，過濾，濾液作為供試品溶液3;取包合物lg，加入20mL石油醚(30°C60°C)，振搖，過濾，作為供試品溶液4;取e-環糊精lg，加入20mL石油醚(30°C60°C)，振搖，過濾，作為供試品溶液5。包合物檢査的紫外圖譜(圖2)表明靈芝孢子白朮混合油、靈芝孢子白朮混合油與0-環糊精的物理混合物、包合物脫包後的物質具紫外吸收，而包合物和e-環糊精無紫外吸收，說明靈芝孢子白朮混合油被e-環糊精包合後形成了新的物質。且包合後靈芝孢子白朮混合油的主要成分未發生變化。片劑的製備方法將該包合物加入10%-15%麥芽糊精，混勻，幹法制粒，加入0.5%微粉矽膠，混勻，壓片(0.25g/片)，包薄膜衣或糖衣，即得片劑。實施例4說明含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑一硬膠囊劑的製備方法按照實施例3的方法獲得包合物，採用幹法制粒後填充硬膠囊(0.20g/粒)。實施例5含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑一靈芝孢子白朮混合油及其包合物的主要藥效學作用研究根據國家中藥6類新藥臨床前研究指導原則的要求，對小鼠移植瘤肉瘤S18C)的抑制作用進行研究，來驗證該藥的主要功效。由於該中藥製劑的主要成分為靈芝孢子白朮混合油，所以驗證該混合油的功效；包合過程明顯增加了靈芝孢子白朮混合油的溶解度，提高揮髮油的生物利用度，而且片劑及硬膠囊劑都是以該包合物為基礎的，所以可通過驗證該包合物的藥效來驗證各種劑型的效果。(1)試驗材料受試藥物靈芝孢子白朮混合油的包合物、靈芝孢子白朮混合油是採用實施例一的方法獲得，批號20080101;純靈芝孢子油，批號20080112(南京中科藥業有限公司生產)；純白朮油，批號20080101(南京中科藥業有限公司生產，)；溶劑為(K5n/。CMC-Na;陽性藥(已知的抗化療藥)注射用環磷醯胺(上海華聯製藥有限公司)，規格200mg/瓶，批號080304。動物:ICR小白鼠，18-22g，雌雄各半，由中國藥科大學動物室提供。合格證號SCXK(蘇)2006-0011;C57小鼠18-22g，由中國科學院上海實驗動物中心提供，合格證號SCXK(滬)2006-0010;飼料顆粒飼料，由中國藥科大學動物室供給；飼養條件空調房間，溫度18-24GC，相對溼度70%。瘤株來源:S咖由江蘇省腫瘤藥物研究所提供。儀器YJ-875型醫用淨化工作檯(蘇州淨化設備廠)；TG-729B型電光分析天平(上海天平儀器廠)；普通離心機(北京醫用離心機廠)(2)各受試藥物對小鼠移植瘤實體肉瘤Si8o的抑制作用實驗過程取上述規格ICR小鼠60隻，按移植性腫瘤研究法接種S咖實體型瘤(在無菌操作下取瘤塊，稱重，用玻璃組織勻漿器研磨，磨勻後放入無菌容器內，加生理鹽水稀釋成1:3的細胞懸液，容器置冰塊上，用空針抽吸，每次抽吸前將細胞混勻，每隻小鼠右前肢腋窩皮下接種0.2ml)，接種後24小時稱鼠重，並隨機分為6組，空白對照組(0.5%CMC-Na)、靈芝孢子白朮混合油(lg/kg)組、靈芝孢子白朮混合油的包合物(lg/kg)組、純靈芝孢子油(lg/kg)組、純白朮油(lg/kg)組、環磷醯胺(20mg/kg)組，於接種24小時後給藥，ig給藥，每天一次，共給藥7次，於停藥後第2天處死荷瘤小鼠稱重，並分離瘤塊稱重，所得數據進行統計學處理(t檢驗)。實驗結果與S咖空白對照組相比，其它受試藥物皆有顯著抑制S咖的腫瘤生長作用(P〈0.01，P〈0.05)。靈芝孢子白朮混合油(lg/kg)組、靈芝孢子白朮混合油的包合物(lg/kg)組抑制腫瘤的效果顯著高於純靈芝孢子油(lg/kg)組和純白朮油(lg/kg)，其中又以靈芝孢子白朮混合油的包合物的抑制效果最為突出。靈芝孢子白朮混合油組、靈芝孢子白朮混合油的包合物組、純靈芝孢子油組、純白朮油組對小鼠體重增長無明顯影響(P>0.05)，而Cy組有顯著的抑制小鼠體重增長作用(P)的形式表示，各組樣本數為10。"*"表示相應數據的P〈0.05，"**"表示相應數據的P〈0.01，均與空白組比較。權利要求1.一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑，其特徵在於所述中藥製劑的原料藥為靈芝孢子和白朮。2.根據權利要求1所述的中藥製劑，其特徵在於所述靈芝孢子與白朮的重量比為l:1。3.根據權利要求1或2所述的中藥製劑，其特徵在於配伍藥物上可接受的輔料，製成藥物上所說的各種口服劑型。4.一種權利要求1或2所述的中藥製劑的製備方法，其具體步驟如下-a:分別淨制靈芝孢子和白朮，按照重量比分別稱取淨制後的靈芝孢子和白朮；b:破壁粉碎步驟a所得的靈芝孢子；C:將步驟b所得破壁粉碎後的靈芝孢子制粒並乾燥，獲得乾燥的靈芝孢子顆粒；d:將步驟c所述乾燥的靈芝孢子顆粒與步驟a所得的白朮混合，經過粗混合油提取、雜質及水分去除步驟後，獲得的靈芝孢子白朮混合油即為所述的中藥製劑。5.根據權利要求4所述的製備方法，其特徵在於步驟d中所述提取粗混合油的方法為C02超臨界萃取法。6.根據權利要求5所述的製備方法，其特徵在於所述C02超臨界萃取法提取粗混合油的條件為萃取溫度為4060°C，壓力為18~26MPa，0)2流量為0.4~0.6mVh，萃取時間為3~5h。7.根據權利要求6所述的製備方法，其特徵在於將所述的靈芝孢子混合油以常規方式製成軟膠囊。8.根據權利要求6所述的製備方法，其特徵在於將所述的靈芝孢子白朮混合油採用e-環糊精進行包合，獲得靈芝孢子白朮混合油的包合物。9.根據權利要求8所述的製備方法，其特徵在於所述的包合方法如下取4~8份重量的e-環糊精與2~4份重量的水混勻，然後加入l份重量的靈芝孢子白朮混合油，研磨2040min後，低溫存放後抽濾，採用0.10.3份重量的無水乙醇洗滌，然後真空乾燥即得所述靈芝孢子白朮混合油的包合物。10.根據權利要求6所述的製備方法，其特徵在於將所述包合物製成片劑或硬膠囊劑。全文摘要本發明提供一種含靈芝孢子油的抗腫瘤中藥製劑，其原料藥為靈芝孢子和白朮。本發明還提供該中藥製劑的製備方法，分別淨制靈芝孢子和白朮，按照重量比分別稱取淨制後的靈芝孢子和白朮；破壁粉碎靈芝孢子；將破壁粉碎後的靈芝孢子制粒並乾燥，獲得乾燥的靈芝孢子顆粒；將靈芝孢子顆粒與白朮混合，經過粗混合油提取、雜質及水分去除步驟後，獲得的靈芝孢子白朮混合油即為所述的中藥製劑。本發明的中藥製劑具有調節免疫功能，抑瘤抗癌，減少西醫藥毒副反應，緩解症狀等作用，適於手術、放化療前後及不宜接受手術或放化療之氣陰兩虛證惡性腫瘤患者服用。該中藥製劑的製備方法能夠高效的提取靈芝孢子與白朮混合油。文檔編號A61P35/00GK101596225SQ20091002787公開日2009年12月9日申請日期2009年5月18日優先權日2009年5月18日發明者敏馮,鵬馮,姚功友,建沈,王雲鵬,王連安,錢一帆,黃景蘇申請人:南京中科集團股份有限公司