一種有機酸植物土壤調節劑及其製備方法
2023-09-16 06:45:35
專利名稱:一種有機酸植物土壤調節劑及其製備方法
技術領域:
本發明是關於一種有機酸植物土壤調節劑及其製備方法,屬於微生物有機肥技術領域。
背景技術:
在白酒發酵過程中,含水量在52 55%的入窖酒醅經微生物代謝後產生大量的游離水。這些水與酒醅中未被微生物所利用的水逐漸沉降,將酒醅中的酸、可溶性澱粉、酵母溶出物、還原糖、單寧、酒精及香味前體物質溶出,最後沉積於窖池底部而形成棕黃色、呈絮體狀的液體,這種液體被稱為黃水。據測定,黃水的PH為3. O 3. 5,黃水中富含醋酸、丁酸、乳酸、己酸等有機酸類物質及其他醇、醛類物質,還含有乙酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯等白酒香味物質,及少量的殘餘澱粉、殘糖和酒精、腐殖質和酵母菌體的自溶物、厭氧性微生物等有機質。其C0D、B0D遠遠超過廢水排放標準。目前,對黃水的利用途徑較少,利用率 較低。主要是進一步蒸餾得黃水酒、與酒尾一起回窖發酵、拌糟醅回窖發酵等。開發新的黃水利用途徑,提高酒廠廢水排放水質、少排廢水、變廢為寶,是一個急需解決的課題。隨著微生物有機肥技術的不斷發展和推廣,一些工業和農業副產品被不斷被開發利用,如果能得到有效利用,富含有機物質的釀酒副產品黃水同樣也不失為是一種優質的生物有機肥原料。
發明內容
本發明的目的在於,針對上述問題,提供一種利用黃水生產有機酸植物土壤調節劑的方法。為實現上述目的,本發明採用以下技術方案一種有機酸植物土壤調節劑的製備方法,其特徵在於,(I)將白酒發酵副產物黃水進行過濾、蒸發濃縮處理;(2)黃水處理完畢後加入葡萄糖、(NH4)2SO4,KH2PO4,MgSO4 · 7H20、MnS04 · H20、NaCl和CaCO3充分混合溶解後進行高溫滅菌;(3)滅菌結束後的發酵母液接入混合菌種發酵液發酵24 48h,通過無菌灌裝機進行裝瓶;所述的混合種菌種發酵液由沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonaspalustris )、突光假單胞菌(Pseudomonas f luorescens)、揭球固氣菌(Azotobacterchroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)菌液組成;所述混合菌種發酵液中沼澤紅假單胞菌、螢光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發酵母液重量的2 5%、2 5%、2 5%、5 10%、5 10%。如上所述的方法,優選地,步驟(I)中所述的白酒發酵副產物黃水採用多袋式過濾器進行過濾,去除其中較大的雜質,然後再通過蒸發濃縮罐將發酵母液蒸發濃縮為總固形物含量為15%的液體。如上所述的方法,優選地,所述的葡萄糖、(NH4) 2S04、KH2PO4' MgSO4 · 7H20、MnSO4 .H20、NaCl 和 CaCO3 分別按 I 2%、0· 5 1%、0· 01 O. 02%,O. 01 O. 02%,O. 001 O. 005%,O. 01 O. 02%和I 2%的重量比添加到發酵母液中;所述高溫滅菌是在115°C 121 °C>O. 07MPa O.1lMPa條件下蒸煮滅菌20 30mino如上所述的方法,優選地,所述的沼澤紅假單胞菌菌液是按以下方法製成的配製種子培養基=K2HPO4O.78g、KH2PO4O. 5g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaClO. 5g、CaCl2O. 05g、(NH4)2SO4O. 05g、酵母膏 2. 5g、醋酸鈉1 . 65g、硼酸鈉 0. 38g、鑰酸銨 0. 22g,蒸餾水 lOOOmL,pH 6. 7 7. 2,在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ;一級種子培養1000mL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接入種子培養基中,溫度25 30°C、轉速100 120r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度25 30°C、通風量體積比為1: O. 5 I的條件下、以80 100r/min機械攪拌,培養24 48h。如上所述的方法,優選地,所述的螢光假單胞菌菌液是按以下方法製成的配製種子培養基蛋白腖5g、牛肉浸膏3g、NaCl 5g,蒸懼水IOOOmL混合均勻,pH6. 8 7. 0,在溫度115 121°C下滅菌20 30min ;一級種子培養1000mL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接入種子培養基中,溫度28 30°C、轉速100 120r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機械攪拌,培養24 48h。如上所述的方法,優選地,所述的褐球固氮菌菌液是按以下方法製成的配製種子培養基K2HP040. 8g、KH2PO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaC10. 5g、CaCl2O. lg、甘露醇 20g、酵母膏 0. 5g、FeCl30. 005g,Na2MoO4. 2H200. 002g,蒸餾水 lOOOmL,pH 7. 0 7. 2,在溫度115 121°C下滅菌20 30min ;一級種子培養1000mL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接種入一級種子培養基中,溫度28 30°C、轉速100 120r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機械攪拌,培養24 48h。如上所述的方法,優選地,所述的巨大芽孢桿菌菌液是按以下方法製成的配製一級種子培養基蛋白腖10. Og,牛肉浸膏3. 0g, NaCl 5. Og,葡萄糖5. Og,蒸餾水lOOOmL,pH 6. 8 7. 0,在溫度115 121°C下滅菌20 30min ;配製二級種子培養基玉米粉10kg、黃豆粉 10kg、K2HP04l. 5kg,MgSO4 ·7Η201. 5kg、CaCO3L 5kg,蒸餾水 1000L, pH 6. 8 7.0,在溫度 115 121°C 下滅菌 20 30min ;一級種子培養1000mL三角瓶中裝一級種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接入一級種子培養基中,溫度28 30°C、轉速130 150r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機械攪拌,培養24 48h。如上所述的方法,優選地,所述的膠凍樣芽孢桿菌菌液是按以下方法製成的配置種子培養基=K2HPO4O.2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、CaC035g、NaClO. 2g、蔗糖 10g、CaSO4 · 2Η200· lg,蒸餾水 lOOOmL, pH 6· 8 7. 0,在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ;一級種子培養1000mL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接種入一級種子培養基中,溫度25 28°C、轉速130 150r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度25 28°C、通風量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機械攪拌,培養24 48h。如上所述的方法,優選地,步驟(3)中所述發酵母液滅菌、接種後,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機械攪拌培養24 48h,然後通過無菌灌裝機進行裝瓶。如上所述方法製備得到的有機酸植物土壤調節劑。按照本發明所述方法製備得到的有機酸植物土壤調節劑,該產品中總固形物彡17. 00%、有機酸鈣含量彡1. 00%、有機酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡11. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡2. 50X 108、螢光假單胞菌彡1.00父109、褐球固氮菌(0 ~8)彡2. 00 X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 55 X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 20 X IO9。本發明的有益效果為本發明選用性能優良的生物有機肥生產菌種,採用先進的微生物液態深層發酵技術,以白酒發酵副產物黃水作為發酵母液,經過濾、濃縮處理後加入一定比例葡萄糖、(NH4)2SO4, KH2PO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl 和 CaCO3 充分混合溶解後進行高溫滅菌,然後接種由沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonaspalustris)、突光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)、揭球固氣菌(Azotobacterchroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillusmegaterium)和膠凍樣芽孢桿菌(BaciIlusmuciIaginosus)組成的混合菌種,經深層液態發酵,可製得一種富含有機酸、有益微生物和植物生長必須有機微量元素的植物土壤調節劑。本發明所用原料黃水中含有豐富的有機酸和殘糖,可以為微生物生長繁殖提供良 好的營養條件。選用優良的微生物有機肥生產菌,採用先進的微生物液態發酵技術,對黃水中殘存的有機質和糖類進行深層發酵,在發酵過程中加入一些植物生長所必須的微量元素,通過菌體發酵分解和有機螯合作用生成生物有機質,能使農作物更易於吸收和利用。同時,通過微生物發酵還產生了大量的有益微生物和豐富的微生物代謝產物及有機酸。使黃水發酵生產的生物有機肥既能均衡、協調農作物的生長發育和刺激根系生長,改善土壤鹽鹼性,增加作物產量和土壤肥力,改善作物品質;又能增強作物的免疫力,提高抗病、抗旱、保水、抗寒能力。同時還減少了廢水的排放,使製酒副產物得到有效的回收和利用,變廢為寶,減少了環境汙染,具有很好的生態效益、經濟效益以及開發前景。更具體地說,本發明提供的有機酸植物土壤調節劑的製備方法具有以下優點1、本發明的產品中富含的有機酸鈣可通過生物絡合、置換反應,置換清除土壤團粒上多餘的Na+,活化鹽鹼土壤中難利用的P5+、Fe2+、Ca2+、Mg2+等離子及微量元素,使其轉變為可利用狀態被植物吸收,解除植物生理缺素症狀。同時通過Na+降低,活化Ca2+、Mg2+等離子之後,可使土壤水傳導能(HC)增高,使土壤水分更易流動,從而有效地改善了土壤的鹽鹼性和作物根系環境,促進根系生長,保證作物苗齊、苗壯,使植物能夠在鹽鹼地上生長和提聞廣量。2、本發明的產品富含的有機酸,可有效中和和緩解土壤鹽鹼性。
3、本發明的產品中的有益微生物能產生糖類物質,佔土壤有機質的O. 1%,與植物粘液,礦物胚體和有機膠體結合在一起,可以改善土壤團粒結構,增強土壤的物理性能和減少土壤顆粒的損失,在一定的條件下,還能參與腐殖質形成。所以施用微生物肥料能改善土壤物理性狀,有利於提高土壤肥力。4、本發明的產品可取代化學肥料和農藥,緩和或減少農產品汙染,而且能夠改善農廣品的品質。5、本發明的產品中富含的有益微生物菌群能促進土壤物質轉化,改善土壤結構,提高土壤肥力,促進作物生長。通過微生物固氮作用,能提高土壤氮素水平,通過其代謝活動能有效地提高土壤中某些有機成分、硫化物和氨態氮,並促進有害汙染物如農藥等的轉化。同時能促進有益微生物的增殖,使之共同參與土壤生態的物質循環。6、本發明的產品中的有益微生物菌群能增強作物抗病防病能力,能促進放線菌等有益微生物的繁殖,抑制絲狀真菌等有害菌群生長,從而有效地抑制某些植病的發生與蔓延。7、本發明產品中的微生物具有解磷、解鉀、固氮的作用,可提高肥料利用率10% 30%以上。這種肥料的大量生產和推廣使用,可以節約肥料資源以及與之相關的煤炭、天然氣、石油等資源,對緩解能源危機有一定的幫助。8、應用本發明方法及製得的產品,可降低農民生產成本、提高作物產量,增加農民收入。9、本發明提供的有機酸植物土壤調節劑中,總固形物> 17. 00%、有機酸鈣含量彡1. 00%、有機酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡11. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡2. 50 X 108、螢光假單胞菌彡1. OOX 109、褐球固氮菌(CFU/g)彡2. 00 X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 55X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 20X IO90
圖1為本發明方法的流程示意圖。
具體實施例方式以下通過具體實施例詳細說明本發明的技術及特點,但這些實施例並非用以限定本發明的保護範圍。
本發明以下實施例中所用沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonaspalustris)、突光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、揭球固氣菌(Azotobacterchroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillusmucilaginosus)是分別購買於中國工業微生物保藏管理中心(CICC)、中國普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)和中國農業微生物菌種保藏管理中心(ACCC)的野生菌種。保藏號分別為ACCC 10649、CICC21461、CGMCC1. 175、CICC 21694、CICC 23575。實施例1·參見圖1,按照以下方法製備本實施例的有機酸植物土壤調節劑1.稱取白酒發酵副產物黃水1000L,採用多袋式過濾器進行過濾,去除其中較大的雜質。然後再通過蒸發濃縮罐將發酵母液蒸發濃縮為總固形物含量為15%的液體。2.黃水處理完畢後,將葡萄糖、(NH4)2SO4' KH2PO4' MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H20、NaCl和CaCO3分別按1%、1%、0· 02%,0. 02%,0. 005%,0. 02%和2%的重量比添加到發酵母液中,然後在121°C、0.1lMPa條件下蒸煮滅菌30min。3.將沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)、突光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、揭球固氣菌(Azotobacter chroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)分別按以下方法進行增菌培養(I)沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)A.製備種子培養基=K2HPO4O. 78g、KH2PO4O. 5g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaCl 0. 5g、CaCl2O. 05g、(NH4) 2S040. 05g、酵母膏 2. 5g、醋酸鈉1. 65g、硼酸鈉0. 38g、鑰酸銨0. 22g,蒸餾水lOOOmL, pH 6. 7,在溫度121°C下滅菌30min。B.培養條件一級種子培養1000mL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50mL的比例接入一級種子培養基中,溫度30°C、轉速100r/min、振蕩培養24h。二級種子培養100L自動種子發酵罐裝種子培養基50L,將上述經一級種子培養的菌液按照10%的重量比接種到二級種子罐中,溫度30°C、通風量體積比1:0. 5、機械攪拌100r/min、培養 24h。(2)突光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)A.製備種子培養基蛋白腖5g、牛肉浸膏3g、NaCl 5g,蒸懼水IOOOmL混合均勻,pH7. O,在溫度121°C下滅菌30min。B.培養條件一級種子培養1000mL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50mL的比例接入一級種子培養基中,溫度30°C、轉速100r/min、振蕩培養24h。二級種子培養100L自動種子發酵罐裝種子培養基50L,將上述經一級種子培養的菌液按照10%的重量比接種到二級種子罐中,溫度30°C、通風量體積比1:0. 5、機械攪拌100/min、培養 24h。(3)褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)A.製備種子培養基=K2HPO4O. 8g、KH2PO4O. 2g、MgSO4 · 7H20 0. 2g、NaClO. 5g、CaCl20. lg、甘露醇 20g、酵母膏 0. 5g、FeCl30 . 00 5g,Na2MoO4. 2H200. 002g,蒸懼水lOOOmL, pH 7. 2,在溫度121°C下滅菌30min。B.培養條件一級種子培養1000mL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50mL的比例接入一級種子培養基中,溫度30°C、轉速120r/min、振蕩培養24h。二級種子培養100L自動種子發酵罐裝種子培養基50L,將上述經一級種子培養的菌液按照10%的重量比接種到二級種子罐中,溫度30°C、通風量體積比1:1、機械攪拌120r/min、培養 24h。(4)巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)A.製備一級種子培養基蛋白腖10. Og,牛肉浸膏3. 0g , NaCl 5. Og,葡萄糖5. Og,蒸懼水lOOOmL, pH 7. O,在溫度121°C下滅菌30min。B.製備二級種子培養基玉米粉10kg、黃豆粉10kg、K2HPO4L 5kg,MgSO4 · 7Η201· 5kg、CaCO3L 5kg,蒸餾水 1000L, pH 7. 0,在溫度 121°C下滅菌 30min。C.培養條件一級種子培養1000mL三角瓶中裝一級種子培養基500mL,將菌種斜面按環/IOOmL的比例接入一級種子培養基中,溫度30°C、轉速150r/min、振蕩培養24h。二級種子培養200L自動種子發酵罐裝二級種子培養基100L,將上述經一級種子培養的菌液按照10%的重量比接種到二級種子罐中,溫度30°C、通風量體積比1:1、機械攪拌 150r/min、培養 24h。(5)膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)A.製備種子培養基=K2HPO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、CaC035g、NaClO. 2g、蔗糖 10g、CaSO4 · 2H200. lg,蒸餾水 lOOOmL, pH7. 0,在溫度 121°C下滅菌 30min。B.培養條件一級種子培養IOOOmL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/IOOmL的比例接入一級種子培養基中,溫度25°C、轉速150r/min、振蕩培養24h。二級種子培養200L自動種子發酵罐裝種子培養基100L,將上述經一級種子培養的菌液按照10%的重量比接種到二級種子罐中,溫度25°C、通風量體積比1:1 1、機械攪拌 150r/min、培養 24h。4.混合菌種發酵液中沼澤紅假單胞菌、螢光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發酵母液重量百分比的5%、5%、5%、10%、10%。5.發酵母液滅菌、接種後,溫度30°C、通風量體積比1:1、機械攪拌120r/min、培養48h通過無菌灌裝機進行裝瓶。6.按照以上方法製備得到的有機酸植物土壤調節劑,其中總固形物彡19. 25%、有機酸鈣含量彡1. 50%、有機酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡20. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡5. 00 X 108、螢光假單胞菌彡1. 50 X 109、褐球固氮菌(CFU/g)彡3. 00X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡3. 00X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡2. 50X IO9。實施例2參見圖1,按照以下方法製備本實施例的有機酸植物土壤調節劑1.稱取白酒發酵副產物黃水1000L,採用多袋式過濾器進行過濾,去除其中較大的雜質。然後再通過蒸發濃縮罐將發酵母液蒸發濃縮為總固形物含量為20%的液體。
2.黃水處理完畢後,將葡萄糖、(NH4)2SCV KH2PO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl和CaCO3分別按1. 5%、0· 5%、0· 01%,O. 01%,O. 002%,O. 01%和1. 5%的重量比添加到發酵母液中,然後在121°C、0.1lMPa條件下蒸煮滅菌30min。3.將沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)、突光假單胞菌(Pseudomonas florescens)、揭球固氣菌(Azotobacter chroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)分別按如實施例1所述的方法進行增菌培養。4.混合菌種發酵液中,沼澤紅假單胞菌、螢光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發酵母液重量百分比的3%、3%、5%、5%、5%。5.發酵母液滅菌、接種後,溫度30°C、通風量體積比1:1、機械攪拌120r/min、培養48h通過無菌灌裝機進行裝瓶。
6.按照以上方法製備得到的有機酸植物土壤調節劑,其中總固形物彡17. 00%、有機酸鈣含量彡1. 00%、有機酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡11. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡2. 50 X 108、螢光假單胞菌彡1. 00X 109、褐球固氮菌(CFU/g)彡2. 00X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 55X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 20X IO9。
權利要求
1.一種有機酸植物土壤調節劑的製備方法,其特徵在於,(1)將白酒發酵副產物黃水進行過濾、蒸發濃縮處理;(2)黃水處理完畢後加入葡萄糖、(NH4)2SCVKH2PO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl 和 CaCO3充分混合溶解後進行高溫滅菌;(3)滅菌結束後的發酵母液接入混合菌種發酵液發酵24 48h,通過無菌灌裝機進行裝瓶;所述的混合種菌種發酵液由沼澤紅假單胞菌、螢光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌菌液組成;所述混合菌種發酵液中沼澤紅假單胞菌、螢光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發酵母液重量的2 5%、2 5%、2 5%、5 10%、5 10%。
2.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,步驟(I)中所述的白酒發酵副產物黃水採用多袋式過濾器進行過濾,去除其中較大的雜質,然後再通過蒸發濃縮罐將發酵母液蒸發濃縮為總固形物含量為15%的液體。
3.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,所述的葡萄糖、(NH4)2SCVΚΗ2Ρ04、 MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl 和 CaCO3 分別按 I 2%、0· 5 1%、0· 01 O. 02%、O. 01 O.02%,O. 001 O. 005%,O. 01 O. 02%和I 2%的重量比添加到發酵母液中;所述高溫滅菌是在115°C 121°C、0. 07MPa O.1lMPa條件下蒸煮滅菌20 30min。
4.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,所述的沼澤紅假單胞菌菌液是按以下方法製成的配製種子培養基=K2HPO4O. 78g、KH2PO4O. 5g、MgSO4 · 7H20 O. 2g、NaClO. 5g、CaCl2O. 05g、 (NH4)2SO4O. 05g、酵母膏 2. 5g、醋酸鈉1. 65g、硼酸鈉 0. 38g、鑰酸銨 0. 22g,蒸餾水 1000mL,pH6.7 7. 2,在溫度115 121°C下滅菌20 30min ;一級種子培養=IOOOmL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接入種子培養基中,溫度25 30°C、轉速100 120r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度25 30°C、通風量體積比為1:0. 5 I的條件下、以80 100r/min機械攪拌,培養24 48h。
5.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,所述的螢光假單胞菌菌液是按以下方法製成的配製種子培養基蛋白腖5g、牛肉浸膏3g、NaCl 5g,蒸懼水IOOOmL混合均勻,pH6. 8 7.0,在溫度115 121°C下滅菌20 30min;一級種子培養IOOOmL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接入種子培養基中,溫度28 30°C、轉速100 120r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機械攪拌,培養24 48h。
6.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,所述的褐球固氮菌菌液是按以下方法製成的配製種子培養基=K2HPO4O. 8g, KH2PO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaC10. 5g、CaCl20. lg、甘露醇 20g、酵母膏 O. 5g、FeCl3O. 005g、Na2MoO4. 2Η200· 002g,蒸餾水 IOOOmL, pH 7.0 7. 2,在溫度115 121°C下滅菌20 30min ;一級種子培養=IOOOmL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接種入一級種子培養基中,溫度28 30°C、轉速100 120r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機械攪拌,培養24 48h。
7.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,所述的巨大芽孢桿菌菌液是按以下方法製成的配製一級種子培養基蛋白腖10. Og,牛肉浸膏3. 0g, NaCl 5. Og,葡萄糖5. Og,蒸懼水 IOOOmL, pH 6. 8 7. 0,在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ;配製二級種子培養基玉米粉10kg、黃豆粉10kg、K2HPO4L 5kg,MgSO4 · 7Η201· 5kg、 CaCO3L 5kg,蒸餾水 1000L, pH 6. 8 7.0,在溫度 115 121°C 下滅菌 20 30min ;一級種子培養1000mL三角瓶中裝一級種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接入一級種子培養基中,溫度28 30°C、轉速130 150r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機械攪拌,培養24 48h。
8.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,所述的膠凍樣芽孢桿菌菌液是按以下方法製成的配置種子培養基=K2HPO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、CaC035g、NaClO. 2g、蔗糖 10g、 CaSO4 · 2Η200· lg,蒸餾水 IOOOmL, pH 6· 8 7. 0,在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ;一級種子培養=IOOOmL三角瓶中裝種子培養基500mL,將菌種斜面按環/50 IOOmL的比例接種入一級種子培養基中,溫度25 28°C、轉速130 150r/min、振蕩培養24 48h ;二級種子培養將上述經一級種子培養的菌液按照5 10%的重量比接種到二級種子罐中,在溫度25 28°C、通風量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機械攪拌,培養24 48h。
9.根據權利要求1所述的方法,其特徵在於,步驟(3)中所述發酵母液滅菌、接種後,在溫度28 30°C、通風量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機械攪拌培養 24 48h,然後通過無菌灌裝機進行裝瓶。
10.按照權利要求1 9中任一項所述方法製備得到的有機酸植物土壤調節劑。
全文摘要
一種有機酸植物土壤調節劑的製備方法,其是將白酒發酵副產物黃水進行過濾、蒸發濃縮處理;黃水處理完畢後加入葡萄糖、(NH4)2SO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、MnSO4·H2O、NaCl和CaCO3充分混合溶解後進行高溫滅菌;滅菌結束後的發酵母液接入混合菌種發酵液發酵24~48h,通過無菌灌裝機進行裝瓶;所述的混合種菌種發酵液由沼澤紅假單胞菌、螢光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌分別按發酵母液重量的2~5%、2~5%、2~5%、5~10%、5~10%混合組成。
文檔編號C12R1/01GK103012009SQ20121050199
公開日2013年4月3日 申請日期2012年11月30日 優先權日2012年11月30日
發明者張有聰, 劉景輝, 索全義, 劉成剛, 嶽彥 申請人:張有聰