人參皂苷代謝物m1單脂肪酸酯類化合物的製備方法
2023-09-15 22:48:05
專利名稱:人參皂苷代謝物m1單脂肪酸酯類化合物的製備方法
技術領域:
本發明屬於以植物為來源的含有有機有效成分的醫藥配製品技術領域,涉及人參 皂苷代謝物Ml脂肪酸酯類化合物,特別是在Ml結構中葡萄糖單元3、4、6_位羥基單酯化產 物的製備方法。同時也涉及抗腫瘤的活性藥物。
背景技術:
人參皂苷是五加科人參屬(Panax)多年生草本植物人參(Panax ginsengC. A. Meyer)中主要的有效成分,具有抗腫瘤等多種生物活性。藥代動力學研究表明,人參皂苷 腸內菌代謝物以及脂肪酸酯可能是人參皂苷發揮功效的真正有效成成分。在研究人參皂苷 動物體內的代謝機制中發現,動物體內的結腸菌可以將人參皂苷Rb1, Rb2, Rc等二醇型人參 皂苷代謝為一種新的人參皂苷20-0-(β -D-吡喃葡萄糖)-20 (S)-原人參二醇皂苷(即Ml 或C-K)。Ml被腸道吸收後,經肝臟代謝,在肝臟中進一步與脂肪酸發生反應,形成Ml的脂 肪酸酯EMl (fatty acid esterof Ml)。曾有專利報導Ml中葡萄糖單元6-0H的酯化產物 及其合成,這類化合物對小鼠肝癌、胃癌等表現出明顯的抗腫瘤活性。但Ml中葡萄糖單元 3-0H、4-0H的酯化產物尚未見報導。參考文獻1. CN 100484951C 2009. 5. 6.2. United States Patent Application 20060234956.2006.10.19.3. Jun Lei, et al. Isolation, Synthesis and Structures of Cytotoxic GinsenosideDerivatives. Molecules,2007,12,2140-2150.4.人參皂苷次生代謝產物的合成研究.李娜等.中藥現代化.2008,28 (7) 523-52
發明內容
針對現有技術存在的不足,本發明的目的在於提供一種人參皂苷代謝物Ml結構中葡萄糖3、4_位羥基的單酯化產物,及Ml結構中葡萄糖3、4、6_位羥基的 單酯化產物的製備方法。人參皂苷代謝物Ml結構式為 本發明的技術方案為採用脂肪酸為醯化試劑,採用甲雙叉雙取代亞胺化合物為 脫水劑,以0獻?(4-乜11^讓7131^110 71^肚1^,4-二甲氨基吡啶的簡稱,下同)或同類物為催 化齊[J,在CH2C12、CHC13、Et3N或吡啶中進行反應。本發明化合物結構通式(1)為 其中R1、R2與R3中一個為醯基時,其餘兩個為H。Ml結構中葡萄糖單元3-0H位引入酯基(2)的結構為
Ml結構中葡萄糖單元6-0H位引入酯基的結構(4)為
香基的脂肪基。其中直鏈烷基、不飽和脂肪基的結構式可用CnH2n+1_x(n = 2,4,6,8···,20,X =0,2,4,6)表示;芳香基具有 CnH2n+1C6H4(或(CnH2n+1)2C6H3) (η = 0,1,2,3,…,12)的結構; 本發明優選的化合物其中R為直鏈烷基、不飽和脂肪基、脂環基以及帶有烷基的芳香基。本發明產品的製備方法採用如下條件採用Ml與脂肪酸為醯化試劑,採用甲雙叉 雙取代亞胺化合物為脫水劑,以4-Ν,N 二取代基氨基吡啶為催化劑,在氯代烷溶劑中進行 反應,反應溫度為15 30°C,反應時間為1 IOh ;反應溫度通常在室溫下為好,溶劑以二 氯甲烷或三氯甲烷為好。反應完畢用鹽酸終止反應,蒸除溶劑後用氯仿萃取殘留物,萃取物合併,並用無水 硫酸鈉乾燥,乾燥物經濃縮、矽膠柱吸附、淋洗、分別收集洗脫液,再經濃縮、結晶分別得到 三種Ml結構中葡萄糖單元3、4、6-0H位引入酯基產品。在進行單酯化反應時,Ml與醯化試劑的摩爾比為1. 0 1. 0 1. 5,Ml與脫水劑 的摩爾比為1.0 1.0 1.2,Ml與催化劑的摩爾比為1 0.060 0.070,溶劑用量為 lmmol Ml用溶劑25 32ml ;脫水劑結構中R4 = CH(CH3)2,或C-C6H11 (為環己基,下同);反應步驟為在反應容器中依次加入脂肪酸,催化劑和溶劑,在室溫攪拌Ih後加 入Ml 5 9h後用IN HCl溶液中止反應。本發明所用的脫水劑甲雙叉雙取代亞胺類化合物具有如下的結構R4-N = C = N-R4其中R4 = CH(CH3)2, C-C6H11, C6H5, p-N02_C6H4,或為 PPh3-DEAD(triphenylphosphi no-diethyl azodicarboxylate三苯基膦-偶氮二羧酸乙酯的簡稱,下同),PPh3-DIPEA ( triphenylphosphino-diisopropylethylamine,三苯基勝-二異丙基乙胺的簡禾爾,下同)。 本發明優選的脫水劑為DICWiisopropylcarbodiimide,N, N' - 二異丙基碳二亞胺的簡 稱,下同)、DCC(dicyclohexylcarbodiimide,N, N' -二環己基碳二亞胺的簡稱,下同)和 DPC(diphenylcarbodiimide,N,N' -二苯基碳二亞胺的簡稱,下同)。其中 R4 = CH(CH3)2、 C-C6H11和苯基。
本發明所述催化劑4-N,N 二取代基氨基吡啶具有如下的結構 其中R5,R6 分別為 CnH2n+1,CnH2nCOOH (η = 1,2,3,…,18),R5 與 R6 相同或不相 同。本發明優選的催化劑為DMAP (4-dimethylaminopyridine, 4- 二甲氨基吡啶)或 DPAP (4- {N-decyl, N-propionyl} aminopyridine, R5 = C10H21,R6 = CH2CH2COOH, 4-{N-癸烷 基,N-丙酸基}氨基吡啶的簡稱,下同)。本發明突出的優點在於提供了一種合成上述酯化 產物的方法,具有條件溫和的特點,適於工業化生產。
具體實施例方式實施例1在50mL 圓底燒瓶中依次加入月桂酸(32. 03mg,0. 16mmol),DIC (20. 3mg, 0. 16mmol), DMAP (2. 6mg, 0. 008mmol), 5mL CH2Cl2 作為溶劑。室溫攪拌 Ih 後加入 Ml (lOOmg,
0.16mmol)。5h後用IN HCl溶液中止反應。經常規後處理,最後用無水Na2SO4乾燥,矽膠 柱層析(淋洗劑為乙酸乙酯/石油醚20%,50%,70% )得到化合物2,3,4 (R = C11H23),產 率分別為25%,25%,10% (按Ml計)。3種化合物的分析數據如下化合物2 (R = C11H23) 白色固體,易溶於 CH2Cl2, CHCl3, m. p. 92 93°C ; [ α ]D25+25° (c lmg/mL CH2Cl2);IR(cm-1) :3361· 94,2965. 67,2932. 09,2851. 49,1729. 85,1629. 10,1454. 48, 1387. 31。1H NMR(CDCl3, 500ΜΗζ) δ :5· 098 (1Η,t,J = 6· 6Hz,Η-24),4· 912 (1Η,t,J = 9· 3Hz, glc-H-3),4. 623(1Η, t, J = 7.75Hz, glc-H-l),3. 86(1Η,dd, J = 3.25Hz, gla-Ha-6),
3.767 (1Η, dd, J = 3. 25Hz, glc-Hb-6),3. 649 (1Η, t, J = 9. IHz, glc-H-4),3. 579 (1Η, dt, J = 5. 3Hz,10. 3Ηζ, Η-12),3. 463(1Η,t, J = 8. 9Hz,glc-H-2),3. 348(1Η,dt/ddd, J =
4.25Hz,glc-H-5),3. 193(lH,dd,J = 4. 6Hz,Η_3),2. 4 (2Η,t,J = 7. 5Ηζ,Η_2" ),2. 18 (1Η, m, H-17),2. 09 (1H, H_23a),2. 01 (1H, H_23b),1. 88 (1H, H-16a),1. 28 (1H, H_16b),1. 88 (3H, H-19),1. 72(1H, H-I la),1. 25(1H, H-llb),1. 76 (1H, H_13),1. 73(1H, H_la),0· 97(1H, Η-lb),1. 70(2H, H-22),1. 64(2H, H-10 「 ),1. 62(1H, H_26a),1. 57(1H, H_26b),1. 62(1H, H-2a),1. 57 (1H, H_2b),1. 63 (2H, H_3 「 ),1. 61 (3H, H_27),1. 53 (2H, H-15),1. 48 (2H, H_6),
1.36(1H,H-9),1. 34(3H,H-21),1. 29(2H,H-ll" ),1. 28 (2H,H_7),1. 26 (6H,H_4〃 -9"), 0. 98(3H,s,H-28),0. 89 (3H,s,H-30),0. 88(3H,t,J = 7. 35Hz,H_12" ),0. 87 (3H,s,H-18), 0. 78 (3H, s, H-29),0· 71 (1H, t, J = 11. OHz, H_5)。13C NMR(CDCl3, 125MHz) 175. 56,131. 83,124. 34,97. 26,84. 57,78. 87,78. 29, 75. 6,71. 96,70. 59,69. 64,62. 43,55. 87,51. 69,51. 53,49. 82,48. 14,39. 8,39. 8,38. 95, 37. 11,35. 43,34. 77,34. 39,31. 93,30. 62,30. 37,29. 71,29. 62,29. 47,29. 35,29. 27, 29. 11,28. 05,27. 42,27. 42,26. 63,25. 68,24. 94,22. 7,22. 44,21. 92,18. 29,17. 76,16. 13,15. 77,15. 39,14. 12ppm。化合物3 (R = C11H23)白色固體,易溶於 CH2C12、CHCl3, m.p· °C ;[a]D25+17° (c 2mg/mL CH2Cl2)。IR(cm-1) :3388. 81,2965. 67,2918. 66,2851. 49,1743. 28,1662. 69,1622. 39, 1461.19,1387. 31。1H NMR(CDCl3, 500MHz) 5. 101 (1H, t, J = 6. 4Hz, H-24),4. 869 (1H,t, J = 9. 6Hz, glc-H-4),4. 561 (1H, d, J = 7. 7Hz,glc—H—l),3. 694(1H,t,J = 9. 4Hz,glc-H—3), 3. 663-3. 638 (1H, m, H-12),3. 663-3. 638 (1H, m, glc-Ha-6),3. 573-3. 548 (1H, m, glc-Hb-6), 3. 412(1H,t, glc-H-2),3. 395-3. 377(1H, m, glc-H-5),3. 196(1H, dd, J = 4. 6Hz, 11. 2Hz, H-3),2. 356 (2H, H_2 「 ),2. 19 (1H, H_17),2. 13 (2H, H_23),1. 89 (2H, H-16),1. 83 (2H, H-11),1. 777 (1H, H-13),1. 73 (1H, Η-la) ,0. 96 (1H, Η-lb),1. 688 (2H, H_22),1. 68 (3H, H-26),1. 63 (2H, H-3 「 ),1· 63 (2H, H-2),1. 61 (3H, H-27),1. 58 (2H, H-6),1. 53 (2H, H-15), 1. 47 (2H, H-7),1. 365(1H,H_9),1. 342(3H,H_21),1. 26(1H,H_11" a),0· 86(1H,H_11" b), 1. 257 (2Η,H-IO 〃),1. 25 (6Η,Η_4 〃 -9" ),1. 01 (3Η,Η-18),0. 976 (3Η,Η-28),0. 9 (3Η, H-19),0. 9 (3Η, Η-30),0. 897 (3Η, Η-12 〃 ),0. 803 (3Η, Η-29) ,0. 716 (1Η, Η-5)。13C NMR(CDCl3,125MHz) 173. 99,131. 87,124. 31,96. 84,84. 43,78. 9,74. 6874. 27, 74. 07,70. 67,70. 48,61. 74,55. 91,51. 74,51. 46,49. 86,49. 46,48. 07,39. 82,38. 99, 38. 95,37. 12,35. 47,34. 29,31. 92,30. 66,30. 46,29. 71,29. 61,29. 45,29. 34,29. 25,29. 1, 28. 06,27. 43,26. 66,25. 69,24. 93,22. 69,22. 36,21. 86,18. 29,17. 76,16. 98,16. 15, 15. 77,15. 38,14. Ilppm0化合物4(R = C11H23)的結構數據與文獻[1』3]數據一致。實施例2在50mL 圓底燒瓶中依次加入月桂酸(32. 03mg,0. 16Immo 1),DIC (20. 32mg, 0. 161mmol),DPAP(3. 0mg,0. 008mmol),5mL CHCl3 作為溶劑。室溫攪拌 Ih 後加入 Ml (lOOmg, 0. 16mmol)。8h後用IN HCl溶液中止反應。經常規後處理,最後用無水Na2SO4乾燥,濃縮 後,經矽膠柱層析(淋洗劑為乙酸乙酯/石油醚20%,50%,70% )得到化合物2,3,4(R = C11H23),產率分別為10%,15%,30% (按Ml計)。三種化合物的分析數據如實施例1所示。實施例3在50mL 圓底燒瓶中依次加入月桂酸(32. 03mg,0. 16mmol),DCC (33. Omg, 0. 16mmol), DMAP (2. 6mg, 0. 008mmol), 5mL CH2Cl2 作為溶劑。室溫攪拌 Ih 後加入 Ml (lOOmg, 0. 16mmol)。5h後用IN HCl溶液中止反應。經常規後處理,最後用無水Na2SO4乾燥,濃縮 後,經矽膠柱層析(淋洗劑為乙酸乙酯/石油醚20%,50%,70% )得到化合物2,3,4(R = C11H23),產率分別為15%,15%,20% (按Ml計)。三種化合物的分析數據如實施例1所示。實施例4在50mL圓底燒瓶中依次力Π入月桂酸(32. 03mg,0. 16mmol), DPC(diphenylcarbodiimide,N,N' -二苯基碳二亞胺)(31. 08mg,0. 16mmol),DMAP (1. 4mg, 0.011 讓ol),5mL CH2Cl2 作為溶劑。室溫攪拌 Ih 後加入 Ml (lOOmg,0. 16mmol)。5h 後用 IN HCl溶液中止反應。經常規後處理,最後用無水Na2SO4乾燥,濃縮後,經矽膠柱層析(淋洗劑 為乙酸乙酯/石油醚20 %,50 %,70 % )得到化合物2,3,4 (R = C11H23),產率分別為10 %,15%,10% (按Ml計)。三種化合物的分析數據如實施例1所示。實施例5在50mL 圓底燒瓶中依次加入癸酸(41. 32mg,0. 24mmol),DIC (30. 29mg, 0. 24mmol) ,DMAP (6. 47mg,0. 053mmol),5mL CH2Cl2 作為溶劑。室溫攪拌 Ih後加入Ml (150mg, 0. 24mmol)。5h後用IN HCl溶液中止反應。經常規後處理,最後用無水Na2SO4乾燥,矽膠 柱層析(淋洗劑為乙酸乙酯/石油醚30 %,50 %,70% )得到化合物2,3,4 (R = C9H19),產 率分別為10%,20%,30% (按Ml計)。化合物2 (R = C9H19)白色固體,易溶於 C^Cl^CHClyIlUcnr1) 3381. 98,2958. 96, 2919.01,2851.49,2360. 20,1736. 57,1622. 40,1461. 19,1407. 45 ;化合物3 (R = C9H19)白色固體,易溶於 C^Cl^CHClyIlUcnr1) 3382. 09,2958. 96, 2918.66,2852.06,2361. 19,1736. 57,1622. 30,1460. 53,1406. 62 ;化合物4(R = C9H19)無色透明油狀物,易溶於 CH2Cl2, CHCl3, IR(cm"1) =3382. 09, 2958.96,2918.66,2851. 49,2361. 19,1736. 57,1622. 39,1461. 19,1407. 46。
權利要求
人參皂苷代謝物M1脂肪酸酯類化合物的製備方法,是在以下結構的M1化合物中葡萄糖3、4、6 位羥基進行單酯化反應而成;其特徵在於以脂肪酸為醯化試劑,甲雙叉雙取代亞胺為脫水劑,4 N,N二取代基氨基吡啶為催化劑,在溶劑氯代烷中與M1在15~30℃下反應1~10h;反應完畢用鹽酸終止反應,蒸除溶劑後用氯仿萃取殘留物,萃取液合併,並用無水硫酸鈉乾燥,乾燥物經濃縮、矽膠柱吸附、淋洗、分別收集洗脫液,再經濃縮、結晶分別得到三種M1結構中葡萄糖單元3、4、6 OH位引入酯基產品;其中M1與醯化試劑的摩爾比為1.0∶1.0~1.5,M1與脫水劑的摩爾比為1.0∶1.0~1.2,M1與催化劑的摩爾比為1∶0.060~0.070,溶劑用量為1mmol M1用溶劑25~32ml;所述催化劑4 N,N二取代基氨基吡啶有如下結構其中R5,R6分別為CnH2n+1,CnH2nCOOH(n=1,2,3,…,18),R5與R6相同或不相同;所述脫水劑甲雙叉雙取代亞胺的結構為R4 N=C=N R4其中R4=CH(CH3)2,c C6H11,C6H5,或p NO2 C6H4。FSA00000156915200011.tif,FSA00000156915200012.tif
2.根據權利要求1所述人參皂苷代謝物Ml脂肪酸酯類化合物的製備方法,其特徵在 於在進行單酯化反應時,Ml與醯化試劑的摩爾比為1.0 1.0,Ml與脫水劑的摩爾比為 1.0 1. 0,Ml與催化劑的摩爾比為1 0. 060 0. 070,溶劑用量為lmmol Ml用溶劑25 32ml ;脫水劑結構中 R4 = CH(CH3)2,或 C-C6H11。
3.根據權利要求1所述人參皂苷代謝物Ml脂肪酸酯類化合物的製備方法,其特徵在於 在進行單酯化反應時,所述的催化劑的結構中,R5為CltlH21,R6為CH2CH2C00H。
4.根據權利要求1所述人參皂苷代謝物Ml脂肪酸酯類化合物的製備方法,其特徵在於 在進行單酯化反應時,所述的催化劑的結構中,R5 = R6 = CH3。
5.根據權利要求1所述人參皂苷代謝物Ml脂肪酸酯類化合物的製備方法,其特徵在於 反應步驟為在反應容器中依次加入脂肪酸,催化劑和溶劑,在室溫攪拌Ih後加入Ml 5 9h後用IN HCl溶液中止反應。
6.根據權利要求1所述人參皂苷代謝物Ml脂肪酸酯類化合物的製備方法,其特徵 在於進行單酯化反應時,Ml與醯化試劑的摩爾比為1.0 1.0,Ml與脫水劑的摩爾比為 1.0 1. 0,Ml與催化劑的摩爾比為1 0. 060 0. 070,溶劑用量為lmmol Ml用溶劑25 32ml ;脫水劑結構中R4 = CH(CH3) 2,或C-C6H11 ;催化劑的結構中,R5 = R6 = CH3或R5為CltlH11, R6為CH2CH2COOH ;反應步驟為在反應容器中依次加入脂肪酸,催化劑和溶劑,在室溫攪拌 Ih後加入Ml 5 9h後用INHCl溶液中止反應。
全文摘要
人參皂苷代謝物M1脂肪酸酯類化合物的製備方法。以脂肪酸為醯化試劑,甲雙叉雙取代亞胺為脫水劑,4-N,N二取代基氨基吡啶為催化劑,在溶劑氯代烷中與M1在15~30℃下反應1~10h;反應完畢用鹽酸終止反應。蒸除溶劑後用氯仿萃取殘留物,萃取物合併,經濃縮、矽膠柱吸附、淋洗、分別收集洗脫液,再經濃縮、結晶分別得到三種M1結構中葡萄糖單元3、4、6-OH位引入酯基產品;M1與醯化試劑的摩爾比為1.0∶1.0~1.5,M1與脫水劑的摩爾比為1.0∶1.0~1.2,M1與催化劑的摩爾比為1∶0.060~0.070,溶劑用量為1mmol M1用溶劑25~32ml;具有條件溫和的特點,適於工業化生產。
文檔編號C07J17/00GK101921305SQ201010209730
公開日2010年12月22日 申請日期2010年6月23日 優先權日2010年6月23日
發明者弓曉傑, 李爭寧, 李文芳, 陳麗榮 申請人:大連大學