微生物菌劑和微生物菌劑的製備方法及其用途的製作方法

2023-09-16 13:39:20

專利名稱：微生物菌劑和微生物菌劑的製備方法及其用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種微生物菌劑和微生物菌劑的製備方法及其用途。
技術背景生態養豬法是採集自然環境中的微生物，將其與一定量的秸杆、木屑、 輔助材料等混合形成有機墊料，有機墊料中的微生物可降解豬糞便。目前， 生態養豬法採用的是自然菌群發酵法，即從自然環境中採集微生物，通過傳 統手段將微生物富集到墊料中，但這種方法的缺點是製作方法不規範，有機 墊料發酵時間長，發酵過程需要從自然界中採集菌種，再擴培培養，使操作過程繁瑣，並且菌數不易控制，菌群不易確定，易感染雜菌，發酵時間約2 周時間，不適合大規模推廣。 發明內容本發明的目的是為了解決現有生態養豬法中的有機墊料發酵時間長，發 酵過程操作繁瑣菌數不易控制，菌群不易確定，易感染雜菌的問題，提供了 一種微生物菌劑和微生物菌劑的製備方法及其用途。本發明微生物菌劑主要由乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真 菌製成；微生物菌劑中乳酸菌與酵母菌的菌數比為16~22: 8~13，酵母菌與 光合細菌的菌數比為8~13: 17 24，光合細菌與放線菌的菌數比為17 24: 7~12，放線菌與絲狀真菌的菌數比為7 12: 38 42。本發明微生物菌劑的製備方法如下將純化培養的乳酸菌、酵母菌、光 合細菌、放線菌和絲狀真菌混合，其中乳酸菌與酵母菌的菌數比為16 22: 8 13，酵母菌與光合細菌的菌數比為8 13: 17~24，光合細菌與放線菌的菌 數比為17 24: 7~12，放線菌與絲狀真菌的菌數比為7 12: 38~42。本發明中的乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌都分別經過 一級斜面培養、二級液體種子培養和三級液體發酵培養。經過三級液體發酵 培養後乳酸菌培養液中乳酸菌的菌數為1.0X108 5.0X108cfb/ml，酵母菌培養 液中酵母菌的菌數為1.0X108 2.5X108cfb/ml，光合細菌培養液中光合細菌的菌數為1.0X108 5.0X108cfu/ml，放線菌培養液中放線菌的菌數為 1.0X108 2.5X108cfo/ml，絲狀真菌培養液中絲狀真菌的菌數為1.0X108 9.0X108cfu/ml。乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌混合後，加 入混合菌液總體積2%的保護劑，保護劑為脫脂乳粉或甘油，在真空度為lPa、 溫度為-50 -8(TC的條件下乾燥8 12h。本發明的微生物菌劑作為有機墊料發酵劑。本發明.的微生物菌劑用於生態法養豬。本發明中所用的乳酸菌可以調節豬腸道的菌群平衡，增強豬的消化吸收 力，有效控制腹瀉等常見腸道疾病的發生，同時改善豬糞便的臭味；所用的 酵母菌作為優質蛋白質增加飼料效價，同時能發酵有機墊料產生酒糟味及特有香味，增加豬的食慾；所用的光合細菌能以有機物或有害氣體為基質，合 成胺基酸、核酸等含氮化合物等多種生理活性物質，這些代謝產物，可以作 為其他微生物生長繁殖的基質；所用的放線菌，能攝取光合細菌產生的氨基 酸等生理活性物質產生抗生物質，有效抑制病原菌，大大減少豬患病的機率； 所用的絲狀真菌，在發酵代謝的過程中能產生熱量，為豬生長提供溫暖舒適 的環境，同時具有分解惡臭物質的作用。本發明中的微生物菌劑中的常溫菌、中溫菌和高溫菌(最高溫度可達60 65°C)組成的的菌群協同遞進、功能互補和酶系互補的作用充分發揮各益生 菌菌株的優勢，提高了降解效率，縮短了對豬糞便的降解周期，7 10天就 可完成降解過程，該過程中最高溫度可達60 65。C，殺滅豬糞中的有害微生 物和病原菌，降俾了豬患病的機率。本發明的微生物菌劑充分的利用了微生 物的轉化和代謝的發熱作用，將除臭和發酵兩種功能有機地結合在一起，實 現了對豬糞便臭味的去除，同時將其轉化為優質的有機飼料，可節省飼料20 30%，降低養豬的生產成本，本發明菌數固定'，方法簡單，無環境汙染。
具體實施方式
具體實施方式
一本實施方式中的微生物菌劑主要由乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌製成；微生物菌劑中乳酸菌與酵母菌的菌數比為16 22: 8 13，酵母菌與光合細菌的菌數比為8~13: 17 24，光合細菌與放 線菌的菌數比為17 24: 7 12，放線菌與絲狀真菌的菌數比為7~12: 38 42。
具體實施方式
二本實施方式中微生物菌劑的製備方法如下將純化培 養的乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌混合，其中乳酸菌與酵母菌的菌數比為16~22: 8 13，酵母菌與光合細菌的菌數比為8 13: 17 24， 光合細菌與放線菌的菌數比為17 24: 7~12，放線菌與絲狀真菌的菌數比為 7~12: 38 42。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
二不同的是乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌都分別經過一級斜面培養、二級液體種子 培養和三級液體發酵培養。其它與具體實施方式
二相同。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
二不同的是經過三級液體發酵培養後乳酸菌培養液中乳酸菌的菌數為1.0X108~5.0X108cfu/ml，酵母菌 培養液中酵母菌的菌數為1.0X108 2.5X108cfU/ml，光合細菌培養液中光合 細菌的菌數為1.0X108 5.0X108cfU/ml，放線菌培養液中放線菌的菌數為 1.0X108 2.5X108cfu/ml，絲狀真菌培養液中絲狀真菌的菌數為1.0X108 9.0X108cfti/ml。其它與具體實施方式
二相同。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
二不同的是乳酸菌、酵母 菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌混合後，加入混合菌液總體積2%的保護劑， 保護劑為脫脂乳粉或甘油，在真空度為1Pa、溫度為-50 -8(TC的條件下乾燥 S 12h，製得固體微生物菌劑。其它與具體實施方式
二相同。
具體實施方式
六本實施方式中微生物菌劑作為有機墊料發酵劑。
具體實施方式
七本實施方式中微生物菌劑用於生態法養豬。
具體實施方式
八本實施方式中乳酸菌菌株的培養過程如下在37。C的 條件下將乳酸菌奔MRS培養基上作一級斜面培養48h後，將經過一級斜面培 養的乳酸菌接種到三角瓶中，在37。C的條件下作二級液體靜止培養I8h，然 後將乳酸菌接種到發酵罐中，使乳酸菌的接種量為發酵罐內發酵液體積的 2% ，然後在37°C的條件下作三級培#後得到菌數為l.0X108 5.0Xl8cfu/mL的液體發酵液。'本實施方式中酵母菌菌株的培養過程如下在30。C的條件下將酵母菌在 麥芽汁培養基上作一級斜面培養48h後，將經過一級斜面培養的酵母菌接種 到三角瓶中，在30。C的條件下作二級液體振蕩培養14h，然後將酵母菌接種到發酵罐中，使酵母菌的接種量為發酵罐內發酵液體積的5%，然後在3(TC的條件下作三級培養後得到菌數為1.0X 108 2.5X 108cfo/mL的液體發酵液。本實施方式中光合細菌菌株的培養過程如下在30。C光照條件下將光合 細菌在營養瓊脂培養基上作一級斜面培養5天後，將經過一級斜面培養的光 合細菌接種到三角瓶中，在3(TC光照條件下作二級液體靜止培養3天，然後 將經過二級液體靜止培養的光合細菌接種到發酵罐中，使光合細菌的接種量 為發酵罐內發酵液體積的20%，然後在30。C的光照條件下作三級培養後得到 菌數為1.0X108 5.0X108cfb/mL液體發酵液本實施方式中放線菌菌株的培養過程如下在28'C的條件下將放線菌在 高氏培養基上作一級斜面培養7天後，將經過一級斜面培養的放線菌接種到 三角瓶中，然後在28。C的條件下作二級液體靜止培養5天，然後將經過二級 液體靜止培養的放線菌接種到發酵罐中，使放線菌的接種量為發酵罐內發酵 液體積的10%,然後在28。C的條件下作三級培養後得到菌數為1.0X108 2.5 X 108cfu/mL的液體發酵液。本實施方式中絲狀真菌菌株的培養過程如下在30。C的條件下將絲狀真 菌在麥芽汁培養基上作一級斜面培養72h後，將經過一級斜面培養的絲狀真 菌接種到三角瓶中，在30。C的條件下作二級液體振蕩培養12h，然後將經過 二級液體振蕩培養的絲狀真菌接i中到發酵罐中，使絲狀真菌的接種量為發酵 罐內發酵液體積的5%，在3(TC的條件下作三級培養得到菌數為1.0X108 9.0X 108cfu/mL的液體發酵液。本實施方式中微生物菌劑的製備方法如下將乳酸菌菌液、酵母菌菌液、 光合細菌菌液、放線菌菌液和絲狀真菌菌液，使每毫升微生物菌劑中乳酸菌 與酵母菌的菌數比為2: 1、酵母菌與光合細菌的菌數比為1: 2、光合細菌與 放線菌的菌數比為2: 1、放線菌與絲狀真菌的菌數比為1: 4的比例混合。然後在室溫下以200mL/平方米的接種量向有機墊料中加入得到的微生 物菌劑，有機墊料在常溫下即可發酵。 '具體實施方式
九本實施方i中乳酸菌菌株的培養過程如下在37。C的條件下將乳酸菌在MRS培養基上作一級斜面培養48h後，將經過一級斜面培 養的乳酸菌接種到三角瓶中，在37。C的條件下作二級液體靜止培養18h，然6後將乳酸菌接種到發酵罐中，使乳酸菌的接種量為發酵罐內發酵液體積的5% ，然後在37°C的條件下作三級培養後得到菌數為1.0X108 5.0X 108cfWmL的液體發酵液。本實施方式中酵母菌菌株的培養過程如下在3(TC的條件下將酵母菌在 麥芽汁培養基上作一級斜面培養48h後，將經過一級斜面培養的酵母菌接種 到三角瓶中，在3(TC的條件下作二級液體振蕩培養14h，然後將酵母菌接種 到發酵罐中，使酵母菌的接種量為發酵罐內發酵液體積的5%，然後在3(TC 的條件下作三級培養後得到菌數為1.0X 108 2.5X 108cfWmL的液體發酵液。本實施方式中光合細菌菌株的培養過程如下在3(TC光照條件下將光合 細菌在營養瓊脂培養基上作一級斜面培養5天後，將經過一級斜面培養的光 合細菌接種到三角瓶中，在3(TC光照條件下作二級液體靜止培養3天，然後 將經過二級液體靜止培養的光合細菌接種到發酵罐中，使光合細菌的接種量 為發酵罐內發酵液體積的20%，然後在3(TC的光照條件下作三級培養後得到 菌數為1.0Xl8 5.0X108cfti/mL液體發酵液。本實施方式中放線菌菌株的培養過程如下在28'C的條件下將放線菌在 高氏培養基上作一級斜面培養7天後，將經過一級斜面培養的放線菌接種到 三角瓶中，然後在28。C的條件下作二級液體靜止培養5天，然後將經過二級 液體靜止培養的放線菌接種到發酵罐中，使放線菌的接種量為發酵罐內發酵 液體積的10%，然後在28。C的條件下作三級培養後得到菌數為1.0X108 2.5 X 108cfU/mL的液體發酵液。本實施方式中絲狀真菌菌株的培養過程如下在30。C的條件下將絲狀真 菌在麥芽汁培養基上作一級斜面培養72h後，將經過一級斜面培養的絲狀真 菌接種到三角瓶中，在30。C的條件下作二級液體振蕩培養12h，然後將經過 二級液體振蕩培養的絲狀真菌接種到發酵罐中，使絲狀真菌的接種量為發酵 罐內發酵液體積的5%，在3(TC的條件下作三級培養得到菌數為1.0X108 9.0X 108cfu/mL的液體發酵液。本實施方式中微生物菌劑的製備方法如下 一、將乳酸菌發酵液、酵母 菌發酵液、光合細菌發酵液、放線菌發酵液和絲狀真菌發酵液離心後得到的 菌泥分別與保護劑混合，然後將菌泥與保護劑的混合物在真空度為iPa、溫度為-50 -8(TC的條件下乾燥8 12h，分別得至U凍幹後的菌體；二、將乳酸菌、 酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌按照乳酸菌與酵母菌的菌數比為2: 1、 酵母菌與光合細菌的菌數比為1: 2、光合細菌與放線菌的菌數比為2: 1、放 線菌與絲狀真菌的菌數比為1: 4的比例混合，得到固體微生物菌劑，其中步驟一中保護劑的質量與菌液的體積比為2g:100ml，步驟一中的保護劑為甘油 或脫脂乳粉。取lkg固體微生物菌劑與10L水混合，然後在室溫下以200mL/平方米 的接種量向有機塾料，有機墊料在常溫下即可發酵。
具體實施方式
十本實施方式與具體實施方式
八和九不同的是乳酸菌三 級培養基按20g葡萄糖、10g蛋白腖、10g牛肉膏、5g酵母膏、5g檸檬酸鈉、 2g磷酸氫二鉀、5g乙酸鈉、0.58g MgS04'7H20、 0.25gMnSO4.4H2O、 80mL 吐溫、0.5°/。山梨酸鉀、20g瓊脂和1000mL的水的比例製備，並用醋酸調節 培養基pH值為6.0 6.5。其它與具體實施方式
八和九相同。
具體實施方式
十一本實施方式與具體實施方式
八和九不同的是酵母菌 三級培養基按1000mL的6。Bx麥芽汁和20g瓊脂的比例製備，並用鹽酸調節 培養基pH值為6.0。其它與具體實施方式
八和九相同。
具體實施方式
十二本實施方式與具體實施方式
八和九不同的是光合細 菌三級培養基按10g蛋白腖、3g牛肉膏、5g氯化鈉、20g瓊脂和1000mL的 比例製備，並用lmol/L的NaOH溶液調節培養基的pH值為7.4。其它與具 體實施方式八和九相同。 '具體實施方式
十三本實施方式與具體實施方式
八和九不同的是放線菌 三級培養基按lg葡萄糖、10g蛋白腖、5g氯化鈉、20g瓊脂和1000mL水的 比例製備。其它與具體實施方式
八和九相同。
權利要求
1. 微生物菌劑，其特徵在於微生物菌劑主要由乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌製成；微生物菌劑中乳酸菌與酵母菌的菌數比為16～22∶8～13，酵母菌與光合細菌的菌數比為8～13∶17～24，光合細菌與放線菌的菌數比為17～24∶7～12，放線菌與絲狀真菌的菌數比為7～12∶38～42。
2、 如枚利要求1所述的微生物菌劑的製備方法，其特徵在於微生物菌劑 的製備方法如下將純化培養的乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀 真菌混合，其中乳酸菌與酵母菌的菌數比為16~22: 8 13，酵母菌與光合細 菌的菌數比為8~13: 17~24，光合細菌與放線菌的菌數比為17 24: 7~12，放 線菌與絲狀真菌的菌數比為7 12: 38 42。 '
3、 根據權利要求2所述的微生物菌劑的製備方法，其特徵在於乳酸菌、 酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌都分別經過一級斜面培養、二級液體 種子培養和三級液體發酵培養。
4、 根據權利要求3所述的微生物菌劑的製備方法，其特徵在於經過三級 液體發酵培養後乳酸菌培養液中乳酸菌的菌數為1.0X108~5.0X108cfu/ml，酵 母菌培養液中酵母菌的菌數為1.0X108 2.5X108cfo/ml，光合細菌培養液中 光合細菌的菌數為1.0X108 5.0X108cfU/ml，放線菌培養液中放線菌的菌數 為1.0X10S 2.5XlScfu/ml，絲狀真菌培養液中絲狀真菌的菌數為1.0X108 9.0X108cfU/ml。
5、 根據權利要求2所述的微生物菌劑的製備方法，其特徵在於乳酸菌、 酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌混合後，加入混合菌液總體積2%的保 護劑，保護劑為脫脂乳粉或甘油，在真空度為1Pa、溫度為-50 -80。C的條件 下乾燥8 12h。
6、 權利要求1所述微生物菌劑的用途，其特徵在於微生物菌劑作為有機 墊料發酵劑。
7、 權利要求1所述微生物菌劑的用途，其特徵在於微生物菌劑用於生態 法養豬。
全文摘要
微生物菌劑和微生物菌劑的製備方法及其用途，它涉及一種菌劑的製備方法及其用途。本發明解決了現有生態養豬法中的有機墊料發酵時間長，發酵過程操作繁瑣菌數不易控制，菌群不易確定，易感染雜菌的問題。本發明微生物菌劑主要由乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌混合製成。本發明方法如下將乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌混合，其中乳酸菌、酵母菌、光合細菌、放線菌和絲狀真菌均經過一級斜面培養、二級液體種子培養和三級液體發酵培養。本發明的微生物菌劑7～10天就可完成降解過程，該過程中最高溫度可達60～65℃，而且本發明菌數固定，方法簡單，無環境汙染。
文檔編號A01K1/02GK101280272SQ200810064568
公開日2008年10月8日 申請日期2008年5月23日 優先權日2008年5月23日
發明者波 孫, 寧 徐 申請人:孫 波;徐 寧