一種用於治療痛經的中藥組合物及其製備方法
2023-09-21 16:36:25 1
專利名稱：：一種用於治療痛經的中藥組合物及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及生物醫藥
技術領域：
，尤其涉及一種用於治療痛經的中藥組合物及其製備方法。
背景技術：
：痛經是指月經周期伴有痙攣性腹痛，並伴有全身的不適症狀。分原發性和繼發性兩種。經過詳細婦科臨床檢查未能發現盆腔器官有明顯異常者，稱原發性痛經，也稱功能性痛經，多見於20-25歲的未婚女性。它是指婦女在經期及其前後，出現小腹或者腰部疼痛，甚至痛及腰骶。每隨月經周期而發，嚴重者可伴有噁心、嘔吐、冷汗淋漓、手足厥冷，甚至昏厥，嚴重的影響了患者的工作和生活。對痛經的治療，西醫一般強調止痛、鎮靜及前列腺素抑制劑進行治療，例如用阿司匹林、阿託品等進行止痛；通過口服雌激素類藥物來抑制排卵而防止下次痛經的發生；注射或口服舒喘靈(羥甲異丁腎上腺素)；口服前列腺素合成抑制劑。然而，西藥的治療儘管迅速，但是停藥後易復發，而且藥物產生的副作用，療效也難持久，使很多女性又增加了其他痛苦。因此，痛經患者更傾向於從傳統中藥中尋找治療的藥物和方法，來從根本上解決痛經的痛苦。中醫治療痛經有豐富的實踐經驗及理論基礎。痛經，在中醫學上意謂"行經腹痛"，中醫認為引起痛經主要原因大致可歸納以下四點一為氣滯血瘀；二為氣血兩虛；三為寒溼凝滯；四為肝腎虧損。明代宋林皋在《宋氏女科秘書》中寫到"經水將來作痛者，血瘀氣滯也，腹中陣陣作痛者，治當調養氣血"。香附，為莎草科植物莎草(CyperusrotundusL.)的乾燥根莖，性平，味辛，微苦，為血中氣藥，主行血中之氣，能入血而以治氣為功。香附富含揮髮油，油中主要含香附醇、香附烯、芹子烯、a、p-香附酮、廣藿香烯酮、檸檬烯等多種成分，具有活血行氣、祛風止痛、幵鬱燥溼等功效。香附為氣中血藥，主行氣中之血，能入氣而偏治於血。川芎為傘科植物川芎(LigusticumchuanxiongHort.)的乾燥塊蓬，主含揮髮油，揮髮油中的主要成分為總藁苯內酯類化合物，包括藁苯內酯、蛇床酯內酯、丁基苯肽、二氫基苯肽等。而總藁苯內酯類化合物中的主要成分為藁苯內酯。川芎中所含的藁本內酯有平滑肌解痙和抑制腸肌、子宮收縮等作用。高溫下，藁苯內酯會發生異構化失去活性。異構後的藁苯內酯藥理作用明顯下降，甚至消失。採用傳統的水蒸汽蒸餾法，會使川芎揮髮油中的藁苯內酯失去活性，從而降低藥物的療效。按中醫理論香附、川芎配伍，氣血並調，共奏理氣解鬱，活血止痛之功效。現代藥理研究表明其揮發性成分具有明顯的鎮痛作用，為其主要活性成分。IndiraM等報導，去卵巢大鼠試驗表明，香附揮髮油有輕度雌激素樣活性，而且實驗也證明從揮髮油分離出的成分中，以香附烯(Cyperene)I的作用最強，對子宮具有明顯的抑制和收縮作用。香附的這一作用是其治療月經不調的主要依據之一。中醫認為痛經的根本病機是氣滯血瘀，其治療原則為行氣活血。血的運行需要氣的推動，香附為血中氣藥，婦人要藥。a-香附酮為較強的前列腺素生物合成抑制劑，故也是鎮痛作用的有效成分之一。關於以香附或者川芎用來治療痛經的專利與文獻比較多，如申請號200410018563.X採用香附一味藥、申請號03135228.6採用香附、川芎等ll味藥、申請號200410022424.4中採用川芎、延胡索等6味藥材、申請號03148158.2中採用川芎一味藥等等。這些專利中所涉及的藥物或者是一味藥，效力不專宏，療效不顯著；或者是多味藥物組成，不但藥味多、劑量大，而且泛化證候類型，不能滿足衛生經濟學指導和保護中藥資源的原則。公開號為CN1352980A的專利公開了將香附、川芎分別進行超臨界C02提取後，將提取物按照一定比例進行混合，製成軟膠囊用於治療偏頭疼症狀。該專利與本發明專利不同。本發明所提供的工藝是混合提取，並進一步純化，除去不必要的成分，增加了臨床安全性。中藥複方製劑中的全方成分與藥效上不等於單位藥的機械總和，複方混合提取形成配伍關係構成系統整體。中藥製劑在製備的過程中大多需要經受溶媒提取、加壓、加熱等過程，在這些過程中，各種成分的溶出或者成分之間的相互作用，成分含量的增減或新化合物的產生都有可能產生。例如黃連解毒湯(黃連、黃柏、黃芩、梔子)混合提取後總梔子苷的提取率為97.4%，而其單味中藥分別提取後合併液的樣品中，總梔子苷的提取率僅為6.3%;又如用於治療心腎不交的交泰丸中黃連與肉桂配伍混合提取後，黃連中的生物鹼與肉桂中肉桂醛或者肉桂酸在提取過程中生成一種新的復鹽，具有明顯的治療心悸失眠等症狀，而黃連和肉桂兩味藥單獨提取後混合不產生該復鹽，這一點也在明代韓懋《韓式醫通》中有記載即"黃連...生用為君，佐官桂少許，煎百沸...."，再次說明黃連與肉桂混合後長時間共同煎煮的必要性；又如麻黃湯中的苦杏仁苷水解產生苯甲醛和桂皮中的桂皮醛在提取過程中能與麻黃鹼中游離氨基縮合生成相應的西佛鹼，西佛鹼具有明顯的解熱作用，而麻黃湯中的四味藥單提後，再進行合併則沒有西佛鹼產生，而且療效也不好；再例如在對12味藥複方天麻鉤藤湯的研究中，比較各單位藥和複方中的化學成分，發現複方水煎劑中牛膝的皂甙與桑寄生中的酚性物質發生反應生成一種新的產物，該產物既不具有皂武的溶血作用，同時也改變了鞣質及酚性物質遇三氯化鐵變色的性質。文獻對川芎的化學成分研究比較多，結合川尊主要成分藥理學研究結果，認為川芎中總藁苯內酯類化合物具有平滑肌解痙和抑制腸肌、子宮收縮等作用，因此總藁苯內酯類化合物的含量也是評价川芎揮髮油的指標之一。香附的揮發性成分具有明顯的鎮痛作用，為其主要活性成分，而a-香附酮為較強的前列腺素生物合成抑制劑，故也是鎮痛作用的有效成分之一。川芎中含有黑麥鹼、川芎哚、腺嘌呤、鹽酸膽鹼等成分，隨著藁苯內酯類成分一同被提出，該成分具有皮膚過敏、休克、支氣管哮喘、血管神經性水腫等不良反應。鑑亍此，提供一種副作用低，劑量小，服用方便、臨床安全性高的治療痛經的中藥組合物非常有必要。
發明內容本發明為了解決
背景技術：
中存在的上述技術問題，而提供了一種藥材簡單，臨床療效好、活性成分明確、質量穩定、工藝簡單、省工省時、提取率高的用於治療痛經的中藥組合物及其製備方法。本發明的技術解決方案是本發明提供了一種用於治療痛經的中藥組合物，其特殊之處在於所述中藥組合物是由原料藥香附與川芎製備而成。上述香附與川芎的重量比是l:15:1;優選重量比是3:1。一種用於治療痛經的中藥組合物的中藥組合物製備方法，其特殊之處在於:該方法包括以下步驟1)將香附、川^，分別粉碎成10目篩，備用；2)將粉碎好的香附、川芎進行混合，採用超臨界C02萃取法萃取得到揮髮油；3)將該揮髮油溶於乙酸乙酯中，用硫酸溶液進行萃取，分離乙酸乙酯層，無水硫酸鈉乾燥，濾除乾燥劑，低溫減壓回收乙酸乙酯，得到藁苯內酯類和香附酮類化合物的活性成分。上述歩驟2)中超臨界C02萃取法的萃取條件是萃取壓力為2530Mpa;萃取溫度為4555。C;解析壓力為10Mpa;解析溫度為5055。C;C02流量為2530kg/h;萃取時間為23h。上述步驟3)中乙酸乙酯和提取的揮髮油的體積比為6:1。上述步驟3)中硫酸溶液的濃度是2mol/L;萃取進行2次。一種用於治療痛經的中藥組合物的藥物製劑，其特殊之處在於所述中藥組合物的藥物製劑包括由原料藥香附與川芎製備而成的中藥組合物以及藥學上可接受的輔劑。上述藥學上可接受的輔劑可以是藥學上可以接受的載體、賦形劑、稀釋劑、潤滑劑、黏合劑的一種或者幾種的組合。上述賦形劑是大豆油、去氫大豆油、玉米油、芳香油、甘油、動物油、乙醇或其類似物的組合。本發明的優點是1、藥材簡單、臨床療效好、活性成分明確、質量穩定。本發明採用香附與川芎配伍，香附為方中君藥，川芎為方中臣藥，所需藥材簡單，按照一定比例進行配置，然後混合提取，其組合物對治療痛經有很好的臨床療效。具有行氣、活血、溫經止痛，主治痛經，尤其對原發性痛經具有明顯的作用。2、工藝簡單，省工省時，提取率高，療效好。本發明所採用的製備方法與傳統工藝相比，採用超臨界C02方法將香附與川芎粉碎混合後進行萃取揮髮油，條件溫和，進一步純化，生產工藝簡單，省工省時，同時在提取過程中可除去不必要的生物鹼，提取效率高，進一步的增強了臨床安全性。3、產品質量穩定，可控制。本發明採用UV方法及HPLC方法以總藁苯內酯類化合物與a-香附酮的含量來控制產品的質量，產品質量穩定，可控制。圖1為本發明所提取的揮髮油A的總離子流色譜圖；圖2為本發明所提取的揮髮油A部分放大離子流色譜圖3為按照CN1352980A專利方法所提取的揮髮油B的總離子流色譜圖；圖4為按照CN1352980A專利方法所提取的揮髮油B部分放大離子流色譜圖；圖5—圖18為本發明所提取的揮髮油A保留時間分別為10.800、11.367、11.667、11.650、12.392、13.533、13.775、14.142、14.558、14.775、15.633、15駕、16.242以及17.183時其相對應組分的質譜圖及相對應化合物的標準質譜圖19一圖31為按照CN1352980A專利方法所提取的揮髮油B保留時間分別為11.350、11.658、11.783、12.417、13,500、13.775、14,117、14.533、14.792、15.267、15.442、16.092以及17.083時其相對應組分的質譜圖及相對應化合物的標準質譜圖。具體實施例方式本發明提供了一種用於治療痛經的中藥組合物，該中藥組合物是香附與川芎混合後經提取純化得到的藁苯內酯類和香附酮類化合物的組合。香附與川芎混合時的重量比是l:15:1，優選重量比是3:1。一種用於治療痛經的中藥組合物的製備方法，該方法包括以下步驟1)將香附、川芎，分別粉碎成10目篩，備用；2)將粉碎好的香附、川芎進行混合，採用超臨界C02萃取法萃取得到揮髮油-，超臨界C02萃取法的萃取條件是萃取壓力為2530Mpa;萃取溫度為4555°C;解析壓力為10Mpa;解析溫度為5055°C;C02流量為2530kg/h;萃取時間為23h。3)將該揮髮油溶於乙酸乙酯中，用硫酸溶液進行萃取，分離乙酸乙酯層，無水硫酸鈉乾燥，濾除乾燥劑，低溫減壓回收乙酸乙酯，得到藁苯內酯類和香附酮類化合物的活性成分。乙酸乙酯和提取的揮髮油的重量比為6:1。硫酸溶液的濃度是2mol/L;萃取進行2次。一種用於治療痛經的中藥組合物的藥物製劑，該中藥組合物的藥物製劑包括有藁苯內酯類和香附酮類化合物的藥組合物以及藥學上可接受的輔劑。該輔劑可以是藥學上可以接受的載體、賦形劑、稀釋劑、潤滑劑、黏合劑的一種或者幾種的組合。賦形劑可以是大豆油、去氫大豆油、玉米油、芳香油、甘油、動物油、乙醇或其類似物的組合。藥學上可接受的輔料包括賦形劑、稀釋劑等，它們與活性成分相容。本發明的藥物組合物包含香附、川芎揮髮油作為活性成分，將該揮髮油和藥學上可接受的輔料(如本領域普通技術人員所熟知的載體、賦形劑、稀釋劑等)組合在一起，製成合適製劑。由於揮髮油為低極性成分，因此可以用油作為溶劑，製成油溶性液體；也可以採用油作為分散介質，製成軟膠囊；還可以採用環糊精進行包合揮髮油，製成片劑、顆粒劑、硬膠囊。本發明的製劑可以為單位劑量形式，如片劑、丸劑、膠囊、混懸劑、顆粒劑、酊劑、乳液劑、懸浮液、針劑等劑型，從而適合各種給藥方式，例如口服、非腸道注射、肌肉、靜脈內、皮下、皮內或經過皮膚等的給藥形式。本發明的藥物製劑為注射液或軟膠囊。當本發明的藥物製劑為注射液，可以選用的合適的賦形劑優選但不僅大豆油、甘油、乙醇或其類似物及其組合，當本發明的藥物製劑為軟膠囊時，優選其藥學上可接受的分散介質選自去氫大豆油、玉米油、芳香油、動物油等的一種或幾種。本發明的藥物組合物中活性成分的含量可以根據具體劑型、給藥方式以及給藥對象的情況而定，如，一般而言，以香附、川考計，給藥的劑量為香附0.75g/kg，川芎0.25g/kg，(相當於原生藥)。按照本發明所提供的工藝提取得到的揮髮油與按照公開號為CN1352980A的所述方法得到揮髮油進行了比較，並對揮髮油進行了GC-MS分析，實驗結果前者揮髮油中的總藁苯內酯類化合物含量與a-香附酮含量顯著高於後者，這說明香附、川芎混合提取時產生共溶作用，有助於有效成分的提出。而且本工藝的萃取率比CN1352980A方法萃取率高29。/。，結果見表1。表1本工藝提取的揮髮油與參照CN1352980A方法得到的揮髮油比較tableseeoriginaldocumentpage8本發明通過數次的工藝試驗研究，通過GC-MS進行分析，發現本工藝的提取方法得到的揮髮油，其有效成分總藁本內酯類化合物和a-香附酮均高於同一批次的香附、川芎按照CN1352980A方法提取的揮髮油。這說明混合提取時香附和川芎能起到增溶的作用，這可能與川芎中含有的內酯化合物與香附中含有的酮類化合物具有協同作用，二者混合提取，總藁苯內酯類化合物與a-香附酮顯著增高。在本發明的實施例二中，本發明人採用GC-MS進行定量分析，發現兩種方法提取其成分大約有40%的不同，具體的結果詳見表2。本發明還通過對本工藝得到的揮髮油與按照CN1352980A方法得到的揮髮油進行了藥效學比較。在本發明的實施例三中，通過一系列藥效學試驗如對催產素所致小鼠痛經模型的影響、對PGEh所致大鼠痛經模型的影響、對正常家兔子宮收縮性的影響等，發現將香附、川芎按照3:l比例進行混合提取得到的揮髮油對痛經的療效明顯高於按照CN1352980A方法得到的揮髮油。為了便於理解，以下將通過具體實施例對本發明進行描述。實施例一含有香附、川芎軟膠囊的製備1、處方香附7500g川芎2500g_大豆油170g_共製成軟膠囊1000粒2、香附、川芎揮髮油的提取(1)、將香附、川芎分別粉碎成10目篩，備用。(2)、將粉碎好的香附、川芎按照處方比例進行混合均勻，採用超臨界萃取法，置適宜的超臨界C02萃取器中進行萃取，萃取壓力為25Mpa，萃取溫度為45°C，解析壓力為10Mpa，解析溫度為55t:，(302流量為25kg/h，萃取時間為2h，室溫收集萃取物，得到揮髮油。(3)將該揮髮油溶於2000ml的乙酸乙酯中，用400ml的2mol/L硫酸溶液萃取兩次，分離乙酸乙酯層，無水硫酸鈉乾燥，濾除乾燥劑，低溫減壓回收乙酸乙酯，得到藁苯內酯類和香附酮類化合物的活性成分，檢測合格後，備用。3、香附、川芎軟膠囊的製備(1)取明膠、甘油、水適量，煮膠，減壓除去氣泡，備用；(2)將香附、川芎的萃取物，加入適量大豆油，攪拌均勻，將已經制好的明膠甘油、萃取物大豆油裝入自動旋轉膠囊機中，採用旋轉模壓法製備軟膠囊，乾燥，挑選，檢驗，包裝，即得。4、a-香附酮含量的測定色譜條件與系統適用性試驗用十八垸基鍵合相矽膠為填充劑，以甲醇-1%冰醋酸(70:30)為流動相；檢測波長254nm，理論塔板數以a-香附酮計算應不低於3000;a-香附酮的峰與相鄰雜質峰的分離度大於1.5。對照品溶液的製備精密稱取u-香附酮對照品25mg，置50ml量瓶中，加入醋酸乙酯2ml溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取2ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得，作為對照品溶液。供試品溶液的製備取裝量差異下的內容物，取125mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加入醋酸乙酯2ml溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。作為供試品溶液。測定方法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，外標法，計算，即得。總藁苯內酯類化合物含量的測定對照品溶液的製備精密稱取藁苯內酯對照品50mg置於10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。標準曲線的製備精密量取對照品溶液200lU、300ul、400ul、500ul、600"1、700"1、800ul分別置於10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。再分別精密量取對照品溶液lml置於10ml量瓶中，加入2mlO.lmol/LNaOH溶液於10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，作為對照品線性溶液。將該對照品線性溶液置於30。C水浴中保溫30min，以無水乙醇與O.lmol/LNaOH溶液(4:1)作為空白試劑，照紫外分光光度法(中國藥典2005版附錄VA)，在326nm處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪製標準曲線。測定法精密稱取裝量差異下的內容物，取100mg置於250ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取lml，置10ml置10ml量瓶中，照標準曲線製備項下的方法，自加"加入2ml0.1mol/LNaOH溶液於10ml量瓶中"起，依法測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中含藁苯內酯的重量，計算，即得。實施例二按照本工藝提取的揮髮油與按照CN1352980A化學成分分析1)藥材香附、川芎均購於西安市萬壽路中藥材批發市場。2)儀器超臨界C02萃取裝置(1L),西北大學化工原理實驗室自製。GC-MS氣質聯用儀HP5973，色譜柱為DB-1，30mX0.32mmX0.25um.柱溫程序升溫，8(TC保持5min,以10。C/min升溫至150。C，保持2min，再以2。C/min升至240。C保持15min。進樣口溫度25(TC。質譜條件EI離子源，離子源溫度240'C，電子能量100ev。3)試驗方法A、按照本工藝提取揮髮油的製備將香附、川萼分別粉碎成10目篩，備用。將粉碎好的香附300g、川芎100g按照3:l比例進行混合均勻，採用超臨界萃取法，置1L的超臨界C02萃取器中進行萃取，萃取壓力為30Mpa，萃取溫度為45°C，解析壓力為10Mpa，解析溫度為50。C，C02流量為25kg/h，萃取時間為2h，室溫收集萃取物，無水硫酸鈉進行脫水處理，得到香附、川芎混合提取揮髮油13.3g，萃取率為3.33%。，將該揮髮油溶於80ml的乙酸乙酯中，用20ml2mol/L硫酸溶液進行萃取兩次，分離乙酸乙酯層，無水硫酸鈉乾燥，濾除乾燥劑，低溫減壓回收乙酸乙酯層，得到香附、川芎提取物的活性成分。記為揮髮油A。B、參照CN1352980A專利提取揮髮油的製備將香附、川彎分別清洗乾淨，低溫烘乾，分別粉碎成20目篩，備用。將粉碎後的600g香附、200g川尊分別置f1L的超臨界C02萃取器中進行萃取,香附的萃取溫度為45X:，萃取壓力28Mpa，萃取時間為2h，收集萃取物7.2g，萃取率1.2%;川芎的萃取溫度為55"C，萃取壓力28Mpa，萃取時間為2h，收集萃取物2.3g，萃取率1.15%。取香附6g、川芎2g混合均勻，得到揮髮油，記為揮髮油B。4)測定方法分別精密稱取揮髮油A與揮髮油B各500mg，置10ml量瓶中，加乙醚稀釋至刻度，搖勻，備用。精密吸取liU，注入氣質聯用儀，對樣品的質量進行掃描。(5)結果參見圖l、2、3和4，將兩種不同提取方法提取出的揮髮油A和B進行分析比較，結果見表2。參見圖5—圖31，兩種不同提取方法在不同時間段提出的揮髮油A和B的具體成分的化學結構見表2，確定它們的化學結構，發現這兩者揮髮油A和B有近40n/。的成分不相同。表2揮髮油A與揮髮油B的GC-MS結果比較tableseeoriginaldocumentpage11tableseeoriginaldocumentpage12實施例三含有香附、川芎中藥組合物的藥效學實驗1)實驗材料1.1)實驗動物Wister大鼠，雌性，體重160士10g，由西安交通大學醫學院藥理實驗室提供，合格證號陝醫動字07-005;昆明種小鼠，雌性，體重21士lg，由西安交通大學醫學院藥理實驗室提供。合格證陝醫動字07-009;紐西蘭大白兔，雌性，體重2.2土2kg，由西安交通大學醫學院藥理實驗室提供。合格證陝醫動字07-025。1.2)受試藥物按照香附與川芎的比例為l:1、3:1、5:1(重量比)進行混混合提取取得到的揮髮油，作為香附、川芎l:l組；香附、川芎3:l組;香附、川芎5:l組。實施例一中香附、川芎提取物，由西安新通藥物研究有限公司提供，規格40g生藥/ml，試驗時配製成所需濃度。按照CN1352980A方法提取的揮髮油(即香附、川芎分別提取的揮髮油，按照3:l的重量比進行混合)作為比較組。1.3)劑量設計60kg人一日服用量為60g生藥，貝Ul.Og/kg/d，實驗時按人與動物等效劑量灌胃給藥，將其定為中劑量，大劑量為其2倍，小劑量為其l/2倍。各劑量組按等容不等濃灌胃給藥。比較組給藥量與香附、川芎提取物中劑量組相當。1.4)陽性對照藥正天丸，由三九醫藥股份有限公司出品。批號200609艾附暖宮丸，北京同仁堂製藥廠產品，批號2060074。實驗時按人與動物等效劑量灌胃給藥。1.5)試驗方法和結果一、香附、川芎不同比例混混合提取後對小鼠鎮痛作用的影響(扭體法)取ICR品系小白鼠50隻，$3各半，體重18-22g，適應實驗室環境3天後開始稱重編號，隨機均衡分為5組，每組10隻①模型組(植物油)10ml/kg;②正天丸組3g/kg;③香附、川芎l:l組1.0g/kg;④香附、川芎3:l組1.0g/kg;⑤香附、川芎5:l組1.0g/kg，以上動物灌胃給藥容量10ml/kg，每天一次，連續一周，末次給藥lh後，小鼠腹腔注射0.5。/。冰醋酸0.1ml/只，注射後立即觀察10分鐘內小鼠的扭體次數。各給藥組與模型組比較，組間T檢驗處理結果見表3。一工八古，、模型組扭體反應次數-給藥組扭體反應次數鎮痛百分率(％)=-一—"-xioo%模型組扭體反應次數表3香附、川芎不同比例對小鼠醋酸致痛扭體的作用(7士s)組別劑』ft(g/kg)動物數(只)扭體次數鎮痛百分率(％)模型對照組105.7±1.5正天丸組103.0±1.347香附、川芎l:l組1.0104.4±1.523香附、川芎3:1組1.0102.6±1.2**54香附、川芎5:l組1.010承承3,7±1.335各給藥組與模型組比較滻P0.05**P<0.01表3中結果顯示，小鼠腹腔注射0.5。/。的醋酸0.1ml/只，可引起小鼠腹腔疼痛，出現扭體反應。給藥後，香附、川芎不同比例均可明顯抑制小鼠出現的疼痛反應，其給藥組香附、川芎3:l與香附、川芎5:l劑量組與正天丸組作用相似有顯著的鎮痛作用(**P<0.01)，但是香附、川芎3:l鎮痛作用更為明顯(鎮痛百分率為54%)。二、對原發性痛經模型的影響1.對催產素所致小鼠痛經模型的影響取昆明種小鼠70隻，其中雄性IO只作為陰性對照組，雌性60隻分為6組，包括①模型組(植物油)10ml/kg;②陽性藥對照組3g/kg;③香附、川芎大劑量組2.0g/kg;香附、川芎中劑量組1.0g/kg;⑤香附、川芎小劑量組組0.5g/kg⑥比較組1.0g/kg。除雄性對照組外，各鼠皮下注射乙烯雌酚0.2mg/只，連續3天。同時各給藥組灌胃給藥，每日一次，第4天灌胃給藥l小時後各鼠腹腔注射催產素0.2u/只，觀察注射催產素後30分鐘內發生典型扭體的鼠數和扭體數。結果採用組間比較T檢驗進行統計學處理。表4香附、川芎藥物組合物對催產素所致小鼠痛經模型的影響劑量組別動物數扭體數(次)抑制率％g/kg/d陰性對照組10——模型對照組…107.0±3.5艾附暖宮丸2.75103.3±1.8*48.43香附、川芎大劑jt組2.0102.9±1.7*50.00香附、川芎中劑it組1.0103.1±2.1*46.87香附、川芎小劑it組0.5104.6±3.028.12比較組1.0104.0±2.0*39.59與模型對照組比較*P<0.05表4結果顯示給藥組2.0g/kg/d、1.0g/kg/d劑量組動物注射催產素後扭體數明顯少於模型對照組，與模型對照組比較有顯著性差別(P<0.05)，說明香附、川芎組合物對催產素所致小鼠痛經有明顯的抑制作用。比較組與模型對照組比較有顯著性差別(P<0.05)，但抑制作用沒有給藥組(1.0g/kg/d)劑量組的強。2.對PGEh所致大鼠痛經模型的影響取Wistar大鼠70隻，其中雄性IO只作為陰性對照組，雌性60隻分為6組，包括，包括①模型組(植物油)10ml/kg;②陽性藥對照組3g/kg;③香附、川彎大劑量組2g/kg;香附、川考中劑量組1.0g/kg;⑤香附、川芎小劑量組組0.5g/kg⑥比較組1.0g/kg。除雄性對照組外，各鼠皮下注射乙烯雌酚，連續4天，劑量分別為0.8、0.4、0.4、0.8mg/只，同時灌胃給藥，連續5天，最後一次給藥後1小時各鼠腹腔注射PGE^mg/只'，觀察注射PGEh後30分鐘內發生典型扭體的鼠數和扭體數。l小時後腹主動脈採血測定血液流變學相關指標。結果採用組間比較T檢驗進行統計學處理。表5香附、川芎藥物組合物對PGE2a所致大鼠痛經模型的影響tableseeoriginaldocumentpage15與模型對照組比較*P<0.05**P<0.01表5結果顯示給藥組2.0g/kg/d、1.0g/kg/d、0.5g/kg/d三個劑量組動物注射PGE2a後扭體數明顯少於模型對照組，與模型對照組比較有顯著性差別(P<0.05)，說明香附、川芎藥物組合物對PGE2a所致小鼠痛經有明顯的抑制作用。比較組對PGE2a所致小鼠痛經有明顯的抑制作用與川芎香附小劑量組(0.5g/kg/d)相當。三、對正常家兔子宮收縮性的影響實驗前每隻家兔肌肉注射乙烯雌酚lmg/kg，同時給藥組灌胃給藥，連續3天。第4天實驗時動物用戊巴比妥鈉30mg/kg體重耳緣靜脈麻醉，仰位固定於手術臺，下腹部切口，暴露子宮，經子宮角切一小口，將末端帶有橡皮球囊的塑料管插入子宮內，自導管緩慢注入生理鹽水，使球囊充滿液體並排盡其中氣體，使球囊壁緊貼子宮壁。導管的另一端通過壓力換能器與TSD140放大器連接，用於記錄子宮內壓的變化。動物穩定後記錄給藥前數值，然後十二指腸給藥一次，分別記錄給藥後20、40、60分鐘子宮收縮(子宮內壓)的改變。表6香附、川芎藥物組合物對正常家兔在體子宮平滑肌收縮性的影響tableseeoriginaldocumentpage16表6結果顯示香附、川芎給藥組2.0g/kg/d、1.0g/kg/d二個劑量組可明顯降低正常家兔子宮的收縮幅度，與對照組比較有顯著性差異(PO.Ol)，比較組對降低正常家兔的收縮程度介於給藥組的中小劑量之間。香附、川考藥物組合物在給藥後20分鐘顯效，可持續至給藥後60分鐘，且有較好的量效相關性和時效相關性。權利要求1、一種用於治療痛經的中藥組合物，其特徵在於所述中藥組合物是由原料藥香附與川芎製備而成。2、根據權利要求l所述的用於治療痛經的中藥組合物，其特徵在於所述香附與川芎的重量比是l:15:1;優選重量比是3:1。3、一種實現權利要求l所述的用於治療痛經的中藥組合物的中藥組合物製備方法，其特徵在於該方法包括以下步驟1)將香附、川芎，分別粉碎成10目篩，備用；2)將粉碎好的香附、川芎進行混合，採用超臨界C02萃取法萃取得到揮髮油；3)將該揮髮油溶於乙酸乙酯中，用硫酸溶液進行萃取，分離乙酸乙酯層，無水硫酸鈉乾燥，濾除乾燥劑，低溫減壓回收乙酸乙酯，得到藁苯內酯類和香附酮類化合物的活性成分。4、根據權利要求3所述的用於治療痛經的中藥組合物製備方法，其特徵在於所述步驟2)中超臨界C02萃取法的萃取條件是萃取壓力為2530Mpa;萃取溫度為4555'C;解析壓力為10Mpa;解析溫度為5055°C;(302流量為2530kg/h;萃取時間為23h。5、根據權利要求3所述的用於治療痛經的中藥組合物製備方法，其特徵在於所述步驟3)中乙酸乙酯和提取的揮髮油的體積比為6:1。6、根據權利要求3或5所述的用於治療痛經的中藥組合物製備方法，其特徵在於所述歩驟3)中硫酸溶液的濃度是2mol/L;萃取進行2次。7、一種用於治療痛經的中藥組合物的藥物製劑，其特徵在於所述中藥組合物的藥物製劑包括由原料藥香附與川芎製備而成的中藥組合物以及藥學上可接受的輔劑。8、根據權利要求7所述的用於治療痛經的中藥組合物的藥物製劑，其特徵在於所述藥學上可接受的輔劑可以是藥學上可以接受的載體、賦形劑、稀釋劑、潤滑劑、黏合劑的一種或者幾種的組合。9、根據權利要求8所述的用於治療痛經的中藥組合物的藥物製劑，其特徵在於所述賦形劑是大豆油、去氫大豆油、玉米油、芳香油、甘油、動物油、乙醇或其類似物的組合。全文摘要本發明涉及一種用於治療痛經的中藥組合物及其製備方法，該中藥組合物是由原料藥香附與川芎製備而成。本發明提供了一種藥材簡單，臨床療效好、活性成分明確、質量穩定、工藝簡單、省工省時、提取率高的用於治療痛經的中藥組合物及其製備方法。文檔編號A61P15/00GK101375983SQ20081015119公開日2009年3月4日申請日期2008年9月28日優先權日2008年9月28日發明者張登科申請人:張登科