預測巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率的模型及方法
2023-09-10 07:47:55 3
預測巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率的模型及方法
【專利摘要】本發明涉及一種預測巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率的數學模型及方法。所述數學模型為：P＝1/(1+Y)，P為巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率，且P為6個月內的復發轉移概率時：Y＝exp(4.092+2.073*X12-2.719*X14-2.58*X17+3.039*X19)；P為6～12個月的復發轉移概率時，Y＝e?xp(2.528+1.633*X8+0.971*X12-1.517*X17)。本發明的有益效果主要體現在：從多因素、多蛋白綜合分析巨大肝癌近期復發轉移相關的多個指標，並通過預測模型達到預測術後近期復發轉移的效果，對臨床實踐及治療方案個體化選擇具有重大意義。
【專利說明】預測巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率的模型及方法
(—)
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種用於預測巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率的數學模型及方法。
(二)
【背景技術】
[0002]肝細胞癌位居全球惡性腫瘤發病率第5位，死亡率居全球惡性腫瘤死因的第3位(Jemal A, Siegel R, Ward E, et al.Cancer statistics,2008.Cancer J Clin,2008 ；58:71-96)，我國是肝癌大國，每年大約有45萬的肝癌新發病例，並已成為癌症導致患者死亡的第2位殺手(張偉東，苗國軍；我國惡性腫瘤死亡率流行病學特徵分析；中國健康教育，2009，25:246-248)，尤其是巨大肝癌。
[0003]巨大肝癌指的是直徑大於1cm的肝癌亞型。目前手術切除治療是巨大肝癌患者的首選方案，但術後易轉移復發、預後差是巨大肝癌治療效果差且致死率高的主要原因。統計數據表明，巨大肝癌術後5年之內復發的概率達到70%。研究表明，巨大肝癌術後復發轉移最早可在術後2個月以內；術後I?2年為復發轉移的高發期。Shimul等報導56例巨大肝癌根治術後復發病人，I年內復發21例(38% )，1年後復發31例(55%);並發現復發後生存率與復發時間密切相關:術後I年內復發者3年生存率顯著低於I年後復發者(參考文獻:Shimul A Shah, Paul D Greig, Steven Gallinger, et al.Factors associatedwith early recurrence after resect1n for hepatocellular carcinoa and outcomes.J Am Coll Surg, 2005，10(5):275-283.)。Hayashi等觀察了肝癌術後復發時間與預後間的關係，I年內復發患者1、3、5年生存率分別為75.7%、36.6%和28.3%，遠低於2年後復發的生存率(1、3、5年生存率分別為100%、92.2%和68.6% )(參考文獻=Hayashi M，Shimizu T,Hirokawa F,et al.Clinicopathological risk factors for recurrence withone year after initial hepatectomy for hepatocellular carcinoma.J Am Surg,2011,77(5):572-578.)。可見肝癌術後I年內復發的比例較高，且對生存率有明顯影響。但復發轉移的機制還沒有被明確闡明使臨床缺少巨大肝癌預後判斷指標和相應的治療手段。
[0004]目前，有關巨大肝癌術後復發轉移的相關因素分析比較多，但多數以單因素進行，這雖然在一定程度上給出了相對準確的判定，但仍屬局限、片面；而肝癌術後復發是一個多因素的複雜的病理過程，在此過程中，蛋白分子特徵決定了肝癌的生物學行為，迄今為止，尚未有相關文獻報導巨塊型肝癌術後近期復發轉移的多因素、多蛋白的數學預測模型，若能從多因素、多蛋白綜合分析肝癌復發轉移相關的多個指標，建立巨大肝癌復發轉移的數學預測模型，為臨床個體化治療、預測術後療效提供理論和實驗依據。
(三)
【發明內容】
[0005]本發明目的是提供一種預測巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率的數學模型及方法。
[0006]本發明採用的技術方案是:
[0007]—種用於預測巨大肝癌患者術後復發轉移概率的數學模型P = 1/(1+Y)，P為巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率，且P為6個月內的復發轉移概率時:Y = exp (4.092+2.073*Χ12-2.719*Χ14-2.58*Χ17+3.039*Χ19) ;Ρ 為 6 ~12 個月的復發轉移概率時，Y = e xp (2? 528+1.633*Χ8+0.971*Χ12_1.517*Χ17);其中Χ8為術中癌栓，若有術中癌栓則Χ8 = 1、若無則X8 = O ；X12為腫瘤分級，腫瘤分級為I級時X12 = UI1-1II級時X12 = 2、IV級時X12=3 ；X14為IQGAP-2蛋白免疫組化表達情況，高表達時X14 = 2、低表達時X14 = I ；X17為S100A12蛋白免疫組化表達情況，高表達時X17 = 2、低表達時X17 = I ；X19為AP0A2蛋白免疫組化表達情況，高表達時X19 = 2、低表達時X19 = I。
[0008]本發明人通過收集巨塊型肝癌根治性切除術的標本，採用病例對照研究方法，所有病例手術切除前未經任何放療和化療，並通過病理證實為肝細胞肝癌。根據6個月內復發組(A組)及6~12個月復發組(B組)為實驗組，12個月內未復發組作為對照組，對其臨床病理因素進行單因素、多因素分析(各因素統計變量賦值見下表)，篩選出影響巨塊型肝癌術後近期復發轉移的獨立危險因素。結合通過蛋白組學篩選出復發轉移相關的差異蛋白，通過免疫組織化學檢測蛋白的相對表達量，通過多因素logistic回歸分析，得出一個預測巨塊型肝癌術後近期復發轉移的數學方程，通過回代性分析判斷該方程的靈敏度、準確度、特異性，判斷該方程能夠預測巨塊型肝癌術後近期復發轉移。
[0009]各因素的統計變量賦值
[0010]
【權利要求】
1.一種用於預測巨大肝癌患者術後復發轉移概率的數學模型P = ι/α+γ)，P為巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率，且P為6個月內的復發轉移概率時:Y = exp (4.092+2.073*Χ12-2.719*Χ14-2.58*Χ17+3.039*Χ19) ；Ρ 為 6-12 個月的復發轉移概率時，Y = e xp (2.528+1.633*Χ8+0.971*Χ12_1.517*Χ17);其中 Χ8 為術中癌栓，若有則 Χ8 = 1、若無則 X8 = O ；X12 為腫瘤分級，I 級時 X12 = 1、I1-1II 級時 X12 = 2、IV 級時 X12 = 3 ；X14 為 IQGAP-2蛋白免疫組化表達情況，高表達時X14 = 2、低表達時X14 = I ；X17為S100A12蛋白免疫組化表達情況，高表達時X17 = 2、低表達時X17 = I ；X19為APOA2蛋白免疫組化表達情況，高表達時X19 = 2、低表達時X19 = I。
2.一種預測巨大肝癌患者術後近期復發轉移概率的方法，所述方法包括: (1)取巨大肝癌患者活檢組織或術中、術後的病理取材作為病理標本，並對病理標本的術中癌栓、腫瘤分級情況進行記錄分析； (2)採用免疫組化SP染色法，分別獲得病理標本IQGAP-2蛋白的免疫組化評分、S100A12蛋白的免疫組化評分和APOA12蛋白的免疫組化評分； (3)將上述取值分別代入6個月內的復發轉移概率數學模型P= I/ (1+Y), Y = exp (4.092+2.073*X12-2.719*X14_2.58*X17+3.039*X19);和 6 ?12 個月的復發轉移概率數學模型 P = 1/(1+Y)，Y = e xp (2.528+1.633*Χ8+0.971*Χ12_1.517*Χ17)，分別進行計算獲得 6個月內和6?12個月的復發轉移概率；其中Χ8為術中癌栓，若有則Χ8 = 1、若無則Χ8 =O ；Χ12 為腫瘤分級，I 級時 Χ12 = UI1-1II 級時 Χ12 = 2、IV 級時 Χ12 = 3 ；X14 為 IQGAP-2蛋白免疫組化表達情況，高表達時X14 = 2、低表達時X14 = I ；X17為S100A12蛋白免疫組化表達情況，高表達時X17 = 2、低表達時X17 = I ；X19為APOA2蛋白免疫組化表達情況，高表達時X19 = 2、低表達時X19 = I。
3.如權利要求2所述的方法，其特徵在於所述免疫組化SP染色法方法如下: (a)取病理標本製備肝癌組織石蠟切片，60°C烤箱過夜； (b)切片脫臘；二甲苯I:10min ;二甲苯 II:10min ;二甲苯 III:10min ； (c)切片水化；依次浸泡:無水乙醇:3min;90%乙醇:3min ;80%乙醇:3min ;75%乙醇:3min ； (d)PBS清洗3次,每次5min ； (e)EDTA抗原高壓修復:切片放入0.0lM EDTA修復液浸泡，沸水浴5min，冷卻至室溫，PBS清洗3次,每次5min ； (f)加入300μ L的3%過氧化氫水溶液，370C 1min, PBS清洗3次，每次5min ； (g)加入300μ L的3% BSA封閉液，37°C Ih ；PBS清洗3次，每次5min ； (h)加入一抗，相應蛋白的一抗抗體濃度如下:IQGAP-2蛋白抗體濃度為1:300，S100A12蛋白的抗體濃度為1:50，APOA2蛋白抗體濃度為1:300 ;4°C冰箱放置16h後取出，室溫復溫15min，然後PBS洗4次，每次5min ； (i)滴加二抗，所述的二抗為辣根過氧化物酶標記的相應二抗，37°C45min ;PBS洗4次，每次5min ； (j)PBS洗3次，每次5min ；DAB顯色2?lOmin，鏡下觀察；雙蒸水洗止顯色，蘇木素復染10s，用自來水衝洗浸泡； (k)脫水；依次浸泡:75%乙醇:2min ;80%乙醇:2min ;90%乙醇:2min ;無水乙醇:2min ； (I)用電吹風吹乾，加入中性樹膠，蓋玻片覆蓋； (m)以染色強度和陽性細胞率的得分之和作為判斷標準:根據染色強度分為四級，細胞無染色記O分，弱染色記I分，中等染色記2分，強染色記3分；根據陽性細胞率也分為四級，O彡陽性細胞率彡5%記為O分，5% <陽性細胞率彡25%記為I分，25% 50%記為3分；上述兩項積分相加，O分為陰性，I?2分為弱陽性，3?4分為中等陽性，5?6分為強陽性，將陰性和弱陽性定義為低表達，中等陽性和強陽性則為高表達。
【文檔編號】G01N33/574GK104200060SQ201410368338
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年7月30日 優先權日:2014年7月30日
【發明者】劉景豐, 黃愛民, 劉小龍, 林承傑 申請人:福建醫科大學附屬第一醫院, 福州市傳染病醫院