胸腺素α1與拉米夫定組合或者與拉米夫定及泛昔洛韋組合治療B型肝炎感染的製作方法

2023-09-19 21:18:20

專利名稱：胸腺素α1與拉米夫定組合或者與拉米夫定及泛昔洛韋組合治療B型肝炎感染的製作方法
技術領域：
本發明涉及B型肝炎治療領域。
與白種人的疾病過程相反，亞洲人的慢性HBV感染的自然史具有以下特徵初始活性病毒複製狀態具有最小的肝損傷(免疫耐受期)，然後是慢性活性肝炎的活性免疫清除期，最後是失活的HBV非複製期，發展成肝硬變，而且有可能由於肝細胞癌(HCC)而變得複雜。另外，隨後是第四期，其特徵是沒有HBE抗原血症的病毒血症和慢性活性肝炎。因為大多數的肝損傷發生在免疫清除期(當HBV複製被自發抑制時)，理想的是在更早期(免疫耐受期)抑制HBV複製。
目前，治療試驗主要是涉及抗病毒劑、免疫調節劑、免疫抑制劑或者這些藥物的某些特定組合的使用。現在幹擾素α在許多國家是唯一被批准的治療藥物。但是，已有報導稱，幹擾素治療在30-40％的北美和歐洲患者中產生B型肝炎e抗原(HBeAg)的持續清除，但這些患者中僅有25-65％最終清除B型肝炎表面抗原(HBsAg)。亞洲患者中的應答率更低約15-20％將清除HBeAg，而他們中僅約10％將清除HBsAg。影響這些免疫調節劑的抗病毒作用的因素之一是高的預處理HBV DNA水平。近來，已發現第二代核苷類似物如拉米夫定和泛昔洛韋可有效地抑制HBV複製，而且具有良好的安全性。但是一旦取消治療，核苷類似物不能表明仍能維持持續的HBV DNA抑制作用。因此，組合治療的目的是抑制和清除。
本領域仍急需對抗慢性HBV感染有效的抗病毒治療劑。
胸腺素α1(Tα1)最開始是從胸腺部分5(TF5)中分離出來的，現已被測序並化學合成。Tα1是一個28胺基酸肽，分子量為3108，在調節T細胞成熟方面的活性與TF5類似。Tα1可影響免疫調節T細胞的功能，促進由正常人淋巴細胞產生幹擾素α、幹擾素γ、以及IL2和IL3，並增加淋巴細胞IL2受體表達。
有證據表明Tα1可影響前-NK細胞的補充，其在接觸幹擾素後變為細胞毒性的。Tα1也可直接影響成熟NK細胞的溶解活性。最近的研究表明，Tα1可通過活化T4(輔助細胞/誘導細胞)細胞來增強同種和自體人混合淋巴細胞反應。這為Ｔ４細胞是Tα1生理作用的主要目標細胞提供了額外證據。
Tα1作為治療HBV感染的主要或輔助治療手段的臨床試驗表明，其增強免疫應答性，並將特異性淋巴細胞參數增加至顯著更高的水平。
已有報導稱，通過使用從帶有CHB的患者得到的周邊血單核細胞(PBM),TF5可減少自發性的、細胞介導的肝細胞溶解作用。在用TF5治療的對照PBM中，沒有發現對細胞毒性的影響。其他的研究表明，在從帶有CHB的患者中得到的PBM中，TF5增加了Con A誘導的抑制劑作用。已表明在預先非反應性的血液透析患者中接種Heptavax-B後，Tα1可增強抗HBs的體內產生。
對照研究如下進行每周兩次向6隻攜帶土撥鼠B型肝炎病毒(WHV)的土撥鼠注射Tα1(10μg/kg)，共進行28周。在治療結束時，WHV DNA水平在4隻經治療的動物中已檢測不到，而在剩餘的2隻動物中被抑制100倍。在治療結束時得到的肝活組織檢查樣本表明，在血清WHV DNA檢測不到的4隻動物中，WHV DNA複製中間體水平降低50-300倍，而在另外兩隻動物中與預處理水平細胞僅有小的變化。在6隻未經處理的對照動物中，治療前和治療後相比，在血清WHV DNA水平或者組織WHV DNA複製中間體方面都沒有發生變化。
在胸腺素部分5(TF5)和胸腺素α1(Tα1)治療CHB的美國Ⅱ期試驗中，12位患者接受TF5或者Tα1，而8位患者接受安慰劑，都是每周兩次，共進行6個月。在研究結束時(1年)，在胸腺素α1治療的患者中，血清轉氨酶水平顯著增加，但在安慰劑組中卻沒有。胸腺素α治療患者中有9位(75％)，而給藥安慰劑的患者中有2位(25％)，清除血清HBV DNA(p＜0.004,Fisher精確試驗)。對胸腺素α1治療的反應與周邊血淋巴細胞、CD3和CD4數量、以及幹擾素γ的體外產生顯著增加超過初始值有關。在給藥Tα1的患者中沒有觀察到副作用，在給藥TF5的幾位患者中在注射部位產生硬結和紅腫。約78％的反應者在正常ALT水平以及陰性血清HBV DNA(使用PCR)和HBeAg方面都有持續恢復。
隨後，在99位血清HBV DNA及HBeAg為陽性的患者中進行美國Ⅲ期CHB多中心、安慰劑對照的雙盲研究。所有患者已有至少6個月為HBsAg(+)，其中ALT持續升高。在3個月的篩選期後，使50位患者隨機接受Tα1(1.6mg,S.C.2×/周)，而49位患者接受安慰劑(甘露醇，NaPO4,S.C.2×/周)，共進行6周，然後中斷1個月後再進行6個月。38位Tα1治療患者以及32位給藥安慰劑的患者分別在1年的研究後再繼續進行23±7(SD)月。2位患者在隨機分組之後但在治療之前離開。結果是Tα1組中有49位患者，在安慰劑組中有48位患者。在結束時，兩個組之間在ALT值、HBV DNA水平和組織學發現方面沒有統計學上的顯著差異。對治療的完全應答(CR)定義為在1年的研究期間持續的血清HBV DNA(-)狀態(至少3個月中有2個陰性結果)，其中在12個月中HBV DNA和HBeAg都是陰性的。延遲應答(DR)定義為在12個月後實現持續的HBV DNA(-)狀態，其中在最後評估時HBV DNA和HBeAg是陰性的。不完全應答(IR)的特徵是，在研究以及後研究期間持續的HBV DNA(-)狀態，其中持續出現HBeAg。對治療的應答如下
總共有12(25％)位用Tα1治療的患者以及6位(13％)給藥安慰劑的患者(p＜0.11)表現出持續的HBV DNA損失，其中在1年研究或研究後隨訪期間為陰性HBeAg。
拉米夫定是逆轉錄酶抑制劑。因為逆轉錄酶的活性對於在HBV-DNA中轉錄HBV-RNA前基因組是必須的，所以存在選擇性抑制病毒複製的目標。2＇3＇-二脫氧-3＇-硫胞苷(拉米夫定)的陰性對映體的選擇增強了抗病毒活性，但限制了毒性，有可能是因為陰性對映體難以跨越線粒體的雙膜。拉米夫定的抗病毒活性已在HBV轉染的細胞系、鴨模型以及慢性感染的黑猩猩中被證實。該藥物在HIV感染的患者中已使用2年，沒有顯著的毒性。
泛昔洛韋是口服形式的噴昔洛韋(BRL39123)，其是一種新的核苷類似物，已證明對單純皰疹和帶狀皰疹病毒是有效的。泛昔洛韋是6-脫氧噴昔洛韋(非合成的非環狀鳥嘌呤衍生物)的二乙醯基酯，而且是噴昔洛韋(活性組分)的前藥。噴昔洛韋的轉化部分發生在腸壁中，在此除去一個酯基，而且在鳥嘌呤鹼基的6-位處發生氧化反應。
在自願者中進行的研究表明，泛昔洛韋能夠很好地被吸收，而且在血液中產生的噴昔洛韋濃度(口服500mg劑量的泛昔洛韋後，Cmax為21.73μg/ml)，優於單獨口服給藥噴昔洛韋後得到的濃度(5mg/kg劑量後，Cmax約為0.14μg/ml)。向人自願者給藥單個且重複劑量的泛昔洛韋，日劑量最高至1000mg，每日三次，共6天。沒有證據表明對臨床實驗室值、血壓、心律或心電圖(ECG)測量產生藥物相關的副作用。
完整的安全性評估涉及11個完全、隨機的雙盲臨床試驗以及2個開放試驗(測試超過3000位患者)，該評估表明副作用以及實驗室異常(血液學、臨床化學和尿分析參數)的頻率在泛昔洛韋和安慰劑接受者之間是類似的。最常見的副作用是頭痛、惡性和腹瀉。
已證明噴昔洛韋是人細胞(轉染有HBV基因組的2.2.15肝瘤細胞)中HBV的強效抑制劑。據說，在該體外體系中的活性與向慢性HBV攜帶者給藥時化合物對抗HBV的活性具有很好的相關性。1μg/ml的噴昔洛韋濃度在第6天時使HBV DNA減少50％，而且在第9天時減少90％。這些作用都是濃度依賴性的。
在北京鴨模型中，噴昔洛韋和泛昔洛韋明確地抑制鴨B型肝炎病毒複製。在開始治療的2天內，噴昔洛韋(噴昔洛韋的口服劑量為20-100mg/kg，每日二次)和泛昔洛韋(口服劑量為5-25mg/kg，每日二次)都使HBV DNA和DNA聚合酶降低至不可檢測的水平，而且在21天的治療期間維持這種抑制作用。在停止給藥後的至少2天內，仍保持對病毒複製的抑制，之後HBV DNA和DNA聚合酶水平都恢復至治療前的水平。
在完全雙盲、安慰劑對照、單中心小型研究中，患者患有慢性B型肝炎，給藥10天泛昔洛韋(250mg或500mg,tid)使11位評估患者中有6位的HBV DNA水平降低超過90％。在一個正在進行的有關慢性B型肝炎的研究中，超過250位的患者接受泛昔洛韋，其劑量最高至500mg，每日三次，共進行16周。該研究的初期數據表明用泛昔洛韋治療使HBV DNA及ALT水平都顯著降低，而且副作用與安慰劑類似。已證明泛昔洛韋對於許多在肝移植後帶有HBV的患者是有效的，
在本領域仍需要治療B型肝炎的更好方法。
發明簡述根據本發明，治療人B型肝炎病毒(HBV)感染包括向需要此等治療的患者給藥以下藥物組合，其包括抗病毒有效量的胸腺素α1(Tα1)和抗病毒有效量的拉米夫定。在優選的實施方案中，藥物組合包括胸腺素α1、拉米夫定和泛昔洛韋。
每日可向患者給藥一次或多次，例如每日2或3次，單獨劑量單元的Tα1、拉米夫定以及任選的泛昔洛韋，而且每周可給藥1或多天，例如每周給藥2、3、4、5、6或7天。
術語「胸腺素α1」和「Tα1」是指具有公開於第4,079,137號美國專利中的胺基酸序列的肽，該專利文獻的內容在此併入作為參考。
抗病毒有效量的Tα1是降低B型肝炎病毒量的胸腺素α1，其可以是包含約0.5-10mg胸腺素α1的劑量單元。優選地，劑量單元包括約1-2mg的Tα1。最優選的是，劑量單元包括1.6mg的Tα1。
根據本發明此實施方案的一個方面，按照常規基礎向患者給藥包括Tα1的劑量單元。例如，可每日一次以上、每日一次、每周一次、每月一次等給藥劑量單元。劑量單元也可在雙周基礎上進行給藥，例如每周兩次，如星期四和星期六。最優選的是，Tα1的劑量單元在每周三次的基礎上給藥，例如每周三次。
根據本發明的另一個方面，在給藥包括Tα1的劑量單元的同時，給藥拉米夫定，其時間足以降低或者消除患者中的HBV感染。
如上所述拉米夫定是2＇3＇-二脫氧-3＇-硫胞苷。根據本發明的優選實施方案，與Tα1組合給藥時，包括有效減少患者中B型肝炎病毒的量的拉米夫定的劑量單元包括約50-500mg的拉米夫定。包含拉米夫定的優選劑量單元包括約100-200mg的拉米夫定、最優選約150mg的拉米夫定。
包括拉米夫定的劑量單元可在常規基礎上給藥於患者，例如劑量單元可每日給藥一次，每日、每周、每月一次以上(例如每日2、3或更多次)。最優選的是，劑量單元每日給藥一次。
與給藥Tα1結合，可給藥拉米夫定劑量單元較長的時間，以有效地減少或者消除患者中的HBV感染。優選地，此等給藥進行至患者中的HBeAg變為陰性，例如約6-12個月。
在特別優選的實施方案中，Tα1以約1-2mg(例如約1.6mg)的藥物劑量單元通過皮下注射每周給藥三次。與該給藥結合，可每日一次向患者口服給藥約150mg的拉米夫定。
根據本發明的另一個方面，與給藥拉米夫定和泛昔洛韋同時給藥包括Tα1的劑量單元足夠長的時間，以降低或者消除患者中的HBV感染。
如上所述，泛昔洛韋是6-脫氧噴昔洛韋的二乙醯基酯。根據優選實施方案，與給藥Tα1結合，包括泛昔洛韋的劑量單元有效地減少患者中的B型肝炎病毒，其劑量範圍約為100-2000mg的泛昔洛韋。包括泛昔洛韋的優選劑量單元包含約100-1000mg的泛昔洛韋，最優選為約250mg的泛昔洛韋。
包括泛昔洛韋的劑量單元可在常規基礎上給藥於患者，例如劑量單元可每日給藥一次，每日、每周、每月一次以上(例如每日2、3或更多次)。最優選的是，劑量單元每日給藥三次。
與給藥胸腺素α1結合，可給藥泛昔洛韋劑量單元較長的時間，以有效地減少或者消除患者中的HBV感染。優選地，此等給藥進行至少6個月，而最優選為約6-12個月。
在特別優選的實施方案中，Tα1以約1-2mg(例如約1.6mg)的藥物劑量單元通過皮下注射每周給藥二次，與該給藥結合，可每日三次向患者口服給藥約150mg的拉米夫定及約250mg的泛昔洛韋。
但應理解的是，包含Tα1、拉米夫定和泛昔洛韋的藥物劑量單元可按照任何合適的方式配製，以通過任何合適的途徑給藥。
本發明適用於自然(即天生)的Tα1及具有天然Tα1之胺基酸序列、基本上與其類似的胺基酸序列或其縮短序列的合成Tα1和重組Tα1，以及生物活性基本上與Tα1類似的生理活性類似物，其具有取代、缺失、增長、置換或者經其他改性的序列。
本發明適用於拉米夫定、其類似物、同系物和衍生物，它們具有基本上類似於拉米夫定的生物活性，還包括能夠轉化為拉米夫定或其生物活性類似於拉米夫定的類似物、同系物或衍生物。
本發明適用於泛昔洛韋、其類似物、同系物和衍生物，它們具有基本上類似於泛昔洛韋的生物活性，還包括能夠轉化為泛昔洛韋或其生物活性類似於泛昔洛韋的類似物、同系物或衍生物。
本發明還適用於有效治療患者中B型肝炎病毒感染的藥物組合，其包括包含抗病毒有效量的胸腺素α1的第一劑量單元、包含抗病毒有效量的拉米夫定的第二劑量單元、以及包含抗病毒有效量的泛昔洛韋的第三劑量單元。
在與Tα1同時使用拉米夫定和泛昔洛韋的優選實施方案中，HBV病毒突變的可能性降低，由此增加了其中病毒負載量低的時間，以增強Tα1對作用的免疫應答。
抗病毒劑如核苷類似物不是殺病毒性的，即、它們不殺死病毒。它們抑制病毒的複製，使得病毒負載量降低至測量不到的水平。但是，單獨用核苷類似物有可能根本不能消除病毒。
病毒可進行複製，其非常有可能在複製周期中通過突變改變其遺傳物質(B型肝炎病毒時為DNA)。在抑制複製的藥物的壓力下，病毒有可能突變成可以耐受藥物作用的株，而且這方面的發生率很高。
如果同時使用一種以上的藥物，而且這些藥物在分子水平上具有不同的作用模式，能夠在藥物的抑制作用下存活的病毒必須在其DNA的兩個不同點處同時突變。在兩個不同點處同時突變比單點突變更加不可能。
胸腺素α1是免疫系統調節劑，其在治療慢性B型肝炎時在活化宿主免疫機理方面起著重要的作用。
以前單獨使用Tα1的研究表明，對於初始病毒負載非常高的患者僅部分是令人滿意的。單獨或者與泛昔洛韋組合使用拉米夫定可抑制病毒複製，由此降低病毒負載並增強Tα1的效果。
用以下實施例進一步說明本發明，但這些實施例不是對本發明範圍的限制。
2、男性或女性。
3、至少6個月血清中存在HBsAg的書面證據。
4、ALT在每隔4周的2個測定值中小於正常值上限的2.5倍，或者篩選期的3個ALT的平均值小於正常值上限的2.5倍。
5、ALT在篩選期小於100U/L。
6、HBV DNA在隔開4周或4周以上的2個測定值中大於4000MEq/ml。如果第二個HBV DNA測定值小於等於4000MEq/ml，則必須在第2個測量後的4周進行第3次測量。第3個測量值必須大於4000MEq/ml(用Chiron Quantiplex(bDNA)測試來確定)。
7、隔開4周或4周以上在2個測定值上為陽性HBeAg。
8、在進入研究前12個月內的肝活組織檢查與慢性肝炎一致。
9、補償性肝病，凝血酶原時間與對照相比低5秒，血清白蛋白大於等於30g/l，膽紅素小於等於68mmol/l。
10、血細胞比容大於等於30％，血小板數大於等於100×109/l,WBC大於等於3.5×109/l，而多形核白細胞數大於等於1.7×109/l。
11、足夠的腎功能經計算的肌氨酸清除率大於等於60ml/min。
12、如果是有懷孕可能的婦女，則使用避孕方法。排除標準1、同時長期使用任何已知有肝毒性的藥物。
2、同時長期使用任何免疫抑制劑。
3、通過HIV血清陽性診斷患有HIV感染，並通過Western斑點證實。
4、同時或者以前有癌症史，但不包括可治癒治療的皮膚癌或者可手術治癒的子宮頸原位癌。
5、活性感染過程，但不包括非自限性的HBV。TB和AIDS是非自限性的感染過程的例子。
6、肝硬變。
7、有肝腦病或出血性食管曲張的病史。
8、尿HCG懷孕測試證實已懷孕。
9、在前5年濫用靜脈毒品和酒精。
10、有較差的醫療或心理風險的患者，或者具有在研究人員看來使患者不可能完成本研究過程的任何非惡性全身疾病的患者。
11、同時參加其他的藥物調查研究，或者在進入本研究前30天內參加任何涉及試驗藥物的臨床試驗。
12、使患者不能遵從研究過程的條件的症狀。
13、在進入本研究前用幹擾素進行治療或者任何其他類型的免疫治療，或者在進入本研究的6個月內用類腎上腺皮質激素進行治療。
14、任何其他的肝疾病，包括C型肝炎、delta肝炎、酒精肝病、藥物誘發的肝損傷、原發性膽肝硬變、硬化膽管炎、自體免疫性肝炎、血色病、α1抗胰蛋白酶缺乏、或者Wilson病。
15、以前用Tα1治療。
16、以前用泛昔洛韋治療。
17、以前用拉米夫定治療。
18、已知對胸腺素α1高度敏感的患者。
19、已知對泛昔洛韋高度敏感的患者。
20、已知對拉米夫定高度敏感的患者。研究的進行篩選評估所有患者都要進行篩選評估，以確定進入本研究的合格性。該評估包括兩個、有時三個獨立的篩選調查。記錄篩選調查的所有數據。第一篩選調查(篩選調查1)A、合格性如果對於篩選調查1為合格的，患者必須具有慢性肝炎史，用至少6個月的陽性HBsAg病史來證明。B、篩選程序篩選調查1中的實驗室篩選測試包括HBsAg、HBeAg、C型肝炎抗體、delta肝炎抗體、HBV DNA、和ALT。
完全病史和身體檢查。
對在進入前12個月內得到的肝活組織檢查樣本進行評估。第二篩選調查A、合格性如果對於繼續進行篩選調查2為合格的，則受試者必須具有陽性的HBsAg、HBeAg、和HBV DNA，而且對於C型肝炎抗體和delta肝炎抗體為陰性的。B、定時在篩選調查1之後的4周後，但不超過篩選調查1之後的2個月，進行篩選調查2。C、篩選程序在篩選調查2中進行以下測試-全血數量(FBC)。包括RBC、血細胞比容、血紅蛋白、WBC和分化計數-血小板數量-凝血酶原時間(PT)-化學測試，包括BUN和肌氨酸-ALT-血清白蛋白和總蛋白
-膽紅素-HBeAg-HBV DNA-抗HIV-鐵蛋白-抗核抗體-甲胎蛋白-尿懷孕測試第三篩選調查(篩選調查3)A、合格性如果篩選2時的HBV DNA值小於等於4000MEq/ml，或者第一或第二篩選時的ALT值中的一個大於正常值上限的2.5倍，而且另一個小於正常值上限的2.5倍，只有這時才需要第三篩選調查。B、定時如果需要，不少於篩選調查2之後的4周，但不長於篩選調查2之後的2個月，進行篩選調查3。C、程序篩選調查3時的實驗室測試包括HBV DNA、HBeAg和ALT。進入研究篩選評估後，將全面評估患者，以確定他們是否符合進入和排除標準。
在得到同意後，從完成篩選評估後計4周內患者開始治療。治療期患者將接受以下治療Tα1 mg SQ，每周三次(6個月)拉米夫定150mg QD(每日一次，6個月)任選的泛昔洛韋250mg PO TID(每日三次，6個月)所有受試者在完成治療後將有至少12個月的隨訪觀察。
在治療期間的具體評估或者研究的觀察部分在治療期間第0、1、3、6月，然後每隔6個月共進行12個月HBVDNAHBeAg抗HBe(僅在HBeAg為陰性時)HBsAg多克隆HBsAg(僅在通過多克隆試驗HBsAg轉變為陰性時)抗HBc抗HBs(僅在HBsAg為陰性時)有限的病史和有限的身體檢查化學參數包括ALT(SGPT)、AST(SGOT)、鹼性磷酸酯酶、總膽紅素、BUN和肌氨酸。
血液學RBC、血細胞比容、WBC、分化、血小板數量凝血酶原時間尿分析(比重、葡萄糖、蛋白、顯微)在第18個月重複肝活體檢查在僅第0周時尿懷孕測試(僅對月經初潮後女性)治療後隨訪如上所述，治療後隨訪將持續至少12個月，收集所列數據。時間限制的定義當需要每四周測試時，希望患者返回以進行預定的臨床檢查，而且在規程中設定的那一天起的一周內進行測試。錯過的調查，或者在預定日期之前或之後1周以上的調查，將被視為違反規程，但不將這些患者排除在數據分析之外。當測試以約3個月的間隔按程序進行時，應在規定日期起的3周內進行測試。研究藥物、供貨和包裝劑量和給藥Tα1的劑量對於所有體重至少為40kg的治療患者標準化為每次注射1.6mg。低於40kg的患者接受40μg/kg的劑量。這是基於Ⅱ期研究的結果，其中發現每周注射兩次1.45-1.75mg範圍內的劑量(成人)是安全的，而且對於從血液中清除HBV DNA是有效的。
對於所有患者，拉米夫定的給藥劑量為150mg，每日一次。
FAMVIR(famicilovir)任選地以250mg的劑量給藥，每日三次，共6個月。劑量調整在該研究中沒有劑量調整的計劃。藥物提供和包裝SciClone Pharmaceuticals以單劑量注射用小管的形式製造合成的Tα1，其已與甘露糖和磷酸鈉配製在一起。小管需要用注射用無菌水復原。小管貼有藥物名稱和劑量的標籤。這將是一個開放研究。
拉米夫定以150mg的劑量提供。
FAMVIR以250mg片劑的形式提供。
所有藥物都存放在安全區域，而且僅由經同意參與本研究的指定藥師或者其他研究人員來分配。同時給藥的藥物及生活方式禁止免疫調節藥物(但不包括Tα1)、糖腎上腺皮質激素(如潑尼松)、免疫抑制藥物和已知有肝毒性的藥物。
對患者沒有其他同時給藥的藥物及生活方式的限制，但是不鼓勵患者過多飲用酒精飲料。適應性評估對於研究給藥具有適應性定義為患者每個月接受大於等於80％的預定劑量或者研究給藥。
每次注射Tα1時，患者將返回門診，而且由給藥人記錄給藥的劑量。在研究人員的同意下，對於規程非常適應的患者可安排在家中或者自己給藥。
如果在家中給藥藥物，患者和/或患者的父母，以及如果需要，指定的健康護理工人，將接受自己注射過程的指導，或者由研究護士進行輔助注射。研究護士將繼續給藥所研究的藥物，直至確認患者可進行自己注射，或者患者父母有能力進行注射。研究護士每周將與患者或者患者父母聯繫，並記錄對注射的適應性。患者或其父母記錄實際給藥的注射以及任何的副作用。
在家中注射的患者將給予合適的容器以丟棄用過的針頭和注射器，而且授以適當的處置技術。從研究中排除患者排除患者的標準1、治療中的副作用將威脅其健康的任何患者停止治療。監控患者副作用的消除，然後繼續在監控下進行預定規程，直至完成研究。
2、臨床狀況顯著惡化的患者，包括血液學參數、以及肝和/或腎功能的生化測試，這些患者將由研究人員和監控委員會進行評估。表明此等惡化的證據包括
a)在6個月的間隔期中ALT或AST持續增加。應注意的是，ALT和AST的暫時性升高有可能早於治療相關的或者自發性的減輕，而且不能成為將患者從研究中排除的原因。
b)在6個月的間隔期中總血清膽紅素水平持續增加。
c)症狀在主觀上增加，妨礙了患者在研究期間的每日活動。
d)血液學和腎參數已處於進入標準所列範圍以外。
3、自願從研究中撤出的患者。
4、無論何種原因，患者不能適應研究給藥，這定義為患者每個月接受小於80％的預定劑量或者研究給藥，或者不能適應規程的其他要求。
5、對於患者的最佳利益，研究人員認為應從治療中撤出。
6、患者在研究期間死亡。
7、患者已完成整個6個月的治療以及12個月的隨訪期。處理撤出者的程序由於不能適應研究給藥，這定義為患者每個月接受小於80％的預定劑量或者研究給藥，從該研究中撤出的患者將被取代。
所有從研究中撤出的患者將進行跟蹤，而且他們的臨床記錄包括在最終的報告中。副作用記錄副作用在整個6個月的治療和12個月的隨訪期間記錄副作用信息。在最後的預定調查時仍持續的副作用將跟蹤至它們已被解決或者可以進行解釋，或者直至副作用穩定，而且總的臨床結果已經確定。
監控患者中有可能由於治療而產生的明顯副作用或過敏症狀。雖然用Tα1時沒有觀察到局部或者全身性的副作用，但是如果發生全身性超敏反應如蕁麻疹或喘息，則應停止注射。應教授患者幾種嚴重的過敏性反應，並告之適當的應對措施。
要求所有患者報告自以前調查時所發生的任何問題。為避免觀察者的偏差，在整個研究期間詢問患者有關副作用的非直接性問題。非直接性的問題包括「自最後一次調查以來你是否有任何問題」。當描述問題時，要求儘可能地詳細。調查人員確定副作用是否與研究給藥有關。記錄所有的副作用，包括開始的日期、持續時間、以及嚴重性。副作用嚴重性的評估副作用的嚴重性如下分為輕度、中等或嚴重
除將副作用分為輕度、中等或嚴重以外，調查人員應確定該副作用是否為嚴重的。嚴重副作用的常規定義包括致命性、威脅生命(如過敏)、嚴重或過早致殘或喪失能力、或者導致住院或使住院期延長、生殖異常、癌症、或者藥物過量(偶然或者是有意的)。因果關係的評估調查人員應盡最大努力來解釋每個副作用，而且如果有的話，評估其與研究藥物治療的關係。用以下類別評估因果關係不相關、有可能相關、可能相關、相關。
用一個或多個以下術語理解副作用的程度，由此確定副作用是由於藥物治療(或者其他病因，例如已有的病史、同時進行的治療等)而產生的確定程度。
1、藥物的已知藥理學。
2、該藥或該類藥物以前曾觀察到的類似性質的反應。
3、如果藥物與例如皮疹、血質不調有關，經常在文獻中報導的類似藥物的副作用。
4、副作用與藥物的服用時間相關，隨停藥而終止(去除挑戰)或者重新挑戰時重現。副作用的隨訪調查人員應隨訪有副作用的受試者，直至副作用停止(消失)或者直至病症穩定。受試者隨後過程的相關報告必須遞交給臨床研究監查員。過量任何過量(懷疑或者證實)的例子必須在24小時內告之於調查人員，並作為嚴重的副作用完整地記錄。任何跡象或症狀以及處理的細節都應記錄，包括所給予的解毒藥的細節。懷孕受試者在研究期間懷孕應立即中止治療。
應建議受試者告之調查人員，如果是在完成研究後決定的，該懷孕是在治療期間或者是治療結束後30天之內。
無論如何，懷孕都應繼續，報告任何過早的終止，而且在生產後報告母親和嬰兒的狀況。行政要求檢查及同意要求倫理檢查委員會發起者應向調查人員提供所有必要的數據，以遞交至調查機構處的倫理委員會(機構檢查組)。倫理和同意書所有患者將籤署經醫院機構檢查組批准的同意書表格。該表格將聲明研究的性質、治療選擇的類型、所得樣品的類型、以及有可能的風險和利益。調查人員在確信患者完全理解同意書表格中的內容後將得到同意書。將給患者一份已籤字的同意書複印件。患者的保密將貫穿整個研究，而且患者在報告書中僅以研究代號來表示。程序及可能的風險靜脈穿刺術和靜脈切開術在進入研究前、開始時約每個月、以及其餘的治療時間每三個月，將從患者抽出約30ml的血液。對於較小的患者，應儘可能僅抽出規程所列測試要求的最小量的血液。該測試導致的血液丟失對於符合該研究的進入標準的患者沒有明顯的感覺。使用有經驗的人實施靜脈穿刺術和靜脈切開術，使這些過程的風險降低至最底，而且使用麻醉技術更進一步地降低其風險。肝活組織檢查患者在進入研究前以及在12個月的隨訪期結束時將進行經皮肝活組織檢查。肝活組織檢查將由有經驗的肝病專家來進行。併發症的發生率低於5％，而且這包括進入部位的疼痛、出血、膽汁腹膜炎、氣胸、腹部內臟的滲出以及膿毒症。死亡率低於0.1％。實驗室將在調查機構所選擇的、經認證的實驗室中進行實驗室研究。調查人員應在整個研究期間使用相同的實驗室。調查人員將向資助人提供一份實驗室目前證明、所有測試方法的目錄、以及規程中所包括的測試的正常值範圍的目錄。如果合適，正常值應註明年齡和性別。這些可在開始研究時提供，而且將用於解釋研究中得到的結果。如果需要在研究期間更換實驗室，或者實驗室要改變方法或正常值，患者記錄必須標有這些變化的數據。如果可能，在整個研究期間實驗室方法不應變化。
對於某些測試，資助人有可能希望使用特定的測試實驗室。例如，測定HBV DNA就有可能是這樣的一個測試。這可與調查機構進行協商。數據評估效力標準主要終點主要終點是完全病毒學應答率，其定義為在6個月的治療期和12個月的隨訪期結束時帶有陰性血清HBV DNA(用Chiron QuantiplexTMHBVDNA(bDNA)測試來確定)和HBeAg的患者的百分數。輔助終點1、在6個月治療和12個月隨訪期結束時，HBV DNA水平與基線值相比的百分變化。
2、在6個月治療和12個月隨訪期結束時，ALT水平降低至正常範圍的上限以下的患者的比例。
3、在6個月治療和12個月隨訪期結束時，失去B型肝炎s抗原的患者的比例。
4、肝組織學的Knodell分數提高的患者的比例。安全性評估臨床評估及經常的血液測試將為監控患者的藥物安全性提供機理，並使未發現的副反應的風險降低至最小。統計學評估分析將由調查人員、以及SciClone Pharmaceuticals或者他們的統計學諮詢人員分析數據。將檢驗數據的歸一性、斜率以及變異的不同一性。如果需要，將數據轉變為對數函數。
分析包括-諸如年齡和性別的人口變量的描述和分析-基線特徵，如醫療史和身體檢查使用雙尾檢驗進行所有的顯著性檢驗，而統計學意義上的顯著性是基於0.05的α水平。適當地使用數據列表、交叉圖表以及圖例來支持分析和敘述性的報告。安全性分析安全性評估是基於對所觀察到的臨床、局部、或者全身性作用的分析。將列出各實驗室結果的異常性的發生率。個體患者的實驗室異常性將由醫療監查員根據具體的標準來監查。亞組分析如下區分亞組，並分析它們的結果。根據各組中的患者數量，結果在統計學上有可能不是顯著性的。在此情況下，則可使用該信息作為將來研究的指導1、男性患者，女性患者2、肝活組織檢查-表現出最小變化的患者-表現出慢性持續肝炎的患者-表現出慢性活性肝炎的患者3、患者的攜帶狀態的已知持續時間4、患者年齡治療方案Tα1 1.6mg，每周三次，共6個月，再加上每日一次150mg的拉米夫定。開始治療後1年，所有患者都有正常的ALT，而且HBV-DNA(雜交俘獲)為陰性。兩個患者的HBeAg變為陰性，一位仍為HBeAg陽性。所有患者都很好地耐受該治療，而且沒有嚴重副作用的報告。實施例3本研究的目的是調查增加宿主免疫性的Tα1與抑制病毒複製的拉米夫定和泛昔洛韋的組合的效力。
在該研究中有11位患者參與，他們已證實患有慢性B型肝炎，HBsAg、HBeAg和HBV DNA為陽性，而且ALT升高至至少為正常值的兩倍。每周皮下給藥Tα1 1.6mg三次，共6個月。給藥拉米夫定150mgQD和泛昔洛韋250mg TID直至患者變為HBeAg陰性。
在總治療的1年內，64％(7/11)的患者的血清HBeAg轉變為陰性，而且所有患者的ALT都正常(11/11)。HBeAg血清轉變發生的時間為4-11個月。HBV DNA在所有患者中都變為陰性。一位患者的ALT升高至150U/l，並繼續治療。但是，該患者表現出了HBV DNA復發。所有患者耐受此治療，而且沒有嚴重副作用的報告。
Tα1與拉米夫定和泛昔洛韋的組合是安全的，而且對於治療慢性B型肝炎是有效的。
上述研究的積極結果表明了用Tα1、拉米夫定以及任選的泛昔洛韋治療患者中B型肝炎病毒的效力。
因為對於上述實施方案還可進行許多修改、變化及改進，因此上述描述僅是說明性的，而不是對本發明範圍的限制。
權利要求
1.治療患者中B型肝炎病毒(HBV)感染的方法，其包括向需要此等治療的患者給藥以下藥物組合，該組合包括抗病毒有效量的胸腺素α1(Tα1)和抗病毒有效量的拉米夫定。
2.如權利要求1所述的方法，其還包括向患者共同給藥抗病毒有效量的泛昔洛韋。
3.如權利要求2所述的方法，其中，注射給藥所述Tα1，劑量範圍約為0.5-10mg，口服給藥所述拉米夫定，劑量範圍是約50-500mg，以及口服給藥所述泛昔洛韋，劑量範圍是約100-2000mg。
4.如權利要求2所述的方法，其中，所述Tα1的劑量範圍約為1-2mg，口服給藥所述拉米夫定的劑量範圍是約100-200mg，而所述泛昔洛韋的給藥劑量範圍是約250-1000mg。
5.如權利要求4所述的方法，其中，所述Tα1每周向患者給藥3次，所述拉米夫定每日向患者給藥1次，而所述泛昔洛韋每日向患者給藥3次。
6.如權利要求4所述的方法，其中，所述Tα1的給藥劑量約為1.6mg，所述拉米夫定的給藥劑量是約150mg，而所述泛昔洛韋的給藥劑量是約250mg。
7.如權利要求6所述的方法，其中，所述Tα1每周向患者給藥3次，所述拉米夫定每日向患者給藥1次，而所述泛昔洛韋每日向患者給藥3次。
8.用於治療患者中B型肝炎病毒(HBV)感染的藥物組合，其包括第一劑量單元和第二劑量單元，所述第一劑量單元包含胸腺素α1(Tα1)，而所述第二劑量單元包含拉米夫定。
9.如權利要求8所述的組合，其還包括第三劑量單元，該劑量單元包含泛昔洛韋。
10.如權利要求9所述的方法，其中，所述Tα1的劑量單元的劑量範圍約為0.5-10mg，所述拉米夫定劑量單元的劑量範圍是約50-500mg，而所述泛昔洛韋的劑量單元的劑量範圍是約100-2000mg。
11.如權利要求9所述的組合，其中，所述Tα1的劑量單元的劑量範圍約為1-2mg，所述拉米夫定的劑量單元的劑量範圍是約100-200mg，而所述泛昔洛韋的劑量單元的劑量範圍是約100-1000mg。
12.如權利要求9所述的組合，其中，所述Tα1的劑量單元的劑量約為1.6mg，所述拉米夫定的劑量單元的劑量是約150mg，而所述泛昔洛韋的劑量單元的劑量是約250mg。
全文摘要
治療患者中B型肝炎病毒(HBV)感染的方法,其包括向需要此等治療的患者給藥以下藥物組合,該組合包括抗病毒有效量的胸腺素α1(Tα1)和抗病毒有效量的拉米夫定、以及任選的抗病毒有效量的泛昔洛韋。
文檔編號A61P31/20GK1320041SQ99811382
公開日2001年10月31日 申請日期1999年9月22日 優先權日1998年9月25日
發明者梁英傑 申請人:希克龍製藥公司