一種尿液有形成份質量控制品組合物及其製備方法

2023-09-18 05:53:45

專利名稱：一種尿液有形成份質量控制品組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及臨床體液學檢驗質量控制領域，具體涉及一種尿液有形成份質量控制品組合物及其製備方法。
背景技術：
尿液檢查因取材方便，病人無痛苦等特點，對泌尿系統疾病及某些與泌尿系統相關的疾病具有診斷、療效觀察和預後判斷的價值，被臨床作為常規檢驗項目廣泛應用。通過對尿理化檢查可觀察尿一般性狀和化學成分，通過對尿中有形成份如紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型、結晶、吞噬細胞、腫瘤細胞、細菌、精子等觀察，可識別尿中病理成分。尿液有形成份檢查常可為臨床醫生提供有關病人疾病狀況必須信息。為了減少檢驗人員尿液有形成份鏡檢的負荷、改善檢驗流程、減少人為因素引起的誤差、推動尿有形成份檢查的標準化，自動化有形成份分析儀相繼問世。隨著自動化儀器的不斷應用，如何使儀器發揮最大效用，為臨床實驗室提供快速、準確、及時的過篩試驗，提高工作效率，做好儀器的質控工作顯得非常重要。然而，尿液有形成份質控仍缺乏好的質控品，目前國際上所用尿液有形成分質控品有日本Sysmex公司使用不同直徑大小的微粒子質控品，美國^IS公司、長春迪瑞公司使用固定人紅細胞質控品，美國伯樂公司的含紅白細胞的尿質控品。這些質控品中微粒子質控品非細胞成分，只能用於計數而不能用於形態觀察；其餘質控品所含成分較少，只有紅細胞或紅、白細胞，不能對尿液有形成份分析儀的主要檢測參數進行有效監控。故尿液有形成份檢驗的質量控制是目前一個比較困難的問題。美國臨床實驗室標準研究院(CLSI)有關尿液分析的指導性文件GP16-A3指出，尿有形成份的質量控制應採用商品化質控品每日進行。我國《尿液沉渣檢查標準化的建議》 及推廣全自動尿液沉渣分析儀的目的，旨在減少方法和技術差異導致的檢驗結果誤差，合適的質控品已成為提高實驗室檢驗可靠性的關鍵。目前，國際所用尿液形成份質控品，按 GP16-A3的要求所能監測的有形成份太少，不能全面對日常尿有形成份分析的進行質量控制。

發明內容
本發明所要解決的技術問題之一是克服目前尿液有形成分質控品監測成分太少或不能用於形態觀察的不足，提供一種含各種有形成分且能進行形態觀察的尿液有形成分質量控制品組合物。本發明所提供的尿液有形成分質控品組合物包括下列組成紅細胞、白細胞、管型及上皮細胞。所述的尿液有形成分質控品組合物還包括細菌。本發明所要解決的另一技術問題是提供一種尿液有形成分質控品組合物的製備方法。本發明所提供的製備方法包括如下步驟
(1)將10%生理鹽水甲醛溶液與尿液之比為1 20的比例加入高壓滅菌的塑料瓶，收集Ia1尿液；(2)將尿液充分混勻後，倒入加有過濾膜的布氏漏鬥中進行抽濾，將留在濾膜上的成份用生理鹽水反覆洗滌；(3)收集所有洗脫液，離心棄上清液取沉渣；(4)將沉渣用中性甲醛溶液按1 2 1 5的比例進行固定，加入100 2000uL 抑菌劑proclin300混勻，2 8 °C冰箱保存。步驟(1)中所述高壓滅菌的塑料瓶為帶蓋，無粒子的塑料瓶。步驟中所述的中性甲醛溶液的配製包括下列步驟a、配製PH7. 0磷酸鹽緩衝液；b、在(a)中加入5_35g甲醛混勻。步驟⑷中所述的沉渣與中性甲醛溶液的比例為1 4。本發明提供的尿有形成份質量控制品組合物中含有紅細胞、白細胞、上皮細胞和管型等有形成份且形態保持良好，易於辨認；在不同檢測原理的尿液有形成份分析儀，無論是流式細胞技術加螢光染色技術，還是流式細胞技術加自動掃描成像技術的分析儀，或是顯微鏡均檢出了紅、白細胞、上皮細胞、管型、細菌等有形成份，能滿足日常尿液有形成份質量控制的需要，不但適用於不同檢測原理的有形成份分析儀，且適用於尿有形成份顯微鏡檢查的質量控制。不同參數不同濃度的質量控制品重複性較好，紅細胞RBC18 586個/ μ L, CV 4. 4 7. 8% ；白細胞 WBC16 127 個/μ L，CV4. 3 14.2% ；上皮細胞 EC9 61 個/yL，CV4. 8 14.4% ；管型CAST3 9個/ μ L，CV17 23% ；與新鮮尿標本(紅細胞 CV2. 4 31% ；白細胞CV8. 5 14% ；上皮細胞CV7. 0 18% ；管型CV17 45% )做批內精密度的結果基本一致，也與微粒子質控品(紅細胞CV 2. 93 16. 28%;白細胞CV2. 07 22.31% ；上皮細胞CV6. 18 11.36% ；管型CV12. 38 35% )的批內精密度相一致，既保持了尿液的天然屬性，又具有與粒子計數相當的不精密度。且本發明的尿有形成份質量控制品組合物有較好的穩定期，至少可達8周。


圖1為實施例1在尿液分析儀UF500監測後的截圖；圖2為實施例1在尿液分析儀IQ200監測後不同有形成份的組圖；圖示中1 5紅細胞，6 10白細胞，11 15上皮細胞，16 19管型，20 22 細菌圖3為實施例1在尿液分析儀Combi XS監測後的截圖；圖示中1紅細胞，2白細胞，3上皮細胞，4管型，5細菌圖4為實施例1在尿液分析儀FUS100檢測後不同有形成份的組圖；圖示中1 5紅細胞，6 9白細胞，10 15上皮細胞，16 21管型，22 洸細菌圖5為實施例1在相差顯微鏡下不同有形成份的形態；圖示中1紅細胞，2白細胞，3上皮細胞，4管型，5細菌
具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之後，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附權利要求書所限定的範圍。實施例1尿有形成份質量控制品的製備1、選擇體積2升左右，帶蓋，無粒子的塑料瓶，高壓蒸汽滅菌備用。2、10%生理鹽水甲醛溶液配製甲醛IOOmL加生理鹽水900mL混勻。3、PH7. 0磷酸鹽緩衝液的配製Na2HPO4 · 2H20 108. 61g+NaH2P04 · 2H20 60. 86g 溶解，定容至 1L。4、PH7. 0中性甲醛溶液配製在上述3中加入20g甲醛混勻。5、將10%生理鹽水甲醛溶液與尿液之比為1 20的比例加入高壓滅菌的塑料瓶， 留取1 尿液。6、收集尿液，按生物安全要求轉運。7、將尿液充分混勻後，倒入已準備好的加有過濾膜的布氏漏鬥中進行抽濾。8、將留在濾膜上的成份，用生理鹽水反覆洗滌。9、收集所有洗脫液，離心1500r*5分鐘，棄上清液取沉渣。10、將沉渣用上述中性甲醛溶液按1 4的比例進行固定，加入IOOOuL proclin300混勻，2 8°C冰箱保存。所製備的尿液有形成分質控品，適用於UF系列儀器、IQ200、Combi XS和FUS100 等尿有形成份分析儀。見圖1 5實施例2尿有形成份質控品重複性的監測1、用中性磷酸鹽緩衝液將按實施例1製備的尿有形成份質控品進行適當的稀釋。2、使紅細胞低濃度為10 20個/μ L，中濃度為20 50個/μ L，高濃度為> 100 個/yL;使白細胞低濃度為10 20個/μ L，中濃度為20 50個/μ L，高濃度為> 100 個/yL;使上皮細胞低濃度為 20個 /uL ；使上皮細胞低濃度為 20個 /uL ；使管型低濃度為2 3個/ μ L，中濃度為3 5個/ μ L，高濃度為> 5個/ μ L。3、在日本希森美康UF500尿有形成份分析儀上重複測定12次，計算各自均值，標準差(S)和不精密度(cv%)04、UF500 監測的不精密度為 RBC18 586 個 / μ L，CV 4. 4 7. 8% ；WBC16 127個 / μ L，CV4. 3 14. 2% ；EC9 61 個 / μ L，CV4. 8 14. 4% ；CAST3 9 個 / μ L，CV17 23%。見表1。 表1UF500監測的四種主要參數高、中、低三種不同濃度濃度的不精密度
權利要求
1.一種尿液有形成分質量控制品組合物，其特徵在於至少包括下列組成紅細胞、白細胞、管型及上皮細胞。
2.根據權利要求1所述的尿液有形成分質量控制品組合物，其特徵在於所述的組合物紅細胞為18 586個/ μ L，白細胞為16 127個/ μ L，上皮細胞為9 61個/ μ L，管型CAST為3 9個/yL。
3.根據權利要求1所述的尿液有形成分質量控制品組合物，其特徵在於所述的組合物還包括細菌。
4.根據權利要求1所述的尿液有形成分質量控制品組合物，其特徵在於所述的組合物2 8°C至少可穩定8周。
5.一種尿液有形成分質量控制品組合物的製備方法，包括如下步驟(1)將10%生理鹽水甲醛溶液與尿液之比為1 20的比例加入高壓滅菌的塑料瓶，收集12h尿液；(2)將尿液充分混勻後，倒入加有過濾膜的布氏漏鬥中進行抽濾，將留在濾膜上的成份用生理鹽水反覆洗滌；(3)收集所有洗脫液，離心棄上清液取沉渣；(4)將沉渣用中性甲醛溶液按1 2 1 5的比例進行固定，加入100 2000uL抑菌劑proclin300混勻，2 8 °C冰箱保存。
6.根據權利要求5所述的一種尿液有形成分質量控制品組合物的製備方法，其特徵在於步驟(1)中所述高壓滅菌的塑料瓶為帶蓋，無粒子的塑料瓶。
7.根據權利要求5所述的一種尿液有形成分質量控制品組合物的製備方法，其特徵在於步驟中所述的中性甲醛溶液的配製包括下列步驟a、配製PH7.0磷酸鹽緩衝液；b、在(1)中加入5-35g甲醛混勻。
8.根據權利要求7所述的一種尿液有形成分質量控制品組合物的製備方法，其特徵在於步驟(a)中所述的甲醛為20g。
9.根據權利要求5所述的一種尿液有形成分質量控制品組合物的製備方法，其特徵在於步驟⑷中所述的沉渣與中性甲醛溶液的比例為1 4;所述的抑菌劑prOClin300加入量為1000uL。
10.根據權利要求1所述一種尿液有形成分質量控制品組合物，其特徵在於該尿液有形成分質量控制品組合物在流式細胞技術加核酸螢光染色技術的自動尿液分析儀、流式細胞技術、自動成像技術的自動尿液分析儀及顯微鏡檢查質量控制中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種尿液有形成份質量控制品組合物及其製備方法，本發明所提供的尿液有形成份質量控制品組合物至少包括有形成份紅細胞、白細胞、上皮細胞和管型，既保持了尿液的天然屬性，又具有較好的不精密度。本發明的尿有形成份質量控制品組合物有較好的穩定期，不但適用於不同檢測原理的有形成份分析儀，且適用於尿有形成份顯微鏡檢查的質量控制。
文檔編號G01N21/00GK102183628SQ20111005555
公開日2011年9月14日 申請日期2011年3月8日 優先權日2011年3月8日
發明者季慧峰, 宋穎, 李棟成, 李 泳, 王青, 胡曉波, 許蕾 申請人:上海市臨床檢驗中心