防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒的製作方法

2023-11-10 12:26:47 2

防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒的製作方法
【專利摘要】本發明涉及防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒，可有效解決禽流感用藥的問題，其解決的技術方案是，是由以下重量計的：黃芪多糖550-650g、牛膝多糖180-220g、貓爪草多糖110-130g和木鱉子霜75-85g作原料藥物，再添加原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的輔料為澱粉、糖粉、糊精的一種或兩種以上的混合，本發明原料豐富，價格低廉，用藥安全，無毒副作用，使用效果好，是防治禽流感的中獸藥物上的創新。
【專利說明】防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒

【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥，特別是一種防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒。

【背景技術】
[0002] 禽流感病毒感染的對象主要為禽類，但近年來，尤其是H5N1高致病性禽流感病 毒可致多種哺乳動物感染與死亡，如發生於我國動物園中虎以及泰國動物園中虎、豹禽流 感的感染髮病，造成了大量死亡，其他動物如豬、貓、犬等的感染髮病與死亡也時有報導。當 然，在許多哺乳動物的禽流感病毒感染中，以豬禽流感的感染對人類的危害為最大。一旦人 流感病毒和禽流感病毒共同感染豬後，很可能產生在人之間傳播與流行的變異株。研究認 為，1957至1968年亞洲流行的H2N2亞型病毒，其HA、NA和PB1基因皆來自於禽流感病 毒，其它基因保留了當時流行於人群中的H1N1病毒的基因；1968年香港流行的H3N2亞 型病毒，其HA和PB1也來自禽流感病毒，其它基因來自於當時流行於人群中的H2N2病 毒。即引起兩次人流感大流行的病毒，都是人源毒株和禽源毒株的雜合病毒。由於豬在這 種雜合病毒的形成過程中起重要作用，被認為是"混合器"。另外，禽流感病毒感染哺乳動物 後，在體內經過一段時間的適應後，其受體特異性可能發生改變，也有可能變成可感染人類 的毒株。
[0003] 從目前哺乳動物的感染與發病情況來看，貓科動物中的虎、豹、貓等動物和鼬科動 物中的貂類動物如雪貂、水貂、石貂等對禽流感病毒非常敏感，雪貂也是流感病毒的理想實 驗動物。結合水貂在我國特種經濟動物養殖上的重要地位以及我國不斷有高致病性禽流感 發生的現實，提醒我們對水貂禽流感的發生與影響必須要給予高度的重視。
[0004] 遺傳和變異是任何一種生物的基本特性；尤其在不良環境壓力下，更會促進其變 異，如抗體的壓力會導致病毒抗原性的改變。在我國，應用H9N2亞型禽流感疫苗已至少有 10年的歷史，而目前流行的H9亞型禽流感病毒至少有3組不同類型的抗原群，不同抗原組 之間交叉反應性較差；而H5亞型流感疫苗的應用也有一定時間，依據現有的報導資料，我 國廣西、雲南、江西以及湖南等地的高致病性禽流感血凝素抗原性都存在較大的差別，而且 動物實驗表明，對鴨接種的病毒，後期所排放的病毒與原接種病毒相比就有數量不等氨基 酸的差異，充分說明了 H5亞型禽流感病毒抗原容易發生變異，而且禽流感病毒抗原變異似 乎進入了一個活躍期。因此，禽流感病毒抗原性的改變，無論是對動物還是對人類疫苗免疫 防控都造成了很大的困難。
[0005] 目前對於禽流感的防治藥物缺乏：金剛烷胺等西藥作為人和畜禽治療流感的藥物 已經用了幾十年了。但是，人的H3NUH3N2已經產生了抗金剛烷胺的毒株。最近有媒體報 道，有人用"達菲"也已經開始產生新的毒株，這是我們非常關心的，但是這主要出現在人的 身上。對於西藥抗病毒用於防治禽流感我國是不允許使用的。按照現行的獸藥管理條例， 只要發現把金剛烷胺等西藥抗病毒藥用於獸藥銷售和生產，就要給予行政處罰。所以，目前 在防治禽類的禽流感方面尚無抗病毒獸藥。
[0006] 部分養殖場戶違反國家規定仍採用金剛烷胺等西藥抗病毒藥用於防治禽流感：① 由於禽類感染禽流感後首先破壞機體的免疫防禦系統，導致機體的抵抗力和自身修復能力 喪失；②西藥抗病毒藥用於臨床後對病毒顆粒有部分拮抗作用，但是對於禽類的機體細胞 也同樣有毒副作用，所以，獸醫臨床上西藥抗病毒藥物用於對禽類的禽流感防治效果並不 理想；③在禽類的飼養過程中使用西藥抗病毒藥物後會導致食品安全等嚴重問題，從而影 響到了人類的身體健康和人類疾病的防控安全。在人類對於禽類的禽流感的臨床防治研究 與探索中發現部分中獸藥品種如黃芪、木鱉子等用於防治禽類的禽流感的臨床效果尚且不 錯，而且研究還發現黃芪等中獸藥不但具有較強的臨床抗病毒能力，同時還具有增強機體 免疫力和抗病力，提高機體自身的修復能力。傳統的中獸藥由於加工工藝比較簡單，相對加 工粗糙，多以簡單的粗粉或細粉或傳統熬製後直接拌入禽類飼料或飲水中，中獸藥的有效 成分得不到充分有效的吸收利用，導致臨床應用效果不太理想。因此，防治禽流感的藥物上 的改進是目前亟需解決的問題。


【發明內容】

[0007] 針對上述情況，為解決現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種防治禽流感 的複方黃芪多糖顆粒，可有效解決禽流感用藥的問題。
[0008] 本發明解決的技術方案是，是由以下重量計的：黃芪多糖550_650g、牛膝多糖 180-220g、貓爪草多糖110-130g和木鱉子霜75-85g作原料藥物，再添加原料藥物重量3% 的輔料製備成顆粒，所述的黃芪多糖為乾燥的黃芪，加水，浸提三次，第一次浸提，先用黃芪 12倍重量的水浸泡30-60min，煎沸，再文火煮1. 5小時，過濾，得第一濾液，藥渣加入黃芪 10倍重量的水，進行第二次浸提，煮沸，再文火煮1. 5小時，過濾，得第二濾液，藥渣再加黃 芪10倍重量的水，進行第三次浸提，煮沸，再文火煮1小時，過濾，得第三濾液，合併三次濾 液，濃縮至1 :1的濃縮液，用濃縮液4倍體積量的無水乙醇沉澱，沉澱物乾燥，得黃芪多糖； 所述的牛膝多糖是，將乾燥的牛膝，加水，料液比1:15,100°C浸提2h，浸提液加牛膝5倍重 量的質量濃度95%的乙醇，浸提2次，每次2小時，合併濾液，濃縮，乾燥，得牛膝多糖；所述 的貓爪草多糖是，將貓爪草加水，浸提2次，每次加水量為貓爪草重量的12倍，每次浸提3 小時，合併兩次浸提液，濃縮至相當於含生藥800g/L的濃縮液，加濃縮液體積50%的無水乙 醇，淨置6小時，棄去上部液體，得沉澱物，沉澱物乾燥，即為貓爪草多糖；所述的木鱉子霜 為將木鱉子仁，裝入擠壓式制霜機壓制，控制溫度為100°C，待含油量達17-20%時，停止壓 榨，將藥渣粉碎混合均勻，得木鱉子霜；所述的輔料為澱粉、糖粉、糊精的一種或兩種以上的 混合。
[0009] 本發明原料豐富，價格低廉，用藥安全，無毒副作用，使用效果好，是防治禽流感的 中獸藥物上的創新。

【具體實施方式】
[0010] 以下結合實施例對本發明的【具體實施方式】作進一步詳細說明。
[0011] 實施例1 本發明在具體實施時，可由以下重量計的：黃芪多糖550g、牛膝多糖180g、貓爪草多糖 110g和木鱉子霜75g作原料藥物，添加原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的輔料為 澱粉、糖粉、糊精，按重量比1 :3 :1混配均勻而成。
[0012] 實施例2 本發明在具體實施時，可由以下重量計的：黃芪多糖600g、牛膝多糖200g、貓爪草多糖 120g和木鱉子霜80g作原料藥物，添加原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的輔料為 澱粉、糖粉，按重量比澱粉：糖粉=1 :3混勻而成。
[0013] 實施例3 本發明在具體實施時，還可由以下重量計的：黃芪多糖650g、牛膝多糖220g、貓爪草多 糖130g和木鱉子霜85g作原料藥物，添加原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的輔料 為澱粉、糊精，按重量比1 :1混配均勻而成。
[0014] 上述本發明組方中， 黃苗：為豆科植物蒙古黃苗胱?eraflaceiAs (Fisch. ) Bge · var · ffioflgAo/iciAs (Bge. ) Hsiao 或膜莢黃苗 J . (Fisch. ) Bge.的根。主產於 內蒙古、山西、黑龍江等地。 _5] 纖..甘，微溫。歸脾、肺經。滅森·：補氣健脾，昇陽舉陷，益衛固表，利尿消腫，脫毒 生肌。
[0016] 觀/?厥究:主要含苷類、多糖、黃酮、胺基酸、微量元素等。黃芪能促進機體代謝、抗 疲勞、促進血清和肝臟蛋白質的更新；有明顯的利尿作用，能消除實驗性腎炎尿蛋白；能改 善貧血動物現象；能升高低血糖；能興奮呼吸；能增強和調節機體免疫功能，對幹擾素系統 有促進作用可提高機體的抗病力；對流感病毒等多種病毒所致細胞病變有輕度抑制作用， 對流感病毒感染小鼠有保護作用；有較廣泛的抗菌作用；黃芪子啊細胞培養中，可使細胞 數明顯增多，細胞生長旺盛，壽命延長；能增強心肌收縮力，保護心血管系統，抗心律失常， 擴張冠狀動脈和外周血管，降低血壓，能降低血小板粘著力，減少血栓形成；還有降血脂、抗 衰老、抗缺氧、抗輻射、保肝等作用。近年來的研究發現黃芪中含多糖、皂甙、黃酮、胺基酸 等多種有效成分，這些活性成分均有促進抗體生成和免疫反應的作用，其中以對黃芪多糖 (Astragalus Polysacharin，APS)的研究報導為多。黃苗多糖是黃苗的主要活性成分之一， 經過高科技萃取、分離而得到的。黃芪多糖是黃芪發揮作用的主要成分。
[0017] 牛膝：為莧科植物牛膝(懷牛膝B1.和川牛膝(甜牛膝） Cya thula officinalis Kuan _8] 藥性：苦、甘、酸、平。歸肝、腎經。功效：活血通經、補肝腎、強筋骨、利水通淋、引火 (血）下行。
[0019] 現代研究：牛膝含有三萜皂苷(經水解後成為齊墩果酸和糖)、蛻皮留酮、牛膝甾 酮、紫莖牛膝留酮等留體類成分和多糖類成分。此外，牛膝還含有精氨酸等12種胺基酸以 及生物鹼類、香豆素類等化合物及鐵、銅等微量元素。牛膝總皂苷對子宮平滑肌有明顯的興 奮作用，懷牛膝苯提取物有明顯的抗生育、抗著床及抗早孕的作用，抗生育的有效成分為蛻 皮甾醇。牛膝醇提物對試驗小動物心臟有抑制作用，煎劑對麻醉犬心肌亦有抑制作用。煎 劑和醇提液有短暫的降壓和輕度利尿作用，並伴有呼吸興奮作用。懷牛膝能降低大鼠全血 黏度、血細胞比容、紅細胞聚集指數，並有抗凝作用。蛻皮甾酮有降脂作用，並能明顯降低血 糖。牛膝具有抗炎、鎮痛作用，能提高機體免疫功能。
[0020] 貓爪草：為毛茛科植物小毛茛沿//wflcWiAs temaiiAs Thunb.的塊根。
[0021] 藥性：甘、辛，微溫。歸肝、肺經。功效：化痰散結，解毒消腫。
[0022] 現代研究：貓爪草含小毛茛內酯、原白頭翁素、花生酸、肉豆蘧酸十八烷基酯、豆甾 醇、谷留醇、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖，還含油類及植物鹼。
[0023] 1.抗結核菌和其他細菌：貓爪草的抗結核菌機制，有人通過對其進行微量元素 分析後認為，結核患者頭髮中微量元素 Zn、Fe、Μη含量明顯比正常人低，貓爪草中較高的 Zn(40. l)、Fe(1306. 4)、Μη(74. 6)含量對抗了由於Ζη降低導致的肌體免疫細胞抑制，從 而減弱了對感染的易感性，但這種殺菌機理的理由並不充分。詹莉等採用反轉錄聚合酶鏈 反應半定量（QC-RT PCR)方法及PCR方法，對貓爪草的有效成分小毛莨內酯（Tern)進行了 抗結核菌分子免疫學機理的研究，結果表明Tern可能誘導周圍血管GLS基因高水平表達， 殺滅胞內致病菌MTB，並呈劑量依賴性，對耐藥的與未治療的肺結核患者誘導水平無顯著差 異。進一步研究表明，Tern可能通過促進GLSmRNA的表達，增強機體細胞毒性T淋巴細胞 (CTL)的殺菌能力，從而達到抗結核體眠落的作用，另外還可能通過減少結核體眠16KDa小 熱體克蛋蠡（16KDaSHSP)基因的表達，在激活體眠菌的同時促進GLS高水平表達，增強機體 CTL殺菌能力，達到抗耐藥菌的作用Η弓丨.謝建平等利用雙向電泳技術，發現貓爪草提取物 作用盾的結核分枝桿菌臨床分離株的企細胞蛋臼表達圖譜中，有22個蛋白質斑點的濃度 具有差異，利用基質輔助雷射鰓吸/電離飛行時間質譜技術分櫥，其中孓腺營甲硫氨酸合 成酶、礙I哚一 3-甘油磷酸合酶、烯醯一 CoA水合酶、琥珀醯輔酶Α合成酶表達明顯下調， 其研究表明，貓瓜草提取物作用在結核菌的多條途徑的多個靶標，這蝗途徑包括氮基酸代 謝及相關的多胺合成、脂肪酸代謝、中樞代謝途徑以及可能參與躡自質分泌、運輸和免疫的 分子伴侶η弓|，這與中藥提取物多成分的性質棚符。在應用上，貓瓜草豹永蘸裁、生藥粉末 及醇提液在試警內對強毒入登結核藹（H37RV)均有不同程度的抑制作用.貓爪草的煎劑及 生藥粉末的抑菌濃度為1 :10,其醇提液的抑菌濃度為1 :1000,且抑菌作用較異煙肼稍強。 "將貓爪草、青篙水浸液過濾後以1 :200濃度製成改良羅氏中藥培養基和對照培養基，經滅 菌後分剃接釋結核蓊混懸液，放置予37°C恆瀑溫箱中培養，絡果對照培養基中結核菌生長 良好，兩中藥培養基無結核菌生長.貓爪草水提液對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、四鏈 球菌、痢疾桿菌等均有抑制作用，且可抑制耐藥性結核桿菌、能抗約氏鼠癌桿菌、降低原蟲 感染率。
[0024] 2.抗腫瘤研究 貓爪草注射液對小鼠 S180、$37、EAC等腫瘸株有顯著的抑制作用。有關其抗腫瘤的機 制，曾有人從微量元素與健康的角度認為，癌症患者血清中Cu / Ζη值升高，而貓爪草Cu / Ζη值趨向與癌症患者Cu / Ζη相反，因此可能有助予調節患者體內Cu、Zn平衡而發揮抗癌 效果。
[0025] 3.抗炎作用 複方貓爪草水提物的抗急性炎症作用顯著，原因可能是通過抑制毛細血管的擴張，降 低遙透性，使滲出液減少以達到抗炎作用…弓丨，貓爪草既粟毛殼本用於治療菲結核性的淋 巴結炎。
[0026] 4.保護性抑制作用 研究認為貓爪草對動物中樞神經系統、心臟、呼吸系統及腸壁具有不同程度的抑制作 用，並可使血壓一時性下降，對血管卻無擴張作用，推斷該藥對人體可能起保護性抑制作 用，有利於改善體質和增強對疾病的抵抗力。
[0027] 木鰵子：為葫蘆科植物木鰵 Momordica cochinchinensis (Lour.) Spreng. 的成熟種子。
[0028] 藥性：苦、微甘，涼。有毒。歸肝、脾、胃經。功效：攻毒療瘡，消腫散結。
[0029] 現代研究：含木鱉子皂苷、木鱉子酸、木鱉子素、齊墩果酸、甾醇、胺基酸，以及油 35. 72%、蛋白質30. 59%、海藻糖等。木鱉子皂苷有抗炎及降血壓作用，並能抑制離體蛙心和 離體兔十二指腸。水浸液.乙醇-水浸出液和乙醇浸出液，試驗於狗、貓及兔等麻醉動物，有 降壓作用。但毒性較大，無論靜脈或肌肉注射，動物均於數日內死亡。大鼠靜脈注射木鱉子 皂甙，血壓暫時下降，呼吸短暫興奮，心搏加快。注射於狗股動脈可暫時增加下肢血流量，其 作用強度約為罌粟鹼的1/8。對離體蛙心和離體兔十二指腸均為抑制作用，而對豚鼠迴腸則 能加強乙醯膽鹼的作用、拮抗罌粟鹼的作用，高濃度時且引起不可逆性收縮。大鼠口服或 皮下注射木鱉子皂甙，能顯著抑制角叉菜膠引起的足滕浮腫。對兔紅細胞有溶血作用。種 子的皂甙：6. 6mg/kg給大鼠靜脈注射可致短暫的呼吸興奮和血壓下降，並能增加狗後肢末 梢血管的血流，對離體娃心有抑制作用；2X10 (-4) g/ml濃度能增加乙醯膽鹼對豚鼠迴腸 的興奮作用；灌胃或皮下注射對角叉菜膠引起的大鼠足部腫脹炎症有抑制作用；有溶血作 用；對小鼠的半數致死量靜脈注射為32. 35mg/kg，腹腔注射為37. 34mg/kg。木鱉子提取物 對麻醉狗，貓及兔等有降壓作用，大鼠靜脈注射木鱉子皂甙，可使血壓暫時下降，心搏加快， 呼吸短暫興奮。注射於狗股動脈可暫時增加下肢血流量，其作用強度約為罌粟鹼的1/8。另 外具有抗炎及溶血作用。
[0030] 木鱉子脂肪油含量測定：分別取樣品粗粉lg，精密稱定，用濾紙包好，置索氏提 取器中，加入乙醚80ml安裝提取裝置，水浴加熱回流提取8 h，至提淨脂肪油，收集提取 液置恆重好的蒸發皿中，在水浴上低溫揮幹乙醚，置電熱恆溫乾燥箱內，l〇〇°C乾燥1 h， 取出移置乾燥器內，冷卻30 min，精密稱定，計算，得出木鱉子生品中脂肪油平均含量為 40. 74%，木鱉子霜脂肪油平均含量17. 13%，平均去油率19. 80%。本發明控制木鱉子霜含 17?20%的脂肪油，是有一定道理的。
[0031] 本發明組分使用黃芪多糖、牛膝多糖、貓爪草多糖及木鱉子霜科學、合理配伍，互 相支持，有效用於治療禽流感，療效好，用藥安全，並經試驗得到了充分證明，有關試驗資料 如下： 一、黃芪多糖藥理活性試驗： 1. 1試驗材料 本發明黃芪多糖。
[0032] 1. 2試驗方案 本試驗旨在研究飼糧中添加不同水平黃芪多糖對蛋雞免疫功能及腸道菌群的影響。試 驗選取健康且生產性能相近的380日齡海蘭灰商品蛋雞1440隻，隨機分為6組，每組4 個重複，每個重複60隻雞。以玉米-豆柏型飼糧為基礎飼糧，各組分別在基礎飼糧中添 加 〇( I，對照組）、50( II組）、100(111 組）、150(IV組）、200( V組）和 250 mg/kg(VI組） 黃芪多糖，預試期1周，試驗期8周。自由採食和飲水，按常規免疫程序免疫。基礎飼糧組 成及營養水平見表1。觀察各實驗組蛋雞脾臟和法氏囊係數、盲腸扁桃體淋巴小結數量和絨 毛長度，觀察對蛋雞免疫功能的影響(見表2)。
[0033] 表1基礎飼糧組成

【權利要求】
1. 一種防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒，其特徵在於，是由以下重量計的：黃芪多糖 550-650g、牛膝多糖180-220g、貓爪草多糖110-130g和木鱉子霜75-85g作原料藥物，再添 加原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的黃芪多糖為乾燥的黃芪，加水，浸提三次，第 一次浸提，先用黃芪12倍重量的水浸泡30-60min，煎沸，再文火煮1. 5小時，過濾，得第一 濾液，藥渣加入黃芪10倍重量的水，進行第二次浸提，煮沸，再文火煮1. 5小時，過濾，得第 二濾液，藥渣再加黃芪10倍重量的水，進行第三次浸提，煮沸，再文火煮1小時，過濾，得第 三濾液，合併三次濾液，濃縮至1 :1的濃縮液，用濃縮液4倍體積量的無水乙醇沉澱，沉澱 物乾燥，得黃芪多糖；所述的牛膝多糖是，將乾燥的牛膝，加水，料液比1:15,100°C浸提2h， 浸提液加牛膝5倍重量的質量濃度95%的乙醇，浸提2次，每次2小時，合併濾液，濃縮，幹 燥，得牛膝多糖；所述的貓爪草多糖是，將貓爪草加水，浸提2次，每次加水量為貓爪草重量 的12倍，每次浸提3小時，合併兩次浸提液，濃縮至相當於含生藥800g/L的濃縮液，加濃縮 液體積50%的無水乙醇，淨置6小時，棄去上部液體，得沉澱物，沉澱物乾燥，即為貓爪草多 糖；所述的木鱉子霜為將木鱉子仁，裝入擠壓式制霜機壓制，控制溫度為l〇〇°C，待出油量 達17-20 %時，停止壓榨，將藥渣粉碎混合均勻，得木鱉子霜；所述的輔料為澱粉、糖粉、糊 精的一種或兩種以上的混合。
2. 根據權利要求1所述的防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒，其特徵在於，是由以下重 量計的：黃芪多糖550g、牛膝多糖180g、貓爪草多糖110g和木鱉子霜75g作原料藥物，添加 原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的輔料為澱粉、糖粉、糊精，按重量比1 :3 :1混配 均勻而成。
3. 根據權利要求1所述的防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒，其特徵在於，是由以下重 量計的：黃芪多糖600g、牛膝多糖200g、貓爪草多糖120g和木鱉子霜80g作原料藥物，添 加原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的輔料為澱粉、糖粉，按重量比澱粉：糖粉=1 :3 混勻而成。
4. 根據權利要求1所述的防治禽流感的複方黃芪多糖顆粒，其特徵在於，是由以下重 量計的：黃芪多糖650g、牛膝多糖220g、貓爪草多糖130g和木鱉子霜85g作原料藥物，添加 原料藥物重量3%的輔料製備成顆粒，所述的輔料為澱粉、糊精，按重量比1 :1混配均勻而 成。
【文檔編號】A61P31/16GK104083427SQ201410368695
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月30日 優先權日:2014年7月30日
【發明者】王一碩, 趙雲生, 郭守義, 楊成祥, 陳麗芬, 胡澤翔 申請人:河南中醫學院