一種用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條的製作方法

2023-12-09 10:01:31

一種用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條的製作方法
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，針對樣品可能含有的不同主要三至多種目標，可監控不同梯級層析指示，屬於分析化學領域。
【背景技術】
[0002]膠體金是一種常用的標記技術，是以膠體金作為示蹤標誌物應用於抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。
[0003]膠體金標記實質上是抗體蛋白等生物大分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附的機理可能是膠體金表面所帶的負電荷與蛋白質分子所帶的正電荷之間靠靜電力相互吸引，達到範德華引力內即形成牢固的結合。另外，膠體金顆粒的粗糙也是有利於形成吸附的重要條件。由於這種標記過程主要是靠物理吸附作用，因而對蛋白質分子的生物學活性沒有明顯影響。
[0004]常用的免疫膠體金檢測技術及應用包括:(I)免疫膠體金光鏡染色法細胞懸液塗片或組織切片，可用膠體金標記的抗體進行染色，也可在膠體金標記的基礎上，以銀顯影液增強標記，使被還原的銀原子沉積於已標記的金顆粒表面，可明顯增強膠體金標記的敏感性。(2)免疫膠體金電鏡染色法，可用膠體金標記的抗體或抗抗體與負染病毒樣本或組織超薄切片結合，然後進行負染。可用於病毒形態的觀察和病毒檢測。(3)斑點免疫金滲濾法，應用微孔濾膜(如膜)作載體，先將抗原或抗體點於膜上，封閉後加待檢樣本，洗滌後用膠體金標記的抗體檢測相應的抗原或抗體。(4)膠體金免疫層析法，將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標記試劑(抗體或單克隆抗體)吸附在結合墊上，當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上後，通過毛細作用向前移動，溶解結合墊上的膠體金標記試劑後相互反應，再移動至固定的抗原或抗體的區域時，待檢物與金標試劑的結合物又與之發生特異性結合而被截留，聚集在檢測帶上，可通過肉眼觀察到顯色結果。上述四種方法已經逐步發展成為診斷試紙條，前景廣泛。
[0005]傳統膠體金速測卡的組裝過程為將聚氯乙烯襯板作為支撐載體固定於試劑卡槽下殼體中，然後樣品墊、複合膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙依次排列連接於襯板右側上表面，單一膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙依次排列連接於樣品墊左側襯板的上表面得到膠體金免疫層析速測卡。除了常用檢測標記試劑條，通常在明確檢測目標後，再組裝膠體金試劑條。而農藥殘留一般組分較多，在多組分分析時，效率低下。一種具有梯形、多組分標記快速檢測試劑條目前未有報導。

【發明內容】

[0006]本實用新型描述了一種用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，可針對樣品可能含有的不同主要多種目標，選用不同方向的襯板與樣品墊組合形成多向層析試劑條。主體結構包含:I為樣品墊，2為膠體金結合墊，3為襯板，4為硝酸纖維膜，5為檢測線梯度，6為對照線，7為吸水濾紙。上述各試紙條為獨立帶有卡扣的襯板，上面分別設有檢測線及對照線、膠體金結合墊、硝酸纖維膜、吸水濾紙;所述的樣品墊包括樣品吸收材料和底部固定材料，以及樣品吸收材料和底部固定材料所構成的卡槽。所述檢測線梯度上固載有檢測線，檢測線數目為2-6，所述梯形層析試紙條標記不少於2種標識物。
[0007]—種用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，其主體結構包含:襯板與樣品墊，所述襯板與樣品墊為獨立組件，所述襯板為組裝好的獨立組件，一般儲存於15°C以下冰箱保存。所述襯板組合方法但並不局限為:將聚氯乙烯底託作為支撐載體固定於試劑卡槽下殼體中，然後樣品墊、複合膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙依次排列連接於襯板上表面。所述襯板為獨立的兩組帶有卡扣的襯板，每組襯板上黏貼的組件包括:膠體金結合墊、硝酸纖維膜、吸水濾紙及或者其他本技術領域工作人員可以理解的。溶膠的穩定性介於小分子離子溶液和粗分散相之間，其顆粒作布朗運動，不易受重力影響而下沉。
[0008]所述的樣品墊包括樣品吸收材料和底部固定材料，以及樣品吸收材料和底部固定材料所構成的卡槽。所述樣品墊的原料為聚酯纖維膜。所述的多向膠體金免疫層析試紙條，膠體金結合墊的底層為聚酯纖維膜，在該聚酯纖維膜表面吸附有膠體金蛋白，所述硝酸纖維膜表面包被有抗原或抗體蛋白。所述樣品墊通過卡槽與兩個方向的襯板卡扣相連接。所述硝酸纖維膜上的包被抗原或抗體蛋白位於膜的兩端。所述的多向膠體金免疫層析試紙條，在所述硝酸纖維膜的兩端，分別存在至少一條所述抗原或抗體蛋白。硝酸纖維素膜上設有第一檢測線和第一對照線，硝酸纖維素上設有第二檢測線和第二對照線，第一檢測線上包被的是第一目標抗體，第二檢測線上包被的是第二目標抗體，第一對照線上包被的是第一目標純化抗體，第二對照線上包被的是第二目標純化抗體，抗體合適包被量分別為1.0-
2.0yg，複合金標探針合適抗體標記量均為10-20yg/mL。
[0009]所述的多向膠體金免疫層析試紙條，備用襯板卡扣與樣品墊卡槽契合，可與樣品墊通過卡槽相連接。
【附圖說明】

[0010]在接下來對實施例的描述中，本發明將更易於理解，僅通過實施例並參考附圖描述，其中:
[0011]圖1為所述梯形層析試紙條的剖面圖，其中I為樣品墊，2為膠體金結合墊，3為襯板，4為硝酸纖維膜，5為檢測線梯度，6為對照線，7為吸水濾紙。
【具體實施方式】
[0012]為使本實用新型的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合附圖對本實用新型的實施方式進行詳細的闡述。然而，本領域的普通技術人員可以理解，在本實用新型實施方式中，為了使讀者更好地理解本申請而提出了許多技術細節。但是，即使沒有這些技術細節和基於以下實施方式的種種變化和修改，也可以實現本申請各權利要求所要求保護的技術方案。
[0013]圖1為所述梯形層析試紙條的剖面圖，其中I為樣品墊，2為膠體金結合墊，3為襯板，4為硝酸纖維膜，5為檢測線梯度，6為對照線，7為吸水濾紙。8為第一檢測線，9為第二檢測線、10為第三檢測線、11為第四檢測線。
[0014]其中，膠體金結合墊底層為聚酯纖維膜，在該聚酯纖維膜表面吸附有膠體金蛋白；膠體金結合墊的底層為聚酯纖維膜，在該聚酯纖維膜表面包被有抗原或抗體蛋白；樣品墊的材質是聚酯纖維膜;吸水墊的材質為紙質複合纖維材料;底襯的材質為聚氯乙烯纖維或者玻璃纖維。
[0015]本實施方式的膠體金免疫層析試紙條的使用方法如下:將樣本溶液滴加在樣品墊I上，樣本溶液經過結合墊的滲透過濾。金蛋白均勻的梯級擴散，本實施方式通過將膠體金結合墊、吸附膠體金蛋白的膠體金結合墊以及樣品墊分層設置於底襯的中部，並將吸水墊設置於底襯的末端，使得膠體金免疫層析試紙條能夠梯級層析。且常被襯底儲存於冰箱，即時使用，從而可以增加膠體金層析的穩定性，提高工作效率。
【主權項】
1.一種用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，其特徵在於，主體結構包含:樣品墊(I)，膠體金結合墊(2)，襯板(3)，硝酸纖維膜(4)，檢測線梯度(5)，對照線(6)，吸水濾紙(7)；所述檢測線梯度上固載有檢測線，檢測線數目為2-6。2.根據權利要求1所述的用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，其特徵在於，所述樣品墊的原料為聚酯纖維膜。3.根據權利要求1所述的用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，其特徵在於，膠體金結合墊的底層為聚酯纖維膜，在該聚酯纖維膜表面吸附有膠體金蛋白。4.根據權利要求1所述的用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，其特徵在於，所述硝酸纖維膜表面包被有抗原或抗體蛋白。5.根據權利要求4所述的用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，其特徵在於，所述硝酸纖維膜上的包被抗原或抗體蛋白位於膜的兩端。6.根據權利要求1所述的用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，其特徵在於，所述梯形層析試紙條標記不少於2種標識物。
【專利摘要】一種用於檢測多組分農藥殘留的梯形層析試紙條，重點在於金蛋白均勻的梯級擴散，將膠體金結合墊、吸附膠體金蛋白的膠體金結合墊以及樣品墊分層設置於底襯的中部，並將吸水墊設置於底襯的末端，使得膠體金免疫層析試紙條能夠梯級層析。
【IPC分類】G01N33/558
【公開號】CN205384281
【申請號】CN201520981754
【發明人】賈明宏
【申請人】江蘇衡譜分析檢測技術有限公司
【公開日】2016年7月13日
【申請日】2015年11月30日