一種治療動物子宮內膜炎的藥物及其製備方法

2023-12-03 11:10:56

一種治療動物子宮內膜炎的藥物及其製備方法
【專利摘要】本發明公開一種治療動物子宮內膜炎的藥物，該藥物的藥物活性成分為牛至。通過將牛至用水蒸氣蒸餾，得到牛至揮髮油，再加入藥物輔料得到。本發明所用藥材來源於植物，其種植及加工對環境影響很小，對環境友好，製得的藥物在使用中對動物毒副作用小，無刺激性，避免了動物食品中抗生素的殘留，保證了食品安全。採用本發明的藥物治療奶牛子宮內膜炎，能抑殺子宮內膜炎致病菌，促進奶牛子宮機能的恢復，治療效果好，治癒率達86%以上，對母豬子宮內膜炎的治癒率達88%以上。
【專利說明】一種治療動物子宮內膜炎的藥物及其製備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於獸藥領域，具體涉及一種治療動物子宮內膜炎的藥物及其製備方法。【背景技術】
[0002]子宮內膜炎是導致奶牛、母豬繁殖障礙的主要疾病之一，在我國奶牛、母豬中極為常見多發，發病率牛為10%~30%、豬為30%~60%，因奶牛子宮內膜炎引起的奶牛不孕症佔生殖系統疾病的68.34%，患子宮內膜炎的奶牛不能正常發情、配種、受孕、產犢，從而延長胎間距，胎間距每延長一天，導致少產鮮奶和犢牛損失約合人民幣20多元(未計入飼養管理、飼草料、人工、醫藥等費用)，全國每年因奶牛子宮內膜炎少產鮮奶損失超過2億元，少產犢牛49.5萬頭，直接經濟損失約10億元。母豬因子宮內膜炎導致的損失就更加嚴重。目前用於治療子宮內膜炎藥物主要為抗菌藥物，臨床長期大劑量的子宮灌注或靜脈、肌肉注射導致致病菌耐藥性產生，使用劑量愈來愈大，臨床療效愈來愈低，同時還導致鮮奶中抗生素和藥物殘留嚴重超標，引起食品安全和公共衛生問題，各國研究機構都在探索新的防治藥物和治療方法。

【發明內容】

[0003]本發明的目的是解決現有技術的上述缺陷，提供一種療效好的治療動物子宮內膜炎的植物源藥物及其製備方法。
[0004]本發明實現上述目的所採用的技術方案如下:
一種治療動物子宮內膜炎的藥物，所述藥物的藥物活性成分為牛至。
[0005]進一步，所述牛至為牛至的揮髮油部位。
[0006]進一步，所述藥物的`劑型為灌注劑、軟膠囊、栓劑或泡騰片。
[0007]進一步,所述動物為奶牛或母豬。
[0008]進一步，所述治療動物子宮內膜炎的藥物的製備方法:牛至用水蒸氣蒸餾，得到牛至揮髮油，再加入藥用輔料。
[0009]本發明所用藥材來源於植物，其種植及加工對環境影響很小，對環境友好，製得的藥物在使用中對動物毒副作用小，無刺激性，避免了動物食品中抗生素的殘留，保證了食品安全。採用本發明的藥物治療奶牛子宮內膜炎，能抑殺子宮內膜炎致病菌，促進奶牛子宮機能的恢復，治療效果好，治癒率達86%以上，對母豬子宮內膜炎的治癒率達88%以上。
【具體實施方式】
[0010]以下結合實施例對本發明做進一步詳細說明。
[0011]實施例1
將牛至切成5cm左右的段，置於燒瓶中，用水蒸氣蒸餾製得揮髮油，將製得的揮髮油按每100ml揮髮油加入0.5g無水硫酸鈉，靜置24小時，過濾，棄去硫酸鈉，將揮髮油加入藥用麻油中，至體積1000ml (2mg牛至揮髮油/ml)，分裝，滅菌，即得牛至灌注液。[0012]實施例2
按比例取明膠-甘油-水(I: 0.3: 1)，明膠用35°C水浸泡1.5小時，升溫至50°〇，真空脫氣30分鐘，再將料液升溫至62°C左右，保溫2小時，加入甘油，充分攪拌後，真空脫氣30分鐘，膠液過濾待用。將依實施例1的方法製得的牛至揮髮油2000mg加入麻油中，使其濃度為2mg/ml。將濾好的膠液壓入制囊機中，調節油軸和鼓輪，使壓製成的膠帶厚度為
0.3_，在供料系統將牛至油麻油混合液通過噴體完成注料的同時，滾模旋壓完成膠囊的封囊，製成橢圓形、粒重為Ig的軟膠囊。
[0013]實施例3
取可可豆脂約130g置蒸發皿內，移置水浴上加熱，至可可豆脂約2/3熔融時，加入20g牛至揮髮油，攪拌均勻，取下蒸發皿，攪拌使全部熔融，注入塗過肥皂水的栓模中，凝固後整理啟模，取出栓劑，每粒重1.5g。
[0014]實施例4
將羥丙甲纖維素溶於60%乙醇中，丙烯酸樹酯II號溶於85%乙醇中，二者按1:1混合，將十六醇加熱熔融後加入到上述混合液中，隨加隨攪拌，最後加吐溫-80，製成混合黏合劑；取牛至揮髮油、碳酸氫鈉、微晶纖維素、乳糖，粉碎、過篩、混合，加混合黏合劑制粒，乾燥，整粒，製成鹼顆粒；取富馬酸粉碎，過篩，加混合黏合劑制粒，乾燥，整粒，製成酸顆粒；取酸鹼顆粒按比例混勻，加硬酯酸鎂壓片，每片含牛至揮髮油50mg的泡騰片。
[0015]一、藥理、毒性試驗
一)試驗用藥物為本發明的牛至灌注液。
[0016]二)半數致死量測定
1.預實驗
小白鼠:體重18±2 g，雌雄各半，10隻為一組，分為10組，分別按照不同劑量灌胃本發明的藥液，觀察出現的症狀並記錄死亡數，找出引起0%和100%死亡率劑量的所在範圍。
[0017]2.正式實驗
在預實驗所獲得的0%和100%致死量的範圍內，選用5個劑量(相鄰劑量間呈1:0.8等比數列)；
小白鼠:體重18±2 g，雌雄各半，10隻為一組，分為5組，灌胃，觀察給藥後動物的死亡情況，記錄實驗結果。應用簡化機率單位換算法計算LD5tlt5
[0018]LD50 = 1.628g / kg
LD50 的 95% 可信限=1.317 ~1.939 (g / kg)
依據毒性分級標準，本製劑為低毒。
[0019]三)刺激性實驗
1)兔點眼法
兔10隻，每隻左眼給藥，右眼對照。將實驗藥物0.05ml滴入左眼結膜囊內，右眼滴生理鹽水做對照。觀察24小時，觀察角膜有無紅腫、充血、流淚能否恢復等情況。
[0020]兔點眼法結果:實驗組和對照組相比無明顯分泌增加現象，實驗組眼結膜未見明顯的充血、流淚、紅腫等症狀。 [0021 ] 2 )小白鼠腹腔注射法
小白鼠20隻，雌雄各半，平均分為兩組，實驗組每隻腹腔注射0.1~03ml受試藥物，對照組每隻注射同等量生理鹽水，觀察小白鼠有無扭體反應(腹部牴觸臺面，軀體向一側歪扭)出現。
[0022]小白鼠腹腔注射法結果:實驗組和對照組均未見扭體反應出現。
[0023]二、治療母豬子宮內膜炎臨床實驗
收治蘭州豬場患子宮內膜炎母豬76例，每次一粒依實施例3製得的牛至油栓劑，隔日一次，連用兩次。最後一次用藥後的第10天觀察治療效果，治癒67例，用藥後炎症消失，子宮內無炎性分泌物和膿液排出，子宮恢復正常；有效6例，用藥後子宮炎症明顯緩解，子宮分泌物基本接近正常；無效3例，用藥後炎症未見緩解，子宮分泌物沒有減少。
[0024]三、治療奶牛子宮內膜炎臨床實驗 I試驗材料
1.1試驗動物
患臨床型子宮內膜炎的中國荷斯坦奶牛40頭，分別來自蘭州市城關奶牛場和花莊奶牛場。試驗前均未給任何藥物。試驗前對奶牛進行臨床檢查，包括體溫、脈搏、呼吸以及營養狀況等，並對其胎次、病程和治療次數進行統計。將病牛隨機分配到各試驗組中。
[0025]1.2試驗藥品
供試品:本發明的牛至灌注液。
[0026]對照藥物:青黴素G鈉，成都維爾京元亨藥業有限公司生產。批號:20131018。
[0027]2試驗方法
2.1試驗分組
將臨床診斷為患臨床型子宮內膜炎的奶牛40頭，隨機分為藥物治療組(試驗動物30頭)和青黴素對照藥物組(試驗動物10頭)。
[0028]2.1.1 「牛至灌注液」組
設高、中(推薦劑量)、低3個試驗組，每組試驗動物10頭。
[0029]2.1.2藥物對照組
青黴素G鈉對照藥物組，試驗動物10頭。
[0030]2.2用法用量
將藥液溫浴至接近體溫溫度，通過直腸把握法，用輸精器將藥液注入子宮。2次為一個療程，經2次未治癒者改用其他藥物治療。
[0031]2.2.1 「牛至灌注液」治療組
高、中(推薦劑量)、低3個試驗組每次分別子宮灌注150ml/次、100 ml/次和50 ml/次，隔日一次，連用2次，兩次為一個療程。
[0032]2.2.2青黴素藥物對照組
青黴素G鈉，子宮灌注。I次/日，每次800萬單位，注射用水溶解，連用2次。
[0033]2.3奶牛子宮內膜炎的診斷
2.3.1奶牛子宮內膜炎的臨床診斷
患臨床型子宮內膜炎奶牛臨床表現為:患病奶牛從陰門中排出粘性或粘膿性炎性分泌物，拱背、努責和屢做排尿姿勢，尾根及會陰部汙穢不潔，趴臥時排出量增多。有時雖未見到排出炎性分泌物，但發情時粘液 中混有膿汁、膿塊或膿絮。有時患病奶牛不發情或發情周期不規律。嚴重者患病奶牛體溫升高，精神沉鬱，食欲不振，反芻減弱，奶產量降低等表現。[0034]直腸檢查:子宮收縮反應減弱，子宮角、子宮體不同程度增大，子宮壁厚薄不均且質地軟硬程度不一致。
[0035]陰道檢查:用開膣器進行陰道檢查，陰道、膣部及子宮頸口可見炎性分泌物；取出開膣器時有時粘附有膿性炎性分泌物；非發情時，可見子宮頸口不同程度的開張及不同程度的充血。
[0036]2.3.2微生物學檢查
對收治的患臨床型子宮內I吳炎的奶牛進彳丁治療如後的微生物學檢查，治療如在臨床檢查時採集病料，治療後最後一次用藥後的第10天採集病料。
[0037](I)病料採集
按以下方法採集病料:採樣前先用濃度為0.2%的新潔爾滅溶液清洗患病奶牛外陰部，然後將滅菌輸精管按人工授精術式送入子宮頸，採取分泌物廣3 ml注入滅菌的空青黴素瓶內，封蓋，貼標籤，置4°C冰箱保存待檢。
[0038](2)病料初步鑑定
將被檢材料進行塗片，革蘭氏染色，鏡檢。
[0039](3)培養基製備
營養肉湯、血清肉湯、普通營養瓊脂、血清瓊脂、鮮血瓊脂、麥康凱瓊脂、伊紅美蘭瓊月旨、三糖鐵瓊脂、蛋白腖水和枸櫞酸鹽培養基等均按李健強等編寫的《獸醫微生物學實驗實習指導》中的方法製備。
[0040](4)細菌的分離培養
將所採集的病料接種於適宜的培養基平板上，37 V培養24~48 h，從中選出單個菌落，經染色塗片檢查與初次組織染色鏡檢觀察到的菌體形態和染色特性一致的單一菌，再挑選單個菌落接種於固體瓊脂斜面或鮮血瓊脂斜面2管和液體培養基2管，37 °C培養24h，取出即為純培養物。
[0041](5)鑑定
根據形態學觀察結果，進行細菌生化鑑定。將上述斜面培養物接種於各種不同的生理生化試驗培養基上，37 V孵育24~48 h，甚至可延長至72~96 h，觀察和記錄各項試驗結果，對分離菌做出鑑定。
[0042]2.3.3血液學檢查
對收治的患子宮內膜炎奶牛治療前後進行紅細胞(RBC)計數、白細胞(WBC)計數和紅細胞壓積(PCV)測定。治療前在臨床檢查時採集血樣，治療後最後一次用藥後的第10天採集血樣。
[0043]2.4奶牛子宮內膜炎的療效判定標準
對確診為患臨床型子宮內膜炎的奶牛按2.2的方法給藥後，最後一次用藥後的第10天觀察治療效果，在「以臨床檢查結果為準，結合實驗室檢查指標」的原則下，按以下療效判定標準進行治療效果評定。
[0044]治癒:從陰門無粘性或粘膿性分泌物排出。用開膣器打開陰道檢查，陰道、膣部及子宮頸口處均無炎性分泌物，非發情時，子宮頸口關閉，呈粉紅色(無充血)；直腸檢查，子宮的收縮、大小及質地恢復正常；停止治療後30天內恢復正常發情，且粘液正常，可進行人工受精。各種實驗室檢查均無異常。[0045]顯效:從陰門無粘性或粘膿性分泌物排出。用開膣器打開陰道檢查，陰道、膣部及子宮頸口處均無炎性分泌物，非發情時，子宮頸口關閉，呈粉紅色(無充血)。直腸檢查，子宮的收縮、大小及質地基本恢復正常；停止治療後30天內，未恢復正常發情，或雖然恢復發情但粘液仍不正常(混有膿絮或不夠清亮或韌性差)，不能進行人工受精。實驗室檢查，各種指標接近正常。
[0046]有效:臨床症狀明顯改善。陰門仍有炎性分泌物排出，但排出量明顯減少，且膿性分泌物比例降低。用開膣器打開陰道檢查，陰道、子宮頸口仍可見少量炎性分泌物存在；非發情時，子宮頸口仍開張且充血；直腸檢查，子宮的收縮反應增加、子宮體和子宮角變小，質地改善。實驗室檢查，大多數指標接近正常。
[0047]無效:各項檢查及臨床症狀未見好轉或有所加重。實驗室檢查，各種指標無明顯變化。
[0048]2.5統計學處理方法
各項檢測數據均用SPSS軟體(SPSSV12.0版)進行統計學處理。
[0049]3、結果與分析
3.1患子宮內膜炎奶牛臨床檢查情況
收治和確診的40頭患臨床型子宮內膜炎奶牛，經臨床檢查，心跳、呼吸基本正常，心跳為50~80次/min，呼吸為15~28次/min ;體溫基本正常(37.8~39.5°C )，其中3頭奶牛達到41°C。外觀營養狀況中等。
[0050]在受試的40頭奶牛中，年齡為3~10歲；頭胎經產奶牛11頭，2~4胎經產奶牛17頭；5胎以上經產12奶牛頭；病程最短25天，最長的可達55天，平均為40天。
[0051]3.2細菌的分離鑑定和抑`菌效果觀察
治療前後，對40頭患臨床型子宮內膜炎奶牛採集的病料進行細菌分離和鑑定，並對感染情況進行統計，結果分別見表1和表2。
[0052]由表1可見，大腸桿菌的感染率為92.5%、鏈球菌為82.5%、葡萄球菌為率72.5%、棒狀桿菌為40%、未鑑定菌為45%。大腸桿菌、鏈球菌和葡萄球菌仍是引起奶牛子宮內膜炎的主要病原菌。本試驗所分離的未鑑定菌是否具有致病性有待於進一步研究。
[0053]由表2可見，患病奶牛經本試驗藥物和對照藥物治療後，細菌感染百分率顯著降低(差異極顯著，/X0.01)。進一步統計分析顯示，高劑量組與中劑量組無顯著差異Gd>0.05)，高劑量組與低劑量組和對照組之間有極顯著差異(/X0.01);中劑量組與低劑量組有極顯著差異Gd〈0.01)，與對照組之間差異極顯著Od〈0.01);低劑量組與對照組之間無顯著差異0° >0.05)。
[0054]表1治療前患臨床型子宮內膜炎奶牛感染情況統計
【權利要求】
1.一種治療動物子宮內膜炎的藥物，其特徵在於，所述藥物的藥物活性成分為牛至。
2.根據權利要求1所述治療動物子宮內膜炎的藥物，其特徵在於，所述牛至為牛至的揮髮油部位。
3.根據權利要求1所述治療動物子宮內膜炎的藥物，其特徵在於，所述藥物的劑型為灌注劑、軟膠囊、栓劑或泡騰片。
4.根據權利要求1所述治療動物子宮內膜炎的藥物，其特徵在於，所述動物為奶牛或母豬。
5.權利要求1所述治療動物子宮內膜炎的藥物的製備方法，其特徵在於，牛至用水蒸氣蒸餾，得到牛 至揮髮油，再加入藥用輔料。
【文檔編號】A61K36/00GK103768104SQ201410051075
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年2月14日 優先權日:2014年2月14日
【發明者】苗小樓, 潘虎, 尚小飛, 王瑜, 陳化琦, 王學智 申請人:中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所, 中國農業科學院中獸醫研究所藥廠