含有1,3－氧硫雜戊烷類核苷的藥物組合物及其製備方法

2023-11-02 22:39:52

專利名稱：含有1,3－氧硫雜戊烷類核苷的藥物組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷(以下簡稱FTC)的(-)，(+)對映體混合物，其藥學上可接受的衍生物和其藥學上可接受的鹽在製備抗病毒藥物中的應用。本發明還涉及以FTC的(-)，(+)對映體混合物，其藥學上可接受的衍生物或其藥學上可接受的鹽作為有效成份的藥物組合物以及該藥物組合物的製備方法。
背景技術：
1，3-氧硫戊環類核苷是近年來新發現的具有優異的抗愛滋病毒(HIV)活性和抗B型肝炎病毒(HBV)活性的核苷類似物，用於愛滋病和B型肝炎抗病毒治療的主流藥物拉米夫定就屬於該類化合物。該類化合物中最新的一個被批准用於抗愛滋病病毒治療的藥物是商品名為Emtriva的順-2R-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷(以下簡稱(-)FTC)，另外商品名為Racivir的順-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷外消旋體(以下簡稱(±)FTC)正處於臨床研究階段。
(±)FTC是如下式所示的(-)FTC和(+)FTC的1∶1混合物。
美國專利5,210,085披露了具有抗HIV活性順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷((±)FTC)的製備方法，該專利同時披露了(±)FTC的抗HIV活性以及該化合物在愛滋病的治療和預防中的應用。美國專利5,210,085披露的方法只能製備順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的外消旋混合物，無法得到單一的對映體，而該專利披露的抗HIV活性也只是外消旋混合物(±)FTC的數據。
中國專利95118741.4披露了用酶拆分來製備順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的單一對映體(+)FTC和(-)FTC的方法，並且發現(-)FTC比(+)FTC具有更強的抗病毒活性雖然兩者都具有相似的低細胞毒性。該專利給出了純(-)FTC和純(+)FTC的抗HIV活性數據，並強調了用於製備藥物組合物的活性成份應該是純的(-)FTC或者是(+)FTC含量小於5％的(-)FTC和(+)FTC混合物。
美國專利6703396和美國專利6642245也披露了通過拆分(±)FTC來得到(-)FTC和(+)FTC的方法，同時指出(+)FTC含量小於5％的(-)FTC和(+)FTC混合物可以用於製備抗病毒藥物。
美國專利6114343和美國專利6069252披露了(+)FTC的製備方法，並且發現(+)FTC也有較好的抗病毒活性，並指出(+)FTC以及(-)FTC含量小於5％的(+)FTC和(-)FTC混合物可以用於製備藥物組合物。
在所有已經公開的報導中，雖然純的(-)FTC和(+)FTC的抗病毒活性數據是已知的，但是除了比例為1∶1的(-)FTC和(+)FTC的混合物(±)FTC之外，該兩種化合物以任意比例共同使用時的抗病毒活性是未知的。由於藥物間的相互作用，當兩種抗病毒化合物在共同使用時，它們的抗病毒活性可以是累加的，協同的或拮抗的。AAC《抗微生物藥劑和化學治療》1992，2423報導了(±)FTC，(-)FTC和(+)FTC在各種不同的細胞系中針對不同病毒株的抗愛滋病病毒活性。在PBM細胞中，(±)FTC，(-)FTC和(+)FTC針對HIV-1的半有效濃度(EC50)分別為0.03，0.008和0.84μM，在CEM細胞中，(±)FTC，(-)FTC和(+)FTC針對HIV-1的半有效濃度(EC50)分別為0.08，0.009和1.4μM，AAC《抗微生物藥劑和化學治療》1992，2689報導了(±)FTC，(-)FTC和(+)FTC在HepG2 2.2.15細胞系中的抗B肝病毒的半有效濃度(EC50)分別為0.083±0.05，0.01±0.005和0.96±0.5μM。分析所有這些活性數據可以發現，(±)FTC的EC50都遠高於將1∶1的(-)FTC和(+)FTC活性疊加所得到的數據，也遠遠高於(-)FTC EC50的兩倍，說明在1∶1的濃度條件下，(-)FTC和(+)C的抗病毒作用具有拮抗作用，(+)FTC的存在抑制了(-)FTC的抗病毒活性。
迄今為止任意比例的(-)FTC和(+)FTC的混合物的抗病毒活性未見報導過，任意比例的(-)FTC和(+)FTC在體內的相互作用也沒有被研究過，同時，(-)，(+)FTC對映體混合物的抗病毒活性隨著混合物中對映體的比例的改變而改變的趨勢以及相互作用模式的改變也是未知的。
綜上所述，現有技術明確強調只有純的(-)FTC，純的(+)FTC，外消旋混合物(±)FTC以及(+)FTC含量小於5％的(-)FTC和(+)FTC混合物和(-)FTC含量小於5％的(-)FTC和(+)FTC混合物能夠用於製備藥物組合物。迄今為止，只有純的(-)FTC和(+)FTC的抗病毒活性和比例為1∶1的(-)FTC和(+)FTC的混合物(±)FTC的抗病毒活性是已知的，而(-)FTC和(+)FTC以其他任意比例混合使用時的抗病毒活性未見報導。現有的數據顯示，在1∶1的濃度條件下，(-)FTC和(+)FTC的抗病毒活性是相互拮抗的，但是其他任意比例的(-)FTC和(+)FTC共同使用時的相互作用也還未見過，其抗病毒作用受該兩個化合物相互作用的影響也是未知的。
雖然目前臨床上使用純的(-)FTC作為抗病毒藥物，但由於(-)FTC需要通過酶拆分或手性柱層析的方法來製備，工藝複雜，生產成本很高。而(±)FTC雖然其生產成本較低，但由於它的抗病毒活性也較低，臨床使用的劑量很大，臨床試驗中使用的最高劑量達每天600毫克，大大增加了患者身體代謝藥物的負擔。由於愛滋病病人需要終生服藥，肝炎病人的治療周期也很長，所以抗病毒藥物需要具有成本低，藥效高的和毒性低的特點。在低成本條件下提供高效的1，3-氧硫戊環核苷類抗病毒藥物仍舊是一個巨大的挑戰。

發明內容
本發明提供了一種製備(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物的低成本的簡便方法，並且意外地發現相對於FTC的外消旋混合物(±)FTC，這種混合物具有更優異的抗病毒活性，其抗病毒活性沒有因為(-)FTC和(+)FTC的相互作用而降低。本發明還提供了一種以(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物作為有效成份的用於抗病毒治療的藥物組合物以及製備所說的藥物組合物的方法。
本領域的普通技術人員都應知道，FTC上的鹼基可以和有機酸或無機酸形成鹽，FTC的5』-OH可以形成羧酸酯或磷酸酯等衍生物。上述鹽或者衍生物在體內能夠直接或間接地轉化成母體化合物FTC或者是FTC的有抗病毒活性的代謝產物。因此(-)FTC含量大於50％的(-)，(+)FTC混合物的藥用鹽及藥用衍生物也包括在本發明的範圍內。
利用本發明提供的抗病毒活性物質進行治療時，雖然活性物質可以直接給藥，但通常是以含有有效成分的藥物製劑形式給藥的。本發明還提供了以為(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物或其藥用鹽或藥用衍生物為有效成分的藥物製劑，同時本發明還提供了製備這些製劑的方法。
發明詳述有效成份的製備本發明首先提供了一種製備(-)FTC富集的(-)FTC和(+)FTC的混合物的方法。
FTC的模擬糖環部分的結構可以用下式來代表，其編號方式如圖所示 在該結構中，2-位和5-位是兩個手性中心，整個合成工藝的關鍵和難點就是選擇性的構建這兩個手性中心。關於5-位的手性中心構建已有很多的文獻報導，而2-位的手性中心構建一直是FTC立體異構體合成中的關鍵問題。
我們採用了如下一條反應路線來合成(-)FTC或富集了(-)FTC的FTC對映體混合物；各步反應描述如下步驟A在芳香烴溶劑(例如甲苯)中將特戊醯氯與L-型扁桃酸反應生成L-型扁桃酸的2-羥基特戊酯，然後再加入二甲亞碸或草醯氯將其轉化成醯氯，得到的醯氯同1，4-丁烯二醇反應生成如結構式所示的二酯(I)。
步驟B將步驟A中生成的二酯(I)溶於醇類溶劑中，在-78℃到室溫這個溫度範圍內通入臭氧，在二酯完全消耗完後，停止通入臭氧，用適當的還原劑(例如硫脲，二甲基硫醚)還原臭氧加成物得到如結構式(II)所示的醛。
臭氧化反應通常需要在極低的溫度(低於-70℃)下進行，但我們所選用的溶劑和反應物系統使得反應可以在0℃到室溫這個溫度範圍內進行，大大降低了對反應裝置的要求，能夠適用於工業化生產。
反應流程步驟C將步驟B中得到的乙醇醛衍生物(II)在質子酸或路易斯酸的催化下與巰基乙酸反應，反應選擇在芳香烴溶劑中進行，並通過加熱共沸除去水分。在此條件下，反應高產率地生成如結構式(III)所示的2-位構型不同的1，3-氧硫雜戊烷-5-酮的非對映異構體的混合物。
步驟D將步驟3C中得到的1，3-氧硫雜戊烷-5-酮的非對映異構體的混合物在由甲苯和石油醚組成的混合溶劑中分級結晶得到2-L構型的單一異構體(IIIA)或者是IIIA富集的III的兩個非對映體的混合物。一般第一次重結晶後，IIIA的含量可以達到75％左右，兩次重結晶後IIIA的含量可以達到90％左右，然後IIIA的含量達到一個平臺，每增加一次重結晶可以提高IIIA的含量1-2％。
步驟E將步驟3D中得到的2-L構型的單一異構體(IIIA)或者是IIIA富集的III的兩個非對映體的混合物用還原劑(優選三叔丁氧基氫化鋁鋰)還原，再加入乙酸酐醯化得到相應的2-L構型的5-乙醯氧基-1，3-氧硫雜戊烷(IV)或者是2-L構型的5-乙醯氧基-1，3氧硫雜戊烷(IV)富集的兩個IV在2位的非對映體的混合物。
步驟F將步驟E中得到的5-乙醯氧基-1，3-氧硫雜戊烷(IV)或IV富集的兩個IV在2位的非對映體的混合物與用六甲基二矽胺烷保護的5-氟胞嘧啶在三甲基碘矽烷或三甲基碘矽烷基三氟甲磺酸酯的催化下縮合得到2-位是L構型的一對順反異構體V或者是2-L構型化合物富集的四個立體異構體的混合物。
步驟G將步驟E中得到的一對順反異構體或者是2-L構型化合物富集的四個立體異構體的混合物在甲醇中進行分級結晶。反式異構體在室溫下結晶析出，過濾除去後得到2-L順式異構體(VI)或者是VI富集的兩個順式異構體的混合物。
步驟H將步驟3G中得到化合物(VI)溶於甲醇中後用正丁胺水解除去扁桃酸殘基即得到(+)FTC，VI富集的兩個順式異構體的混合物在正丁胺除去扁桃酸殘基即得到(-)FTC富集的(-)FTC和(+)FTC的混合物。
需要指出的是，從步驟E到步驟H的過程中，2位的構型不會發生變化，最終得到的(-)FTC和(+)FTC的混合物中(-)FTC的含量是由步驟D得到的IIIA的含量決定的。
運用上述的方法雖然可以得到純的(-)FTC單一對映體，但這需要用多次重結晶的方法分離得到純的化合物IIIA。同製備純的IIIA相比，製備IIIA含量在90％左右的IIIA與其2-D構型的非對映體混合物則要簡便的多，由於重結晶次數的減少，大大降低了溶劑的使用量，減少了廢溶劑的排放所帶來的汙染，同時產率成倍地提高。因此，如果(-)FTC富集的(-)FTC和(+)FTC的混合物所具有的抗病毒活性並與純的(-)FTC接近，則利用(-)FTC富集的(-)FTC和(+)FTC的混合物作為抗病毒劑在經濟上是能節省的而且在環境保護上也是有利的。
利用產生HBV的HepG2 2.2.15細胞，測定了(-)FTC含量分別為100％，95％，90％和85％，和50％的(-)FTC和(+)FTC對映體混合物的抗B型肝炎病毒活性，我們發現上述(-)FTC含量大於50％FTC混合物的抗HBV活性遠高於外消旋的FTC，而接近於純的(-)FTC。這個結果說明了(-)FTC含量大於50％FTC混合物可以用做抗病毒治療劑，其療效應該接近於純的(-)FTC而遠遠高於消旋的(±)FTC。
雖然本發明的一個方面提供了製備(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物的一個方法，但是用別的方法得到的(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物也應該有相同的抗病毒活性，所以用別的方法得到的(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物在製備抗病毒藥物上的應用也在本專利的範圍之內。
本發明的第二個方面提供了一種藥物組合物，該藥物組合物含有(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物或其藥用鹽或藥用衍生物以及一種或多種藥物上可接受的載體。
所說的藥物組合物可以通過任何已知的方式給藥，包括口服；肌肉，皮下和靜脈注射；通過口腔，舌下，鼻，直腸和陰道的局部給藥等方式。
適合於口服的藥物組合物可以是固體製劑如片劑，膠囊劑，粉劑，顆粒劑，也可以是液體製劑如乳液，懸浮液，溶液等。口服的片劑，膠囊劑可含有常規的賦型劑如粘合劑，潤滑劑，崩解劑，填充劑或潤溼劑。口服的固體製劑還可以製成緩釋劑型。
優選的劑型是口服製劑，優選的口服製劑包括片劑和膠囊。
以下實施例可以幫助更好地說明本發明，但這些實施例並不限制本發明的範圍。
實施例11，4-二(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧基)-2-丁烯(I) L-扁桃酸100克與特戊醯氯100毫升在200毫升甲苯中在通入氮氣的情況下在50℃反應8個小時。將得到的反應液冷卻到室溫後加入DMF 10毫升，然後緩慢滴加氯化亞碸。反應在35℃持續三小時後真空濃縮得到油狀液體。將該油狀液體用二氯甲烷500毫升稀釋後緩慢加入到裝有1，4-丁烯二醇28ml，三乙胺110ml，DMAP0.4g和二氯甲烷1600ml的三口瓶中，滴加的過程中持續攪拌，並保持反應溫度在10℃以下。滴加完畢後攪拌半小時後向反應液中加入飽和碳酸氫鉀水溶液40ml，繼續攪拌半小時後，用5％的鹽酸(1000ml)洗3次，0.1M碳酸鈉(1000ml)洗1次，水(1000ml)洗1次後，旋轉蒸發抽乾溶劑得黃色油狀液體180ml。
1H-NMR(CDCl3)1.28(S，9H)，4.62(t，J＝1.6Hz，2H)，5.61(t，J＝4Hz，1H)，5.86(s，1H)，7.27-7.47(m，5H)。
實施例22-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧基)乙醛(II) 在帶有尾氣吸收裝置的三口圓底燒瓶中加入1，4-二(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧基)-2-丁烯(I)180毫升和甲醇2000毫升。用冰鹽浴冷卻反應液到-5℃後通入臭氧並保持反應溫度在10℃以下。通入臭氧8個小時後薄層層析(矽膠板，用乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2展開，1％的硫酸甲醇溶液顯色)顯示反應原料已經消失。通入氮氣10分鐘清除臭氧後，啟動攪拌，用冰水浴將反應液到冷卻到5℃後以每分鐘1克的速度加入硫脲12.6g，加完硫脲後，反應攪拌過夜，過濾除去固體後，濾液在真空下濃縮除去甲醇後再加入二氯甲烷500ml，用水500ml洗滌2次除去殘留硫脲後，抽乾得黃色油狀液體150克。1H-NMR(CDCl3)1.29(s，9H)，4.62(s，2H)，6.01(s，1H)，7.27-7.55(m，5H)，9.52(s，1H)。
實施例32-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-1，3-氧硫雜戊烷-5-酮(III) 將2-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧基)乙醛(II)150克，巰基乙酸35.8ml，對甲苯磺酸1克和甲苯800ml加入到一個2000毫升的圓底燒瓶中。裝上帶有冷凝管的分水器後反應用油浴加熱到120℃回流兩個小時，其間共有18毫升水被分出。薄層層析(矽膠板，用乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2展開，1％的硫酸甲醇溶液顯色)顯示反應已經完全。將反應液冷卻到室溫後用1M碳酸鈉1000ml洗3次，旋轉蒸發除去溶劑後得到黃色油狀液體200毫升，將其加熱溶於1000毫升異丙醇∶水的6∶1的混合溶劑中，然後放置於5℃12小時白色晶體析出，過濾得到固體180克，核磁氫潛顯示該固體是兩個非對映體的1∶1混合物。
實施例42-L-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-1，3-氧硫雜戊烷-5-酮(IIIA) 將2-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-1，3-氧硫雜戊烷-5-酮(III)180克在60℃溶於600毫升甲苯∶石油醚＝2∶1的混合溶劑中，溶液放置於室溫8小時後過濾收集析出的晶體得到120克白色固體，1H-NMR顯示IIIA的含量約為75％。在同樣條件下重複重結晶一次後得到白色晶體78克，1H-NMR顯示IIIA的含量約為90％。重複上述重結晶過程直到1H-NMR顯示IIIA的含量大於97％後得到26克白色固體。
1H-NMR(CDCl3)1.29(s，9H)，3.54(s，2H)，4.28-4.43(m，2H)，5.52-5.55(m，1H)，5.90(s，1H)，7.38-7.49(m，5H)。
實施例52-L-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-5-乙醯氧基-1，3-氧硫雜戊烷(IV) 向一個2L的三口燒瓶中加入氫化鋰鋁6.0g，無水四氫呋喃228毫升，在0℃和氮氣保護下滴加叔丁醇37ml和四氫呋喃82ml的混合物。滴加速度為每分鐘2ml。滴加完畢後移走冰浴，待反應體系的溫度上升到室溫後再將反應裝置置於30度的水浴中，繼續攪拌反應，直至反應體系中停止釋放氣泡。換上冰水浴，在加液漏鬥中加入2-L-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-1，3-氧硫雜戊烷-5-酮(IIIA)26克和THF75ml的混合物，以每秒鐘1滴的速度加入此混合物，加完後繼續攪拌反應2小時，薄層層析(矽膠板，乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4展開，1％的硫酸的甲醇溶液顯色)顯示原料已經消耗完全。向加液漏鬥中加入乙酸酐120ml，在冰水浴中以每秒鐘2-3滴的速度加入到反應物中，繼續攪拌反應過夜，薄層層析顯示反應完畢。加入硅藻土100克，攪拌反應半小時，混合物過濾，濾液用飽和碳酸氫鉀(500ml)洗滌3次，無水硫酸鈉乾燥後，真空除去溶劑後得淡綠色油狀液體30毫升。
實施例6順-2-L-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)1，3-氧硫雜戊烷(V) 將5-氟胞嘧啶10g，六甲基二矽烷50ml，硫酸銨固體少許和無水1，2-二氯乙烷260ml在氮氣保護下加熱回流約四個小時後白色固體消失形成澄清溶液。將此溶液冷卻到0℃後加入2-L-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-5-乙醯氧基-1，3-氧硫雜戊烷(3-IIA)30毫升。在氮氣保護下加入三甲基碘矽烷10.8毫升。將反應液攪拌過夜並讓反應液的溫度逐漸升到室溫。用亞硫酸氫鈉水溶液200毫升洗滌反應液後在真空下除去溶劑得到50克糖漿狀棕色殘餘物。將該殘餘物加熱溶於100毫升甲醇後冷卻至室溫，放置12小時後有固體析出。過濾除去固體後將母液濃縮三分之一，放置於室溫12小時又後有固體析出。過濾除去固體，母液在真空下除去甲醇，殘餘物溶於100毫升乙酸乙酯後放置於-20℃冷凍結晶，過濾得到白色固體14克，收率為43％，熔點56-58℃，[α]D20+97.8°(c0.45，二氯甲烷)。
1H-NMR (CDCl3)1.29(s，9H)，3.19(d，J＝12Hz，1H)，3.43(dd，J＝5.2，12.8Hz，1H)，4.25(ddd，J＝4，12.4，16.4Hz，2H)，5.46(br s，NH，1H)，5.90(S，1H)，6.27(d，J＝4.8Hz，1H)，7.18(br s，NH，1H)，7.27-7.51(m，5H)。
實施例7順-2-L-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷(-)FTC。
將順-2-L-(2』-特戊醯氧基-L-扁桃醯氧甲基)-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)1，3-氧硫雜戊烷(V)14克溶於100甲醇中，然後加入正丁胺10毫升，室溫攪拌反應2小時。真空除去溶劑，將所得殘餘物用石油醚洗滌後，所得灰色固體。用甲醇重結晶，得到順-2-L-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)1，3-氧硫雜戊烷(FTC)5.8克，收率為89％。熔點184-186℃，旋光度「α]D20-119.8°(c 0.98，甲醇)。手性HPLC分析測定其對映體純度為98.5％。HPLC分析柱為Chiral Pak AS(Dajcel chemical industries Ltd)，流動相為異丙醇，流速0.5ml/min，(-)FTC的保留時間為9.2min，(+)FTC的保留時間為16.5min。
實施例8(-)FTC含量為91.3％的(-)FTC和(+)FTC的混合物實施例4中得到的IIIA含量約為90％的混合物26克用實施例5-7中所描述的相同的製備方法得到固體5.3克，旋光度[α]D20-96.8°(c0.83，甲醇)，手性HPLC分析測定其對映體純度為91.3％。HPLC分析柱為Chiral Pak AS(Daicel chemical industries Ltd)，流動相為異丙醇，流速0.5ml/min，(-)FTC的保留時間為9.2min，(+)FTC的保留時間為16.5min。
實施例9(-)FTC含量超過50％的(-)FTC和(+)FTC混合物的抗HBV活性(-)FTC含量為95％，90％和85的％(-)FTC和(+)FTC混合物用實施例8所描述的方法製得。
產生HBV的HepG2 2.2.15細胞系被維持在最小量的必需的介質中，在37℃潮溼的含有5％的CO2和95％的空氣的條件下進行培養，將2.2.15細胞接種到25cm2的培養皿中。(-)FTC含量為95％，90％和85的％(-)FTC和(+)FTC混合物以及純的(-)FTC和(±)FTC在接種後3大加到介質中，每種有效成分重複三組，細胞在藥物存在的條件下生長12天，介質每3天換一次，培養結束後，介質離心2000g10分鐘，並向上清液加入PEG(Mr，8000)最終濃度為10％。病毒通過離心沉澱，沉澱物重新懸浮在原體積1％的TNE中，懸浮物加入1％的SDS和蛋白酶K0.5mg/ml，然後在0.8％的瓊脂糖凝膠上電泳分離，之後轉移到雜交膜上，用32P標記的HBV DNA探針雜交30分鐘，再自動放射顯影，自放射顯影調帶的強度用掃描密度儀定量測定。在獨立的重複實驗中，HBV特異的DNA的量是相似的，EC50被定義為抑制HBV DNA在介質中產生50％的濃度，這個值是通過抑制百分數同藥物濃度作圖得到的。所試樣品的EC50列於表一中表一有效成分 EC50(μM)(-)FTC 21.5±5.695％(-)FTC 18.3±6.590％(-)FTC 28.6±4.185％(-)FTC 23.8±11.3(±)FTC115.7±12.1實施例10膠囊劑製劑配方活性成分200mg
微晶纖維素 25mg聚乙烯吡咯烷酮 75mg硬脂酸鎂 5mg將上述配方中的各成分混合填充到硬明膠膠囊中製得膠囊劑，其中活性成分為(-)FTC含量大於50％的(-)FTC和(+)FTC的混合物。
實施例15片劑製劑配方活性成分200mg微晶纖維素 75mg甘醇酸澱粉鈉25mg硬脂酸鎂5mg膠態二氧化矽2mg製備方法將活性成分2.0kg，微晶纖維素0.75kg，甘醇酸澱粉鈉0.25kg和膠態二氧化矽20g分別過篩後混合，用適當的混合器混合30分鐘後再加入硬脂酸鎂50g，繼續混合5分鐘後用旋轉壓片機幹壓制粒。
其中所說的活性成分為(-)FTC含量大於50％的(-)FTC和(+)FTC的混合物。
權利要求
1.順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的對映體混合物，其藥學上可接受的衍生物或其藥學上可接受的鹽在製備抗病毒藥物中的應用，所說的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的對映體混合物是(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷和(+)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的混合物，其特徵在於(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於50％並且不多於95％的。
2.根據權利要求1，所說的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷中(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於75％。
3.根據權利要求1，所說的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷中(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於90％。
4.根據權利要求1，所說的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷中(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於93％。
5.一種以順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷，其藥學上可接受的衍生物或其藥學上可接受的鹽作為有效成份的藥物組合物，所說的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷是(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷和(+)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的混合物，其特徵在於(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於50％並且不多於95％的。
6.如權利要求5中所述的藥物組合物，其中所述的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷中(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於75％。
7.如權利要求5中所述的藥物組合物，其中所述的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷中(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於90％。
8.如權利要求5中所述的藥物組合物，其中所述的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷中(-)順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷的含量不少於93％。
9.如權利要求5中所述的藥物組合物，所述的藥物組合物含有順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷在藥學上可接受的鹽。
10.-種製備權利要求5-9任-項中所述的藥物組合物的方法，該方法包括將作為有效成份的順-2-羥甲基-5-(5』-氟胞嘧啶-1』-)-1，3-氧硫雜戊烷，其藥學上可接受的衍生物或其藥學上可接受的鹽與一種或多種藥學上可接受的載體混合。
全文摘要
本發明提供了(－)順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的含量大於50％的順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的對映體混合物，其藥學上可接受的衍生物或其藥學上可接受的鹽。本發明還提供了上述對映體混合物的抗HIV和HBV的活性並意外地發現(+)順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的存在不會影響(－)順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的抗病毒活性。本發明還涉及(－)順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的含量大於50％的順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的對映體混合物，其藥學上可接受的衍生物或其藥學上可接受的鹽在製備抗病毒藥物中的應用，及以製備(－)順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的含量大於50％的順－2－羥甲基－5－(5』－氟胞嘧啶－1』－)－1，3－氧硫雜戊烷的對映體混合物，其藥學上可接受的衍生物或其藥學上可接受的鹽作為有效成份的藥物組合物的方法。
文檔編號A61P31/12GK1795861SQ20041006588
公開日2006年7月5日 申請日期2004年12月24日 優先權日2004年12月24日
發明者袁建棟 申請人:博瑞生物醫藥技術(蘇州)有限公司