消渴通脈製劑及質量控制方法
2023-10-09 23:39:39
專利名稱：消渴通脈製劑及質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物的製備工藝及質量控制方法，特別是涉及消渴通脈製劑的製備方法及質量控制方法。
背景技術：
已有國家標準的針對II型糖尿病治療藥物有消渴靈片、消渴丸、十味降糖顆粒、枸杞消渴膠囊、生津消渴膠囊等，大多數處方針對糖尿病的三多症候組方，對於糖尿病引起的併發症少有關注。為了發揮中藥在糖尿病治療領域的特色，製成治療II型糖尿病周圍神經病變的中藥消渴通脈製劑，處方由黃芪、地黃、白芍、麥冬、葛根、丹參、水蛭、黃芩、黃連、玄參、川芎、川牛膝為活性成分。功能主治為益氣養陰清熱，活血化瘀通絡。主治消渴病，氣陰兩虛，兼血瘀症。症見倦怠、乏力、口乾、肢體麻木、疼痛，甚則青紫潰破等。適用於II型糖尿病周圍神經病變。
發明內容
本發明的目的是提出一種適用於II型糖尿病周圍神經病變治療的藥物消渴通脈製劑的製備方法和質量控制方法，本消渴通脈製劑的治療用途為II型糖尿病周圍神經病變、心腦血管粥樣硬化、高血壓、高脂血症。
本發明由以下技術內容構成 將處方配比為黃芪129～516g、地黃129～516g、白芍86～344g、麥冬86～344g、葛根86～344g、丹參86～344g、水蛭51.5～206g、黃芩64.5～258g、黃連64.5～258g、玄參86～344g、川芎64.5～258g、川牛膝64.5～258g的藥材組合與適宜的藥學可接受輔料；採用藥學適宜的常規工藝，經過提取，濃縮，乾燥，制粒，壓片，硬膠囊填充，軟膠囊填充等必要工序組合，可以製成但不僅限於口服液、口服膏劑、普通片、泡騰片、口崩片、咀嚼片、硬膠囊、軟膠囊等藥學適宜劑型。
優選處方配比黃芪258g、地黃258g、白芍172g、麥冬172g、葛根172g、丹參172g、水蛭103g、黃芩129g、黃連129g、玄參172g、川芎129g、川牛膝129g。
消渴通脈口服液製法為處方十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.30(80℃熱測).加水至1000ml。冷藏48小時，濾過，濾液調PH值為7.0，加水至1000ml，灌封，滅菌，即得。
消渴通脈的固體製劑製法為以上十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.15～1.18(70℃)噴霧乾燥(進風溫度150～170℃，出風溫度75～120℃)製成浸膏粉，或將濾液濃縮成相對密度為1.24～1.28(80℃熱測)稠膏烘乾粉碎成浸膏粉；浸膏粉與適宜輔料混勻，制粒，乾燥後，可以製成顆粒、普通片、硬膠囊、泡騰片、口崩片等適宜的固體製劑。
本消渴通脈製劑的質量標準主要包括以下方法中的一種或幾種 鑑別取本品口服液或固體製劑加適量水溶解或其它適宜方法製備後依照以下方法進行鑑別試驗。
黃芪鑑別(1)取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加水飽和的正丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇層，加氨試液25ml提取一次，取正丁醇層，水浴蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置分層的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
白芍鑑別(2)取芍藥苷對照品，加甲醇製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍紫色斑點。
葛根鑑別(3)取葛根素對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-甲醇-水(7∶2.5∶0.25)為展開劑，展開，取出，晾乾，在濃氨蒸氣中放置10分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
丹參鑑別(4)取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加乙醚提取三次，每次10ml，合併乙醚層，揮去溶劑，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶3∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
黃芩鑑別(5)取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加乙醚15ml，振搖提取，棄去乙醚液，水液滴加鹽酸調節pH值至2～3，加乙酸乙酯25ml振搖提取，分取乙酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以醋酸乙醋-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
黃連鑑別(6)取鹽酸小檗鹼對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。另取黃連對照藥材0.5g，加甲醇10ml，冷浸過夜，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液、對照藥材溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。
含量測定(1)精密量取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加水飽和的正丁醇提取次，每次10ml，合併正丁醇提取液，加氨試液洗滌2次，分別為25ml、10ml，棄去氨水層，正丁醇層水浴蒸乾，殘渣加水3～5ml使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱(內徑1cm，長12cm)，以水50ml洗脫，棄去洗液，再用40％乙醇30ml洗脫，棄去40％乙醇洗脫液，繼用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，用甲醇溶解並轉移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液2μl，對照品溶液1μl與5μl，分別交叉點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層掃描法進行掃描，波長λS＝505nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
(2)葛根素丹參酮IIA照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水(85∶15)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數按葛根素峰計算，應不低於2000，按丹參酮IIA計，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱葛根素和丹參酮IIA對照品適量，加甲醇溶解製成含葛根素80μg/ml丹參酮IIA 16μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或其它製劑適量(約相當於丹參0.35g)，精密稱定，置於50mL量瓶中，加甲醇至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液. 測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
(3)鹽酸小檗鹼黃芩苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀(45∶55)為流動相；檢測波長為264nm。理論板數按鹽酸小檗鹼峰計算，應不低於2500，按黃芩苷峰計算，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱取鹽酸小檗鹼黃芩苷對照品適量，加流動相溶解製成含鹽酸小檗鹼65μg/ml黃芩苷120μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或其它製劑適量(約相當於黃芩0.12g)，精密稱定，置於100mL量瓶中，加流動相至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加流動相至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液. 測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
(4)黃芪甲苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水(75∶25)為流動相；蒸發光散射檢測器漂移管溫度90℃；氮氣流量2.0L/min。
對照品溶液的製備取黃芪甲苷對照品對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取本品口服液3ml或其它製劑適量(約相當於黃芪0.8g)，加水30ml溶解，用水飽和的正丁醇提取4次(30ml、30ml、20ml、15ml)，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加甲醇溶解，移置5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液。
測定法精密吸取對照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。
(5)芍藥苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸(35∶65∶0.1)為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，加流動相溶解製成含芍藥苷7μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或取其它製劑適量(約相當於白芍0.17g)，精密稱定，置於50mL量瓶中，加流動相至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加流動相至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液. 測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
基於藥學專業人員的常識，可以對本發明做出不違背本發明實質的改進與提高，也屬於本發明範疇。
具體實施例方式 實施例1 消渴通脈口服液處方十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.30(80℃熱測).加水至1000ml。冷藏48小時，濾過，濾液調PH值為7.0，加水至1000ml，灌封，滅菌，即得。
實施例2黃芪258g、地黃258g、白芍172g、麥冬172g、葛根172g、丹參172g、水蛭103g、黃芩129g、黃連129g、玄參172g、川芎129g、川牛膝129g。
處方十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過；加入適量增粘劑、矯味劑，混勻，減壓濃縮至取本品10g，加水20ml稀釋後，依法測定(中國藥典2005年版一部附錄VII A)的相對密度為1.12～1.14，濾過，放冷，製成口服膏劑。
實施例3處方黃芪258g、地黃258g、白芍172g、麥冬172g、葛根172g、丹參172g、水蛭103g、黃芩129g、黃連129g、玄參172g、川芎129g、川牛膝129g。
製法以上十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.15～1.20(70℃)噴霧乾燥(進風溫度150～170℃，出風溫度75～120℃)製成浸膏粉，取澱粉185g及上述藥物浸膏粉混勻，加聚乙二醇細粉9g，硬脂酸鎂6g，混勻，直接粉末壓片，共製成1000片。
實施例4處方黃芪258g、地黃258g、白芍172g、麥冬172g、葛根172g、丹參172g、水蛭103g、黃芩129g、黃連129g、玄參172g、川芎129g、川牛膝129g。
製法以上十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，將濾液濃縮成相對密度為1.24～1.28(80℃熱測)稠膏，烘乾粉碎成浸膏粉，取澱粉100g混勻，置沸騰制粒機中，用聚維酮K30做粘合劑制粒，加二氧化矽9g，硬脂酸鎂6g，混勻，膠囊填充，共製成1000粒。實施例5處方黃芪258g、地黃258g、白芍172g、麥冬172g、葛根172g、丹參172g、水蛭103g、黃芩129g、黃連129g、玄參172g、川芎129g、川牛膝129g。
製法以上十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.15～1.18(70℃)噴霧乾燥(進風溫度150～170℃，出風溫度75～120℃)製成浸膏粉，與糊精250g、水溶性澱粉450g、甜蜜素適量混勻，制粒，乾燥，分裝，製成顆粒劑。
實施例6處方黃芪258g、地黃258g、白芍172g、麥冬172g、葛根172g、丹參172g、水蛭103g、黃芩129g、黃連129g、玄參172g、川芎129g、川牛膝129g。
製法以上十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.15～1.18(70℃)噴霧乾燥(進風溫度150～170℃，出風溫度75～120℃)製成浸膏粉，與食用植物油600g、聚乙二醇400 120g、丙二醇8g及上述黨參黃芪浸膏粉共研磨成膏體，填充製成軟膠囊，共製成1000粒。
實施例7取實施例1的口服液進行質量標準方法試驗 (1)取消渴通脈口服液20ml，加水飽和的正丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇層，加氨試液25ml提取一次，取正丁醇層，水浴蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置分層的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)取芍藥苷對照品，加甲醇製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍紫色斑點。
(3)取葛根素對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-甲醇-水(7∶2.5∶0.25)為展開劑，展開，取出，晾乾，在濃氨蒸氣中放置10分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
(4)取消渴通脈口服液20ml，加乙醚提取三次，每次10ml，合併乙醚層，揮去溶劑，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶3∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(5)取消渴通脈口服液20ml，加乙醚15ml，振搖提取，棄去乙醚液，水液滴加鹽酸調節pH值至2～3，加乙酸乙酯25ml振搖提取，分取乙酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以醋酸乙醋-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(6)取鹽酸小檗鹼對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。另取黃連對照藥材0.5g，加甲醇10ml，冷浸過夜，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液、對照藥材溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。
含量測定(1)精密量取本品20ml，加水飽和的正丁醇提取5次，每次10ml，合併正丁醇提取液，加氨試液洗滌2次，分別為25ml、10ml，棄去氨水層，正丁醇層水浴蒸乾，殘渣加水3～5ml使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱(內徑1cm，長12cm)，以水50ml洗脫，棄去洗液，再用40％乙醇30ml洗脫，棄去40％乙醇洗脫液，繼用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，用甲醇溶解並轉移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液2μl，對照品溶液1μl與5μl，分別交叉點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層掃描法進行掃描，波長λS＝505nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
本品含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少於0.05mg/ml。
(2)葛根素丹參酮IIA照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水(85∶15)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數按葛根素峰計算，應不低於2000，按丹參酮IIA計，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱葛根素和丹參酮IIA對照品適量，加甲醇溶解製成含葛根素80μg/ml丹參酮IIA 16μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或固體製劑細粉適量(約相當於丹參0.35g)，精密稱定，置於50mL量瓶中，加甲醇至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液. 測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
本品含葛根以葛根素計，應不低於3.2mg/ml。含丹參以丹參酮IIA計，應不低於0.06mg/ml。
(3)鹽酸小檗鹼黃芩苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀(45∶55)為流動相；檢測波長為264nm。理論板數按鹽酸小檗鹼峰計算，應不低於2500，按黃芩苷峰計算，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱取鹽酸小檗鹼黃芩苷對照品適量，加流動相溶解製成含鹽酸小檗鹼65μg/ml黃芩苷120μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或取固體製劑適量(約相當於黃芩0.12g)，精密稱定，置於100mL量瓶中，加流動相至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加流動相至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液. 測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
本品含黃連以鹽酸小檗鹼計，應不低於4.0mg/ml。含黃芩以黃芩苷計，應不低於9.4mg/ml。
(4)黃芪甲苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水(75∶25)為流動相；蒸發光散射檢測器漂移管溫度90℃；氮氣流量2.0L/min。
對照品溶液的製備取黃芪甲苷對照品對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取本品口服液3ml或固體製劑細粉適量(約相當於黃芪0.8g)，加水30ml溶解，用水飽和的正丁醇提取4次(30ml、30ml、20ml、15ml)，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加甲醇溶解，移置5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液。
測定法精密吸取對照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。
本品含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少於0.05mg/ml。
(5)芍藥苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸(35∶65∶0.1)為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，加流動相溶解製成含芍藥苷7μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或取固體製劑適量(約相當於白芍0.17g)，精密稱定，置於50mL量瓶中，加流動相至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加流動相至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液. 測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
本品含白芍以芍藥苷計，不得少於2.0mg/ml。
實施例8穩定性試驗 1、主要試驗儀器伊利特液相色譜儀(伊利特科學儀器有限公司) 2、藥品供試樣品實施例1的樣品消渴通脈口服液自製批號為070803、070804、070805，黃芪甲苷對照品(中國藥品生物製品檢定所批號110781-200512)，芍藥苷對照品(中國藥品生物製品檢定所批號110736-200526)，葛根素對照品(中國藥品生物製品檢定所批號110752-200511)，原兒茶醛對照品(中國藥品生物製品檢定所批號110810-200205)，黃芩苷對照品(中國藥品生物製品檢定所批號110715-200514)，鹽酸小檗鹼對照品(中國藥品生物製品檢定所批號110713-200208)，丹參酮IIA(中國藥品生物製品檢定所批號110766-200417)。
3、加速穩定性試驗方法實施例1的消渴通脈口服液(070803、070804、070805)藥用玻璃瓶包裝(上市包裝)，在溫度40±2℃，相對溼度75％±5％(飽和食鹽水)的條件下放置6個月，分別於0個月、1個月末、2個月末、3個月末、6個月取樣一次，按穩定性重點考察項目(性狀、鑑別、檢查、含量)檢測。
4、長期穩定性試驗方法實施例1的消渴通脈口服液(070803、070804、070805)藥用玻璃瓶包裝(上市包裝)在溫度25±2℃，相對溼度60％±10％的條件下放置。分別於0個月、3個月末、6個月末，按穩定性重點考察項目(性狀、鑑別、檢查、含量)進行檢測。
5、穩定性試驗結果消渴通脈口服液加速試驗(相對溼度75％±5％，溫度40℃±2℃)下試驗，長期試驗(相對溼度60％410％，溫度25℃±2℃)下試驗，分別連續觀察6個月，其對性狀、鑑別、檢查、含量等項目進行了檢測，並在0月、6月末對微生物限度進行了考察，均無明顯變化，符合質量標準的規定，消渴通脈口服液質量穩定，預期穩定期為24個月，長期穩定性試驗仍在進行。包裝材料對質量無影響，有效期暫定24個月。
實施例9取實施例1的口服液進行臨床試驗 摘要參照《中藥新藥臨床研究指導原則》中III期臨床試驗的有關要求設計消渴通脈口服液臨床試驗方案。對照藥物選擇與消渴通脈口服液功能主治相近的糖脈康顆粒。觀察消渴通脈口服液的臨床有效性及安全性。由中國中醫研究院西苑醫院、成都中醫藥大學附屬醫院臨床研究基地、山東中醫藥大學附屬醫院臨床研究基地、上海中醫藥大學曙光醫院臨床研究基地四家基地醫院共完成治療組307例、對照組102例，經統計學處理，兩組療效有顯著性差異，治療組療效優於對照組。治療過程中未見毒副反應。
一般資料 共完成治療組307例，對照組102例；全部病例均符合II型糖尿病合併周圍神經病變的診斷標準。治療組與對照組，治療前在性別、年齡、症狀上均無顯著性差異，(P＞0.05)，病例具有可比性。
一性別分布 表1.性別分布表
治療組與對照組比較X2＝0.007 P＝0.933 分析表1結果經統計學處理，治療組與對照組比較性別分布上無顯著性差異。
二、年齡分布 表2.年齡分布表
治療組與對照組比較X2＝2.84 P＝0.417 分析表2結果經統計學處理表明，治療組與對照組比較，在年齡分布上無顯著性差異。
三、病情輕重分級 表3.兩組患者病情比較表
治療組與對照組比較X2＝10.010 P＝0.007 分析表3結果經統計學處理表明，治療組與對照組比較，兩組患者病情比較有統計學差異，治療組重於對照組。
四、治療前病程情況比較表 表4.治療前病程比較表
治療組與對照組比較t＝0.530 P＝0.596 分析表4結果經統計學處理表明，治療組與對照組比較，病程無統計學差異。
五、治療前空腹血糖情況比較表 表5.治療前空腹血糖比較表
治療組與對照組比較t＝0.221 P＝0.825 分析表5結果經統計學處理表明，治療組與對照組比較，空腹血糖無統計學差異。
六、治療前餐後2小時血糖情況比較表 表6.治療前餐後2小時血糖比較表
治療組與對照組比較t＝0.933 P＝0.351 分析表6結果經統計學處理表明，治療組與對照組比較，餐後2小時血糖無統計學差異。
七、治療前糖化血紅蛋白情況比較表 表7.治療前糖化血紅蛋白比較表
治療組與對照組比較t＝0.697 P＝0.486 分析表7結果經統計學處理表明，治療組與對照組比較，糖化血紅蛋白無統計學差異。
八、治療前血流變情況比較表 表8.治療前血流變比較表
分析表8結果經統計學處理表明，治療組與對照組比較，血流變無統計學差異。
九、治療前中醫症候表現表 表9中醫症候表現表
分析表9結果經統計學處理，治療組與對照組的中醫症候表現比較，肢體麻木治療組重於對照組，有非常顯著差異，倦怠乏力及便秘治療組重於對照組，有顯著性差異，其它無顯著性差異。
十、治療前症候總積分比較表 表10.治療前症候總積分比較表
治療組與對照組比較t＝2.932 P＝0.004 分析表10結果經統計學處理表明，治療組症候總積分比對照組高，統計學有顯著性差異。
十一、其它項目 表11其它項目表
統計分析表11結果經統計學處理，治療組與對照組比較，治療前其它項目無顯著性差異。
十二、兩組患者治療前神經傳導速度變化表 表12神經傳導速度變化表
分析表12結果經統計學處理，治療組與對照組的神經傳導速度比較，除右正中神經MCV有顯著性差異外，其它無顯著性差異。
十三、兩組患者治療前右脛後腓總神經傳導速度、波幅、潛伏期變化比較 表13兩組患者治療前右脛後腓總神經傳導速度、波幅、潛伏期變化比較表
分析表13結果經統計學處理，治療組與對照組的右脛後腓總神經傳導速度、波幅、潛伏期變化比較無顯著性差異。
試驗方法 按「消渴通脈口服液治療治療II型糖尿病合併周圍神經病變的有效性及安全性的多中心、隨機、雙盲、對照臨床研究方案(草案)」中所述的方法。
試驗結果 本次共試驗病例409例，其中治療組病例307例，對照組102例。
一療效比較 1、綜合療效比較 表14兩組綜合療效比較表
經秩和檢驗Z＝-4.914 P＝0.000表14結果經統計學處理，治療組與對照組比較，綜合療效無顯著性差異。
2、兩組中醫症候療效的比較 表15兩組中醫症候療效比較表
經秩和檢驗表15結果經統計學處理，治療組與對照組比較，中醫療效治療組優於對照組，有顯著性差異。
3、兩組患者治療前後中醫症狀療效比較，見表16 表16兩組患者治療前後中醫症狀療效比較表
資料按等級統計，兩級計分只統計兩級；經秩和檢驗，兩組患者治療前後各症狀具有非常顯著性差異；兩組間比較，肢體麻木，倦怠乏力治療組優於對照組，有非常顯著性差異，身癢有蟻行感，肢端發涼，肢體疼痛或刺痛，身疲懶言，便秘治療組優於對照組，有顯著性差異；其它症狀無顯著性差異。
4、治療前後症候總積分比較 表17.治療前後症候總積分比較表
分析表17結果經統計學處理表明，治療前後症候總積分組間，組內比較，統計學均有非常顯著性差異。
5、治療前後空腹血糖比較 表18.治療前後空腹血糖比較表
分析表18結果經統計學處理表明，治療前後空腹血糖組間比較無顯著性差異，治療前後空腹血糖組內比較，統計學有非常顯著性差異。
6、治療前後餐後2小時血糖療效比較 表19治療前後餐後2小時血糖比較表
分析表19結果經統計學處理表明，治療前後餐後2小時血糖組間比較有顯著性差異，治療前後餐後2小時血糖組內比較，統計學有非常顯著性差異。
7、兩組患者治療前後糖化血紅蛋白療效比較 表20治療前後糖化血紅蛋白比較表
分析表20結果經統計學處理表明，治療前後糖化血紅蛋白組間比較無顯著性差異，治療前後糖化血紅蛋白組內比較，對照組有非常顯著性差異。
8兩組患者治療前後血流變情況比較 表21治療前後血流變情況比較表
分析表21結果經統計學處理，治療組全血粘度高切、全血粘度低切及紅細胞壓積有顯著性差異，對照組全血粘度高切、全血粘度低切有顯著性差異，組間比較均無顯著性差異。
9兩組患者治療前後神經傳導速度比較 9.1兩組患者治療前後神經傳導速度比較見表22.1 表22.1兩組患者治療前後神經傳導速度變化比較
表22.1結果經統計學處理表明，兩組患者治療前後比較，正中、頸後腓神經感覺和運動神經傳導速度均有非常顯著差異。
9.2兩組患者神經傳導速度變化比較見表22.2 表22.2兩組患者神經傳導速度變化(神經傳導速度差值)比較表
表22.2結果經統計學處理表明，治療組與對照組組間比較，正中、頸後腓神經感覺和運動神經傳導速度均無顯著性差異，右脛後NSCV有顯著性差異。
9.3兩組患者神經遠段、近端傳導速度比較見表22.3 表22.3兩組患者治療前後右脛後腓總神經傳導速度、波幅、潛伏期變化比較表
表22.3結果經統計學處理表明，治療前後治療組組內比較，右脛後腓總神經傳導遠段、近端傳導速度、潛伏期及遠段波幅均有顯著性差異。對照組遠段和近端傳導速度、潛伏期有顯著性差異。
9.4治療前後兩組患者神經遠段、近端傳導速度比較見表22.4 表22.4兩組患者治療前後右脛後腓總神經傳導速度、波幅、潛伏期變化比較表
表22.4結果經統計學處理表明，治療前後治療組與對照組比較，右脛後腓總神經傳導速度、波幅、潛伏期變化組間比較均無顯著性差異。
10、兩組患者治療前後舌質療效比較，見表23 表23兩組患者治療前後舌質療效比較表
表23結果經統計學處理表明，治療前後治療組組內比較，舌質變化有非常顯著性差異，對照組組內及治療組與對照組比較，無顯著性差異。
11、治療組用藥2、4、6周空腹血糖的關係，見表24 表24治療組用藥2、4、6周空腹血糖的關係
表24結果經統計學處理表明治療組用藥2、4、6周空腹血糖相互比較，有非常顯著性差異。12、治療組2、4、6周餐後2小時血糖間的關係見表25 表25治療組2、4、6周餐後2小時血糖間的關係表
表25結果經統計學處理表明，治療組用藥2、4、6周餐後2小時血糖相互比較，2周與6周，4周與6周間比較有非常顯著性差異。
13、治療組各臨床基地醫院綜合療效比較見表26.1 表26.1治療組各臨床基地醫院綜合療效比較表
表26.1結果經統計學處理表明，治療組各臨床基地醫院綜合療效無顯著性差異。
14、對照組各臨床基地醫院綜合療效比較見表26.2 表26.2對照組各臨床基地醫院綜合療效比較表
表26.2結果經統計學處理表明，對照組各臨床基地醫院綜合療效無顯著性差異。
權利要求
1消渴通脈製劑及質量控制方法，其特徵為將處方配比為黃芪129～516g、地黃129～516g、白芍86～344g、麥冬86～344g、葛根86～344g、丹參86～344g、水蛭51.5～206g、黃芩64.5～258g、黃連64.5～258g、玄參86～344g、川芎64.5～258g、川牛膝64.5～258g的藥材組合與適宜的藥學可接受輔料；採用藥學適宜的常規工藝，經過提取，濃縮，乾燥，制粒，壓片，硬膠囊填充，軟膠囊填充等必要工序組合，可以製成但不僅限於口服液、口服膏劑、普通片、泡騰片、口崩片、咀嚼片、硬膠囊、軟膠囊等藥學適宜劑型。
2權利要求1所述的消渴通脈製劑及質量控制方法，其特徵為優選處方配比是黃芪258g、地黃258g、白芍172g、麥冬172g、葛根172g、丹參172g、水蛭103g、黃芩129g、黃連129g、玄參172g、川芎129g、川牛膝129g。
3權利要求1所述的消渴通脈製劑及質量控制方法，其特徵是口服液製法為處方十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.30(80℃熱測).加水至1000ml。冷藏48小時，濾過，濾液調PH值為7.0，加水至1000ml，灌封，滅菌，即得。
4權利要求1所述的消渴通脈製劑及質量控制方法，其特徵是固體製劑製法為以上十二味，其中地黃、丹參、玄參加2500mL70％乙醇回流提取兩次，每次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液備用。其餘黃芪等九味，加水8倍量，煎煮兩次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.15～1.18(70℃)噴霧乾燥(進風溫度150～170℃，出風溫度75～120℃)製成浸膏粉，或將濾液濃縮成相對密度為1.24～1.28(80℃熱測)稠膏烘乾粉碎成浸膏粉；浸膏粉與適宜輔料混勻，制粒，乾燥後，可以製成顆粒、普通片、硬膠囊、泡騰片、口崩片等適宜的固體製劑。
5權利要求1所述的消渴通脈製劑及質量控制方法，其特徵為質量標準主要包括以下方法中的一種或幾種
鑑別取本品口服液或固體製劑加適量水溶解或其它適宜方法製備後依照以下方法進行鑑別試驗。
黃芪鑑別(1)取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加水飽和的正丁醇提取三次，每次10ml，合併正丁醇層，加氨試液25ml提取一次，取正丁醇層，水浴蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置分層的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
白芍鑑別(2)取芍藥苷對照品，加甲醇製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍紫色斑點。
葛根鑑別(3)取葛根素對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以三氯甲烷-甲醇-水(7∶2.5∶0.25)為展開劑，展開，取出，晾乾，在濃氨蒸氣中放置10分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
丹參鑑別(4)取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加乙醚提取三次，每次10ml，合併乙醚層，揮去溶劑，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶3∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
黃芩鑑別(5)取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加乙醚15ml，振搖提取，棄去乙醚液，水液滴加鹽酸調節pH值至2～3，加乙酸乙酯25ml振搖提取，分取乙酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以醋酸乙醋-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
黃連鑑別(6)取鹽酸小檗鹼對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。另取黃連對照藥材0.5g，加甲醇10ml，冷浸過夜，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取2.1.2項下的供試品溶液及上述對照品溶液、對照藥材溶液各2μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上。以苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。
含量測定(1)精密量取本品口服液20ml或其它劑型製劑加適量水溶解，加水飽和的正丁醇提取5次，每次10ml，合併正丁醇提取液，加氨試液洗滌2次，分別為25ml、10ml，棄去氨水層，正丁醇層水浴蒸乾，殘渣加水3～5ml使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱(內徑1cm，長12cm)，以水50ml洗脫，棄去洗液，再用40％乙醇30ml洗脫，棄去40％乙醇洗脫液，繼用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，用甲醇溶解並轉移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液2μl，對照品溶液1μl與5μl，分別交叉點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置過夜的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層掃描法進行掃描，波長λS＝505nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
(2)葛根素丹參酮IIA照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水(85∶15)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數按葛根素峰計算，應不低於2000，按丹參酮IIA計，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱葛根素和丹參酮IIA對照品適量，加甲醇溶解製成含葛根素80μg/ml丹參酮IIA 16μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或其它製劑適量(約相當於丹參0.35g)，精密稱定，置於50mL量瓶中，加甲醇至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液.
測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
(3)鹽酸小檗鹼黃芩苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀(45∶55)為流動相；檢測波長為264nm。理論板數按鹽酸小檗鹼峰計算，應不低於2500，按黃芩苷峰計算，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱取鹽酸小檗鹼黃芩苷對照品適量，加流動相溶解製成含鹽酸小檗鹼65μg/ml黃芩苷120μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或其它製劑適量(約相當於黃芩0.12g)，精密稱定，置於100mL量瓶中，加流動相至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加流動相至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液。
測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
(4)黃芪甲苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水(75∶25)為流動相；蒸發光散射檢測器漂移管溫度90℃；氮氣流量2.0L/min。
對照品溶液的製備取黃芪甲苷對照品對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取本品口服液3ml或其它製劑適量(約相當於黃芪0.8g)，加水30ml溶解，用水飽和的正丁醇提取4次(30ml、30ml、20ml、15ml)，合併正丁醇液，蒸乾，殘渣加甲醇溶解，移置5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，作為供試品溶液。
測定法精密吸取對照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。
(5)芍藥苷照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸(35∶65∶0.1)為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷峰計算，應不低於1500。
對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，加流動相溶解製成含芍藥苷7μg/ml的對照品溶液。
供試品溶液的製備精密吸取口服液1ml或取其它製劑適量(約相當於白芍0.17g)，精密稱定，置於50mL量瓶中，加流動相至近刻度，密塞，超聲提取30分鐘，放冷至室溫，加流動相至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液.
測定法精密吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。
6權利要求1所述的消渴通脈製劑及質量控制方法，其特徵是治療用途為II型糖尿病周圍神經病變、心腦血管粥樣硬化、高血壓、高脂血症。
全文摘要
本發明的目的是提出消渴通脈製劑及質量控制方法，提出處方配比為黃芪129～516g、地黃129～516g、白芍86～344g、麥冬86～344g、葛根86～344g、丹參86～344g、水蛭51.5～206g、黃芩64.5～258g、黃連64.5～258g、玄參86～344g、川芎64.5～258g、川牛膝64.5～258g的藥材組合與適宜的藥學可接受輔料，用適宜工藝製成的藥物的製備方法和質量控制標準，治療用途為II型糖尿病周圍神經病變、心腦血管粥樣硬化、高血壓、高脂血症。
文檔編號G01N30/36GK101301425SQ20081004980
公開日2008年11月12日 申請日期2008年5月19日 優先權日2008年5月19日
發明者趙新年, 楊景華, 王紅林, 劉同祥 申請人:河南省新四方製藥有限公司