一種治療慢性肝炎的藥物的製作方法

2023-10-10 23:52:54 1

專利名稱：一種治療慢性肝炎的藥物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療慢性肝炎的藥物組合物，特別是涉及以植物中草藥的有效部位為原料製備的治療慢性肝炎的藥物。
背景技術：
病毒性肝炎臨床表現可分為急性肝炎與慢性肝炎兩大類型。根據臨床表現差異，慢性肝炎又可分為以下數種臨床類型慢性遷延性肝炎病程超過半年以上，症狀輕，無黃疸或黃疸輕微。肝臟輕度腫大，質地中等偏軟，脾臟一般不可觸及，肝功能改變以單項ALT波動為特點。一般無肝外器官表現。
慢性活動性肝炎病程超過半年，症狀較重，慢性肝病面容，肝臟大而質地中等偏硬，多數脾大，肝功能損害明顯，ALT持續或反覆升高，血漿白蛋白低下，或白/球蛋白比例降低等表現。
慢性肝炎病程冗長，臨床演變併發症較多。其中重要有①肝炎後脂肪肝，以超聲濾檢查顯大特殊脂肪肝波形為主要表現。②肝硬化B型肝炎、非甲非B型肝炎可演變為壞死後性、膽汁性或門靜脈性肝硬化。
我國為B型肝炎的高發區，有60％的人群受過B肝病毒的感染，B型肝炎表面抗原(HBsAg)攜帶者約為1.3億人。目前我國患慢性B型肝炎的病人超過3000萬，其中不少人可能發展成肝硬化或肝癌。每年我國死於B肝後肝硬化、肝癌者達40萬人。因此慢性B型肝炎的治療(包括能阻斷、減輕乃至逆轉肝纖維化的治療)是我國迫切需要解決的重大疾病之一。有專家認為「誰控制了肝纖維化，誰就控制了慢性肝炎」。
從70年代中期以來，隨著人們對肝纖維化發生、發展認識的不斷深化，現已公認肝纖維化是細胞外基質的合成與降解失去平衡的結果，故纖維組織的形成可看作是一個動態過程，並證明人類的肝纖維化是可以逆轉的。多年來，我國醫務工作者不斷致力於中醫中藥治療慢性肝炎和逆轉肝纖維化的研究，取得了可喜的成績，這是中醫中藥在肝病治療上的一大優勢。大量文獻資料表明，中醫中藥在抗肝纖維化方面以其可靠的療效和較少的副作用而獨樹一幟。目前國內外有關肝纖維化治療的研究多處於實驗階段，尚缺乏有治療前景的逆轉肝纖維化或肝硬化的藥物。
《醫家金》曰「肝為木氣，全賴土以滋培，以水灌溉，若中土虛則木不升而鬱」。溼為陰邪，最易傷陽，脾陽受困，而致脾虧氣虛。氣虛失運，木鬱失達，則肝部氣滯。氣滯日久，氣病及血，血行不暢，瘀血內阻，絡道失和，以致痞塊形成，青筋暴露，病至險境，纏綿難愈。針對病機所在，治法當以黃芪益氣扶脾為重，丹參活血化瘀為先，緩緩圖治，以收遠效。黃芪和丹參自古以來就是治療肝病的主要中藥。近年來國內眾多學者對其藥理學、藥效學等進行了廣泛深入的研究，並開發了以黃芪、丹參為主要原料的口服液、注射液、針劑等藥物以治療肝病。但這些藥物大多使用黃芪、丹參的粗提物。

發明內容
黃芪藥材中含有多糖、皂苷、黃酮、胺基酸、酚類和微量元素等，其中多糖和皂苷為免疫調節作用的主要活性成分。丹參藥材中所含的丹參酮和酚酸類是其藥理作用的主要活性成分。本發明首先對黃芪、丹參進行提取得到粗提物，然後自粗提物中分離出主要含黃芪總皂苷、總丹參酮和總酚酸的各有效部位，最後將各有效部位按一定比例混合均勻得到組合物。該組合物可以按公知的工藝加工成口服製劑，如顆粒劑、片劑、膠囊等。其特徵在於組合物中主要含總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的各有效部位有以下質量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝15～50∶3～7∶0.5～4。
優選的質量比為總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝20～45∶4～6∶1～3。
最佳的質量比為總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝25∶3.5∶2。
各有效部位中，總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的含量均≥50％。
黃芪皂苷既溶於水又溶於乙醇。用水或乙醇對黃芪進行提取得到水或乙醇的粗提物，然後自粗提物中分離出主要含黃芪總皂苷的有效部位。
丹參酮為脂溶性成分，酚酸為水溶性成分。丹參藥材分別用乙醇和水進行提取，得到乙醇和水的粗提物，然後自粗提物分離得到主要含總丹參酮和總酚酸的有效部位。
所述的分離主要是吸附分離，如薄層分離、色譜分離、大孔吸附樹脂分離等。
安徽醫科大學對上述各有效部位進行了體內外藥效學試驗，證明了本發明的提取、分離工藝的可行性。同時對各有效部位按比例混合後的組合物亦進行了體內外藥效學試驗(試驗中，組合物編號為CAE)，如果如下CAE體外對HSC-T6細胞功能的抑制作用體外實驗結果表明，在60.3mg·L-1～mg·L-1濃度範圍內，CAE對HSC-T6細胞增殖和產生膠原有濃度依賴性的抑制作用。提示CAE對HSC上述功能有直接抑制作用。
CAE體外對巨噬細胞功能的抑制作用實驗結果表明，CAE在5.9～94.2mg·L-1濃度範圍內，對LPS誘導大鼠PMΦs產生IL-1、NO和TNF-α也有明顯的濃度依賴性。提示CAE對PMΦs產生炎性細胞因子有直接的抑制作用。
CAE對小鼠D-GaIN性肝損傷的保護作用採用D-GaIN(800mg·L-1)誘導小鼠急性肝損傷模型，CAE三個劑量(60、120、240mg·L-1)對D-GaIN升高的血清ALT水平、肝臟指數以及肝勻漿MDA的含量均顯著降低。表明CAE對D-GaIN致小鼠急性肝損傷有明顯的保護作用，並提示其作用可能與該藥的抗氧化作用有關。
CAE對CCl4致大鼠肝纖維化的防治作用實驗結果表明，對CCl4致大鼠肝纖維化模型，CAE三個劑量(60、120、240gmg·kg-1×8wk)不僅可降低CCl4升高的ALT與AST水平和CCl4升高的大鼠肝、脾指數，以及肝組織MDA水平；還可升高CCl4降低的大鼠胸腺指數和肝組織T-SOD水平，而且可顯著降低CCl4升高的血清HA含量和肝組織HYP含量。病理組織學發現，CAE明顯減輕CCl4所致的肝細胞壞死、肝組織纖維化和肝硬化的程度。表明CAE有抗肝纖維化作用，該作用可能與其抗氧化和抗炎作用有關。
總之，CAE體外對HSC-T6細胞的增殖和產生膠原均有明顯的抑制作用；大鼠腹腔巨噬細胞產生IL-1、TNF-α和NO等炎性因子亦有明顯的抑制作用；對小鼠D- GaIN性肝損傷，CAE三個劑量均有明顯的保護作用；對大鼠CCl4性肝纖維化模型，CAE三個劑量亦有明顯的防治作用。
具體實施例方式
現以大孔吸附樹脂吸附分離為例，非限定實施例敘述如下。
1、黃芪總皂苷的製備黃芪藥材粉碎後用70～85％的乙醇回流提取兩次，第一次10倍量，回流1～2小時，第二次8倍量，回流1小時，合併兩次濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，當乙醇脫盡時，加水溶解，靜置12小時，分離，用D101大孔吸附樹脂吸附分離，分別用水、30％、70％乙醇洗脫，減壓濃縮70％乙醇洗脫液，60℃真空乾燥得到主要含黃芪總皂苷浸膏(I)。
以黃芪甲苷為對照品，採用人光光度法測定浸膏(I)中總皂苷含量，總皂苷含量≥50％。
2、總丹參酮的製備丹參藥材經粉碎後用90～95％的乙醇回流提取兩次，第一次8倍量，回流1～2小時，第二次6倍量回流1～2小時，合併兩次濾液，減壓蒸餾，回收乙醇，用D101大孔吸附樹脂吸附分離，經洗脫、濃縮得到主要含總丹參酮浸膏(II)。
以丹參酮IIA為對照品，用分光光度法測定浸膏(II)中總丹參酮的含量，總丹參酮含量≥50％。
3、在實施例2中，經乙醇提取後的丹參濾渣脫盡乙醇，繼續用水提取兩次，每次8倍量水，回流或煎煮1.5～2.5小時，合併兩次濾液，減壓脫水濃縮，用D101大孔吸附樹脂吸附分離，經洗脫、濃縮得到主要含總酚酸浸膏(III)。
以原兒茶醛為對照品，用分光光度法測定浸膏(III)中總酚酸的含量，總酚酸含量≥50％。
4、顆粒劑的製備取浸膏(I)0.5份，浸膏(II)3份，浸膏(III)20份，按顆粒劑製備工藝製備顆粒劑。
5、片劑的製備取浸膏(I)4份，浸膏(II)7份，浸膏(III)50份，按片劑製備工藝製備片劑。
6、膠囊的製備取浸膏(I)3份，浸膏(II)5份，浸膏(III)30份，按膠囊劑製備工藝製備膠囊。
7、軟膠囊的製備取浸膏(I)2份，浸膏(II)3.5份，浸膏(III)25份，按軟膠囊製備工藝製備軟膠囊。
本製備患者口服劑量，以有效部位組合物計為120～240mg。
權利要求
1.一種治療慢性肝炎的藥物，是由黃芪和丹參的粗提物中分離出的有效部位構成的組合物，其特徵在於主要含總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的各有效部位有以下質量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝15～50∶3～7∶0.5～4，各有效部位中，總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的含量均≥50％。
2.根據權利要求1所述的藥物，其特徵在於各有效部位優選以下質量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝20～45∶4～6∶1～3。
3.根據權利要求1或2所述的藥物，其特徵在於各有效部位最佳質量比總酚酸∶總丹參酮∶黃芪總皂苷＝25∶3.5∶2。
全文摘要
一種治療慢性肝炎的藥物，是由黃芪、丹參的粗提物中分離出的有效部位構成的組合物，各有效部位總酚酸、總丹參酮和黃芪總皂苷的質量比為15～50∶3～7∶0.5～4。經藥效學試驗表明，本發明明顯減輕大鼠CCl
文檔編號A61P31/14GK1759855SQ200410064999
公開日2006年4月19日 申請日期2004年10月15日 優先權日2004年10月15日
發明者魏偉, 金繼曙, 陳敏珠, 雷紅 申請人:合肥恆星藥物研究所