A₁腺苷受體的部分和完全激動劑的製備方法

2023-10-31 04:56:32 4

專利名稱：A1腺苷受體的部分和完全激動劑的製備方法
技術領域：
本發明涉及製備作為部分或完全^腺苷受體激動劑的化合物。這些化合物可用 於治療哺乳動物的糖尿病，肥胖症，改善脂肪細胞功能，CNS病症(障礙)，以及改善心臟活 性，尤其是治療心律失常。這些化合物在哺乳動物體內還具有抗脂解效應。
背景技術：
腺苷是一種天然存在的核苷，其通過與稱作^、A^、A^以及A3的腺苷受體的家族 進行相互作用來施加其生物效應，所有這些腺苷受體都調節重要的生理過程。例如，A^腺苷 受體調節冠狀血管擴張，A^受體則與肥大細胞活化、哮喘、血管擴張、細胞生長的調節、腸功 會g、以及神經分泌的調節(參見Adenosine A犯Rec印tors as Therapeutic Targets, Drug Dev Res 45 :198 ;Feoktistov etal. ， Trends Pharmacol Sci 19 :148-153)，以及A3腺苷 受體調節細胞增殖過程有關。 &腺苷受體介導兩種不同的生理反應。兒茶酚胺的心臟剌激效應的抑制是藉助 於腺苷酸環化酶的抑制來介導的，而減慢心率(HR)以及延長通過AV結的神經衝動傳播的 直接效應在很大程度上起因於IKAdo的活化(B. Lerman和L. Belardinelli Circulation, Vol. 83 (1991) ， P1499-1509以及J. C. Shryock和L. Belardinelli, The Am. J. Cardiology, Vol. 79 (1997) P 2-10) 。 ^腺苷受體的剌激可縮短AV結細胞的動作電勢的持續時間並減小 其範圍，因而延長AV結細胞的不應期。因此，&受體的剌激可提供治療室上性心動過速的 方法，包括終止結性折返性心動過速，以及在心房纖顫和撲動期間控制心室率。
因此，&腺苷激動劑可用於治療心律的急性和慢性病症，尤其是那些以快速心率 為特徵的疾病，其中快速心率是由竇房、心房、以及AV結組織中的異常所驅動(激活)。這 樣的病症包括但不限於心房纖顫、室上性心動過速以及心房撲動。暴露於Aj敫動劑會引 起心率降低以及異常節律的調整，從而改善心血管功能。 通過其抑制兒茶酚胺效應的能力，&激動劑可降低細胞的cAMP，因此在衰竭 的心臟中具有有益的效應，其中增加的交感緊張性會增加細胞的cAMP水平。研究已 經表明，在後的病症伴隨增加的室性心律失常和猝死的可能性。參見，例如，B丄erman 和L. Belardinelli Circulation, Vol. 83(1991)， P1499-1509以及J. C. Shryock和 L. Belardinelli, Am. J. Cardiology, Vol. 79(1997)P 2-10。 由於其對環AMP生成的抑制作用的結果，Aj敫動劑在脂肪細胞中具有抗脂解效應， 其導致降低非酯化脂肪酸(NEFA)的釋放(E. A. van Schaick et al. ， J. Pharmacokineticsand Biopharmaceutics， Vol.25 (1997)p 673-694以 及P. Strong Clinical Science Vol. 84(1993)p. 663-669)。非胰島素依賴性糖尿病(NIDDM)的特徵在於胰島素抗性，其 導致高血糖。促使所觀察到的高血糖的因素是缺少正常葡萄糖攝取以及骨骼肌糖原合成 酶(GS)的活化。研究表明，提高水平的NEFA可抑制胰島素剌激的葡萄糖攝取以及糖原 合成(D. Thiebaud et al Metab. Clin. Exp. Vol. 31(1982)pll28_1136以及G. Boden et al J. Clin. Invest. Vol. 93 (1994)p 2438-2446)。早在1963年P. J. Randle就提出了葡 萄糖脂肪酸循環假說(P. J. Randle et al Lancet (1963) p. 785-789)。這種假說的原則是 限制將脂肪酸供給周圍組織會促進碳水化合物利用(P. Strong et al Clinical Science Vol. 84(1993)p. 663-669)。 已經綜述了 Aj敫動劑對於中樞神經病症(障礙)的益處(L. J. S. Knutsen 禾口 T.F.Murray在Purinergic Approaches in ExperimentalTherapeutics， Eds. K.A. Jacobson and M. F. Jarvis (1997) Wiley-Liss， N. Y. ， P 423-470)。簡單地說，基於 癲癇的實驗模型，研究表明，混合的A^ : Aj敫動劑(腺苷地爾)對於由反向苯並二氮雜
革類激動劑6， 7- 二甲氧基-4-乙基-13 -咔啉-3-羧酸甲酯所誘導的癲癇發作是強效
抗驚厥藥(DMCM， H.Klitgaard Eur. J. Pharmacol. (1993) Vol. 224p. 221-228)。在其它利 用CGS 21680 (—種A^激動劑)進行的研究中，得出下述結論抗驚厥活性起因於A受 體的活化(G.Zhanget al. Eur. J. Pharmacol. Vol. 255 (1994)p. 239-243)。此外，研究表 明，腺苷選擇性激動劑在DMCM模型中具有抗驚厥活性(L. J. S. Knutsen In Adenosine and Adenne Nucleotides :From MolecularBiology to Integrative Physiology ;eds. L Belardinelli and A. Pelleg， Kl騰r :Boston， 1995， pp 479-487)。其中A工腺苷激動劑 具有益處的第二個領域是在前腦缺血的動物模型中，如由K皿tsen等人所證明的(J. Med. Chem. Vol. 42(1999)p. 3463-3477)。在神經保護中的益處被認為是部分起因於對釋放興奮 性胺基酸的抑制(出處同上)。 已經證明，腺苷本身可有效治療與A腺苷受體有關的病症，例如終止陣發性室上 性心動過速。然而，由於腺苷的半衰期小於10秒，所以這些效應是短暫的。另外，因為腺苷 無差別地作用於A2A、 A2B、以及A3腺苷受體亞型，因此它還對交感緊張性、冠狀血管擴張、全 身血管擴張以及肥大細胞去粒施加直接影響。 已經報導了一類作為有效A腺苷受體激動劑(完全和/或部分)的化合物(參見 於2002年7月17日提交的美國專利申請序列第10/194. 335號，將其全部披露的內容以引 用方式結合於本文作為參考)。研究表明，在此專利申請中披露的一種化合物，其被確定為 (4S，5S，2R，3R)-5-[(2-氟苯硫)甲基]_2-{6_[ (2-羥基-環戊基)氨基]-嘌呤_9-基} 草脲胺_3， 4- 二醇，是高度選擇性的部分&腺苷受體激動劑。 鑑於對這種和類似化合物的高度關注，尤其是(4S，5S，2R，3R)-5-[(2-氟苯硫)甲 基]-2- {6-[ (2-羥基-環戊基)氨基]-嘌呤-9-基}草脲胺-3， 4- 二醇的非對映異構體， 所以希望尋求一種新的合成方法，該合成方法可以提供方便的方法來製備大量的好的產率 和高純度的上述化合物並避免使用層析法以及其它費力的分離步驟。

發明內容
因此，本發明的一個目的是提供一種方便的合成方法來大規模製備(4S， 5S， 2R，3R)-5-[(2-氟苯硫)甲基]-2-{6-[(2-羥基-環戊基)氨基]-嘌呤-9-基}草脲胺_3， 4- 二醇和相關化合物、以及其非對映異構體，尤其是2- {6-[ ((1S， 2S) -2-羥基環戊基)氨 基]嘌呤-9-基} (4S， 5S， 3R) -5- [ (2-氟苯硫)甲基]草脲胺-3， 4- 二醇以及2- {6_ [ ((1R， 2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯硫)甲基]草脲胺_3， 4-二醇。因此，在第一個方面，本發明涉及製備化學式I的化合物
其中R是可選取代的苯基 包括在鹼存在的情況下用化學式RSH的化合物與化學式(5)的化合物接觸
在一種優選的具體實施方式
中，R是2-氟苯基而6-取代基是(1R，2R)-2-(羥基
環戊基)氨基。適合的鹼的實例是氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、三乙胺，優選為碳酸鉀，並且
反應通常在極性溶劑中進行，例如N， N- 二甲基甲醯胺或N， N- 二甲基乙醯胺。 在第二個方面，本發明涉及製備化學式(5)的化合物，包括在鹼存在的情況下用
2-羥基環戊基胺與化學式(13)的化合物接觸
6
以提供化學式(5)的化合物。 反應通常在質子溶劑中進行，例如乙醇或異丙醇，或可替換地二氯甲烷。適宜的鹼 的實例是氫氧化鈉、碳酸鉀、以及三乙胺，優選為三乙胺。在一種優選的具體實施方式
中， 2_羥基環戊基胺是作為單一異構體即(1R， 2R) -2-羥基環戊基胺存在的。
在第三個方面，本發明涉及製備化學式(13)的化合物，包括用鹼接觸化學式(12)
的化合物；
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優選的鹼是氨水，並且反應通常在惰性溶劑中進行，例如甲醇或二氯甲烷。 在第四個方面，本發明涉及製備化學式(12)的化合物，包括在鹼存在的情況下用
亞硫醯氯與6-氯嘌呤核苷，即化學式(1)的化合物接觸
formula see original document page 7
在一種優選的具體實施方式
中，反應是在惰性溶劑存在的情況下進行的，例如乙 腈或二氯甲烷。鹼通常是吡啶。 在第五個方面，本發明涉及製備化學式I的化合物




化學式I
其中R是可選取代的苯基 包括以下步驟
(a)在鹼存在的情況下用亞硫醯氯與化學式(1)的化合物接觸
'""OH
(b)用鹼接觸步驟(a)的產物以形成化學式(13)的化合物 (c)在鹼存在的情況下用2-羥基環戊基胺與步驟(b)的產物接觸以提供化學式
(5)的化合物:
以及 (d)在鹼存在的情況下用化學式RSH的化合物與步驟(c)的產物接觸，其中R如上 所定義。
具體實施例方式
優詵的
具體實施例方式
在步驟(a)中，反應通常在惰性溶劑存在的情況下進行，例如乙腈或二氯甲烷。鹼 通常是吡啶。 在步驟(b)中，鹼通常是氨水。反應優選在惰性溶劑存在的情況下進行。 在步驟(c)中，反應在惰性溶劑中進行，優選的鹼是三乙胺，並且2-羥基環戊基胺
優選作為單一異構體即(1R，2R)-2-羥基環戊基胺而存在。 在步驟(d)中，優選的溶劑是N，N-二甲基甲醯胺或N，N-二甲基乙醯胺，更優選為 N， N- 二甲基乙醯胺，並且優選的鹼是碳酸鉀。 優選的是，步驟(a)和步驟(b)中的化學式的產物，化學式(12)和化學式(13)的 化合物是未經分離的，而是在其後的反應步驟中用作粗產物。以這種方式，該方法去除了昂 貴和費時的純化步驟，其在進行大規模製備時是重要的及需要考慮的問題。
定義和一般參數 如在本說明書中所使用的，以下單詞和詞組除在其中所使用的上下文中另有說明 外，通常具有如以下所描述的含義。 術語"烷基"是指單價支鏈或無支鏈飽和烴鏈，其具有1至20個碳原子。此術語
是通過基團如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正己基、正癸基、十四烷
基等來加以舉例說明的。 術語"取代的烷基"是指 1)如上所定義的烷基基團，其具有1至5個取代基，優選1至3個取代基，這些 取代基選自由鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環烯基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨基羰 基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、卣素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、 雜芳硫基、雜環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺醯基、氨基羰基氨基、
雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-so-烷基、-so-芳基、-so-雜芳基、-so2-烷基、-so2-芳基以及-so2-雜芳基組成的組。除非通過定義另有限定，所有取代 基可以可選地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基選自烷基、羧基、羧基烷基、氨基羰 基、羥基、烷氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以及-S (0)nR，其中R是烷基、芳基、或 雜芳基而n是0、1或2 ;或 2)如上所定義的烷基基團，其被獨立選自氧、硫以_NRa-的1至5個原子或基團所 中斷，其中Ra是選自氫、烷基、環烷基、鏈烯基、環烯基、炔基、芳基、雜芳基以及雜環基。所有 取代基可以可選地進一步被烷基、烷氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(0)nR取 代，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、 1或2 ;或 3)如上所定義的烷基基團，其具有如上所定義的1至5個取代基並且被如上所定 義的1至5個原子或基團所中斷。 術語"低級烷基"是指單價支鏈或無支鏈飽和烴鏈，其具有1至6個碳原子。此術 語是通過基團如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正己基等來加以舉例 說明的。 術語"取代的低級烷基"是指如上所定義的低級烷基，其具有如針對取代的烷基 所定義的1至5個取代基，優選1至3個取代基；或如上所定義的低級烷基基團，其被如針 對取代的烷基所定義的1至5個原子所中斷；或如上所定義的低級烷基基團，其具有如上所 定義的1至5個取代基並且被如上所定義的1至5個原子所中斷。 術語"亞烷基"是指支鏈或無支鏈飽和烴鏈的雙基，優選地其具有1至20個碳原 子，優選1至10個碳原子，更優選1至6個碳原子。此術語是通過基團如亞甲基(_CH2-)、 亞乙基(-CH2CH2-)、亞丙基異構體(例如，-(^2(^2(^2-和-CH(CH3)CH2_)等來加以舉例說明 的。 術語"低級亞烷基"是指支鏈或無支鏈飽和烴鏈的雙基，其具有l至6個碳原子。
術語"取代的亞烷基"是指 (1)如上所定義的亞烷基基團，其具有1至5個取代基，這些取代基選自由烷基、 鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環烯基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰 基氨基、疊氮基、氰基、卣素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜 環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺醯基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜
環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-so-烷基、-so-芳基、-so-雜芳基、-so2-烷 基、-so廠芳基以及-so廠雜芳基組成的組。除非通過定義另有限定，所有取代基可以可選
地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基選自烷基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷 氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以及-S (0)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n 是0、1或2 ;或 (2)如上所定義的亞烷基基團，其被獨立選自氧Jt以及NRa-的1至5個原子或基 團所中斷，其中Ra是選自氫、可選取代的烷基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基以及雜環基，或 選自羰基、羧基酯、羧醯胺以及磺醯基的基團；或 (3)如上所定義的亞烷基基團，其具有如上所定義的1至5個取代基並且被如上 所定義的l至20個原子所中斷。取代的亞烷基的實例有氯亞甲基(-CH(Cl)-)、氨基亞乙 基(_CH(NH2)CH2-)、甲氨基亞乙基(-CH(NHMe)CH2-)、2-羧基亞丙基異構體(_CH2CH(C02H) CH2_)、乙氧基乙基(-CH2CH20-CH2CH2_)、乙基甲氨基乙基(_CH2CH2N(CH3) CH2CH2_) 、 1-乙氧基-2-(2-乙氧基-乙氧基)乙烷(-CH2CH20-CH2CH2-0CH2CH2-0CH2CH2_)等等。 術語"芳烷基"是指共價連接於亞烷基基團的芳基基團，其中芳基和亞芳基在本文
中加以定義。"可選取代的芳烷基"是指共價連接於可選取代的亞烷基基團的可選取代的芳
基基團。這樣的芳烷基基團是通過苄基、3-(4_甲氧基苯基)丙基等加以舉例說明的。 術語"烷氧基"是指基團R-O-，其中R是可選取代的烷基或可選取代的環烷基，或
R是基團-Y-Z，其中Y是可選取代的亞烷基而Z是可選取代的鏈烯基、可選取代的炔基；或
可選取代的環烯基，其中烷基、鏈烯基、炔基、環烷基以及環烯基如在本文中所定義。優選的
烷氧基基團是烷基-0-，並且包括，例如，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔
丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、l，2-二甲基丁氧基等等。 術語"烷硫基"是指基團R-S-，其中R如針對烷氧基所定義。 術語"鏈烯基"是指支鏈或無支鏈的不飽和烴基團的單價基團，優選具有2至20 個碳原子，更優選2至10個碳原子以及甚至更優選2至6個碳原子，並且具有1至6個，優 選1個雙鍵(乙烯基)。優選的鏈烯基基團包括乙烯基(-CH = CH2) 、1-亞丙基或烯丙基 (_CH2CH = CH2)、異亞丙基(_C(CH3) = CH2)、雙環[2. 2. 1]庚烯等等。在鏈烯基和氮相連的 情況下，雙鍵不能在氮的a位。 術語"低級鏈烯基"是指如上所定義的鏈烯基，其具有2至6個碳原子。 術語"取代的鏈烯基"是指如上所定義的鏈烯基基團，其具有l至5個取代基，優
選1至3個取代基，這些取代基選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環烯基、醯基、
醯氨基、醯氧基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、卣素、羥基、酮基、硫代羰
基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨
基磺醯基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-so-烷
基、-SO-芳基、-S0-雜芳基、-302-烷基、-302-芳基以及-so2-雜芳基組成的組。除非通過 定義另有限定，所有取代基可以可選地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基選自烷 基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以及-S(0) nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、 1或2。 術語"炔基"是指不飽和烴的單價基團，優選具有2至20個碳原子，更優選2至10 個碳原子，甚至更優選2至6個碳原子，並且具有至少1個而優選1至6個乙炔(三鍵)不 飽和部位。優選的炔基基團包括乙炔基(-c e ch)、炔丙基(或丙炔基，-c e cch3)等等。 在炔基和氮相連的情況下，三鍵不能在氮的a位。 術語"取代的炔基"是指如上所定義的炔基基團，其具有1至5個取代基，優選1 至3個取代基，這些取代基選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環烯基、醯基、醯氨 基、醯氧基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、卣素、羥基、酮基、硫代羰基、 羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基
磺醯基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-so-烷 基、-so-芳基、-so-雜芳基、-so2-烷基、-so2-芳基以及-so2-雜芳基組成的組。除非通過 定義另有限定，所有取代基可以可選地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基選自烷 基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以及-S(0) nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、 1或2。 木語"氨基羰基"是指基團-C(0)NRR，其中每個R獨立地是氫、烷基、芳基、雜芳基、雜環基，或其中兩個R基團相連以形成雜環基團(例如，嗎啉代)。所有取代基可以可選地 進一步被下述基團所取代烷基、烷氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(0)nR，其 中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、 1或2。 術語"醯氨基"是指基団-NRC(0)R，其中每個R獨立地是氫、烷基、芳基、雜芳基、或 雜環基。所有取代基可以可選地進一步被下述基團所取代烷基、烷氧基、滷素、C&、氨基、 取代的氨基、氰基、或-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、1或2。
術語"醯氧基"是指基團-O(O)C-烷基rO(O)C-環烷基rO(O)C-芳基rO(O)C-雜 芳基、以及-0(0)C-雜環基。所有取代基可以可選地進一步被下述基團所取代烷基、烷氧 基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S (0)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、 1或2。 術語"芳基"是指6至20個碳原子的芳香族碳環基團，其具有單環(例如，苯基)
或多環(例如，聯苯基)，或多個稠環(例如，萘基或蒽基)。優選的芳基包括苯基、萘基等 等。 除非針對芳基取代基的定義另有限定，上述芳基基團可以可選地被1至5個取代 基、優選1至3個取代基所取代，這些取代基選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環 烯基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、滷素、羥基、酮 基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳氧基、 雜芳基、氨基磺醯基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝 基、-so-烷基、-so-芳基、-S0-雜芳基、-302-烷基、-302-芳基以及-so2-雜芳基組成的組。 除非通過定義另有限定，所有取代基可以可選地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基 選自烷基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、卣素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以 及-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、1或2。 術語"芳氧基"是指基團芳基-O-，其中芳基基團如上所定義，並且包括同樣如上所 定義的可選取代的芳基基團。術語"芳硫基"是指基團R-S-，其中R是如針對芳基所定義。
術語"氨基"是指基團_NH2。 術語"取代的氨基"是指基團-NRR，其中每個R獨立地選自由氫、烷基、環烷基、羧 基烷基(例如，苄氧基羰基)、芳基、雜芳基以及雜環基組成的組，條件是兩個R基團不都是 氫，或基團-Y-Z，其中Y是可選取代的亞烷基而Z是鏈烯基、環烯基、或炔基。除非通過定義 另有限定，所有取代基可以可選地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基選自烷基、羧 基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以及-S(0)nR，其 中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、 1或2。 術語"羧基烷基"是指基團-C (0) 0-烷基、-C (0) 0-環烷基，其中烷基和環烷基是如
在本文中所定義的，並且可以可選地進一步被下述基團取代烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、 滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、或-S(0)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、l或 2。 術語"環烷基"是指3至20個碳原子的環烷基基團，其具有單環或多個稠環。這 樣的環烷基基團包括，例如，單環結構如環丙基、環丁基、環戊基、環辛基等，或多環結構如 金剛烷基、以及雙環[2. 2.1]庚烷，或稠合有芳基基團的環烷基基團，例如茚滿，以及類似基團。
術語"取代的環烷基"是指環烷基基團，其具有1至5個取代基，優選1至3個取 代基，這些取代基選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環烯基、醯基、醯氨基、醯氧 基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、卣素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基 烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺醯基、氨
基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝基、-so-烷基、-so-芳 基、-so-雜芳基、-so廠烷基、-so廠芳基以及-so2-雜芳基組成的組。除非通過定義另有限
定，所有取代基可以可選地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基選自烷基、羧基、羧基 烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、滷素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以及-S (0)nR，其中R是烷 基、芳基、或雜芳基而n是0、1或2。 術語"滷素"或"滷代"是指氟代、溴代、氯代、以及碘代。 術語"醯基"表示基團-C(O)R，其中R是氫、可選取代的烷基、可選取代的環烷基、 可選取代的雜環基、可選取代的芳基、以及可選取代的雜芳基。 術語"雜芳基"是指芳香族基團(即不飽和的)，其包括1至15個碳原子以及在至 少一個環內的1至4個選自氧、氮以及硫的雜原子。 除非針對雜芳基取代基的定義另有限定，上述雜芳基基團可以可選地被1至5個 取代基、優選1至3個取代基所取代，這些取代基選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷 基、環烯基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、卣素、羥 基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳 氧基、雜芳基、氨基磺醯基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨 基、硝基、-SO-烷基、-so-芳基、-SO-雜芳基、-302-烷基、-302-芳基以及-so2-雜芳基組成 的組。除非通過定義另有限定，所有取代基可以可選地進一步被1至3個取代基所取代，這 些取代基選自烷基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、卣素、CF3、氨基、取代的氨基、 氰基、以及-S(0)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、l或2。這樣的雜芳基基團可 以具有單環(例如，吡啶基或呋喃基)或多個稠環(例如，中氮茚基、苯並噻唑基、或苯並噻 吩基)。氮雜環和雜芳基的實例包括但不限於吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、中 氮茚、異吲哚、噴哚、噴唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、2，3-二氮雜萘(酞嗪)、萘基吡啶、喹喔 啉、喹唑啉、噌啉(肉啉)、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁 嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、類似基團以及含N-烷氧基-氮的雜芳基化合物。
術語"雜芳氧基"是指基團雜芳基-O-。 術語"雜環基"是指具有單環或多個稠環的單價飽和或部分不飽和基團，其具有l 至40個碳原子以及在環內的1至10個選自氮、硫、磷、和/或氧的雜原子，優選為1至4個 雜原子。 化學式I的化合物包括下述定義"當與和它們相連的氮原子一起考慮時，R和YR1
表示可選取代的雜環基"。這樣的定義包括在環內僅含有氮的雜環，例如，吡咯烷類和哌啶
類，並且還包括在環內具有一個以上雜原子的雜環，例如哌嗪類、嗎啉類等。 除非針對雜環取代基的定義另有限定，上述雜環基團可以可選地被1至5個取代
基、優選1至3個取代基所取代，這些取代基選自由烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、環烷基、環
烯基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、滷素、羥基、酮
基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳硫基、雜芳硫基、雜環硫基、硫羥基、烷硫基、芳基、芳氧基、雜芳基、氨基磺醯基、氨基羰基氨基、雜芳氧基、雜環基、雜環氧基、羥氨基、烷氧基氨基、硝
基、-so-烷基、-so-芳基、-S0-雜芳基、-302-烷基、-302-芳基以及-so2-雜芳基組成的組。
除非通過定義另有限定，所有取代基可以可選地進一步被1至3個取代基取代，這些取代基
選自烷基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、卣素、CF3、氨基、取代的氨基、氰基、以
及-S(O)nR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基而n是0、1或2。雜環基團可以具有單環或多個
稠環。優選的雜環包括四氫呋喃基、嗎啉代、哌啶基等。 術語"硫羥基"是指基團-SH。 術語"取代的烷硫基"是指基團-S-取代的烷基。 術語"雜芳硫(羥)基"是指基團-S-雜芳基，其中雜芳基基團如上所定義，其包括同樣如上所定義的可選取代的雜芳基基團。 術語"亞碸"是指基團-S(0)R，其中R是垸基、芳基、或雜芳基。"取代的亞碸"是指基團-S(O)R，其中R是如在本文中所定義的取代的烷基、取代的芳基、或取代的雜芳基。
術語"碸"是指基團-S(OhR，其中R是烷基、芳基、或雜芳基。"取代的碸"是指基團-S(OhR，其中R是如在本文中所定義的取代的烷基、取代的芳基、或取代的雜芳基。
術語"酮基"是指基團-C(O)-。術語"硫代羰基"是指基團-C(S)-。術語"羧基"是指基團-C(0)-0H。 術語"質子溶劑"一般是指包含羥基基團的溶劑。質子溶劑的實例是甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、丁醇等等。"可選的"或"可選地"是指其後描述的事件或情況可以發生或者可以不發生，以及
該描述包括所述事件或情況發生的情形以及所述事件或情況不發生的情形。 術語"化學式I的化合物"是用來包括如所披露的本發明的化合物，以及這樣的化
合物的藥用鹽、藥用酯、以及藥物前體。 術語"有效治療量"是指當向需要這樣的治療的哺乳動物給藥時，化學式I的化合物的量足以實現如下文所定義的有效治療。有效治療量將隨以下因素而變化待治療的受治療者和病情、受治療者的體重和年齡、病情的嚴重程度、給藥方式等，這些可以由本領域普通技術人員很容易確定。 術語"治療"或"處理"是指對哺乳動物疾病的任何治療，包括
(i)預防疾病，即，使疾病的臨床症狀不發展；
(ii)抑制疾病，即，阻止臨床症狀的發展；和/或
(iii)緩解疾病，S卩，使臨床症狀消退。 在許多情況下，本發明的化合物藉助氨基和/或羧基基團或與其類似基團的存在而能夠形成酸式鹽和/或鹼式鹽。術語"藥用鹽"是指這樣的鹽，其保留化學式I的化合物的生物有效性和性能，並且在生物上或在其它方面是合乎需要的。藥用鹼加成鹽可以由無機鹼和有機鹼製備。衍生自無機鹼的鹽(僅舉例說明)包括鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽以及鎂鹽。衍生自有機鹼的鹽包括但不限於伯胺、仲胺以及叔胺的鹽，如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二 (取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、鏈烯基胺、二鏈烯基胺、三鏈烯基胺、取代的鏈烯基胺、二 (取代的鏈烯基)胺、三(取代的鏈烯基)胺、環烷基胺、二 (環烷基)胺、三(環烷基)胺、取代的環烷基胺、二取代的環烷基胺、三取代的環烷基胺、環烯基胺、二 (環烯基)胺、三(環烯基)胺、取代的環烯基胺、二取代的環烯基胺、三
14取代的環烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、雜芳基胺、二雜芳基胺、三雜芳基胺、雜環基胺、二雜環基胺、三雜環基胺、混合的二胺和三胺，其中在胺上的至少兩個取代基是不同的並且選自由烷基、取代的烷基、鏈烯基、取代的鏈烯基、環烷基、取代的環烷基、環烯基、取代的環烯基、芳基、雜芳基、雜環、以及類似基團組成的組。還包括這樣的胺，其中兩個或三個取代基和氨基氮一起形成雜環基或雜芳基基團。 僅為舉例說明，適宜的胺的特定實例包括異丙胺、三甲胺、二乙胺、三異丙胺、三正丙胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、氨丁三醇、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、海巴明、膽鹼、甜菜鹼、乙二胺、葡糖胺、N-烷基葡糖胺、可可鹼、嘌呤、哌嗪、哌啶、嗎啉、N-乙
基哌啶等等。 藥用的酸加成鹽可以由無機酸和有機酸製備。由其可以衍生鹽的無機酸包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。由其可以衍生鹽的有機酸包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。 如本文所使用的，"藥用載體"包括所有溶劑、分散介質、塗層、抗菌藥以及抗真菌藥、等滲劑以及吸收延遲劑等等。這樣的介-質和藥劑用於藥物活性物質在本領域是眾所周知的。可以設想將其用於治療組合物中，除非任何常規的介質或藥劑與活性組分不相容。也可以將輔助的活性組分加入組合物中。 作為具有高度內在(固有)功效的激動劑的化合物可引起生物系統能夠引起的最大效應。這些化合物稱作"完全激動劑"。如果結合於效應物過程(effector process)的效率較高的話，它們能夠誘發最大可能的效應而沒有佔據所有受體。相反，"部分激動劑"可誘發反應(應答)，但不能誘發生物系統能夠引起的最大反應(應答)。它們可以具有合理的親合力，但具有較低的內在功效。部分&腺苷激動劑對於慢性治療可以具有附加的益處，因為它們較小可能誘導A丄受體的脫敏作用(R. B. Clark， B. J. Knoll， R. Barber TiPS，Vol. 20 (1999) p. 279-286)，並且較小可能引起副作用。
本發明的化合物的命名和編號是用化學式I的典型化合物來說明的，其中R是
2_氟苯基formula see original document page 16 其被命名為 (4S，5S，2R，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]_2-{6_[ (2-羥基環戊基)氨基]-嘌呤-9-基}草脲胺-3，4-二醇，或 2- {6- [ ((1RS， 2RS) _2_羥基環戊基)氨基]嘌呤_9_基} (4S， 5S， 3R) -5- [ (2-氟苯
基硫代)甲基]草脲胺_3，4- 二醇。 其中6-氨基取代基衍生自(1S， 2S) -2-氨基環戊基-1-醇的相關化合物被命名為2-(6-[((lS，2S)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]草脲胺-3，4-二醇。其中6-氨基取代基衍生自(lR，2R)-2-氨基環戊基-l-醇的相關化合物被命名為2-化-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]-草脲胺-3，4-二醇。其中6-氨基取代基衍生自(1R，2S)-2-氨基環戊基-1-醇的相關化合物被命名為2- {6- [ ((1R， 2S) -2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基} (4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]-草脲胺-3，4-二醇。其中6-氨基取代基衍生自(1S，2R) -2-氨基環戊基-1-醇的相關化合物被命名為2- {6-[ ((1S， 2R) -2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S， 5S， 3R) -5-[ (2-氟苯基硫代)甲基]_草脲胺_3， 4- 二醇。
合成反應參數 術語"溶劑"、"惰性有機溶劑"或"惰性溶劑"是指在與其一起描述的反應條件下為惰性的溶劑，[包括，例如，苯、甲苯、乙腈、四氫呋喃("THF")、二甲基甲醯胺("匿F")、氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、吡啶等]。除非有相反的規定，在本發明的反應中所使用的溶劑是惰性有機溶劑。 術語"足量"是指加入足以達到所述功能的量，例如使溶液達到所希望的體積(即，100% )。 化學式I的化合物的合成 在反應圖解I中示出了由6-氯嘌呤核苷開始來製備化學式I的化合物的過程。 反應圖解I
其中Ph是苯基。 歩驟1-化學式(2)的製備 化學式(2)的化合物是在質子溶劑(優選乙醇)中、在鹼(優選三乙胺)存在的情況下、並在約回流的溫度下通過化學式(1)的化合物與2-(苄氧基)環戊基胺反應約24小時而製得的。當反應基本完成時，通過常規方法來分離化學式(2)的產物，例如，減壓下除去溶劑，在乙酸乙酯和水之間分配殘留物，從有機層中除去溶劑，以及通過例如由乙酸乙酯/己烷的結晶作用或沉澱作用來純化殘留物。
歩驟2-化學式(3)的製備 然後將化學式(2)的化合物轉化成化學式(3)的化合物。在鹼(優選吡啶)存在的情況下，將亞硫醯氯加入到化學式(2)的化合物在惰性溶劑(優選乙腈)中的懸浮液中。優選在約ot:下反應約4小時，然後使升溫至室溫並過夜。當反應基本完成時，在減壓下濃縮獲得的懸浮液以提供化學式(3)的化合物，其用於下一步驟而無需純化。
歩驟3-化學式(4)的製備 化學式(4)的化合物是通過將化學式(3)的化合物溶解於鹼(優選氫氧化銨)和質子溶劑(優選甲醇)的混合物中而製得的。在約室溫下反應約30分鐘。當反應基本完成時，通過常規方法來分離化學式(4)的產物，例如，減壓下除去溶劑，在乙酸乙酯和水之間分配殘留物，並在減壓下除去乙酸乙酯。殘留物用於下一步驟而無需進一步提純。
歩驟4-化學式(5)的製備 然後在催化劑(優選氫氧化鈀)存在的情況下，通過用部分不飽和環烷基化合物(優選環己烯)進行處理來對化學式(4)的化合物進行去保護。可替換地，甲酸銨可以用來代替環己烯。在質子溶劑(優選乙醇)中並優選在約回流溫度下反應約18小時。當反應基本完成時，通過常規方法來分離化學式(5)的產物，例如通過在減壓下除去溶劑，接著研磨殘留物。 歩驟5-化學式I的製備 然後使化學式(5)的化合物與化學式RSH的化合物(優選2-氟苯硫酚)進行反應。在質子溶劑(優選N，N-二甲基甲醯胺)中、在鹼(例如氫氧化鈉)存在的情況下、並在約IO(TC的溫度下反應約3至5小時。可替換地，在質子溶劑(優選N， N- 二甲基甲醯胺)中、在叔鹼(優選三乙胺)存在的情況下、並在約室溫下反應約1至5天，優選約3天。當反應基本完成時，通過常規方法來分離化學式I的產物，例如通過在減壓下除去溶劑，接著用乙醚研磨殘留物。
起始原料的製備 在步驟l中，將l，2-(苄氧基)-環戊基胺用作起始原料。這種化合物(作為外消旋混合物或作為單獨的異構體)可商業獲得或可以通過本領域技術人員熟知的方法加以製備。例如，一種製備(lR，2R)-2-(苄氧基)-環戊基胺的方法圖示在以下的反應圖解I1中。 反應圖解II
formula see original document page 19
在第一步驟中，通過常規方法，例如通過在惰性溶劑中並在4_ 二甲氨基吡啶存在 的情況下進行反應，用(B0C^0(二碳酸二叔丁酯)對化學式(a)的化合物((1R，2R)-2-氨 基環戊-l-醇)進行N保護。然後在鹼(優選氫化鈉)存在的情況下，使受保護的環戊醇 (b)衍生物與苄基溴反應，用以形成(c)，接著以常規方法例如用在二氧雜環己烷中的鹽酸 對其進行去保護。 從(lS，2S)-2-氨基環戊-l-醇開始可提供具有與化學式(d)相反的立體化學特 性的化合物，而從(lRS，2RS)-2-氨基環戊-l-醇開始可提供化學式(d)的化合物的外消旋 類似物。 在反應圖解III中示出了一種用於製備化學式I的化合物的可替換過程。 反應圖解IIITBDMSO、 起始的受保護的環戊基衍生物可以衍生自(lR，2R)-2-氨基環戊-l-醇、(1S， 2S)-2-氨基環戊-l-醇、或(lRS，2RS)-2-氨基環戊-l-醇。通過本領域熟知的方法，羥基 基團被保護成為叔丁基二甲基甲矽烷基基團。 如反應圖解IV所示，可替換地，可以常規合成化學式I的化合物而無需使用任何 保護基團。 反應圖解IV
formula see original document page 21 在反應圖解V中示出了一種優選的製備化學式I的化合物的方法，該方法沒有必 要利用任何保護基團、或分離和/或純化中間體。
反應圖解V
歩驟l-化學式(12)的製備 通過與亞硫醯氯的反應將化學式(1)的化合物轉化成化學式(12)的化合物。通 常，在約2 2.5摩爾當量的鹼(優選吡啶)存在的情況下，將化學式(1)的化合物懸浮在 惰性溶劑(優選乙腈)中，並在約1小時內緩慢加入約5 5. 5摩爾當量的亞硫醯氯。優 選在約ot:下反應約3小時，然後使升溫至室溫並過夜。當反應基本完成時，在減壓下濃縮 獲得的懸浮液以提供化學式(12)的化合物，其優選用於下一步驟而無需提純。
歩驟3-化學式(13)的製備 通過將步驟1的粗產物溶解在質子溶劑(優選含水甲醇)和鹼(優選氨水)的混 合物中，由化學式(12)的化合物來製備化學式(13)的化合物。在約ot:下反應約i小時，接著在室溫下反應約3小時。當反應基本完成時，通過常規方法分離化學式(13)的產物，
並用於下一步驟而無需進一步提純。 歩驟4-化學式(5)的製備 在質子溶劑(優選異丙醇)中，在約3摩爾當量鹼(優選三乙胺)存在的情況下，並在約回流的溫度下通過與約1 1. 1摩爾當量的2-羥基環戊基胺反應約24小時，由步驟3的粗產物(化學式(13)的化合物)而製備化學式(5)的化合物。當反應基本完成時，通過常規方法來分離化學式(5)的產物，例如通過減壓下除去溶劑並用水攪拌殘留物。
歩驟5-化學式I的製備 然後使步驟4的產物(化學式(14)的化合物)與約3 5摩爾當量的化學式RSH的化合物，例如2-氟苯硫酚反應。在質子溶劑(通常為N，N-二甲基甲醯胺)中，在約5 6摩爾當量的鹼(例如氫化鈉、氫氧化鈉、或三乙胺，優選三乙胺)存在的情況下，在約室溫下反應約1 5天，優選約3天。當反應基本完成時，通過常規方法分離化學式I的產物。可以通過由各種溶齊U，例如甲醇、乙醇、異丙醇或甲醇和乙醇的混合物的再結晶作用來另外純化產物。可替換地，可以通過由乙酸乙酯的再結晶作用或用乙酸乙酯製成漿料來純化產物。,、微
一般應用 化學式I的化合物可有效治療已知對給予&腺苷受體的部分或完全激動劑有反應(應答)的病症。這樣的病症包括但不限於心律的急性和慢性病症，尤其是那些以快速心率為特徵的疾病，其中(快速)心率是由竇房、心房、以及AV結組織中的異常所驅動(激活)。這樣的病症包括但不限於心房纖顫、室上性心動過速以及心房撲動、充血性心力衰竭、非胰島素依賴性糖尿病、高血糖、癲癇(抗驚厥活性)、以及神經保護。Aj敫動劑在脂肪細胞中還具有抗脂解效應，其導致降低非酯化脂肪酸的釋放。
試驗 如在以上引用的那些專利和文獻、以及以下的實施例中所描述的，並通過對本領域技術人員來說顯而易見的方法進行活性試驗。
以下實施例是用來說明本發明的優選具體實施方式
。本領域技術人員應當明了，
在以下實施例中披露的技術代表由本發明人發現的並在本發明的實施中很好起作用的技
術，因此可以被認為構成了其實施的優選方式。然而，根據本發明披露的內容，本領域技術
人員應當明了，在不偏離本發明的精神和範圍的情況下，可以對所披露的特定的具體實施
方式進行多種變化並仍然獲得相同或類似的結果。 實施例1化學式(2)的化合物的製備
向6-氯嘌呤核苷(10. 0g，35mmo1)的乙醇(350mL)溶液中加入三乙胺(10. OmL，lOOmmol)和(1R，2R)-2-(節氧基)環戊基胺(5. 2g， 52mmol)。回流混合物24小時，在此期間反應從懸浮液變成透明溶液。在減壓下除去乙醇，然後在乙酸乙酯和水(lOOmL : 200mL)之間分配殘留物。分離有機層，然後用乙酸乙酯(2X75mL)洗滌水層。(硫酸鈉)乾燥合併的有機層，然後在減壓下除去溶劑。將殘留物溶解在乙酸乙酯(150mL)中，然後通過加入己烷來沉澱產物，以獲得作為白色固體的2-(6-([(lR，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(4S，3R，5R)-5-(羥甲基)草脲胺-3，4-二醇(12.0g，77% )。
力NMR(CD30D) S 1. 62—2. 16 (m， 6H) ， 3. 26—3. 29 (m， 1H， NHCH) ， 3. 68—3. 85 (m， 2H，CH2-5' ) ，4. 03-4. 10(m， 1H， CH—4' ) ， 4. 12—4. 16(m， 1H， CHOBn) ，4. 16—4. 19(m， 1H，3' CH)，4.71(s，2H， 0CH2Ph)，4. 83—4. 92(m，lH，2' CH) ， 5. 98(d， J = 6Hz，lH， H—l' )，7. 23—7. 35 (m，5H， PhH) ，8. 15(S， 1H， C-2H)。
B.化學式(2)的化合物的製備 類似地，按照以上1A的步驟，但用2-(苄氧基)環戊基胺的其它異構體代替(1R，2R)-2-(節氧基)環戊基胺，製得以下化合物 2-(6-{[(lS，2S)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 3R，5R)-5-(羥甲基)草脲胺-3，4-二醇； 2-(6-{[(lR，2S)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 3R，5R)-5-(羥甲基)草脲胺-3，4-二醇； 2-(6-{[(lS，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 3R，5R) -5-(羥甲基)草脲胺-3， 4- 二醇；以及 2-(6-([(lRS，2RS)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 3R，5R)-5-(羥甲基)草脲胺-3，4-二醇。
實施例2化學式(3)的化合物的製備
24
在(TC下，向在乙腈(15mL)中的2_(6_{[ (1R， 2R) _2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(4S，3R，5R)-5-(羥甲基)草脲胺-3，4-二醇(2.0g，4. 5,1)和吡啶(0. 728mL，9mmo1)經攪拌的懸浮液中滴加亞硫醯氯(1. 7mL，22. 5mmo1)。在(TC下攪拌4小時以後，使反應升溫至室溫，然後攪拌過夜。在減壓下從產生的懸浮液除去溶劑，以提供4-(6-([(lR，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(6S，3aR，6aR)-6-(氯甲基)-4H， 6H， 3aH， 6aH-草脲胺並[3， 4_d] 1， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷(dioxathiolan) -2-酮，
其用於下一步驟而無需進一步提純。
B.僕射(3)齢洽麵燃 類似地，按照以上2A的步驟，但用2- (6- {[2-(苯基甲氧基)環戊基]-氨基}嘌呤-9-基)(4S，3R，5R)-5-(羥甲基)草脲胺_3， 4-二醇的其它異構體代替2-(6-{[ (1R，2R) -2-(苯基甲氧基)環戊基]-氨基}嘌呤-9-基)(4S， 3R， 5R) _5_ (羥甲基)草脲胺-3，4-二醇，製得以下化合物 4-(6-{[(lS，2S)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(6S，3aR，6aR) -6-(氯甲基)-4H， 6H， 3aH， 6aH-草脲胺並[3， 4_d] 1 ， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷-2-酮；
4-(6-{[(lR，2S)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(6S，3aR，6aR) -6-(氯甲基)-4H， 6H， 3aH， 6aH-草脲胺並[3， 4_d] 1 ， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷-2-酮；
4-(6-{[(lS，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(6S，3aR，6aR) -6-(氯甲基)-4H， 6H， 3aH， 6aH_草脲胺並[3， 4_d] 1， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷_2_酮；以及 4-(6-([(lRS，2RS)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(6S， 3aR，6aR) -6-(氯甲基)-4H， 6H， 3aH， 6aH-草脲胺並[3， 4_d] 1 ， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷_2_酮。
實施例3 化學式(4)的化合物的製備
25
將來自實施例2的4- (6- {[ (1R， 2R) _2_ (苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(6S，3aR，6aR)-6-(氯甲基)_4H， 6H， 3aH， 6aH_草脲胺並[3， 4_d] 1， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷-2-酮溶解在甲醇和水(40mL/2mL)的混合物中，然後向此溶液中滴加濃氫氧化銨(2.2mL，28%)。在23。C下攪拌30分鐘以後，在減壓下除去溶劑，然後用水(15mL)稀釋殘留物。用乙酸乙酯(3X75mL)萃取含水混合物，用MgS04乾燥，然後在減壓下除去溶劑，以提供2- (6- {[ (IR， 2R) -2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(4S， 5S， 3R) -5-(氯甲基)草脲胺-3， 4- 二醇，其用於下一步驟而無需進一步提純。
B.僕射(4)齢洽麵燃 類似地，按照以上3A的步驟，但用4-(6-([2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(6S， 3aR， 6aR) -6-(氯甲基)_4H， 6H， 3aH， 6aH-草脲胺並[3， 4_d] 1， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷-2-酮的其它異構體代替4-(6-([(lR，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9-基)(6S， 3aR， 6aR) _6_ (氯甲基)-4H， 6H， 3aH， 6aH-草脲胺並[3， 4_d] 1， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷_2-酮，製得以下化合物 2-(6-{[(lS，2S)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇； 2-(6-{[(lR，2S)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇； 2-(6-{[(lS，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R) -5-(氯甲基)草脲胺-3， 4- 二醇；以及 2-(6-([(lRS，2RS)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇。
實施例4 化學式(5)的化合物的製備
,、《頻 將在實施例3中獲得的2-(6-([(lR，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇(22g)溶解在乙醇(450mL)和環己烷(200mL)中。向此溶液中加入氫氧化鈀(20摩爾％，最初加入1克，6小時後加入1克，以及14小時後加入1克)，並使反應混合物回流18小時。將反應混合物在仍然較熱的同時通過硅藻土 (或寅氏鹽)過濾，然後在減壓下從濾液中除去溶劑。用乙醇(20mL)研磨產物，過濾，然後用乙醇洗滌，以提供作為白色粉末的2-化-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基} (4S， 5S， 3R) -5-(氯甲基)草脲胺-3， 4- 二醇(7. 3克)。 另外，通過將可回收的氫氧化鈀懸浮在甲醇(200mL)中，並在9(TC下加熱混合物1
小時來回收材料。通過硅藻土過濾熱混合物，然後用熱甲醇進一步洗滌硅藻土。在減壓下
濃縮濾液，然後用乙醇(20mL)研磨殘留物，以提供另外8.6克的2-化-[((lR，2R)-2-羥基
環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇。 力NMR (DMS0-d6) S 1. 64-2. 18 (m， 6H) ， 3. 26-3. 29 (m， 1H， NHCH) ， 3. 83-3. 97 (m， 2H，
CH2C1 5， ) ，4. 03-4. 09(m， 1H， CH_4， ) ，4. 12—4. 17(m， 1H， CHOH) ，4. 16—4. 19 (m， 1H，3' CH)，
4. 84-4. 92(m， 1H，2' CH) ， 5. 96(d， J = 6Hz， 1H， H—l' ) ， 7. 23—7. 35 (m， 5H， PhH) ，8. 15(S， 1H，
C-2H) ，8. 39(s， 1H， C-8H)。 B.化學式(5)的化合物的製備 類似地，按照以上4A的步驟，但用2-(6-([2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺_3， 4-二醇的其它異構體代替2-(6-{[ (1R，2R)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤-9-基)(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺_3，4-二醇，製得以下化合物 2-(6-{[(lS，2S)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇； 2-(6-{[(lR，2S)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇； 2-(6-{[(lS，2R)-2_(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R) -5-(氯甲基)草脲胺-3， 4- 二醇；以及 2-(6-([(lRS，2RS)-2-(苯基甲氧基)環戊基]氨基}嘌呤_9_基)(4S， 5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇。
27
實施例5化學式I的化合物的製備，其中R是2- tt苯某
formula see original document page 28 向2-氟苯硫酚(38mL，406mmo1)的2N氫氧化鈉(lOOmL)溶液中加入在N， N_ 二甲基甲醯胺(120mL)中的2-化-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基} (4S， 5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇(15. 0g，40. 6mmo1)。將混合物升溫至10(TC持續4小時，通過TLC跟蹤反應進程。在減壓下除去N，N-二甲基甲醯胺，接著用水(200mL)稀釋剩餘的混合物，用乙酸中和，用乙酸乙酯(3X125mL)萃取，然後用MgS04乾燥合併的有機層。在減壓下除去溶劑以後，用乙醚研磨殘留物並過濾，以提供16克作為白色粉末的2-{6-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]草脲胺-3，4-二醇(產率為85% )。 力NMR (DMS0-d6) S 1. 66—2. 27 (m， 6H) ， 3. 42—3. 59 (m， 1H， NHCH) ， 4. 05-4. 14 (m， 2H)，4. 03-4. 09 (m， 1H， CH—4' ) ， 4. 14—4. 19 (m， 1H) ， 4. 16—4. 19 (m， 1H， 3， CH) ， 4. 84—4. 92 (m， 1H，2， CH)，5. 97(d，J = 6Hz，lH，H-l' )，7. 05—7. 55 (m， 4H， PhH) ， 8. 10 (S， 1H， C—2H) ， 8. 15(s，lH，C-8H)。B.化學式I的化合物的製備，其中R是2- tt苯某 類似地，按照以上5A的步驟，但用2-{6-[(2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基}(4S， 5S， 3R) -5-(氯甲基)草脲胺-3， 4- 二醇的其它異構體代替2- {6_[ ((1R， 2R) -2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺_3， 4-二醇，製得以下化合物 2-化-[((lS，2S)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S， 5S， 3R) _5_[ (2-氟苯基硫代)甲基]草脲胺-3，4-二醇； 2- {6- [ ((1R， 2S) _2_羥基環戊基)氨基]嘌呤_9_基} (4S， 5S， 3R) _5_ [ (2-氟苯基硫代)甲基]草脲胺-3，4-二醇； 2-化-[((lS，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S， 5S， 3R) _5_[ (2-氟苯基硫代)甲基]草脲胺_3， 4- 二醇；以及
2- {6- [ ((1RS， 2RS) _2_羥基環戊基)氨基]嘌呤_9_基} (4S， 5S， 3R) -5- [ (2-氟苯
基硫代)甲基]草脲胺_3，4- 二醇。 C.僕射I齢洽麵燃，柳鵬R 類似地，按照以上5A的步驟，但用化學式RSH的其它苯硫酚代替2-氟苯硫酚，製得化學式I的其它化合物。
實施例6 僕射(12)齢洽麵燃
製備1 在55分鐘的時間內，向在乾燥的乙腈(600ml)中的6_氯嘌呤核苷(50. Og，174.4mmo1)和經蒸餾的吡啶(30ml， 370mmo1)的冷((TC，冰浴)懸浮液中滴加亞硫醯氯(S0C12，66. 0ml，907mmo1)。在(TC下攪拌反應混合物3小時，然後在室溫下攪拌18小時。在減壓和4(TC下濃縮黃色溶液，然後在高真空下乾燥6小時。將殘留物(6S，4R，3aR，6aR) -6-(氯甲基)-4- (6-氯嘌呤-9-基)_4H， 6H， 3aH， 6aH-草脲胺並[3， 4_d] 1 ， 3， 2- 二氧雜硫雜環戊烷-2-酮(12)用於隨後的反應而無需進一步提純。
2.僕射(12)齢洽麵贈麵燃 在30 60分鐘的時間內，向在乾燥的二氯甲烷(15升)中的6-氯嘌呤核苷(1Kg)和經蒸餾的吡啶(850ml)的混合物中滴加亞硫醯氯(S0Cl2，530ml)，同時保持溫度低於3(TC。在30。C下攪拌反應混合物4小時，然後冷卻至2(TC。加入無水乙醇(1700ml)，保持溫度在2(TC ，並攪拌混合物15分鐘。然後緩慢加入水(3. 5升)，並攪拌混合物30分鐘，其後分離內容物。進行相分離，然後用飽和碳酸氫鈉(4升)洗滌有機層。在兩相分離後，用飽和氯化鈉(2.6升)洗滌有機層，分離，然後在減壓下除去溶劑直至達到大約4升的體積，從而提供溶解狀態的(6S， 4R， 3aR， 6aR) -6-(氯甲基)_4_ (6-氯嘌呤-9-基)_4H， 6H，3aH，6aH-草脲胺並[3，4_d] 1， 3， 2_二氧雜硫雜環戊烷_2_酮(12)的溶液，其用於隨後的反應而無需進一步提純。
實施例7 僕射(13)齢洽麵燃
29formula see original document page 30
將獲自實施例6 (製備1)的化學式(12)的化合物溶解於甲醇(1000ml)和蒸餾水(50ml)中。將溶液冷卻至(TC，然後在25分鐘內滴加濃氨水(28% ， 56ml)。在(TC下連續攪拌l小時，然後在室溫下攪拌3小時。在此期間加入另外10ml的濃氨水(28%)(通過TLC跟蹤反應進程，CH^iyMeOH為9 : 1)。然後在減壓下濃縮反應混合物並在室溫下用檸檬酸的5%水溶液(1000ml)水解殘留物。用乙酸乙酉旨(1X900ml，lX400ml，lX200ml，2X100ml)萃取水層，然後用飽和碳酸氫鈉(450ml)洗滌合併的有機層。用乙酸乙酯(3X50ml)萃取碳酸氫鈉水層。用鹽水(400ml)洗滌合併的有機層，然後用乙酸乙酯(3X50ml)萃取氯化鈉水層。用硫酸鈉乾燥合併的有機層，過濾，然後在減壓下濃縮濾液以給出41. 8g化學式(13)的化合物(4S，5S，2R，3R)-5-(氯甲基)-2-(6-氯嘌呤-9-基)草脲胺-3，4-二醇。未進行進一步提純。
製備2 可替換地，向在實施例6製備2中獲得的溶解狀態的(6S，4R，3aR，6aR)-6-(氯甲基)_4- (6-氯嘌呤-9-基)-4H， 6H， 3aH， 6aH_草脲胺並[3 ， 4_d] 1 ， 3 ， 2- 二氧雜硫雜環戊烷-2-酮(12)的溶液中加入氫氧化銨(500ml)，然後在25t:下攪拌混合物12小時。濾出固體，然後用二氯甲烷(500ml)洗滌。合併濾液和洗滌物，然後在真空下將體積減少至約6升。未進行進一步提純。
實施例8 化學式(5)的化合物的製備
formula see original document page 30
製備1 向在脫氣異丙醇(100ml)中的(R， R) -2-氨基戊醇鹽酸鹽(或氫氯化物)(34. 2g，249mmol)和蒸餾三乙胺(用氫化鈣乾燥，95ml， 69g， 226mmol)的懸浮液中滴加在400ml異丙醇中的(4S，5S，2R，3R)-5-(氯甲基)-2-(6-氯嘌呤-9-基)草脲胺-3，4-二醇(36. 3g，118. 7mmo1)溶液。在室溫下攪拌反應混合物30分鐘，然後回流(油浴溫度約80°C ) 20小時。在將反應混合物冷卻至室溫後，在減壓下除去溶劑，然後向殘留物中加入1000ml水。在室溫下攪拌懸浮液3. 5小時，隨後濾出固體物質，用水洗滌(1 X 60ml和1 X 90ml)，然後在真空下用P205乾燥3天以提供68. 0g(81% )作為淺棕色粉末的2-{6-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇。
製備2 可替換地，將在實施例7、製備2中獲得的溶液冷卻至20 25。C，然後加入三乙胺(1000ml)，接著加入(R， R) -2-氨基戊醇(530g)。回流混合物8小時，然後在大氣壓下除去溶劑直至達到約4升的體積。將混合物冷卻至55 6(TC，加入水(15升)，然後將混合物冷卻至20 25°C 。攪拌混合物約1小時，然後過濾，用無水乙醇(1. 25升)洗滌固體，隨後在減壓下乾燥固體，其間不允許溫度超過60°C 。 B.類似地，按照以上8A(製備1或製備2)的步驟，但用(S， S)-2-氨基戊醇鹽酸鹽(或氫氯化物)代替(R， R)-2-氨基戊醇鹽酸鹽(或氫氯化物)，則製得2-化-[((lS，2S)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇。
C.類似地，按照以上8A(製備1或製備2)的步驟，但用(1R， 2S) _2_氨基戊醇鹽酸鹽(或氫氯化物)代替(R， R)-2-氨基戊醇鹽酸鹽(或氫氯化物)，則製得2-化-[((lR，2S)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇。
D.類似地，按照以上8A(製備1或製備2)的步驟，但用(1S， 2R) _2_氨基戊醇氫氯化物代替(R，R)-2-氨基戊醇氫氯化物，則製得2-化-[((lS，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S， 5S， 3R) -5-(氯甲基)草脲胺_3， 4- 二醇。
實施例9化學式I的化合物的製備,其中R是2-氟苯某
formula see original document page 31 製備1 向在脫氣無水N，N-二甲基甲醯胺(1.8升)中的2-化-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]-嘌呤-9-基} (4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇(166. 5g，0.457mo1)和由氫化鈣蒸餾的三乙胺(352ml，256g，2. 53mol，4當量)的溶液中加入2-氟苯硫酚(190ml，228g， 1. 78mol，4當量)，每2-3小時加入38. 5ml的部分。在室溫下攪拌混合物4天，同時連續將氮氣鼓入溶液中(通過^ NMR對反應進行監測)。在反應完成以後，將反應混合物注入到7升的乙酸乙酯中，然後用3升水進行洗滌。用乙酸乙酯(2X500ml)萃取水層，並用水(3X2升)洗滌合併的有機層，然後減少至約1.8升的體積，從而提供白色固體的懸浮液。在室溫下攪拌懸浮液9小時，然後濾出白色沉澱物，用乙醚(3X200ml)洗滌，接著在高真空下乾燥24小時，以給出131g(產率為63X)作為白色粉末的2-化-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基l(4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]_草脲胺_3， 4-二醇(純度為98.9% )。 力NMR (DMS0-d6) S 1. 66—2. 27 (m， 6H) ， 3. 42—3. 59 (m， 1H， NHCH) ， 4. 05-4. 14 (m， 2H)，4. 03-4. 09(m， 1H， CH—4' ) ，4. 14—4. 19(m， 1H) ，4. 16—4. 19 (m， 1H，3' CH) ， 4. 84—4. 92 (m， 1H，2， CH)，5. 97(d，J = 6Hz，lH，H-l' )，7. 05—7. 55 (m， 4H， PhH) ， 8. 10 (S， 1H， C—2H) ， 8. 15(s，lH，C-8H)。 通過在1升乙醚/乙醇(50 : 1)中攪拌過夜對產物進行進一步純化，以給出127g的純2-化-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]-草脲胺-3，4-二醇。
製備2 將實施例8、製備2的產物(1Kg)溶解在N，N- 二甲基乙醯胺(2. 7升)中，然後加入碳酸鉀(560g)。向保持低於25°C的混合物中加入2-氟苯硫酚(380g)，然後在60 65°C下加熱混合物約6小時。然後將混合物冷卻至25 3(TC，並加入乙酸乙酯(IO升)，接著加入氯化鈉(260g)的水(4.9升)的溶液，並攪拌混合物15分鐘。在分離成兩層以後，用氯化鈉(260g)的水(4.9升)溶液再次洗滌有機相，然後攪拌混合物15分鐘。在分離以後，在大氣壓下將有機層濃縮至約5升的體積，然後加入甲醇(IO升)。在大氣壓下再次將混合物濃縮至約2. 8升的體積，然後將獲得的溶液冷卻至約35 40°C。然後加入二氯甲烷(5升)，並將混合物保持在約35 40°C 1小時，接著冷卻至0 5t:之間30分鐘。濾出固體產物，用二氯甲烷(2.8升)洗滌，然後在減壓下乾燥至恆重，其間不允許溫度高於5(TC，以提供2-化-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S，5S，3R)-5-[(2-氟苯基硫代)甲基]-草脲胺-3，4-二醇。 通過下述步驟對產物進行進一步提純在60 7(TC之間的溫度下，將1Kg的產物(2- {6- [ ((1R， 2R) -2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基} (4S， 5S， 3R) -5- [ (2-氟苯基硫代)甲基]-草脲胺-3，4- 二醇)溶解在甲醇(20升)中，保溫1小時，冷卻至45 50°C，然後通過1微米的過濾器過濾溶液，並保持溶液溫度高於40°C 。將溶液濃縮至約7升，並保持溶液溫度高於4(TC，然後將得到的溶液保持在50 55°C 1小時。然後在2小時內將溶液冷卻至-5t:，並將溫度保持在-5t: l小時。在-5t:下濾出產物，並使用濾液來洗滌固體，以提
供純的(2- {6-[ ((1R， 2R) -2-羥基環戊基)氨基]嘌呤-9-基} (4S， 5S， 3R) -5-[ (2-氟苯基硫代)甲基]_草脲胺_3， 4- 二醇)。 B.化學式I的化合物的製備,其中R是2-氟苯某 類似地，按照以上9A(製備1或製備2)的步驟，但用2-{6-[(2_羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S，5S，3R)-5-(氯甲基)草脲胺_3， 4-二醇的其它異構體代替2-(6-[((lR，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S， 5S， 3R)-5-(氯甲基)草脲胺-3，4-二醇，製得以下化合物 2- {6- [ ((1S， 2S) _2_羥基環戊基)氨基]嘌呤_9_基} (4S， 5S， 3R) _5_ [ (2-氟苯基
硫代)甲基]草脲胺-3，4-二醇； 2- {6- [ ((1R， 2S) _2_羥基環戊基)氨基]嘌呤_9_基} (4S， 5S， 3R) _5_ [ (2-氟苯基硫代)甲基]草脲胺-3，4-二醇； 2-化-[((lS，2R)-2-羥基環戊基)氨基]嘌呤_9-基} (4S， 5S， 3R) _5_[ (2-氟苯基硫代)甲基]草脲胺_3， 4- 二醇；以及 2- {6- [ ((1RS， 2RS) _2_羥基環戊基)氨基]嘌呤_9_基} (4S， 5S， 3R) _5_ [ (2-氟苯
基硫代)甲基]草脲胺_3，4- 二醇。 C.僕射I齢洽麵燃，柳鵬R 類似地，按照以上9A(製備1或製備2)的步驟，但用化學式RSH的其它苯硫酚代
替2-氟苯硫酚，製得化學式I的其它化合物。 實施例10 結合測I定-DDL細胞 麵歸 在95%空氣和5% C02的調溼氣氛中，利用杜伯科(Dulbecco)改進的Eagle介質(匿EM)，使DDT細胞(倉鼠輸精管平滑肌細胞系)在培養皿中生長為單層，其中杜爾貝科改進的Eagle介質(DMEM)含有2. 5 y g/ml的兩性黴素B、100U/ml的青黴素G、0. lmg/ml的硫酸鏈黴素以及5%的胎牛血清。通過分散在漢克平衡鹽溶液(HBSS)(其不含二價陽離子並含有lmM EDTA)中而使細胞每周傳代培養兩次。然後將細胞接種在生長培養基中，密度為1. 2X 105個細胞/平皿，接著在大約1天預融合的4天以後進行實驗。
月草先U口口口 用HBSS(2X 10mL)洗滌附著的細胞兩次，在4。C下在5ml的50mM Tris-HCl緩衝液(pH 7. 4)中藉助於橡膠澱帚(橡膠頭玻璃攪棒，rubber policeman)擦淨平皿，然後均化懸浮液10秒鐘。然後在27，000Xg下離心懸浮液10分鐘。如上所述，通過旋轉和離心將小丸再懸浮在均化緩衝液中。將最終的小丸再懸浮在1體積50mM的Tris-HCl緩衝液(pH7.4，含有5mM的MgC12)中，用於AlAdoR測定。對於[35S]GTP y S結合測定，將最終的小丸再懸浮在50mM的Tris-HCl中，其pH 7. 4、含有5mM的MgCl2、100mM的NaCl以及lmM的二硫蘇糖醇。然後將這種膜懸浮液置於液氮中IO分鐘，融化(解凍)然後用於測定。藉助Bradford 測定試劑盒並利用牛血清白蛋白作為標準對蛋白質含量進行測定。
競爭性結合測定 通過在50mM的Tris緩衝液中(5X組織質量的體積，pH = 7. 4)均漿來製備豬紋狀體。在4°C以及19， OOOrpm下離心25分鐘以後，棄去上清液，並重複該過程兩次。對化學式I的化合物進行測定以確定它們對豬紋狀體膜製品或DDT丄膜製品中的A1受體的親合力。簡單地說，用腺苷脫氨酶和50mM Tris緩衝液(pH = 7. 4)處理0. 2mg的豬紋狀體膜或DDT丄細胞膜，接著混合。向豬的膜中加入2iiL的本發明化合物的連續稀釋的匿S0儲備液，其濃度為100微摩爾至10nM。對照(樣)只接收2微升的DMSO，然後加入在Tris緩衝液
33(50mM，pH為7.4)中的用於豬紋狀體的拮抗劑[3H]8-環戊基黃嘌呤(CPX)或用於DDT丄膜的激動劑[3H]2-氯-6-環戊基腺苷(CCPA)，以獲得2nM的最終濃度。在23。C下溫育2小時以後，利用膜採集器並利用膜的多次洗滌(3X)來過濾溶液。在提供氚化CPX置換量的閃爍混合劑(scintillation cocktail)中或通過化學式I的化合物的競爭結合來計數濾片(filter disk)。 本測定表明，化學式I的化合物對於A1腺苷受體顯示出較高、中等、或較低的親合力。 實施例11 「mS1GTPyS結合測定 A丄激動劑剌激的[35S]GTP y S結合是通過由Giersckik等人(1991)和Lorenzen等人(1993)所描述方法的改進方法加以測定的。在3(TC下，在0. 1ml的體積中溫育膜蛋白質(30 50 ii g)90分鐘，其中在0. lml的體積中含有50mM的Tris-HCL緩衝液(pH7. 4)、5mM的MgCl2、 lOOmM的NaCl、 lmM的二硫蘇糖醇、0. 2單位/ml的腺苷脫氨酶、0. 5% BSA、 lmMEDTA、10mM GDP、0. 3nM[35S]GTP y S以及含有或不含有不同濃度的CPA。非特異性結合是通過加入10 M的GTP y S來測定的。激動劑剌激的結合測定為在有CPA的情況下的總結合和在沒有CPA的情況下測定的基礎結合之間的差異。先前的報導已經表明，激動劑剌激的[35S]GTP yS結合依賴於GDP的存在(Gierschik et al. ， 1991 ;Lorenzen et al. ， 1993 ;Traynor&Nahorski, 1995)。在初步實驗中，研究發現，10 y MGDP給出CPA依賴性[35S]GTP y S結合的最佳剌激，因而將此濃度用於所有研究中。在飽和實驗中，用0. 5 lOOOnM的GTP y S溫育0.5nM的[35S]GTPyS。在溫育結束時，如上所述，過濾每種懸浮液並測定保留的放射性。 本測定表明，化學式I的化合物是A1腺苷受體的部分或完全激動劑。
實施例12
cAMP測定 利用兔抗體進行的閃爍迫近分析法(SPA)指向cAMP，其中利用腺苷3'，5'-環磷酸2' -0-丁二醯-3_[1251]碘酪氨酸甲酯的附加示蹤物以及含有抗兔特異性抗體的螢光微球(f luoromicrosphere)，如由Amersham Pharmacia Biotech (Biotrak cellularcommunication assays (Biotrak細胞通訊測定))所描述的。簡單地說，在37t: (5% C02和95%溼度)下，在底部透明的96孔微量滴定板中培養DDT1細胞，其中不透明孔的濃度在40iU的HBSS中為104至106個細胞/孔之間。在37。C，在咯利普蘭(50 y M)以及5 y M弗司扣林存在的情況下，用DD1\細胞在不同濃度下溫育本發明的部分或完全Al激動劑(5iU)10分鐘。通過用5iU的10%溴化十二烷基三甲銨進行處理來立即溶解細胞，接著利用微孔板搖床進行搖動。在溫育(微孔)板5分鐘以後，向每個孔中加入免疫試劑溶液(150iil，含有等體積的示蹤物、抗血清、以及SPA螢光球(fluorosphere))，接著密封(微孔)板。在23°CT 15 20小時以後，通過在微量滴定板閃爍計數器中計數2分鐘來測定與螢光微球結合的[^1]cAMP的量。與利用類似程序針對cAMP所產生的標準曲線的計數比較來提供在細胞溶胞作用以後存在的cAMP。 本測定表明，化學式I的化合物作為Ai激動劑具有cAMP的部分或完全降低而在功能上是活性的。
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雖然本發明根據其特定的具體實施方式
而加以描述，但是本領域技術人員應當明了，在不偏離本發明的真正精神和範圍的情況下，可以進行多種改進以及進行等同替換。此外，可以作出多種改進以使特定的情況、材料、物質組成、工藝、一個工藝步驟或多個工藝步驟適應本發明的目的、精神和範圍。所有這樣的改進均包括在所附的權利要求書的範圍內。以上引用的所有專利和出版物均以引用方式結合於本文中。
權利要求
一種用於製備以下化學式的化合物的方法包括用鹼與以下化學式的化合物接觸F2009102158428C00011.tif,F2009102158428C00012.tif
2. 根據權利要求l所述的方法，其中，所述鹼是氨。
3. 根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述反應是在甲醇或二氯甲烷中進行的。
4. 一種用於製備以下化學式的化合物的方法formula see original document page 2包括在鹼存在的情況下用亞硫醯氯與以下化學式的化合物接觸a
5. 根據權利要求4所述的方法，其中，所述鹼是吡啶。
6. 根據權利要求4或5所述的方法，其中，所述反應是在二氯甲烷中進行的。
全文摘要
本發明披露了適合於大規模製造新型化合物的合成方法，這些化合物是部分和完全A1腺苷受體激動劑，可用於治療各種疾病，尤其是心動過速和心房撲動、心絞痛、以及心肌梗死。
文檔編號C07H19/16GK101775052SQ20091021584
公開日2010年7月14日 申請日期2005年8月30日 優先權日2004年8月30日
發明者埃爾法蒂赫·埃爾扎因, 安東尼·迪桑蒂, 彼得·A·克爾納斯特, 斯坦尼斯拉斯·馬耶爾, 斯科特·A·米勒, 傑夫·扎布沃茨基, 麥可·G·奧根, 雅羅斯拉夫·比洛金 申請人:吉利德帕洛阿爾託股份有限公司