博落回總生物鹼鹽及其製備方法和應用的製作方法

2023-10-04 10:42:29 2

專利名稱：博落回總生物鹼鹽及其製備方法和應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及新的博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽及應用、製備方法。
背景技術：
博落回(Macleaya cordata(Willd.)R.Br.)，又名號筒草、號筒杆、泡桐杆、勃勒回、山大筒、黃薄荷、黃婆娘、三錢三、野麻子、吹火筒，是罌粟科博落回屬多年生高大草本，使用博落回治療疥癬、疔毒及殺蟲滅蛆等在我國有悠久的歷史。最早記載博落回的本草文獻為《本草拾遺》。現統一命名為博落回，廣泛用於醫藥、生物農藥、獸醫獸藥、精細化工產品原料。
博落回為多年生高大草本，高1～2.5m，全體帶有白粉，折斷後有黃汁流出。根粗大，橘紅色。莖圓柱形，直立，中空，綠色，有時帶紅紫色。單葉互生，闊卵形，裂片有不規則波狀齒，上面綠色光滑，下面白色，具密細毛。花白色，蒴果下垂，倒卵狀長橢圓形，扁平，紅色。種子4～6粒。花期6～7月，果期8～11月。生於山坡，丘陵或低山草地，林邊，路旁等處。分布長江流域中、下遊各省。
博落回是生長於長江中下遊地區的民間習用草藥，藥用始載於《本草拾遺》，陳藏器謂「博落回，生江南山谷，莖葉如蓖麻，莖中空，吹之作聲，如博落回，折之有黃汁，藥人立死，不可入口也」。又謂「主惡瘡癭根，瘤贅瘜肉，白癜風，蠱毒」。《本草綱目》列於蓖麻附錄項下，均指此種植物。該藥味苦，性寒。有消腫、解毒、殺蟲的功能。傳統用於用於疔毒膿腫，惡瘡潰瘍，燙傷、頑癬等。
博落回各部位均可使用，報導中多以莖杆和根的使用為多，果實的研究及使用報導則較為少見，本專利以博落回果實的研究和應用為主，是對博落回使用的有益探索與創新。
博落回中主要含有血根鹼(Sanguinarine)、白屈菜紅鹼(Chelerythrine)、博落回鹼(Bocconine)、博落回寧鹼(Bocconoline)、甲氧基白屈菜紅鹼(Chelilutine)、二氫血根鹼(dihydrosanguinarine)、二氫白屈菜紅鹼(Dihydrochelerythrine)等苯並菲啶型生物鹼及原阿片鹼(Protopine)，α-別隱品鹼(α-Allocryptopine)、β-別隱品鹼(β-Allocryptopine)等原託品型生物鹼。果實中生物鹼含量較全草要高，可達3％以上，又以血根鹼和白屈菜紅鹼為主，而毒性成分原阿片鹼在果實中含量則較少。博落回莖中則以二氫血根鹼、二氫白屈菜紅鹼、6-甲氧基二氫白屈菜紅鹼等為主，6-甲氧基二氫血根鹼則為莖中發現的微量成分。
現代藥理研究表明博落回具有明顯的抗菌、殺蟲、改善肝功能、提高免疫力及抗腫瘤等作用。
目前，已有US 4517172、US4590061、US4683133等美國專利涉及將血根提取物、博落回提取物等用於牙菌斑顯示劑及牙周病等口腔疾病的治療。另外，美國專利US 4145412及US 4689216則描述了含血根提取物、博落回提取物或其有效成分應用於牙膏的情況。日本專利JP62185026描述了博落回提取物及其類似物用於治療皮膚瘙癢的方法；JP62093237則描述了博落回用於治療髮癬菌病(Trichophytosis)的方法；JP63141916、JP63072617則是將博落回應用於頭髮的滋養方面。
國內目前也有一些使用博落回或其提取物的專利，在醫藥方面的應用主要涉及以下一些方向。CN1470513和CN1457780公開了將博落回應用於抗癌方向的方法；CN1425460及CN1199640涉及將博落回應用於皮膚護理方面；CN1065394涉及將博回應用於漱口水；CN1060215則將博落回應用於治療肝炎。
目前，博落回提取物，主要成分為血根鹼氯化物和白屈菜紅鹼氯化物，已在美國環保署獲得登記，登記的主要活性成分為氯化血根鹼和氯化白屈菜紅鹼，登記類型為殺菌劑(Fungicide)。國內博落回植物農藥也已獲得登記，登記的有效成分為血根鹼，登記類型為殺蟲劑/殺菌劑。
博落回生物鹼雖然有明顯的生物活性，但其溶解性很低，而且在鹼性條件下易發生變化，因此，博落回生物鹼很難直接發揮其諸多生物活性，所以現在市場上出現的產品多以其鹽酸鹽或硫酸鹽應用於產品中。但是以博落回總生物鹼的鹽酸鹽或硫酸鹽來替代博落回總生物鹼是否合理，能否提高或保證博落回總生物鹼的生物活性，未在已有的有關博落回的應用和研究文獻中有所報導，缺乏有效的研究和論證，是個需要深入探討的問題。

發明內容
本發明的目的之一在於提供一種具有更好的生物活性，消炎，殺菌效果，可定量的博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽。
本發明的另一目的是提供上述博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽的製備方法。
本發明還一目的旨在提供上述博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽的應用。
一些有機酸具有很廣泛的生理活性，比如水楊酸或阿斯匹林，不但具有抗菌消炎、解熱鎮痛的作用，還具有免疫調節，抑制腫瘤的活性，但由於酸性強，也導致此類物質具有一定的胃腸道反應和對肝、腎等器官的不良作用，從而限制了應用。對此類物質，一般採用結構修飾的方法來降低它們的副作用，主要方向就是減少化合物的酸性，比如與胺類化合物脫水生成醯胺或者將羧基改造為其它基團。
硼酸與水楊酸、苯甲酸、馬來酸、酒石酸同是可用於消毒、抑菌的活性物質，具有明顯的抑菌、抗炎作用，而且硼酸也不是典型的礦酸，所以本發明也涉及到博落回總生物鹼硼酸鹽的製備與應用研究。但現有技術中均是將博落回總生物鹼、及硼酸與水楊酸、苯甲酸、馬來酸、酒石酸等其藥理及相關的作用都是分別進行研究。
本發明的發明人則是突破上述研究慣例，用一種新的角度去考慮，以博落回總生物鹼為工具，通過與經發明人多次研究試驗後才決定採用的硼酸與水楊酸、苯甲酸、馬來酸、酒石酸這些酸類物質組合成鹽的方式來達到降低其酸性並保持或提高其活性而增加其使用價值的目的。因此本發明通過讓此類有機酸及硼酸與博落回總生物鹼成鹽，一方面對於博落回總生物鹼而言可在解決其溶解性的同時有效保證甚至提高其生物活性，另一方面對於所選有機酸及硼酸而言，又可降低其酸性，提高其使用價值。
由於本發明所涉及的有機酸及硼酸與博落回總生物鹼所形成的鹽屬於弱酸弱鹼鹽，所以成鹽的條件和性質與以往文獻中的鹽酸鹽或硫酸鹽有明顯區別。本發明對此進行了深入研究，提出了製備博落回有機酸鹽及硼酸鹽的新工藝。
最終，所形成的博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽可以更小的劑量和更好的活性，也就是更安全合理的形式得到應用。因此，本發明是對博落回生物鹼鹽應用形式和機理的重要嘗試和突破。
本發明的目的是通過下述方式實現的本發明所提供的博落回總生物鹼鹽為博落回總生物鹼水楊酸鹽或博落回總生物鹼苯甲酸鹽或博落回總生物鹼馬來酸鹽或博落回總生物鹼酒石酸鹽或博落回總生物鹼硼酸鹽；上述博落回總生物鹼鹽中的血根鹼和白屈菜紅鹼鹽重量含量為50.0％～90％。
本發明第一次明確地提供博落回總生物鹼有機酸(水楊酸、苯甲酸、馬來酸、酒石酸)鹽及硼酸鹽，產品設計思路科學合理，質量可控，是一種新型的植物精細化工產品，且本發明博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽可以很好地製備出來。
本發明的另一目的是通過下述方式實現的本發明所提供的博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽的製備方法為方法一將博落回總鹼溶於甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，攪拌下加入有機酸，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全。此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
方法二將有機酸溶解於甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，攪拌下加入博落回總鹼，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全。此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
方法三將博落回總鹼溶於甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，將有機酸溶於相應的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，在攪拌下將二者混合，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全。此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
方法四將有機酸置於水中，加熱到60～80℃，緩慢加入生物鹼，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼至反應完全。此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
方法五博落回總鹼硼酸鹽的製備，將博落回總鹼溶於甲醇或乙醇中，向溶液中加入定量的飽和硼酸溶液，收集沉澱即得博落回總鹼硼酸鹽。
所用薄層方法矽膠G(青島海洋化工廠)製備層析板，不加粘合劑；以苯環已烷(9∶1)為展開劑，碘化鉍鉀顯色，白屈菜紅鹼的Rf為0.4；血根鹼的Rf為0.6。
所製備的博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽中的血根鹼和白屈菜紅鹼的有機酸鹽或硼酸鹽重量含量範圍為50～90％，高效液相方法檢測。上述製備的博落回總生物鹼有機酸鹽和博落回總生物鹼硼酸鹽及其應用未見任何文獻報導。
本發明還一目的為將含有上述博落回總生物鹼有機酸鹽的產品可作為具有抗菌、消炎作用的藥品或日用化學品；用於動物有關的抗菌、抗炎作用的獸藥或飼料添加劑；用於動物有關的消毒用品或日用化學品。
本發明的博落回總生物鹼有機酸鹽可應用於多種劑型的產品，包括粉劑、酊劑、洗液及噴劑等。
本發明所使用的原料可來自博落回的果莢、莖杆及根；血水草的根。
本發明通過使產品的特徵明確化，從而使生產建立在較好的量化控制基礎上，擺脫了對原料產地的依賴而使原料的來源得以擴大，從而在產品質量可控的前提下最終降低生產成本，使本發明的產品的工業化建立在較好較充足的原料基礎上，是傳統中藥生產模式的重要突破。本發明以博落回生物鹼的有機酸鹽及硼酸鹽為產品應用形式，充分結合了博落回總生物鹼的生物活性及所用有機酸和硼酸的活性特點，並且改善了產品的使用性能，因此也提高了博落回的用藥水平，而且所得產品的抗菌、抗炎作用明顯。
為了更好理解本發明實質，下面以更具體的試驗例說明。
試驗本發明製備的博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽的抗菌、抗炎作用。為方便比較，所有用於體外抗菌、抗炎試驗的供試品的含量均為60±3％，以博落回總生物鹼鹽的重量計。
一、體外抗真菌試驗1、博落回總生物鹼水楊酸鹽供試品博落回總生物鹼水楊酸鹽(批號040518，長沙世唯科技有限公司提供)，試驗前製備成2mg/ml(以提取物量計)；酮康唑(批號040112，瀋陽藥科大學合成研究室提供)，製備成1mg/ml溶液。
菌株7種菌株均購自中國醫學科學院南京皮膚病研究所。
體外抗菌試驗取白色念珠菌20～25℃培養24h的第二代新鮮培養物，用氯化鈉注射液稀釋；絮狀表皮癬菌、石膏樣毛癬菌和紅色毛癬菌均用20～25℃培養7天的斜面培養物，用氯化鈉注射液將培養物洗下，振搖、過濾、鏡檢計孢子數、稀釋，使菌液終濃度為1×106CFU/ml。
金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及大腸桿菌接種於肉湯培養基中傳5代，取純種再接種於瓊脂培養基，置37℃培養24h，取菌苔製成相應試驗菌懸液，用標準比濁管調整細菌濃度為1×106CFU/ml備用。
以1mg/ml酮康唑做為陽性對照，採用試管二倍稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)，見表二。
表二、博落回總鹼水楊酸鹽體外抗菌作用菌種MIC(μg/ml) MBC(μg/ml)白色念珠菌 120 272絮狀表皮癬菌 170 387石膏樣毛癬菌 360 770紅色毛癬菌 210 440金黃色葡萄球菌 140 310表皮葡萄球菌 3080大腸桿菌 110 2362、博落回總生物鹼苯甲酸鹽供試品博落回總生物鹼苯甲酸鹽(批號040612，長沙世唯科技有限公司提供)，試驗前製備成2mg/ml(以提取物量計)。
抗菌測試實驗方法如例1，結果如表三所示。
表三、博落回總鹼苯甲酸鹽體外抗菌作用菌種 MIC MBC白色念珠菌 160 380絮狀表皮癬菌 320 660石膏樣毛癬菌 210 460紅色毛癬菌 240 500金黃色葡萄球菌 150 350表皮葡萄球菌 40100大腸桿菌 170 3813、博落回總生物鹼酒石酸鹽供試品博落回總生物鹼酒石酸鹽(批號040619，長沙世唯科技有限公司提供)，試驗前製備成2mg/ml(以提取物量計)。
抗菌測試實驗方法如例1，結果如表四所示。
表四、博落回總鹼酒石酸鹽體外抗菌作用菌種 MIC MBC白色念珠菌 230 492絮狀表皮癬菌 320 660石膏樣毛癬菌 290 710紅色毛癬菌 170 374金黃色葡萄球菌 130 294表皮葡萄球菌 122 253大腸桿菌 170 3764、博落回總生物鹼馬來酸鹽供試品博落回總生物鹼馬來酸鹽(批號040702，長沙世唯科技有限公司提供)，試驗前製備成2mg/ml(以提取物量計)。
抗菌測試實驗方法如例1，結果如表五所示。
表五、博落回總鹼馬來酸鹽體外抗菌作用菌種 MIC MBC白色念珠菌 201 411絮狀表皮癬菌 220 468石膏樣毛癬菌 310 636紅色毛癬菌 130 302金黃色葡萄球菌 143 319表皮葡萄球菌 118 341大腸桿菌 150 3345、博落回總生物鹼硼酸鹽供試品博落回總生物鹼硼酸鹽(批號040704，長沙世唯科技有限公司提供)，試驗前製備成2mg/ml(以提取物量計)。
抗菌測試實驗方法如例1，結果如表六所示。
表六、博落回總鹼硼酸鹽體外抗菌作用菌種 MIC MBC白色念珠菌 112 234絮狀表皮癬菌 220 562石膏樣毛癬菌 361 775紅色毛癬菌 121 244金黃色葡萄球菌 176 378表皮葡萄球菌 3482大腸桿菌 93 2316、博落回總生物鹼硫酸鹽供試品博落回總生物鹼硫酸鹽(批號040704，湖南太陽植物有限公司(湖南祁東縣歸陽鎮前進街205號)提供)，試驗前製備成2mg/ml(以提取物量計)。
抗菌測試實驗方法如例1，結果如表七所示。
表七、博落回總鹼硫酸鹽體外抗菌作用菌種 MIC MBC白色念珠菌 440 918絮狀表皮癬菌 270 576石膏樣毛癬菌 322 715紅色毛癬菌 147 325金黃色葡萄球菌 243 528表皮葡萄球菌 146 321大腸桿菌 326 6907、博落回總生物鹼鹽酸鹽供試品博落回總生物鹼鹽酸鹽(批號040514，長沙世唯科技有限公司提供)，試驗前製備成2mg/ml(以提取物量計)。
抗菌測試實驗方法如例1，結果如表七所示。
表八、博落回總鹼鹽酸鹽體外抗菌作用菌種 MIC MBC白色念珠菌 365 778絮狀表皮癬菌 220 476石膏樣毛癬菌 272 605紅色毛癬菌 237 489金黃色葡萄球菌 313 658表皮葡萄球菌 106 221大腸桿菌 281 615結論體外抗菌試驗表明，本發明製備的博落回總生物鹼有機酸(水楊酸、苯甲酸、馬來酸、酒石酸)鹽及硼酸鹽有明顯的抗菌活性。與博落回總生物鹼的鹽酸鹽及硫酸鹽相比，本發明製備的有機酸鹽及硼酸鹽有明顯更好的抗菌活性。
二、抗炎試驗1、博落回總生物鹼水楊酸鹽的抗炎活性動物小鼠，昆明種；大鼠，Wistar品系，均由湖南中醫學院實驗動物中心提供。
供試品博落回總生物鹼水楊酸鹽(批號040518，長沙世唯科技有限公司提供)。
氫化可地松河南利華製藥有限公司生產，批號031204。
以上使用的藥物均室溫保存，實驗時以生理鹽水配製成適當濃度藥液使用。
對二甲苯致小鼠耳廓腫脹反應的影響。昆明種小鼠，雄性，26～30g，按體重分層，隨機分為空白對照、氫化可地松、博落回總鹼水楊酸鹽大中小劑量5組，每組12隻。各組小鼠按20ml/kg容積灌胃給藥，間隔12h給藥3次。末次給藥後60min以二甲苯接觸右耳5s，15min脫頸椎處死小鼠，用直徑6mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下，稱取左右耳片重量，計算耳廓腫脹率(％)和腫脹抑制率(％)。實驗結果見表九。
表九水楊酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓急性炎症的抑制作用(x±s)

注1.博落回總鹼水楊酸鹽按純品計算，下同；2.組間比較t檢驗，與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，下同。
對蛋清致大鼠足蹠腫脹反應的影響。Wistar大鼠，180～220g，雌雄各半，按體重分層，隨機分為空白對照、氫化可地松、博落回總鹼水楊酸鹽大中小劑量5組，每組12隻。各組大鼠按10ml/kg容積灌胃給藥，分別給予生理鹽水、氫化可地松20mg/kg、博落回總鹼水楊酸鹽40、80、160mg/kg，間隔12h給藥3次。末次給藥後30min，以新鮮蛋清0.1ml注射於大鼠左後足蹠皮下致炎。容積法測定大鼠致炎足外踝突出處平面以下部位致炎前和致炎後0.5、1.0、2.0、4.0和6.0h的容積，計算大鼠足蹠腫脹值。實驗結果見表十。
表十水楊酸鹽對蛋清致大鼠足蹠腫脹值的影響(x±s)

實驗結果表明，博落回總鹼水楊酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致大鼠足蹠腫脹有較明顯的抑制作用。
2、博落回總生物鹼苯甲酸鹽的抗炎活性供試品博落回總生物鹼苯甲酸鹽(批號040612，長沙世唯科技有限公司提供)表十一 苯甲酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓急性炎症的抑制作用(x±s)

注1.博落回總鹼苯甲酸鹽按純品計算，下同；2.組間比較t檢驗，與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，下同。
表十二 苯甲酸鹽對蛋清致大鼠足蹠腫脹值的影響(x±s)

實驗結果表明，博落回總鹼苯甲酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致大鼠足蹠腫脹有較明顯的抑制作用。
3、博落回總生物鹼酒石酸鹽的抗炎活性供試品博落回總生物鹼酒石酸鹽(批號040619，長沙世唯科技有限公司提供)表十三 酒石酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓急性炎症的抑制作用(x±s)

注1.博落同總鹼酒石酸鹽按純品計算，下同；2.組間比較t檢驗，與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，下同。
表十四 酒石酸鹽對蛋清致大鼠足蹠腫脹值的影響(x±s)

實驗結果表明，博落回總鹼酒石酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致大鼠足蹠腫脹有較明顯的抑制作用。
4、博落回總生物鹼馬來酸鹽的抗炎活性供試品博落回總生物鹼馬來酸鹽(批號040702，長沙世唯科技有限公司提供)表十五 馬來酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓急性炎症的抑制作用(x±s)

表十六 馬來酸鹽對蛋清致大鼠足蹠腫脹值的影響(x±s)

注1.博落回總鹼馬米酸鹽按純品計算，下同；2.組間比較t檢驗，與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，下同。
實驗結果表明，博落回總鹼馬來酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致大鼠足蹠腫脹有較明顯的抑制作用。
5、博落回總生物鹼硼酸鹽的抗炎活性供試品博落回總生物鹼硼酸鹽(批號040704，長沙世唯科技有限公司提供)表十七 硼酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓急性炎症的抑制作用(x±s)

注1.博落回總鹼硼酸鹽按純品計算，下同；2.組間比較t檢驗，與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，下同。
表十八 硼酸鹽對蛋清致大鼠足蹠腫脹值的影響(x±s)


實驗結果表明，博落回總鹼硼酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致大鼠足蹠腫脹有較明顯的抑制作用。
6、博落回總生物鹼硫酸鹽的抗炎活性供試品博落回總生物鹼硫酸鹽(批號040704，湖南太陽植物有限公司(湖南祁東縣歸陽鎮前進街205號)提供)表十九 硫酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓急性炎症的抑制作用(x±s)

注1.博落回總鹼硫酸鹽按純品計算，下同；2.組間比較t檢驗，與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，下同。
表二十 硫酸鹽對蛋清致大鼠足蹠腫脹值的影響(x±s)

7、博落回總生物鹼鹽酸鹽的抗炎活性供試品博落回總生物鹼鹽酸鹽(批號040514，長沙世唯科技有限公司提供)表二十一 鹽酸鹽對二甲苯致小鼠耳廓急性炎症的抑制作用(x±s)


表二十二 鹽酸鹽對蛋清致大鼠足蹠腫脹值的影響(x±s)

注1.博落回總鹼鹽酸鹽按純品計算，下同2.組間比較t檢驗，與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，下同。
結論抗炎試驗表明，本發明製備的博落回總生物鹼有機酸鹽(水楊酸、苯甲酸、馬來酸、酒石酸)及硼酸鹽具有明顯的抗炎活性。與博落回總生物鹼鹽酸鹽及硫酸鹽相比，本發明製備的有機酸鹽及硼酸鹽有明顯更好的抗炎活性。
具體實施例方式
本實驗所用博落回總生物鹼購自湖南太陽植物有限公司實施例1將批號為040713的博落回總鹼10g(其中約含4g血根鹼，MW349.39；2g的白屈菜紅鹼，MW365.40)溶於乙醇中，攪拌下加入水楊酸(MW138.21)1.7g，薄層監控，根據反應情況補加少量水楊酸，直至血根鹼和白屈菜紅鹼成鹽反應完全。薄層方法矽膠G(青島海洋化工廠)製備層析板，不加粘合劑；以苯環己烷(9∶1)為展開劑，碘化鉍鉀顯色，白屈菜紅鹼的Rf為0.4；血根鹼的Rf為0.6。待成鹽反應完全，回收乙醇，乾燥得博落回總生物鹼水楊酸鹽，收率為77.4％。採用高效液相進行含量測定，總鹽含量為53.4％(以血根鹼水楊酸鹽和白屈菜紅鹼水楊酸鹽計)。
色譜條件如下色譜柱HypetsilODS25μ 4.6×200mm。
流動相A為乙腈；B為0.05％磷酸-0.2％三乙胺-水。
Time flow ％A ％B0.00 0.6 257512.000.6 406015.000.6 554518.000.6 2575柱溫30℃；流速0.6ml/min；檢測波長270nm；進樣量5μ1。標準品及樣品濃度約為0.1mg/ml。
實施例2將批號為040713的博落回總鹼10g溶於乙酸乙酯中，與1.5g苯甲酸(MW122.13)按例1方法製備博落回總生物鹼苯甲酸鹽，收率71.2％。按實施例1方法檢測，博落回總生物鹼苯甲酸鹽含量為51.1％。
實施例3將批號為040713的博落回總鹼10g溶於甲醇中，與1.8g酒石酸(MW150.12)按例1方法製備博落回總生物鹼酒石酸鹽，收率78.4％。按例1方法檢測，博落回總生物鹼酒石酸鹽含量為52.6％。
實施例4將批號為040713的博落回總鹼10g溶於氯仿中，與1.4g馬來酸(MW116.07)按例1方法製備博落回總生物鹼馬來酸鹽，收率71.7％。按例1方法檢測，博落回總生物鹼馬來酸鹽含量為50.2％。
實施例5將2g水楊酸溶解於丙酮中，攪拌下加入批號為040605的博落回總鹼10g，薄層監控，適當補加少量水楊酸使血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全。回收溶劑，乾燥得博落回總生物鹼水楊酸鹽，收率78.4％。按例1方法檢測，博落回總生物鹼水楊酸鹽含量為63.2％。
實施例6將1.8g苯甲酸溶解於乙酸乙酯中，攪拌下加入批號為040605的博落回總鹼10g，按實施例5方法製得博落回總生物鹼苯甲酸鹽，收率77.3％。按例1方法檢測，博落回總生物鹼苯甲酸鹽含量為61.2％。
實施例7將2.2g酒石酸溶解於乙醇中，攪拌下加入批號為040605的博落回總鹼10g，按實施例5方法製得博落回總生物鹼酒石酸鹽，收率78.4％。按例1方法檢測，博落回總生物鹼酒石酸鹽含量為60.7％。
實施例8將1.7g馬來酸溶解於甲醇中，攪拌下加入批號為040605的博落回總鹼10g，按實施例5方法製得博落回總生物鹼馬來酸鹽，收率72.6％。按例1方法檢測，博落回總生物鹼馬來酸鹽含量為62.5％。
實施例9將批號為040812的10g博落回總鹼溶於丙酮中，將2.5g水楊酸溶於丙酮中，在攪拌下將二者混合，薄層監控，適當補加水楊酸或水楊酸丙酮溶液，直至血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全。回收溶劑，乾燥得博落回總生物鹼水楊酸鹽，收率76.5％。經檢測，博落回總生物鹼水楊酸鹽含量為76.4％。
實施例10將批號為040812的10g博落回總鹼溶於乙酸乙酯中，將2.2g苯甲酸溶於乙酸乙酯中，按實施例9方法製備博落回總生物鹼苯甲酸鹽，收率75.5％。經檢測，博落回總生物鹼苯甲酸鹽含量為73.7％。
實施例11將批號為040812的10g博落回總鹼溶於乙醇中，將2.7g酒石酸溶於乙醇中，按實施例9方法製備博落回總生物鹼酒石酸鹽，收率74.7％。經檢測，博落回總生物鹼酒石酸鹽含量為77.1％。
實施例12將批號為040812的10g博落回總鹼溶於甲醇中，將2.1g馬來酸溶於甲醇中，按實施例9方法製備博落回總生物鹼馬來酸鹽，收率73.6％。經檢測，博落回總生物鹼馬來酸鹽含量為74.3％。
實施例13將3g水楊酸置於水中，加熱到60℃，緩慢加入批號為040907的10g博落回總鹼，薄層監控，適量補加水楊酸或水楊酸水溶液，直至血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全。回收溶劑，乾燥得博落回總生物鹼水楊酸鹽，收率83.7％。經檢測，博落回總生物鹼水楊酸鹽含量為89.1％。
實施例14將2.7g苯甲酸置於水中，加熱到60℃，緩慢加入批號為040907的10g博落回總鹼，依實施例13所述方法製備博落回總生物鹼苯甲酸鹽，收率88.3％。經檢測，博落回總生物鹼苯甲酸鹽含量為89.1％。
實施例15將3.3g酒石酸置於水中，加熱到80℃，緩慢加入批號為040907的10g博落回總鹼，依實施例13所述方法製備博落回總生物鹼酒石酸鹽，收率82.5％。經檢測，博落回總生物鹼水楊酸鹽含量為87.6％。
實施例16將2.5g馬來酸置於水中，加熱到80℃，緩慢加入批號為040907的10g博落回總鹼，依實施例13所述方法製備博落回總生物鹼馬來酸鹽，收率86.3％。經檢測，博落回總生物鹼馬來酸鹽含量為88.24％。
實施例17博落回總生物鹼硼酸鹽的製備。將批號為040605的20g博落回總鹼溶於乙醇中，向溶液中加入1.8g硼酸的飽和水溶液，薄層確定反應終點，回收溶劑，乾燥得博落回總生物鹼硼酸鹽，收率72.5％。經檢測，博落回總生物鹼硼酸鹽含量為61.3％。
以下例子提供博落回總生物鹼有機酸鹽在終端產品中的應用形式。
實施例18博落回總生物鹼鹽粉劑製備舉例。
取本發明博落回總生物鹼水楊酸鹽20g、百部5000g、水楊酸3000g、以重量計。將5000g百部用水提取，濃縮乾燥得百部提取物，將此百部提取物與水楊酸3000g及博落回總生物鹼水楊酸鹽20g混合，過80目篩，混合均勻，分裝製得100包，每包含博落回總生物鹼水楊酸鹽200mg。本品外用，具抗菌、抗炎活性。每包用2500-3000ml熱水溶解，將腳完全浸泡入其中30-40分鐘即可，每日一次，每次一包，三天為一療程。
實施例19博落回總生物鹼鹽酊劑製備舉例。
博落回總生物鹼酒石酸鹽10g，苦參提取物50g，百部提取物50g，60％酒精稀釋至1000ml，二層紗布過濾，棕色玻璃瓶中密封備用。本品外用，可用於治療手、足癬。用藥棉少許蘸酊劑搽於患處，1d 3次-4次。10d為一個療程，一般連續治療3個-6個療程。
實施例20博落回總生物鹼鹽洗液製備舉例。
將苦參50g、蛇床子50g、地膚子50g、(花椒)川椒20g、百部50g加水煎煮二次，每次2小時，濾過，合併濾液，濃縮至25℃時相對密度不低於1.07，加入薄荷腦1g和博落回總生物鹼馬來酸鹽5g，攪拌使溶解，加水製成1000ml，即得。本品具抗菌、抗炎作用，可用於皮膚的清潔及護理。
實施例21博落回總生物鹼鹽噴劑製備舉例。
噴劑(商品名「博淨」)取博落回總生物鹼水楊酸鹽1g，加純淨水500ml，攪拌使溶解，加水稀釋製成1000ml溶液即得。本品具抗菌、抗炎作用，可用於表面的清潔及護理。本品經湖南省疾病預防控制中心檢測，博淨噴劑原液作用2min對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念珠菌的平均抑制率分別為72.82％，80.87％和69.34％。
權利要求
1.博落回總生物鹼鹽，其特徵在於所述博落回總生物鹼鹽為博落回總生物鹼水楊酸鹽或博落回總生物鹼苯甲酸鹽或博落回總生物鹼馬來酸鹽或博落回總生物鹼酒石酸鹽或博落回總生物鹼硼酸鹽；上述博落回總生物鹼鹽中的相應血根鹼和白屈菜紅鹼鹽重量含量為50.0％～90％。
2.製備權利要求1中所述的博落回總生物鹼鹽的方法，其特徵在於將博落回總鹼溶於甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，攪拌下加入有機酸，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全，此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
3.製備權利要求1中所述的博落回總生物鹼鹽的方法，其特徵在於將有機酸溶解於甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，攪拌下加入博落回總生物鹼，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全，此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
4.製備權利要求1中所述的博落回總生物鹼鹽的方法，其特徵在於將博落回總鹼溶於甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，將有機酸溶於相應的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等極性或中等極性溶劑中，在攪拌下將二者混合，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼反應完全，此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
5.製備權利要求1中所述的博落回總生物鹼鹽的方法，其特徵在於將有機酸置於水中，加熱到60～80℃，緩慢加入博落回總生物鹼，薄層監控血根鹼和白屈菜紅鹼至反應完全，此方法涉及的有機酸包括水楊酸、苯甲酸、酒石酸及馬來酸。
6.製備權利要求1中所述的博落回總生物鹼鹽的方法，其特徵在於博落回總鹼硼酸鹽的製備，將博落回總生物鹼溶於甲醇或乙醇中，向溶液中加入定量的飽和硼酸溶液，收集沉澱即得博落回總鹼硼酸鹽。
7.權利要求1所述博落回總生物鹼鹽的應用，其特徵在於用於抗菌、抗炎作用的藥品。
8.權利要求1所述博落回總生物鹼鹽的應用，其特徵在於用於日用化學品。
9.權利要求1所述博落回總生物鹼鹽的應用，其特徵在於用於動物有關的抗菌、抗炎作用的獸藥或飼料添加劑或消毒用品或日用化學品。
10.權利要求1所述博落回總生物鹼鹽的應用，其特徵在於用於粉劑、酊劑、洗液或噴劑。
全文摘要
本發明涉及新型博落回總生物鹼鹽的應用及製備工藝，本發明博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽的含量為50.0％～90％，以血根鹼和白屈菜紅鹼的有機酸鹽及硼酸鹽重量計。本發明的博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸具有抗菌、抗炎活性，而且活性明顯優於其硫酸鹽及鹽酸鹽。本發明涉及含有此博落回總生物鹼有機酸鹽及硼酸鹽的藥品及日化產品在人及動物的抗菌、抗炎方向的應用。
文檔編號A23K1/16GK1740175SQ20051003206
公開日2006年3月1日 申請日期2005年8月29日 優先權日2005年8月29日
發明者曾建國, 張靜, 羅煉輝 申請人:長沙世唯科技有限公司