生脈顆粒劑的質量控制方法
2023-12-05 15:33:01 2
專利名稱：生脈顆粒劑的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種生脈顆粒劑(黨參方)的質量控制方法，屬於對藥品進行質量控制的技術領域。
背景技術：
生脈顆粒是一種經典中成藥，具有益氣復脈，養陰生津，改善心功能，加強心肌收縮力，改善心肌供血，調整心肌代謝，改善微循環，調節血壓，抗心率失常等功能；臨床上主要用於各種類型的休克和心臟類疾病，其療效確切。但經我們研究發現，生脈顆粒劑存在質量控制標準簡單，產品質量不易控制的缺點，在產品生產過程中，用該質量控制方法不能有效控制生脈顆粒的質量，從而將影響該製劑的臨床療效。
發明內容
本發明的目的在於提供一種生脈顆粒劑的質量控制方法，本發明針對現有質量控制標準簡單，產品質量不易控制的缺點，根據本方中各味藥材的含量、特性及其製備工藝，研究制定了具體可行的鑑別和含量測定方法，以有效地控制生脈顆粒劑的質量，從而確保該製劑的臨床療效。
本發明所述的生脈顆粒劑是這樣構成的它由黨參300g、麥冬200g、五味子100g和適當輔料製備而成。
生脈顆粒劑的製備方法為黨參、麥冬、五味子加15倍量水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合併煎液，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.06(60℃)，加乙醇使含醇量達50％，攪勻，靜置24小時，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.30(60～65℃)的浸膏。加蔗糖粉適量，製成顆粒，乾燥，整粒，製成1000g，分裝，即得。
本發明所述質量控制方法主要包括性狀、檢查、鑑別、含量測定項目中的部分或全部；其中性狀應符合顆粒劑項下的有關規定；鑑別是對五味子的薄層鑑別；檢查應符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定為對製劑中五味子的含量測定。
五味子的鑑別方法是以五味子醇甲對照品為對照，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑的薄層鑑別方法。
具體的鑑別方法為取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近幹，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
本製劑中五味子的含量測定方法是以五味子醇甲對照品為對照，以甲醇∶水＝65∶35為流動相的高效液相色譜法。
具體的含量測定方法為照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備 精密稱取經五氧化二磷減壓乾燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇製成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的製備 取過三號篩的本製劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時，取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計，不得少於0.6mg。
本發明所述質量控制方法包括性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑑別取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近幹，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
檢查應符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備 精密稱取經五氧化二磷減壓乾燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇製成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的製備 取過三號篩的本製劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時，取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計，不得少於0.6mg。
本申請人進行了一系列的試驗研究，以確定最佳的質量控制方法，具體如下一、鑑別試劑、試藥甲醇、硅藻土、正己烷、乙酸乙酯、甲酸均為分析純；矽膠GF254螢光薄層板由青島海洋化工廠分廠提供，批號20050227；五味子醇甲(C24H32O7)對照品，由中國藥品生物製品檢定所提供(供含量測定用)；生脈顆粒(黨參方)三個批號供試品(20050401，20050402，20050403)及生脈顆粒(黨參方)空白樣品均由貴州同濟堂製藥有限公司提供。
薄層鑑別是參照各味藥在《中國藥典》記載的藥品標準中薄層鑑別方法進行。利用對照藥材或對照品和本品在相同的溶劑系統條件下展開，在薄層板上有相同斑點的，而通過作陰性試驗無幹擾，說明本方法具專屬性。
本發明是對方中五味子的特徵鑑別。五味子為方中使藥，根據處方中所含藥味的化學性質及劑型特點，研究制定了五味子的薄層色譜鑑別，以五味子醇甲為對照品鑑別處方中原藥材五味子。
取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，分別以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶5∶1)、30℃～660℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外燈(254nm)下檢視。結果以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶5∶1)為展開劑效果最好，經反覆試驗，陰性對照無幹擾，故列入本發明內容。
二、檢查按《中國藥典》2000年版一部附錄IC顆粒劑項下的規定，對本製劑三批樣品的水分，裝量差異，粒度，溶化性及微生物限度進行檢查，結果符合《中國藥典》規定的標準。(以上項目測定數據及重金屬、砷鹽檢查略)。
檢查指標、方法及結果如下(1)水分檢查照《中國藥典》(2000年版一部附錄IX H)水分測定法第一法測定，不得超過5.0％。
(2)裝量差異照《中國藥典》2000年版一部附錄ID顆粒劑項下規定的方法檢測。
本製劑包裝為10克/袋，裝量差異限度為±5％。
(3)粒度取單劑量分裝的顆粒劑5袋(瓶)或多劑量分裝顆粒劑1包(瓶)，稱定重量，置藥篩內過篩。過篩時，將篩保持水平狀態，左右往返輕輕篩動3分鐘。不能通過一號篩和能通過五號篩的顆粒和粉末總和，不得過15％。
(4)溶化性取供試品10g，加熱水20倍，攪拌5分鐘，立刻觀察。可溶性顆粒劑應全部溶化，允許有輕微渾濁。顆粒劑不得有焦屑等異物。
(5)砷鹽具體方法如下取本製劑1g，加氫氧化鈣0.5g，混勻，加水少量攪勻，乾燥後，先用小火燒灼使炭化，再用500～600℃熾灼至完全炭化，加鹽酸4ml，加水15ml，按《中國藥典》2000年版一部附錄IX F檢查，結果均低於2ppm，故未列入本發明內容。
(6)微生物限度按《中國藥典》2000年版一部附錄XIII C的檢查方法及顆粒劑(不含原藥材粉)微生物限度標準進行檢查。
表1 生脈顆粒(黨參方)檢查項目研究結果
由表中結果可知，生脈顆粒(黨參方)樣品的檢查項目都符合《中國藥典》2000年版一部及生脈顆粒(黨參方)質量標準的規定。
三、含量測定按照《中國藥典》2000年版一部附錄VI D制定。
(一)含量測定化學成份的確定本方主藥黨參、麥冬兩味藥有效成分多為皂苷，多糖等親水性成份。五味子藥材主具收斂固澀，益氣生精，補腎寧心的功效。主要含總木脂素，其含量達18.1-19.2％。如五味子素(schisandrin)、五味子醇(Schisadrol)、去氧五味子素(Deoxyschisandrin)、γ-五味子素(γ-Schisandrin)、偽-γ-五味子素(Pseudo-γ-Schisandrin)、五味子丙素(WuweizisuC)、五味子酯甲(SchisantherinA)及五味子酯乙、丙、丁、戊(SchsantherinB、C、D、E)等。1979年I等報導從五味子果實中分離到5種新的二苯並環辛二烯類木脂素戈米辛A、B、C、F、G(GomisinA、B、C、F、G)等新的木脂素成分。還含揮髮油2％，油中主要為α-、β-花柏烯(α、β-Chamigrene)。此外，本方五味子藥材尚含蘋果酸(Malic acid)11％，枸櫞酸(Citric acid)8％，酒石酸(Tartaric acid)0.8％，原兒茶酸，維生素C(VitamineC)0.035％-0.085％。五味子醇甲是本製劑的有效成分之一，且含量較高，亦具有一定專屬性，故選用其做含量測定的指標性成分。本申請人在《中國藥典》五味子含量測定方法等參考文獻資料基礎上，進行實驗研究，建立了樣品前處理簡單、穩定、專屬性強及靈敏度高、結果可靠的高效液相色譜法。
(二)提取分離方法的考察我們比較了甲醇作為提取溶劑在不同提取時間(0.5h、1.0h、1.5h)的提取效果。具體方法如下取本製劑粉末(過篩)約5g，共3份，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml。稱定重量。分別超聲處理(功率250W，頻率20KHZ)0.5小時、1.0小時和1.5小時。取出，放冷後，用溶劑補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml。轉移至圓底燒瓶中，回收溶劑至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得。測試結果見表1。
表2 不同超聲提取時間所得五味子醇甲含量
經綜合比較，提取條件確定用50ml甲醇超聲(功率250W，頻率20KHz)提取1.0h，較為適宜。
(三)含量測定方法的考察1、儀器、試劑、試藥 Agilent1100高效液相色譜儀(在線脫氣機、二元泵、二極體陣列檢測器、自動進樣器、智能恆溫柱溫箱、Agilent化學工作站)；CX-250型超聲波清洗器(功率250W，頻率20KHZ，北京市醫療設備二廠)；FC-104天平(上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠)；十萬級天平(日本進口)；甲醇為色譜純和分析純；純淨水。五味子醇甲(C24H32O7)對照品，由中國藥品生物製品檢定所提供(110749-200309供含量測定用)；生脈顆粒(黨參方)三個批號供試品(20050401，20050402，20050403)由貴州同濟堂製藥有限公司提供。
2、檢測波長的確定 五味子醇甲於190nm～400nm波長下掃描，最大吸收波長為250nm。在250 nm波長處五味子醇甲吸收峰靈敏度較高，其它色譜峰幹擾較小，五味子醇甲色譜峰的分離最為理想，故選用250nm±1nm作為檢測波長。
3、系統適用性試驗選擇了三種色譜柱(1)Hypersil ODS(5um，4.0×250mm，Agilent)色譜柱，(2)Hypersil ODS2(5um，5×200mm，大連依利特)色譜柱，(3)DiamonsilTM(鑽石)HPLC C18(5um，4.6×250mm，迪馬公司)色譜柱；及四個流動相(1)甲醇-水(65∶35)(2)甲醇-0.1％磷酸溶液(65∶35)(3)乙腈-水(65∶35)(4)乙腈-0.1％磷酸溶液(60∶40)進行系統適用性試驗。試驗結果表明在以下色譜條件下用Hypersil ODS2(5um，5×200mm，大連依利特)色譜柱，甲醇-水(65∶35)為流動相，流速1.0ml/min，柱溫40℃，檢測波長250nm，供試品中五味子甲素得到較好分離，理論板數達到4000，分離度2.5以上。故理論板數以五味子甲素峰計算擬定為不低於2000；分離度不低於1.5。
4.空白試驗根據本製劑處方和工藝，製備缺五味子藥材的空白試驗樣品，按質量標準的提取條件製備供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。測定結果表明空白試驗對五味子醇甲色譜分析無幹擾。
5.線性關係的考察稱取五味子醇甲對照品適量，用甲醇溶解製成每1ml中含0.121mg的對照品儲備液，再分別吸取0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml的對照品儲備液至10ml容量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，分別製成每1ml含五味子醇甲0.00605mg、0.01210mg、0.02420mg、0.03630mg、0.04840mg、0.06050mg的對照品溶液，吸取對照品溶液10μl依次進樣，記錄色譜圖。以五味子醇甲的進樣量(μg)為縱坐標，峰面積(mAu·s)為橫坐標進行線性回歸，得一基本過原點的直線Y＝0.000484282X-0.00109(r＝0.99993)。
回歸方程擬合為過原點的方程Y＝0.000483062X將一樣品峰面積帶入以上兩方程中，經計算比較，所得誤差在2％以下。五味子甲素進樣量的線性範圍為0.0605μg～0.605μg，線性關係良好，可以用外標一點法計算其含量。(見表3)表3 標準曲線 (n＝5)
6、穩定性試驗 取生脈顆粒(黨參方)粉末(過三號篩)約5g，精密稱定，按含量測定項下的方法製備供試液，精密吸取10μl，進樣5次，時間間隔為0、2、4、6、8小時，記錄色譜圖，供試品中五味子醇甲峰面積平均值為587.712902mAu·S，RSD＝0.816％，結果表明本試驗方法穩定，測定時間可在8小時內。
(見表4)表4 穩定性試驗測定結果 n＝5
7.儀器精密度試驗 精密吸取對照品溶液10μl，連續進樣6次，記錄色譜圖，供試品中五味子醇甲峰面積平均值為632.369955mAu·S，RSD＝0.538％，結果表明精密度良好。(見表5)表5 儀器精密度試驗測定結果 n＝5
8、重複性試驗 取生脈顆粒(黨參方)粉末(過三號篩)約5g，精密稱定，共6份，每份樣品按含量測定項下的方法製備供試液，吸取10μl注入色譜儀，記錄色譜圖，供試品中五味子醇甲含量平均值為0.112564mg/g，RSD＝0.507％，結果說明重複性良好。(見表6)表6 重複性試驗測定結果 n＝5
9、加樣回收率試驗 取生脈顆粒(黨參方)粉末(過三號篩)約2.5g，精密稱定，共取5份，於每份中加入對照品溶液(C＝0.262mg/ml)1ml，按本發明含量測定項製備供試液，進樣，記錄色譜圖，計算五味子醇甲回收率，平均回收率為99.737％，RSD＝0.479％，表明回收良好。(見表7)表7 加樣回收試驗測定結果(樣品五味子醇甲含量0.112564mg/g) n＝5
RSD＝0.479％
根據以上試驗結果，本製劑含量測定方法的條件確定為用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(65∶35)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數按五味子甲素峰計算應不低於2000。
供試品溶液製備方法確定為取本製劑粉末(過三號篩)約5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml。稱定重量。超聲處理(功率250W，頻率20KHZ)30分鐘。取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，過濾，精密吸取該提取液25ml。轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得。
(四)含量測定計算方法(1)供試品溶液濃度計算CX=CRAXAR]]>式中CR為對照品溶液濃度(mg.ml-1)。
AX為供試品溶液峰面積值(mAu*s)。
AR為對照品溶液的峰面積值(mAu*s)。
(2)製劑含量計算 式中Cx供試品溶液濃度(mg.ml-1)V為樣品的稱樣量(g)。
V為樣品的體積(ml)。
(五)含量測定限度的確定根據10批樣品測定結果(見表8)，本製劑每袋含五味子醇甲平均值為1.0208mg。依據此結果制定本顆粒劑含五味子以五味子醇甲C24H32O7計，每袋不得少於0.6mg。
表8 10批生脈顆粒(黨參方)中五味子醇甲的含量
與現有技術相比，本發明質量控制方法精密度高，穩定性好，重現性好，回收率高，測量結果準確，提高了生脈顆粒劑的質量控制標準，可有效控制生脈顆粒劑的質量，從而確保了該製劑的臨床療效。
具體實施例方式本發明的實施例1性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑑別取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近幹，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取經五氧化二磷減壓乾燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇製成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的製備取過三號篩的本製劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時，取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計，不得少於0.6mg。
本發明的實施例2性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑑別取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近幹，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定。
本發明的實施例3性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；檢查應符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取經五氧化二磷減壓乾燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇製成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的製備 取過三號篩的本製劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時，取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計，不得少於0.6mg。
本發明的實施例4性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑑別取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近幹，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定照《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取經五氧化二磷減壓乾燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇製成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的製備取過三號篩的本製劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時，取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計，不得少於0.6mg。
權利要求
1.一種生脈顆粒劑的質量控制方法，所述質量控制方法主要包括性狀、檢查、鑑別、含量測定項目中的部分或全部；其特徵在於性狀應符合顆粒劑項下的有關規定；鑑別是對五味子的薄層鑑別；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定為對製劑中五味子的含量測定。
2.按照權利要求1所述生脈顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於五味子的鑑別方法是以五味子醇甲對照品為對照，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑的薄層鑑別方法。
3.按照權利要求1或2所述生脈顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於具體的鑑別方法為取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近幹，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
4.按照權利要求1所述生脈顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於本製劑中五味子的含量測定方法是以五味子醇甲對照品為對照，以甲醇∶水＝65∶35為流動相的高效液相色譜法。
5.按照權利要求1或4所述生脈顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於具體的含量測定方法為照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備 精密稱取經五氧化二磷減壓乾燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇製成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的製備 取過三號篩的本製劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時，取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H3207計，不得少於0.6mg。
6.按照權利要求1所述生脈顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於所述質量控制方法包括性狀藥物為淡棕黃色的顆粒；氣香，味甜；鑑別取本製劑5g，研細，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸至近幹，加硅藻土2g，拌勻，水浴蒸乾，轉移至錐形瓶中，再加甲醇50ml水浴回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對照品，加甲醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠GF254薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝3∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇∶水＝65∶35為流動相；檢測波長為250nm；理論板數按五味子醇甲峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備 精密稱取經五氧化二磷減壓乾燥過夜的五味子醇甲對照品適量，加甲醇製成每1ml含五味子醇甲30μg的溶液，即得；供試品溶液的製備 取過三號篩的本製劑粉末5g，精密稱定，置量瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在功率250W、頻率20KHZ條件下超聲處理1小時，取出，放冷後，用甲醇補足損失的重量，搖勻，過濾，精密吸取濾液25ml，轉移至圓底燒瓶中，回收甲醇至適量，再用甲醇定量轉移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲C24H32O7計，不得少於0.6mg。
全文摘要
本發明提供了一種生脈顆粒劑的質量控制方法，所述質量控制方法主要包括性狀、檢查、鑑別、含量測定項目中的部分或全部；其中性狀應符合顆粒劑項下的有關規定；鑑別是對五味子的薄層鑑別；檢查應符合《中國藥典》2005年版一部附錄IC顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定為對製劑中五味子的含量測定；與現有技術相比，本發明質量控制方法精密度高，穩定性好，重現性好，回收率高，測量結果準確，提高了生脈顆粒劑的質量控制標準，可有效控制生脈顆粒劑的質量，從而確保了該製劑的臨床療效。
文檔編號G01N30/02GK1840078SQ20061020005
公開日2006年10月4日 申請日期2006年1月20日 優先權日2006年1月20日
發明者王曉春 申請人:貴州同濟堂製藥有限公司