自動質粒提取裝置製造方法
2023-12-02 11:11:56 2
自動質粒提取裝置製造方法
【專利摘要】本發明涉及一種自動質粒提取裝置，其包括主控制器、離心振動裝置、以及分別設置於離心振動裝置兩側的加液取液裝置和升降壓蓋旋轉升降機構，離心振動裝置上設置有離心座，離心座上設置有多個離心管槽，其中一個離心管槽旁設置定位感應器，離心座上設置有與定位感應器對應的傳感器，所述的升降壓蓋旋轉升降機構包括可旋轉的支架和可升降的升降壓蓋，支架為L形，升降壓蓋連接在支架上，升降壓蓋下面設置有與離心管槽對應的離心管塞，加液取液裝置包括可轉動的L形支架和設置於L形支架上的移液盤，移液盤上設置有多個加液管和吸液管，加液管上連接電磁閥。本發明的自動質粒提取裝置能夠自動實現質粒的提取，提高生產效率，減少人工操作，並提高提取的質粒的純度。
【專利說明】自動質粒提取裝置
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物實驗設備領域，特別是一種自動質粒提取裝置。
【背景技術】
[0002]質粒是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主複製的較小的DNA分子，它是把一個有用的目的DNA片段通過重組DNA技術，送進受體細胞中去進行繁殖和表達的常用載體。因而質粒提取是基因克隆過程中的一個常規操作，目前通常使用鹼裂解法從大腸桿菌製備質粒。原理為:使用高PH值溶液使質粒DNA和染色體DNA變性，同時沉澱蛋白質。再將pH值調至中性，質粒DNA較小，很容易復性成雙鏈。而染色體DNA較大，不會復性，纏結成網狀不溶物質，從而可以通過離心除去。一般步驟為將細菌培養液離心獲得菌體，加入重懸液，再加入新配製的細菌裂解溶液，最後加入用冰預冷的用於中和PH的中和溶液，然後離心，去除沉澱，在上清液中加入DNA吸附柱，離心去除廢液，再加入洗液I洗一遍，離心去除廢液，洗液2洗2遍，離心去除廢液，最後用洗脫液洗脫得到純的質粒DNA。從中可見操作步驟繁瑣，每提取20個質粒需要開蓋關蓋多達400多次，離心10餘次。由於質粒提取是從事分子生物學研究的實驗室每天都要用的常規技術，因而工作量較大，又由於其機械重複性較高，為自動化提供了可能。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在於針對【背景技術】中所述的現有的質粒提取過程人工操作重複性高，工作量大的問題，提供一種能夠解決前述問題的自動質粒提取裝置。
[0004]能夠實現本發明的發明目的的技術方案如下:
[0005]一種自動質粒提取裝置，其包括主控制器、離心振動裝置、以及分別設置於離心振動裝置兩側的加液取液裝置和升降壓蓋旋轉升降機構，離心振動裝置上設置有離心座，離心座上設置有多個離心管槽，其中一個離心管槽旁設置定位感應器，離心座上設置有與定位感應器對應的傳感器，所述的升降壓蓋旋轉升降機構包括可旋轉的支架和可升降的升降壓蓋，支架為L形，升降壓蓋連接在支架上，升降壓蓋下面設置有與離心管槽對應的離心管塞，加液取液裝置包括可轉動的L形支架和設置於L形支架上的移液盤，移液盤上設置有多個加液管和吸液管，加液管上連接電磁閥。
[0006]所述的離心振動裝置包括底座、振動電機、振動座以及離心機。
[0007]所述的離心座上設置有偶數個離心管槽，升降壓蓋下方對應設置有相同數量的離心管塞。根據具體提取DNA質粒的過程的不同，需要設置不同數量的離心管槽。
[0008]所述的加液取液裝置上設置有6個加液管和兩個吸液管。根據具體提取DNA質粒的過程的不同，需要設置不同數量的加液管和吸液管。
[0009]為了便於對廢液進行集中處理 ，所述的離心座上位於加液取液裝置附近設置有廢液槽。
[0010]本發明的自動質粒提取裝置的工作原理為:通過主控器來控制離心振動裝置的旋轉和振動、加液取液裝置的旋轉和升降以及對離心管內注入和取出液體、升降壓蓋旋轉升降機構的旋轉和升降，電磁閥的開關，離心管塞的壓緊和鬆開以及離心蓋的開關。離心座上根據需要可設置有偶數個離心管槽，使用時，將離心管和DNA吸附柱間隔放入離心管槽內，下面以離心座上設置四個離心管槽為例進行說明，四個離心管槽順次編號為一號至四號；一號離心管槽旁有定位感應器，與離心工作檯上相應的傳感器感應後能自動停在一號的位置上。在提取質粒時，首先，人工將潔淨的一號離心管和三號離心管分別放入一號離心管槽和三號離心管槽內，將二號DNA吸附柱和四號DNA吸附柱分別放入二號離心管槽和四三號離心管槽內，並將已經發酵好的同等體積的細菌培養液(約1.5mL)加入一號和三號離心管內，然後轉動升降壓蓋旋轉升降機構的支架，將升降壓蓋從離心座的側面水平轉動到離心座的上方，再下移升降壓蓋，將預先安置在升降壓蓋下面的四個離心管塞鬆開後壓緊到四個對應的離心管上，然後支架上移並將升降壓蓋水平轉動至原來的位置。然後，關緊離心蓋，離心振動裝置對一號和三號離心管內的細菌培養液旋轉離心；離心完成後，離心蓋開啟，升降壓蓋從離心座的側面水平轉動到離心座的上面，再下移將四個離心管塞同時鬆開並固定在升降壓蓋下面，升降壓蓋上移，再水平轉動支架至原來的位置，這時細菌沉澱在一號和三號離心管的底部，隨後加液取液裝置的L形支架轉動，將移液盤水平轉動到離心座的上面，再轉動移液盤使第一廢液吸管轉動至一號離心管正上方，下移移液盤，將第一廢液吸管末端預先裝上的一次性用的長塑料管慢慢進入一號離心管，將其中的上清液體慢慢吸乾，然後轉動移液盤到廢液槽上方，將廢液排到廢液槽內，再轉動移液盤使第一廢液吸管轉動至三號離心管正上方，下移移液盤將第一廢液吸管下端的長塑料管慢慢進入三號離心管，將其中的上清液體也慢慢吸乾並排到廢液槽中。然後移液盤旋轉使第一加液管移動到一號離心管正上方並通過電磁閥控制加入定量的重懸液250 μ 1，然後加同等體積的重懸液到三號離心管中，按上述的方式，將離心管塞壓在離心管上，啟動離心振動裝置，離心管劇烈振蕩I分鐘，使細菌菌體均勻懸浮，再旋轉移液盤使第二加液管分別移動到一號離心管和三號離心管上方並通過電磁閥控制加入新配製的細菌裂解溶液250 μ 1，通過離心振動裝置按照上述的方法輕輕振蕩離心管使溶液混勻，最後旋轉移液盤使第三加液管分別移動到一號離心管和三號離心管上方並通過電磁閥控制加入用冰預冷的用於中和PH的中和溶液350μ 1，通過離心振動裝置按照上述的方法輕輕振蕩離心管使溶液混勻後離心。離心結束後，移動和旋轉移液盤使第二吸液管末端預先裝上的一次性用的長塑料管伸至一號離心管中將其中含有質粒DNA的上清液體慢慢吸出，再轉動移液盤將第二吸液管中的含有質粒DNA的上清液體慢慢加到二號DNA吸附柱中，同樣用第二吸液管將三號離心管中的液體吸出並轉移到四號DNA吸附柱中，然後離心，這時質粒DNA會吸附到DNA吸附柱中DNA結合膜上，而濾過的廢液收集在DNA吸附柱的下部。然後轉動移液盤使第四加液管依次移動到二號DNA吸附柱和四號DNA吸附柱的上方並通過控制電磁閥向DNA吸附柱中加入含有異丙醇的第一洗液清洗一遍去除雜蛋白，然後離心，再轉動移液盤從第五加液管向DNA吸附柱中再加入含有乙醇的第二洗液，洗兩遍以上去除雜蛋白，然後離心，人工取出DNA吸附柱上部，將收集有廢液的DNA吸附柱下部取出丟棄，換放一個新的DNA收集管，將含有質粒DNA的DNA吸附柱上部放入DNA收集管中，從第六加液管分別加入洗脫液到二號和四號DNA收集管中，然後離心洗脫後，在DNA收集管中得到純的質粒DNA，人工取出含有質粒DNA的收集管保存備用。這樣一次操作可以提取兩倍體積的質粒DNA，增加了產量，節約了時間。上述以四個離心管為例，但根據實際需要，離心座中可以設置更多的離心管槽，以增加更高的產量,也可以根據需要，同時提取幾種不同的質粒DNA。
[0011]本發明的自動質粒提取裝置的優點在於:本發明的自動質粒提取裝置結構緊湊，整個提取質粒的過程主要通過機器來自動完成，不需要人工參與，質粒提取過程中，可以通過修改控制器的參數來調節各溶液及洗液的加入量，還可以調節離心時間和振動強度，可以調節清洗液的清洗次數，以提高提取的質粒的質量。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0012]圖1為本發明的自動質粒提取裝置的結構示意圖；
[0013]圖2為離心振動裝置的示意圖；
[0014]圖中，I為主控制器，2為離心座，3為離心管槽，4為定位感應器，5為傳感器，6為升降壓蓋，7為離心管塞,8為L形支架,9為移液盤,10為加液管，11為吸液管，12為電磁閥，13為廢液槽，14為底座，15為振動電機，16為振動座，17為離心機。
【具體實施方式】
[0015]下面結合附圖1、附圖2對本發明的【具體實施方式】進行進一步闡述:
[0016]實施例1
[0017]如圖1所示的一種自動質粒提取裝置，其包括主控制器1、離心振動裝置、以及分別設置於離心振動裝置兩側的加液取液裝置和升降壓蓋旋轉升降機構，離心振動裝置上設置有離心座2，離心座2上設置有多個離心管槽3，其中一個離心管槽3旁設置定位感應器4，離心座2上設置有與定位感應器4對應的傳感器5，所述的升降壓蓋旋轉升降機構包括可旋轉的支架和可升降的升降壓蓋6，支架為L形，升降壓蓋6連接在支架上，升降壓蓋6下面設置有與離心管槽3對應的離心管塞7，加液取液裝置包括可轉動的L形支架8和設置於L形支架8上的移液盤9，移液盤9上設置有多個加液管10和吸液管11，加液管10上連接電磁閥12。
[0018]實施例2
[0019]如圖2所示，上述方案中所述的離心振動裝置包括底座14、振動電機15、振動座16以及尚心機17。通過振動電機15帶動振動座16振動，尚心機17設置在振動座16上,通過這種設置可以實現振動和離心的操作，簡化自動質粒提取裝置的結構，使整個裝置結構更加緊湊。
[0020]實施例3
[0021]上述方案中所述的加液取液裝置上設置有6個加液管10和兩個吸液管11,離心座2上共設置4個離心管槽3，升降壓蓋6下方對應設置4個離心管塞7。
[0022]實施例4
[0023]上述方案中，為了便於對廢液進行集中處理，所述的離心座2上位於加液取液裝置附近設置有廢液槽13。
【權利要求】
1.一種自動質粒提取裝置，其特徵在於:其包括主控制器、離心振動裝置、以及分別設置於離心振動裝置兩側的加液取液裝置和升降壓蓋旋轉升降機構，離心振動裝置上設置有離心座，離心座上設置有多個離心管槽，其中一個離心管槽旁設置定位感應器，離心座上設置有與定位感應器對應的傳感器，所述的升降壓蓋旋轉升降機構包括可旋轉的支架和可升降的升降壓蓋，支架為L形，升降壓蓋連接在支架上，升降壓蓋下面設置有與離心管槽對應的離心管塞，加液取液裝置包括可轉動的L形支架和設置於L形支架上的移液盤，移液盤上設置有多個加液管和吸液管，加液管上連接電磁閥。
2.根據權利要求1所述的自動質粒提取裝置，其特徵在於:所述的離心振動裝置包括底座、振動電機、振動座以及離心機。
3.根據權利要求1所述的自動質粒提取裝置，其特徵在於:所述的離心座上設置有偶數個離心管槽，升降壓蓋下方對應設置有相同數量的離心管塞。
4.根據權利要求1至3中任意一項所述的自動質粒提取裝置，其特徵在於:所述的加液取液裝置上設置有6個加液管和兩個吸液管。
5.根據權利要求1至3中任意一項所述的自動質粒提取裝置，其特徵在於:所述的離心座上位於加液取液裝 置附近設置有廢液槽。
【文檔編號】C12M1/36GK103602582SQ201310637644
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月29日 優先權日:2013年11月29日
【發明者】周琪 申請人:周琪