一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法
2023-12-03 20:08:01 1
一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法
【專利摘要】一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法，涉及一種三萜皂苷提取方法。包括以下步驟：將乾燥的金櫻子果皮粉碎後用液料比為10:1-50:1mL/g的40-80%乙醇溶液溶解，置於設置微波功率為200-800W的微波反應器內微波輻射4-10min，趁熱過濾，合併提取液減壓濃縮成浸膏，即得到金櫻子果皮三萜皂苷的粗提物。通過響應面分析方法對乙醇濃度、提取時間、液料比及微波功率進行優化分析，得到微波提取金櫻子果皮三萜皂苷的最佳工藝條件。本發明的技術採用微波輔助法提取金櫻子果皮皂苷，通過運用響應面法對提取條件進行工藝優化，使前處理簡單、操作簡便，而且大大縮短提取時間、對環境汙染小、溶劑揮發少。
【專利說明】一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種三萜皂苷提取方法，特別是涉及一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法。
【背景技術】
[0002]金樓子三職阜苷藥用價值:金樓子(Rose Laevigata Michx.),又名油瓶果子、糖罐子、黃茶瓶、倒掛金鉤、蜂糖罐等。是薔薇科薔薇屬植物。其根、莖、葉、果、花均可入藥。廣泛分布在我國的東南、西南、華中及華南等地區，是一種開發前景非常好的野生經濟植物。藥理研究顯示金櫻子果實具有抑菌、抗動脈粥樣硬化、促進胃液分泌、降血脂等作用，其藥理作用與三萜類物質有關係。三萜類化合物在自然界中分布十分廣泛，它們通常以游離態或以與糖結合成苷或成酯的形式存在。動物、植物及海洋生物中均有其分布，尤其雙子葉植物分布最多。藥理研究顯示，三萜類化合物有廣泛的生物活性，如護肝、抗HIV-1、抗HIV-1蛋白酶活性等諸多功效。
[0003]微波輔助提取通過使用少量溶劑和較少能量來支持，是一項環境友好的綠色提取技術，其作用機理有其他方法完全不同。微波輔提法是利用微波能使提取物在極短時間內溫度迅速升高，從而使被提取物質從植物體系中快速分離出來。因此，微波輔提法可以提高提取速率，達到強化傳質、縮短提取時間的目的。該方法具有提取率聞、提取效率聞、能耗小、設備簡單等優點，非常適合於結構穩定的三萜類化合物的提取。
[0004]響應曲面法(Response surface analysis, RSA)是工藝優化時常用的有效方法，用於同時涉及多種工藝參數的工藝優化。與正交分析法相比，採用了更為合理的試驗設計，用最經濟方式尋求最優工藝，具有試驗周期短，求得的回歸方程精度高，對因子及其交互作用也可以進行評價等優點。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在於提供一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法，該方法採用微波輔助提取，結合UV-3系列紫外可見分光光度計對金櫻子三萜皂苷檢測分析，通過運用響應面法對提取條件進行工藝優化，使前處理簡便和操作簡單，易於掌握，而且大大縮短提取時間，效率高。
[0006]本發明的目的是通過以下技術方案實現的:
一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法，所述方法包括以下過程:
首先，製備金櫻子三萜皂苷粗提物:將乾燥的金櫻子果皮粉碎後用液料比為10:1-50:1mL/g的40-80 %乙醇溶液溶解，置於設置微波功率為200-800 W的微波反應器內微波輻射4-10 min，趁熱過濾，合併提取液減壓濃縮成浸膏，即得到金櫻子果皮三萜皂苷的粗提物；將皂苷粗提物進行顯色反應並採用UV-3系列紫外可見分光光度計測定其吸光度，由標準曲線計算其皂苷含量；
然後，精確量取定量的金櫻子果皮皂苷提取液0.1~0.5 mL,分別置於2支具塞試管內，水浴揮幹後，分別加入0.2~0.8 mL, 2^5 %香草醛-冰醋酸液，0.8~1.2 mL高氯酸，置於50~70 °C熱水浴10~15 min，再冰水浴10~20 min，最後加入5~10 mL冰醋酸，移取3~5 mL於玻璃比色皿以空白試劑為空白參照，用UV-3系列紫外可見分光光度計在最佳吸收波長520^560 nm處測定其吸光度；從標準曲線上查得皂苷的濃度C，根據3次平行測定的平均值，計算出金櫻子果皮中皂苷的含量。
[0007]所述的一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法，所述方法，設置乙醇水溶液中乙醇的體積濃度即乙醇濃度，樣液在微波反應器內輻射的時間即提取時間，乙醇水溶液與金櫻子果皮粉末的比例即液料比以及微波反應器所設置的微波功率；運用Design-Expert 8.0.6軟體根據Box-Behnken Design (BBD)設計原則進行工藝的優化。
[0008]本發明的優點與效果是:
本發明微波法提取三萜類物質具有提取時間短、雜質溶出少、三萜皂苷收率和純度高，金櫻子果皮皂苷平均含量為62.48 ± 0.25mg/g。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0009]圖1優化微波輔助提取三萜皂苷的三維響應面圖；
圖2優化微波輔助提取三萜皂苷的響應面的等高線圖。
[0010]注:圖1和圖2為產物狀態分析示意圖，僅供參考。圖中文字清晰與否並不影響本發明技術方案的理解 。
【具體實施方式】
[0011]下面結合實施例，對本發明作進一步詳述。
[0012]實施例1:
準確稱取20份(4組)I g金櫻子果實粉末分別置於圓底燒瓶中，分別對乙醇/水比例(40-80 %);微波提取時間(4-10 min);液料比(10:1-50:1 ml/g);微波功率(200-800W);進行單因素考察，從而確定BBD實驗的因素及水平。見表1 BBD實驗因素水平編碼表實施例2;
準確稱取29份0.1 g金櫻子粉末分別置於圓底燒瓶中，按BBD實驗設計表，表2響應面的BBD實驗設計及結果表，進行微波提取，離心後取上清液按照標準曲線的方法測定其吸光值並計算其皂苷含量。以提取時間作為橫坐標，皂苷含量作為縱坐標。結果見表2。實驗數據處理是採用響應曲面分析法方法，各因子與響應值之間的顯著性由F值來判斷，P值越小，則說明變量的顯著性越高。結果表明，乙醇濃度、提取時間、液料比及微波功率四個因素對金櫻果皮皂苷含量的影響大小依次為:乙醇濃度(A) >提取時間(B) >微波功率(D)>液料比(C)。從方差分析結果，表3響應面法結果的方差分析表，可以看出:乙醇濃度(A)對三萜皂苷的提取的影響最顯著，其次是提取時間(B)，微波功率(D)對皂苷提取的影響，最後是液料比(C)。此外，模型的顯著水平小於0.0001，所以該回歸模型是極顯著的。
[0013]根據所得數據進行多元回歸方程的分析，得到各因素與響應值之間的多元二次回歸方程，即
白#入旦57 J5+313 A+I9i Brhimc^r 1.U15 AE+ QltAC+ ?.ΙΑ Α?η
七甘曰裡(mg/g)-O gSBC +037BD +OJQCD - 0_63A s - 0_07? 1 1j53C 1 OJSID 1利用Design-Expert 8.0.6軟體根據回歸方程進行繪圖分析，得到回歸方程的響應面及其等高線圖。如圖2所示。
[0014]由模型分析可以預測得到微波輔助法提取金櫻子果皮皂苷提取的最佳工藝條件。
[0015]實施例3:
取3份金櫻子果實粉末，每份I g，按照微波助提法的最佳工藝條件進行提取，將其離心後取上清液按照標準曲線的方法測定其吸光值並計算其皂苷含量。結果顯示:金櫻子果皮皂苷平均含量為62.48±0.25mg/g，這與預測值62.69 mg/g十分相近。則表明響應面法優化的模型及工藝條件比較穩定，合理。
[0016]表1 BBD實驗因素水平編碼表
【權利要求】
1.一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法，其特徵在於，所述方法包括以下過程: 首先，製備金櫻子三萜皂苷粗提物:將乾燥的金櫻子果皮粉碎後用液料比為10:1-50:1mL/g的40-80 %乙醇溶液溶解，置於設置微波功率為200-800 W的微波反應器內微波輻射4-10 min，趁熱過濾，合併提取液減壓濃縮成浸膏，即得到金櫻子果皮三萜皂苷的粗提物；將皂苷粗提物進行顯色反應並採用UV-3系列紫外可見分光光度計測定其吸光度，由標準曲線計算其皂苷含量； 然後，精確量取定量的金櫻子果皮皂苷提取液0.0.5 mL，分別置於2支具塞試管內，水浴揮幹後，分別加入0.2~0.8 mL, 2^5 %香草醛-冰醋酸液，0.8~1.2 mL高氯酸，置於50~70 °C熱水浴10~15 min，再冰水浴10~20 min，最後加入5~10 mL冰醋酸，移取3~5 mL於玻璃比色皿以空白試劑為空白參照，用UV-3系列紫外可見分光光度計在最佳吸收波長520^560 nm處測定其吸光度；從標準曲線上查得皂苷的濃度C，根據3次平行測定的平均值，計算出金櫻子果皮中皂苷的含量。
2.根據權利要求1所述的一種金櫻子果皮三萜皂苷提取方法，其特徵在於，所述方法，設置乙醇水溶液 中乙醇的體積濃度即乙醇濃度，樣液在微波反應器內輻射的時間即提取時間，乙醇水溶液與金櫻子果皮 粉末的比例即液料比以及微波反應器所設置的微波功率；運用Design-Expert 8.0.6軟體根據Box-Behnken Design (BBD)設計原則進行工藝的優化。
【文檔編號】A61K36/738GK103977108SQ201410193804
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月9日 優先權日:2014年5月9日
【發明者】高品一, 劉學貴, 金梅, 蔣福宇, 楊頔, 張振學 申請人:瀋陽化工大學