作為抗傳染病替代藥物的益生微生物的製作方法

2023-12-12 20:40:57 1

專利名稱：：作為抗傳染病替代藥物的益生微生物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種益生微生物組合物，以及一種用該益生微生物組合物調節免疫反應的方法。
背景技術：
：相關文獻的描述，包括信息發表在37CER1.97和37CER1.98。益生菌是一種有活性的微生物，應給予適量的益生菌，它可以授予"寄主"有益健康的效果(摘自聯合國食物與農業組織及世界健康組織，替換醫藥2001)。益生菌普及用與人類，及動物營養添加劑，例如說，酵母菌常作為給家禽的營養補充劑。優樂乳和乳酸菌，乳酸桿菌(丄"cto^c/〃w)和雙歧桿菌(及;/^oZ)ac/eWwm)，通常用來預防及治療與腹瀉，和有關腸胃感染的疾病(Alvaez，etal，2001;Fuller1989;Majamaa,etal1995)。許多益生菌獨特的特點，例如抗感染的性質，調節免疫反應，增加防疫功能，代謝功能以及改變腸的蠕動及吸收功能。這些功能都使益生菌'成為對人類及動物的替代醫藥(WalkerandBuckley,2006)。雖然益.生菌的產物，如短連脂肪酸(SCFA)，細胞壁的蛋白酣糖(peptidoglycan)和短連去氧核糖核酸(DNA)含有CPG排列，可以有益生菌的功能。使用有活性的微生物，給人類和動物吃，是目前主要應用和研究益生菌的方針(WalkerandBuckley,2006)。為了使益生菌對人類及動物發揮最大的效果，我們必須將活的細菌傳送到腸內並在腸內生長、繁殖(KailasapathaandChin2000)。乳酸桿菌(Z^cto6aa7/us)及雙歧桿菌(5折cfotocfen'wm)是兩種最常見的乳酸益生菌，常在科學文獻中討論，也常在一般商品中見到。這兩屬細菌是屬於適合厭氧環境的細菌，這兩屬細菌中大部分的種及小種對氧氣以及高溫都很敏感(Gomesetal,1995;TalwakarandKailasapathy,2004)，所以在室溫，一直又開又關的環境下，是非常困難維持這兩類細菌的活性。因此，對於目前的商品來說，長期保存的方法，以及在不同溫度的運送條件，常有不同的結果發表(Tuomolaetal,2001)。美國專利號碼5,968,569，聲明在寵物食物中膠質，澱粉網包含有益生微生物，特別聲明是酵母菌屬0&cc/^rcw7;;ces)及乳酸片球菌(PeGf/ococcwsacW/a"/c/)。美國專'利號碼6,551,663，聲明給寵物的奶粉中含有乳酸酵素及乳酸，並包含專利5,968,569所聲明的益生菌。美國專利號碼6,780,447聲明動物食物包含山梨酸(sorbicacid)以及有活性及無活性的微生物，這些微生物是指乳酸片球菌CR"c/^/fl^d)。美國專利號碼6,827,957聲明動物食物中的特別組合，包含一層軟質的內層及硬質的外殼與益生菌混合在一起，特別是指酵母菌屬(Sacc/wramj/CM)。美國專利號碼6,827,397，用脂肪來包含酵母菌，包括各式'不同的益生菌，包括布拉酵母菌(&cc/wro，cei1tow/"ni/0禾口乳酸片球菌(7W/ococc"i1"cW/"c//c/)。美國專利申請中2003/0049240，揭示一種方法，是用乳酸桿菌(丄fl"oZ)flc/〃船)及雙歧桿菌CB拆AtocfeWww)，治療螺桿菌(helicobacter)的感染。美國專利申請中2003/010卯25，聲稱一種方法用來製造一種微粒，外面塗有活性的微生物。美國專利申請中2004/0197352，聲稱益生菌的前身其中的成份和減少肌肉素(creatine)和BUN包含各種不同種的微生物。美國專利申請中2003/0165472，聲稱一種用來儲存及運輸辦生物。美國專利申請中2006/0008511，聲稱益生微生物包含在黃原膠(xanthangum)，殼聚糖(chitosan)及明膠(gelatin)的混合物中。以前的例子無論相關與否都是用來說明。
發明內容以下的體系與觀念配合各種系統工具及方法來解釋，說明具代表性，並不局限於此點的空間。在不同的體系中，有一些上述的問題就相對減少或是解決，當我們用不同的方法系統來解決問題。所揭示的具體實施方式包括一種寵物用製品，該製品包括包囊在黃原膠和殼聚糖的混合物中的益生菌。又所揭示的具體實施方式，包括準備給寵物食用的食物，包含益生微生物包裝在一種明膠膠囊中，這種益生微生物是酵母菌(ce^及乳酸細菌。在此項揭示中，酵母菌是指酵母菌屬(&cc/wromyce4乳酸細菌是指乳酸片球菌CP^//ococc^flaW//fl"/c/)。酵母菌是特別指布拉釀酒酵母(&cc/ar麵j/ceycerev/"化ZowAsvi/"，又口qSacc/^rcwy^sZow/aW/。所謂乳酸菌是指乳酸片球菌(屍eafococc船ac/aWac"c/)。在這項揭示中，黃原膠(xanthangum)的濃度是在0.2-2.0%(百分比重量/容積)，殼聚糖的濃度在0.1-1.0%(重量/容積)，而酸鹼度(PH)在2-7之間。更具體一點來說，黃原膠(xanthangum)的濃度在1.25%(重量/容積)左右，殼聚糖的濃度在0.4%左右(重量/容積)，而酸鹼(PH)度在4.15左右。所揭示的具體實施方式包括治療鳥及哺乳動物腸胃有關的傳染病。在這治療的過程中，包括將益生菌包裝在裡面，或是將益生菌加在動物的詞料和零食裡，當益生菌餵於鳥及哺乳類，以如此的方式可以增強鳥類與哺乳類的免疫功能，抵抗病原。圖l表示，酸鹼度(PH)和黃原膠和殼聚糖膠囊硬度的關係。圖2表示，益生菌的活性與有無黃原膠和殼聚糖膠囊在減溫的關係。圖3表示，益生菌的活性與有無黃原膠和殼聚糖膠囊在增溫的關係。圖4表示，益生菌的活性與有無黃原膠和殼聚糖膠囊在酸性環境的關係。圖5表示，益生菌對抗體產生的效應。圖6表示，益生菌對細胞免疫的效應。圖7表示，被(￡.flcen/M肌"")感染雞糞便中的胞囊蟲。圖8表示，被(￡.acm;w仏Vzfl)或是(五.te"e/fe)感染的雞，糞便中的胞囊蟲。具體實施例方式有活性的乳酸菌與酵母菌用來餵食給貓狗寵物的益生菌，是被一種微生物的生物多聚合物黃原膠(xanthangum)和殼聚糖(Chiosan)混合保護包裝而成的。黃原膠(xanthangum)是一種多糖類膠，用很少的量，即可溶解在7JC中，加上些許的攪拌，就變成非常濃稠的溶液，它可以在溶液上形成一層強韌的保護膜，可以幫助益生菌提高對熱分解的忍耐度。甲殼素(chitin)也是一種多醣類，大部分是由不分支連的葡萄胺(N-acetyl-glucosamine)單位體。殼聚糖(Chitosan)是一種去除胺基(acetyl)的甲殼素，這種聚合物通常用來處理水，衝洗照相的乳劑以及改進人造合成纖維，織布的染色力，和傷口癒合的準備。益生微生物被包裹在水溶液中，含有0.5-2.5%(重量百分比，重量/體積)的黃原膠(Xanthangum)以及0.2-0.8。/。(重量/容積)的殼聚糖(chitosan)膠囊，此溶液的酸鹼度(PH)在2至7之間，比較更適宜的溶液是含有1.25%的黃原膠(xanthan)和0.4M的殼聚糖(chitosan)膠囊(重量/容積)，酸鹼度(PH)在4:15，此種被包裹而仍有活性的微生物細胞每毫升仍能形成10^菌株單位體(cfWml)。將有活性的益生微生物包裹在黃原膠(xanthan)和殼聚糖(chitosan)的混合液中，它能保存微生物的活性，並將正確的活性益生菌的劑量，送到寵物的腸胃中，如此使餵食益生菌給貓狗能達到最大的效益。通常貓狗都不會拒絕食用益生菌，包裹在黃原膠(xanthan)和殼聚糖(chitosan)的混合液中。發明者希望不要被局限在這個解釋，他們建議當益生微生菌包含在黃原膠(xanthangum)和殼聚糖(chitosan)溶液中，特殊的功效是因為這種膠囊混合液形成一處特殊的黃原膠殼聚糖(xanthanchitosan)結合復體。這個復體在溶液中帶有兩種相交的電極的電解質。由於不同的電極互相吸引而形成聚合電解質。根據測在中性的溶液中，黃原膠(xanthangum)大部分是帶負電極，而殼聚糖(chitosan)大部分是帶有正電極，這兩種聚合物帶有不同電極在水溶液中，就會結合成一個穩定的聚合復體和強韌的膠囊。當酸鹼值(PH)升高也就是溶液變在鹼性，就會使殼聚糖的胺基部分去除(去離子)，使兩種聚合物之間產生比較不穩定的結合，導致成較弱的保護膠囊。圖1黃原膠(xanthan)和殼聚糖(chitosan)的膠囊的硬度的酸鹼值(PH)在2至8之間的關係。膠囊在上述適常的溶液環境下形成的。利用TA.XT25可以測量出膠囊的硬度與韌性，與不同酸鹼值的關係，測量時用一個5公斤測值器，在距離l毫米下測量，圖1表示膠囊最強韌尖峰是落在酸鹼值3至4之間。當酸鹼值在6至8之間，膠囊的韌性也相對減弱，圖1的數據也符合前一段理論上的討論。黃原膠(xanthan)和殼聚糖(chitosan)的黃原膠和殼聚糖Xanthanchitosan因正負兩極相吸形成聚合復體的穩定性與酸鹼值有關。圖2顯示，低溫效應下，益生菌的活性與有無黃原膠(xanthan)和殼聚糖(chitosan)的膠囊的關係。在(TC將有膠囊和沒有膠囊的益生菌置放1小時，沒有膠囊保護的活性益生菌數目從10"菌株體/毫升(cfu/ml)，降至1083,株體/毫升。有膠囊的活性微生物數目從1093菌株體/毫升，降至109菌株體/毫升，圖2顯示在低溫下，膠囊對益生微生物的保護效果。圖3顯示，高溫效應下，益生菌的活性與有無黃原膠(xanthan)和殼聚糖(chitosan)的膠囊的關係。在60°C將有膠囊和沒有膠囊的益生菌置放150秒，沒有膠囊保護的活性微生菌數目從109菌株體/毫升降至107菌株體/毫升。有膠囊的活性微生菌數目從109菌株體/毫升降至108'9菌株體/毫升。圖3顯示，在高溫下，膠囊對益生微生物的保護效果。圖4顯示，在酸鹼質低(酸性溶液)時，益生菌的活性與有無黃原膠(xanthan)和殼聚糖(chitosan)的黃原膠膠質(xanthan)和殼聚糖聚甲殼糖(chitosan)的混合液膠囊的關係。將有膠囊與沒有膠質膜的益生菌，放置在酸鹼值2的環境下0至60分不鍾等，在30分鐘後，沒有膠囊的活性微生菌從原來109降至10"菌株體/毫升，在60分鐘後，降至1055菌株體/毫升。有膠囊的活性微生菌從原來109降至10"菌株體/毫升，在30分與60分鐘後，圖4顯示，在酸性高的溶液，膠囊對益生微生物的保護效果！益生菌可作為替代醫藥，可以替適燒烤的雞防衛寄生蟲引起的傳染病。鳥類的球蟲病是在家禽養殖業最常見，最主要的寄生蟲病，嚴重可以致死，輕者造成消化不良，吸收不佳，導致生長緩慢，並減少下蛋的機會(Lillehojetal.,2004)。球蟲病最明顯的病狀就是抑制生長，減緩體重的增加，在比較嚴重的狀況，會減輕體重，這些都會影響到家禽業的經濟效益(DalloulandLillehoj,2006)。目前，藥物及活菌疫苗是兩種主要漢療球蟲病的方法，但是由於使用預防疫病的藥物管理手續增多，以及疫苗成本提高，替代治療方法的需求也就相對提高，對於被艾美爾球蟲感染的子雞，雖然觀察到雞體內的抗體增加，但是細'胞免疫性的增加，才是治療疾病的根本基礎(DalloulandLillehoj,2004)。最近益生菌研究的進展，證明活的細萬可以影響寄主體液免疫性增加，尤其是對由輪狀病毒(rotavirus)、大腸菌(E.coli)及沙門桿菌(Salmonella)引起有關腸的疾病(IsolauriE.,2003;Majamaa,etal1995;Perdigonetal2001)。為了更有效使用益生菌成為一種替代醫藥，對抗由艾美爾球蟲引起的傳染病，我們必須要證明使用益生菌餵食並被艾美爾球蟲感染的子雞，其雞體內的體液免疫及細胞免疫均有提高，並有很好的效果。檢査使用益生菌對被艾美爾球蟲感染的子雞，在其體任何所產生任何可能的毒性。.將15-20隻一天大的小雞，列為一組，共有6組。從第一天起餵予不同的飼料，一組是對照組只餵食一般市面上的飼料，另外餵食添加益生菌。乳酸片球菌(P^/A7^^c/)的詞料，在餵食有益生菌的飼料中又分為五種不同的飼料，依照不同濃度的益生菌區分成0，0.01%，0.05%，0.1%及0.4%。在第10天，除了對照組的變化(沒有餵食乳酸片球菌i^^Vcoccttfac/A7a"/c/，沒有感染)，其他所有的子雞都給予口服感染5000個艾美爾球蟲(&'mw/aacervw/Z"a)的發芽的卵囊蟲。在感染後的第0，6，9天之後，測量所有小雞的重量，並記錄他們體重的增值數。在感染後6天，開始收集小雞的糞便，連續收集4天(感染後第6天到第9天)，收集糞便放於小桶內，並記錄糞便中的卵囊蟲。將不同實驗組及對照組所收集的數據差異，以"差異分析"(ANOVA)用統計的程式GRAPJIPADINSTAT分析，這是統計軟體程式的註冊商標，是由GraphPad軟體公司所設計的。公司位於聖地牙哥，加利佛尼亞州。數據是這個程式分析後，發現實驗組之間與對照組有明顯的差異，其概率P0.05，此外還用Dunnett比較試驗法，來比較每組的中間值。圖表1(TABLE-US-00001)顯示乳酸片球菌(屍ocfococcwsa"A7fl"/c/)對被球蟲菌感染的子雞的生長以及雞糞中卵囊蟲的數目卻有明顯的影響與作用。首先檢視子雞被5000個艾美爾球蟲的卵囊蟲感染後1-9天體重增加的比較，一共有6組，依序為1，2，3，4，5，6。每組給0，5000，5000，5000，5000個卵囊蟲。以及餵不同百分比的乳酸片球菌(P.acidilactici)，分別是0%，0%，0.01%，0.05%，0.1%和0.4%。平均每組的體重增值依次為396克，343克，362克，366克，395克和382克，其標準差為45，51，58，36，44。其次在糞便中所收集的艾美爾球蟲的卵囊蟲每組平均值依次約為0x108，2.65x108，1.97x108，2.39x108,1.39x108，2.10x108，其標準差為0.67，0.50，0.27，0.23，0.60。A.被5000個發芽卵囊蟲感染後子雞1-9天體重增加量，以克為單位。tableseeoriginaldocumentpage10當想要將一個試劑應用成為一個新的藥物之前，一定要去除此試劑會產生任何有毒素的副作用之可能性，然後才能運行應用這試劑，做各種數能的研究。乳酸片球菌(P"c^/""/d)是一種自然生長在動物和人類腸內的微生物，從來沒有任何文獻上記載，這種乳酸片球菌有明顯的毒害作用。為了要確保調查乳酸片球菌有可能造成對這種適合嫩雞產生毒害的副作用，我們餵0.1-0.4%的乳酸片球菌給嫩雞或是被艾美爾球蟲發芽卵囊蟲(五.acen^/^")感染的雞。如同表1A顯示，無論是否被艾美爾球蟲感染的嫩雞，只要餵食乳酸片球菌，就沒有體重減輕或是狹死的現象。更進一步的結果顯示，被艾美爾球蟲感染的嫩雞餵能混合種的益生菌，也就是說乳酸片球菌Pac/A7fl改'c)與布拉酵母菌CS.&^^^7)濃度分別為0.01%和1.0%。這些被感染的雞在感染期間，體重反而增加比較多，整個實驗的過程當中，我們在餵益生菌給雞吃之後，沒有觀察到任何主要器官有任何變化。這些器官包括，肝、心臟、腎、脾。此項'實驗與類似的實驗結果證明被艾美爾球蟲感染的嫩雞，可以餵以比正常濃度高40倍的稚球乳酸菌(也就是說，-濃度在0.01%至0.4。/。)或是餵以混合乳酸片球菌和布拉酵母菌濃度可以從O.Ol高達至1.0%，都不會偵察到任何形態上的變化。為了證明乳酸片球菌(屍"c/A7a"/c)可以用來防禦子雞被艾美爾球蟲感染所產生的病症。我們觀察是否使用乳酸片球菌來餵雞，然後再口服一種艾美爾球蟲的發芽卵囊蟲(五/附^&^//^")。有趣的是被感染艾美爾球蟲的子雞，又餵以乳酸片球菌顯示卵囊蟲的數目量減少比沒有餵食乳酸片球菌的子雞產生的卵囊蟲數大約少20-40%百分比(參見圖7)。在相似的狀況下，我們觀察到當子雞被五.acervw/f"a感染時，若餵以混合兩種益生菌乳酸片球菌和布拉酵母菌，卵囊蟲的數目會減少到30-50%百分比。當子雞被五.化//6朋感染，又餵以同樣的混合益生菌，卵囊i的數目比沒有餵食益生菌的雞減少10-20%(參見圖8)，因此這些結果顯示益生菌可以減低病原或是寄生蟲對雞體內的損害。餵食益生菌可以使被艾美爾球蟲感染的嫩雞，刺激雞體內的體液免疫反應。圖5顯示在餵食濃度不同的益生菌混合種(乳酸片球菌和布拉酵母菌)。以沒有益生菌混合種(以NOR代表)，0.1%或0.2%的比例摻和益生菌混合種在一般的飼料中餵食21天(以MG0.1和MG0.2代表)，檢驗雞體內產生抗艾美爾球蟲的抗體(Anti-ETMICZ)反應。比較孵化12天後沒有被感染的子雞，'和被5000個艾美爾球蟲(五.^朋//0)的卵囊蟲感染子雞，在感染卵囊蟲後10天，取雞的血清，檢驗抗艾美爾球蟲的抗體。雞體內產生抗艾美爾球蟲的抗體(Anti-ETMICZ)反應不同，每一個帶狀條代表中間值加減標準差(N-3)，被感染艾美爾球蟲的雞和沒有被感染的雞，他們的中間值有明顯的不同，概率小於0.05(P<0.05)。為了評估抗體對艾美爾球蟲抗原，ETMIC2的反應。ETMIC2是艾美爾球蟲中的一種五/wer/a蛋白，它的基因已經被分離出來，並加以分析評估(Dallouletal,2006)並用ELISA檢定雞體內的血清。在所有被艾美爾球蟲(￡.fe"e〃力感染的子雞，他們的血清中明顯的都引起產生對艾美爾球蟲蛋白的抗體。更進一步說，在使用餵食益'生菌乳酸片球菌CPfl"力7ac"c/)又被蟲感染的雞，他體內的血清對艾美爾球蟲的抗體，明顯的高過沒有餵食益生菌又被蟲感染的雞，體內血清中的抗體，其概率PO.05(如圖5)。這項結果明顯的證明益生菌乳酸片球菌CPac/^7a"/"')是能夠刺激產生體液免疫性的抗體，來抵抗特定的寄生蟲感染的嫩雞。全身性的細胞免疫性反應，淋巴球的繁殖。圖6顯示ConcanavalineA(conA)可以導引脾細胞的繁殖。當嫩雞感染艾美爾球蟲後，又餵食普通飼料或含有不同濃度0.01%，0.1%或1.0%'的混合益生菌乳酸片球菌和布拉酵母菌用5000個艾美爾球蟲￡.acerra"朋(EA)或是&"e//a(ET)的卵囊蟲感染孵化14後天的子雞，取出脾細胞加以培養，並加入conA繼續培養24小時，接著用含有放射性的[SH]-thymidine，來測量細胞繁殖，每一個帶狀條代表中間值加減標準差(N:3)。感染不同種的艾美爾球蟲(EA或是ET)的雞，他們細胞繁殖的中間值不同。概率(P)小於0.05(P<0.05)。我們利用被艾美爾球蟲感染的嫩雞，一組餵食普通飼料，另一組餵食含有益生菌的飼料，利用conA促使脾細胞繁殖反應的檢測，來決定是否被餵食含有益生菌如乳酸片球菌的雞能產生全身性的細胞免疫反應，來對抗艾美爾球蟲的感染。在被EA艾美爾球蟲感染的嫩雞中，餵以含有0.1%益生菌的嫩雞，他們的脾細胞繁殖速'度明顯的比其他任何一組餵以不同飼料嫩雞的脾細胞都快(P0.05)。這些不同的飼料是指普通不含益生菌或是含有不同濃度的益生菌飼料，在被ET艾美爾球蟲感染的嫩雞中，餵食以含有0.01%和0.1%益生菌的嫩雞組，明顯的顯示他們的脾細胞在受conA的刺激下，繁殖速度比其他實驗組快，而餵以0.1%益生菌的雞之脾細胞繁殖速度又比0.01%的快。圖7顯示比較被艾美爾球蟲E(ET)感染的嫩雞，被艾美爾球蟲ET，感染的雞糞中卵囊蟲的數目。餵食普通的飼料(REG)或是含有0.1M益生菌(MG0.1)或是含有0.2。/。的益生菌(MG0.2)。感染後的6至9天，每天收集雞糞中的卵囊蟲。MG代表含有雞球乳酸菌的飼料，每一個帶狀條代表中間值加減標準差(N-5個籠子)。圖8，用5000個艾美爾球蟲的卵囊蟲(EA或是ET)，感染12天孵化後的子雞雞糞中卵囊蟲的數目，在感染，這些被感染的子雞餵食普通詞料(REG)，含0.01%的混合益生菌(MO.Ol)，0.P/。(M0.1)或1.0%(M1.0)。M是代表混合乳酸片球菌(Pac/^7fl"/c/)和布拉酵母菌(S.Zww/aWz7)，每一個帶狀條是代表中間值加減標準差^=5籠)。益生菌可做為狗消化不良或是狗受病毒感染的替代醫藥。益生菌的應用——對於狗消化不良的疫病。應用益生菌成功的例子邁特靈MITOMAXTM，是一種混合乳酸片球菌(屍acW/a"/c/)和布拉酵母菌(S.6oM/flW/Z)益生菌。它可以幫助子雞抵制艾美爾球蟲的感染，使我們想進一步的做田間試驗來評估是否邁特靈MITOMAXTM可以幫助解決狗消化不良的問題。邁特靈MITOMAXTM是益生菌的註冊商標，屬於ImagilinTechnology,LLC，位于波多馬克，馬裡蘭州。它是混合乳酸片球菌(屍flcM/a"/W和布拉酵母菌(S.Z)owto^7)被包裝在明膠的膠囊中。這個田間評估是與巴西聖保羅3家動物醫院的4位獸醫進行合作實驗(表2)，狗的體重分布於2公斤到26公斤，狗齡大約1歲至15歲不等。這些狗都總有不同程度的腸胃消化不良的病症，每天餵以1顆或2顆的益生菌，按狗的體重來決定是1顆還是兩顆。經過14天使用益生菌的治療，大部分的狗都有明顯的改進，不再受消化不良的現象。這項結果很明確的顯示，益生菌對於治療消化不良的狗有很好的效果。表2(TABLE-US-0002)將益生菌對治療狗消化不良的田間試驗^H故的總結，此項田間試驗是在巴西聖保羅的動物醫院進行的。表2益生菌對有消化不良病症的狗患的田間評估，評估是在巴西聖保羅市的動物醫院進'行。tableseeoriginaldocumentpage14*:消化不良有不同的病症，分為0=腹瀉，V^區吐，。=便秘，OCH本臭，F二腸胃脹氣，LA:失專胃口，病情程度++++=非常嚴重，+++=嚴重，++=輕微到嚴重之間，+=輕微。**:益生菌治療是指口服邁特靈MITOMAX的膠囊包含了混合乳酸片球菌和布拉酵母菌。如果狗的體重少於20公斤，每天口服一顆邁特靈MITOMAX,如果狗的體重超過20公斤以上，每天2顆邁特靈MITOMAXTM。益生菌是一種替代醫藥，可用來停止狗因小病毒感染引起'的血性腹瀉。被小病毒感染的狗，會有嚴重的腸、胃症狀，如嘔吐和血性腹瀉。被感染的小狗，如果沒有適當的醫療，幾天內就會病死，因為這是病毒引起的疾病，抗生素不能有效的撲減病毒，狗的復健是依賴狗的免疫系統來對抗小病毒的感染，擴散，因此這會是很好的實例來描述益生菌用來做替代醫藥處理被小病毒感染的小狗。四隻已被檢試證實受小病毒感染的小狗，雖然經過綜合抗生素的處理後，血性腹瀉還是無法停止，這四隻小狗餵食益生菌混合乳酸片球菌CP"C/A7"C"C^和布拉酵母菌'(S.tow/"W/"，2-3天後血性腹瀉完全停止，大便也恢復正常的塊狀，經過連續2個星期服用益生菌，也沒有任何的復發個案(表3)。表3益生菌對小病毒感染狗的療效*。tableseeoriginaldocumentpage15*:由加州蘭卡斯特的動物急救診所的Dr.Volkenbourgh,DVM所執行。":標準小病毒感染狗的處理是用綜合抗生素(NoraiosolR,Reglan，Cefazolin，MetronidazoleorAmpiliccin，+/-Famotidine)於感染的小狗，有些狗會接受多糖澱粉(hetastarch)或血漿運送。益生菌的處理是餵用1天1顆邁特靈MITOMAX—乳酸片球菌PacW/a化W和布拉酵母菌S.6ow/aW"'的綜合劑。益生菌對動物和人體的效用取決於益生菌的活性，膠質囊包裝的益生菌，經過貯藏在低溫4GC或常溫25QC，二年後，貯藏後的活性益生蘆的數目被檢試到和原來的益生菌的活性數目是相似的。艾美爾球蟲感染的嫩雞，餵食飼料，包含0.01%到0.4%的益生菌乳酸片球菌PacW//a"/c/後，形態上或體重上和沒有被感染的嫩雞，'沒有明顯的差別。類似的結果也同樣在不同的種艾美爾球蟲(EA或ET)感染的嫩雞得到。益生菌(乳酸片球菌Pac/A7""/c/或乳酸片球菌Pac/^7flc,/c/和布拉酵母菌S.6w/wA7的綜合劑)對於艾美爾球蟲感染的嫩雞的效用，取決於l.從大便樣品抽取卵囊數目的減少量2.促進小雞製造抗體3.促進小雞脾細胞的繁殖，益生菌(乳酸片球菌Poc/fiWfl"/c/或乳酸片球菌PflC7V/z7a"/c/和布拉酵母菌S.tow/an力7的綜合劑)。從動楊醫療診所的田間試驗評估，證明對腸胃消化病，如瀉肚，嘔吐，喪失食慾，口臭是有效果的。最重要的是，口服益生菌綜合劑(乳酸片球菌Pac/A/a"/c/和布拉酵母菌51.^M/aW/02-3天後，被小病毒感染的犬類，健康能立即恢復，這些結果描述益生菌可用來做代替醫藥，對付傳染性疾病。最適合的益生菌是酵母菌和乳酸菌，乳酸菌是小球菌屬(屍W/ococc船)、乳酸桿菌屬(丄acto6(2c"/MS)、桿菌屬(5flc/〃ws)、雙歧桿菌屬(說yktoZ)ac&n.wm)、鏈球菌屬(5^印tococc"力、腸球菌屬CE"feracoccw50或酵母菌屬。酵母菌屬是Saccharomyces,囊包益生菌對致病的細菌、病毒、真菌、寄生蟲和單胞體是有醫療效果的。.囊包益生菌對鉤蟲、蛔蟲、鞭蟲，絛蟲是有醫療效果的，囊包益生菌對球蟲，如賈第蟲屬是有效果的。當人感染傳染性腸胃病後，服用適當劑量的囊包益生菌，囊包益生菌對抗人體傳染性腸胃病是有效的，囊包益生菌對抗魚類傳染性腸胃病是有效的，粉狀益生菌和囊包益生菌是有相似的醫療效果的。權利要求1.一種益生微生物組合物，其包括至少一種包囊在明膠中、或黃原膠與殼聚糖的混合物中的益生微生物。2.如權利要求1所述的組合物，其中所述益生微生物是酵母菌或乳酸菌。3.如權利要求2所述的組合物，其中所述益生微生物是小球菌屬(屍e&ococc船)、乳酸桿菌屬(丄a"okzc/〃w》、桿菌屬(5fld〃附)、雙歧桿菌屬0B訴(/o6acten'wm)、鏈球菌屬(&reptococcws)、或腸球菌屬C&7化racoccws)細菌或酵母菌屬4.如權利要求3所述的組合物，其中所述小球菌屬細菌是乳酸片球菌(戶e^ococc^ac/力&"/"')，或者所述酵母菌屬酵母是布拉釀酒酵母5.—種調節寄主對抗原的免疫反應以及治療鳥類、魚類以及哺乳類動物的傳染病的方畢，所述方法包括向需要增強所述免疫反應的寄主或向需要所述治療的鳥類、魚類或哺乳類動物施用如權利要求1所述的益生微生物組合物。6.如權利要求5所述的方法，其中所述益生微生物包含在動物的食物、寵物的零食、動物的風味料、發酵過的乳製品或酸奶中。7.如權利要求5所述的方法，其中所述鳥類是雞、鸚鵡、長尾小鸚鵡、鵒子、火雞、鴨或鵝。8.如權利要求5所述的方法，其中所述哺乳類是狗、貓、天,鼠、亞洲大鼠、老鼠、兔子、猴子、猩猩、豬或人。9.如權利要求5所述的方法，其中所述傳染病由病原性細菌、病毒、真菌、寄生蟲或原生動物引起。10.如權利要求9所述的方法，其中所述病毒是細小病毒(pan/ov/n^)、輪狀病毒(ratov/r船)或流行感冒病毒(〖"yMe/zavzV^)。11.如權利要求9所述的方法，其中所述寄生蟲是鉤蟲、蛔蟲、鞭蟲或絛蟲。12.如權利要求9所述的方法，其中所述原生動物是艾美爾球蟲(五/men》)、賈第蟲(Gfarafe)、隱？包子蟲(Co^tos;w〃Vif"w)、弓形蟲(rcwcp/aswa)、培原蟲(屍/oswc^'ww)、萊什曼原蟲(丄eis/zwflm.a)或是環包子蟲(C>c/o5p3ra)。13.如權利要求5所述的方法，其中所述調節免疫反應是增加抗體的產生或增加T細胞及輔助T細胞的繁殖。14.一種增強鳥類、魚類和哺乳類動物對抗原的免疫反應的方法,所述方法包括向所述鳥類、魚類或哺乳類動物施用如權利要求1所述的^生微生物組合物。15.如權利要求14所述的方法，其中所述增強免疫反應包括增加抗體的產生或增加T細胞的繁殖。16.如權利要求14所述的方法，其中所述益生微生物包含在動物的食物、寵物的零食、動物的風味料、發酵過的乳製品或酸奶中。17.—種益生微生物組合物，其包含至少一種粉狀益生微生物。全文摘要在這項提案，提供一個具代表性的新體系，是用來改進餵食益生菌的方法。將益生菌特別是乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)和布拉酵母菌(Saccharomycesboulardii)混合在不同的膠質網內，包括黃原膠(Xanthan)，殼聚糖(chitosan)或明膠(gelatin)。使用這種混合膠質保護，可以保護益生菌的活性，並幫助抵抗，多種惡劣的環境和不利生長的溫度。這種具代表性的新方法也提供多種方法，用有活性的益生菌，贊助治療，鳥類及哺乳動物的傳染病。此外，益生菌也能常作輔佐劑，以提高抗體的產生，以及促進細胞性的免疫效果。更特別的是使用益生菌在此提示，可以減少糞便中卵囊蟲的數目，增加抗體的產生。在被艾美爾球蟲感染的雞，能促進脾細胞(splenocytes)的繁殖，此外如被小病毒(parvovirus)感染的狗，益生菌也能減輕他的病症。文檔編號A61K36/064GK101172118SQ200710139878公開日2008年5月7日申請日期2007年7月25日優先權日2006年7月26日發明者林哲志申請人:美國醫邁科技有限公司