抗衰老藥物組合物及其製備方法
2023-12-01 03:37:51 3
專利名稱：抗衰老藥物組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及到一種含有節旋藻、蛹蟲草、川芎、枸杞等原料提取液的抗衰老藥物組合物及其製備方法。
背景技術：
隨著經濟的發展，生活的改善，科技文化的進步，人類的平均壽命正在不斷的延長，老年人在人口總數中佔的比例越來越大，據統計，我國60歲以上的人口，目前已達1.4億左右，佔全國總人口的10％以上，進入老齡化國家。
衰老是人體的生理規律不可避免的現象。衰老的進程又受環境、飲食及其自身健康狀況和生活習慣等等多種因素左右。應用科技手段和方法，探索衰老的發生和演進過程，對一些老年疾病予以防治。衰老發生的機制極為複雜，由一系列生理、病理過程綜合作用的多因素所致，我國醫藥學在延緩衰老，延年益壽等方面，積累了豐富的理論知識和實踐經驗。
人們為延緩衰老的進程，一直在探索尋求各種防衰老的方法，在眾多的方法中，「補品」抗衰是我國傳統的行之有效的方法之一，也是被世界各國關注的課題。
人們隨著年齡的增長，生理機能在逐漸改變，對飲食營養的要求也在不斷的發生變化，因此結合生理功能改變的特點，製成相應的飲食，以適應年齡的增長需要，從而達到預防疾病和推遲、延緩衰老的目的。
自由基性質活潑，具有極強的氧化反應能力。其數量隨年齡的增加而增長，在細胞內自由基超過一定數量時，機體即產生不良影響和損傷，促使人體衰老。因此，尋覓可清除自由基的物質也是抗衰老的方法之一。
大量的中醫典籍，都表明了益氣活血在衰老過程中的重要作用。清·王清任《醫林改錯》中有「元氣既虛，必不能達瘀血管，血管無氣，必停留瘀」的描述。並明確指出補氣藥與活血藥一同應用的良好效果。
臨床試驗結果表明，混合組成多種物質，比單一物質的抗衰效果好。氣虛血瘀是一種以氣虛為本，血瘀為標的本虛標實證，人到老年，必然會有元氣不足，五臟之氣衰憊之變化，這是衰老的根本機制。因此，對氣虛血瘀在衰老過程中的重要機制變化的認識，以及應用益氣活血的中草藥和菌藻類進行抗衰老的防治作用的研究得到了確定。如能改善氣虛血瘀則是抗衰老的又一種萬法，對延緩衰老具有一定的作用。
《內經》有「邪之所湊，其氣必虛」之說，明確表達了氣虛時機體抗病能力不足，免疫功能低下的特點。應用同位素標記法測定發現，多種疾病的虛症患者的細胞免疫功能都有所降低，這就為免疫功能與中醫正氣概念之間的相互關係提供了佐證。老年病多屬虛症，這是由於在免疫功能降低的基礎上發生的生理性虛症和病理性虛症交織所致。因此，觀察免疫功能的改善，尤其是細胞免疫功能提高，是評價、判斷抗衰老作用的重要標誌之一。血瘀的機理可以從眾多的項目來檢測，目前一般認為TXB2(血栓素)與PGE2(前列腺素)的平衡變化能客觀反應血小板聚集與血管壁的舒縮情況，血漿TXB2水平升高，可能是血瘀症的重要特症之一，兩者之間的動態平衡構成了氣血相互依存和制約的關係，可見選擇細胞免疫功能測定與TXB2、PGE2的平衡關係來說明氣虛與血瘀的變化是合理的。
目前市場出售的各種(類)護膚、美容化妝品，種類繁多，不勝枚舉，究其作用，一般僅能起到暫時性的潤膚作用，有些甚至因其中所含的增白劑等物，還會導致皮炎等副作用發生。本發明人認為，單純以有機化合物或金屬物質(單體)成份作為添加劑製成的化妝品膏、霜或乳劑等，最終不能起到保護皮膚，延緩皮膚衰老的作用，還或多或少的存在著不同程度的弊端與不足。
為解決上列的技術問題與不足，用藻菌及中草藥內的多種有效成份(含天然色素)代替化學合成(含染料)物，應用到化妝品生產中，生產藻類和中草藥天然提取物系列化妝品(含口紅，胭脂，眼影膏，指甲油)，對防皺、消炎(座瘡)等有顯效。
1988年法國著名的施藍化妝品公司，首先製成螺旋藻化妝品(五個系列產品，霜，眼影膏，洗髮香波等)，為當時市場上最昂貴的高級化妝品之一。以後日本、美國等也先後製成多種螺旋藻化妝品，所有這些產品中都是直接將螺旋藻作為原料之一，參與配伍。
本發明的特點之一，是將藻類和中草藥內的有效營養成份卒取出來，用入化妝品中，既提高了純度和成份，更提高了使用效果，達到營養保健，美化肌膚的雙重作用。
發明內容
人到老年，必然元氣不足，五臟之氣衰憊。從「氣行則血行」的理論出發，氣虛血運行無力可致瘀，因此老年病患者的氣虛與血瘀常互相關聯，互為因果。氣虛血瘀是一種本虛標實證，本虛導致標實，標實使本更虛，往復循環，造成全身性功能減退，以至衰竭。因此，採用藻菌和中草藥同時應用，其效果較佳。
1986年本發明人與蘇州市中醫院、解放軍100等七家醫院合作藻類治療″急再障″臨床試驗的同時，美國哈佛醫學院的Schwartz和SHKlar研究發現，從顫藻科螺旋藻屬Spirulian Turpin的一個未知種名的藻類提取的藻蛋白混合物，對一些癌細胞有抑制作用，並有抗疲勞等功能。亦可用於抗衰老和治療AIDS病方面。
次年(1987)本發明人即著手藻類抗衰老的應用研究，在完成節(螺)旋藻保健食品組合物及其製法(專利公開號CN1113716A)和鈍頂節(螺)旋藻Artlirospira(Spirulina)、Platensis藻藍蛋白及其應用(專利號ZL9410925 X國際專利分類號C07K14/405)都獲得成功的基礎上，又經七年多的臨床試驗、驗證，藻類物質具有明顯的抗衰老效果。此項成果，在99年(北京)國際研討會上引起德、美等國的廣泛興趣。
本發明應用本發明人自行選育的節(螺)旋藻和蛹蟲草配合川芎、枸杞分解，提取物經臨床應用後，表明這些物質對人體的某些衰老症狀，具有較明顯的改善效果。
本發明還通過對我國古代養生理倫基礎的研究，結合現代應用藻類的抗衰老試驗研究成果，運用中醫衰老機制學說「益氣活血」法抗衰老的臨床試驗(觀察抗衰老作用)。
本發明的提取物由多糖類、糖苷、黃酮類等物質組成，既可內服又可外搽塗，可改善免疫功能，血液流變，能提高前列腺素(PGE2)含量，使血栓素(TXB2)下降，和PGE2/TXB2的比值變化；明顯減少血清過氧化脂質(LPO)水平，提高超氧化物歧化酶(SOD)活性，膠原蛋白中游離膚或結合膚的烴脯氨酸(HO-PRO)含量增加。
本發明的提取物用作外搽(塗)皮膚表面，可促進表皮代謝，延緩角質化的發生(進程)。
本發明的原料藥物的選擇1、藻類節(螺)旋藻1980年2月，本發明人將美國贈送的「螺旋藻」進行室內養，完成一系列生理、生化試驗後，置於蘇州東山建池進行自然條件下工業化生產研究成功(1984年10月通過中科院鑑定)後，同年移放張家港市進一步擴大生產成功(獲1986年蘇州市科技4等獎)，用其製成啤酒(1986年國際雅典藻類會議)被公認為首創。1990年10月在全國家科委主持召開(昆明)首屆螺旋藻應用研討會上，予以介紹，向全國推廣。多年來，「螺旋藻」被國際間廣泛流傳應用誤稱為螺旋藻Spirulina，此項研究經南京大學曾昭琪教授和德國Tsnang-Pi CHANG研究員合作，應用生化、電鏡等檢驗研究發現應為節旋藻Arthrospira(參見《藻類》1990年60期)。經國家衛生部90年3月批准為我國新食品資源。本發明人選育符合《中國藥典》90年版，《中國藥用孢子植物》等典藉標準。
2、菌類北冬蟲夏草(蛹蟲草)1987年7月～1990年7月間，本發明人先後在山東泰安、甘肅武威，多次採得形態相似、顏色相同，桔黃色含菌的僵硬蟲蛹(子實體)，經分離、培養、馴育，鑑定為蛹蟲草(Ordyceps militaris)將其接種蠶蛹上，置一定的溫、溼、光照條件下人工培養70天左右，獲得與(野生)自然環境中生長的蛹蟲草菌(絲)、形態、顏色均一致的子實體。成分分析結果表明，該子實體含18種胺基酸，其中蘇氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、SOD、蟲草素、蟲草多糖、腺嘌呤等含量均高於冬蟲夏草。
3、藥用植物川芎、枸杞。
4、本發明的藥物組合物中有效成分的功效(1)節旋藻(螺旋藻)含有極豐富的營養物質，和多種活性物質，及人體必需的胺基酸，多種維生素(Vitamin)尤以β-胡羅卜素和藻藍素(leucocyan)的含量是其它植物無法與其相比的，其脂類的主要成份為不飽和脂肪酸，同時還含有膽鹼脂酶，多糖(Polysaccharids)和鋅(Zn)及微量元素硒(Se)等等。具有增強核酸內切酶活性的作用，有明顯的抗幅射，抑制癌細胞，促進新陳代謝和提高免疫功能等多種功效。
胺基酸是構成蛋白質的主要成份，而細胞又由蛋白質等物質組成，所以它對人體生理機能有著極重要的作用不僅是提供營養而且參與細胞內酶的代謝，亦可增加皮膚光澤等作用。
(2)維生素是維持生命的必需物質，人體中如果缺少它們就會出現各種病症，皮膚亦不例外，如「糙皮病」就是因為缺少維生素A所致，β-胡羅卜素為弱鹼性脂溶性化合物，進入人體後能轉化為維生素A；它還是一種良好的抗氧化劑，能通過清除自由基發揮防衰老作用。
(3)α-亞麻酸(又稱維生素F)是人體不能合成而又必需的不飽和脂肪酸，是毛髮和皮膚新陳代謝，防止皮膚老化不可缺少的物質。
(4)維生素E有明顯的抗衰老作用，同時又具有防治白髮的作用(800國際單位/日)。
(5)鋅與人體健康休戚相關，它可調節皮膚、黏膜的知覺，分泌排洩等功能，維護皮膚的韌性和彈性，缺鋅會便體內激素失調，皮脂外溢形成皮疹發生痤瘡。
(6)硒是穀胱甘肽過氧化酶的組成成分，這種酶存在於心、肝、肺、胰臟等重要的臟器中，它可以破壞機體正常代謝過程中形成的有害的過氧化物，保護細胞膜，因而有抗衰老作用。硒還可以某種方式與有毒物質砷、鎘、汞等結合以降低它們的危害，並可抑制苯並芘類、黃麴黴毒素、硝胺等致癌物的誘癌作用。
(7)SOD檢測得知，藻類和北冬蟲夏草內都含有豐富的SOD，其含量分別為1400單位和58單位。我國藥科大學徐敞木教授研究發現「由於自由基(如O2-)的作用，便胞膜不飽和脂肪酸形成過氧化脂肪酸，然後經過氧化物分介成丙二醛和磷脂酚乙醇胺，前者是極活潑的交聯劑，可立即與後者交聯成螢光色素，然後再與蛋白質核酸或脂類結合成難溶性大分子並沉著在細胞內成自發螢光的色素、斑點(即脂褐素，俗稱老年斑)。另外，佔人體總蛋白量30％的膠原蛋白，是構成結締組織基質的成份，由於自由基(O2-)的作用，可使膠原蛋白變性導致結締組織功能退化，使皮膚失去彈性，出現皺紋。人體在其新陳代謝過程中不斷產生(O2-)，尤其是在疾病狀態和進入中老年期，其體內SOD水平不斷減少，消除(O2-)能力不斷下降，因此漸進性的產生上述生理性變化。
美國，巴爾的摩老人研究中心，研究發現，人體衰老現象(含皮膚老化)與機體本身自由基產生的濃度及人體自身清除這些自由基的能力(抗氧化能力)密切相關。德、西班牙等國研究發現，在炎症情況下，由於吞噬細胞對外來異物的吞噬而必然產生大量(O2-)，當(O2-)水平超過細胞內部SOD含量，則(O2-)將導致炎症進一步發展。Bcrcl(Arch·Biochcm·Biophtys，179；8，1977)，描述了吞噬細胞產生(O2-)的過程，也即在吞噬對外來異物吞噬後形成吞噬泡，在吞噬泡中產生大量有毒的(O2-)。日本廣島大學研究發現(O2-)在炎症的發生發展中起著重要作用。因此使用外源性SOD(在皮膚上常抹)既可以增進皮膚抗氧化能力，使皮膚變得光澤有彈性，消除細皺紋，延緩皮膚老化，又可切斷皮膚炎症發展中的中間環節，使炎症自然消退。
(8)蛹蟲草內含草素，經鑑定是3-脫氧腺嘌呤核苷，(3-dexoxyadenosine)，這種活性物質，分子式為C10H13N5O3，它有抑制病毒和細菌及抗輻射的作用。所含多糖(CS-I)對小鼠艾氏腹水癌，有抑制作用，對鱗狀上皮增生有抑制其癌變的作用。尚含有環狀肽類和SOD(超氧化歧化酶)這些物質，被用於治療風溼性關節炎、紅斑狼瘡、活動性肝炎等自身免疫性疾病。中醫用它治療「遺精」、「陽痿」等症。
(9)枸杞內含維生素A、B1、B2、C、β-胡羅卜素、蛋白質、脂肪、碳水化合物，礦物質、鈣、磷、鐵、鉀等和微量元素，鋰、鍺等，尚含甜菜鹼和β-谷甾醇等物質。
《本草綱目》載，枸杞主治五內邪氣，熱中消渴，周痺風溼，久服堅筋骨，輕身不老，耐寒暑。下胸氣，客熱頭痛補內傷，大勞虛吸，強陰，利大小腸，補精氣諸不足，易顏色變白，明目定神，令人長壽。現代醫學研究發現，枸杞能增強機體免疫功能，提高人體抗病能力，促進造血功能，使白細胞增多，保肝降血糖，降血壓，滋陰壯陰，刺激生長的作用。由於所含的甜菜鹼等。
(10)川芎對中樞神經系統有鎮靜作用，對周圍血管有直接擴張作用，有某些抗維生素E缺乏症和抑制大腸、痢疾、傷寒、霍亂菌等皮膚真菌的作用。
本發明優選的實施方案(一)本發明產品的粗提液的製備本發明節旋藻、蛹蟲草、川芎和枸杞各原料藥物的總重量比例為1-4∶1-5∶1-3∶1-2。
(1)節旋藻與蛹蟲草(1-2∶1-12)磨細成(80-100目)粉，加10倍量去離子水浸泡24小後煮沸45分鐘，過濾。濾渣再加8倍量的去離子水煮沸，過濾，合併2次濾液，加等量酒精，加熱至40℃半小時，靜置過夜，過濾，沉澱物加5倍量水與等量酒精，過濾。合併2次濾液，為提取液(a)。
(2)節旋藻、川芎、枸杞(1-4∶1-3∶1-2)加2倍量的磷酸緩衝液(PH7.3)加入中性蛋白酶1.5(3000單位/g)置35℃水浴中30分鐘後，磁力攪拌30分鐘後，置-20℃速凍，待結成冰塊後，取出置35℃水浴解凍，再磁力攪拌30分鐘，再速凍，解凍，如此循環三次，解凍液置4℃，5000r/15分鐘離心，收集上清液，得到提取液(b)。
將提取液(a)與提取液(b)混合攪拌勻，即為本發明產品的粗提液。
(二)本發明粗提液的分離純化纖維素層析純化粗提液用蒸餾水稀釋一倍，上DEAE52纖維素柱(3×18cm)，該柱頂預先已用10MM，PH7.3磷酸緩衝液平衡280mm檢測，待抽提液全部進入纖維素柱後用同一個緩衝液洗柱至基線，再改用10MM，PH8.0的磷酸液緩衝並加0.3N，和0.6N的Nacl部分洗脫和收集。取0.3N Nacl的洗脫峰，加固體硫酸銨至80％飽和度，4℃靜置4小時後，2500r/15分鐘離心，收集沉澱加水10ml溶介，並對水透析，更換透析液二次，最後置500ml，10mm，PH7.3的磷酸緩衝液中透析平衡過液。透析後的樣品液，250Or/15分鐘離心去沉澱，上清液以Seohade XG75凝膠柱過濾(15×85cm)凝膠柱預先用10mm，PH7.3的磷酸液緩衝平衡，一次上樣，以同一緩衝洗脫，分部收集，冷凍乾燥得成品。
(二)SOD提取節旋藻液和蛹蟲草液加中性蛋白酶，反覆凍溶三次後，溶液(藍色具螢光)，劇烈攪拌30分鐘後，0-4℃靜置過液，緩緩加入0.25倍體積預冷(-15℃)95％乙醇後，攪拌5-10分鐘，再加入0.15倍體積的預冷氯仿，攪拌15分鐘靜置之20分鐘，抽濾去掉沉澱，得藍色清徹透明，粗酶液。加入預冷(-15℃)丙酮，生成大量白色沉澱。3000r/15分鐘離心，收集沉澱。用約為沉澱量50倍體積的磷酸鉀緩衝液稀釋水各加熱至65℃，15分鐘內迅速冷卻至室溫，離心得上清液，加入預冷丙酮，生成沉澱，沉澱經丙酮脫水，溶於去離子水，得20％溶液真空乾燥即成品(淡藍色凍幹品)。
本發明藥物組合物的抗衰老實驗1、材料a、本實驗所用昆明種小鼠(體重25-30g)老年小鼠(20-21同齡)均由蘇州醫學院動物中心提供。
b、粗提液由本發明人製造。
c、烴脯氨酸標準品，BDH公司產品。
d、硫代巴比妥酸(TBA)，四乙氧基丙烷(TEP)均為AR級，購自上海化學試劑商店。721分光光度計，上海第三分析儀器廠。
2、方法取老年小鼠30隻，隨機分成3組，每組10隻，分別灌服粗提液60ml/kg，30ml/kg，生理鹽水0.5ml/只，同等條件下，餵養連續30天，給予本發明的藥物組合物後2小時眼眶採血，用於測定SOD和LPO，處死小鼠後取尾睫測定羥脯酸含量，並分別進行耐力測定。(依小鼠體重的15％負重，於水深6Ocm，水溫22℃的水中遊泳，以小鼠沉入水底不再上浮為指標，測定它們的遊泳時間。)粗提液能提高老年小鼠紅細胞內SOD活力，同時降低血清中LPO含量，大(60ml)、小(30ml)劑量組與生理鹽水組相比較，都有明顯的差異結果如下表1表1本發明的藥物組合物對老年小鼠SOD、LPO、HO-PRO的影響(X±30)
注與生理鹽水組比，**P＜0.001*P＜0.05灌服本發明的藥物組合物小鼠的遊泳時間比較，如表2粗提液對小鼠遊泳時間的影響
注與生理鹽水組比，P＜0.05。
SOD是體內重要的抗氧化酶，可以清除自由基對機體的毒害作用。粗提液可明顯的減少老年小鼠血清中LPO水平，提高老年小鼠紅細胞內SOD活性，因此，提高粗提液可能通過增強SOD活性來減少體內LPO的生成，清除體內自由基所造成的損害，從而減少疾病的發生和延緩衰老。
膠原蛋白是構成結締組織細胞間質膠原纖維的主要成分，老年人和老年動物膠原蛋白溶解度隨年齡增長而逐漸降低，膠原蛋白申游離肽或結合肽的HO-PRO含量降低。HO-PRO和動物衰老存在著相關性，通過測定HO-PRO可以檢測動物的衰老狀況(田清淶等1991.11)實驗表明本發明的藥物粗提液(60ml/kg)可以增加小鼠尾睫HO-PRO含量。
試驗再次表明，粗提液有明顯的抑制丙二醛的生成作用，可降低小鼠心肌脂褐素的形成；有抑制單胺氧化酶A的作用。
在動物試驗取得明顯效果的前題下，經76位自願受試者(年齡在55-74歲之間)，其中以60-70歲居多，佔全部受試者58％，以隨機法將他們分為試驗組和對照組。每組38名。試驗組，每人每次口服20ml粗提液，每天早晚各一次；對照組每人每次口服黃芪液20ml(江蘇揚子江藥業集團公司)，每組均口服90天。
臨床觀察項目本發明人認為氣虛血瘀是衰老的病理原因之一，氣虛時機體抗病能力，免疫功能均低，尤其是細胞免疫功能的變化是重要指標；同時觀察血瘀機制的客觀反映，以血小板聚集與血管壁舒縮變化的情況為依據，再將一些衰老的體(症)狀面部皺紋，皮膚鬆弛，老年斑，記憶力，觸痛，溫感反應以及舌苔，舌質，脈象等綜合起來，以累積記分法，觀察二組服液前後的積分值的變化，(積分標準明顯4分，不明顯1分，輕度2分，中度3分)，相互參考、印證。
通過臨床症狀累記積分法比較兩組的情況
NK細胞活性的變化服用粗提液後，NK細胞活性明顯提高(P＜0.05)而對照組服用黃芪液後的NK細胞活性無顯著差異(P＞0.05)結果如表3表3服用粗提液後外周血NK細胞活性的變化
T淋巴細胞亞群百分比的變化服粗提液後，T淋巴細胞亞群OKT3、OKT4細胞的百分比都有明顯增高(P＜0.001＝，OKT4/OKT8比值，雖有所提高，但無統計學意義，而服黃芪液前後的OKT3，細胞百分比無顯著提高(P＞0.05)，結果如下表4表4試驗後T細胞亞群的變化(X±SE)
血漿PGE2、TXB2、TXB2/PGE的變化服用粗提液後，PGE2顯著增高(P＜0.01，TXB2則顯著下降，(P＜0.01，而服黃芪液的對照組服用前後的PGE2、TXB2都無顯著差異(P＞0.05)，結果如表5表5試驗後外周血PGE2、TXB2、TXB2/PGE2的變化(X±SE)
由於老年人的衰老可以從多種途徑來檢測，目前一般認為TXB、PGE的平衡變化能比較客觀的反映出血小板的聚集情況與血管的舒縮功能，本研究結果再次表明，粗提液能顯著提高PGE2的含量，使TXB2下降，且TXB2/PGE2的變化有顯著意義。
典型病例1吳××，男，55歲，高血脂症20年，曾服月見草，多烯康，脂必妥等。服粗提液前檢查血脂水平，TC286mg/dl，S-TG116.4mg/dl，HDL-C49.7mg/dl。服用粗提液60天後，血脂水平TC240mg/dl，S-TG90.8mg/dl，HDL-C46.6mg/dl。
病例2黃XX，女，63歲，勞累性心膠痛，每逢勞累時，即發作2～3次，心電圖示III、aVFS-T段壓低0.5mmT波倒置，Tv4-6曳倒，服用粗提液60天後，心電圖S-T段上升至等電位線，TIII、aVF、V4-6波直立，心電圖恢復正常。
病例3張××，女69歲，TCD提示「腦動脈硬化」，血流不對稱，服粗提液90天後，自覺症狀頭暈、頭痛等消失或緩解。TCD示血流對稱，腦動脈硬化症狀減輕。
病例4沈××，男，70歲，末服粗提液時，血液中含SOD26.4單位/ml，服粗提液90天，血液中SOD上升至38.5單位。
粗提液的外搽——防皺試驗1989年初，對螺旋藻化妝品的劑型膏、霜或乳劑的配比和其最佳用量，形成條件進行了反覆的研究，成功製成各種劑型的樣品。
在動物試驗後證實其無毒無害，無任何刺激，對皮膚具有優良的護膚、美膚作用的基礎上，開始在人體上進行塗抹試驗。方法是受試者每天搽用一次，用前冷水或溫水(以冷水為佳)洗淨，然後用消毒棉球將Spirulina霜或乳搽在受試者一隻手背皮膚上，另一隻手背皮膚不搽任何物品及處理。經10天搽抹後，2隻手背皮膚發生明顯不同，搽抹Spirulina的手背皮膚白嫩、細膩、有光澤，在用螺旋藻化妝品初步見成效的基礎上，本發明人改用粗提液搽的方法進一步擴大試驗範圍，先從內部進行試驗，受試人數為230人次，經連續6個月試用，其結果令人滿意後，再擴大到450人次的臨床觀察，通過連續三年的觀察試用，進一步證實粗提液具有較強的滲透作用，可促進皮膚細胞的生長，對皮膚細胞的營養，對延緩皺紋，延緩衰老都有積極的作用。對皮脂溢出座瘡、消退雀斑、色素沉著、黃褐斑，表皮細胞脫落(頭皮屑)，魚鱗癬等都有各種程度的治療效果，其有效率分別在85％～95％之間。
其機理國際衛生組織等都一致公認Vc、VE，B族及微量元素等物質，可將氧化型黑色素轉化為還原型，使多巴醌還原成多巴，抑制黑色素形成。同時，可減弱紫外線對皮膚的損害。黃褐斑，大都由於內分泌障礙引起，色素沉著於皮膚所致。由此表明，粗提液對皮膚的衰老同樣具有抗衰老、延緩作用。
病例1謝××，女，37歲，臉上患有黃褐斑，曾試用多種化妝品，均末有效，甚至有些化妝品引起皮膚灼痛或紅斑，使用粗提液90天後，臉部黃褐斑明顯減少。
病例2王××，女，45歲，小學教師，臉部黃褐斑，使用粗提液三個月後，黃褐斑基本消退。
病例3周××，女，48歲，營業員，眼部(魚尾紋)及口角處皺紋明顯，口服，外搽粗提液90天後，眼及口部的皺紋明顯緩減。
病例4陳××，女，30歲，農村婦女，常年手、腳部乾燥開裂，痛疼，影響勞動、行走，外搽粗提液後，2天即不大疼痛，4～5天後裂口即癒合，連續使用30天後，手部的粗糙狀明顯的減輕。
本發明系列化妝品之製作的用料1、口紅、唇膏、防唇裂膏等石臘，蜂臘，凡士林，蓖麻油，藻紅蛋白(SOD)，Ve，香精，粗提液等。
2、胭脂(膏、餅、液)滑石粉，高嶺土，蜂臘，液體石臘，白凡士林，甘油，粘合劑，粗提液，藻紅蛋，SOD，Ve，香精等。
3、眼影膏(液)蜂臘，羊毛脂，滑石粉，粗提液，高嶺土，凡士林；丙二醇，藻藍蛋白，SOD，VE，香精等。
4、指甲油乙酸乙脂，乙酸丁脂，磷酸三甲酚酷，鄰苯二甲酸丁二脂，硝化纖維素，藻紅蛋白，VE，滲透劑等。
5、防曬膏矽酮(D-C-225)營養液，羊毛脂，硬脂酸水核酸二丙二醇脂，對烴基苯甲酸甲脂，甘油，藻藍蛋白和藻紅蛋白，SOD，VE，香精，粗提液等。
6、去(防)皺膏核桃仁，杏仁，甘油，羊毛脂營養液，藻藍藻紅蛋SOD，VE，香精，粗提液等。
7、防皺液絲瓜汁(濾)，乙醇營養液，蜂蜜，藻紅和藻藍蛋白，SOD，VE，香精，粗提液等。
8、除雀斑液黃瓜汁，檸檬汁，乙醇營養液，蜂蜜，藻紅藍蛋，SOD，VE，香精，粗提液等。
9、去斑霜桃花，冬瓜籽，蜂蜜營養液，藻藍蛋白 SOD，VE，香精，粗提液等。
10、洗髮香波AEs、6501、B5-12營養液，珠光劑，雙酯，K12，E.D.T.A，藻藍紅蛋白--SOD，檸檬酸，香精，粗提液等。
人體由於免疫力下降，特別對老年人而論，就更容易受到外界的幹擾，導致全身生理調節能力的失衡，本實驗，應用症狀變化累積記分法，對服用粗提液前後及對照結果予以比較，表明粗提液能夠改善老年人的臨床症狀，對平衡失調有較好的修復效果。同時，通過細胞免疫功能的變化，NK細胞活性變化及T淋巴細胞亞群的百分率變化，均表明了口服粗提液能提高老年人的NK細胞活性及增高OKT3、OKT4細胞的百分率，OKT4/OKT8的比值也有所提高，因此，表明粗提液確實能改善老年人的細胞免疫功能，顯示了提高老年人的抗病能力，即維護機體的防禦系統能力。
十多年的試驗、研究，動物實驗，臨床試用先後都表明粗提液有較明確的抗衰老作用，能改善老年人健康水平，對延緩衰老有一定的效果。
本發明的組合物和使用的方法已經一般地被公開了，並且通過特定的病例參考，病例並非限制本領域普通技術人員發生的無需花費創造性能力和變動，除非指明。
實施例11、製備粗提液菌類北冬蟲夏草(又稱蛹蟲草)3.78 節旋藻0.64。實例北冬蟲夏草(蛹蟲草)37.8g，節旋藻6.4g混合後磨細，加2倍量磷酸緩衝液(PH7.3)加中性蛋白酶(3000單位/克)1.5％，置35℃水浴中30分鐘後，磁力攪拌30分鐘，置-20℃速凍，待結成冰塊後，取出置35℃水浴解凍，再磁力攪拌30分鐘，再速凍，如此循環三次後，解凍液置40℃，5000r/分鐘離心，收集上清液，即成「b」液。
藻類與中草藥混合物，其比例為節旋藻2.46 川芎1.84 枸杞1.28實例節旋藻24.6g，川芎18.4g，枸杞12.89g，共55.89g。磨細(過80目篩後)加560ml去離子水，浸泡24小時後煮沸45分鐘，過濾取上清液。
濾渣加8倍量的去離子水，煮沸，過濾取上清液。
合併2次濾液加等量酒精，加熱至40℃半小時後，靜置過夜，過濾取上清液。
沉澱物加5倍量水和等量的酒精，過濾，合併2次濾液，即成「粗提液」a。
將粗提液「a」和「b」液混合拌勻，即成粗提液。該粗提液以藥學上常規的製藥技術，加入各種藥學上可接受的常規助劑即可製備成口服液、顆粒劑、膠囊劑、片劑等各種劑型。
實施例2本發明粗提液的分離純化纖維素層析純化粗提液用蒸餾水稀釋一倍，上DEAE52纖維素柱(3×18cm)，該柱頂預先已用10MM，PH7.3磷酸緩衝液平衡280mm檢測，待抽提液全部進入纖維素柱後用同一個緩衝液洗柱至基線，再改用10MM，PH8.0的磷酸液緩衝並加0.3N，和0.6N的Nacl部分洗脫和收集。取0.3N Nacl的洗脫峰，加固體硫酸銨至80％飽和度，4℃靜置4小時後，2500r/15分鐘離心，收集沉澱加水10ml溶介，並對水透析，更換透析液二次，最後置500ml，10mm，PH7.3的磷酸緩衝液中透析平衡過液。透析後的樣品液，250Or/15分鐘離心去沉澱，上清液以Seohade XG75凝膠柱過濾(15×85cm)凝膠柱預先用10mm，PH7.3的磷酸液緩衝平衡，一次上樣，以同一緩衝洗脫，分部收集，冷凍乾燥得成品。
本發明的藥物組合物，其中的節旋藻、蛹蟲草、川芎和枸杞的重量比例為31∶37.8∶18.4∶12.89。本發明的藥物組合物，其特徵在於它可以採用藥學上常規的技術和可接受的助劑製備成任一臨床上可接受的劑型。
實施例3SOD提取提取液a加中性蛋白酶，反覆凍溶三次後，藻液(藍色具螢光)，劇烈攪拌30分鐘後，0-4℃靜置過液，緩緩加入0.25倍體積預冷(-15℃)95％乙醇後，攪拌5-10分鐘，再加入0.15倍體積的預冷氯仿，攪拌15分鐘靜置之20分鐘，抽濾去掉沉澱，得藍色清徹透明，粗酶液。加入預冷(-15℃)丙酮，生成大量白色沉澱。3000r/15分鐘離心，收集沉澱。用約為沉澱量50倍體積的磷酸鉀緩衝液稀釋水各加熱至65℃，15分鐘內迅速冷卻至室溫，離心得上清液，加入預冷丙酮，生成沉澱，沉澱經丙酮脫水，溶於去離子水，得20％溶液真空乾燥即成品(淡藍色凍幹品)。
權利要求
1.一種SOD的提取方法，其特徵在於它將按照節旋藻和蛹蟲草溶液加中性蛋白酶，反覆凍溶三次後，溶液(藍色具螢光)，劇烈攪拌30分鐘後，0-4℃靜置過液，緩緩加入0.25倍體積預冷(-15℃)95％乙醇後，攪拌5-10分鐘，再加入0.15倍體積的預冷氯仿，攪拌15分鐘靜置之20分鐘，抽濾去掉沉澱，得藍色清徹透明，粗酶液。加入預冷(-15℃)丙酮，生成大量白色沉澱。3000r/15分鐘離心，收集沉澱。用約為沉澱量50倍體積的磷酸鉀緩衝液稀釋水各加熱至65℃，15分鐘內迅速冷卻至室溫，離心得上清液，加入預冷丙酮，生成沉澱，沉澱經丙酮脫水，溶於去離子水，得20％溶液真空乾燥即成品(淡藍色凍幹品)。
2.權利要求1的SOD在化妝品中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種抗衰老的藥物組合物及其製備方法，含節(螺)旋藻、蛹蟲草等原料藥物，本發明又公開了這種藥物組合物還可用於化妝品領域，本發明還公開了一種SOD的提取方法。
文檔編號C12N9/02GK1524953SQ20041000654
公開日2004年9月1日 申請日期2002年6月19日 優先權日2002年6月19日
發明者李祥麟, 黃檀溪 申請人:李祥麟