褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法

2023-11-01 23:50:02

專利名稱：褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法
技術領域：
本發明屬於食用真菌的栽培技術領域，尤其涉及褐環粘蓋牛肝菌圃地的人 工栽培方法。
背景技術：
褐環粘蓋牛肝菌[Suillus luteus (L. :Fr) Gray]是一種優良的菌根食用 菌，在國內廣泛分布，是一種重要的野生商品蘑菇，也是出口的野生牛肝菌之 一，目前褐環粘蓋牛肝菌的商品全部靠野生採集，尚無成功的人工栽培方法。
所見報導有陳連慶、裴致達對褐環粘蓋牛肝菌的生物學特性和液體培養條 件進行了研究，證明它是我國亞熱帶地區特有樹種馬尾松共生的優良菌根真菌 (《林業科學研究》1998， 11 (4): 443—446)。目前人們沒有找到一種適合的 褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，因此也無法實現產業化生產褐環粘蓋牛肝菌。

發明內容
為了實現褐環粘蓋牛肝菌人工栽培，本發明的目的是提供一種褐環粘蓋牛 肝菌人工栽培方法，實現了褐環粘蓋牛肝菌產業化的人工栽培方法。
為了實現上述的目的，本發明採用了以下的技術方案 褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，包括以下的步驟
A、 菌種分離培養採集的新鮮子實體，切取菌肉帶部分菌管組織塊，接入 母種培養基內，進行培養；
B、 菌種擴繁將上述的培養的母種，接入置有擴繁培養基的容器內培養， 先靜止培養，待接入的母種塊萌發後，開始震蕩培養至容器內有大量棕褐色菌 球；
C、 無菌苗培育選新鮮溼地松飽滿種子在水中浸泡，瀝乾後經消毒處理， 然後將種子催芽，待露白後，播入經滅菌的無菌苗培養基質，培養得到無菌苗;
D、 菌根苗培育以及栽培出菇將擴繁獲得的菌球打碎成菌漿，將培育的無 菌苗進行蘸菌漿後重新栽培，培育成菌根苗，然後將菌根苗密植在經消毒的苗 圃地，培養出菇；或者將蘸菌漿後的無菌苗直接密植在經消毒的苗圃地，培養 出燕。
作為優選，上述的步驟A中母種培養的溫度為20 28°C ，時間為25 30天。 作為再優選，上述的母種培養基每1000毫升水中包括以下重量份數的成份: 馬鈴薯 80 150g 葡萄糖 10 20g
磷酸二氫銨0. 5 2g 磷酸二氫鉀0. 5 1. 5g
硫酸鎂 0.5 lg 松根150 300g煮後的過濾液
瓊脂 10 30g 。
作為最優選，上述的母種培養基每1000毫升水中包括以下重量份數的成份 馬鈴薯 100g 葡萄糖 10g
磷酸二氫銨lg 磷酸二氫鉀0. 5 1. 5g
硫酸鎂 0.5 lg 松根200g煮後的過濾液 瓊脂 20g。
作為優選，上述的步驟B中容器採用三角燒瓶，用化纖棉塞封口，外加牛 皮紙，置常規滅菌，冷卻後接入母種，培養溫度為20 22°C，靜止培養2 4天， 震蕩培養，轉速為100 140轉/分，培養20 30天。
作為再優選，上述的步驟B中擴繁培養基每1000毫升水中包括以下重量份 數的成份
磷酸二氫鉀0.5 2g 硫酸鎂0. 1 lg
磷酸二氫銨0.5 2g 葡萄糖5 30g
澱粉 2 20 g。
作為最優選，上述的步驟B中擴繁培養基每1000毫升水中包括以下重量份 數的成份
磷酸二氫鉀lg 硫酸鎂0.5g
磷酸二氫銨 lg 葡萄糖10g
澱粉 5g。
作為優選，上述的步驟C中新鮮溼地松飽滿種子浸泡溫度為20 25°C，浸 泡時間12 15小時，無菌苗的培養時間為1 1. 5個月。
作為再優選，上述的無菌苗基質配方包括蛭石、泥炭、沙，配比為1: 0.5
1.5: 0. 1 0.3。作為最優選，上述的蛭石、泥炭、沙的配比為l: 1: 0.2。
本發明提供得褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法菌種分離培養——菌種擴繁
—無菌苗培育——菌根苗培育密植——栽培出菇。與現有其他燕類人工栽培 技術路線相比完全不同，本發明採用合成的褐環粘蓋牛肝菌溼地松菌根苗採用
10_50釐米間距密植於經過消毒的圃地，實現人工栽培，達到褐環粘蓋牛肝菌
產業化生產的目的，生產得到的褐環粘蓋牛肝菌與天然褐環粘蓋牛肝菌的形態 特徵一致。


圖1為本發明的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法順序簡圖。
具體實施例方式
下面結合附圖1按時間順序對本發明的具體實施方式
做一個詳細的說明。
2001年12月21日，採集到褐環粘蓋牛肝菌子實體，經消毒，採用組織分 離方法獲得，取菌蓋與菌肉帶部分菌管組織，置入母種培養基試管中，於25。C
溫度下培養25 30天獲得。母種培養基採用每1000毫升水中包括以下重量份 數的成份馬鈴薯100g、葡萄糖10g、磷酸二氫銨lg、磷酸二氫鉀0.5 1.5g、 硫酸鎂0.5 lg、松根200g煮後的過濾液、瓊脂20g。
2005年3月18日，採用磷酸二氫鉀lg，硫酸鎂0. 5 g，磷酸二氫銨lg， 葡萄糖10 g，澱粉5 g，水1000毫升。配方，配製後用1000毫升三角燒瓶裝 培養基800毫升，用化纖棉塞封口，外加牛皮紙，置高壓鍋內常規滅菌，冷卻 後接入母種，置迴旋式震蕩培養機培養。培養溫度為20 22°C，先靜止培養3 天，待接入的母種塊萌發後，開始震蕩培養，轉速為120轉/分。培養30天， 瓶內有大量棕褐色菌球，培養液顏色為橙黃色，透明，拔開棉塞有牛肝菌特有 的菇香味。每瓶過濾後得菌球約100毫升。
2005年3月18日，配無菌苗培育基質，蛭石、泥炭、沙配比為1: 1: 0.2， 調水滅菌後倒入泡沫箱。2005年3月21日，取溼地松種子個1000克用0. 1%升 汞水浸泡2分鐘，然後用無菌水浸洗5次，混於溼沙中保溼保溫催芽，3月24 日播於基質中，培養得到無菌苗。
2005年4月26日用過濾後得菌球打碎成菌漿，將培育的無菌苗進行蘸菌漿 接種後重新栽培原位進行管理，管理方法同一般溼地松苗。
栽培方法一2005年12月31日將培育的無菌苗經檢査有白色菌根菌絲的 菌根苗按IOXIO和10X50釐米間距移栽於經消毒的苗圃地。
栽培方法二 2005年5月10日將蘸褐環粘蓋牛肝菌菌漿後的無菌苗10X 10釐米和10X50釐米直接移植經消毒的苗圃地。
2006年12月21日發現栽培方法一和方法二均有褐環粘蓋牛肝菌子實體從 松苗叢中長出。12月25日有較多量的褐環粘蓋牛肝菌子實體發生，到2007年 2月27日出數量相當多的第二批，4月份仍有少量的子實體發生，子實體鮮重
100_280g/m2。所得褐環粘蓋牛肝菌子實體形態特徵菌蓋扁半球形至近扁平， 直徑3 12 cm,溼時粘滑，淡黃色或黃褐色，幹後有光澤。菌肉淡黃色，受傷 後不變色。菌管鮮黃色，管口三角形，直生或延生，不易分離。菌柄近柱形， 淡黃褐色，長1.5 7 cm，全柄略等粗或下部稍粗，直徑0.9 2.4 cm，實心， 菌柄上部常具小腺點。菌環在菌柄上部，易脫落，孢子印淡黃褐色至黃褐色， 圓形至橢圓形8 10X3.5 5。上述形態特徵與野生褐環粘蓋牛肝菌一致。子實 體根部菌絲與樹根聯結緊密，說明培養成功。
權利要求
1.褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於包括以下的步驟A、菌種分離培養採集的新鮮子實體，切取菌肉帶部分菌管組織塊，接入母種培養基內，進行培養；B、菌種擴繁將上述的培養的母種，接入置有擴繁培養基的容器內培養，先靜止培養，待接入的母種塊萌發後，開始震蕩培養至容器內有大量棕褐色菌球；C、無菌苗培育選新鮮溼地松飽滿種子在水中浸泡，瀝乾後經消毒處理，然後將種子催芽，待露白後，播入經滅菌的無菌苗培養基質，培養得到無菌苗；D、菌根苗培育以及栽培出菇將擴繁獲得的菌球打碎成菌漿，將培育的無菌苗進行蘸菌漿後重新栽培，培育成菌根苗，然後將菌根苗密植在經消毒處理的苗圃地，培養出菇；或者將蘸菌漿後的無菌苗直接密植在經消毒的苗圃地，培養出菇。
2. 根據權利要求1所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於步驟A中 母種培養的溫度為20 28°C，時間為25 30天。
3. 根據權利要求1或2所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於母種 培養基每1000毫升水中包括以下重量份數的成份馬鈴薯 80 150g 葡萄糖 10 20g磷酸二氫銨0. 5 2g磷酸二氫鉀0. 5 1. 5g硫酸鎂 0.5 lg 松根150 300g煮後的過濾液瓊脂 10 30g 。
4. 根據權利要求3所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於母種培養基每1000毫升水中包括以下重量份數的成份馬鈴薯 100g 葡萄糖 10g磷酸二氫銨lg 磷酸二氫鉀0.5 1.5g 硫酸鎂 0.5 lg 松根200g煮後的過濾液 瓊脂 20g。
5. 根據權利要求1所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於步驟B中 容器採用三角燒瓶，用化纖棉塞封口，外加牛皮紙，置常規滅菌，冷卻後接 入母種，培養溫度為20 22。C，靜止培養2 4天，震蕩培養，轉速為100 140轉/分，培養20 30天。
6. 根據權利要求1或5所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於步驟 B中擴繁培養基每1000毫升水中包括以下重量份數的成份磷酸二氫鉀0.5 2g 硫酸鎂0. l lg磷酸二氫銨0.5 2g 葡萄糖 5 30g澱粉 2 20 g。
7. 根據權利要求6所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於步驟B中 擴繁培養基每1000毫升水中包括以下重量份數的成份磷酸二氫鉀 lg 硫酸鎂0.5g磷酸二氫銨 lg 葡萄糖10g澱粉 5g。
8. 根據權利要求1所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於步驟C中 新鮮溼地松飽滿種子浸泡溫度為20 25°C，浸泡時間12 15小時，無菌苗 的培養時間為1 1.5個月。
9. 根據權利要求1或7所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於無菌 苗基質配方包括蛭石、泥炭、沙，配比為l: 0.5 1.5: 0. 1 0.3。
10. 根據權利要求9所述的褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，其特徵在於蛭石、泥炭、沙的配比為1: 1: 0.2。
全文摘要
本發明屬於食用真菌的栽培技術領域，尤其涉及褐環粘蓋牛肝菌圃地的人工栽培方法。褐環粘蓋牛肝菌人工栽培方法，包括以下的步驟菌種分離培養；菌種擴繁；無菌苗培育；菌根苗培育以及栽培出菇。本發明採用合成的褐環粘蓋牛肝菌溼地松菌根苗採用10-50釐米間距密植於經過消毒的圃地，實現人工栽培，達到褐環粘蓋牛肝菌產業化生產的目的，生產得到的褐環粘蓋牛肝菌與天然褐環粘蓋牛肝菌的形態特徵一致。
文檔編號A01G1/04GK101204131SQ20071016473
公開日2008年6月25日 申請日期2007年12月10日 優先權日2007年12月10日
發明者呂明亮, 應國華, 李伶俐 申請人:麗水市林業科學研究所;麗水市大山菇業研究開發有限公司