一種新型滴眼液對治療乾眼的用途
2024-01-26 11:13:15 1
一種新型滴眼液對治療乾眼的用途
【專利摘要】本發明公開了一種新型滴眼液對治療乾眼的用途，所述新型滴眼液是含有α-MSH的滴眼液，α-MSH的質量濃度為10-4-10-3mg/ml，用於治療乾眼。α-MSH的優選質量濃度為10-4mg/ml。本發明通過對大鼠進行淚膜破裂時間BUT、淚液分泌（SchirmerItest）測量、角膜上皮螢光素鈉染色（fluoresceinstaining）及評分和淚液蕨類實驗分析。然後取大鼠整個眼球，行HE及過碘酸-雪夫PAS染色，並取大鼠新鮮角膜行實時定量PCR檢測角膜組織中白細胞介素-1β和腫瘤壞死因子-αmRNA的表達水平。發現含α-MSH的滴眼液能夠促進大鼠淚液分泌，延長淚膜破裂時間，穩定淚膜，促進角膜上皮損傷修復及杯狀細胞數量恢復，並減輕眼表炎症反應。含α-MSH的滴眼液有利於緩解乾眼病變。
【專利說明】
一種新型滴眼液對治療乾眼的用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種藥物的應用，具體是一種新型滴眼液對治療乾眼的用途。
【背景技術】
[0002]乾眼是由各種原因引起的一種常見眼表疾病，發病率日趨增高，嚴重影響了人們的視覺和生活質量。而目前我國對於乾眼的研究仍處於起步階段，國際上也缺乏治療乾眼的有效方法。這就迫切需要加強對乾眼的研究，針對其發病機制研製乾眼的治療方案，為乾眼患者解除痛苦。
[0003]全球15?35%的人群伴有乾眼相關的症狀或體徵。2007年國際乾眼工作小組將乾眼新定義為:一種能引起患眼不適、視覺障礙和淚膜不穩定，損害淚液和眼表組織並伴有淚液滲透壓增高和眼表炎症的多因素疾病。近年來的研究也指向乾眼的發病與炎症、免疫、細胞凋亡及性激素水平等有關。目前，臨床上常用人工淚液替代物緩解症狀，但對中、重度乾眼病不適用；自體血清適用於中、重度乾眼病，但因其保存受限而無法廣泛應用於臨床；其它如糖皮質激素長期應用全身副作用大等。因此，從乾眼的發病機制出發，研發一種新型的能有效治療乾眼的藥物並應用於臨床是亟待解決的關鍵問題。
α -黑素細胞刺激素(a -melanocyte stimulating hormone, a -MSH)是阿片-促黑素細胞皮質素原在前體激素轉換酶作用下釋放出的13個胺基酸殘基，經末端化學修飾後具有生物學活性。
[0004]既往研究表明，a -MSH具有強有力的抗炎作用，並可促進角膜上皮細胞的損傷修復。本研究擬通過腹部皮下注射氫溴酸東莨菪鹼注射液建立大鼠乾眼模型，探討含a-MSH的滴眼液對大鼠乾眼眼表的保護效果。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在於提供一種新型滴眼液對治療乾眼的用途，且該滴眼液能夠促進淚液分泌，延長淚膜破裂時間，穩定淚膜，促進角膜上皮損傷修復及杯狀細胞數量恢復，並減輕眼表炎症反應，以解決上述【背景技術】中提出的問題。
[0006]為實現上述目的，本發明提供如下技術方案:
一種新型滴眼液對治療乾眼的用途，所述新型滴眼液是含有a-MSH的滴眼液，a-MSH的質量濃度為10_4-10_3mg/ml，用於治療乾眼。
[0007]作為本發明進一步的方案:所述新型滴眼液中a -MSH的質量濃度為10_4mg/ml。
[0008]與現有技術相比，本發明的有益效果是:本發明通過對大鼠進行淚膜破裂時間BUT、淚液分泌(Schirmer I test)測量、角膜上皮突光素鈉染色(fluorescein staining)及評分和淚液蕨類實驗分析。於28天，取大鼠整個眼球，行HE及過碘酸-雪夫PAS染色，並取大鼠新鮮角膜行實時定量PCR檢測角膜組織中白細胞介素-1 β和腫瘤壞死因子-αmRNA的表達水平。發現含a-MSH的滴眼液能夠促進大鼠淚液分泌，延長淚膜破裂時間，穩定淚膜，促進角膜上皮損傷修復及杯狀細胞數量恢復，並減輕眼表炎症反應。含a-MSH的滴眼液有利於緩解乾眼病變。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0009]圖1是各組在第7天、14天、21天、28天的臨床指標。㈧淚液分泌量；⑶淚膜破裂時間；(C)螢光素鈉染色。其中:*P〈0.05，**P〈0.01，***P〈0.001，l(T3mg/ml a -MSH 治療組 versus 0.9% NaCl 溶液治療組；+P<0.05，++Ρ〈0.01，+++Ρ〈0.001，l(T4mg/ml a -MSH 治療組versus 0.9% NaCl 溶液治療組；ΧΡ〈0.05，ΧΧΡ〈0.01，ΧΧΧΡ〈0.001，10_5mg/ml a -MSH治療組versus0.9% NaCl溶液治療組。正常組的淚液分泌量為7.3mm, BUT為10.3s，螢光素鈉染色標記為O。
[0010]圖2是五組大鼠28天時角膜上皮螢光素鈉染色(A - E)和HE染色(F - J, X 200)的代表性圖片。其中(A，F)正常組；(B，G) 0.9%NaCl溶液治療組；(C，H) 10_5 a -MSH治療組；(D, I) 10_4 a -MSH 治療組；(E, J) 10_3 a -MSH 治療組。
[0011]圖3是五組大鼠21天時淚液蕨類結晶圖像的代表性圖片(Χ200)。
[0012]圖4是各組大鼠28天時結膜PAS染色的代表性圖片(Χ200)。
[0013]圖5是各組大鼠28天時杯狀細胞計數，其中*Ρ〈0.05，#Ρ〈0.01，*#P〈0.0Ol。
[0014]圖6是實時定量PCR檢測角膜組織中IL-1 β和TNF-a mRNA的表達水平變化(*p〈0.05, **p〈0.01)。
【具體實施方式】
[0015]下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本發明保護的範圍。
[0016]本發明實施例中，通過皮下注射氫溴酸東莨菪鹼建立大鼠乾眼模型，探討一種新型滴眼液對乾眼的治療效果。具體實驗過程如下所述。
[0017]1.1實驗動物
6周齡Wistar健康雌性大鼠36隻，72眼，體重為160?180g。
[0018]1.2試劑與儀器
東莨菪鹼氫溴酸鹽，a -MSH,淚液分泌酚紅棉線，螢光素鈉注射液，PAS染色試劑盒，Fast SYBR?Green Master Mix, Trizol 試劑盒和逆轉錄試劑盒，7900HT Fast Real-timePCR儀，點樣毛細玻璃管，光學顯微鏡，裂隙燈顯微鏡。
[0019]1.3實驗方法
1.3.1乾眼模型的製備及治療
將30隻大鼠編號，採用隨機數字表法將其隨機分為10_5mg/ml a -MSH組:η=10 ;l(T4mg/ml α -MSH 組:η=10 ；10_3mg/ml α -MSH 組:η=10。使用濃度為 3mg/ml 的氫溴酸東莨菪鹼注射液腹部兩側交替進行皮下注射製作大鼠乾眼模型，0.5ml/次，4次/日。同時，每隻大鼠右眼給予相應濃度的a-MSH滴眼液點眼治療，50 μ L/次，2次/日，其中a-MSH滴眼液是a -MSH溶於無菌的0.9%NaCl溶液，左眼以同樣方法給予0.9%NaCl溶液點眼，持續28天。另選6隻作為正常對照組，飼養於相同的環境中，不予任何處理。用藥後O天、7天、14天、21天、28天對各組大鼠行淚液分泌試驗、淚膜破裂時間BUT、角膜上皮螢光素鈉染色及淚液蕨類試驗分析。用藥後28天，頸椎脫白法處死大鼠，取整個眼球，石蠟切片，行HE及PAS染色，光鏡下觀察。並取大鼠新鮮角膜行RT-PCR，檢測角膜組織中促炎因子白細胞介素I β (IL-1 β )和腫瘤壞死因子a (TNF- α )的mRNA表達水平。
[0020]1.3.2淚液分泌實驗
大鼠眼表不使用麻醉藥物，用鑷子夾持酚紅棉線，將其置於大鼠下瞼結膜囊中外三分之一交界處，停留30s後取出。測量酚紅棉線溼潤的長度並記錄，讀數精確到0.5_，實驗中應避免接觸或劃傷大鼠角膜上皮。
[0021]1.3.3淚膜破裂時間BUT測定
將1μ I液態螢光素鈉(10mg/ml)滴至結膜囊並閉合眼瞼，裂隙燈顯微鏡鈷藍光下觀察。協助大鼠瞬目三次，從最後一次瞬目開始計時，至角膜出現第一個黑斑的時間即為BUT。重複三次，取平均值。
[0022]L 3.4角膜上皮突光素鈉染色(fluorescein staining)及評分
大鼠結膜囊內滴入I μ I液態螢光素鈉(10mg/ml) 90s後，在裂隙燈顯微鏡鈷藍光下觀察角膜上皮螢光素鈉著色情況並評分。將角膜平均分為4個象限並分別評分，將所有分值相加即得最後分值。評分標準:無著色:0分；點狀著色少於30個:1分；點狀著色多於30個但不彌散:2分；嚴重的彌散性著色但尚未形成斑塊狀:3分；有斑塊狀著色:4分。
[0023]1.3.5淚液蕨類試驗
大鼠眼部未使用表面麻醉藥物，自製點樣毛細玻璃管在下瞼結膜囊淚阜處吸取淚液標本，儘量不接觸眼表。將淚液標本塗至潔淨載玻片上，25°C室溫乾燥10?20min後，置於光學顯微鏡下觀察淚液蕨類圖像的形態並拍照。
[0024]1.3.6眼球石蠟切片HE及PAS染色
頸椎脫臼法處死大鼠，迅速取下包括上下眼瞼在內的整個眼球。4%多聚甲醛固定，常溫下由低濃度至高濃度梯度酒精脫水，二甲苯透明後浸蠟、包埋，平行於眼軸方向切片，厚度為3 μ m。石蠟切片後參照試劑操作說明分別進行HE及PAS染色。HE染色後光學顯微鏡下觀察角膜組織病理學改變。每眼取6張不同等分位置的代表性切片進行PAS染色，以胞質染色深紅者為結膜杯狀細胞，分別計數並取其平均值作為該眼結膜杯狀細胞數量的代表值。
[0025]1.3.7 RNA 提取和 RT-PCR 檢測
收集角膜組織，液氮中低溫研磨，按照Trizol試劑盒說明書提取總RNA。繼而取250ng總RNA，DNase I處理後，以Oligo dT為引物，按試劑盒說明書行逆轉錄反應，製備cDNA。然後用CYBER Green real-time PCR的方法檢測IL-1 β和TNF-a mRNA的表達，以GAPDH為內參照。IL-1 β 上遊引物:AGGCTTCGAGATGAACAACAAAA ;下遊引物:TCCATTGAGGTGGAGAGCTTTC。TNF-α 上遊引物:ACAAGGCTGCCCCGACTAC ;下遊引物:CTCCTGGTATGAAATGGCAAATC，如序列表中序列表I所示。RT-PCR擴增參數為:50°C孵育2min，95°C變性lOmin，然後進行40次循環:95°C變性15s，60°C退火/延伸Imin ;加入解離階段:95°C變性15s，60°C退火15s，然後95°C反應15s，以判定擴增產物的特異性。擴增後，以2_「et法分析所得數據。即ACt=目的基因Ct—內參照Ct，Λ ACt=目的基因ACt—參照因子ACt。
[0026]1.4統計學處理採用3?3313.0統計學軟體進行數據統計分析，計量資料經31^?化0-1111^檢驗呈正態分布，以均數土標準差表示；然後經Levene檢驗檢查方差齊性。對乾眼臨床指標SchirmerI值、淚膜破裂時間、角膜螢光素鈉染色評分、杯狀細胞計數等的相關結果，滿足方差齊性時，採用單因素方差分析比較各組整體差異，繼而用/^^ post Am進行組間兩兩比較；方差不齊時，採用ifc/wei ?檢驗。Ρ〈0.05被認為差異有統計學意義。
[0027]結果如下所示:
2.1淚液分泌量的變化
用藥後第O天，方差分析顯示五組的淚液分泌量差異無統計學意義。用藥第7天，方差分析示各組間差異有統計學意義(F=14.771，P=0.000)。其中各處理組與正常對照組相t匕，差異均有統計學意義(均為P=0.0000)。用藥第14天，方差分析示各組間差異有統計學意義(F=Il.219，P=0.000)。其中除10_4mg/ml a-MSH治療組與正常對照組相比較差異無統計學意義外(P=0.355)，其餘均有統計學意義(均Ρ〈0.05)。10_4mg/ml a-MSH組、10^mg/ml a -MSH組分別與0.9%NaCl處理組比較，差異有統計學意義(P分別為0.023和0.046)，其餘各組兩兩比較差異均無統計學意義。用藥第21天，方差分析示各組間差異有統計學意義(F=8.951，P=0.000)，其中除正常對照組與四處理組兩兩比較差異均有統計學意義外(P=0.000),餘均無統計學意義。用藥第28天，方差分析示五組間差異有統計學意義(F=6.002，P=0.001)，除10_5mg/ml a -MSH組與0.9%NaCl組差異無統計學意義外(P=0.142)，其餘均有統計學意義。上述結果提示使用含有a-MSH的滴眼液時，大鼠淚液分泌量明顯增加，如圖1A所示。
[0028]2.2淚膜破裂時間
BUT越小表示淚膜穩定性越差。用藥後第O天，方差分析結果顯示10_5mg/ml a -MSH組、10_4mg/ml a -MSH組、10_3mg/ml a -MSH組、0.9%NaCl組和正常對照組五組的BUT差異無統計學意義。用藥第7天，方差分析示五組間差異有統計學意義(F=2.522，P=0.048)。其中0.9%NaCl處理組與正常對照組及10_4mg/ml a -MSH治療組之間差異有統計學意義(P=0.013, P=0.021)，餘均無統計學意義。用藥第14天，方差分析示各組間差異有統計學意義(F=43.904，P=0.000)。其中除了 0.9%NaCl處理組與l(T5mg/ml a -MSH治療組之間差異無統計學意義外(P=0.146)，其餘各組兩兩比較差異均有統計學意義。用藥第21天，方差分析示各組間差異有統計學意義(F=35.235，P=0.000)。其中正常對照組與四處理組兩兩比較差異均有統計學意義(P=0.000)，0.9%NaCl處理組與10_5mg/ml a -MSH治療組、10_4mg/ml a -MSH治療組及10_3mg/ml a -MSH治療組之間差異有統計學意義(P分別為0.049，0.026,0.015)，餘均無統計學意義。用藥第28天，方差分析示各組間差異有統計學意義(F=31.087，P=0.000)。10_5mg/ml a -MSH 治療組與 0.9%NaCl 處理組相比(Ρ=0.239)，以及10_4mg/ml a-MSH組與10_3mg/ml a-MSH組相比，差異無統計學意義(P=0.553)外，其餘兩兩比較差異均有統計學意義。上述結果提示經含有α-MSH的滴眼液治療，乾眼大鼠的BUT較未治療組顯著延長，且最適濃度為10_4mg/ml，如圖1B所示。
[0029]2.3角膜螢光素鈉染色
正常對照組大鼠角膜螢光素鈉染色基本無著色或著色不明顯，裂隙燈顯微鏡下觀察角膜透明，上皮完整。0.9%NaCl溶液處理組大鼠角膜可見明顯的密集點狀著色,偶見角膜上皮小片狀著染。給予a-MSH滴眼液點眼治療組大鼠的角膜螢光素鈉著色較0.9%NaCl治療組明顯減輕，且隨a -MSH滴眼液濃度增高效果更明顯，10_4mg/ml a -MSH組、10_3mg/mla -MSH組大鼠的角膜狀況良好，基本接近正常對照組(圖2Α-Ε)。第O天，方差分析示五組的螢光素鈉染色評分差異無統計學意義。用藥第7天，方差分析示五組間差異有統計學意義(F=25.842，P=0.000)，其中0.9%NaCl處理組的角膜上皮螢光素鈉染色評分明顯增高，與其餘各組比較差異均有統計學意義(均為P=0.000)。用藥第14天，方差分析示五組間差異有統計學意義(F=26.076，P=0.000)，其中0.9%NaCl組的角膜螢光素鈉染色評分進一步增高，與其餘各組比較差異均有統計學意義(均為P=0.000)。用藥第21天，方差分析示五組間差異有統計學意義(F=50.983，P=0.000)，0.9%NaCl組的角膜螢光素鈉染色評分增高，與其餘各組比較差異均有統計學意義(P=0.000)。用藥第28天，方差分析顯示五組間差異有統計學意義(F=37.025，P=0.000)，0.9%NaCl組的角膜螢光素鈉染色評分進一步增高，與其餘各組比較差異均有統計學意義(均為P=0.000)。上述結果提示使用含有a -MSH的滴眼液可以顯著減輕乾眼的角膜上皮損傷，如圖1C所示。
[0030]2.4角膜HE染色
0.9%NaCl溶液處理組大鼠角膜上皮細胞出現增生，較正常組明顯增厚，細胞層數增加至10-12層，基底細胞層水腫、排列紊亂，角膜表面欠光滑。而給予a-MSH滴眼液點眼治療組的大鼠角膜HE染色較0.9%NaCl溶液處理組明顯好轉，基本接近正常(圖2F-J)。
[0031]2.5淚液蕨類實驗
第O天，光學顯微鏡下觀察五組大鼠的淚液蕨類結晶圖像可見形態良好的蕨類物。自第7天起，0.9%NaCl溶液處理組大鼠淚液結晶中的蕨類物逐漸減少，蕨類物之間的連接中斷、分支減少。而在同一時點，a-MSH滴眼液治療組的蕨類物形態保持良好(圖3)。
[0032]2.6結膜組織的PAS染色和杯狀細胞計數
如圖4，5所示，PAS染色可見0.9%NaCl溶液處理組大鼠的結膜穹窿部上皮細胞排列紊舌L出現缺失，杯狀細胞形態不一致，數量減少；而a-MSH滴眼液治療組大鼠的結膜杯狀細胞數量增加，且基本呈劑量依賴性。杯狀細胞計數顯示，第28天時10_5mg/ml a -MSH組、10_4mg/ml a -MSH組、10_3mg/ml a -MSH、0.9%NaCl溶液處理組和正常對照組的杯狀細胞計數分別為(91.33±7.45)個、(168.83±54.98)個、(142.17±63.99)個、(69.50±9.75)個、(129.50±16.24)，五組間差異有統計學意義(F=6.311，P=0.001)。除了 l(T4mg/ml a -MSH組，10-3mg/ml a -MSH與正常對照組無差異外，其餘兩兩比較差異均有統計學意義。
[0033]2.7 RT-PCR正常大鼠角膜中促炎因子IL-1 β mRNA、TNF-a mRNA僅少量表達。0.9%NaCl溶液處理組大鼠角膜組織中IL-1 β、TNF_a的mRNA表達較正常對照組顯著升高；a -MSH治療組大鼠角膜中的IL-1 β mRNA,TNF- a mRNA的表達水平隨a -MSH的濃度增高呈劑量依賴性地降低，其中I(T4和l(T3mg/ml a -MSH組IL-1 β mRNA以及TNF- a mRNA水平顯著低均於0.9%NaCl溶液處理組(圖6A，6B)。
[0034]淚液由水、蛋白質、脂類及代謝產物等組成，對眼表有清潔、潤滑、營養和抗感染等作用。全身給予氫溴酸東莨菪鹼注射液皮下注射後，大鼠的淚液量顯著減少，而經含有a -MSH的滴眼液治療後淚液分泌量較溶劑對照組有劑量依賴性地顯著增加，這表明a -MSH能夠促進大鼠淚液分泌。
[0035]正常眼表上皮細胞可以分泌粘蛋白，使細胞不角化，而且是保持眼表溼潤的必要條件。輕度乾眼時，眼表細胞改變不明顯；而中重度乾眼時，幾乎都存在眼表細胞凋亡，這在乾眼發病機制中起著重要作用，是引起乾眼病情惡性循環的重要因素。本研究中對角膜上皮螢光素染色評分的分析可見，含a -MSH的滴眼液可以減輕東莨菪鹼誘導的乾眼大鼠角膜上皮螢光素鈉著色，這提示a -MSH能夠修復乾眼造成的角膜上皮損傷。
[0036]隨著研究的深入，人們越來越意識到炎症在乾眼發病中的作用。乾燥可導致炎性因子釋放而損害眼表，而眼表的損害則進一步加劇乾眼。IL-1 β和TNF-α是較常見的促炎因子。研究發現在氫溴酸東莨菪鹼誘導的乾眼模型中，眼表的IL-1 β和TNF-α表達明顯增加。我們的研究也證實了這一點，溶劑對照組大鼠角膜中IL-1 β和TNF-a mRNA的表達較正常大鼠顯著增加，而應用a-MSH滴眼液點眼後，角膜中此二基因的表達水平顯著降低。
[0037]淚液蕨類試驗是評估淚液中電解質的濃度和黏蛋白含量的敏感指標。顯微攝像觀察淚液蕨類結晶發現，淚液中鹽類和糖蛋白、黏蛋白的比例是決定淚液蕨類圖形特點的關鍵因素。本研究發現a -MSH治療組較0.9%NaCl溶液處理組的蕨類樣物形態保持良好，間接反映a -MSH可能改善東莨菪鹼誘導的大鼠乾眼模型眼表的滲透壓和淚液組分。
[0038]淚膜的主要部分是由杯狀細胞分泌的黏蛋白與淚腺分泌的漿液層形成的凝膠，這種混合粘性液體可緊密依附在角膜上皮表面，使淚膜均勻而穩定。如果粘蛋白層缺乏或成分改變，即使淚液分泌量正常，淚膜也不能保持穩定。乾眼引起的炎症和淚液滲透壓的增高可能造成結膜杯狀細胞數量減少，引起淚液中粘蛋白分泌不足，造成淚膜不穩定，進一步加劇乾眼的惡化。另外，乾眼繼續惡化可導致結膜上皮細胞鱗狀化生，從而進一步加重杯狀細胞的損害和粘蛋白的減少，造成乾眼病變的惡性循環。我們的實驗結果也證實東莨菪鹼誘導的乾眼模型可以引起淚膜不穩定和杯狀細胞的丟失。本研究對結膜杯狀細胞計數結果分析顯示，a -MSH治療組的結膜杯狀細胞計數顯著增加、淚膜破裂時間顯著延長，表明a -MSH對結膜杯狀細胞有一定的保護作用，從而維持淚膜的穩定性。
[0039]總之，局部應用a -MSH滴眼液且其質量濃度為10_4_10_3mg/ml能夠促進大鼠淚液分泌，延長淚膜破裂時間，增加淚膜穩定性，促進角膜上皮損傷修復及杯狀細胞增生，減輕眼表炎症反應，有利於緩解乾眼的病理改變，可以作為臨床治療乾眼的新型藥物。
[0040]對於本領域技術人員而言，顯然本發明不限於上述示範性實施例的細節，而且在不背離本發明的精神或基本特徵的情況下，能夠以其他的具體形式實現本發明。因此，無論從哪一點來看，均應將實施例看作是示範性的，而且是非限制性的，本發明的範圍由所附權利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權利要求的等同條件的含義和範圍內的所有變化囊括在本發明內。
[0041]此外，應當理解，雖然本說明書按照實施方式加以描述，但並非每個實施方式僅包含一個獨立的技術方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領域技術人員應當將說明書作為一個整體，各實施例中的技術方案也可以經適當組合，形成本領域技術人員可以理解的其他實施方式。
【權利要求】
1.一種新型滴眼液對治療乾眼的用途，其特徵在於，所述新型滴眼液是含有a-MSH的滴眼液，a-MSH的質量濃度為l(T4-l(T3mg/ml,用於治療乾眼。
2.根據權利要求1所述的新型滴眼液對治療乾眼的用途，其特徵在於，所述新型滴眼液中a -MSH的質量濃度為l(T4mg/ml。
【文檔編號】A61K38/10GK104436159SQ201410744859
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月9日 優先權日:2014年12月9日
【發明者】趙少貞, 黃悅, 張琰, 茹玉莎, 劉會娟 申請人:天津醫科大學眼科醫院