炎琥寧及其凍乾粉針劑的製備方法

2024-04-10 03:13:05

專利名稱：炎琥寧及其凍乾粉針劑的製備方法
技術領域：
本發明涉及炎琥寧及其凍乾粉針劑的製備方法。

背景技術：
炎琥寧，其化學名稱為14-脫羥-11，12-二脫氫穿心蓮內酯-3，19-二琥珀酸半酯鉀鈉鹽，分子式為C28H34KNaO10·H2O，結構式如式(I)所示；它是由從中藥穿心蓮中提取的二萜化合物穿心蓮內酯經結構改造而製成的脫水穿心蓮內酯琥珀酸半酯鉀鈉鹽，具有抗菌、解毒、消炎的作用。

式(I) 炎琥寧能抑制早期毛細血管通透性增高與炎性滲出及水腫，能特異性地興奮垂體-腎上腺皮質功能，促進ACTH釋放，增加垂體前葉中ACTH的生物合成；體外具有滅活腺病毒、流感病毒、呼吸道病毒等多種病毒的作用。臨床用於病毒性肺炎，病毒性上呼吸道感染及菌痢等。在實踐中，炎琥寧不僅對某些病毒和細菌有直接的殺滅作用，而且能夠提高人體對疾病的防禦和抵抗能力，全面治療各種細菌和病毒對人體造成的損傷(尤其是易發生變異的病毒)。臨床應用具有副作用小、無耐藥性、療效可靠、產品質量穩定的特點，是中醫急診中較為常用和理想的藥物之一，打破了認為中藥只能用來治療慢性病的傳統說法。
雖然炎琥寧注射劑具有很好的臨床療效，但由於原料純度、工藝等原因，注射劑中會含有大量的雜質(有關物質)，這樣極大的影響了製劑的安全性，同時會給患者帶來許多過敏反應，影響了療效，嚴重者會帶來過敏性休克，威脅患者的生命。現有明確的研究資料顯示中藥製劑的療效和安全性與其「有關物質」有一定的線性關係，對中藥提取物的純度要求就比較高，因此把「有關物質」控制在一定限度下顯得尤其重要。
炎琥寧及其凍乾粉針製劑現行的製備方法較簡單，且不可控因素太多。具體方法為將氫氧化鈉和穿琥寧投入容器中，加適量的水，攪拌使溶解，完全溶解後，溶液澄清過濾，濃縮，減壓乾燥即得炎琥寧；再將炎琥寧溶於水，攪拌使溶解，完全溶解後，溶液澄清過濾，灌裝，凍幹即得炎琥寧製劑。上述製備方法，由於局部的鹼性太大，使得炎琥寧可能發生酯分解和裂環反應，再加上減壓乾燥可能使水分含量較高，以至所得的炎琥寧原料在外觀、溶液顏色，尤其有關物質項，不符合質量標準，會大大增加患者使用過程中發生過敏等不良反應的風險，同時炎琥寧原料的收率也比較低。


發明內容
本發明的目的是提供炎琥寧及其凍乾粉針劑的製備方法。
本發明所提供的炎琥寧的製備方法，是將穿琥寧溶於所述穿琥寧4-5倍質量的注射用水中，然後用0.1-0.2mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH值至7.1-7.5；然後加入活性炭除雜質，接著依次用0.45μm、0.22μm的微孔濾膜過濾，收集濾液，將濾液進行冷凍乾燥處理，即得到炎琥寧。
本發明所提供的炎琥寧凍乾粉針劑，是由下述原料經冷凍乾燥製成；所述原料包括下述質量份的炎琥寧、氯化鈉和注射用水 炎琥寧 4-20質量份 氯化鈉 1-5質量份 注射用水 200-300質量份。
其中，所述原料優選包括 炎琥寧 4質量份 氯化鈉 1質量份 注射用水 60-200質量份。
所述原料還可包括pH調節劑，具體可為0.1～0.2mol/L的氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液。
所述原料中炎琥寧與氯化鈉的質量分數比為4∶1。
製備所述炎琥寧凍乾粉針劑的方法，是將所述量的炎琥寧和所述量的氯化鈉溶於45-60℃的注射用水中，混勻後加入所述溶液質量的0.1％的針用活性炭，將溶液的pH值用所述pH調節劑調至6.4～6.8，補充注射用水至所述量；過濾脫炭，再依次用0.22μm的微孔濾膜過濾、截留分子量為10000道爾頓的超濾膜超濾、0.22μm的微孔濾膜過濾，收集濾液，冷凍乾燥得到炎琥寧凍乾粉針劑。
當凍乾粉針劑的原料中炎琥寧與注射用水的質量份數比為1∶(25-50)時，所述冷凍乾燥採用下述方法進行 第一階段預凍採用慢凍的方式，用4小時將產品溫度由20℃線性降溫至-45℃，並在-45℃保持1.5小時，不需抽真空； 第二階段升華乾燥用1.25小時將溫度由-45℃線性升溫至-12℃，並在-12℃維持8小時；真空度為14-22Pa； 第三階段解析乾燥將溫度由-12℃線性升溫至33℃，進行7小時，並在33℃維持1～2小時；真空度1.0-5.0Pa。
當凍乾粉針劑的原料中炎琥寧與注射用水的質量份數比為1∶(15-18.75)時，所述冷凍乾燥採用下述方法進行 第一階段預凍採用反覆預凍的方式(即將產品線性地從20℃降溫至-45℃，然後再升溫至-10℃，最後再降溫至-45℃)，預凍8小時，將產品溫度由20℃降溫至-45℃； 第二階段升華乾燥用1.5小時將溫度由-45℃線性升溫至-12℃，並在-12℃維持12-15小時；然後用1小時將溫度由-12℃線性升溫至-5℃，並在-5℃維持6-8小時；真空度14-22Pa； 第三階段解析乾燥將溫度由-5℃線性升溫至33℃，進行4小時，並在33℃維持6-8小時；真空度1.0-5.0Pa。
上述凍乾粉針劑中所用的炎琥寧，按照本發明中所提供的製備炎琥寧的方法製備。
本發明用穿琥寧與氫氧化鈉反應製備炎琥寧，其反應方程式如下
在炎琥寧的製備方法中，使用較稀的氫氧化鈉溶液並且採用後加的方式，減少了穿琥寧和炎琥寧的水解，同時也減少了雜質；控制溶解後的溶液pH值在7.1～7.5，使穿琥寧成鹽完全，增大其溶解性，同時也減少了炎琥寧中的穿琥寧含量；使用的活性炭既能脫去了色素雜質，也能吸附其中的雜質；通過0.45μm的膜粗濾脫去活性炭及其吸附的雜質，通過0.22μm的膜精濾去除了細菌和顆粒較細的不溶性雜質；通過冷凍乾燥降低了水分，減少炎琥寧的水解，增加其穩定性，利於貯藏。
炎琥寧凍乾粉針劑的製備過程中，使用西林瓶，採用超聲波洗瓶，四水四衝，350℃以上6分鐘滅菌乾燥，保證清潔無異物；採用全自動清洗機清洗膠塞，保證了無附著物、無粘連；選用氯化鈉作為起骨架作用的賦形劑，使製品保持塊狀，且疏鬆、易溶；所使用的注射用水，採用現制現用，85℃以上循環使用。對原料、輔料、內包材等進行的上述處理，減少了雜質的引入和同時防止了可能發生的反應。
炎琥寧凍乾粉針劑的製備過程中，控制配液罐的溫度在45～60℃，是為了使炎琥寧在溶解形成溶液的過程中不至於因溫度太高而降解，也不至於因溫度太低而形成膠體狀態而結合較多的水；加入所述溶液質量0.1％的針用活性炭，雖然對主藥有吸附，但為了降低可能的雜質，使用它來吸附色素和雜質；把藥液的pH值控制在6.4～6.8，一是靜脈輸注用注射液一般要求pH值在4-9之間，二是通過工藝研究，在pH值6.4～6.8的條件下，炎琥寧溶液是最穩定的；對藥液的過濾，採用四級工藝，一是脫炭過濾，去除活性炭及其吸附的雜質，二是0.22μm微孔濾膜過濾，去除細菌和大直徑物質，減輕超濾膜負荷，三是10000道爾頓分子量的超濾膜超濾，去除內毒素等大分子物質，提高澄清度，四是再過0.22μm微孔濾膜過濾，去除細菌，消除濃度梯度，提高澄明度。採用這樣的配濾工藝，減少了雜質的引入，防止細菌，同時提高炎琥寧在溶液狀態下的穩定性。
製備炎琥寧凍乾粉針劑中冷凍乾燥的步驟，按照製劑規格和灌裝量的不同，並根據其共晶點溫度制定了不同的凍幹工藝曲線，控制了凍幹製品的水分限度，降低了局部溶化的可能性，並提高了穩定性。
凍幹後得到的產品採用真空狀態下壓塞，包裝後成品在陰涼乾燥處貯存，是為了排除主藥的氧化降解，溫度、溼度、光照對主藥的影響，提高穩定性。
本發明製備的炎琥寧及其凍幹製劑——注射用炎琥寧，由於採用了上述各種有效的控制措施，使注射用炎琥寧的「有關物質」控制在1％以下，大大提高了注射用炎琥寧在臨床應用時的療效和安全性，而將「有關物質」項控制在1％以下的標準在國內目前是最高標準，同時也提高了炎琥寧的含量，增強了療效。



圖1為炎琥寧凍乾粉針劑的製備工藝流程圖。
圖2為實施例1的凍幹曲線。
圖3為實施例2的凍幹曲線。
圖4為實施例4的凍幹曲線。

具體實施例方式 實施例1、炎琥寧的製備 將5g氫氧化鈉溶於625ml注射用水中，得到濃度為0.2mol/L的氫氧化鈉溶液，備用。將70g的穿琥寧(成都天台山製藥有限公司，國藥準字H51023411)溶於375ml注射用水中，在攪拌狀態下加入上述氫氧化鈉溶液，調節pH值至7.3。然後加入所述溶液質量0.1％的活性炭，於室溫下攪拌20min，過0.45μm微孔濾膜粗濾，再過0.22μm微孔濾膜精濾，將濾液進行冷凍乾燥，得到淡黃色的粉末，即為炎琥寧。
冷凍乾燥按照凍幹曲線圖2操作 第一階段預凍採用慢凍的方式，用3小時將產品溫度由20℃線性降溫至-45℃，並在-45℃保持2小時，不需抽真空； 第二階段升華乾燥用2小時將溫度由-45℃線性升溫至-12℃，並在-12℃維持6小時；真空度為14-22Pa； 第三階段解析乾燥用7小時將溫度由-12℃線性升溫升至33℃，並在33℃維持2小時；真空度1.0-5.0Pa。
採用分光光度法測定炎琥寧的含量，具體方法為取本品28mg，精密稱定，置1000ml量瓶中，加稀乙醇適量使溶解，加醋酸0.1ml，用稀乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇稀釋至刻度，搖勻；作為供試品溶液。另精密稱取以五氧化二磷為乾燥劑在60℃減壓乾燥至恆重的脫水穿心蓮內酯琥珀酸半酯對照品適量，按同法製成每1ml中含25μg的溶液，作為對照品溶液。取上述兩種溶液，照分光光度法在251nm的波長處測定吸收度，計算求得供試品中脫水穿心蓮內酯琥珀酸半酯的含量與1.1128相乘，即得供試品中炎琥寧C28H34KNaO10的重量，實驗設三次重複，按幹品計算結果分別為96.32％、97.11％、96.70％。表明實施例1所製備的炎琥寧的含量為96.71±0.39％。
採用電阻法測得炎琥寧的共晶點為-10℃。
具體方法如下 1、電阻測定法原理物料在凍結過程中，溫度降到冰點，物料中水分開始生成冰晶。隨著溫度的下降，冰晶越來越多，物料的電阻也越來越大。當溫度降到某一點的時候，物料的電阻值突然增大，此時的溫度就是物料的共晶點。
2、試驗物料預處理將實施例1製備的炎琥寧溶於水，配製成設定濃度(72.0mg/ml～78.0mg/ml)的溶液，然後放入凍結箱內進行凍結，液體厚度以20mm～25mm為宜鋪放在託盤中。
3、實驗結果從多次的實驗過程來看，並不象理論分析的那樣有一個特別明顯的電阻值突變點，可能是諸多因素的影響，物料的電阻值突變值發生在降溫過程的一個溫度區間裡，為了保證物料的完全凍結，我們取該溫度區間的下限作為該物料的共晶點。
實施例2、規格為40mg的炎琥寧凍乾粉針劑的製備 按照圖1的製備工藝流程製備炎琥寧凍乾粉針劑，具體方法如下將1600ml注射用水加入配液灌中，開啟攪拌，控制配液罐的溫度在45-55℃。準確稱取炎琥寧40g，加入上述配液灌中攪拌至溶解。準確稱取氯化鈉10g，溶解於200ml注射用水中，加入上述配液罐中。將配液罐中的溶液攪拌均勻後，加入所述溶液質量的0.1％針用活性炭，攪拌回流15min，用0.1～0.2mol/L的鹽酸溶液調節藥液的pH值為6.4～6.8，然後用注射用水補足至2000ml。過濾脫碳，接著依次用0.22μm微孔濾膜過濾、用分子截留量為10000道爾頓的超濾膜超濾、再用0.22μm微孔濾膜過濾，至濾液澄明。取樣，測得上述濾液中炎琥寧的含量為19.4～20.6mg/ml。將濾液分成1000份，分別無菌灌裝於西林瓶中，半加塞，放入冷凍乾燥機中進行冷凍乾燥，得凍乾產品。
冷凍乾燥按照凍幹曲線圖3操作 第一階段預凍採用慢凍的方式，用4小時將產品溫度由20℃線性降溫至-45℃，並在-45℃保持1.5小時，不需抽真空； 第二階段升華乾燥用1.25小時將溫度由-45℃線性升溫至-12℃，並在-12℃維持8小時；真空度為14-22Pa； 第三階段解析乾燥將溫度由-12℃線性升溫至33℃，進行7小時，並在33℃維持1～2小時；真空度1.0-5.0Pa。
炎琥寧的含量，按幹品計，在凍幹前後沒有變化。凍幹後，炎琥寧復溶情況良好，按時溶解，未見不溶物。主要項目檢查及加速試驗結果、長期試驗結果如下 表1注射用炎琥寧加速試驗結果(40mg) 表2注射用炎琥寧長期試驗結果(40mg) 實施例3、規格為80mg的炎琥寧凍乾粉針劑的製備 將1600ml注射用水加入配液灌中，開啟攪拌，控制配液罐的溫度在45-55℃。準確稱取炎琥寧80g，加入上述配液灌中攪拌至溶解。準確稱取氯化鈉20g，溶解於200ml注射用水中，加入上述配液罐中。將配液罐中的溶液攪拌均勻後，加入所述溶液質量的0.1％針用活性炭，攪拌回流15min，用0.1～0.2mol/L的鹽酸溶液調節藥液的pH值為6.4～6.8，然後用注射用水補足至2000ml。過濾脫碳，接著依次用0.22μm微孔濾膜過濾、用分子截留量為10000的超濾膜超濾、再用0.22μm微孔濾膜過濾，至濾液澄明。取樣，測得上述濾液中炎琥寧的含量為38.8～41.2mg/ml。將濾液分成1000份，分別無菌灌裝於西林瓶中，半加塞，放入冷凍乾燥機中進行冷凍乾燥，得凍乾產品。
冷凍乾燥按照實施例2中凍幹曲線圖3操作。
炎琥寧的含量，按幹品計，在凍幹前後沒有變化。凍幹後，炎琥寧復溶情況良好，按時溶解，未見不溶物。主要項目檢查及加速試驗結果、長期試驗結果如下 表3注射用炎琥寧加速試驗結果(80mg) 表4注射用炎琥寧長期試驗結果(80mg) 實施例4、規格為160mg的炎琥寧凍乾粉針劑的製備 將2400ml注射用水加入配液灌中，開啟攪拌，控制配液罐的溫度在55-60℃。準確稱取炎琥寧160g，加入上述配液灌中攪拌至溶解。準確稱取氯化鈉40g，溶解於300ml注射用水中，加入上述配液罐中。將配液罐中的溶液攪拌均勻後，加入所述溶液質量的0.1％針用活性炭，攪拌回流15min，用0.1～0.2mol/L的鹽酸溶液調節藥液的pH值為6.4～6.8，然後用注射用水補足至3000ml。過濾脫碳，接著依次用0.22μm微孔濾膜過濾、用分子截留量為10000的超濾膜超濾、再用0.22μm微孔濾膜過濾，至濾液澄明。取樣，測得上述濾液中炎琥寧的含量為51.8～54.9mg/ml。將濾液分成1000份，分別無菌灌裝於西林瓶中，半加塞，放入冷凍乾燥機中進行冷凍乾燥，得凍乾產品。
冷凍乾燥按照凍幹曲線圖4操作 第一階段預凍採用反覆預凍(即將產品線性地從20℃～-45℃～-10℃～-45℃)的方式，預凍8小時，將產品溫度由20℃降溫至-45℃； 第二階段升華乾燥用1.5小時將溫度由-45℃線性升溫至-12℃，並在-12℃維持12-15小時；然後用1小時將溫度由-12℃線性升溫至-5℃，並在-5℃維持6-8小時；真空度14-22Pa； 第三階段解析乾燥將溫度由-5℃線性升溫至33℃，進行4小時，並在33℃維持6-8小時；真空度1.0-5.0Pa。
炎琥寧的含量，按幹品計，在凍幹前後沒有變化。凍幹後，炎琥寧復溶情況良好，按時溶解，未見不溶物。主要項目檢查及加速試驗結果、長期試驗結果如下 表5注射用炎琥寧加速試驗結果(0.16g) 表6注射用炎琥寧長期試驗結果(0.16g) 實施例5、規格為200mg的炎琥寧凍乾粉針劑的製備 將2400ml注射用水加入配液灌中，開啟攪拌，控制配液罐的溫度在55-60℃。準確稱取炎琥寧200g，加入上述配液灌中攪拌至溶解。準確稱取氯化鈉50g，溶解於300ml注射用水中，加入上述配液罐中。將配液罐中的溶液攪拌均勻後，加入所述溶液質量的0.1％的針用活性炭，攪拌回流15min，用0.1～0.2mol/L的鹽酸溶液調節藥液的pH值為6.4～6.8，然後用注射用水補足至3000ml。過濾脫碳，接著依次用0.22μm微孔濾膜過濾、用分子截留量為10000的超濾膜超濾、再用0.22μm微孔濾膜過濾，至濾液澄明。取樣，測得上述濾液中炎琥寧的含量為64.7～68.6mg/ml。將濾液分成1000份，分別無菌灌裝於西林瓶中，半加塞，放入冷凍乾燥機中進行冷凍乾燥，得凍乾產品。
冷凍乾燥按照實施例4中凍幹曲線圖4操作。
炎琥寧的含量，按幹品計，在凍幹前後沒有變化。凍幹後，炎琥寧復溶情況良好，按時溶解，未見不溶物。主要項目檢查及加速試驗結果、長期試驗結果如下 表7注射用炎琥寧加速試驗結果(0.2g) 表8注射用炎琥寧長期試驗結果(0.2g)
權利要求
1.一種炎琥寧凍乾粉針劑，是由下述原料經凍幹製成；所述原料包括下述質量份的炎琥寧、氯化鈉和注射用水
炎琥寧4-20質量份
氯化鈉1-5質量份
注射用水 200-300質量份。
2.根據權利要求1所述的凍乾粉針劑，其特徵在於所述原料包括下述質量份的炎琥寧、氯化鈉和注射用水
炎琥寧4質量份
氯化鈉1質量份
注射用水 60-200質量份。
3.根據權利要求1或2所述的凍乾粉針劑，其特徵在於所述原料還包括pH調節劑；所述原料中炎琥寧與氯化鈉的質量分數比為4∶1。
4.根據權利要求3所述的凍乾粉針劑，其特徵在於所述pH調節劑為0.1～0.2mol/L的氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液。
5.根據權利要求1-4中任一所述的凍乾粉針劑，其特徵在於所述炎琥寧按照如下方法製備
將穿琥寧溶於所述穿琥寧4-5倍質量的注射用水中，然後用0.1-0.2mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH值至7.1～7.5；然後加入活性炭除雜質，接著依次用0.45μm、0.22μm的微孔濾膜過濾，收集濾液，將濾液進行冷凍乾燥處理，即得到炎琥寧。
6.製備權利要求1-5中任一所述的凍乾粉針劑的方法，是將所述量的炎琥寧和所述量的氯化鈉溶於45-60℃的注射用水中，混勻後加入所述溶液質量的0.1％的針用活性炭，用所述pH調節劑將溶液的pH控制在6.4～6.8，補充注射用水至所述量；過濾脫炭，再依次用0.22μm的微孔濾膜過濾、截留分子量為10000道爾頓的超濾膜超濾、0.22μm的微孔濾膜過濾，收集濾液，冷凍乾燥得到炎琥寧凍乾粉針劑。
7.根據權利要求6所述的方法，其特徵在於所述凍乾粉針劑的原料中炎琥寧與注射用水的質量份數比為1∶(25-50)，所述冷凍乾燥採用下述方法進行
第一階段預凍用4小時將產品溫度由20℃線性降溫至-45℃，並在-45℃保持1.5小時，不需要抽真空；
第二階段升華乾燥用1.25小時將溫度由-45℃線性升溫至-12℃，並在-12℃維持8小時；真空度為14-22Pa；
第三階段解析乾燥將溫度由-12℃線性升溫至33℃，進行7小時，並在33℃維持1～2小時；真空度1.0-5.0Pa。
8.根據權利要求7所述的方法，其特徵在於所述凍乾粉針劑的原料中炎琥寧與注射用水的質量份數比為1∶(15-18.75)，所述冷凍乾燥採用下述方法進行
第一階段預凍採用反覆預凍的方式，將產品從20℃線性降溫至-45℃，然後再從-45℃線性升溫至-10℃，最後再從-10℃線性降溫至-45℃，預凍8小時；
第二階段升華乾燥用1.5小時將溫度由-45℃線性升溫至-12℃，並在-12℃維持12-15小時；然後用1小時將溫度由-12℃線性升溫至-5℃，並在-5℃維持6-8小時；真空度14-22Pa；
第三階段解析乾燥將溫度由-5℃線性升溫至33℃，進行4小時，並在33℃維持6-8小時；真空度1.0-5.0Pa。
9.根據權利要求6-8中任一所述的方法，其特徵在於所述炎琥寧按照如下方法製備
將穿琥寧溶於所述穿琥寧4-5倍質量的注射用水中，然後用0.1-0.2mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH值至7.1～7.5；然後加入活性炭除雜質，接著依次用0.45μm、0.22μm的微孔濾膜過濾，收集濾液，將濾液進行冷凍乾燥處理，即得到炎琥寧。
全文摘要
本發明公開了炎琥寧及其凍乾粉針劑的製備方法。該炎琥寧的製備方法，是將穿琥寧溶於所述穿琥寧4-5倍質量的注射用水中，然後用0.1-0.2mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH值至7.1～7.5；然後加入活性炭除雜質，然後依次用0.45μm、0.22μm的微孔濾膜過濾，收集濾液，將濾液進行冷凍乾燥處理，即得到炎琥寧。炎琥寧凍乾粉針劑的製備方法是將炎琥寧和氯化鈉溶於45-60℃的注射用水中，混勻後加入所述溶液質量的0.1％的針用活性炭，將溶液的pH控制在6.4～6.8，補充注射用水至所述量；過濾脫炭，再依次用0.22μm的微孔濾膜過濾、截留分子量為10000道爾頓的超濾膜超濾、0.22μm的微孔濾膜過濾，收集濾液，冷凍乾燥得到炎琥寧凍乾粉針劑。
文檔編號A61K9/19GK101780051SQ20091024707
公開日2010年7月21日 申請日期2008年5月8日 優先權日2008年5月8日
發明者張煜, 範建飛, 周慶柱 申請人:海南斯達製藥有限公司