取代的噻吩衍生物用作抗癌藥的製作方法

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專利名稱：取代的噻吩衍生物用作抗癌藥的製作方法
本申請根據35U.S.C.§119(e)要求2004年3月30日提交的美國臨時申請序列號60/558,342的優先權，將其全文納入本文作為參考。
背景技術：
發明領域本發明涉及取代的五元雜環化合物及其藥學上可接受的鹽、酯或前藥，這些化合物與藥學上可接受的載體的組合物，以及這些化合物的用途。
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將所有上面提到的出版物以全文納入本文作為參考，就好像專門和個別地將各個出版物以全文納入本文作為參考的程度。
現有技術Akt激酶起初，vAkt被鑑定為存在於轉化的小鼠白血病逆轉錄病毒中的細胞衍生的病毒癌基因，即AKT8(Staal和Hartley，1988)。該病毒的不尋常之處在於它能夠轉化貂肺上皮細胞而非其它細胞如NIH3T3成纖維細胞，這說明存在新型對細胞類型特異的癌基因。病毒Akt激酶的人同源物是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，屬於AGC蛋白激酶超家族，由於它類似於蛋白激酶A和C而命名為蛋白激酶B，產生現有「PKB/Akt」命名系統(Brazil和Hemmings，2001；及其參考文獻)。
後來證明Akt能介導與磷脂醯肌醇3-激酶(PI3K)相關的下遊事件，響應於生長因子(包括血小板衍生生長因子(PDGF)、表皮生長因子(EGF)、鹼性成纖維細胞生長因子(bFGF)、胰島素樣生長因子(IGF-I)、神經生長因子(NGF)、幹細胞因子和血管內皮生長因子)、細胞因子(包括白介素1、3、4、5和8)、胰島素、緩激肽、RANTES和內皮縮血管肽，以及連接於胞外基質(ECM)和各種形式的細胞應激(如缺氧和熱激)，Akt聚集到質膜上(Lawlor和Alessi，2001；Brazil和Hemmings，2001；Scheid和Woodgett，2003)。
在質膜上，PI3K將磷脂醯肌醇4，5-雙磷酸(PtdIns(4，5)P2；PIP2)轉化為脂質第二信使，磷脂醯肌醇3，4，5-三磷酸(PtdIns(3，4，5)P3；PIP3)。PIP3或其降解產物磷脂醯肌醇3，4-雙磷酸(PtdIns(3，4)P3；PI(3，4)P2)通過N-末端PKB的血小板-白細胞C激酶底物同源(PH)區將Akt徵集到質膜上。
通過多位點磷酸化，尤其是活化中心催化結構域的T-環活化結合於膜的PKB。然後，磷酸化PKB參與涉及細胞周期調節、存活、運動性和生長的許多下遊信號轉導事件(Lawlor和Alessi，2001；Scheid和Woodgett，2003)。這些過程是正常細胞功能必需的過程。此外，在人癌中發現影響磷酸化PKB的活性和/或產量的多肽的突變和/或異常表達(Luo等，2003)。具體說，在卵巢癌、乳腺癌和結腸癌中發現了Akt(Id.)。
目前至少鑑定了三種細胞同源物(即Akt1/PKBα、Akt2/PKBβ和Akt3/PKBγ)(Lawlor和Alessi，2001；Scheid和Woodgett，2003)。除PH區以外，已知這些蛋白質具有用於其上遊激活激酶的錨定結構域(docking domain)(HM)，同為AGC家族激酶的3-磷酸肌醇(phosphoinoside)依賴性激酶(PDK1)。HM結構域也似乎用作其它變構調節方式的位點(Scheid和Woodgett，2003)。位於激活T-環內的Thr308磷酸化似乎由PDK1進行，它是PKB功能必需的。位於PKB C-末端疏水結構域的Ser473磷酸化對於PKB活性的最大化同樣重要，儘管磷酸化機制不明(Brazil和Hemmings，2001；Scheid和Woodgett，2003)。
已鑑定或提出了許多Akt底物，包括Bcl-2促凋亡家族成員(BAD)；通過FasL和Bim介導凋亡的FOXO家族fork-head轉錄因子；癌症相關性3』-磷酸酶PTEN；乳腺癌易感基因產物1(BRCA-1)；cAMP反應元件結合蛋白(CREB)；內皮一氧化氮合酶(eNOS)；NFκB抑制劑(I-κB)；無K(Lys)蛋白激酶-1(WNK1)，與II型假醛固酮減少症II(PHAII)相關的高血壓相關基因(Vitari等，2003)等，表明AKT在細胞生長調節中起到基礎作用(Brazil和Hemmings，2001；Luo等，2003)。
在一系列不同晚期癌症中可見的一處常見改變是PTEN基因突變，該基因與細胞調節和凋亡(程序性細胞死亡)相關。PTEN是使PIP3失活和關閉PDK1和Akt的脂質磷酸酶。在乳腺癌、前列腺癌、子宮內膜癌、卵巢癌、結腸癌、黑色素瘤、成膠質細胞瘤和淋巴瘤中發現了PTEN基因中的突變。動物模型表明僅丟失一個拷貝的PTEN基因足以阻礙細胞信號轉導，並開始不受控制的細胞生長過程。所有這些PTEN突變的癌症都有激活的AKT，並且是AKT療法的天然適應症。
Alessi和同事(Alessi等，1996)預測了PKB結合的共有序列；然而，側翼序列顯著影響PKB磷酸化包含共有序列的肽底物的能力(Obata等，2000)。因此，PKB/Akt底物特異性除一級胺基酸序列識別之外，還必須依賴於蛋白-蛋白相互作用(Luo等，2003)；強調了PKB/Akt底物識別的特異性。
已開發了成功用於臨床的激酶抑制劑，包括幹擾受體酪氨酸激酶(RTK)Erb2/HER2、PDGF、BCR-Abl和c-KIT受體-磷酸化的抑制劑。也可獲得PI3K抑制劑，用於研究用途，並被證明能抑制腫瘤生長(Luo等，2003；及其參考文獻)。不幸地是，這種抑制劑的靶點位於PKB/Akt上遊，抑制這些靶點會對細胞生化通路產生廣泛影響。
AGC激酶包括PKB/Akt和PDK1的高度結構相似性阻礙了靶向此類下遊激酶的激酶抑制劑的鑑定，假定這些下遊激酶僅影響下遊激酶調節的一小組生化通路。已報導了PKB/Akt和PDK1激酶結構域的部分X射線結構；然而，這些結構並未揭示各PH結構域的結構，它們可能是PKB/Akt和/或PDK1-特異性抑制劑的優選靶位點(Harris，2003)。
雖然天然產生的鞘脂、神經醯胺似乎能阻止PIP3與PKB/Akt的PH區的相互作用(Powell等，2003)，並被用作抗癌藥，觀察到神經醯胺的作用有時是對立的，可能短暫，且知之甚少(Radin，2003)。
因此，需要激酶如PKB/Akt的特異性抑制劑。
蛋白激酶A許多肽激素，如促卵泡激素(FSH)通過調節腺苷酸環化酶的活性起作用，腺苷酸環化酶結合於質膜的內表面。細胞內腺苷酸環化酶活性的相對水平控制了用作肽激素信號下遊轉導的「第二信使」的環化AMP(cAMP)的量(Watson等，1987，第982頁)。蛋白激酶A(PKA)通常通過PKA的調節性「R」亞基定位於質膜。然而，當cAMP的胞內濃度升高時，它能結合PKA的調節R亞基並釋放蛋白激酶的催化部分。然後，活化的PKA轉運至細胞核，在核中激活許多底物，包括cAMP反應元件結合蛋白(CREB)、cAMP反應元件調節子(CREM)和活化轉錄因子(ATF)(Lewin，1996，1081-82頁；Don和Stelzer，2002)。
就CREB而言，即使磷酸化一個Ser殘基(一般是Ser-133)就能提高它與在許多基因中發現的cAMP反應元件(CRE)的親和力，包括但不限於細胞周期調節子，胞外基質(ECM)蛋白酶，膽固醇運輸蛋白，神經肽，免疫基因，胰島素樣生長因子(IGF)家族成員，激素信號轉導蛋白，信號轉導蛋白質和與細胞生長、分化、增殖和精子發生相關的其它蛋白質。cAMP下調的蛋白包括細胞周期蛋白B和E2、胰島素樣生長因子結合蛋白-5(IGFBP-5)、α1型XVI膠原、脂皮質蛋白III、L-犬尿氨酸水解酶、捲毛相關蛋白、NF-κB和肌動蛋白/原肌球蛋白/鈣調蛋白結合蛋白(Tierney等，2003)。
CDC7與DBF4調節亞基組成複合物的CDC7激酶是真核細胞中啟動DNA複製所必需的。CDC7似乎是通過將合適酶徵集到起始位點來「引發」或「開火」複製起點啟動所必需的。CDC7涉及ATR和Chk1激酶的S期檢查點信號轉導下遊。
在數個模式系統中研究了CDC7的生物學作用。在酵母中，CDC7的失活導致正在進行的DNA複製完成後生長阻滯。酵母研究也表明CDC7在減數分裂，檢查點應答以及染色體結構的維持和修復中的作用。相反，在未分化的小鼠胚胎幹細胞中CDC7的條件失活導致生長阻滯，伴隨正在進行的DNA合成中止，這表明即使在DNA合成起始後也需要CDC7。CDC7功能缺失也誘導重組修復和CDC2激酶抑制，最終導致p53依賴性凋亡。微型染色體維持蛋白質(MCM)似乎是CDC7的主要生理底物。
CDC7激酶表達的部分損失導致細胞和整體水平的生長延緩，而在癌細胞中觀察到CDC7激酶水平升高。後一發現使CDC7激酶成為小分子激酶抑制劑的誘人靶點(Montagnoli，A.等，2004；Woo，R.A.和Poon，R.Y.，2003；Semple，J.W.和Duncker，B.P.，2004)。用微陣列進行基因表達分析也將CDC7鑑定為藥物靶點(Walker，M.G.，2001)。
因此，PKB/Akt、PKA和CDC7不可避免地關係到細胞生長、分化、功能障礙和存活是熟知的。因此，需要激酶如PKB/Akt、PKA和CDC7的特異性抑制劑。
發明概述本發明涉及式I代表的取代的五元雜環衍生化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前藥 式中環A是含有5或6環原子的含氮雜芳基，其中1-4個環原子是氮原子；n是選自0或1的整數
R選自a)氫，b)羥基，c)烷基，d)取代的烷基，e)環烷基，f)取代的環烷基，g)-SO2R7，其中R7是C1-C5烷基或取代的烷基，h)烷氧基，i)羧基，j)羧酸酯，k)硝基，l)芳基，m)取代的芳基，n)雜芳基，o)取代的雜芳基，p)雜環基，q)取代的雜環基，r)醯氨基，和s)醯基；R1各自獨立地選自a)滷素，b)氰基，c)硝基，d)羥基，e)巰基，f)氨基，g)取代的氨基，h)烷氧基，i)取代的烷氧基，j)芳氧基，
k)取代的芳氧基，l)雜芳氧基，m)取代的雜芳氧基，n)烷硫基，o)取代的烷硫基，p)-C(＝O)NR8R8，其中R8各自獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基、取代的雜環基，或者各R8可任選地與懸掛在它上面的氮原子連接在一起形成雜環基或取代的雜環基，q)-NHC(＝O)-R9，其中R9選自氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基、取代的雜環基，r)芳基或雜芳基，各自可被任選取代的烷基或芳基任選取代，s)雜環基，各自可被任選取代的烷基或芳基任選取代，和t)用1-3個取代基任選取代的C1-C5烷基，所述取代基選自滷素、羥基、氨基、芳基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基；m是等於0、1或2的整數；R2和R4獨立地選自a)氫，b)環烷基，c)取代的環烷基，d)雜環基，e)取代的雜環基，f)芳基，g)取代的芳基，h)雜芳基，i)取代的雜芳基，j)任選取代的C1-C5取代的烷基，k)任選取代的C2-C5烯基，l)任選取代的C2-C5炔基，m)任選取代的C1-C5烷氧基，n)羥基，
o)氨基，p)C1-C5烷基單取代的氨基，和q)C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，限制條件是當R2或R4之一是環烷基、取代的環烷基、雜環基、取代的雜環基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基，R2或R4中另一個是氫；R3選自a)氫，b)C1-C5烷基，和c)在亞烷基鏈上由1-2個取代基任選取代的-(C1-C5亞烷基)p-Z，所述取代基選自i.由1-3個取代基任選取代的C1-C5烷基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，ii.由1-3個取代基任選取代的C2-C5烯基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，限制條件是所述羥基取代基不懸掛在取代的烯基的乙烯基碳原子上，iii.由1-3個取代基任選取代的C2-C5炔基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，限制條件是所述羥基取代基不懸掛在取代的炔基的乙炔碳原子上，iv.C3-C6環烷基，v.C3-C6螺環烷基，vi.羧基，vii.羧酸酯，viii.滷素，ix.羥基，x.C1-C5烷氧基，xi.氨基，xii.C1-C5烷基單取代的氨基，xiii.C1-C5烷基雙取代的氨基，xiv.芳基，和xv.雜環基；
Z選自a)烷基，b)取代的烷基，c)烷基氨基，d)烷氧基，e)取代的烷氧基，f)環烷基，g)雜環基，h)取代的雜環基，i)芳基，j)取代的芳基，k)雜芳基，和l)取代的雜芳基；p是選自0或1的整數Q選自a)-C(X』)NR6-，b)-CH2NR6-，c)-NR6C(X』)-，d)-NR6C(X』)O-，e)-NR6C(X』)NR6-，f)-OC(X』)NR6-，g)-C(X』)O-，h)-CR6＝CR6-，i)-C≡C-，j)-S(O)2NR6-，和k)-S(O)NR6-，其中，X』選自氧和硫，R6各自獨立地選自氫和C1-C3烷基和C1-C3取代的烷基，或者R6與Q和其連接的碳原子加上R4和其連接的碳原子連接在一起形成雜環基或取代的雜環基，限制條件是當Q是-C(O)NH-時，R3不是至少還用-C(O)在-C(O)NH-的β位取代的C2烷基，
進一步的限制條件是當Q是-S(O)2NH-時，R3不是至少還用-C(O)取代的C2烷基；W選自-O-、-S-、-SO-和-SO2-；附加條件是當環A是嘧啶和Q是-C(O)NR6-時，R4不是芳基或雜芳基。
本發明也提供了含有式I化合物和藥學上可接受的賦形劑或載體的藥物組合物。
在另一方面，本發明提供了治療患有至少部分由CDC7、PKA和/或Akt介導的病症的哺乳動物患者的方法。因此，本發明提供治療需要所述治療的哺乳動物患者的方法，所述方法包括給予該患者治療有效量的式I化合物(包括其混合物)。
在一個實施方式中，至少部分由CDC7、PKA和/或Akt介導的病症是細胞增殖性病症。細胞增殖性病症可以是癌症。在另一實施方式中，癌症可以是腫瘤或新生物，選自癌、腺癌和肉瘤。
在另一實施方式中，癌症可選自實體瘤/惡性腫瘤、粘液樣和圓形細胞癌、局部晚期腫瘤、人軟組織癌、癌轉移、鱗狀上皮細胞癌、食道鱗狀上皮細胞癌、口腔癌、皮膚T細胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、腎上腺皮質癌、產生ACTH的腫瘤、非小細胞癌、乳腺癌、腸胃癌、泌尿系統癌、女性生殖道惡性腫瘤、男性生殖道惡性腫瘤、腎癌、腦癌、骨癌、皮膚癌、甲狀腺癌、視網膜母細胞瘤、成神經細胞瘤、腹膜滲出物、惡性胸腔積液、間皮瘤、腎母細胞瘤、膽囊癌、滋養層腫瘤、血管外皮細胞瘤和卡波濟氏肉瘤。
在又一實施方式中，癌症選自新生血管發生-介導的疾病、良性腫瘤、聽神經瘤、纖維神經瘤、化膿性肉芽瘤、膽道癌、絨毛膜癌、食道癌、胃癌、上皮內腫瘤、肺癌、成神經細胞瘤、慢性髓細胞性白血病、急性成髓細胞性白血病和多發性骨髓瘤。
在又一方面，本發明提供了治療哺乳動物患者的至少部分由Akt介導的病症的方法，該方法包括單獨給予所述患者能有效減少或防止患者腫瘤生長的式I化合物量或與至少一種其它抗癌劑組合給予所述患者能有效減少或防止患者腫瘤生長的式I化合物量。
在又一方面，本發明提供了治療哺乳動物患者的至少部分由PKA介導的病症的方法，該方法包括單獨給予所述患者能有效減少或防止患者腫瘤生長的式I化合物量或與至少一種其它抗癌劑組合給予所述患者能有效減少或防止患者腫瘤生長的式I化合物量。在又一方面，本發明提供了治療哺乳動物患者的至少部分由CDC7介導的病症的方法，該方法包括單獨給予所述患者能有效減少或防止患者腫瘤生長的式I化合物量或與至少一種其它抗癌劑組合給予所述患者能有效減少或防止患者腫瘤生長的式I化合物量。
可通過合適途徑如口服、靜脈內、胃腸道外、透皮、局部、直腸或鼻內將本發明化合物或組合物給予哺乳動物。
哺乳動物患者包括例如人和其它靈長類，寵物或伴侶動物如犬和貓，實驗室動物如大鼠、小鼠和兔以及家畜如馬、豬、綿羊和牛。
優選實施方式在優選實施方式中，環A選自 式中R、R1、R5、n和m的定義如本文所述，t是0或1。
W優選硫。
優選的R選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、取代的環烷基、醯氨基、雜芳基、硝基、芳基、-SO2R7、羧酸酯和醯基。
尤其優選的R選自2-(甲基氨基)乙-1-基，2-(N-甲基哌嗪-N』-基)乙-1-基，2-(N-甲基吡咯-2-基)乙-1-基，2-(N-嗎啉代)乙-1-基，
2-(哌啶-N-基)乙-1-基，2-(吡啶-2-基)乙-1-基，2-(吡啶-3-基)乙-1-基，2-(吡啶-4-基)乙-1-基，2-(S)-苯基環丙基，2-氨基乙-1-基，2-羥基乙-1-基，2-苯基乙-1-基，2-螺環丙基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，3-(咪唑-N-基)丙-1-基，3-(N-甲基哌嗪-N』-基)丙-1-基，3-(N-嗎啉代)丙-1-基，3-氨基丁-1-基，3-氨基丙-1-基，5-羧基-4-(R，S)-氨基戊-1-基，氨基羰基，苄基，苄基氨基羰基，丁基，環丁基，環戊基，環丙基，環丙基甲基，二甲基氨基羰基，乙基，乙基氨基羰基，氫，甲基，甲氧基羰基，甲基氨基羰基，甲基羰基，
新戊基，硝基，苯基，苯基氨基羰基，丙基，丙基氨基羰基，吡啶-2-基甲基，吡啶-3-基甲基，吡啶-4-基，吡啶-4-基甲基，和SO2CH3。
R5優選氫或甲基。
較佳地，R1選自氫、C1-5烷基、-C(＝O)NR9和-NHC(＝O)-R9，其中R9選自氫或甲基。更佳地，R1選自氫、甲基、氨基羰基和甲基羰基氨基。
較佳地，R2和R4選自氫、羥基、氨基和用芳基或氨基任選取代的C1-C5烷氧基。更佳地，R2和R4選自氫、氨基、羥基、甲氧基、苄氧基和2-氨基乙氧基。
R3優選為-(C1-C5亞烷基)p-Z，其中p是0或1。當p是1時，亞烷基鏈優選為未取代或用選自以下基團的取代基取代的鏈C1-C5烷基，用羥基、氨基、單取代的氨基或雙取代的氨基取代的C1-C5烷基，C2-C5烯基，C2-C5炔基，C3-C6螺環烷基，羧基，羧酸酯，羥基，氨基，雜環基和芳基。更優選的是，當p是1時，亞烷基鏈是未取代或用選自以下基團的取代基取代的鏈2-氨基乙基，2-二甲基氨基乙基，和2-羥乙基，2-甲基氨基乙基，3-甲基氨基丙基，氨基，氨基甲基，羧基，二甲基氨基，二甲基氨基甲基，
乙基，甲基，甲基羧基，嗎啉代，羥甲基，苯基，丙-2-烯基，丙-2-炔基，丙基，螺環丁基，和螺環丙基。
在其它優選實施方式中，Z選自環烷基、取代的環烷基、雜環基、取代的雜環基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、烷基、氨基、烷基氨基和二烷基氨基。
尤其優選的R3選自(2-氟-4-甲氧基苯基)乙-1-基，(2-氟-4-甲基苯基)乙-1-基，[1-(4-氯苯基)環丁-1-基]甲基，[1-(4-氯苯基)環丙-1-基]甲基，1-(1-氨基乙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-4-甲氧基-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-4-苯基-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-7-氯-1H-苯並眯唑-2-基，1-(2-甲基丙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(3，3-二甲基丁基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(3-氨基丙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(4-氯苯基)-3-(N-甲基氨基)丙-1-基，1-(4-氯苯基)-3-(N，N-二甲基氨基)丙-1-基，1-(4-氯苯基)-3-羥基丙-1-基，
1-(氨基甲基)-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(二甲基氨基)丁-2-基，1-(R)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(甲基氨基)丁-2-基，1-(R)-1-(2，4-二氯苄基)-4-氨基丁-2-基，1-(R)-2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基乙-1-基，1-(R)-4-氟苯基)乙-1-基，1-(R)-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙-1-基，1-(R)-氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R)-羥甲基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-羧基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-羥甲基-1-苯基甲基，1-(R，S)-羥甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-羥甲基-2-苯基乙-1-基，1-(R，S)-甲基羧基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-苯基-2-苯基乙-1-基，1-(S)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(二甲基氨基)丁-2-基，1-(S)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(甲基氨基)丁-2-基，1-(S)-1-(2，4-二氯苄基)-4-氨基-丁-2-基，1-(S)-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙-1-基，1-(S)-氨基甲基-2-(1H-吲哚-3基)乙-1-基，1-(S)-氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(S)-氨基甲基-2-(吲哚-3-基)乙-1-基，1-(S)-二甲基氨基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(S)-二甲基氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1，2，3，4-四氫萘-1-基，1-氨基乙基-4-甲氧基苯並咪唑-2-基，1-氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-氨基甲基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，1-氨基甲基-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-苄基吡咯烷-3-基，1-二甲基氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙-2-基，
1-乙基-4-氯苯並咪唑-2-基，1-羥甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-羥甲基-2-甲基丙-1-基，1-異丁基-4-氯苯並咪唑-2-基，1-甲基-2-羥基乙-1-基，1-甲基-4-氯苯並咪唑-2-基，1-甲基苯並咪唑-2-基，1-苯基-1-(4-氯苯基)甲基，1-苯基-2-羥基乙-1-基，2-(2，4-二氯苯基)丁-1-基，2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，2-(2，4-二氯苯基)戊-1-基，2-(2，4-二氯苯基)戊-4-烯-1-基，2-(2，4-二氯苯基)戊-4-炔-1-基，2-(2，4-二氯苯基)丙-1-基，2-(2，5-二甲氧基苯基)乙-1-基，2-(2，6-二氯苯基)乙-1-基，2-(2-氯苯基)乙-1-基，2-(3，4-二氯苯基)乙-1-基，2-(3，4-二甲氧基苯基)乙-1-基，2-(3-氯苯基)乙-1-基，2-(3-氟苯基)乙-1-基，2-(3-甲氧基苯基)乙-1-基，2-(4-氨基苯基)乙-1-基，2-(4-氨基磺醯基苯基)乙-1-基，2-(4-聯苯基)乙-1-基，2-(4-溴苯基)乙-1-基，2-(4-氯苯基)乙-1-基，2-(4-乙氧基苯基)乙-1-基，2-(4-乙基苯基)乙-1-基，2-(4-氟苯基)乙-1-基，
2-(4-甲氧基苯基)乙-1-基，2-(4-甲基苯基)乙-1-基，2-(4-苯氧基苯基)乙-1-基，2-(N-甲基哌嗪-N』-基)乙-1-基，2-(N-甲基吡咯-2-基)乙-1-基，2-(N-嗎啉代)乙-1-基，2-(哌啶-1-基)乙-1-基，2-(哌啶-3-基)乙-1-基，2-(吡啶-2-基)乙-1-基，2-(吡啶-4-基)乙-1-基，2-(R)-(N-嗎啉代)-2-苯基乙-1-基，2-(R)-氨基-3-(吲哚-3-基)丙-1-基，2-(R)-羥基茚滿-1-基，2-(R)-甲基-2-苯基乙-1-基，2-(R，S)-氨基-2-苯基乙-1-基，2-(R，S)-羥基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，2-(R，S)-甲基-2-苯基乙-1-基，2-(S)-氨基-3-(吲哚-3-基)丙-1-基，2-(S)-甲基-2-苯基乙-1-基，2-(三氟甲基)-4-氟苯基甲基，2，4-二氯苄基，2，4-二氯苯基甲基，2，2-二甲基-5-苄基四氫吡喃-4-基，2，2-二苯基乙-1-基，2，4-二氯苄基，2，4-二氟苄基，2，5-二氟苄基，2-氨基苯並噻唑-4-基，2-氨基乙-1-基，2-氯苄基，2-二甲基氨基乙-1-基，
2-氟-4-氯苄基，2-氟-6-氨基苄基，2-甲氧基苄基，2-甲基-4-氯苯基甲基，2-甲基苄基，2-苯乙基，2-苯基苄基，2-哌啶-N-基苄基，3-(4-氟苯基)丙-1-基，3-(吡咯-N-基)丙-1-基，3，4-二氯苄基，3，5-二氯苄基，3，5-二氟苄基，3-氨基-1-(4-氯苯基)丙-1-基，3-溴苄基，3-氯苄基，3-甲氧基苄基，4-(2-氯苯基)噻唑-2-基，4-(3，4-二氟苯基)噻唑-2-基，4-(3-氯苯基)噻唑-2-基，4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基，4-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-(吡啶-2-基)噻唑-2-基，4-(吡啶-3-基)噻唑-2-基，4-(三氟甲氧基)-6-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-(三氟甲基)-6-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4，6-二氯苯並噻唑-2-基，4，6-二氟苯並噻唑-2-基，4-氨基-2-(4-氯苯基)丁-1-基，4-氨基苄基，4-氨基磺醯基苄基，
4-溴-6-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-溴-6-異丙基-苯並噻唑-2-基，4-溴苯並噻唑-2-基，4-溴苄基，4-氯-[2-(S)-2-(氨基丙醯基)氨基甲基]苯並噻唑-2-基，4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基，4-氯-5-甲基羧基-苯並噻唑-2-基，4-氯-6-({[2-(S)-2-氨基-3-苯基丙醯基]氨基}甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(2-氨基乙基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(2-硝基乙基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(二甲基氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(甲基氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(甲基羰基氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(三氟甲氧基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(三氟甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-[(2-氨基)乙基氨基羰基]苯並噻唑-2-基，4-氯-6-{[(氨基甲基羰基)氨基]甲基}苯並噻唑-2-基，4-氯-6-氨基甲基苯並噻唑-2-基，4-氯-6-羥甲基苯並噻唑-2-基，4-氯-6-甲基氨基甲基苯並噻唑-2-基，4-氯-6-甲基噻唑-2-基，4-氯-6-N-嗎啉代甲基-苯並噻唑-2-基，4-氯-7-氨基甲基-苯並噻唑-2-基，4-氯-7-羥甲基-苯並噻唑-2-基，4-氯苯並噻唑-2-基，4-氯苯並唑-2-基，4-氯苄基，4-二甲基氨基苄基，4-氟苄基，4-氟苯並噻唑-2-基，4-氟苄基，
4-氟苯基，4-氟苯基甲基，4-羥基-2-(4-氯苯基)丁-1-基，4-羥基苯並噻唑-2-基，4-羥基苯並噻唑-4-基，4-甲氧基-6-(甲基氨基甲基)苯並噻唑-1-基，4-甲氧基苯並噻唑-2-基，4-甲氧基噻唑-2-基，4-甲基-6-氨基甲基-苯並噻唑-2-基，4-甲基苄基，4-甲基噻唑-2-基，4-苯基噻唑-2-基，5-(2-溴噻吩-5-基)噻唑-2-基，5-(3-溴-4-甲氧基苯基)噻唑-2-基，5-氯苯並咪唑-2-基，5-氯苯並噻唑-2-基，6-氨基甲基-8-氯喹啉-2-基，6-氨基甲基-苯並噻唑-2-基，6-氯苯並噻唑-2-基，6-氟苯並噻唑-2-基，7-氯苯並噻唑-2-基，苯並咪唑-2-基，苯並噻唑-2-基，苯並噻唑-6-基，苯並噻吩-2-基(benzothiophen-2-yl)，苄基，氫，茚滿-1-基(indan-1-yl)，萘-1-基甲基，吡啶-2-基甲基，吡啶-3-基甲基，
吡啶-4-基甲基，嘧啶-3-基，吡咯烷-3-基，喹啉-2-基，喹啉-3-基，喹啉-6-基，和噻吩-2-基甲基(thiophen-2-ylmethyl)。
優選的Q基團包括-C(O)NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-CH2NH-、-C(O)N(CH2CH2NH2)-、-C(O)N(CH3)-、-SO2NH-、-C(O)O-、-CH＝CH-和-C≡C-。
在另一優選上述方式中，R6與Q和其連接的碳原子加上R4和其連接的碳原子連接在一起形成取代的雜環基，更優選連接形成5，6-二氫嘧啶-4-酮。
R6優選為氫或用氨基任選取代的C1-3取代的烷基。
其它實施方式本發明涉及式IA代表的取代的五元雜環衍生化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前藥 式中R選自a)氫，b)羥基，c)烷基，d)取代的烷基，e)環烷基，f)取代的環烷基，g)-SO2R5，其中R5是C1-C5烷基或取代的烷基，
h)烷氧基，i)羧酸酯，j)硝基，k)芳基，l)取代的芳基，m)雜芳基，n)取代的雜芳基，o)醯氨基，和p)醯基；Ra選自氫、烷基和取代的烷基；R1各自獨立地選自a)滷素，b)氰基，c)硝基，d)羥基，e)巰基，f)氨基，g)取代的氨基，h)烷氧基，i)取代的烷氧基，j)芳氧基，k)取代的芳氧基，l)雜芳氧基，m)取代的雜芳氧基，n)烷硫基，o)取代的烷硫基，p)-C(＝O)NR」R」，其中R」各自獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基，或者各R」可任選地與懸掛在它上面的氮原子連接在一起形成雜環基，q)-NHC(＝O)-R」，其中R」的定義如上，r)芳基或雜芳基，各自可被任選取代的烷基或芳基任選取代，和s)用1-3個取代基任選取代的C1-C5烷基，所述取代基選自滷素、羥基、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基；m是等於0、1或2的整數；R2和R2』獨立地選自a)氫，b)環烷基，c)雜環基，d)芳基，e)雜芳基，f)用1-3個取代基任選取代的C1-C5烷基，所述取代基選自滷素、羥基、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，g)用1-3個取代基任選取代的C1-C5烯基，所述取代基選自滷素、羥基、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，h)用1-3個取代基任選取代的C1-C5炔基，所述取代基選自滷素、羥基、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，i)用1-3個取代基任選取代的C1-C5烷氧基，所述取代基選自滷素、羥基、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，j)羥基，k)氨基，l)C1-C5烷基單取代的氨基，和m)C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，限制條件是當R2或R2』之一是環烷基、雜環基、芳基或雜芳基時，R2或R2』中另一個是氫；R3選自a)C1-C5烷基，和b)在亞烷基鏈上由1-2個取代基任選取代的-(C1-C5亞烷基)p-Z，所述取代基選自i.由1-3個取代基任選取代的C1-C5烷基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，ii.由1-3個取代基任選取代的C2-C5烯基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，，iii.由1-3個取代基任選取代的C2-C5炔基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，，iv.C3-C6環烷基，v.C3-C6螺環烷基，vi.羧基，vii.羧酸酯，viii.滷素，ix.羥基，x.C1-C5烷氧基，xi.氨基，xii.C1-C5烷基單取代的氨基，xiii.C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，xiv.芳基；Z選自a)烷基，b)取代的烷基，c)烷基氨基，d)烷氧基，e)取代的烷氧基，f)環烷基，g)雜環基，h)取代的雜環基，
i)芳基，j)取代的芳基，k)雜芳基，和l)取代的雜芳基；p是0或1；Q選自a)-C(X』)NR6-，b)-CH2NR6-，c)-NR6C(X』)-，d)-NR6C(X』)O-，e)-NR6C(X』)NR6-，和f)-OC(X』)NR6-，其中，X』選自氧和硫，R6選自氫和C1-C3烷基和C1-C3取代的烷基，限制條件是當Q是-C(O)NH-時，R3不是至少還用-C(O)取代的C2烷基；W選自-O-、-S-、-SO-和-SO2-；X各自獨立地選自-CH-、-CR1(R1定義如上)或氮，限制條件是至少一個X是氮；和Y選自-CH-、-CR1(R1定義如上)或氮，限制條件是當Y是氮時，兩個X都是氮，限制條件還有當Y是-CH-或-CR1且Q是-C(O)NR6-時，R2』不是芳基或雜芳基。
本發明的示範性化合物下表1-5列舉了本發明範圍內的取代的五元雜環衍生物。在下表中，「Me」指甲基、「Et」指乙基，「Ph」指苯基。
表1
*化合物108是2，4-噻吩。
*化合物145用1，3，5-三嗪替代了嘧啶。
表2
表3
表4
表5
在實施例部分表6中可以發現本發明範圍內的具體化合物。
發明詳述定義和概覽如上所述，本發明涉及新的取代的五元雜環化合物。
也應理解，本文所用術語的目的僅為說明具體實施方式
，並不旨在限制本發明範圍。必須注意，本文和權利要求中所用的單數形式″一個(a)″、″一種(an)″和″這種(the)″包括複數含義，除非文中明確指出不是這樣。在此說明書和所附權利要求書中，參照應具有以下定義的許多術語除非另有定義，以下術語具有下述含義。
術語″烷基″指具有1-5個碳原子、更優選1-3個碳原子的單價飽和脂族烴基。該術語的例子是，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基等。
″取代的烷基″指具有1-3、優選1-2個取代基的烷基，所述取代基選自烷氧基、取代的烷氧基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、取代的氨基、氨基醯基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、滷原子、羥基、硝基、羧基、羧酸酯、環烷基、取代的環烷基、螺環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基。
「亞烷基」指優選具有1-5個碳原子、更優選具有1-3個碳原子的二價飽和脂族烴基，可以是直鏈或支鏈。該術語的例子是，例如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CH2-)、亞正丙基(-CH2CH2CH2-)、亞異丙基(-CH2CH(CH3)-)等。
″烷氧基″指″烷基-O-″，包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基等。
″取代的烷氧基″指″取代的烷基-O-″。
″醯基＂指H-C(O)-、烷基-C(O)-、取代的烷基-C(O)-、烯基-C(O)-、取代的烯基-C(O)-、炔基-C(O)-、取代的炔基-C(O)-環烷基-C(O)-、取代的環烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、取代的芳基-C(O)-、雜芳基-C(O)-、取代的雜芳基-C(O)-、雜環基-C(O)-和取代的雜環基-C(O)-，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環烷基、取代的環烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基的定義如本文所述。
″醯氨基″指-C(O)NR10R10，其中R10各自獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、環烷基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基、取代的雜環基，各R10與氮原子連接形成雜環或取代的雜環，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環烷基、取代的環烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環的定義如本文所述。
″醯氧基″指烷基-C(O)O-、取代的烷基-C(O)O-、烯基-C(O)O-、取代的烯基-C(O)O-、炔基-C(O)O-、取代的炔基-C(O)O-、芳基-C(O)O-、取代的芳基-C(O)O-、環烷基-C(O)O-、取代的環烷基-C(O)O-、雜芳基-C(O)O-、取代的雜芳基-C(O)O-、雜環基-C(O)O-和取代的雜環基-C(O)O-，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環烷基、取代的環烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基的定義如本文所述。
″烯基″指具有2-6個碳原子、優選2-4個碳原子並具有至少1個、優選1-2個烯基不飽和位點的烯基。這種基團的例子是乙烯基、烯丙基、丁-3-烯-1-基等。
″取代的烯基″指具有1-3個取代基、優選1-2個取代基的烯基，所述取代基選自烷氧基、取代的烷氧基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、取代的氨基、氨基醯基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、滷原子、羥基、硝基、羧基、羧酸酯、環烷基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基，附帶條件是任何羥基取代基不能連接在乙烯基(不飽和)碳原子上。
″炔基″指具有2-6個碳原子、優選2-3個碳原子並具有至少1個、優選1-2個炔基不飽和位點的炔基。
″取代的炔基″指具有1-3個取代基、優選1-2個取代基的炔基，所述取代基選自烷氧基、取代的烷氧基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、取代的氨基、氨基醯基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、滷原子、羥基、硝基、羧基、羧酸酯、環烷基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基，附帶條件是任何羥基取代基不連接於乙炔(不飽和)碳原子。
「氨基」指-NH2。
「氰基」指-CN。
「取代的氨基」指-NR10R10，其中R10各自獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、環烷基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基、取代的雜環基，假如兩個R10都不是氫，各R10與其結合的氮原子連接形成雜環基或取代的雜環基。當R10是氫、另一個R10是烷基時，本文中的取代的氨基有時稱為烷基氨基。當兩個R10都是烷基時，本文中的取代的氨基有時稱為二烷基氨基。當指單取代的氨基時，意思是一個而非兩個R10是氫。當指雙取代的氨基時，意思是兩個R10都不是氫。
″氨基醯基″指-NR11C(O)烷基、-NR11C(O)取代的烷基、-NR11C(O)環烷基、-NR11C(O)取代的環烷基、-NR11C(O)烯基、-NR11C(O)取代的烯基、-NR11C(O)炔基、-NR11C(O)取代的炔基、-NR11C(O)芳基、-NR11C(O)取代的芳基、-NR11C(O)雜芳基、-NR11C(O)取代的雜芳基、-NR11C(O)雜環基和-NR11C(O)取代的雜環基，其中R11是氫或烷基，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環烷基、取代的環烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基的定義如本文所述。
「硝基」指-NO2。
″芳基″或″Ar″指具有一個環(如苯基)或多個稠合環(如萘基或蒽基)的6-14個碳原子的單價芳香碳環基團，假如連接點在芳香碳原子上，稠合環可以是或不是芳香環(如2-苯並唑啉酮、2H-1，4-苯並嗪-3(4H)-酮-7-基等)。優選芳基包括苯基和萘基。
「取代的芳基」指用1-3個取代基、優選1-2個取代基取代的芳基，所述取代基選自羥基、醯基、醯氨基、醯氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、氨基、取代的氨基、氨基醯基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、羧基、羧酸酯、氰基、巰基、烷硫基、取代的烷硫基、芳硫基、取代的芳硫基、雜芳硫基、取代的雜芳硫基、環烷硫基、取代的環烷硫基、雜環硫基、取代的雜環硫基、環烷基、取代的環烷基、滷素、硝基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基、取代的雜環基、雜芳氧基、取代的雜芳氧基、雜環氧基、取代的雜環氧基、氨基磺醯基(NH2-SO2-)和取代的氨基磺醯基。
″芳氧基″指芳基-O-，包括例如苯氧基、萘氧基等。
″取代的芳氧基″指取代的芳基-O-。
″羧基″指-COOH或其鹽。
″羧酸酯″指-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)-芳基和-C(O)O-取代的芳基，其中烷基、取代的烷基、芳基和取代的芳基的定義如本文所述。
″環烷基″指具有一個或多個環的3-10個碳原子的環烷基，包括例如金剛烷基、環丙基、環丁基、環戊基、環辛基等。
「螺環烷基」指具有螺接的環烷基環(螺接由一個原子形成，該原子是這些環的唯一共有原子)的3-10個碳原子的環狀基團，如以下結構所示
″取代的環烷基″指具有1-5個取代基的環烷基，所述取代基選自氧代(＝O)、硫代(＝S)、烷氧基、取代的烷氧基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、取代的氨基、氨基醯基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、滷原子、羥基、硝基、羧基、羧酸酯、環烷基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基。
″環烷氧基″指-O-環烷基。
″取代的環烷氧基″指-O-取代的環烷基。
″滷素″或″滷原子″指氟、氯、溴和碘，優選氟或氯。
「羥基」指-OH。
″雜芳基″指環中有1-10個碳原子和1-4個雜原子的芳香基團，雜原子選自氧、氮和硫。所述雜芳基可具有一個環(如吡啶基或呋喃基)或多個稠合環(如中氮茚基或苯並噻吩基)，其中假如連接點在芳香雜芳基的原子上，稠合環可以是或不是芳香環和/或含有或不含雜原子。雜芳基優選包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、苯硫基(thiophenyl)和呋喃基。
本文所用術語「含氮雜芳基」指至少一個環原子是氮，優選1-6個環原子是氮的雜芳基。在一些實施方式中，1-4個環原子是氮。
″取代的雜芳基″指用1-3個取代基取代的雜芳基，所述取代基選自取代的芳基中定義的取代基。
″雜芳氧基″指-O-雜芳基，″取代的雜芳氧基″指-O-取代的雜芳基。
″雜環″或″雜環基″或「雜環烷基」或「雜環基」指具有一個環或多個稠合環、環中具有1-10個碳原子和14個選自氮、硫或氧的雜原子的飽和或不飽和基團，在稠合環系統中，假如連接點在雜環上，一個或多個環可以是環烷基、芳基或雜芳基。
″取代的雜環″或「取代的雜環烷基」或「取代的雜環基」指用與取代的環烷基中定義的相同的1-3個取代基取代的雜環基。
雜環基和雜芳基的例子包括但不限於氮雜環丁烷、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、中氮茚、異吲哚、吲哚、二氫吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、酞嗪、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異唑、吩嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、鄰苯二甲醯亞胺、1，2，3，4-四氫-異喹啉、4，5，6，7-四氫苯並[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯並[b]噻吩、嗎啉基、硫代嗎啉基(也稱為硫嗎啉基)、哌啶基、吡咯烷、四氫呋喃基等。
應注意，當提到雜芳基、取代的雜芳基、雜環基和取代的雜環基時，可任選地氧化可能存在的任何氮原子或硫原子。
″巰基″指-SH。
″烷硫基″或「烷硫基醚(alkylthioether)」或「硫代烷氧基(alkoxythio)」指-S-烷基。
″取代烷硫基″或「取代烷硫基醚」或「取代的硫代烷氧基」指-S-取代的烷基。
「芳硫基」指-S-芳基，其中芳基定義如上。
「取代的芳硫基」指-S-取代的芳基，其中取代的芳基定義如上。
「雜芳硫基」指-S-雜芳基，其中雜芳基定義如上。
「取代的雜芳硫基」指-S-取代的雜芳基，其中取代的雜芳硫基定義如上。
″雜環硫基″指-S-雜環和＂取代的雜環硫基＂指-S-取代的雜環，其中雜環和取代的雜環定義如上。
「雜環氧基」指雜環基-O-，「取代的雜環基-O-指取代的雜環基-O-，其中雜環基和取代的雜環基定義如上。
「環烷硫基」指-S-環烷基，「取代的環烷硫基」指-S-取代的環烷基，其中環烷基和取代的環烷基定義如上。
本文所用″生物活性″指在實施例22-25所列的至少一個實驗中測定時的抑制濃度。
本文所用術語″藥學上可接受的鹽″指式I化合物的無毒酸鹽或鹼土金屬鹽。可在最後分離和純化式I化合物期間原位製備、或通過使鹼或酸官能團分別與合適的有機或無機的酸或鹼單獨反應製備這些鹽。代表性鹽包括但不限於乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡糖酸鹽、環戊烷丙酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、已酸鹽、延胡索酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、菸鹼鹽、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamoate)、果膠酸鹽(pectinate)、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。同時，可用試劑如烷基滷化物如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸酯如硫酸二甲基、硫酸二乙基、硫酸二丁基和硫酸二戊基，長鏈滷化物如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物，芳烷基滷化物如苄基溴和苯乙基溴等使鹼性含氮基團季銨化。從而獲得可溶解或分散於水或油的產物。
可用於形成藥學上可接受的酸加成鹽的酸的例子包括無機酸如鹽酸、硫酸和磷酸，以及有機酸如草酸、馬來酸、甲磺酸、琥珀酸和檸檬酸。可在最後分離和純化式I化合物期間原位製備、或通過使羧酸部分與合適鹼或與氨或有機伯胺、仲胺或叔胺單獨反應製備鹼加成鹽，合適鹼例如藥學上可接受的金屬陽離子的氫氧化物，碳酸鹽或碳酸氫鹽。藥學上可接受的鹽包括但不限於基於鹼金屬和鹼土金屬的陽離子，如鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋁鹽等，以及銨、季銨和胺陽離子，包括但不限於銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。可用於形成鹼加成鹽的其它代表性有機胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。
本文所用術語「藥學上可接受的酯」指可在體內水解的酯，包括在人體內降解釋放出母體化合物或其鹽的酯。合適的酯基團包括例如衍生自藥學上可接受的脂族羧酸，尤其是鏈烷酸、鏈烯酸、環烷酸和鏈烷二羧酸的酯，其中各烷基或烯基部分最好不多於6個碳原子。具體酯的代表性例子包括但不限於甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和乙基琥珀酸酯(ethylsuccinate)。
本文所用術語「藥學上可接受的前藥」指本發明化合物的前藥，它們在合理醫療判斷範圍內適合用於接觸人和低等動物的組織而不產生過分毒性、刺激性、過敏反應等，與合理利益/風險比相當，並有效用於預計用途，(可能時)是本發明化合物的兩性離子形式。術語「前藥」指在體內迅速轉化，例如在血液中通過水解產生上式母體化合物的化合物。以下文獻中討論了這個問題T.Higuchi和V.Stella，《前藥作為新型遞送系統》(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，第14卷，A.C.S.系列研討會，和Edward B.Roche編，《藥物設計中生物可逆的載體》(Bioreversible Carriers in DrugDesign)，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987，將其納入本文作為參考。
本文所用「抗癌劑」或「癌症治療劑」指包括例如凋亡誘導劑；多核苷酸(如核酶)；多肽(如酶)；藥物；生物模擬物；生物鹼；烷化劑；抗癌抗生素；抗代謝劑；激素；鉑化合物；與抗癌藥、毒素和/或放射性核素偶聯的單克隆抗體；生物反應修飾劑(如幹擾素和白介素等)；過繼性免疫療法藥；造血生長因子；誘導腫瘤細胞分化的藥物(如全反式維甲酸等)；基因治療試劑；反義療法試劑和核苷酸；腫瘤疫苗；新生血管發生抑制劑等藥物。本領域技術人員熟知許多其它藥物。
應理解，在上面定義的所有取代基中，本發明不包括通過使取代基本身又被其它取代基取代得到的聚合物(如具有取代的芳基作為取代基的取代的芳基，取代基本身被取代的芳基取代等)。在這種情況下，這種取代基的最大數目是三個。即上述定義各自限於以下限制(例如)取代的芳基僅限於-取代的芳基-(取代的芳基)-取代的芳基。
類似地，應理解上述定義不旨在包括不允許的取代模式(如用5個氟取代甲基或羥基連接於乙烯或乙炔不飽和基團的α位)。這些不允許的取代模式是本領域技術人員熟知的。
由於化合物中存在一個或多個不對稱或手性中心，本發明化合物可具有立體異構性。本發明考慮了各種立體異構體和其混合物。某些本發明化合物含有不對稱取代的碳原子。這些不對稱取代的碳原子可導致本發明化合物包括特定不對稱取代的碳原子的立體異構體混合物或一種立體異構體。結果是，本發明包括本發明化合物的外消旋混合物、非對映異構體的混合物、一種對映異構體、以及一種非對映異構體。本文所用術語″S″和″R″構型的定義見IUPAC 1974″RECOMMENDATIONS FORSECTION E，FUNDAMENTAL STEREOCHEMISTRY，″Pure Appl.Chem.4513-30，1976。所需對映異構體可通過用本領域熟知方法從市售手性原材料手性合成獲得、或可通過用已知技術從對映異構體混合物分離所需對映異構體而獲得。
本發明化合物也可具有幾何異構性。幾何異構體包括具有烯基或亞烯基部分的本發明化合物的順式和反式形式。本發明包括各幾何異構體和立體異構體及其混合物。
化合物製備可用以下通用方法和步驟從容易獲得的原材料製備本發明化合物。應理解，當給定一般或優選的反應條件(即反應溫度、時間、反應物的摩爾比、溶劑、壓力)時，也可採用其它反應條件，除非另有說明。最優反應條件可隨所用具體反應物或溶劑而改變，但本領域技術人員用常規優化步驟可確定這些條件。
此外，正如本領域技術人員了解的那樣，需要常規的保護基團來防止某些官能團發生不需要的反應。各種官能團的合適保護基團以及保護和去保護具體官能團的合適條件是本領域熟知的。例如，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，《有機合成中的保護基團》(Protecting Groups in Organic Synthesis)，第二版，Wiley，New York，1991及其引用的參考文獻中描述了許多保護基團。
而且，本發明化合物可含有一個或多個手性中心。因此，如果需要，這些化合物可製備或分離為純的立體異構體，即單一的對映異構體或非對映異構體，或富含立體異構體的混合物。除非另有說明，本發明範圍包括所有這些立體異構體(和富集混合物)。可用(例如)本領域熟知的光學活性原材料或立體選擇性試劑製備純的立體異構體(或富集混合物)。或者，可用(例如)手性柱色譜、手性拆分劑等分離這些化合物的外消旋混合物。
除非另有說明，用於以下實施例的試劑是市售的，可購自(例如)Sigma-AldrichCompany，Inc.(Milwaukee，WI，USA)。
可根據以下方案1合成本發明化合物。可通過在各種已知的成醯胺條件下將羧酸1A與式NH2R3胺偶聯形成化合物1B。在110℃的回流甲苯中使甲基酮1B接觸1.5當量二甲基甲醯胺縮二甲醇，產生插烯的的醯胺1C。然後，還可在具有合適鹼如2.1當量NaOEt/EtOH的鹼性條件下用2當量式H2NC(＝NR)NH2胍的鹽酸鹽在80℃處理醯胺1C 16小時，產生5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺。
方案1合成5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺 式中R和R3的定義如本文所述或者，可通過活化嘧啶2B官能化嘧啶環，如方案2所示。在合適溶劑如吡啶中，插烯的醯胺1C與S-甲基異硫脲半硫酸鹽(0.5當量H2SO4中的3當量H2NC(＝NH)SMe)在100℃下縮合(condense)3天形成硫化物2A，然後室溫在溶劑如二氯甲烷中用2當量間氯過氧苯甲酸氧化14小時得到碸2B，在1，4-二烷中與式RNH2的合適胺在110℃反應約4-14小時，產生1D。
方案2
式中R和R3的定義如本文所述此外，也可通過首先組裝嘧啶環、然後引入羧醯胺部分來合成1D類型的化合物，如方案3所示。在回流甲苯中於110℃用2.5當量二甲基甲醯胺縮二甲醇處理1A 15小時，產生3A。在合適鹼如NaOEt/EtOH的鹼性條件下，將插烯的醯胺3A與2當量式H2NC(＝NR)NH2胍的鹽酸鹽在70℃反應約15小時，形成乙酯3B。然後，在0.5當量NaOMe的MeOH溶液中將之前反應的產物與胺NH2R3在70℃縮合2天，產生醯胺1D。
方案3 式中R和R3的定義如本文所述也可如方案4所示合成噻吩羧醯胺。4A與NaH和三氟甲磺酸酐在DCM中室溫下反應60小時形成雙三氟甲磺酸酯4B。羧酸4C與1當量羰基二咪唑在THF中於室溫下反應約12小時，然後與合適胺NH2R3偶聯產生醯胺4D。合適的胺起始材料包括羥基胺、烷基胺、硝基胺、H2N-CN等。通過鈀(0.05當量Pd(dppf)2)催化的鈴木(Suzuki)反應(2當量DIEA，THF，在80℃反應12小時)將1.1當量雙三氟甲磺酸酯4B偶聯於硼酸4D，產生三氟甲磺酸酯4E。在回流條件下將胺(5當量RNH2或RRaNH的THF溶液)加入4E中反應約16小時產生嘧啶4F。
方案4 式中R、R1、R3的定義如本文所述鈀介導的偶聯形成嘧啶-噻吩鍵也可以得到吡啶基取代的噻吩，如方案5所示，其中用靶催化劑如Pd(PPh3)4的2.6當量Na2CO3(2M水溶液)溶液於70℃反應18小時將1當量硼酸偶聯於2-氯-4-碘吡啶5A。用過量(5-45當量)胺RRaNH的THF溶液在150℃取代得到的氯化物2天，產生5-(2-氨基吡啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺。
方案5合成5-(2-氨基吡啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺 式中R和R3的定義如本文所述可如方案6所示合成含有4-(5-氨基噻吩-2-基)嘧啶-2-胺核心的本發明化合物。在溶劑如甲醇中用10當量肼在70℃處理酯6A 16小時，形成醯肼6B。然後在乙酸中用1.05當量HCl(0.6M水溶液)和1當量NaNO2(4.0M水溶液)於0℃反應30分鐘將醯肼轉變為醯基疊氮6C。在加熱時化合物6C重排形成異氰酸酯，它可與胺(在二甲苯中於130℃反應30分鐘，然後與3當量R3NH2在130℃反應1小時)、醇(在二甲苯中於130℃反應30分鐘，然後與3當量R3OH在130℃反應1小時)或酸(在6當量1.5M HCl水溶液中於100℃反應16小時)反應，分別產生脲6D、氨基甲酸酯6E或胺6F。化合物6F還可被進一步醯化，如用R3C(＝O)OC(＝O)-咪唑醯化產生醯胺6G。
方案6合成4-(5-氨基噻吩-2-基)嘧啶-2-胺衍生物。
式中R和R3的定義如本文所述可如方案7所述合成含有5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-3-羧醯胺核心的本發明化合物，其中3-溴噻吩7C被鋰化，用二氧化碳猝滅該反應。得到的酸7D可進一步與胺偶聯產生相應的醯胺7E。
方案75-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-3-羧醯胺
式中R和R3的定義如本文所述可如方案8所示合成含有5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-氨基甲基核心的本發明化合物。在THF中於70℃下，用(PPh3)Pd(0)以2，4-二氯嘧啶官能化親核試劑8A後，在酸性條件下去除縮醛基團，然後接觸胺，通過乙醛8C形成相應亞胺。在還原性胺化條件下將乙醛8C的亞胺轉變為胺8D。取代氯化物8D產生所需胺8E。
方案8合成5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-氨基甲烷
可如方案9所述合成含有5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-磺醯胺核心的本發明化合物。將購自Maybridge(Maybridge，Trevillett，Tintagel，Cornwall，PL34 OHW，英國)的磺醯氯9A與胺R3NH2相接觸，其中R3＝4-氯苯乙基，然後用間氯過氧苯甲酸氧化產生化合物9B。用胺取代磺酸酯產生磺醯胺9C。
方案9合成5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-磺醯胺 實施例中還提供了製備這些化合物的合成方法的其它範例。
藥物劑型當用作藥物時，本發明化合物通常以藥物組合物的形式給藥。可通過各種途徑，包括口服、胃腸道外、透皮、局部、直腸和鼻內給予這些化合物。這些化合物在注射組合物和口服組合物中都有效。用藥學領域中熟知的方式製備這種組合物，它包含至少一種活性化合物。
本發明也包括含有一種或多種上述本發明化合物(作為活性成分)以及藥學上可接受的載體的藥物組合物。在製備本發明組合物的過程中，通常將活性成分與賦形劑混合、用賦形劑稀釋並封裝在載體中，載體可以是膠囊、藥囊、紙或其它容器的形式。所用賦形劑一般是適合給予人對象或其它哺乳動物的賦形劑。當賦形劑用作稀釋劑時，它可以是固體、半固體或液體材料，用作活性成分的載體(vehicle)、運載體(carrier)或介質。因此，該組合物可以是片劑、丸劑、粉末、錠劑、藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮液、乳劑、溶液、糖漿、氣霧劑(為固體或在液體介質中)、含有(例如)高達10重量％活性化合物的軟膏、軟明膠和硬明膠膠囊、栓劑、無菌注射溶液和無菌封裝粉末的形式。
在製劑的製備過程中，在與其它成分混合之前可能需要研磨活性化合物以提供合適粒度。如果活性化合物基本不溶，通常將它研磨到粒度小於200目。如果活性化合物基本溶於水，通常通過研磨將粒度調整到在製劑中基本均一地分布的程度，如約40目。
合適賦形劑的一些例子包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、澱粉、阿拉伯樹膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、無菌水、糖漿和甲基纖維素。製劑中還可包括潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油；溼潤劑；乳化劑和懸浮劑；防腐劑如甲基-和丙基羥基-苯甲酸鹽；甜味劑以及調味劑。可用本領域已知方法配製本發明組合物，以在給予患者後快速釋放、緩釋和延遲釋放活性成分。
藥物組合物及其單位劑型中活性成分即本發明化合物的量可因具體應用、具體化合物的效力和所需濃度而大大改變或調整。
優選將組合物配製成單位劑型，每劑含有約1-500mg，通常約5-100mg，偶爾約10-30mg活性成分。術語「單位劑型」指適合用作人對象和其它哺乳動物的單一劑型的物理上分開的單位，各單位含有經計算能產生所需療效的預定量的活性材料，再加上合適的藥物賦形劑。上述本發明化合物優選以不高於約藥物組合物的20重量％，更優選不高於約15重量％應用，餘量為藥學上惰性的載體。
活性化合物在寬劑量範圍內有效，通常給予藥學上或治療上有效的量。然而應理解，醫生根據相關情況，包括待治療的病症、所治療病症的嚴重性、選擇的給藥途徑、實際給予的化合物、個體患者的年齡、體重和反應以及患者症狀的嚴重性等決定實際給予的化合物量。
在治療或對抗溫血動物炎症的治療應用中，可通過任何合適途徑如口服、局部、透皮和/或胃腸道外給予能獲得和維持一定濃度的劑量的本發明化合物或其藥物組合物，所述濃度即活性組分在進行治療的動物中能有效治療的量或血液水平。通常，這種治療有效量的活性組分劑量(即有效劑量)的範圍是約0.1-100，更優選約1.0-50mg/kg體重/天。
為了製備固體組合物如片劑，將主要活性成分與藥物賦形劑混合形成含有本發明化合物的均一混合物的固體預製劑組合物。當提到這些預製劑組合物均一時，指活性成分均勻分散在整個組合物中，以致於不難將該組合物再分為同樣有效的單位劑型如片劑、丸劑和膠囊。然後，再將此固體預製劑分為含有(例如)0.1-約500mg本發明活性成分的上述類型的單位劑型。
本發明的片劑或丸劑可包衣或複合(compound)，以提供產生延長作用的優點的劑型。例如，片劑或丸劑可包含劑內組分和劑外組分，後者是前者包膜的形式。這兩種組分可由腸溶層(enteric layer)分開，腸溶層用於抵抗胃內崩解並使內部組分能夠完整地進入十二指腸或被延遲釋放。可將各種材料用於所述腸溶層或腸溶衣，這種材料包括多種聚合酸和聚合酸的混合物，這種材料例如紫膠、十六烷醇和纖維素乙酸酯。
本發明新組合物可摻入其中的、用於口服給藥或注射給藥的液體形式包括水溶液、適當調味的糖漿，水懸液或油懸液和用食用油如玉米油、棉花籽油、芝麻油、椰子油或花生油調味的乳劑，以及酏劑和類似藥物運載體。
用於吸入或吹入的組合物包括藥學上可接受的水性或有機溶劑的溶液或懸液，或其混合物和粉末。該液體或固體組合物可包含適當的上述藥學上可接受的賦形劑。優選通過口腔或鼻腔呼吸途徑給予該組合物以產生局部或全身效果。可用惰性氣體霧化優選的藥學上可接受的溶劑中的組合物。可從噴霧裝置(或噴霧裝置可連接於面罩)或間歇正壓呼吸機中直接吸入霧化溶液。優選經口或經鼻從以適當方式遞送該製劑的裝置給予溶液、懸液或粉末組合物。
以下劑型實施例闡明本發明的代表性藥物組合物。
劑型實施例1製備含有以下成分的硬明膠膠囊量成分 (mg/膠囊)活性成分 30.0澱粉 305.0硬脂酸鎂 5.0混合上述成分並填入硬明膠膠囊中，總量340mg。
劑型實施例2用以下成分製備片劑量成分(mg/片)活性成分25.0微晶纖維素 200.0膠體二氧化矽10.0硬脂酸 5.0混合這些組分並壓縮形成片劑，每片重240mg。
劑型實施例3製備含有以下組分的乾粉吸入劑成分重量％活性成分5乳糖95將活性成分與乳糖混合，將混合物加入乾粉吸入裝置中。
劑型實施例4如下所述製備片劑，每片含30mg活性成分量成分(mg/片)活性成分30.0mg澱粉45.0mg微晶纖維素 35.0mg聚乙烯吡咯烷酮 4.0mg(10％的無菌水溶液)羧甲基澱粉鈉4.5mg硬脂酸鎂0.5mg滑石粉1.0mg總計120mg
使活性成分、澱粉和纖維素通過20目美國篩(No.20 mesh U.S.sieve)，充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與得到的粉末混合，然後使其通過16目美國篩(No.16 meshU.S.sieve)。在50℃-60℃乾燥這樣產生的顆粒，並通過16目美國篩。羧甲基澱粉鈉、硬脂酸鎂和滑石粉先通過30目美國篩(No.30 mesh U.S.sieve)，然後加入該顆粒中，混合後在壓片機上壓縮產生片劑，每片重120mg。
劑型實施例5如下所述製備膠囊，每粒膠囊含有40mg藥物量成分 (mg/膠囊)活性成分 40.0mg澱粉 109.0mg硬脂酸鎂1.0mg總計 150.0mg混合活性成分、澱粉和硬脂酸鎂，通過20目美國篩，填入硬明膠膠囊中，總量150mg。
劑型實施例6如下所述製備栓劑，每劑含有25mg活性成分成分 量活性成分 25mg飽和脂肪酸甘油酯至 2,000mg將活性成分通過60目美國篩，懸浮於之前必須用最小加熱融化的飽和脂肪酸甘油酯中。然後將該混合物傾倒入標稱為2.0g容量的栓劑模具中，然後使之冷卻。
劑型實施例7如下所述製備懸浮劑，每5.0mL劑量含有50mg藥物成分量活性成分50.0mg黃原膠 4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％)50.0mg微晶纖維素(89％)蔗糖1.75g苯甲酸鈉10.0mg香料和顏料 q.v.
純化水至5.0mL混合活性成分、蔗糖和黃原膠，通過10目美國篩，然後與之前製備的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉的水溶液混合。在攪拌下用一些水稀釋苯甲酸鈉、香料和顏料並加入。然後加入足量水以產生所需體積。
劑型實施例8量成分 (mg/膠囊)活性成分 15.0mg澱粉 407.0mg硬脂酸鎂 3.0mg總計 425.0mg混合活性成分、澱粉和硬脂酸鎂，通過20目美國篩，填入硬明膠膠囊中，總量425.0mg。
劑型實施例9可如下所述製備皮下劑型成分 量活性成分 5.0mg玉米油 1.0mL
劑型實施例10可如下所述製備局部劑型成分量活性成分1-10g乳化蠟 30g液體石蠟20g白色軟石蠟 至100g將白色軟石蠟加熱至融化。摻入液體石蠟和乳化蠟並攪拌至溶解。加入活性成分並繼續攪拌直到分散。然後將該混合物冷卻至固體。
劑型實施例11可如下所述製備靜脈內劑型成分 量活性成分 250mg等滲鹽水 1000mL用於本發明方法的另一優選劑型採用透皮遞送裝置(「貼劑」)。可用這種透皮貼劑連續或不連續地輸注控制量的本發明化合物。透皮貼劑的構建和在遞送藥物中的應用是本領域熟知的。參見例如1991年6月11日公布的美國專利5,023,252，納入本文作為參考。可將這種貼劑構建為連續遞送藥物、脈衝遞送藥物或按需遞送藥物。
常常想要或需要將藥物組合物直接或間接引入腦中。直接技術通常包括將藥物遞送導管置入宿主的腦室系統中以避開血腦屏障。納入本文作為參考的美國專利5,011,472描述了用於將生物因子輸送到身體的特定解剖區域的一種可植入遞送系統。
通常優選間接技術，它通常包括配製組合物以通過將親水性藥物轉變為脂溶性藥物使藥物潛伏化。通常通過封閉藥物上存在的羥基、羰基、硫酸根和伯胺基團實現潛伏化，以使藥物的脂溶性更高並且更易於通過血腦屏障運輸。或者，可通過動脈內輸注可瞬時打開血腦屏障的高滲溶液增強親水性藥物的遞送。
可在《雷明頓藥物科學》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，Mace PublishingCompany，Philadelphia，PA，第17版本(1985)中發現適合用於本發明的其它劑型。
如上所述，本文所述化合物適合用於上述各種藥物遞送系統。此外，為了延長所給化合物的體內血清半衰期，可將化合物裝入膠囊、引入脂質體內腔、製備為膠體或可用能延長該化合物血清半衰期的其它常規技術處理化合物。可獲得製備脂質體的各種方法，如Szoka等，美國專利號4,235,871、4,501,728和4,837,028所述，各自納入本文作為參考。
給藥本發明化合物可用於抑制真核細胞中Akt的活性。Akt的激活與許多上遊事件相關，包括磷脂醯肌醇3-激酶(PI3K)介導的事件，響應於各種生長因子、細胞因子、胰島素、緩激肽、RANTES和內皮縮血管肽，Akt被徵集到質膜。Akt活化也與連接於胞外基質(ECM)和各種形式的細胞應激(如缺氧和熱激)相關。
已知的PKB底物包括但不限於Bcl-2促調亡家族成員(BAD)；通過FasL和Bim介導凋亡的FOXO家族fork-head轉錄因子；癌症相關性3』-磷酸酶PTEN；乳腺癌易感基因產物1(BRCA-1)；cAMP反應元件結合蛋白(CREB)；內皮一氧化氮合酶(eNOS)；NFκB抑制劑(I-κB)；無K(Lys)蛋白激酶-1(WNKl)，與II型假醛固酮減少症II(PHAII)相關的高血壓相關基因(Vitari等，2003)；和與細胞生長和癌症相關的其它蛋白。根據已鑑定的Akt底物數目和這些底物在細胞增殖性病症如癌症中的普遍性，預計也能鑑定到其它癌症相關性Akt底物。
抑制Akt活性的能力將允許調控Akt底物，包括本文所列底物的活性。由於已知Akt底物與特定形式的癌症相關如BRCA-1，或通常相信與抑制凋亡相關如Bcl-2，所以抑制Akt的能力會有利於預防或治療不受控制的細胞增殖，包括癌症。本發明可用於用本發明化合物和/或組合物治療哺乳動物中出現的癌症。哺乳動物包括例如人和其它靈長類，寵物或伴侶動物如犬和貓，實驗室動物如大鼠、小鼠和兔以及家畜如馬、豬、綿羊和牛。
類似地，已知PKA能活化與細胞周期調節、膽固醇運輸、激素信號轉導和信號轉導相關的基因表達，並已知能活化胞外基質(ECM)蛋白酶、神經肽、免疫基因、胰島素樣生長因子(IGF)家族成員和與精子發生、細胞生長、分化和增殖相關的其它蛋白(Tierney等，2003)。調控PKA活性的能力將能夠調控PKA底物，包括本文所列底物的活性。
此外，本發明化合物可用於治療至少部分由CDC7介導的病症。在癌細胞中發現CDC7水平升高。因此，考慮了本發明化合物(例如)通過抑制該酶調控CDC7活性。
腫瘤或新生物包括細胞繁殖不受控制並不斷進行的組織細胞生長。一些所述生長是良性的，但其它稱為「惡性」並可導致生物死亡。惡性腫瘤或「癌症」與良性生長的區別在於，除具有侵襲性細胞增殖以外，它們還可侵入周圍組織並轉移。而且，惡性腫瘤的特徵是它們嚴重丟失了分化特性(嚴重「去分化」)以及互相的組織關係和與周圍組織的組織關係。此特性稱為「間變」。
預計可用本發明化合物和/或組合物治療的腫瘤或新生物包括但不限於實體瘤，即癌、腺癌和肉瘤。癌包括滲入(侵入)周圍組織並產生轉移的衍生自上皮細胞的惡性腫瘤。腺癌是衍生自粒狀組織或衍生自形成可識別粒狀結構的組織的癌。另一大類癌症包括肉瘤，它們是細胞包埋在纖維狀或均一性物質如胚胎結締組織中的腫瘤。
具體說，本發明可用於治療乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、成膠質細胞瘤、黑色素瘤等。
可通過一種或多種方法和/或用一種或多種藥物組合物(其中一些見本文所述)將本發明化合物遞送給動物，如人患者。將有益藥理製劑遞送給人和其它動物的其它方法是本領域熟知的。
可按需改性具有所需生物活性的化合物，以提供所需特性如改進的藥理特性(如體內穩定性、生物利用度)或在診斷應用被檢測的能力。可用各種方式，例如通過測量該化合物在與肽酶或人血漿或血清孵育期間的半衰期測定穩定性。
為了診斷目的，可將各種標記連接於該化合物，以直接或間接提供可檢測信號。因此，可為各種最終目的用各種方式改性本發明化合物和/或組合物，而仍保持其生物活性。此外，可引入各種反應活性位點，以連接於顆粒、固體基材、大分子等。
標記化合物可用於各種體內或體外應用。可採用各種標記，如放射性核素(如發射γ射線的放射性同位素如鎝-99或銦-111)、螢光劑(如螢光素)、酶、酶底物、酶輔因子、酶抑制劑、化學發光化合物、生物發光化合物等。本領域普通技術人員知道結合於該複合物的其它合適標記，或能夠用常規實驗確定其它合適標記。用本領域普通技術人員公知的標準技術實現這些標記的結合。
本發明藥物組合物適合用於各種藥物遞送系統。適合用於本發明的劑型見《雷明頓藥物科學》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，Mace Publishing Company，Philadelphia，Pa.，第17版(1985)。
給予患者的量將因給予的藥物、給藥目的如預防或治療、病人狀態、給藥方式等而不同。在治療應用中，將組合物給予已患有疾病的患者，給藥量足以治癒或至少部分阻滯疾病及其併發症的進展和症狀。將足以完成此目的的量定義為「治療有效劑量」或「治療有效量」。此用途的有效量將取決於所治療病情以及主治醫師根據許多因素如疾病、病症或病情的嚴重性，患者的年齡、體重和總體情況等作出的判斷。
給予患者的化合物一般是上述藥物組合物的形式。可通過常規殺菌技術或過濾除菌使這些組合物無菌。得到的水溶液可包裝待用或凍幹，在給藥前將凍幹製劑與無菌水性載體混合。該化合物製劑的pH一般為約3-11，更優選約5-9，最優選約7-8。應理解用某些上述賦形劑、載體或穩定劑將導致形成藥物鹽。
本發明化合物和/或組合物的治療劑量將根據(例如)治療的具體用途、給予該化合物的方式、患者的健康和病情以及處方醫生的判斷而改變。例如，對於口服給藥，劑量範圍一般為約10μg-20mg/千克體重/天，優選約1mg-10mg/千克體重/天。另外，對於靜脈內給藥而言，劑量範圍一般為約5μg-10,000μg/千克體重，優選約500μg-5000μg/千克體重。考慮的其它給藥途徑包括但不限於鼻內、透皮、吸入、皮下和肌肉內。可由獲自體外或動物模型測試系統的劑量反應曲線外推有效劑量。
通常，通過用途相似的任何接受的給藥方式給予治療有效量的本發明化合物和/或組合物。可用標準藥學方法在細胞培養物或實驗動物中測定所述化合物的毒性和療效，如測定LD50(對50％群體致死的劑量)和ED50(在50％群體中有效治療的劑量)。毒性和療效的劑量比是治療指數，它可表示為LD50/ED50比。優選治療指數大的化合物。
獲自細胞培養測定和動物研究的數據可用於設計用於人的劑量範圍。該化合物的劑量優選在包括ED50、毒性很小或無毒性的循環濃度範圍內。該劑量可在此範圍內根據所用劑型和所用給藥途徑而改變。對於用於本發明方法的任何化合物和/或組合物，一開始可由細胞培養測定估計治療有效劑量。在動物模型中設計劑量，以獲得包括細胞培養中測定的IC50(受試化合物實現半數最大抑制活性的濃度)的循環血漿濃度範圍。這些信息可用於更準確地確定人中的有用劑量。可用(例如)高效液相色譜測定血漿水平。
提供以下合成和生物實施例是為了說明本發明，不應以任何方式解釋為限制本發明範圍。除非另有說明，所有溫度都表示為攝氏度。
實施例參照以下實施例，用本文所述方法或本領域熟知的其它方法合成本發明化合物。
用裝有2690分離模塊的Waters Millenium色譜系統(Milford，MA)進行高效液相色譜(HPLC)，以表徵化合物和/或中間體。分析柱是Alltech的Alltima C-18反相柱，4.6×250mm(Deerfield，IL)。用梯度洗脫，一般用5％乙腈/95％水起始，在40分鐘內逐步提高到100％乙腈。所有溶劑都含有0.1％三氟乙酸(TFA)。通過220或254nm處的紫外線(UV)吸收檢測化合物。HPLC溶劑來自Burdick和Jackson(Muskegan，MI)或Fisher Scientific(Pittsburgh，PA)。在一些情況下，通過採用背覆玻璃或塑料的矽膠板，如Baker-Flex矽膠1B2-F柔性板的薄層色譜(TLC)評價純度。在紫外光下，或用已知的碘蒸氣或其它各種顯色技術不難目測TLC結果。
在兩個LCMS裝置之一上進行質譜分析Waters系統(Alliance HT HPLC和Micromass ZQ質譜儀；柱Eclipse XDB-C18，2.1×50mm；溶劑系統5-95％(或35-95％或65-95％或95-95％)乙腈的水溶液(含有0.05％TFA)；流速0.8mL/分鐘；分子量範圍500-1500；錐電壓20V；柱溫度40℃)或Hewlett Packard系統(1100系列HPLC；柱Eclipse XDB-C18，2.1×50mm；溶劑系統1-95％乙腈的水溶液(含有0.05％TFA)；流速0.4mL/分鐘；分子量範圍150-850；錐電壓50V；柱溫度30℃)。所有報告質量都是質子化母離子的質量。
在Hewlett Packard裝置(裝有質量選擇性檢測器5973的HP6890系列氣相色譜；注射器體積1μL；起始柱溫度50℃；最終柱溫度250℃；升溫時間(ramp time)20分鐘；氣體流速1mL/分鐘；柱5％苯基甲基矽氧烷，型號HP190915-443，尺寸30.0m×25m×0.25m)上進行GCMS分析。
用Varian 300MHz NMR(Palo Alto，CA)對一些化合物進行核磁共振(NMR)分析。參比譜是溶劑的TMS或已知化學位移的溶劑。一些化合物樣品在升高溫度(如75℃)下運行，以促進樣品溶解性提高。
通過元素分析(Desert Analytics，Tucson，AZ)評價一些本發明化合物的純度。
在Laboratory Devices Mel-Temp裝置(Holliston，MA)上測定熔點。
用快速40色譜系統和KP-Sil，60A(Biotage，Charlottesville，VA)、或以矽膠(230-400目)為填充料的快速柱色譜，或採用C-18反相柱的HPLC進行製備型分離。用於快速40Biotage系統和快速柱色譜的溶劑一般為二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、己烷、丙酮、水性羥胺和三乙胺。用於反相HPLC的溶劑一般為不同濃度的乙腈和水(含有0.1％三氟乙酸)。
除非另有說明，所有溫度都表示為攝氏度。同時，在這些實施例和其它地方，縮寫的含義如下aq＝水性Boc2O＝二碳酸二叔丁酯
BuLi＝丁基鋰CDI＝N，N』-羰基二咪唑d＝天DCM＝二氯甲烷DIEA＝二異丙基乙胺DMAP＝二甲基氨基吡啶DMF-DMA＝二甲基甲醯胺縮二甲醇DMSO＝二甲基亞碸EDTA＝乙二胺四乙酸eq.＝當量ES/MS＝電子噴射質譜Et3N＝三乙胺EtOH＝乙醇g＝克GCMS＝氣相色譜質譜h＝小時HOAc＝乙酸HOBt＝1-羥基苯並三唑HPLC＝高效液相色譜kg＝千克L＝升M＝摩爾/升(molar)m/z＝質量/電荷比mCPBA＝間氯過氧苯甲酸MeOH＝甲醇mg＝毫克mL＝毫升mol＝摩爾N＝當量濃度(normal)nM＝納摩爾/升(nanomolar)NaOEt＝乙醇鈉
NaOMe＝甲醇鈉nBuLi＝正丁基鋰Pd(dppf)2＝1，1′-雙(聯苯基膦基)二茂鐵鈀Pd(PPh3)4＝四(三苯基膦)鈀(0)PyBrop＝溴代三吡咯烷代六氟磷酸鹽rt＝室溫Tf＝三氟甲磺酸酯THF＝四氫呋喃v/v＝體積/體積μM＝微摩爾/升(micromolar)以下實施例含有編號化合物。實施例中所用編號並不與表1-6中的編號對應。
實施例1合成N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺 步驟1縮合為醯胺(2)N，N』-羰基二咪唑(1.00當量)加入0.25M的化合物1的無水四氫呋喃溶液中。在室溫下攪拌該混合物2小時。加入4-氟苯乙胺(1.00當量)，再在室溫下攪拌該反應4小時。減壓去除揮發性物質。將該產物再溶解於二氯甲烷，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物2。ES/MS m/z 292(MH+)，C15H14FNO2S＝291g/mol。
步驟2形成乙烯化醯胺(3)將二甲基甲醯胺縮二甲醇(1.50當量)加入0.30M的化合物1(1.00當量)的無水甲苯溶液中。使該反應回流15h，然後回復到室溫。通過加入1∶1醚∶己烷來沉澱產物，真空過濾分離產物。再用1∶1醚∶己烷衝洗濾餅，然後減壓乾燥，產生化合物3，為棕褐色固體。ES/MS m/z 347(MH+)，C18H19FN2O2S＝346g/mol。
步驟3形成嘧啶環(4)將乙醇鈉(2.10當量)和鹽酸甲基胍(2.00當量)加入0.2M的化合物3(1.00當量)的無水乙醇懸液中。在80℃攪拌該反應2天，然後回復到室溫。用二氯甲烷稀釋該混合物，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用快速色譜在矽膠上純化粗產物(96∶4二氯甲烷∶甲醇)，產生化合物4。ES/MS m/z 357(MH+)，C18H17FN4OS＝356g/mol。
實施例2合成N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-羥乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺 步驟1形成嘧啶環(5)注本實施例所列「化合物3」的製備方式類似於N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺，除了(1)在步驟1中，用2，4-二氯苯乙胺替換4-氟苯乙胺和(2)將胺加入中間體醯基咪唑烷(acylimidazolide)後，在50℃攪拌該反應。
在100℃將化合物3(1.00當量)加入到1.2M的S-甲基異硫脲半硫酸鹽(3.00當量)的4∶1水∶吡啶溶液中。在100℃攪拌該混合物3天。冷卻到室溫後，用二氯甲烷稀釋該混合物，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用快速色譜在矽膠上純化粗產物(1∶1∶1己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷)，產生化合物5。ES/MS m/z424，426(MH+)，C18H15Cl2N3OS2＝424g/mol。
步驟2氧化為碸(6)在室溫下將間氯過氧苯甲酸(2.00當量)加入0.25 M的化合物5的二氯甲烷溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。用二氯甲烷稀釋該混合物，依次用1M碳酸鈉水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用快速色譜在矽膠上純化粗產物(1∶1∶1己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷)，產生化合物6。ES/MS m/z 456，458(MH+)，C18H15Cl2N3O3S2＝456g/mol。
步驟3用胺取代碸(4)將乙醇胺(R＝CH2CH2OH，2.00當量)加入0.5M的化合物6(1.00當量)的1，4-二烷溶液中。使該反應回流4小時，然後回復到室溫。減壓去除揮發性物質。反相HPLC純化產生化合物4。ES/MS m/z 437，439(MH+)，C19H18Cl2N4O2S＝437g/mol。
實施例3合成5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]N-(2-苯基乙基)噻吩-2-羧醯胺 步驟1插烯的醯胺(7)的形成將二甲基甲醯胺縮二甲醇(2.50當量)加入0.30M的化合物1(1.00當量)的無水甲苯溶液中。使該反應回流15小時，然後回復到室溫。通過加入1∶1醚∶己烷沉澱產物，真空過濾分離產物。再用1∶1醚∶己烷衝洗濾餅，然後減壓乾燥，產生化合物7，為棕褐色固體。ES/MS m/z 240(MH+)，C11H13NO3S＝239g/mol。
步驟2環化為氨基嘧啶(8)在室溫下將乙醇鈉(2.10當量)和鹽酸甲基胍(R＝Me，2.00當量)加入0.2M的化合物7(1.00當量)的無水乙醇溶液中。在70℃攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。用二氯甲烷稀釋該漿液，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物8。ES/MS m/z 264(MH+)，C12H13N3O2S＝263g/mol。
步驟3縮合為醯胺(9)方法A
將苯乙胺(R3＝苯乙基、2.50當量)和甲醇鈉(0.500當量)加入0.2M的化合物8(R＝Me，1.00當量)的甲醇溶液中。使該反應回流2天，然後回復到室溫。減壓去除揮發性物質。反相HPLC純化產生化合物9。ES/MS m/z 339(MH+)，C18H18N4OS＝338g/mol。
方法B將氫化鈉(2.00當量)加入1.1M的2-氨基-4-氯苯並噻唑(R3＝4-氯苯並噻唑-2-基，2.20當量)的N，N』-二甲基甲醯胺溶液中。攪拌該混合物15分鐘。在20分鐘內逐滴加入0.5 M的化合物8(R＝Me，1.00當量)的N，N』-二甲基甲醯胺溶液。室溫攪拌該反應2小時，然後通過加入水猝滅反應。反相HPLC純化產生化合物9。ES/MS m/z 402，404(MH+)，C17H12ClN5OS2＝402g/mol。
實施例4合成N-(4-甲氧基-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺 步驟1保護為氨基甲酸叔丁酯(11)將二碳酸二叔丁酯(1.20當量)、4-二甲基氨基吡啶(0.200當量)和三乙胺(1.20當量)加入0.5M的化合物10的四氫呋喃溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。用乙酸乙酯稀釋該混合物，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物11，它無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 364(MH+)，C17H21N3O4S＝363g/mol。
步驟2皂化為羧酸(12)將氫氧化鈉水溶液(2.00當量)加入0.2M的化合物11的乙醇溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。將殘留物再溶解於二氯甲烷，依次用稀鹽酸和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物11，它無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 336(MH+)，C15H17N3O4S＝335g/mol。
步驟3縮合為醯胺(13)將N，N』-羰基二咪唑(1.00當量)加入0.2M的化合物12的無水四氫呋喃溶液中。50℃攪拌該混合物1小時。使該溶液回復到室溫，加入2-氨基-4-甲氧基苯並噻唑(R3＝4-甲氧基苯並噻唑-2-基，1.10當量)。再在50℃攪拌該溶液15小時。減壓去除揮發性物質。將殘留物再溶解於二氯甲烷，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物13，可用快速色譜進一步純化。ES/MS m/z 498(MH+)，C23H23N5O4S2＝497g/mol。
步驟4去保護為游離胺(14)將鹽酸(30當量)加入0.1M的化合物13的甲醇溶液中。50℃攪拌該混合物4小時。用二氯甲烷稀釋該混合物，依次用1M碳酸鈉水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物14。ES/MS m/z398(MH+)，C18H15N5O2S2＝397g/mol。
實施例5合成N-(4-氟苄基)-N′-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}脲、5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基氨基甲酸4-氟苄基酯和3-(4-氟苯基)-N-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}丙醯胺
步驟1轉化為醯基醯肼(15)將水合肼(10.0當量)加入0.5M的化合物10的甲醇懸液中。使該混合物回流14小時，回復到室溫。通過加入水沉澱產物，真空過濾收集產物。用甲醇衝洗濾餅，，在乾燥器中乾燥，產生化合物15。ES/MS m/z 250(MH+)，C10H11N5OS＝249g/mol。
步驟2將醯基醯肼轉化為羰基疊氮(16)將0.6M鹽酸水溶液(1.05當量)加入1.1M的化合物15的冰醋酸懸液中。在30分鐘內逐滴加入4.0M的亞硝酸鈉水溶液(1.00當量)。用1體積的水稀釋該漿液並過濾。將固體懸浮於水中，用6M的氫氧化鈉水溶液將pH調整到7-8。真空過濾收集沉澱，用水衝洗沉澱。在乾燥器中乾燥黃色固體，產生化合物16。ES/MS m/z261(MH+)，C10H8N6OS＝260g/mol。
步驟3a將羰基疊氮轉化為脲(17)N-(4-氟苄基)-N′-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}脲在130℃攪拌0.2 M的化合物16(1.00當量)的二甲苯溶液30分鐘。加入4-氟苄胺(R3＝4-氟苄基，2.00當量)，再在130℃攪拌該混合物1小時。減壓去除揮發性物質。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物17。ES/MS m/z 358(MH+)，C17H16FN5OS＝357g/mol。
步驟3b將羰基疊氮轉化為氨基甲酸酯(18)5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基氨基甲酸4-氟苄基酯在130℃攪拌0.2M的化合物16(1.00當量)的二甲苯溶液30分鐘。加入4-氟苄基醇(R3＝4-氟苄基，2.00當量)，再在130℃攪拌該混合物1小時。減壓去除揮發性物質。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物18。ES/MS m/z 359(MH+)，C17H15FN4O2S＝358g/mol。
步驟3c將羰基疊氮重排為胺(19)在100℃攪拌0.25M的化合物16(1.00當量)在1.5M鹽酸中的懸液14小時。用6N氫氧化鈉水溶液將混合物的pH調整為9。用二氯甲烷萃取水相。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用快速色譜在矽膠上純化粗產物(94∶6二氯甲烷∶甲醇)，產生化合物19。ES/MS m/z 207(MH+)，C9H10N4S＝206g/mol。
步驟4縮合為醯胺(20)3-(4-氟苯基)-N-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}丙醯胺將N，N』-羰基二咪唑(1.00當量)加入0.25 M的4-氟苯基丙酸(R3＝4-氟苯乙基、1.00當量)的無水四氫呋喃溶液中。50℃攪拌該混合物1小時。加入化合物19(1.00當量)，再在50℃攪拌該反應2小時。減壓去除揮發性物質。將該產物再溶解於二氯甲烷，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物20。ES/MS m/z 357(MH+)，C18H17FN4OS＝356g/mol。
實施例6合成N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[5-甲基-2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺
步驟1縮合為醯胺(22)將N，N』-羰基二咪唑(1.00當量)加入0.28M的5-(二羥基硼烷基)-2-噻吩羧酸的無水四氫呋喃溶液中。室溫攪拌該混合物1小時。加入4-氟苯乙胺(R3＝4-氟苯乙基、1.00當量)，再在室溫下攪拌該反應12小時。減壓去除揮發性物質。將產物再溶解於乙酸乙酯，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物22。ES/MS m/z 294(MH+)，C13H13BFNO3S＝293g/mol。
步驟2鈴木偶聯為醯胺(23)將Pd(dPPf)2(0.05當量)加入0.34M的化合物22(R3＝4-氟苯乙基、1.00當量)和化合物21(R1＝Me，1.1當量)的無水四氫呋喃溶液中，然後加入二異丙基乙胺(2.0當量)。用氬氣吹掃反應混合物，加熱到80℃12小時。減壓去除揮發性物質。將產物再溶解於乙酸乙酯，依次用水、飽和偏亞硫酸氫鈉和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用Biotage以20％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物23。ES/MS m/z 490(MH+)，C19H15F4N3O4S2＝489g/mol。
步驟3形成氨基嘧啶環，以產生N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[5-甲基-2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺(24)在油浴中將甲胺(R＝Me，2.0M的四氫呋喃溶液，5.0當量)和化合物23(R1＝Me；R3＝4-氟苯乙基、1.0當量)的混合物加熱到150℃ 16小時。減壓去除揮發性物質。用Biotage以60％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物24。ES/MS m/z371(MH+)，C19H19FN4OS＝370g/mol。
實施例7合成N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)吡啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺 步驟1鈴木偶聯為醯胺(25)Pd(PPh3)4(0.05當量)加入0.37M的化合物22(R3＝4-氟苯乙基、1.0當量)、2-氯-4-碘吡啶(1.2當量)和碳酸鈉(2.0M水溶液，2.6當量)的四氫呋喃溶液中。用氬氣吹掃反應混合物，加熱到70℃18小時。減壓去除揮發性物質。將產物再溶解於乙酸乙酯，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用Biotage以40％乙酸乙酯的己烷溶液純化產物，產生化合物25。ES/MS m/z 361(MH+)，C18H14ClFN2OS＝360g/mol。
步驟3形成氨基嘧啶環(26)在油浴中將甲胺(2.0M四氫呋喃溶液，45當量)和化合物25(1.0當量)的混合物加熱到150℃2天。減壓去除揮發性物質。將產物再溶解於乙酸乙酯，依次用5％NaOH和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用Biotage以90％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物26。ES/MS m/z 356(MH+)，C19H18FN3OS＝355g/mol。
實施例8合成N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-3-羧醯胺
步驟1形成插烯的醯胺(27)將二甲基甲醯胺縮二甲醇(2.50當量)加入0.48M的2-乙醯基-4-溴噻吩(1.00當量)的無水甲苯溶液中。使該反應回流20小時，然後回復到室溫。通過加入1∶1醚∶己烷沉澱產物，真空過濾分離產物。再用1∶1醚∶己烷衝洗濾餅，然後減壓乾燥，產生化合物27。ES/MS m/z 260(MH+)。
步驟2形成嘧啶環(28)將乙醇鈉(2.0當量)和鹽酸甲基胍(R＝Me，2.00當量)加入0.25M的化合物27(1.00當量)的無水乙醇懸液中。在75℃攪拌該反應18小時，然後回復到室溫。用乙酸乙酯稀釋該混合物，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用己烷研磨粗產物，過濾產生化合物28。ES/MS m/z 270(MH+)。
步驟3形成羧酸(29)在-78℃，10分鐘內將BuLi(2.5M己烷溶液，2.5當量)加入化合物28(R＝Me，1.0當量)在THF/醚(1∶1)中的混合物中。該反應混合物在-78℃再攪拌10分鐘。將CO2吹入反應溶液40分鐘。然後使反應回復到室溫，攪拌12小時。用冰醋酸(5.0當量)水溶液猝滅反應混合物。減壓去除揮發性物質。將產物再溶解於乙酸乙酯，用鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生所需產物29。ES/MS m/z 236(MH+)。
步驟4形成醯胺鍵以產生N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-3-羧醯胺(30)將二異丙基乙胺(3.0當量)加入化合物29(R＝Me，1.0當量)、PyBrop(1.2當量)、HOBt(1.2當量)混合物的四氫呋喃溶液中。室溫攪拌該混合物1小時。將2，4-二氯苯乙胺(R3＝2，4-二氯苯乙基、1.2當量)加入該溶液。室溫攪拌該反應溶液18小時。減壓去除揮發性物質。將產物再溶解於乙酸乙酯，用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。反相HPLC純化產生化合物30。ES/MS m/z 407(MH+)，C18H16Cl2N4OS＝406g/mol。
實施例9合成4-[5-({[2-(4-氯苯基)乙基]氨基}甲基)噻吩-2-基]-N-甲基嘧啶-2-胺 步驟1Negishi偶聯為4-(2-噻吩基)嘧啶(32)將四(三苯基膦)鈀(0)(0.050當量)加入脫氣的0.50M的2，4-二氯嘧啶(1.0當量)和5-(1，3-二氧戊環-2-基)-2-噻吩基溴化鋅31(1.0當量)的四氫呋喃溶液。在70℃攪拌該混合物16小時，然後回復到室溫，用醚稀釋。依次用0.5M pH9的EDTA水溶液和鹽水洗滌該溶液。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用快速色譜在矽膠上純化粗產物(1∶1∶1己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷)，產生化合物32。ES/MS m/z 269(MH+)，C11H9ClN2O2S＝269g/mol。
步驟2二氧戊環去保護為醛(33)將鹽酸(6.0當量)加入0.10M的化合物32的丙酮懸液中。室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。將殘留物再溶解於醚，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾，濃縮，粗醛33無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 225(MH+)，C9H5ClN2OS＝225g/mol。
步驟3還原性胺化為胺(34)將4-氯苯乙胺(1.1當量)加入0.15M的化合物33(1.0當量)的甲苯溶液中。使該混合物回流4.5小時。減壓去除揮發性物質。將殘留物再溶解於甲醇，製備0.15M溶液。加入硼氫化鈉(1.3當量)。室溫攪拌該混合物2小時。減壓去除揮發性物質。用快速色譜在矽膠上純化粗產物(96∶4二氯甲烷∶甲醇)，產生化合物34。ES/MS m/z364(MH+)，C17H15Cl2N3S＝364g/mol。
步驟4親核取代為2-氨基嘧啶(35)和(36)0.05M化合物34(1.0當量)在2.0M甲胺(R＝Me)的四氫呋喃(40當量)溶液中的溶液回流過夜。減壓去除揮發性物質。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物35，4-[5-({[2-(4-氯苯基)乙基]氨基}甲基)噻吩-2-基]-N-甲基嘧啶-2-胺。ES/MS m/z359(MH+)，C18H19ClN4S＝359g/mol。
或者，0.05M化合物34(1.0當量)的1∶1 1，4-二烷∶氫氧化銨溶液回流過夜。減壓去除揮發性物質。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物36，4-[5-({[2-(4-氯苯基)乙基]氨基}甲基)噻吩-2-基]嘧啶-2-胺。ES/MS m/z 345(MH+)，C17H17ClN4S＝345g/mol。
實施例10合成5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-磺醯胺和N-[2-(4-氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯胺 步驟1形成磺醯胺(38)將4-氯苯乙胺(1.0當量)和三乙胺(1.0當量)加入0.20M的5-[2-(甲硫基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯氯37(1.0當量)的二氯甲烷溶液中。室溫攪拌該反應3小時。加入間氯過氧苯甲酸(3.0當量)，再在室溫攪拌該反應4小時。用二氯甲烷稀釋該反應混合物，依次用1M碳酸鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗產物38無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 458(MH+)，C17H16ClN3O4S3＝458g/mol。
步驟2親核取代為氨基嘧啶(39)和(40)將2.0M甲胺溶液(5.0當量，R＝Me)加入0.20M的化合物38(1.0當量)的1，4-二烷溶液中，70℃攪拌過夜。減壓去除揮發性物質。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物39，N-[2-(4-氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯胺。ES/MSm/z 409(MH+)，C17H17ClN4O2S2＝409g/mol。
或者，將氫氧化銨(15當量，R＝H)加入0.20M的化合物38(1.0當量)的1，4-二烷溶液中，回流過夜。減壓去除揮發性物質。用反相HPLC純化粗產物，產生化合物40，5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-磺醯胺。ES/MS m/z395(MH+)，C16H15ClN4O2S2＝395g/mol。
實施例11合成3-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-6-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩並[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮和6-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩並[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮
步驟1噻吩(42)的溴化將三溴化苯基三甲基銨(3.00當量)和碳酸鈣(4.00當量)加入0.3M的3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯41的溶液中。室溫攪拌該混合物16小時並過濾。濃縮並層析(1∶1己烷∶乙酸乙酯)濾出液，產生所需溴化物43。ES/MS m/z 236，238(MH+)，C6H6BrNO2S＝236g/mol。
步驟2環化為醯胺(43)將二甲基甲醯胺縮二甲醇(2.00當量)加入0.5M的化合物42的二甲苯溶液中。在130-135℃攪拌該混合物2天。減壓去除揮發性物質。將剩餘物再溶解於1，4-二烷中，產生0.3M溶液。加入2，4-二氯苯乙胺(1.00當量)和對甲苯磺酸(0.2當量)，再在100℃攪拌該反應21小時。使反應混合物回復到室溫，用乙酸乙酯稀釋，依次用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相、過濾、濃縮並層析(1∶1己烷∶乙酸乙酯)，產生化合物43。ES/MS m/z 403，405(MH+)，C14H9BrCl2N2OS＝404g/mol。
步驟3Sonogashira和去保護為炔(44)將三甲基甲矽烷基乙炔(1.2當量)、二氯雙(三苯基膦)鈀(0.04當量)和碘化銅(0.06當量)加入溴化物43的2∶1四氫呋喃∶三乙胺脫氣溶液中。70℃攪拌該混合物16小時，然後冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，和通過矽膠塞過濾。濃縮濾出液並再溶解，得到0.05M的甲醇溶液。加入碳酸鉀(2.0當量)，室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。將剩餘物再溶解於二氯甲烷，依次用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮，產生所需炔44。ES/MS m/z 349(MH+)，C16H10Cl2N2OS＝349g/mol。
步驟4水合為酮(45)將2.0N硫酸水溶液(20當量)加入0.05M的炔44的1，4-二烷溶液中。使該混合物回流16小時，回復到室溫。減壓去除揮發性物質。加入乙酸乙酯。有機層用硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮並層析，產生所需酮45。ES/MS m/z 367(MH+)，C16H12Cl2N2O2S＝367g/mol。
步驟5形成插烯的醯胺(46)將二甲基甲醯胺縮二甲醇(2.0當量)加入0.20M的化合物45(1.0當量)的無水甲苯溶液中。使該反應回流40h，然後回復到室溫。減壓去除揮發性物質。醯胺46無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 422(MH+)，C19H17Cl2N3O2S＝422g/mol。
步驟6形成嘧啶環(47)乙醇鈉(3.0當量)和鹽酸甲基胍(R＝Me，3.0當量)或鹽酸胍(R＝H，3.0當量)加入0.2M的化合物46的無水乙醇懸液中。70℃攪拌該反應2天，然後回復到室溫。用反相HPLC純化粗產物，產生47。以下數據是R＝Me時的數據。ES/MS m/z 432(MH+)，C19H15Cl2N5OS＝432g/mol。
實施例12合成3-氨基-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺 步驟1Sonogashira和去保護為炔(52)將三甲基甲矽烷基乙炔(1.2當量)、二氯雙(三苯基膦)鈀(0.04當量)和碘化銅(0.06當量)加入溴化物51的2∶1四氫呋喃∶三乙胺脫氣溶液中。70℃攪拌該混合物16h，然後冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，通過矽膠塞過濾。濃縮濾出液並再溶解，得到0.05M的甲醇溶液中。加入碳酸鉀(2.0當量)，室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。將剩餘物再溶解於二氯甲烷，依次用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮，產生所需炔52。ES/MS m/z 182(MH+)，C8H7N2OS＝181g/mol。
步驟2水合為酮和保護為氨基甲酸叔丁酯(53)
將2.0N硫酸水溶液(20當量)加入0.05M的炔52的1，4-二烷溶液中。80℃攪拌該混合物16h，回復到室溫。減壓去除揮發性物質。加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉水溶液。用硫酸鈉乾燥有機層，過濾並濃縮。
將二碳酸二叔丁酯(2.50當量)和4-二甲基氨基吡啶(0.200當量)加入0.3M的粗產物的四氫呋喃溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。用快速色譜純化剩餘物(2∶1己烷∶乙酸乙酯)，產生所需酮53。ES/MS m/z 400(MH+)，C18H25NO7S＝399g/mol。
步驟3形成插烯的醯胺(54)將二甲基甲醯胺縮二甲醇(2.5當量)加入0.20M的化合物53(1.0當量)的無水甲苯溶液中。使該反應回流18h，然後回復到室溫。減壓去除揮發性物質。醯胺54無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 455(MH+)，C21H30N2O7S＝454g/mol。
步驟4形成氨基嘧啶(55)將乙醇鈉(4.1當量)和鹽酸甲基胍(4.0當量)加入0.2M的化合物54的無水乙醇懸液中。70℃攪拌該反應3天，然後回復到室溫。減壓去除揮發性物質。加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉水溶液。用硫酸鈉乾燥有機層，過濾並濃縮。氨基嘧啶55無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 465(MH+)，C21H28N4O6S＝464g/mol。
步驟5保護為氨基甲酸叔丁酯(56)將二碳酸二叔丁酯(3.0當量)、三乙胺(2.0當量)和4-二甲基氨基吡啶55(0.20當量)加入0.2M的粗產物的四氫呋喃溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。用快速色譜純化剩餘物(1∶1己烷∶乙酸乙酯)，產生所需產物56。ES/MS m/z565(MH+)，C26H36N4O8S＝564g/mol。
步驟6皂化為羧酸(57)將1.0M氫氧化鈉水溶液(3.0當量)加入0.1M的氨基甲酸叔丁酯56的乙醇溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。用二氯甲烷稀釋該反應混合物，依次用稀鹽酸和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機層，過濾並濃縮。羧酸57無需進一步純化即可使用。ES/MSm/z 551(MH+)，C23H34N4O8S＝550g/mol。
步驟7縮合為醯胺(58)將N，N』-羰基二咪唑(1.0當量)加入0.1M的羧酸57的無水THF溶液中。60℃攪拌該混合物3h。使該溶液回復到室溫；加入2，4-二氯苯乙胺(1.1當量)。在60℃攪拌該溶液3天。使該混合物回復到室溫，用1體積甲醇和2體積3M鹽酸稀釋。60℃攪拌該混合物3h。減壓去除揮發性物質，用反相HPLC純化剩餘物，得到最終產物58。ES/MS m/z 422(MH+)，C18H17Cl2N5OS＝422g/mol。
實施例13合成4-{5-[(E)-2-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)乙烯基]噻吩-2-基}嘧啶-2-胺和4-{5-[(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)乙炔基]噻吩-2-基}嘧啶-2-胺 步驟1形成插烯的醯胺(62)將二甲基甲醯胺縮二甲醇(2.50當量)加入0.30M的化合物61(1.00當量)的無水甲苯溶液中。使該反應回流15h，然後回復到室溫。通過加入1∶1醚∶己烷沉澱產物，真空過濾分離產物。再用1∶1醚∶己烷衝洗濾餅，然後減壓乾燥，產生化合物62，為棕褐色固體。ES/MS m/z 260，262(MH+)，C9H10BrNOS＝260g/mol。
步驟2環化為氨基嘧啶(63)在室溫下將乙醇鈉(2.10當量)和鹽酸甲基胍(2.00當量)加入0.2M的化合物62(1.00當量)的無水乙醇溶液中。70℃攪拌該混合物16h。減壓去除揮發性物質。用二氯甲烷稀釋該漿液，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物63。ES/MS m/z 256，258(MH+)，C12H13N3O2S＝256g/mol。
步驟3Sonogashira和去保護為炔(64)將三甲基甲矽烷基乙炔(1.5當量)、二氯雙(三苯基膦)鈀(0.04當量)和碘化銅(0.06當量)加入溴化物63的2∶1四氫呋喃∶三乙胺脫氣溶液中。70℃攪拌該混合物16h，然後冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，通過矽膠塞過濾。濃縮濾出液並再溶解，得到0.07M的甲醇溶液中。加入碳酸鉀(2.0當量)，室溫攪拌該混合物3h。減壓去除揮發性物質。層析剩餘物，產生所需炔64。ES/MS m/z 202(MH+)，C10H7N3S＝201g/mol。
步驟4還原為烯(66)將喹啉(0.20當量質量(eq.by mass))和Lindlar催化劑(0.10當量質量)加入0.05M的炔64的乙酸乙酯懸液中。在氫氣球下攪拌該混合物過夜，過濾並濃縮。烯66無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 204(MH+)，C10H7N3S＝203g/mol。
步驟5鈀-催化的偶聯(65和67)將來自步驟3的炔64或來自步驟4的烯66與2-溴-4-氯苯並噻唑(1.0當量)、二環己基甲胺(1.1當量)、三叔丁基膦(0.03當量)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(0.015當量)和二烷混合在微波小瓶中。在190℃微波處理該混合物8分鐘。用乙酸乙酯稀釋該混合物，通過矽膠塞過濾，濃縮，用反相HPLC純化，產生所需產物65或67。
實施例14合成N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-(2-氨基-1H-咪唑-4-基)噻吩-2-羧醯胺
步驟1溴化為α-溴代酮(72)將溴(1.0當量)加入0.75M的5-乙醯噻吩-2-羧酸乙酯71(1.0當量)的1，4-二烷溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。加入醚。用水洗滌該溶液，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，產生α-溴代酮72。粗產物無需進一步純化即可使用。
步驟2環化為乙醯胺基咪唑(73)將α-溴代酮72溶於乙腈。加入1-乙醯胍(2.50當量)。80℃攪拌該混合物6h。減壓去除揮發性物質。將剩餘物再溶解於DCM，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，產生乙醯胺基咪唑73。用快速色譜純化該產物(1∶1丙酮∶己烷)。ES/MS m/z 280(MH+)，C12H13N3O3S＝279g/mol。
步驟3切下乙醯基(74)將2.0N硫酸水溶液(3.0當量)加入0.3M的化合物73的甲醇溶液中。70℃攪拌該混合物18h。減壓去除揮發性物質。將剩餘物再溶解於DCM，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，產生化合物74。粗產物無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 238(MH+)，C10H11N3O2S＝237g/mol。
步驟4保護為氨基甲酸叔丁酯(75)將二碳酸二叔丁酯(3.0當量)和4-二甲基氨基吡啶(0.20當量)加入0.3M的化合物74的四氫呋喃溶液中。室溫攪拌該混合物16小時，濃縮，用快速色譜純化(2∶1己烷∶乙酸乙酯)，產生氨基甲酸叔丁酯75。ES/MS m/z 538(MH+)，C25H35N3O8S＝537g/mol。
步驟5皂化為羧酸(76)將氫氧化鉀水溶液(4.0當量)加入0.2M的氨基甲酸叔丁酯75的乙醇溶液中。室溫攪拌該混合物5天。減壓去除揮發性物質。用鹽酸將pH調節到約3。加入二氯甲烷。濾出沉澱，用水洗滌，在乾燥器中乾燥，產生羧酸76，無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 410(MH+)，C18H23N3O6S＝409g/mol。
步驟6縮合為醯胺(77)將N，N』-羰基二咪唑(1.0當量)加入0.2M的羧酸76的無水N，N-二甲基甲醯胺溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。加入1-疊氮甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙胺(1.1當量)。再在50℃攪拌該溶液16h，產生醯胺77。用快速色譜純化該混合物(1∶2己烷∶乙酸乙酯)。ES/MS m/z 636，638(MH+)，C27H31ClN7O5S＝636g/mol。
步驟7氫化和去保護(78)將10％碳載鈀(0.10當量質量)加入0.05M的醯胺77的甲醇脫氣溶液中。在氫氣氣氛下攪拌該混合物2h。過濾該混合物，用等體積3.0M鹽酸於50℃處理3h。濃縮產物並用HPLC純化，產生所需產物78。
實施例15合成2-氨基-4-苯硫基-嘧啶衍生物 步驟1保護為氨基甲酸叔丁酯(81)
將二碳酸二叔丁酯(1.20當量)、4-二甲基氨基吡啶(0.200當量)和三乙胺(1.20當量)加入0.5M的80(R＝H，Me)的四氫呋喃溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。用乙酸乙酯稀釋該混合物，依次用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生化合物81，它無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 364(MH+)，C17H21N3O4S＝363g/mol。
步驟2皂化為羧酸(82)將氫氧化鈉水溶液(2.00當量)加入0.2M的氨基甲酸叔丁酯81的乙醇溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。用鹽酸將pH調節到3-4。濾出沉澱，用水洗滌，在乾燥器中乾燥，產生羧酸82，無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z336(MH+)，C15H17N3O4S＝335g/mol。
步驟3縮合為醯胺(83)將N，N』-羰基二咪唑(1.00當量)加入0.2M的羧酸的無水1，4-二烷溶液中。60℃攪拌該混合物3h。使該溶液回復到室溫，加入合適胺(1.1當量)。再在60-100℃攪拌該溶液16h。使該混合物回復到室溫，用1體積甲醇和2體積3M鹽酸稀釋。60℃攪拌該混合物18h。減壓去除揮發性物質，，用反相HPLC純化剩餘物，產生終產物(83)(R3的定義如本文所述)。
步驟4任選的附加步驟當R3是氨基甲基二氯苯乙基取代基時，需要附加步驟。來自前一步驟的產物不用純化。取而代之，將它再溶解於甲醇，並用惰性氣體衝洗。加入碳載鈀(0.1當量質量)，在氫氣下攪拌該混合物2h。過濾並濃縮該混合物，然後用HPLC純化。將氨基甲基保護為疊氮甲基。此步驟將疊氮化物還原為伯胺。
實施例16合成N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-吡啶-4-基噻吩-2-羧醯胺
R＝(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基除了合成標題化合物外，也用此合成方法來合成本發明的其它2-雜芳基噻吩、吡唑、氨基吡啶和醯氨基吡啶。
步驟1Negishi偶聯為4-(2-噻吩基)吡啶(85)將四(三苯基膦)鈀(0)(0.050當量)加入0.50M的4-溴吡啶(1.0當量)和5-乙氧基羰基-2-噻吩基溴化鋅84(1.0當量)的四氫呋喃脫氣溶液中。70℃攪拌該混合物16h，然後回復到室溫，用醚稀釋。依次用0.5M pH9的EDTA水溶液和鹽水洗滌該溶液。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用快速色譜在矽膠上純化粗產物(1∶1∶1己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷)，產生化合物2。ES/MS m/z 234(MH+)，C12H11NO2S＝233g/mol。
步驟2皂化為羧酸(86)將氫氧化鈉水溶液(2.00當量)加入0.2M的酯85的乙醇溶液中。室溫攪拌該混合物16小時。減壓去除揮發性物質。用鹽酸將pH調節到3-4。濾出沉澱，用水洗滌，在乾燥器中乾燥，產生羧酸86，無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 206(MH+)，C10H7NO2S＝205g/mol。
任選步驟2』用於合成5-[2-(乙醯氨基)吡啶-4-基]-N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]噻吩-2-羧醯胺將0.5M的NH3的二烷(2.0當量)溶液和等體積的濃氫氧化銨加入2-氟-4-(噻吩-2-基-5-羧酸)中。在密封容器中於120℃攪拌該混合物3天。濃縮該混合物，無需進一步純化即可使用。將乙酸酐(1.5當量)和二異丙基乙胺(2.5當量)加入0.1M的粗產物溶液。使混合物在100℃回流4天。使該混合物回復到室溫，用水稀釋。將該混合物的pH調節到3-4，加入乙酸乙酯。用硫酸鈉乾燥有機層，過濾並濃縮。粗產物無需進一步純化即可使用。
步驟3縮合為醯胺(87)將N，N』-羰基二咪唑(1.00當量)加入0.2M的羧酸86的無水1，4-二烷溶液中。60℃攪拌該混合物3h。使該溶液回復到室溫；加入合適胺(1.1當量)。再在60-100℃攪拌該溶液16h。使該混合物回復到室溫，用5體積甲醇稀釋。用氬氣衝洗反應容器。加入催化性10％碳載鈀。在H2下攪拌該混合物2h，用氬氣衝洗，過濾。減壓去除揮發性物質，用反相HPLC純化剩餘物，得到最終產物87。ES/MS m/z 406(MH+)，C19H17Cl2N3OS＝406g/mol。
實施例17合成2-氨基-4-氯苯並[d]噻唑-6-腈 標題化合物是本發明化合物製備中的有用中間體。
步驟1合成異硫氰酸酯(92)將硫光氣(1.1當量)加入0.5M的4-氨基-3-氯苯並噻唑91(1.00當量)的甲苯懸液中。110℃攪拌該混合物16h。減壓去除揮發性物質，產生化合物92，它無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 195(MH+)，C8H3ClN2S＝194g/mol。
步驟2合成硫脲(93)將化合物92(1.0當量)懸浮於1，4-二烷溶液中。加入濃氫氧化銨(2.0當量)。室溫攪拌該混合物30分鐘。將該漿液濃縮到其初始體積的一半左右，然後過濾。用醚衝洗沉澱，然後在乾燥器中減壓乾燥，產生化合物93。ES/MS m/z 212(MH+)，C8H6ClN3S＝211g/mol。
步驟3環化為6-氰基苯並噻唑(94)在室溫下用15分鐘將0.6M溴(1.5當量)的氯仿溶液加入0.4M的化合物93(1.0當量)的氯仿懸液中。75℃攪拌該混合物16小時，然後回復到室溫。收集沉澱，並研磨成細粉。將該物質放回濾出液中。再加入溴(0.5當量)，75℃攪拌該混合物46h。使反應混合物回復到室溫並過濾。用醚衝洗沉澱，減壓乾燥產生化合物94，為HBr鹽。ES/MS m/z 210(MH+)，C8H4ClN3S＝209g/mol。
步驟4還原為6-氨基甲基苯並噻唑(95)在0℃下將化合物94(1.00當量)加入0.4M的氫化鋁鋰(4.00當量)的醚懸液中。室溫攪拌該漿液過夜。使該混合物回復到0℃，用水猝滅反應。分離層。將水相pH調整到10-11，然後用二氯甲烷萃取。合併的有機相用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，產生化合物95，它無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 214(MH+)，C8H8ClN3S＝213g/mol。
步驟5轉化為N-Boc-氨基甲基苯並噻唑(96)將二碳酸二叔丁酯(1.0當量)加入0.1M的化合物95的四氫呋喃懸液中，室溫攪拌1小時。減壓去除揮發性物質。用快速色譜在矽膠上純化產物(48∶48∶4二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇)，得到化合物96。ES/MS m/z 314(MH+)，C13H16ClN3O2S＝313g/mol。
實施例18合成5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1-甲基-1H-苯並咪唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺 此合成也可用於製備以下化合物5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1-乙基-1H-苯並咪唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氯-1-(3，3-二甲基丁基)-1H-苯並咪唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；和5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1-異丁基-1H-苯並咪唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺。
步驟1還原性胺化(96)
在室溫下攪拌3-氯-2-硝基苯胺95(1.0當量)和醛(1.2當量)混合物的二氯甲烷溶液2h。加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1.2當量)，然後加入乙酸(1.2當量)。再在室溫下攪拌該反應3h。用碳酸氫鈉飽和溶液和鹽水洗滌該混合物。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用Biotage以15％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗化合物，產生化合物96。
步驟2氫化(97)將阮內鎳(Raney-Ni)(25％w/w，用水和甲醇衝洗)加入化合物96的甲醇溶液中。然後在室溫下向反應混合物中鼓入氫氣3h。通過硅藻土(Celite)過濾反應懸液。用甲醇衝洗濾餅，減壓濃縮合併的甲醇溶液，產生所需產物97。
步驟3形成4-氯-1-烷基-1H-苯並咪唑(98)將化合物97的甲醇溶液加入溴化氰的乙腈和水(1∶10v/v)溶液中。室溫攪拌反應混合物15小時。將碳酸氫鈉飽和溶液加入溶液中，以調節pH＝8。用乙酸乙酯萃取反應混合物。用鹽水洗滌有機相，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用己烷研磨(treaturate)粗產物，過濾產生所需產物98。
步驟4縮合為醯胺(100)將N，N』-羰基二咪唑(1.1當量)加入0.1M的羧酸99(1.0當量)的無水THF溶液中。50℃攪拌該混合物1.5h。使該溶液回復到室溫；加入4-氯-1-烷基-1H-苯並咪唑98(1.1當量)。50℃攪拌該溶液15小時。使該混合物回復到室溫，用乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉飽和溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用Biotage以60％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗化合物，產生N-Boc保護的產物，在室溫下用60％三氟乙酸的二氯甲烷溶液處理該產物1h。減壓去除揮發性物質，用反相HPLC純化剩餘物，得到最終產物100。
實施例19合成N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-3-羥基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺
步驟1形成羧酸(111-A)對化合物111進行實施例20步驟7中所列反應，產生相應羧酸111-A。
步驟2縮合為醯胺(101)將溴代-三-吡咯烷-六氟磷酸鹽(PyBrop，1.5當量)和N-羥基苯並三唑(HOBt，1.5當量)加入0.2M的羧酸111-A(1.0當量)、2-氨基-4-氯苯並噻唑(4.0當量)、N，N-二異丙基乙胺(2.0當量)的無水THF溶液中。室溫攪拌該混合物12h，用乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉飽和溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用乙酸乙酯和己烷(1∶1，v/v)研磨(triturate)粗化合物，過濾產生產物101。ES/MS m/z432/434(MH+)，C18H14ClN5O2S2＝431g/mol。
步驟3去甲基化(102)在0℃將101的二氯甲烷懸液加入0.1M的三氯化鋁(12當量)的乙硫醇溶液中。室溫攪拌該反應5h。用二氯甲烷稀釋該混合物，依次用水、鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮，產生黃色固體產物102。ES/MS m/z 418/420(MH+)，C17H12ClN5O2S2＝418g/mol。
實施例20合成用於本發明化合物的各種中間體
步驟1溴化(104)將三溴化苯基三甲基銨(3.0當量)加入3-羥基噻吩-2-羧酸甲酯103(1.0當量)的甲醇和二氯甲烷(1∶1，v/v)溶液中。然後加入碳酸鈣(4.0當量)。室溫攪拌該混合物20h。過濾反應懸液，減壓濃縮濾出液。將剩餘物再溶解於乙酸乙酯中，依次用碳酸氫鈉飽和溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用Biotage以10％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物104。GC/MS 237(M+)，C6H5BrO3S＝237g/mol。
步驟2Mitsunobu反應為甲氧基噻吩(105)在0℃、氬氣下將三苯基膦(1.5當量)加入到甲醇(1.5當量)的THF溶液中。在0℃攪拌30分鐘，形成澄清溶液。在0℃將偶氮二羧酸二乙酯(1.5當量)緩慢加入反應溶液中，0℃攪拌得到的黃色溶液1h。加入化合物104(1.0當量)的THF溶液，0℃攪拌該反應1h，室溫攪拌10h。減壓去除揮發性物質。用Biotage以5％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物105。ES/MS m/z 250/252(MH+)，C7H7BrO3S＝251g/mol。
步驟3Sonogashira反應為TMS乙炔(106)在室溫、氬氣下將二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.12當量)和碘化銅(I)(0.2當量)分別加入105(1.0當量)的THF和三乙胺(2∶1，v/v)溶液中。室溫攪拌該反應10分鐘。緩慢加入(三甲基甲矽烷基)乙炔(6.0當量)。在油浴中將該混合物加熱到70℃15h。用THF稀釋反應混合物，通過矽膠過濾。減壓去除揮發性物質。用Biotage以4％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物106。GC/MS 268(M+)，C12H16O3SSi＝268g/mol。
步驟4去三甲基甲矽烷基化(107)在0℃將氟化四丁基銨(1.0M的THF溶液，2.0當量)加入106(1.0當量)的THF溶液中。0℃攪拌該混合物24h，GCMS數據說明反應完成。減壓去除揮發性物質。將粗產物溶解於二氯甲烷，用水、鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機相，過濾並濃縮。用Biotage以5％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物107。
GC/MS 196(M+)，C9H8O3S＝196g/mol。
步驟5取代炔(108)室溫攪拌二氯甲烷中的107(1.0當量)的25％三氟乙酸溶液4h。減壓去除揮發性物質。將氯化四丁基銨(0.1當量)和二氯甲烷/水(3∶1)加入剩餘物中，然後加入1.0MKOH，使水相pH＝10。室溫攪拌該反應30分鐘。將二氯甲烷和水加入反應混合物中。用鹽水洗滌有機相，用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用Biotage以8％乙酸乙酯的己烷溶液純化粗產物，產生化合物108。GC/MS 214(M+)，C9H10O4S＝214g/mol。
步驟6加入嘧啶環(109)按照實施例3的步驟1和步驟2以及實施例4的步驟1合成化合物109。
步驟7皂化為羧酸(110)將1.0M氫氧化鈉水溶液(3.0當量)加入109(1.0當量)的乙醇溶液中。室溫攪拌該混合物4h。減壓去除揮發性物質。將剩餘物溶解在乙酸乙酯中，依次用稀鹽酸和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機層，過濾並濃縮，得到化合物110。該產物無需進一步純化即可使用。ES/MS m/z 366(MH+)，C16H19N3O5S＝365g/mol。
實施例21合成3-羥基噻吩衍生物此方案可用於製備噻吩3-位被取代的中間體。
步驟1醚的還原(112)按照實施例19的步驟，將化合物111還原為相應醇112。
步驟2Mitsunobu反應(113)對化合物112進行實施例20步驟2中所列反應，產生相應醚113。
步驟3皂化為羧酸(114)對化合物113進行實施例20步驟7中所列的皂化反應，產生化合物114。
可用上述實施例中所述方法製備下表6中的化合物。本領域技術人員已知並可購得用於合成的原材料，或可用已知方法製備這些原材料。用ACD/Name Batch 5.04版(Advanced Chemistry Development Inc.；Toronto，Ontario；www.acdlabs.com)命名化合物。
表6
實施例22Akt3激酶活性實驗用基於[γ33p]-ATP的放射性實驗或基於抗體的時間分辨的螢光實驗測定Akt3激酶活性，它們能測定生物素標記的肽在Akt3激酶存在下的磷酸化水平。用於這些實驗的試劑和進行這些實驗的方法見下。
以下試劑用於這些實驗重組人Akt3在昆蟲細胞中表達Histag全長Akt3蛋白，在Ni親和樹脂上純化。
生物素-肽底物生物素-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Pro-Arg-Ala-Ala-Thr-Phe-NH2(American Peptide Company，Sunnyvale，CA)；SEQ ID NO2親和純化的兔抗磷酸-肽抗體DELFIA Eu-N1標記的抗兔抗體(PerkinElmer，Foster City，CA)DELFIA增強溶液(PerkinElmer，Foster City，CA)[γ33P]-ATP(PerkinElmer，Foster City，CA)實驗緩衝液(50mM Tris-HCl(pH7.5)，10mM MgCl2，5mM MnCl2，5mM BGP，2mM DTT和0.01％BSA)時間分辨的螢光實驗用DMSO稀釋受試化合物，使其為最終實驗濃度的50倍。然後將2μl各稀釋受試化合物轉移到96孔板中，用新鮮製備的實驗緩衝液稀釋至終體積為25μl。然後，將包含3nM Akt3酶和1μM生物素-肽底物的50μl實驗緩衝液加入稀釋的受試化合物中。通過將25μl 800nM ATP加入實驗緩衝液啟動反應，產生的終濃度為1.5nM酶、0.5μM生物素-肽底物和200nM ATP。
讓反應進行60分鐘，然後通過加入終濃度為30mM的EDTA終止反應。將100μl的各反應物轉移到黑色96孔Neutravidin板(Pierce Biotechnology，Rockford，Illinois)中。1小時後洗滌該板，然後加入抗磷酸肽第一抗體。孵育1小時後，再次洗滌該板，然後加入DELFIA Eu-N1-標記的抗兔抗體，孵育1小時。洗滌最後一次，然後加入100μl DELFIA增強溶液(PerkinElmer，Foster City，CA)，同時振蕩3-5分鐘。然後用Wallac Victor 2設備(PerkinElmer)測定時間分辨的螢光。
基於[γ33P]-ATP的放射性實驗進行放射性實驗所用條件類似於時間分辨的螢光實驗的條件，除了在各反應開始時加入[γ33P]-ATP使終濃度為5μCi/ml。通過加入EDTA終止反應，將100μl的各反應物轉移到鏈黴抗生物素蛋白包被的96孔Flash板(PerkinElmer)中，以捕獲生物素-肽底物。1小時後，洗滌該板並密封，用Wallac MicroBeta Trilux平板計數器測定摻入33P的量。
本發明化合物能抑制CDC7、Akt和/或PKA。為測定抑制特性，用上述實施例所列方法測定化合物對Akt的抑制，用實施例23所列方法測定化合物對PKA的抑制，用實施例24或25所列方法測定化合物對CDC7的抑制。抑制能力的一種衡量是IC50，定義為使激酶CDC7、Akt和/或PKA的活性降低50％的組合物濃度。優選化合物的IC50值小於約1mM，優選實施方式的IC50值小於約25μM，尤其優選的實施方式的IC50值小於約1000nM，最優選的實施方式的IC50值小於約100nM。
實施例23PKA活性實驗在無細胞激酶實驗中，在含有30mM Tris-HCl pH7.5、30mM MgCl2、1.4mMDTT、7mM EGTA、25mM β甘油磷酸酯和0.035％BSA的緩衝液中用市售PKA(Upstate#14-440)(酶的終濃度為0.1nM)和PKA的生物素化底物(Upstate#12-394)(終濃度為0.5μM)測定化合物。最終反應體積是150μl，最終DMSO濃度為1％。
使反應中未標記ATP為1μM，γ[33P]-ATP為1.6nM，然後室溫孵育1小時。使磷酸化底物捕獲在白色的鏈黴抗生物素蛋白包被的96孔板上1小時，然後洗滌4次。加入閃爍液，密封該板並用閃爍計數器計數。
如上所述，本發明化合物也可抑制PKA。為測定抑制特性，如上述實施例所述測定化合物。優選化合物的IC50值小於約1mM，優選實施方式的IC50值小於約25μM，尤其優選的實施方式的IC50值小於約1000nM，最優選的實施方式的IC50值小於約100nM。
實施例24篩選CDC7抑制劑的實驗以下試劑直接用於實驗或用於製備所述溶液CDC7/DBF4酶，生物素-MCM2底物，1M Hepes pH7.2-7.5，
1M MgCl2，1M DTT，1M PBS，100mg/ml亮抑肽酶，10mg/ml(1％)BSA的PBS溶液，100mMATP，1M Tris pH7.5，4M NaCl，0.5M EDTA，吐溫20，Rx-MCM2 pSer108 BL1539抗體(1mg/ml)(1∶4000稀釋)(Bethyl，A300-094A)，α篩選蛋白A500點檢測試劑盒(PerkinElmer，6760671C)，白色不透明的384孔微量板(PerkinElmer，6007290)，緩衝液(10mg/ml(1％)BSA/蒸餾H2O)，20％吐溫20，實驗緩衝液(50mM Hepes，10mM MgCl2.1mM DTT，10ug/mL亮抑肽酶和0.2mg/mLBSA)，和檢測緩衝液(25mM Tris，400mM NaCl，100mM EDTA，0.3％BSA的PBS溶液，0.05％吐溫20)。
在緩衝液中製備準備測試對CDC7的抑制活性的化合物的40×儲存液和天然產生的激酶抑制劑星孢素的儲存液，以用於該實驗。製備各種已知濃度的星孢素。
將受試化合物儲存液各0.5μl轉移到384孔測定板的「測試孔」中。類似地，將星孢素溶液各1μl轉移到「星孢素對照孔」中。
將5μl 0.5M EDTA溶液和4％DMSO轉移到「背景孔」中。將1μl含有30％DMSO的溶液轉移到「總計孔」中。
將10μL含有CDC7/DBF4酶(0.2μg/ml)和生物素-MCM2底物(0.125μg/ml)的溶液轉移到各孔中。然後將10μL 0.5μM ATP轉移到各孔中，啟動反應。然後在平板搖床上孵育該平板1小時。
通過用檢測緩衝液將鏈黴抗生物素蛋白包被的供體珠和偶聯於蛋白A的受體珠稀釋為54μg/ml，以及1∶4,000稀釋pSer108-特異性抗體新鮮製備檢測混合物並維持在低照度條件下。在1小時孵育結束後，在低照度條件下將10μL檢測混合物轉移到各孔中以終止反應。
該板再在暗處孵育4小時，然後用Perkin Elmer Fusion Instrument讀數，以測定由CDC7/DBF4酶活性產生的磷酸化生物素-MCM2底物的相對量。將各種受試化合物產生的抑制量與各種已知濃度的星孢素產生的抑制量相比較，以確定各受試化合物的相對抑制活性。根據上述「背景孔」確定少量DMSO(存在於檢測試劑盒中提供的試劑中)產生的背景信號，並減去此背景信號。
在此方式中，測定了各受試化合物對CDC7激酶的抑制量。
實施例25篩選CDC7抑制劑的實驗以下試劑直接用於實驗或用於製備所述溶液CDC7/DBF4酶，生物素-MCM2底物，1M Hepes pH7.2-7.5，1M MgCl2，1M DTT，1M PBS，100mg/ml亮抑肽酶，10mg/ml(1％)BSA的PBS溶液，100mM ATP，1M Tris pH7.5，4M NaCl，0.5M EDTA，吐溫20，Rx-MCM2 pSer108 BL1539抗體(1mg/ml)(1∶4000稀釋)(Bethyl、A300-094A)，α篩選蛋白A500點檢測試劑盒(PerkinElmer，6760671C)，白色不透明的384孔微量板(PerkinElmer，6007290)，緩衝液(10mg/ml(1％)BSA/蒸餾H2O)，20％吐溫20，實驗緩衝液(50mM Hepes，10mM MgCl2，1mM DTT，10ug/mL亮抑肽酶和0.2mg/mL BSA)，和檢測緩衝液(25mM Tris，400mM NaCl，100mM EDTA，0.3％BSA的PBS溶液，0.05％吐溫20)。
在緩衝液中製備準備測試對CDC7的抑制活性的化合物的40×儲存液和天然產生的激酶抑制劑星孢素的儲存液，以用於該實驗。製備各種已知濃度的星孢素。
將受試化合物儲存液各0.5μl轉移到384孔測定板的「測試孔」中。類似地，將星孢素溶液各1μl轉移到「星孢素對照孔」中。
將5μl 0.5M EDTA溶液和4％DMSO轉移到「背景孔」中。將1μl含有30％DMSO的溶液轉移到「總計孔」中。
將10μL含有CDC7/DBF4酶(0.2μg/ml)和生物素-MCM2底物(0.125μg/ml)的溶液轉移到各孔中。然後將10μL 0.5μM ATP轉移到各孔中，啟動反應。然後在平板搖床上孵育該平板1小時。
通過用檢測緩衝液將鏈黴抗生物素蛋白包被的供體珠和偶聯於蛋白A的受體珠稀釋為54μg/ml，以及1∶4,000稀釋磷酸化蘇氨酸特異性抗體(Cell Signalling，9381)新鮮製備檢測混合物並維持在低照度條件下。在1小時孵育結束後，在低照度條件下將10μL檢測混合物轉移到各孔中以終止反應。
該板再在暗處孵育4小時，然後用Perkin Elmer Fusion Instrument讀數，以測定由CDC7/DBF4酶活性產生的磷酸化生物素-MCM2底物的相對量。將各種受試化合物產生的抑制量與各種已知濃度的星孢素產生的抑制量相比較，以確定各受試化合物的相對抑制活性。根據上述「背景孔」確定少量DMSO(存在於檢測試劑盒中提供的試劑中)產生的背景信號，並減去此背景信號。
在此方式中，測定了各受試化合物對CDC7激酶的抑制量。
如上所述，本發明化合物也可抑制CDC7。為測定抑制特性，如上面兩個實施例中所述測定化合物。優選化合物的IC50值小於約1mM，優選實施方式的IC50值小於約25μM，尤其優選的實施方式的IC50值小於約1000nM，最優選的實施方式的IC50值小於約100nM。
本領域技術人員可根據上述說明書對組合物和方法進行各種修改和改變。在所附權利要求書範圍內的所有這些修改都包括在本發明範圍內。
權利要求
1.一種式I代表的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯或前藥 式中環A是含有5或6環原子的含氮雜芳基，其中1-4個環原子是氮原子；n是選自0或1的整數；R選自a)氫，b)羥基，c)烷基，d)取代的烷基，e)環烷基，f)取代的環烷基，g)-SO2R7，其中R7是C1-C5烷基或取代的烷基，h)烷氧基，i)羧基，j)羧酸酯，k)硝基，l)芳基，m)取代的芳基，n)雜芳基，o)取代的雜芳基，p)雜環基，q)取代的雜環基，r)醯氨基，和s)醯基；R1各自獨立地選自a)滷素，b)氰基，c)硝基，d)羥基，e)巰基，f)氨基，g)取代的氨基，h)烷氧基，i)取代的烷氧基，j)芳氧基，k)取代的芳氧基，l)雜芳氧基，m)取代的雜芳氧基，n)烷硫基，o)取代的烷硫基，p)-C(＝O)NR8R8，其中R8各自獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基、取代的雜環基，或者R8各自可任選地與懸掛在它上面的氮原子連接在一起形成雜環基或取代的雜環基，q)-NHC(＝O)-R9，其中R9選自氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環基、取代的雜環基，r)芳基或雜芳基，各自可被任選取代的烷基或芳基任選取代，s)雜環基，各自可被任選取代的烷基或芳基任選取代，和t)用1-3個取代基任選取代的C1-C5烷基，所述取代基選自滷素、羥基、氨基、芳基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基；m是等於0、1或2的整數；R2和R4獨立地選自a)氫，b)環烷基，c)取代的環烷基，d)雜環基，e)取代的雜環基，f)芳基，g)取代的芳基，h)雜芳基，i)取代的雜芳基，j)任選取代的C1-C5取代的烷基，k)任選取代的C2-C5烯基，l)任選取代的C2-C5炔基，m)任選取代的C1-C5烷氧基，n)羥基，o)氨基，p)C1-C5烷基單取代的氨基，和q)C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，限制條件是當R2或R4之一是環烷基、取代的環烷基、雜環基、取代的雜環基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基時，R2或R4中另一個是氫；R3選自a)氫，b)C1-C5烷基，和c)在亞烷基鏈上由1-2個取代基任選取代的-(C1-C5亞烷基)p-Z，所述取代基選自i.由1-3個取代基任選取代的C1-C5烷基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，ii.由1-3個取代基任選取代的C2-C5烯基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，限制條件是所述羥基取代基不懸掛在取代的烯基的乙烯基碳原子上，iii.由1-3個取代基任選取代的C2-C5炔基，所述取代基選自羥基、羧基、羧酸酯、氨基、C1-C5烷基單取代的氨基和C1-C5烷基雙取代的氨基，其中各烷基獨立於其它烷基，限制條件是所述羥基取代基不懸掛在取代的炔基的乙炔碳原子上，iv.C3-C6環烷基，v.C3-C6螺環烷基，vi.羧基，vii.羧酸酯，viii.滷素，ix.羥基，x.C1-C5烷氧基，xi.氨基，xii.C1-C5烷基單取代的氨基，xiii.C1-C5烷基雙取代的氨基，xiv.芳基，和xv.雜環基；Z選自a)烷基，b)取代的烷基，c)烷基氨基，d)烷氧基，e)取代的烷氧基，f)環烷基，g)雜環基，h)取代的雜環基，i)芳基，j)取代的芳基，k)雜芳基，和l)取代的雜芳基；p是選自0或1的整數Q選自a)-C(X』)NR6-，b)-CH2NR6-，c)-NR6C(X』)-，d)-NR6C(X』)O-，e)-NR6C(X』)NR6-，f)-OC(X』)NR6-，g)-C(X』)O-，h)-CR6＝CR6-，i)-C≡C-，j)-S(O)2NR6-，和k)-S(O)NR6-，其中，X』選自氧和硫，R6各自獨立地選自氫和C1-C3烷基和C1-C3取代的烷基，或者R6與Q和其連接的碳原子加上R4和其連接的碳原子連接在一起形成雜環基或取代的雜環基，限制條件是當Q是-C(O)NH-時，R3不是還用至少一個-C(O)基團在-C(O)NH-的β位取代的C2烷基，進一步的限制條件是當Q是-S(O)2NH-時，R3不是還用至少一個-C(O)基團取代的C2烷基；W選自-O-、-S-、-SO-和-SO2-；限制條件是當環A是嘧啶、Q是-C(O)NR6-時，R4不是芳基或雜芳基。
2.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，環A選自式IA、IB、IC、ID、IE，和IF 式中R、R1、R5、n和m的定義如上，t是0或1。
3.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、取代的環烷基、醯氨基、雜芳基、硝基、芳基、-SO2R7，其中R7是氫或甲基、羧酸酯和醯基。
4.如權利要求3所述的化合物，其特徵在於，R選自2-(甲基氨基)乙-1-基，2-(N-甲基哌嗪-N』-基)乙-1-基，2-(N-甲基吡咯-2-基)乙-1-基，2-(N-嗎啉代)乙-1-基，2-(哌啶-N-基)乙-1-基，2-(吡啶-2-基)乙-1-基，2-(吡啶-3-基)乙-1-基，2-(吡啶-4-基)乙-1-基，2-(S)-苯基環丙基，2-氨基乙-1-基，2-羥基乙-1-基，2-苯基乙-1-基，2-螺環丙基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，3-(咪唑-N-基)丙-1-基，3-(N-甲基哌嗪-N』-基)丙-1-基，3-(N-嗎啉代)丙-1-基，3-氨基丁-1-基，3-氨基丙-1-基，5-羧基-4-(R，S)-氨基戊-1-基，氨基羰基，苄基，苄基氨基羰基，丁基，環丁基，環戊基，環丙基，環丙基甲基，二甲基氨基羰基，乙基氨基羰基，氫，乙基，甲基，甲氧基羰基，甲基氨基羰基，甲基羰基，新戊基，硝基，苯基，苯基氨基羰基，丙基，丙基氨基羰基，吡啶-2-基甲基，吡啶-3-基甲基，吡啶-4-基，吡啶-4-基甲基，和SO2CH3。
5.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R5是氫或甲基。
6.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R1選自氫、C1-5烷基、-C(＝O)NR8R8和-NHC(＝O)-R9。
7.如權利要求6所述的化合物，其特徵在於，R1選自氫、甲基、氨基羰基和甲基羰基氨基。
8.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R2和R4獨立地選自氫、羥基、氨基、用芳基或氨基任選取代的C1-C5烷氧基。
9.如權利要求8所述的化合物，其特徵在於，R2和R4選自氫、羥基、氨基、甲氧基、苄氧基和2-氨基乙氧基。
10.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R3是氫。
11.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R3是-(C1-C5亞烷基)p-Z，其中p是0或1。
12.如權利要求11所述的化合物，其特徵在於，p是1，所述亞烷基鏈是未取代或用選自以下基團的取代基取代的鏈C1-C5烷基，用羥基、氨基、單取代的氨基或雙取代的氨基取代的C1-C5烷基，C2-C5烯基，C2-C5炔基，C3-C6螺環烷基，羧基，羧酸酯，羥基，氨基，雜環基和芳基。
13.如權利要求11所述的化合物，其特徵在於，所述亞烷基鏈是未取代或用選自以下基團的取代基取代的鏈2-氨基乙基，2-二甲基氨基乙基，和2-羥乙基，2-甲基氨基乙基，3-甲基氨基丙基，氨基，氨基甲基，羧基，二甲基氨基，二甲基氨基甲基，乙基，甲基，甲基羧基，嗎啉代，羥甲基，苯基，丙-2-烯基，丙-2-炔基，丙基，螺環丁基，和螺環丙基。
14.如權利要求11所述的化合物，其特徵在於，Z選自環烷基、取代的環烷基、雜環基、取代的雜環基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、烷基、氨基、烷基氨基和二烷基氨基。
15.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R3選自(2-氟-4-甲氧基苯基)乙-1-基，(2-氟-4-甲基苯基)乙-1-基，[1-(4-氯苯基)環丁-1-基]甲基，[1-(4-氯苯基)環丙-1-基]甲基，1-(1-氨基乙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-4-甲氧基-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-4-苯基-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-氨基乙基)-7-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(2-甲基丙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(3，3-二甲基丁基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(3-氨基丙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-(4-氯苯基)-3-(N-甲基氨基)丙-1-基，1-(4-氯苯基)-3-(N，N-二甲基氨基)丙-1-基，1-(4-氯苯基)-3-羥基丙-1-基，1-(氨基甲基)-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(二甲基氨基)丁-2-基，1-(R)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(甲基氨基)丁-2-基，1-(R)-1-(2，4-二氯苄基)-4-氨基丁-2-基，1-(R)-2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基乙-1-基，1-(R)-4-氟苯基)乙-1-基，1-(R)-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙-1-基，1-(R)-氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R)-羥甲基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-羧基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-羥甲基-1-苯基甲基，1-(R，S)-羥甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-羥甲基-2-苯基乙-1-基，1-(R，S)-甲基羧基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(R，S)-苯基-2-苯基乙-1-基，1-(S)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(二甲基氨基)丁-2-基，1-(S)-1-(2，4-二氯苄基)-4-(甲基氨基)丁-2-基，1-(S)-1-(2，4-二氯苄基)-4-氨基-丁-2-基，1-(S)-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙-1-基，1-(S)-氨基甲基-2-(1H-吲哚-3基)乙-1-基，1-(S)-氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(S)-氨基甲基-2-(吲哚-3-基)乙-1-基，1-(S)-二甲基氨基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-(S)-二甲基氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1，2，3，4-四氫萘-1-基，1-氨基乙基-4-甲氧基苯並咪唑-2-基，1-氨基甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-氨基甲基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，1-氨基甲基-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基，1-苄基吡咯烷-3-基，1-二甲基氨基-3-(2，4-二氯苯基)丙-2-基，1-乙基-4-氯苯並咪唑-2-基，1-羥甲基-2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，1-羥甲基-2-甲基丙-1-基，1-異丁基-4-氯苯並咪唑-2-基，1-甲基-2-羥基乙-1-基，1-甲基-4-氯苯並咪唑-2-基，1-甲基苯並咪唑-2-基，1-苯基-1-(4-氯苯基)甲基，1-苯基-2-羥基乙-1-基，2-(2，4-二氯苯基)丁-1-基，2-(2，4-二氯苯基)乙-1-基，2-(2，4-二氯苯基)戊-1-基，2-(2，4-二氯苯基)戊-4-烯-1-基，2-(2，4-二氯苯基)戊-4-炔-1-基，2-(2，4-二氯苯基)丙-1-基，2-(2，5-二甲氧基苯基)乙-1-基，2-(2，6-二氯苯基)乙-1-基，2-(2-氯苯基)乙-1-基，2-(3，4-二氯苯基)乙-1-基，2-(3，4-二甲氧基苯基)乙-1-基，2-(3-氯苯基)乙-1-基，2-(3-氟苯基)乙-1-基，2-(3-甲氧基苯基)乙-1-基，2-(4-氨基苯基)乙-1-基，2-(4-氨基磺醯基苯基)乙-1-基，2-(4-聯苯基)乙-1-基，2-(4-溴苯基)乙-1-基，2-(4-氯苯基)乙-1-基，2-(4-乙氧基苯基)乙-1-基，2-(4-乙基苯基)乙-1-基，2-(4-氟苯基)乙-1-基，2-(4-甲氧基苯基)乙-1-基，2-(4-甲基苯基)乙-1-基，2-(4-苯氧基苯基)乙-1-基，2-(N-甲基哌嗪-N』-基)乙-1-基，2-(N-甲基吡咯-2-基)乙-1-基，2-(N-嗎啉代)乙-1-基，2-(哌啶-1-基)乙-1-基，2-(哌啶-3-基)乙-1-基，2-(吡啶-2-基)乙-1-基，2-(吡啶-4-基)乙-1-基，2-(R)-(N-嗎啉代)-2-苯基乙-1-基，2-(R)-氨基-3-(吲哚-3-基)丙-1-基，2-(R)-羥基茚滿-1-基，2-(R)-甲基-2-苯基乙-1-基，2-(R，S)-氨基-2-苯基乙-1-基，2-(R，S)-羥基-2-(4-氯苯基)乙-1-基，2-(R，S)-甲基-2-苯基乙-1-基，2-(S)-氨基-3-(吲哚-3-基)丙-1-基，2-(S)-甲基-2-苯基乙-1-基，2-(三氟甲基)-4-氟苯基甲基，2，4-二氯苄基，2，4-二氯苯基甲基，2，2-二甲基-5-苄基四氫吡喃-4-基，2，2-二苯基乙-1-基，2，4-二氯苄基，2，4-二氟苄基，2，5-二氟苄基，2-氨基苯並噻唑-4-基，2-氨基乙-1-基，2-氯苄基，2-二甲基氨基乙-1-基，2-氟-4-氯苄基，2-氟-6-氨基苄基，2-甲氧基苄基，2-甲基-4-氯苯基甲基，2-甲基苄基，2-苯乙基，2-苯基苄基，2-哌啶-N-基苄基，3-(4-氟苯基)丙-1-基，3-(吡咯-N-基)丙-1-基，3，4-二氯苄基，3，5-二氯苄基，3，5-二氟苄基，3-氨基-1-(4-氯苯基)丙-1-基，3-溴苄基，3-氯苄基，3-甲氧基苄基，4-(2-氯苯基)噻唑-2-基，4-(3，4-二氟苯基)噻唑-2-基，4-(3-氯苯基)噻唑-2-基，4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基，4-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-(吡啶-2-基)噻唑-2-基，4-(吡啶-3-基)噻唑-2-基，4-(三氟甲氧基)-6-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-(三氟甲基)-6-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4，6-二氯苯並噻唑-2-基，4，6-二氟苯並噻唑-2-基，4-氨基-2-(4-氯苯基)丁-1-基，4-氨基苄基，4-氨基磺醯基苄基，4-溴-6-(氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-溴-6-異丙基-苯並噻唑-2-基，4-溴苯並噻唑-2-基，4-溴苄基，4-氯-[2-(S)-2-(氨基丙醯基)氨基甲基]苯並噻唑-2-基，4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基，4-氯-5-甲基羧基-苯並噻唑-2-基，4-氯-6-({[2-(S)-2-氨基-3-苯基丙醯基]氨基}甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(2-氨基乙基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(2-硝基乙基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(二甲基氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(甲基氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(甲基羰基氨基甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(三氟甲氧基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-(三氟甲基)苯並噻唑-2-基，4-氯-6-[(2-氨基)乙基氨基羰基]苯並噻唑-2-基，4-氯-6-{[(氨基甲基羰基)氨基]甲基}苯並噻唑-2-基，4-氯-6-氨基甲基苯並噻唑-2-基，4-氯-6-羥甲基苯並噻唑-2-基，4-氯-6-甲基氨基甲基苯並噻唑-2-基，4-氯-6-甲基噻唑-2-基，4-氯-6-N-嗎啉代甲基-苯並噻唑-2-基，4-氯-7-氨基甲基-苯並噻唑-2-基，4-氯-7-羥甲基-苯並噻唑-2-基，4-氯苯並噻唑-2-基，4-氯苯並唑-2-基，4-氯苄基，4-二甲基氨基苄基，4-氟苄基，4-氟苯並噻唑-2-基，4-氟苄基，4-氟苯基，4-氟苯基甲基，4-羥基-2-(4-氯苯基)丁-1-基，4-羥基苯並噻唑-2-基，4-羥基苯並噻唑-4-基，4-甲氧基-6-(甲基氨基甲基)苯並噻唑-1-基，4-甲氧基苯並噻唑-2-基，4-甲氧基噻唑-2-基，4-甲基-6-氨基甲基-苯並噻唑-2-基，4-甲基苄基，4-甲基噻唑-2-基，4-苯基噻唑-2-基，5-(2-溴噻吩-5-基)噻唑-2-基，5-(3-溴-4-甲氧基苯基)噻唑-2-基，5-氯苯並咪唑-2-基，5-氯苯並噻唑-2-基，6-氨基甲基-8-氯喹啉-2-基，6-氨基甲基-苯並噻唑-2-基，6-氯苯並噻唑-2-基，6-氟苯並噻唑-2-基，7-氯苯並噻唑-2-基，苯並咪唑-2-基，苯並噻唑-2-基，苯並噻唑-6-基，苯並噻吩-2-基，苄基，茚滿-1-基，萘-1-基甲基，吡啶-2-基甲基，吡啶-3-基甲基，吡啶-4-基甲基，嘧啶-3-基，吡咯烷-3-基，喹啉-2-基，喹啉-3-基，喹啉-6-基，和噻吩-2-基甲基。
16.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，Q選自-C(O)NH-、-NHC(O)-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-CH2NH-、-C(O)N(CH2CH2NH2)-、-C(O)N(CH3)-、-SO2NH-、-C(O)O-、-CH＝CH-和-C≡C-。
17.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R6與Q和其連接的碳原子加上R4和其連接的碳原子連接在一起形成取代的雜環基。
18.如權利要求17所述的化合物，其特徵在於，所述取代的雜環基是5，6-二氫嘧啶-4-酮。
19.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，R6是氫或被氨基任選取代的C1-3烷基。
20.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，W是-S-。
21.一種選自下組的化合物N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-苯基乙基)噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氟苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-{2-[(甲磺醯基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-溴苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-{2-[4-(氨基磺醯基)苯基]乙基}-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2-甲氧基苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(3-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(3-甲氧基苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[(2S)-2-苯基丙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，6-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(3，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[3-(4-氟苯基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(乙基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(新戊基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(環丙基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(環丁基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-(氨基磺醯基)苄基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(噻吩-2-基甲基)噻吩-2-羧醯胺；N-{[1-(4-氯苯基)環丙基]甲基}-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-羥乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[5-甲基-2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(2-氯苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(3-氯苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(2，4-二氟苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(2，4-二氯苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-嗎啉-4-基-2-苯基乙基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(1-萘基甲基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-苯基丙基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2-氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(3-氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(4-氯苄基)-2-羥乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[(2R)-2-苯基丙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2-氯苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(3-氯苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2，4-二氟苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2，5-二氟苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(3，5-二氟苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-2-氟苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2，4-二氯苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(3，4-二氯苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(3，5-二氯苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2-氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(3-氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(4-氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(3，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，6-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[(2R)-2-苯基丙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[(2S)-2-苯基丙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2-苯基丙基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-{[1-(4-氯苯基)環丙基]甲基}噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-2-羥乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氯苯基)-4-羥基丁基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(2S)-2-氨基-2-苯基乙基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2-甲基苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-甲基苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2-甲氧基苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(3-甲氧基苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(3-溴苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-溴苄基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2-羥基-1-苯基乙基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2-氟-4-甲基苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[(2R)-2-(4-氯苯基)-2-羥乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)丙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)丁基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)戊基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)戊-4-烯基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)戊-4-炔基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-1，3-苯並噻唑-2-基噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-{[1-(4-氯苯基)環丁基]甲基}噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-2-羥乙基]噻吩-2-羧醯胺；2，4-二氯-N-({5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}羰基)-L-苯丙氨酸甲酯；N-[(1S)-1-苄基-2-羥乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-羥基-1-苯基乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-氨基-2-(4-氯苯基)丁基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(4-氯苯基)-3-羥丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2，4-二氯苄基)-2-羥乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[1-(2，4-二氯苄基)-2-羥乙基]噻吩-2-羧醯胺；2，4-二氯-N-({5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}羰基)-L-苯丙氨酸；N-(4-氯-2-甲基苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-2-甲基苄基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-氨基-1-(4-氯苄基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(4-氯苯基)-3-(二甲基氨基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[1-(4-氯苯基)-3-(甲基氨基)丙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[1-(4-氯苯基)-3-(二甲基氨基)丙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(1，1′-聯苯-2-基甲基)噻吩-2-羧醯胺；N-[3-氨基-1-(4-氯苯基)丙基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(4-甲基-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(4-甲氧基-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(乙基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-N-甲基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1R)-2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-3-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-7-氯-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1R)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1R)-1-(2，4-二氯苄基)-3-(甲基氨基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1R)-1-(2，4-二氯苄基)-3-(二甲基氨基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-3-(甲基氨基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-3-(二甲基氨基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1R)-3-氨基-1-(2，4-二氯苄基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-3-氨基-1-(2，4-二氯苄基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(2-氨基乙基)-N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1R)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-2-(二甲基氨基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-2-(二甲基氨基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-N-甲基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4，6-二氟-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4，6-二氟-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(3-氨基丙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-4-甲氧基-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-4-甲氧基-1H-苯並咪唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-喹啉-2-基噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-甲氧基-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；3-氨基-N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-2-(二甲基氨基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-1-(2，4-二氯苄基)-2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲氧基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-甲氧基-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；3-氨基-N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(羥甲基)-2-甲基丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(2-羥基-1-甲基乙基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(2-氨基乙基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-吡咯烷-3-基噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-哌啶-3-基噻吩-2-羧醯胺；N-[(2S)-2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(1H-吲哚-3-基甲基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[4-(甲基氨基)-1，3，5-三嗪-2-基]噻吩-2-羧醯胺；3-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-6-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩並[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮；6-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩並[3，2-d]嘧啶-4(3H)-酮；N-[1-(2-氨基乙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(3-氨基丙基)-4-氯-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1-乙基-1H-苯並咪唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-氯-1-(3，3-二甲基丁基)-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；3-氨基-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1-異丁基-1H-苯並咪唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-4-乙氧基-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-4-乙氧基-1H-苯並咪唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-4-苯基-1H-苯並咪唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2-氨基乙基)-4-苯基-1H-苯並咪唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-羥基-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(2-氨基-6-氟苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[1-(2，4-二氯苄基)-2-(二甲基氨基)乙基]-3-羥基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(1H-吲哚-3-基甲基)乙基]-3-甲氧基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(1-苄基吡咯烷-3-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-3-(苄氧基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-{4-氯-7-[(甲基氨基)甲基]-1，3-苯並噻唑-2-基}-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氯-6-(羥甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-氯-7-(羥甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-甲基-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[7-(氨基甲基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-溴-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-氯-6-(嗎啉-4-基甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氯-6-(嗎啉-4-基甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(4-苯基-1，3-噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-苯基-1，3-噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(5-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-1-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-(3-氯苯基)-1，3-噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-(4-甲氧基苯基)-1，3-噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-(3，4-二氟苯基)-1，3-噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[5-(3-溴-4-甲氧基苯基)-1，3-噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(5-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-(3-氯苯基)-1，3-噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-(4-甲氧基苯基)-1，3-噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-(3，4-二氟苯基)-1，3-噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[5-(3-溴-4-甲氧基苯基)-1，3-噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-(2-氯苯基)-1，3-噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-(2-氯苯基)-1，3-噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；N-{4-氯-6-[(二甲基氨基)甲基]-1，3-苯並噻唑-2-基}-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-{4-氯-6-[(二甲基氨基)甲基]-1，3-苯並噻唑-2-基}噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-溴-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氟-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4，6-二氯-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(7-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(2-氨基乙基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氯-6-(2-硝基乙基)-1，3-苯並噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(4-吡啶-2-基-1，3-噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-吡啶-2-基-1，3-噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(4-吡啶-3-基-1，3-噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-吡啶-3-基-1，3-噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(2-氨基乙基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-氯-6-(2-硝基乙基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；4-氯-N-甲基-2-[({5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}羰基)氨基]-1，3-苯並噻唑-6-羧醯胺；N-(2-氨基乙基)-4-氯-2-[({5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}羰基)氨基]-1，3-苯並噻唑-6-羧醯胺；N-(2-氨基乙基)-2-({[5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-基]羰基}氨基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-6-羧醯胺；N-{4-氯-6-[(甲基氨基)甲基]-1，3-苯並噻唑-2-基}-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-{4-氯-6-[(甲基氨基)甲基]-1，3-苯並噻唑-2-基}噻吩-2-羧醯胺；4-氯-2-[({5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}羰基)氨基]-1，3-苯並噻唑-5-羧酸甲酯；2-({[5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-基]羰基}氨基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-5-羧酸甲酯；N-(4-氯-6-甲基-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-6-甲基-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1，3-苯並唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[6-({[(2S)-2-氨基丙醯基]氨基}甲基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-溴-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-{4-甲氧基-6-[(甲基氨基)甲基]-1，3-苯並噻唑-2-基}-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-{4-甲氧基-6-[(甲基氨基)甲基]-1，3-苯並噻唑-2-基}噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1，3-苯並唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-({[(2S)-2-氨基-3-苯基丙醯基]氨基}甲基)-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(6-{[(氨基乙醯基)氨基]甲基}-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-{6-[(乙醯氨基)甲基]-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基}-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-(三氟甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-(三氟甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-(三氟甲氧基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-(三氟甲氧基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[4-氯-6-(三氟甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氯-6-(三氟甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[4-氯-6-(三氟甲氧基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氯-6-(三氟甲氧基)-1，3-苯並噻唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-4-溴-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(4-溴-6-異丙基-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-溴-6-異丙基-1，3-苯並噻唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[4-(氨基甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[4-(氨基甲基)-1，3-苯並噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[6-(氨基甲基)-8-氯喹啉-2-基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-3-甲氧基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(5-苄基-2，2-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[5-甲基-2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(硝基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-苯胺基嘧啶-4-基)-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；4-[5-({[2-(4-氟苯基)乙基]氨基}羰基)噻吩-2-基]嘧啶-2-基氨基甲酸甲酯；5-(2-{[(二甲基氨基)羰基]氨基}嘧啶-4-基)-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-(2-{[(甲基氨基)羰基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(乙醯氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(4-甲基苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-乙基苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(1，1′-聯苯-4-基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-乙氧基苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(4-苯氧基苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，5-二甲氧基苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(二甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氟苯基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(二甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-{2-[(氨基羰基)氨基]嘧啶-4-基}-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(丙基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(丁基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-{2-[(環丙基甲基)氨基]嘧啶-4-基}-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(苄基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(環戊基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-嗎啉-4-基乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(3-嗎啉-4-基丙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-哌啶-1-基乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-苯基乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-1H-苯並咪唑-2-基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-1，3-苯並噻唑-2-基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(6-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(6-氟-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-1，3-苯並噻唑-6-基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-喹啉-3-基噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-喹啉-6-基噻吩-2-羧醯胺；N-[5-(5-溴噻吩-2-基)-1，3-噻唑-2-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(吡啶-2-基甲基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(吡啶-3-基甲基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(吡啶-4-基甲基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-吡啶-2-基乙基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-吡啶-4-基乙基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-哌啶-1-基乙基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-嗎啉-4-基乙基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-[3-(1H-吡咯-1-基)丙基]噻吩-2-羧醯胺；5-{2-[(氨基羰基)氨基]嘧啶-4-基}-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-{2-[(2-氨基乙基)氨基]嘧啶-4-基}-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-{2-[(3-氨基丙基)氨基]嘧啶-4-基}-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-{2-[(4-氨基丁基)氨基]嘧啶-4-基}-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N～6～-{4-[5-({[2-(2，4-二氯苯基)乙基]氨基}羰基)噻吩-2-基]嘧啶-2-基}-L-賴氨酸；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(吡啶-4-基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[(2S)-2-苯基環丙基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(吡啶-2-基甲基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(吡啶-3-基甲基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(吡啶-4-基甲基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-吡啶-2-基乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-吡啶-3-基乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-{2-[(2-吡啶-4-基乙基)氨基]嘧啶-4-基}噻吩-2-羧醯胺；5-[2-({[1-(4-氯苯基)環丙基]甲基}氨基)嘧啶-4-基]-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[2-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)乙基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(1，2-二苯基乙基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(2，2-二苯基乙基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[(甲基氨基)羰基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[(乙基氨基)羰基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-(2-{[(丙基氨基)羰基]氨基}嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2-吡啶-3-基乙基)噻吩-2-羧醯胺；5-{2-[(苯胺基羰基)氨基]嘧啶-4-基}-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-{[(苄基氨基)羰基]氨基}嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氨基苄基)-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-(二甲基氨基)苄基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氨基苯基)乙基]-5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-1H-苯並咪唑-2-基噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(1-甲基-1H-苯並咪唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[(2R)-2-羥基-2，3-二氫-1H-茚-1-基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-2，3-二氫-1H-茚-1-基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-1，2，3，4-四氫萘-1-基噻吩-2-羧醯胺；N-[(4-氯苯基)(苯基)甲基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氟-2-(三氟甲基)苄基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(1H-苯並咪唑-2-基甲基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(1-苯並噻吩-2-基甲基)噻吩-2-羧醯胺；N-(5-氯-1H-苯並咪唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1-甲基-1H-苯並咪唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1-甲基-1H-苯並咪唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1-乙基-1H-苯並咪唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[4-氯-1-(3，3-二甲基丁基)-1H-苯並咪唑-2-基]噻吩-2-羧醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氯-1-異丁基-1H-苯並咪唑-2-基)噻吩-2-羧醯胺；N-(4-羥基-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-N-(2-哌啶-1-基苄基)噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-3-甲氧基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-3-羥基-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；3-(2-氨基乙氧基)-N-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；3-(4-氟苯基)-N-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}丙醯胺；3-(2，4-二氯苯基)-N-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}丙醯胺；N-[5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-基]-3-(2，4-二氯苯基)丙醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基氨基甲酸苄酯；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基氨基甲酸4-氟苄基酯；(2R)-2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙基5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基氨基甲酸酯；(2S)-2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙基5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基氨基甲酸酯；N-(4-氟苄基)-N′-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}脲；N-(2，4-二氯苄基)-N′-{5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}脲；4-[5-({[2-(4-氟苯基)乙基]氨基}甲基)噻吩-2-基]-N-甲基嘧啶-2-胺；4-[5-({[2-(4-氯苯基)乙基]氨基}甲基)噻吩-2-基]-N-甲基嘧啶-2-胺；4-[5-({[2-(2，4-二氯苯基)乙基]氨基}甲基)噻吩-2-基]-N-甲基嘧啶-2-胺；4-[5-({[2-(4-氯苯基)乙基]氨基}甲基)噻吩-2-基]嘧啶-2-胺；4-氯-N-({5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-基}甲基)-1，3-苯並噻唑-2-胺；N-{[5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-基]甲基}-4-氯-1，3-苯並噻唑-2-胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯胺；N-[2-(4-氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯胺；N-(4-氟苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯胺；N-(2，4-二氯苄基)-5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-磺醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(4-氟苯基)乙基]噻吩-2-磺醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]噻吩-2-磺醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(4-氟苄基)噻吩-2-磺醯胺；5-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-(2，4-二氯苄基)噻吩-2-磺醯胺；5-[2-(甲基氨基)嘧啶-4-基]噻吩-2-羧酸2-氨基-1，3-苯並噻唑-4-基酯；5-(2-氨基嘧啶-4-基)噻吩-2-羧酸2-氨基-1，3-苯並噻唑-4-基酯；4-{5-[(E)-2-(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)乙烯基]噻吩-2-基}嘧啶-2-胺；4-{5-[(4-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)乙炔基]噻吩-2-基}嘧啶-2-胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)吡啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-[2-(甲基氨基)吡啶-4-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-(2-{[2-(甲基氨基)乙基]氨基}吡啶-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(乙醯氨基)吡啶-4-基]-N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-吡啶-4-基噻吩-2-羧醯胺；4-[5-({[2-(4-氟苯基)乙基]氨基}羰基)噻吩-2-基]吡啶-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-[6-(甲基氨基)吡啶-2-基]噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-吡啶-4-基噻吩-2-羧醯胺；N-[2-(4-氟苯基)乙基]-5-(1H-吡唑-3-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-(1H-比唑-4-基)噻吩-2-羧醯胺；N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]-5-(2-氨基-1H-咪唑-4-基)噻吩-2-羧醯胺；5-[2-(乙醯氨基)-1H-咪唑-4-基]-N-[(1S)-2-氨基-1-(2，4-二氯苄基)乙基]噻吩-2-羧醯胺；和N-[2-(2，4-二氯苯基)乙基]-5-嘧啶-4-基噻吩-2-羧醯胺。
22.一種含有權利要求1所述化合物或其混合物和藥學上可接受的載體和/或賦形劑的藥物組合物。
23.一種治療患有至少部分由CDC7、PKA和/或Akt介導的病症的哺乳動物患者的方法，所述方法包括給予患有至少部分由CDC7、PKA和/或Akt介導的病症的患者藥學有效量的權利要求22所述組合物。
24.如權利要求23所述的方法，其特徵在於，所述方法還包括給予另一種抗癌劑。
25.一種在患有至少部分由PKA介導的病症的患者中抑制PKA的方法，所述方法包括給予所述患者藥學有效量的權利要求22所述組合物。
26.如權利要求25所述的方法，其特徵在於，所述病症是癌症。
27.一種在患有至少部分由Akt介導的病症的患者中抑制Akt的方法，所述方法包括給予所述患者藥學有效量的權利要求22所述組合物。
28.如權利要求23所述的方法，其特徵在於，所述病症是癌症。
29.一種在患有至少部分由CDC7介導的病症的患者中抑制CDC7的方法，所述方法包括給予所述患者藥學有效量的權利要求22所述組合物。
30.如權利要求29所述的方法，其特徵在於，所述病症是癌症。
全文摘要
本發明涉及新的取代的五元化合物及其藥學上可接受的鹽、酯或前藥，新化合物與藥學上可接受的載體的組合物，和新化合物的應用。本發明化合物具有以下通式。
文檔編號A61K31/506GK1989131SQ200580010575
公開日2007年6月27日 申請日期2005年3月30日 優先權日2004年3月30日
發明者林曉東, A·裡科, Y·周, A·B·傑弗森, A·瓦特, 王小京 申請人:希龍公司