作為cox-2抑制劑的苯基乙酸衍生物的製作方法

2023-04-25 15:46:36

專利名稱：：作為cox-2抑制劑的苯基乙酸衍生物的製作方法作為COX-2抑制劑的苯基乙酸衍生物本發明涉及本文中所定義的苯基乙酸及其衍生物，它們為特別有效的並且具有選擇性的環氧合酶-2(COX-2)抑制劑，本發明還涉及其製備方法、含有所述化合物的藥用組合物、選擇性抑制COX-2活性的方法，還涉及在哺乳動物中採用所述化合物或含有所述本發明化合物的藥用組合物治療對COX-2的抑制有響應的疾病的方法。本發明提供了新的苯基乙酸及其衍生物，它們能夠抑制COX-2而不會顯著抑制環氧合酶-l(COX-l)。因此，本發明提供了新的非甾體類抗炎成分，令人驚奇地是，它們沒有通常與典型的非甾體類抗炎成分有關的不需要的副作用，例如胃腸道副作用和腎臟副作用。因此，本發明化合物可以特別用作選擇性COX-2抑制劑，或者可以代謝轉化為特別用作選擇性COX-2抑制劑的化合物。因此，它們可以特別用於在哺乳動物中治療COX-2依賴性疾病，包括炎症、發熱(pyresis)、疼痛、骨關節炎、類風溼性關節炎、痛經、偏頭痛、癌症(例如消化道癌症(如結腸癌症)和黑素瘤)、癌症疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、神經變性疾病(例如多重硬化症、帕金森病和阿爾茨海默病)、心血管疾病(例如動脈粥樣硬化、冠狀動脈疾病和動脈石更化)、骨質疏鬆症、痛風、急性痛風、哮喘、狼掩和銀屑病，而基本上消除了與常規環氧合酶(COX)抑制劑有關的不需要的胃腸道潰瘍。本發明化合物也是UV吸收劑，特別是UV-B吸收劑，因此，可用於阻斷或者吸收UV輻射，例如，在防曬產品中用於治療和預防曬傷。本發明化合物的眼部應用包括治療目艮部炎症、溼性老年性黃斑病變、眼部疼痛(包括與眼部手術有關的疼痛，例如PRK或白內障手術)、眼睛過敏反應、各種病原的畏光、通過抑制小梁網狀結構誘導的糖皮質激素響應蛋白的產生而導致的眼內壓升高(在青光眼中)和乾眼病。本發明化合物用於治療瘤形成，特別是能夠產生前列腺素或表達COX6的瘤形成，包括良性和惡性腫瘤，生長物和息肉，特別是上皮細胞衍生的瘤形成。本發明化合物特別用於治療如上所述的肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、宮頸癌、肺癌和乳癌，尤其是胃腸道癌(例如結腸癌)和皮膚癌(例如，鱗狀細胞癌或基底細胞癌)以及黑素瘤。本文中使用的術語"治療，，可以理解為包括治療和預防兩種模式，例如與瘤形成相關的治療、為防止明顯瘤形成的臨床或臨床前發作的治療，或者防止惡性細胞開始啟動的治療或終止或逆轉前-惡性細胞向惡性細胞轉化的治療，以及防止或抑制瘤形成物生長或轉移的治療。在本文中，本發明特別可以理解為包括本發明化合物在抑制或預防皮膚癌進展中的用途，所述皮膚癌例如由於暴露於uv而導致的鱗狀細胞癌或基底細胞癌，例如長期暴露於陽光中而導致的上述癌症。所述化合物可以用於人類或者其它哺乳動物。在第一方面，本發明提供了式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽及其藥學上可接受的酯RCH2COOH(I)其中R為曱基或乙基；R3為卣素或d-C6烷基；R4為CVC6烷基；Rs為閨素；上述位於R3和R4上的d-C6烷基任選被一或多個滷素基團取代。優選在式(I)化合物中，R3為滷素、曱基或乙基。更優選它為滷素。或者優選它為氯。優選在式(I)化合物中，Rt為CrC3烷基，該烷基任選被一或多個滷素取代。更優選它為甲基、乙基、異丙基或三氟曱基。還更優選它為甲基。或者優選它為三氟甲基。優選在式(I)化合物中，Rs為氯或氟。還更優選R3和R5兩者均獨立選自氯和氟。優選所述化合物選自下列化合物5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3'-甲基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，,4，-二氯代-3'-甲基苯胺基)苯基乙酸，5-甲基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-曱基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-曱基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-曱基苯胺基)苯基乙酸，5-曱基-2-(2，-氟-3'-甲基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-甲基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-甲基-2-(2，-氟-3'-乙基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-乙基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3'-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，，4，-二氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-異丙基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸二乙胺鹽，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鈉，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸氨丁三醇鹽，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸釣單水合物，賴氨酸5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鹽單水合物，膽鹼5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鹽單水合物，和5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鉀。在第二方面，本發明提供了含有有效量的式(I)化合物以及一或多種藥學上可接受的栽體的藥用組合物。在第三方面，本發明提供了在哺乳動物中治療環氧合酶-2(COX-2)依賴性疾病的方法，該方法包括給予需要治療的哺乳動物有效量的式(I)化合物。在第四方面，本發明提供了在哺乳動物中選擇性抑制COX-2活性而基本上不抑制環氧合酶-1活性的方法，該方法包括給予需要的哺乳動物有效的COX-2抑制量的式(I)化合物。在第五方面，本發明提供了在哺乳動物中治療類風溼性關節炎、骨關節炎、痛經、疼痛、肺瘤或炎症的方法，該方法包括給予需要的哺乳動物相應的有效量的式(I)化合物。在第六方面，本發明提供了式(I)化合物在生產用於治療類風溼性關節炎、骨關節炎、痛經、疼痛、胂瘤或炎症的藥物中的用途。在第七方面，本發明提供了式(I)化合物在治療COX-2依賴性疾病中的用途。在第八方面，本發明提供了製備權利要求1的式(I)化合物的方法，該方法包括下列步驟(a)在銅和碘化亞銅存在下，使式(II)或(III)化合物其中Z為溴或械；R如上文所定義；Ra為氫、鹼金屬陽離子或低級烷基，優選異丙基；並且R6和R7為低級烷基；或者R6和R7與氮原子一起代表嗎啉代、哌啶子基或吡咯烷子基；與式(IV)化合物偶合其中R3-Rs如上文所定義，獲得式(V)或(VI)化合物:formulaseeoriginaldocumentpage10或(Vl>將獲得的式(V)或(VI)化合物水解，獲得式(I)化合物；或者(b)在Friedel-Crafts醯化反應中，使式(VII)化合物(VII)其中R3-R7如本文中所定義，與酸例如乙酸的活性官能衍生物例如乙醯氯進行縮合反應，獲得例如式(VIII)化合物(vm)其中R3-R7如本文中所定義，隨後將其氫-合物，其中R代表例如乙基；或者(c)採用強鹼水解式(IX)的內醯胺，然後水解，獲得式(I)化其中R和R3-Rs如本文中所定義，在上述方法中，需要時可以將任何幹擾反應的活性基團暫時進行保護，然後將獲得的本發明化合物進行分離；並且需要時可以將任何獲得的化合物轉化為另一種本發明化合物；和/或需要時可以將本發明的游離羧酸轉化為其藥學上可接受的酯衍生物；和/或需要時將獲得的游離酸轉化為鹽，或者將獲得的鹽轉化為游離酸或轉化為另一種鹽。在可以根據本文中所述方法轉化為本發明化合物的原料化合物和中間體中，存在的官能團(例如氨基、羥基和)可以如下通過製備有機化學中的常規保護基團進行保護。被保護的羥基、氨基和g基團是那些在溫和條件下無需發生其它不需要的副反應就可以轉化為游離氨基、羥基和羧基的基團。例如，羥基保護基團優選節基或取代的千基或者優選醯基，例如新戊醯基。方法(a)中式(V)和(VI)化合物的製備可以在用於製備二芳基胺的改良的Ullmann縮合反應條件下進行，例如，在銅粉和硪化銅(I)以及碳酸鉀存在下，任選在惰性高沸點溶劑中，例如在硝基苯、曱苯、二曱苯或iV-甲基吡咯烷酮中，在升高的溫度下，例如在100-200。C的溫度範圍內，優選於回流溫度下，根據下列文獻中所述的通用方法進行Nohara，C7^附爿6^"，第94巻，第15402x頁(1951);Moser等，/MWC7^附，第33巻，第2358頁(19卯)。當z為溴時，該縮合反應在^H匕鹽(例如硤化鉀)存在下進行。獲得的式(V)的鄰-苯胺基苯乙醯胺的水解可以在如下條件下進行在鹼性氫氧化物水溶液中，例如在6NNaOH中，在醇(例如乙醇、丙醇和丁醇)存在下，在升高的溫度下，例如在反應混合物的回流溫度下。式(VI)的酯的水解可以根據本領域已知的方法進行，例如，在上面式(V)化合物所述的鹼性條件下，或者也可以在酸性條件下，例如採用甲磺酸。式(II)或(III)的原料通常為已知的，或者可以根據本領域中已知的方法製備，例如根據下列文獻中所述方法製備Nohara在日本專利申請第78/96，434(1978)號中所述；美國專利號6,291,523以及本文中所述方法。例如，將相應的鄰氨基苯曱酸轉化為鄰-重氮鹽衍生物，隨後在酸(例如硫酸)中採用鹼金屬硤化物處理，獲得2-碘苯甲酸或其低級烷基酯。根據本領域中已知的方法，採用例如乙硼烷或氬化鋁鋰將酯還原為相應的節基醇，先將醇轉化為為溴化物，然後轉化為腈，再將腈水解為乙酸，將其轉化為7V，7V-二垸基醯胺，獲得式(II)的原料。或者，例如，式(II)(其中Z為Br，R為環丙基)的原料首先根據/爿附C&附Soc，第123巻，第4155頁(2001)中所示方法縮合進行製備，例如，在三氯化銦存在下將2-溴-5-碘苯甲酸曱酯與環丙基溴縮合，獲得2-溴-5-環丙基苯甲酸甲酯，然後根據上述方法將其轉化為相應的式(II)的2-溴-5-環丙基苯基乙醯胺。另外，式(II)(其中R為例如乙基)的原料可以如下製備，在氯化鋁存在下，採用例如乙醯氯進行羥吲咪的Friedel-Crafts乙醯化反應，獲得的酮通過例如催化氫化反應還原，隨後將獲得的5-乙基羥吲哚水解為鄰氨基-苯基乙酸。在例如碘化鉀存在下進行重氮化反應，獲得鄰碘-苯基乙酸，隨後將其轉化為式(II)的醯胺。式(III)的酯根據本領域中已知的酯化方法自相應的酸製備。式(IV)的苯胺在本領域中為已知的，或者可以根據本領域中眾所周知的方法以及本文中所述方法製備。方法(b)中5-乙基或5-正丙基取代的化合物的製備可以例如首先在Friedel-Crafts醯化條件下進行，例如在氯化鋁存在下，在惰性溶劑(例如1，2-二氯乙烷)中進行，隨後採用例如鈀炭催化劑進行氫解，優選在作為溶劑的乙酸中於室溫下以及約3個大氣壓下進行。式(VII)的原料通常可以根據方法(a)項下所述製備，採用式(II)(其中R代表氫)的醯胺為原料，例如根據上述Moser等(19卯)所述方法。根據方法(c)的本發明化合物的製備可以在本領域中已知的用於內醯胺的水解的條件下進行，優選採用強鹼水溶液(例如氫氧化鈉水溶液)進行，12任選在有機水混溶溶劑(例如甲醇)存在下、在升高的約50-100。C的溫度下進^f亍，如美國專利號3，558，6卯中的通用方法。式(IX)的羥P引咮原料可以通過式(X)的二芳基胺其中R和Ri-Rs如上文所定義，用卣代乙醯氯(優選氯代乙醯氯)進行7V-醯基化反應製備，最好在升高的溫度下(例如接近IO(TC)進行，獲得式(XI)的化合物其中R和R3-Rs如本文中所定義。在Friedel-Crafts催化劑(例如，氯化鋁和乙基二氯化鋁)存在下，於升高的溫度下(例如，120-175。C),在惰性溶劑(例如二氯苯)中，在Friedel-Crafts烷基化條件下進行式(XI)化合物的環化反應。式(X)的原料胺可以通過Ullmann縮合反應以及其它本領域已知的方法(例如，Buchwald偶合反應)進行製備。根據本領域中眾所周知的方法，例如在極性溶劑(例如7V，iV-二曱基曱醯胺)中，式(I)的羧酸酯可以通過羧酸(以鹽的形式)或者在鹼存在下與相應的酯化醇的卣化物(溴化物或氯化物)縮合製備，例如氯代乙酸爺基酯，並且需要時可以將獲得的產物進一步修飾。例如，如果酯化產物本身為酯，則例如通過將獲得的卡基酯氫解，可以將其轉化為羧酸。而且，如果酯化產物本身為卣化物，則通過例如與硝酸銀反應，可以例如將其轉化為硝基氧基衍生物。例如，式(Ia)化合物優選通過將上述式(I)的羧酸鹽與下式化合物縮合製備X~CH2~COORb其中X為離去基團；並且Rb為g-保護基團；獲得g-保護形式的式(Ia)化合物，隨後除去保護基團Rb。所述酯化反應可以在本領域中已知的酯化條件下進行，例如，在極性溶劑(例如7V，iV-二甲基甲醯胺)中，在室溫至約100。C的溫度範圍內，優選在40-60。C的範圍內，例如，才艮據美國專利號5，291，523中所述方法進^f亍。式(I)的酸的鹽優選為鹼金屬鹽，例如可以在位製備的鈉鹽。離去基團X優選為囟素(例如氯或溴)或低級烷基磺醯基氧基(例如曱磺醯基氧基)。g-保護基團Rb優選為爺基。優選，在例如Pd/C催化劑存在下，在乙酸中，在大氣壓下或者在Parr氫化下，在室溫至約50。C的溫度範圍內，採用氫進行氫解，可以將獲得的千基酯轉化為游離的式(Ia)酸。本發明包括任何新的原料以及製備它們的方法。最後，本發明化合物可以以游離形式獲得，或者如果存在鹽形成基團時，可以以其鹽的形式獲得。最好在醚或醇溶劑(例如低級烷基醇)存在下，採用可藥用鹼(例如鹼金屬氫氧化物水溶液)，可以將本發明的酸性化合物轉化為金屬鹽。通過採用酸處理可以將獲得的鹽轉化為游離化合物。這些或其它鹽也可以用於獲得的化合物的純化。通過與適當的胺(例如二乙胺等)反應可以獲得銨鹽。具有鹼性基團的本發明化合物可以轉化為酸加成鹽，特別是藥學上可接受的鹽。它們可以與例如下列酸形成無機酸，例如礦酸(mineralacid)(如硫酸)、磷酸或氫卣酸；或有機羧酸，例如(C廣CO烷羧酸(例如，可以為未取代的或者被卣素取代的)(如乙酸)，例如飽和的或不飽和的二羧酸(例如，草酸、琥珀酸、馬來酸或富馬酸)，例如羥基羧酸(例如，乙二酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸或檸檬酸)，例如胺基酸(例如，天冬氨酸或穀氨酸)；或有機磺酸，例如(C廣CO烷基磺酸，如甲磺酸；或芳基磺酸，未取代的或者被例如卣素取代的。優選與鹽酸、甲磺酸和馬來酸形成的鹽。考慮到游離化合物與其鹽形式化合物之間的密切聯繫，當在本文中提及化合物時，也包括相應的鹽，前提是在此情況下相應的鹽為可能的或適當的。化合物(包括其鹽)也可以以7jc合物的形式獲得，或者包含用於其結晶的其它溶劑。除非另外說明，本文中所使用的通用定義在本發明範圍中具有如下意義。藥學上可接受的酯優選前藥酯衍生物，它們可以通過溶劑分解或者在生理學條件下轉化為例如式(I)的羧酸。此類酯為例如，低級烷基酯，例如甲基或乙基酯；皿-低級烷基酯，例如羧基甲酯；硝基氧基-或亞硝基氧基-低級烷基酯，例如4-硝基氧基丁基或4-亞硝基氧基丁基酯等。優選式(Ia)的苯基乙醯氧基乙酸及其藥學上可接受的鹽R3(Ia)其中R、R3、R4和Rs如本文中式(I)化合物所定義。藥學上可接受的鹽代表金屬鹽，例如鹼金屬鹽，如鈉、鉀、鎂或鈣鹽；銨鹽，它們可以例如與氨以及單-或二-烷基胺形成，例如二乙基銨鹽；與胺基酸形成的鹽，例如精氨酸鹽和組胺酸鹽。低級烷基含有至多6個碳原子，優選1-4個碳原子，可以是直鏈或支鏈的，代表例如甲基、乙基、丙基、丁基、異丙基、異丁基等，優選甲基或乙基。低級烷氧基為甲氧基、乙氧基等。卣素優選為氯、溴或氟，最好為氯或氟。本發明化合物用作選擇性COX-2抑制劑或作為其前藥。本發明的選擇性COX-2抑制劑及其前藥特別用於治療例如炎症、發熱、疼痛、骨關節炎、痛經、類風溼性關節炎及其它對COX-2的抑制有響應的疾病，一般來說，它們基本上沒有與常規非甾體類抗炎成分有關的不需要的胃腸副作用。上述性能可以通過體外和體內實驗證實，實驗最好採用哺乳動物(例如大鼠、小鼠、犬、猴)和人類及非人類來源的分離的細胞或酶製品。所述化合物可以以溶液的形式(例如水溶液)體外應用，也可以以口I良、局部或胃腸夕卜(例如靜脈內)的形式體內應用。體外的劑量範圍約為10-5-10力摩爾濃度。體內的劑量範圍取決於給藥的途徑，約為0.1mg/kg-100mg/kg。生物學性質可以通過本領域已知的實驗證實，例如根據美國專利號6,291,523以及本文中所述的方法進行。COX-2的抑制可以通過體外酶分析方法採用獲自商業的試劑盒(CaymanChemicalCompany)證實。將實驗化合物(採用緩衝液稀釋至各種濃度的DMSO儲備液)與30-50單位的純化的重組人COX-2和hemactin(lpM)—起於25。C預溫育30分鐘，隨後與100jiM花生四烯酸和比色底物1]\0(7\;"〃',^7-四曱基-^/"-亞苯基二胺)一起於25。C預溫育5-7分鐘，然後於5卯nm進行被氧化的TMPD的比色測定。將有實驗化合物存在下的COX-2的活性與不含實驗化合物的對照的COX-2的活性進行對比。COX的抑制也可以在體外採用細胞分析(可以用於COX-l和COX-2兩者的抑制)進行測定。用於研究COX抑制劑的細胞分析在本領域中是已知的，該研究的根據在於COX酶(前列腺素H合酶)能夠促進自花生四烯酸開始的前列腺素合成的限速步驟的速率。兩種酶能夠調節該反應COX-l為該酶的構成形式，而COX-2通過對各種生長因子和細胞活素的響應而被誘導。採用前列腺素E2免疫分析(CaymanPGE2試劑盒)，在細胞分析中測定體外COX-l和COX-2的抑制，從而評價COX-2抑制的體外活性和選擇性。採用的細胞為已經被轉染的HEK-293EBNA細胞，能夠分別穩定表達重組人COX-l或重組人COX-2。將細胞塗布於用於進行分析的96孔板中。兩種細胞系均採用化合物稀釋液於37。C預先處理30分鐘，然後加入作為外源性底物的花生四烯酸酸(lHM)。15分鐘後收集上清液，通過免疫分析測定PGE2的產生量。為了進行IC知的測定，對化合物的5-9種濃度進4亍實驗，每一種濃度(最高濃度為30pM)均進行單份、雙份或四份的平行實驗。計算每一種濃度的PGE2平均抑制(與沒有採用化合物處理的細胞進行對比)，以平均抑制百分率。/。對化合物的濃度對數繪圖，採用4-參數對數擬合方法計算ICso值。比較對每一種酶的相對作用，從而評價對COX-2抑制的選擇性。體外COX-l和COX-2的抑制也可以在人類全血中進行測定，其中COX-l在血小板中構成性表達，COX-2的表達在經脂多糖(LPS)(10照/mL)處理的單核細胞中誘導。為了進行該分析，將肝素化的人血分為兩等份一份用於測定TxB2的產生(COX-l活性的代表性指標)，第二份用於測定PGE2的產生(COX-2活性的代表)。在刺激進行前將血樣用實驗化合物預處理1小時。化合物進行實驗的終濃度範圍為O.lnM-300fiM，濃度以半對數方式增加。為了測定對血栓素B2(TxB2)產生的抑制，加入A23187(50pM)，將血溫育1小時。加入LPS(10照/mL)並隨後溫育過夜後，測得PGE2的產生。與A23187或LPS溫育後，將樣品於4。C以250xg離心10分鐘，收集血清。採用獲自AssayDesignsInc.(AnnArbor，MI)的化學發光酶免疫分析方法，測定血清中存在的PGE2和TxB2的量。將每一個樣品中的前列腺素的水平歸一化為由每一種濃度的實驗化合物所導致的百分抑制率。收集每一個供體的百分抑制率，採用回歸方法將其擬合為4-參數對數函數。在COX-2抑制分析中的式(I)化合物的ICso值低至約0.10iliM，或者甚至更低。優選化合物的COX-l抑制和COX-2抑制的ICso值的比例高於50，最好在約100-1000的範圍內或者更高。例如，根據上述分析獲得下列IC50值，為採用一種以上的分析所獲取的平均值tableseeoriginaldocumentpage17在脂多糖(LPS)-激發的大鼠皮下氣囊模型中，在體內測定COX-2導致的前列腺素-E2的抑制。參見炎症研究進展(v4^WI"S/W/w/Zfl/MWW/Ofl/^m"";0，RavenPress(l986);/M^/.C7^附"第39巻，第1846頁(1996);/./^Ao/,，第141巻，第483-495頁；和/.屍W/^/.，第134巻，第147-156頁。將雌性Lewis大鼠麻醉，然後通過無菌0.45微米注射器濾膜(syringe-adaptedfilter)經皮下注射10mL空氣製備背部氣嚢。製備完成6或7天後，將懸浮於無菌磷酸鹽緩衝鹽水中的LPS注射到氣嚢中(每嚢5jLig)。LPS激發前1小時或者激發後2小時或2小時以上，通過管銅法給予待評價化合物。LPS激發後5小時收集嚢內容物，通過酶免疫分析測定嚢液體中存在的PGE2JC平。例如，本發明實施例4(j)的化合物口服給藥1mg/kg時抑制PGE2形成達約50%。才艮才居Offerness等在"非甾體抗炎藥(7VoM5te/wV/a/爿Mft7w/Zfl附附ato^"r"^y)"，Lombardino,Ed.，JohnWiley&Sons,第116-128頁(1986)中所述的改良方法，採用角叉膠誘導的大鼠足腫脹分析，測定抗炎活性。將SpragueDawley大鼠(200-225g)禁食過夜，然後口服給予溶於0.5%曱基纖維素中的化合物。l小時後，向左後足的足下區注射0.1mL體積的1%角叉膠鹽水溶液，引起炎症反應。注射角叉膠3小時後，將大鼠人道處死，自足毛交界線處切下兩個後足，在電子天平上稱重。自發炎足(左足)的重量減去非發炎足(右足)的重量，測定發炎足中水腫的量。通過獲得的與對照平均值進行對比的足重百分率計算化合物對每一隻動物的抑制百分率。口服給予實驗化合物4小時後進行測定，採用胃耐受性分析評價大鼠的嚴重潰瘍的形成。該實驗進行如下雄性SpragueDawley大鼠禁食過夜，通過管飼法給予^L在0，5%甲基纖維素載體中的化合物，4小時後通過吸入二氧化碳處死。切除胃，計數並測定嚴重胃損傷，獲得每一個大鼠的總的損傷長度。每一實驗均包括下列各組(每組5-6隻大鼠)載體對照組、實驗化合物組以及作為參比化合物的雙氯芬酸組。18計算數據，表示為各組中潰瘍的平均數、各組中潰瘍的平均長度(mm)以及潰瘍指數(UI)。UI=各組中潰瘍的平均長度x潰瘍發生率其中潰瘍發生率為各組中動物損傷的分數(100%發生率為1)。例如，本發明實施例的化合物以30mg/kg口服給藥時基本上沒有任何胃潰瘍作用。通過測定對腸通透性的作用，可以測定腸的耐受性。通透性增加的缺乏是腸耐受性的指標。採用的方法為Davies等，屍/rfl/m及es.，第11巻，第1652-1656頁(1994)的改良方法，根據在於NSAIDs使得口服給予的"Cr-EDTA(小腸通透性的標記物)的排洩增加。通過胃插管法給予雄性SpragueDawley大鼠組(每組^12隻)單次口服劑量的實驗化合物或載體。給予化合物後立即通過胃插管法給予每一隻大鼠"Cr-EDTA(每隻大鼠5^Ci)。然後將大鼠置於各個代謝籠中，使其隨意進食食物和水。收集24小時的尿液。給予51Cr-EDTA24小時後，將大鼠處死。通過將在經化合物處理的大鼠的尿液中測定的排洩的51Cr-EDTA與在經載體處理的大鼠的尿液中測定的排洩的51Cr-EDTA進行比較，定量測定化合物對腸通透性的影響。經背景放射校正後，通過計算每一份尿樣中相對於給予劑量的活性百分數測定相對通透性。本發明化合物的鎮痛活性在大鼠中採用完全弗式佐劑(CFA)-誘導的痛覺過敏進行測定。將50piCFA注射到左後足中。CFA注射前24小時，採用標準足-壓力儀器(Analgesymeter，UgoBasile，Milan)測定痛覺閾值。以足爪的收縮或掙扎作為終點。將化合物溶於0.5%甲基纖維素並經口給藥，給藥後於l、3和6小時再測定痛覺閾值。在每一個實驗中，一組只個動物接受載體或一個劑量的化合物。結果以初始劑量痛覺過敏逆轉的百分率計算。計算每一個化合物達到初始劑量痛覺過敏的30。/。抑制的劑量(D30)，從而獲得對效能的整體評價。本發明化合物抗關節炎作用可以根據眾所周知的大鼠慢性佐劑關節炎實驗(chronicadjuvantarthritistest)進4亍觀'J定。目艮部作用可以在眾所周知的眼睛分析方法中得到證明。同樣，抗腫瘤19活性可以在眾所周知的抗肺瘤動物實驗中得到證實。本發明的藥用組合物是那些適用於腸道(例如口服或直腸)、透皮、局部以及胃腸外給藥於哺乳動物(包括人類)抑制COX-2活性的組合物，適用於治療COX-2依賴性疾病，可以單獨含有有效量的具有藥理學活性的本發明化合物，或者也含有聯合應用的其它治療成分以及一或多種藥學上可接受的載體。更特別的是，藥用組合物含有有效的COX-2抑制量的本發明的選擇性COX-2抑制化合物，基本上沒有COX-l抑制活性以及與^M目關的副作用。本發明的具有藥理學活性的化合物可以用於生產藥用組合物，該組合物含有有效量的所述化合物以及與之結合或混合的適用於腸道或胃腸外應用的賦形劑或載體。優選片劑和明皿嚢，它們含有活性成分以及下列物質a)稀釋劑，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素和/或甘氨酸；b)潤滑劑，例如二氧化矽、滑石粉、硬脂酸、其鎂鹽或鈣鹽和/或聚乙二醇；對於片劑，也可以含有c)粘合劑，例如矽酸鋁鎂、澱粉漿、明膠、黃芪膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮；需要時可以含有d)崩解劑，例如澱粉、瓊脂、藻酸或其鈉鹽或者泡騰混合物；和/或e)吸收劑、著色劑、矯味劑和鄰"未劑。注射用組合物優選等滲水溶液或懸浮液，栓劑最好製備自脂肪乳劑或懸浮液。所述組合物可以是無菌的和/或含有輔助劑，例如防腐劑、穩定劑、潤溼劑或乳化劑、促溶劑、用於調節滲透壓的鹽和/或緩衝劑。另外，它們也可以含有其它具有治療作用的物質。所述組合物可以根據常規的混合、制粒或包衣方法製備，含有約0.1-75%(優選約1-50%)的活性成分。片劑可以根據本領域已知的方法進行薄膜包衣或者包腸衣。透皮應用的適當的製劑含有有效量的本發明化合物以及栽體。適當的栽體包括可吸收的藥理學上可接受的溶劑，有助於通過宿主的皮膚。例如，透皮裝置為繃帶形式，包括被襯、含有化合物以及任選的載體的儲庫、任選的控速屏障(用於將化合物以受控或預定的速率在較長的時間內傳遞通過宿主的皮膚)以及將該裝置固定到皮膚的裝置。局部應用(例如用於皮膚或眼睛)的適當的製劑包括水溶液、混懸液、軟膏、霜劑、凝膠或噴霧製劑，例如通過氣霧劑等傳遞的製劑。此類局部傳遞系統尤其適用於皮膚應用，例如用於治療皮膚癌，例如在防曬霜、洗劑、噴霧劑等中的預防應用。在此方面，需要注意的是，本發明化合物能夠吸收290-320nm範圍的UV射線，同時允許較高波長的4吏皮膚曬成褐色的射線通過。因此，它們特別適用於局部應用，包括化妝品、本領域中已知的製劑。此類製劑可以含有增溶劑、穩定劑、增強張力的成分、緩衝劑和防腐劑。適用於局部應用的製劑可以例如才艮據美國專利號4,784,808中所述方法製備。目艮部給藥的製劑可以例如根據美國專利號4,829,088和4，960，799中所述方法製備。本發明化合物可以單獨使用，或者與其它治療成分組合應用。例如，用於與瘤形成(惡性和良性)治療有關的適當的其它活性成分包括例如抗腫瘤成分或者在國際專利申請WO98/16227等中所述的防輻射成分。其它適當的其它治療成分包括鎮痛劑，例如NSAIDs、羥可酮、可待因、樸熱息痛、布洛芬、曲馬多、左啡諾、丙氧芬、酮咯酸、噴他佐辛、哌替啶等；肌肉鬆他劑，例如苯並瘞二唑類，如Sirdalucf;抗血小板藥物，例如阿司匹林、氯吡格雷、噻氯匹定等；二膦酸酯/鹽類，例如唑來膦酸鹽(zoledronate)、帕米磷酸鹽、利塞膦酸鹽、阿倫膦酸鹽等；他汀類，例如氟伐他汀、阿託伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、瑞舒伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀等；抗酸藥；質子泵抑制劑，例如奧美拉唑、埃索美拉唑；鈣敏感受體拮抗劑(calcilytics);降釣素，例如口服降釣素；抗-IL-ipIgGl/K抗體；抗高血壓藥，例如ACE抑制劑、血管緊張素II阻斷劑、腎素抑制劑。與其它活性成分聯合應用時，本發明化合物可以與其它活性成分同時給藥、在其給藥之前或之後給藥，可以通it^目同或不同的給藥途徑分別給藥，或者在相同的藥物製劑中一起給藥。給予的活性化合物的劑量取決於溫血動物(哺乳動物)的種類、體重、年齡和個體情況以及給藥的模式。口服給予體重約50-70kg的哺乳動物的單位劑量可以含有約5mg至500mg的活性成分。本發明也涉及在哺乳動物中使用本發明化合物及其藥學上可接受的鹽或其藥用組合物的方法，用於抑制COX-2和用於治療本文中所述的疾病，例如炎症、疼痛、類風溼性關節炎、骨關節炎、痛經、腫瘤和其它<:0乂-2-依賴性疾病。特別的是，本發明涉及在哺乳動物中抑制COX-2活性而基本上不抑制COX-l活性的方法，該方法包括給予需要的哺乳動物有效的COX-2抑制量的本發明化合物。因此，本發明也涉及在哺乳動物中治療COX-2依賴性疾病的方法，該方法包括給予需要的哺乳動物有效的COX-2抑制量的本發明化合物。更特別的是，本發明涉及在哺乳動物中治療COX-2依賴性疾病同時基本上消除與COX-l活性相關的不需要的副作用的方法，該方法包括給予需要的哺乳動物有效的COX-2抑制量的本發明的選擇性COX-2抑制化合物，該化合物基本上沒有COX-l抑制活性。更特別的是，本發明涉及在哺乳動物中治療例如類風溼性關節炎、骨關節炎、疼痛、痛經、痛風或炎症的方法，該方法不會引起不需要的胃腸道潰瘍，該方法包括給予需要的哺乳動物相應的有效量的本發明化合物。下列實施例用於說明本發明，並非欲對其加以限定。採用的溫度為攝氏度。如果沒有另外說明，所有的蒸發均在減壓下進行，優選在約15mmHg至100mmHg之間(-20-133mbar)。終產物、中間體和原料的結構可以通過標準分析方法確證，例如，孩i量分析和光語特徵分析，例如，MS、IR和NMR。縮寫和商標為本領域中常規應用的。具有代表性的示例如下所示BOC:叔-丁氧基羰基COD:環辛二烯DMAP:4-二曱基^t^-吡咬DME:1，2-二甲氡基乙烷DSC:差示掃描量熱法DMF:N，N-二甲基甲醯胺22d卿二苯基膦基丙烷EDCI:l-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽HOAt:l-羥基-7-氮雜苯並三唑LAH:氫化鋁鋰匪M:N-甲基嗎啉SelectfluorTM:l-(氯代曱基)-4-氟-l，4-二氮雜雙環[2.2.2辛烷二(四氟硼酸鹽)THF:四氫呋喃TLC:薄層色鐠實施例實施例1苯胺原料A.2，4-二氯代-3-甲基苯胺根據r"m/^rfnw，Vol.53，No.17，第6145頁(1997)所述方法，通過將2，4-二氯代-3-甲J^'基絲原，製備2，4-二氯代-3-甲基苯胺。B.2，4-二氯代-3-乙基苯胺向2，4-二氯代苯胺(42.0g，260mmol)的AcOH(40.0mL)溶液中加入Ac2O(80mL)。將反應混合物溫熱至50°C，於此溫度下攪拌l小時。將反應物冷卻至室溫並倒入水水中(500mL)。形成固體沉澱，將混合物於室溫下再攪拌l小時。過濾固體，用水、己烷洗滌，空氣中乾燥獲得AK2，4-二氯代苯基)乙醯胺。於-70。C，向N-(4-氯代-2-氟苯基)乙醯胺(30.0g,147mmol)的THF(300mL)溶液中滴加(保持反應溫度低於-60。C)"-BuLi(2.0M的環己烷溶液，147mL，294mmol)。將反應物於-60至-70。C攪拌2小時，於-70。C滴加l，l，l-三氟-2-碘乙烷(46,2g，220mmol)。反應混合物於此溫度下再攪拌1.5小時，隨後緩慢加入3NHC1(108mL)溶液。將混合物溫熱至室溫，用EtOAc萃取(200mLx3)。合併有機層，用水、鹽水洗滌，然後經硫酸鎂乾燥。除去溶劑，殘留物在乙醚和己烷(l:2，120mL)中攪拌l小時。過濾固體沉澱物，獲得7V-(2,4-二氯代-3-碘苯基)乙醯胺。23向7V-(2，4-二氯代-3-碘苯基)乙醯胺(40.0g，121mmol)的MeOH(lOOmL)溶液中加入濃HCl(50mL)。將混合物攪拌並於回流下加熱18小時。冷卻混合物，減壓除去溶劑(水浴低於45°C)。殘留物用水浴冷卻，加入3NNaOH溶液將pH調節至9-10。混合物用乙醚萃取，硫酸鎂乾燥。除去溶劑，殘留物經快速色傳柱純化，採用己烷/乙醚梯度洗脫，獲得2，4-二氯代-3-碘苯胺。向2，4-二氯代-3-硪苯胺(9.0g，31mmol)的DME/水(180mL/60mL)溶液中加入乙烯基三硼雜環己烯(vinyltriboroxine)吡啶複合物(5.0g，20，8mmol)和K2C03(8.5g，62.0mmol)。將反應混合物攪拌，^/v氮氣15min。於室溫下加入四(三苯膦)鈀(0)(1.8g，1.6mmo1)，再次吹入氮氣20min。將反應混合物加熱至80。C並攪拌18小時，GC-MS顯示反應完全。過濾混合物，用乙醚(400mL)和水(50mL)洗滌。分離有機層，用鹽水洗滌，硫酸鎂乾燥。除去溶劑，殘留物經快速色i普柱純化，採用己烷/乙醚梯度洗脫，獲得2，4-二氯代-3-乙烯基苯胺。向2，4-二氯代-3-乙烯基苯胺(4.9g，26mmol)的EtOAc(60mL)溶液中加入10%Pd/C(0.50g)。向壓力燒瓶中充入H2達到55psi，振搖2小時。除去過量的氫氣，混合物通過硅藻土塾過濾。除去溶劑，獲得的殘留物經快速色鐠柱純化，採用己烷/乙醚梯度洗脫，獲得2，4-二氯代-3-乙基苯胺。C.2-氟-4-甲基-3-三氟苯胺向2-氟-3-三氟甲基苯胺(5.0g,28mmol)的DMF(25mL)溶液中加入NBS(5.0g,28mmol)的DMF(25mL)溶液。2.5小時後，將反應物在乙醚和飽和的NaCl水溶液之間分配。分離的有機相採用新鮮的飽和氯化鈉水溶液洗滌二次，硫酸鈉乾燥並減壓濃縮，獲得為油狀物的4-溴-2-氟-3-三氟甲基苯胺。將上述溴化物(IO.Og，38.8mmol)、三甲基環三硼氧烷(4.9g，38.8mmol)、K2C03(16.1g，116mmol)和四三苯膦鈀(4.5g，3.9mmol)在氮氣環境中加熱。加入第二份三甲基環三硼氧烷(trimethylboroxine)(4.9g，38.8mmol)以消耗原料溴化物。18小時後，將冷卻的反應物在EtOAc和飽和氯化鈉水溶液之間分配。分離的有機層用新鮮的鹽水洗滌(3x)，硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。殘留物經快速層析純化(Et20/己烷)，獲得目標苯胺。D.2-氟-4-乙基-3-三氟苯胺將上述4-溴-2-氟-3-三氟曱基苯胺(5.0g，19.4mmol)和三丁基乙烯基氯化錫(7.1g，20.4mmol)加至無水DMF(100mL)中。溶液採用氮氣脫氣，加入四三苯膦鈀(1.5g,1.3mmol)，將反應物於120。C加熱18小時。冷卻後，將反應混合物在Et20和飽和氯化鈉水溶液之間分配。分離的醚層採用新鮮的飽和氯化鈉水溶液(2x)洗滌，硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。殘留物經快速層析純化，採用5%、然後10%、最後20。/oEtOAc的己烷溶液洗脫，獲得需要的產物，2-氟-3-三氟甲基-4-乙烯基苯胺。將上述製備的2-氟-3-三氟甲基-4-乙烯基苯胺(4.0g，19.4mmol)溶於EtOH，用氮氣脫氣，加入10%鈀炭(0.5g)。將混合物置於Parr設備中，採用氫氣於室溫下處理。將反應物充入氮氣並過濾。濾墊用新鮮的乙醇洗滌，合併濾液。向冷卻的濾液中(0。C)加入濃HC1(6.5mL)，隨後減壓除去揮發物。獲得的白色固體用Et20洗滌，過濾收集，獲得4-乙基-2-氟-3-三氟甲基苯胺鹽酸鹽。通過在Et20和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配，自鹽酸鹽製備游離的苯胺。分離的有機層用鹽水洗滌，硫酸鈉乾燥並真空濃縮，獲得4-乙基-2-氟-3-三氟甲基苯胺，為油狀物。E.4-氯代-2-氟-3-甲基苯胺向6-氯代-2-氟-3-甲基苯甲酸(10g，53mmol)中加入CH2Cl2(60mL)、DMF(0.5mL)和草醯氯(9.25mL，106mmol)。攪拌反應混合物直到其均勻，然後真空濃縮。將殘留物倒入50:50的冰和36%氫氧化銨的混合物中，得到6-氯代-2-氟-3-甲基苯甲醯胺。將上述製備的6-氯代-2-氟-3-甲基苯甲醯胺溶於MeOH。加入曱醇鈉(16.1g，298mmol)，將反應物加熱至回流。然後分次加入為固體的NBS(21.2g，119mmo1),將反應混合物於回流下再攪拌2小時。冷卻後，減壓除去揮發物，殘留物用EtOAc和水稀釋。分離有機相，水層用新鮮的EtOAc萃取(3x)。合併的有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮，獲得7V-6-氯代-2-氟-3-甲基-苯基)絲曱酸甲酯。將上述製備的氨基曱酸酯溶於MeOH(220mL)和水(22mL)中。加入氬氧化鉀(31g，560mmol),將反應物於回流下加熱12小時。將反應物冷卻至室溫後，減壓除去MeOH，殘留物用水稀釋，用CH2C12萃取(3x)。合併的有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物經快速層析純化，採用10%EtOAc的己烷溶液洗脫，獲得6-氯代-2-氟-3-曱基苯胺。向6-氯代-2-氟-3-曱基苯曱酸(10g，53mmol)中加入CH2C12(60mL)、DMF(0.5mL)和草醯氯(9.25mL，106mmol)。攪拌反應混合物直到其均勻，然後真空濃縮。將殘留物倒入50:50的水:36%氫氧化銨的混合物中，得到6-氯代-2-氟-3-甲基苯曱醯胺。將上述製備的6-氯代-2-氟-3-甲基苯甲醯胺溶於MeOH。加入甲醇鈉(16.1g，298mmol)，將反應物加熱至回流。然後分次加入為固體的NBS(21.2g，119mmo1)，將反應混合物於回流下再攪拌2小時。冷卻後，減壓除去揮發物，殘留物用EtOAc和水稀釋。分離有才;i4目，水層用新鮮的EtOAc萃取(3x)。合併的有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮，獲得7V-6-氯代-2-氟-3-曱基-苯基)氨基甲酸甲酯。將上述製備的氨基曱酸酯溶於MeOH(220mL)和水(22mL)中。加入氫氧化鉀(31g，560mmol),將反應物於回流下加熱12小時。將^^應物冷卻至室溫後，減壓除去MeOH，殘留物用7JC稀釋，用CH2Cl2萃取(3x)。合併的有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物經快速層析純化，採用10。/。EtOAc的己烷溶液洗脫，獲得6-氯代-2-氟-3-曱基苯胺。F.4-氯代-2畫氟國3-乙基苯胺向4-氯代-2-氟苯胺(50.0g，344mmol)的AcOH(30mL)溶液中加入Ac2O(60mL)，將反應物於室溫下攪拌2小時。將混合物倒入水水(500mL)中獲得固體沉澱物。將混合物於室溫下再攪拌l小時。過濾固體，用水和己烷洗滌，然後空氣乾燥獲得iV-(4-氯代-2-氟苯基)乙醯胺。於-78。C,向7V-(4-氯代-2-氟苯基)乙醯胺(IO.Og，53.3mmol)和二異丙基胺(7.5mL，53.3mmol)的THF(300mL)溶液中滴加w-BuLi(2.5M的己烷溶液，42.6mL，106.6mmol)，保持反應溫度低於-60。C。2小時後，於-78。C滴加碘乙烷(12.4g，80mmo1)。將反應混合物於-78。C再攪拌1.5小時。緩'艮加入INHC1水溶液，直到pH達到4-5。將混合物用EtOAc萃取(200mLx3)，合併的有機層用水和鹽水洗滌，然後經硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑，將固體殘留物在乙醚和己烷(l:4，80mL)中攪拌l小時。乾燥過濾的固體，獲得7\44-氯代-3-乙基-2-氟苯基)乙醯胺。向iV-(4-氯代-3-乙基-2-氟苯基)乙醯胺(11.0g，51.0mmol)的MeOH(80mL)溶液中加入濃HC1(40mL),然後於回流下加熱16小時。減壓下自冷卻的反應物中除去溶劑，同時保持水浴溫度低於45。C。冰浴冷卻殘留物，隨後加入3NNaOH溶液將pH調節至9-10。將混合物用乙醚萃取，硫酸鎂乾燥。除去溶劑，殘留物經快速色譜純化，採用乙^/己烷梯度洗脫，獲得4-氯代-3-乙基-2-氟苯胺。採用相同的方法製備4-氯代-3-曱基-2-氟苯胺。G.4-氯代-2-氟-3-異丙基苯胺於-78。C，向上述製備的iV-(4-氯代-2-氟苯基)乙醯胺(12.0g，64mmol)的THF(300mL)溶液中滴加w-BuLi(2.0M的環己烷溶液，64mL，128mmol)，保持反應溫度低於-60。C。將反應混合物於-60至-70。C攪拌2小時，於-78。C滴加1，1，1-三氟-2-碘乙烷(20.1g，96mmol)。將混合物於此溫度下再攪拌3小時。於-78。C緩慢加入1NHC1(200mL)。將混合物溫熱至室溫，用EtOAc萃取(200mLx3)。合併的有機層用水和鹽水洗滌，然後經硫酸鎂乾燥。除去溶劑，將殘留物在乙醚和己烷(l:2，120mL)中攪拌l小時。過濾固體獲得7V-(4-氯代-2-氟-3-碘苯基)乙醯胺。向7V-(4-氯代-2-氟-3-硪苯基)乙醯胺(20.0g，64mmol)的MeOH(80mL)混合物中加入濃HC1(60mL)。將混合物於回流下攪拌18小時，隨後冷卻至室溫，減壓除去溶劑，同時保持水，;^f氐於45。C。用冰浴冷卻殘留物，加入lNNaOH溶液將pH調節至9-10。7jc相用乙醚萃取，硫酸鎂乾燥。除去溶劑，殘留物經快速色i普柱純化，採用己烷/乙醚梯度洗脫，獲得4-氯代一2-氟-3隱硪苯胺。向4-氯代-2-氟-3-珙苯胺(13.5g，50mmol)的DME/水(150mL/50mL)溶液中加入2-丙烯硼酸(6.4g，74.6mmol)和K2CO3(20.6g，150mmol)。吹入氮氣15分鐘，隨後於室溫下加入四(三苯膦)鈀(0)(2.8g，2.5mmo1)。再次^v氮氣20分鐘，隨後將反應混合物加熱至8(TC18小時。將混合物通過硅藻土墊過濾，用乙醚(400mL)和水(50mL)洗滌。分離有機層，用鹽水洗滌，硫酸鎂乾燥。除去溶劑，殘留物經快速色語柱純化，採用己烷/乙醚梯度洗脫，獲得4-氯代-3-異丙烯-2-氟苯胺。向4-氯代-3-異丙烯-2-氟苯胺(4.5g，24.2mmol)的EtOAc(50mL)溶液中加入10%Pt/C(0.45g)。將壓力燒並瓦充入氫氣達50psi，於室溫下振搖4小時。除去過量的氫氣，將混合物通過硅藻土墊過濾。除去溶劑，得到的殘留物經快速色i普柱純化，採用己烷/乙醚梯度洗脫，獲得4-氯代-3-異丙烷-2-氟苯胺。實施例22-硤苯基乙酸酯和苯基乙醯胺原料採用相應的苯曱酸或2-二氫P引咮酮(indolinone),根據例如/Af^/C7^附，第33巻，第2358-2368頁(19卯)、美國專利號6,291,523和國際申請WO99/11605中所述方法製備，例如7V,7V-二甲基-5-甲基-2-碘苯基乙醯胺；7V，7V-二曱基-5一乙基-2-碘苯基乙醯胺。實施例35-乙基-2-(2'-氟-4'-甲基-3，-三氟曱基苯胺基)苯基乙酸7V，7V-二甲基醯胺將iV，7V-二甲基-5-乙基-2-碘苯基乙醯胺(2.0g，6.3mmol)、2-氟-甲基-3-三氟曱基苯胺(2.4g，12.6mmo1)、銅(0.2g，3.2mmol)、捵化亞銅(0.6g,3.2mmol)和K2CO3(0.9g，6.3mmol)在二甲苯(6.0mL)中的混合物於回流下加熱24小時。冷卻後，粗品反應混合物用EtOAc稀釋，通過Celite⑧過濾。將濾液減壓濃縮。殘留物經快速層析純化，己烷洗脫，然後多至25%EtOAc/己烷混合物洗脫，獲得目標化合物5-乙基-2-(2，-氟-4'-曱基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸iV，7V-二甲基醯胺。採用相同的方法製備5-甲基-2-(2，-氟-4'-甲基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸7V，7V-二甲基醯胺。5-曱基-2-(2，-氟-4，-溴-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸7V，yV-二甲基醯胺。5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸iV，7V-二甲基醯胺。5-乙基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸A^V-二甲基醯胺。5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸7V，7V-二甲基醯胺。5-乙基-2-(2，，4，-二氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸A^7V-二甲基醯胺。5-甲基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸A^V-二甲基醯胺。5-乙基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸7V"V-二甲基醯胺。5-甲基-2-(2，-氟-4，-氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸7V，7V-二甲基醯胺。5-乙基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸A^V-二曱基醯胺。5-乙基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-異丙基苯胺基)苯基乙酸A^V-二甲基醯胺。實施例45-曱基-2-(2'-氟-4'-乙基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸7V，7V-二甲基醯胺將根據實施例3中所述方法製備的5-甲基-2-(2，-氟-4'-溴-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸7V，iV-二曱基醯胺(0.8g，1.7mmol)、Pd(PPh3)4(0.1g,0.09mmol)和乙烯基三丁基錫烷(0.6g，1.9mmol)的DMF(5mL)溶液於120。C、氮氣環境中加熱過夜。冷卻後，將反應物在EtOAc和飽和的氯化鈉水溶液之間分配。分離的有機層用新鮮的氯化鈉水溶液洗滌2次。將EtOAc層乾燥並減壓濃縮。殘留物經快速層析純化，獲得5-甲基-2-(2，-氟-4'-乙烯基-3，-三氟曱基苯胺基)苯基乙酸A^-二甲基醯胺。將上述苯乙烯在列出的條件下還原。將苯乙烯溶於Z-PrOH和甲苯，脫氣10分鐘。然後加入Cs2CO3(22mg，0.07mmo1)、[Ir(cod)Cl]2(44mg，0.07mmol)和dppp(27mg，0.07mmol)，將反應物加熱至80。C過夜。將冷卻的溶液真空濃縮，殘留物經快速層析純化，採用10%、然後20%、最後30。/。EtOAc/己烷洗脫，獲得目標5-甲基-2-(2，-氟-4'-乙基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸iV，al二甲基醯胺。實施例55a)5-乙基-2-(2，-氟-4'-曱基-3，-三氟曱基苯胺基)苯基乙酸將實施例3中所述的5-乙基-2-(2，-氟-4'-甲基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸iV，7V-二甲基醯胺(0.9g，2.4mmol)在EtOH(25mL)和4NNaOH(12mL〕29中的溶液加熱至80。C過夜。冷卻後，將反應物減壓濃縮，用冰冷的EtOAc稀釋。水層的pH採用冰冷的2.5NHC1調節至1-2。分離的有機層採用硫酸鈉乾燥並濃縮為固體。將該固體採用Et20/己烷混合物研磨純化，獲得目標酸，5-乙基-2-(2，-氟-4'-甲基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸。MSm/z356(ES+)，354(ES-)CHN實測值C60.47,H4.47，N3.73相同方法製備5b)5-甲基-2-(2，-氟-4'-甲基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸。MSm/z342(ES+)，340(ES)CHN實測值C59.56，H4.36，N3.915c)5-甲基-2-(2，-氟-4'-乙基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸。NMR(400MHz，DMSO畫^)5ppm1.13(t，/=7.3Hz，3H)，2.27(s,3H),2.63畫2.70(m，2H)，3.56(s，2H)，6.87(t，/=8.6Hz，1H)，7.02-7.09(m，2H)，7.12(s，1H)，7.43(s，1H)。MSm/z356(ES+)，354(ES)5d)5-乙基-2-(2，-氟-4'-乙基-3，-三氟甲基苯胺基)苯基乙酸。匪R(400MHz，DMSO-A)Sppm1.17(t，/=7.5Hz,3H)，1.26(t，/=7.5Hz，3H)，2.59(q，/=7.5Hz，2H)，2.89(q，/=7.1Hz，2H)，3.75(d，/=22.7Hz1H)，3.83(d，/=22.7Hz，1H)，6.52(d，/=8.1Hz，1H)，7.06(d，/=8.1Hz，1H),7，23(s，1H)，7.50(d，/=8，3Hz，1H)，7.79(t，/=7.8Hz，1H)。MSm/z370(ES+)，368(ES)5e)5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸。^醒R(400MHz,DMSO畫A)Sppm2'29(s，3H)，2.41(s，3H)，3.51(s，2H)，6.51(d，/=8.8Hz，1H)，7.07畫7.22(m，4H),12.46(s，1H)。MSm/z324，326,328(ES+)，322，324,326(ES)5f)5-乙基-2-(2，,4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸。MSm/z338，340，342(ES+)，336,338，340(ES)CHN實測值C59.97，H4.71，N4.125g)5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸。匪R(400MHz,DMSO,Sppm1.14(t，/=7.5Hz,3H)，2.29(s，3H)，2.88(q，《/=7.5Hz，2H)，3.52(s，2H)，6.52(d，/=9.0Hz，1H)，7.07-7.18(m，4H)，7.25(s，1H)，12.49(br.s"1H)CHN實測值C60.53,H5.19，N3.985h)5-乙基-2-(2，，4，-二氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸。，HNMR(400MHz,DMSO-rf6)Sppm1.11-1.22(m，6H)，2.52畫2.63(m,4H)，2.88(q，/=7,5Hz，2H)，3.54(s,2H)，6.55(d，/=9.0Hz，1H)，7.11-7.15(m，3H)，7.18(s，1H)，7.26(s，1H)，12.50(br.s"1H)CHN實測值C61.39，H5.22，N4.245i)5-甲基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸。MSm/z308(ES+),306(ES一)CHN實測值C62.16，H4.79，N4.495j)5-乙基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸。MSm/z322(ES+)，320(ES—)CHN實測值C63.20，H5.22，N4.325k)5-甲基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸。，H匪R(楊MHz,DMSO畫A)Sppm1.15(t，7=7.5Hz,3H)，2.27(s，3H)，2.72(qd，/=7.5，2.1Hz，2H)，3,54(s，2H)，6.55(t,/=9.0Hz，1H)，6.98-7'07(m，3H)，7.10(s，1H)，7.30(br.s"1H)，12.35(br.s"1H)MSm/z322(ES+)，320(ES-)CHN實測值C63.54，H5.28，N4.3851)5-乙基-2-(2，-氟-4'-氯代-3，-乙基苯胺基)苯基乙酸。!HNMR(400MHz,DMSO-^)5ppm1.12-1.20(m，6H)，2.57(q，/=7.7Hz，2H)，2.68-2.76(m,2H)，3.56(s,2H)，6'58(t，/=9.0Hz，1H)，7.00(dd，/=9.0，1.5Hz，1H)，7.04-7.10(m，2H)，7'13(s，1H)，7.31(s，1H)，12.36(s，1H)CHN實測值C64.20，H5.61，N4.375m)5畫乙基畫2-(2，畫氟-4,-氯代-3，畫異丙基苯胺基)苯基乙酸。!HNMR(400MHz,CDC13)SppmL23(t，/=7.7Hz，3H)，1.37(dd，/=7.0,1.3Hz，6H)，2.62(q，/=7.7Hz，2H)，3.46畫3.60(m，1H)，3.68(s，2H)，6.72(t，/=8.8Hz，1H)，6.92(dd，/=8.8，1.8Hz，1H)，7.07畫7.14(m，2H)，7.23(d，/=8.1Hz,1H)CHN實測值C65.08，H6.16,N3.84實施例66a)5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸二乙胺鹽將600mg5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸(1.85mmols)在6ml叔丁基甲基醚(TBME)中的懸浮液加熱至40。C。滴加137mg二乙胺(1.85mmols)。將獲得的輕微渾濁的溶液經Whatman玻璃纖維濾膜通過熱過濾澄清。採用4(TC的2mlTBME洗滌濾膜。將濾液緩慢冷卻。將溶液於30。C種晶，結晶產生。將懸浮液於室溫下攪拌約15小時，然後於0""C攪拌2小時。過濾漿狀液，濾餅用0。C的4.5mlTBME洗滌。結晶於50。C、約10mbar乾燥4小時，得到白色粉末，m.p.115-116。C。6b)5-甲基-2-(2，,4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鈉將400mg5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸(1.23mmols)在4ml丙酮中的懸浮液加熱至50。C。將獲得的幾乎澄清的溶液經Whatman玻璃纖維濾膜通過熱過濾澄清。濾膜用50。C的2ml丙酮洗滌。於50。C,加入165mg30%氫氧化鈉水溶液(1.23mmols)。將溶液冷卻至室溫，於約25。C種晶。然後緩慢結晶。將懸浮液於室溫下攪拌約15小時，然後於0。C攪拌2小時。過濾後只獲得97mg溼的結晶。合併結晶和母液，攪拌下滴加6ml乙酸異丙基酯。過濾粘稠的懸浮液，固體採用乙酸異丙基酯洗滌。將鹽先於50。C/約10mbar乾燥2小時，然後於洲。C、約10mbar乾燥16小時，得到為白色粉末的鹽，m.p.254-255°C。水分析2.310/om/m6c)5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸氨丁三醇鹽將1.30g5-甲基-2-(2，,4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸(4.01mmols)在13ml丙酮中的懸浮液加熱至55。C。將獲得的幾乎澄清的溶液經Whatman玻璃纖維濾膜通過熱過濾澄清。濾膜用50。C的2.6ml丙酮洗滌。於50。C滴加0.487g氨丁三醇(Trisma鹼)(4.01mmols)的lml水溶液。將滴液漏鬥用0.5ml水洗滌。將溶液冷卻至室溫，於約40。C種晶。然後進行結晶。將懸浮液於室溫下攪拌約15小時，然後於0。C攪拌2小時。過濾漿狀液，固體採用6ml丙酮洗滌。將鹽先於5(TC/約10mbar乾燥2小時，然後於80。C、約10mbar乾燥16小時，得到為白色粉末的鹽，m.p.156-157°C，DSC162.0。C,融化焓132J/g。主要X-射線衍射峰2-e角。d值A強度計數強度％4.37120.1990736066.713.2766.6638252597.213.7196.4493431257.814.4436.1280231658.514.9435.923935665.915.6635.6532131858.916.9485.2273440374.617.7394.9959830456.322.8323.8917746485.923.7073.750033897224.8773.5762932359.825.8683.4414321740.226.5963.348865401006d)5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸4丐單水合物將1.30g5-曱基-2-(2，,4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸(4.01mmols)在13ml丙酮中的懸浮液加熱至55。C。加入0.535g30%氫氧化鈉水:容液(4.01mmols)。將獲得的幾乎澄清的溶液於50。C經Whatman玻璃纖維濾膜通過過濾澄清。濾膜用50。C的3.9ml丙酮洗滌。然後於50。C滴加0.51g氯化4丐(4.41mmols)的lml水溶液。將滴液漏鬥採用0.5ml水洗滌。將獲得的粘稠懸浮液冷卻至室溫。於25。C再加入7ml水。將混合物於室溫下攪拌l小時並過濾。濾餅用20ml丙酮/水2:1v/v洗滌，然後採用5ml丙酮洗滌。將結晶先於50'C/約10mbar乾燥2小時，然後於8(TC、約10mbar乾燥16小時。因為鹽中仍然混雜有某些氯化鈉，因此將結晶懸浮於13.5ml水和1.5ml丙酮中，將懸浮液於室溫下攪拌1小時。過濾後，將濾餅用8ml水/丙酮9:lv/v分4次洗滌。將鹽先於50。C/約10mbar乾燥2小時，然後於80。C、約10mbar乾燥16小時，得到白色粉末，m.p.278畫279。C，DSC147.1/224.2。C，融化焓121/2J/g。水分析2.63%m/m主要X-射線衍射峰2-e角。d值A強度％6.27314.0791910010.6228.3220430.711.1067.9602834.813.386.6120633.714.3486.1679825.516.4735.3769348.218.6344.7580629.221.3944.1500134.723.8873.7222627.824.4983.6306723.525.3953.5045196e)賴氨酸5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鹽單水合物將400mg5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸(1.23mmols)在4ml丙酮中的懸浮液加熱至50°C。將獲得的幾乎澄清的溶液經Whatman玻璃纖維濾膜通過熱過濾澄清。濾膜用50。C的4ml丙酮洗滌。滴加184mg賴氨酸(1.23mmols)的lml水溶液。將獲得的粘稠懸浮液於50。C保持30分鐘，然後冷卻至室溫。將混合物於約25。C再攪拌過夜並過濾。濾餅用6ml丙酮洗滌。將結晶先於50。C/約10mbar乾燥2小時，然後於80。C、約10mbar乾燥16小時，得到白色粉末，m.p.162-163。C。水分析3.80%m/m6f)膽鹼5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鹽單水合物將400mg5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸(1.23mmols)在4ml丙酮中的懸浮液加熱至50。C。加入305mg膽鹼的50%水溶液(1.23mmols)。將獲得的幾乎澄清的溶液經Whatman玻璃纖維濾膜通過熱過濾澄清。濾膜用50。C的2ml丙酮洗滌。於40。C向濾液中緩慢加入6ml叔丁基甲基醚(TBME)。將輕微渾濁的溶液冷卻，於25。C種晶。然後非常緩慢地產生結晶。將混合物於室溫下攪拌過夜。16h後，滴加12mlTBME。將粘稠的懸浮液於25。C再攪拌2小時並過濾。固體用6mlTBME/丙酮9/1v/v洗滌，於50°C、約10mbar乾燥4小時，得到白色粉末，m.p.105-106。C。水分析4.55%m/m6g)5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸鉀將5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸(15.42mmols)在丙酮中的懸浮液加熱至回流溫度，將其於約55。C攪拌10分鐘。將獲得的溶液緩慢冷卻至50'C,經Whatman玻璃纖維濾膜熱過濾。濾膜於50。C用丙酮洗滌。將濾液加熱至50。C，約15分鐘內滴加氫氧化鉀45%(14.65mmols)(0.95eq，)和水的混合物。滴液漏鬥用水和丙酮洗滌。將獲得的懸浮液於50。C攪拌30分鐘。然後將漿狀液在約2小時內冷卻至25。C。將懸浮液於室溫下攪拌過夜並過濾。濾餅洗滌3次。將結晶先於5(TC/約10mbar乾燥3小時，然後於80。C/約10mbar乾燥17小時，得到白色粉末，m.p.315-317。C，326.9。C,融化焓29J/g。主要X-射線衍射峰.e角。d值A強度％6.26314.1014610010.9328.0866438.212.6027.0183124.713.6146.4991525.214.6896.0259222.616.6695.3140226.918.9044,6905531.721.4424.1407814,921.9584.0445817.322.8293.8921915.724.243.6687422.626.1143.4096325.826.6983.3363236.426.9883,3011219.828.0263.181233,129.1733.0586713.83權利要求1.式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽及其藥學上可接受的酯其中R為甲基或乙基；R3為滷素或C1-C6烷基；R4為C1-C6烷基；R5為滷素；上述位於R3和R4上的C1-C6烷基任選被一或多個滷素基團取代。2.權利要求l的化合物，其中R3為滷素。3.權利要求1或權利要求2的化合物，其中Rt為甲基或乙基。4.上述權利要求中任一項的化合物，其中Rs為卣素。5.上述權利要求中任一項的化合物，其中R3和Rs每一個均獨立選自氯和氟。6.上述權利要求中任一項的化合物，所述化合物選自下列化合物5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3'-甲基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，，4，-二氯代-3'-甲基苯胺基)苯基乙酸，5-甲基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-甲基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-甲基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-三氟甲基-4'-甲基苯胺基)苯基乙酸，5-甲基-2-(2，-氟-3'-甲基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-甲基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-曱基-2-(2，-氟-3'-乙基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-乙基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3'-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，，4，-二氯代-3'-乙基苯胺基)苯基乙酸，5-乙基-2-(2，-氟-3'-異丙基-4，-氯代苯胺基)苯基乙酸，5-曱基-2-(2，，4，-二氯代-3，-曱基苯胺基)苯基乙酸二乙胺鹽，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鈉，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸氨丁三醇鹽，5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸4丐單水合物，賴氨酸5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基苯胺基)苯基乙酸鹽單7jC合物，和膽鹼5-甲基-2-(2，，4，-二氯代-3，-甲基笨胺基)苯基乙酸鹽單水合物。7.藥用組合物，該藥用組合物含有有效量的上述權利要求中任一項的化合物以及一或多種藥學上可接受的載體。8.在哺乳動物中治療環氧合酶-2(COX-2)依賴性疾病的方法，所述方法包括給予需要該治療的哺乳動物有效量的權利要求1的化合物。9.在哺乳動物中選擇性抑制COX-2活性而又基本上不會抑制環氧合酶-1活性的方法，所述方法包括給予需要該治療的哺乳動物抑制COX-2有效量的權利要求1的化合物。10.在哺乳動物中治療類風溼性關節炎、骨關節炎、痛經、疼痛、腫瘤或炎症的方法，所述方法包括給予需要該治療的哺乳動物相應的有效量的權利要求1的化合物。11.權利要求1-7中任一項的化合物在生產用於治療類風溼性關節炎、骨關節炎、痛經、疼痛、腫瘤或炎症的藥物中的用途。12.用於治療COX-2依賴性疾病的權利要求1-7中任一項的化合物。13.製備權利要求l的式(I)化合物的方法，所述方法包括下列步驟(a)在銅和多!H匕亞銅存在下，使式(II)或(III)化合物(")其中Z為溴或碘；R如上文所定義；Ra為氫、鹼金屬陽離子或低級烷基，優選異丙基；並且R6和R7為低級烷基；或者R6和R7與氮原子一起代表嗎啉代、哌啶子基或吡咯烷子基；與式(IV)化合物偶合(IV)其中R3-Rs如上文所定義，獲得式(V)或(VI)化合物:(v)(vi)將得到的式(V)或(VI)化合物水解，獲得式(I)化合物；或者(b)在Friedd-Crafts醯化反應中，使式(VII)化合物formulaseeoriginaldocumentpage5其中R3-R7如本文中所定義，與酸例如乙酸的活性官能團衍生物例如乙醯氯縮合，獲得例如式(VIII)化合物其中R3-R7如本文中所定義，隨後將其氫解，然後水解，獲得式(I)化合物，其中R代表例如乙基；或者(c)採用強鹼水解式(IX)的內醯胺其中R和R3-Rs如本文中所定義，在上述方法中，如果需要，可以將任何幹擾反應的活性基團暫時進行保護，然後將獲得的本發明化合物進行分離；並且需要時將任何獲得的化合物轉化為另一種本發明化合物；和/或需要時將本發明的游離羧酸轉化為其藥學上可接受的酯衍生物；和/或需要時將獲得的游離酸轉化為鹽，或者將獲得的鹽轉化為游離酸或轉化為另一種鹽。全文摘要本發明公開式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽及其藥學上可接受的酯。這些化合物可以用於治療COX-2依賴性疾病。文檔編號C07C211/56GK101479231SQ200780023690公開日2009年7月8日申請日期2007年6月25日優先權日2006年6月26日發明者B·B·穆格裡奇,L·G·莫洛維奇申請人:諾瓦提斯公司